本發(fā)明屬于1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)的領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔的1，3-偶極環(huán)加成方法。特別地，本發(fā)明涉及(雜)芳基疊氮化物或(雜)芳基重氮化合物與(雜)環(huán)辛炔或(雜)環(huán)壬炔的1，3-偶極環(huán)加成。
背景技術(shù)：
：1，3-偶極環(huán)加成——也稱為Huisgen(3+2)環(huán)加成——是1，3-偶極子與親偶極子之間形成五元環(huán)的化學(xué)反應(yīng)。用于(3+2)環(huán)加成反應(yīng)的典型偶極子包括疊氮化物、硝酮、氧化腈和重氮化合物，它們與作為親偶極子的炔烴或烯烴反應(yīng)形成五元雜環(huán)。Huisgen環(huán)加成的典型條件包括起始組分的長(zhǎng)時(shí)間加熱。然而，還可借助于加入金屬催化劑或者借助于使用有張力的(strained)烯烴或炔烴來引起環(huán)加成。張力促進(jìn)的疊氮化物-炔烴環(huán)加成(SPAAC)包括通過疊氮化物與有張力的環(huán)狀炔烴的反應(yīng)形成1，2，3-三唑。除了疊氮化物以外，有張力的炔烴還顯示出與其他偶極子例如硝酮和氧化腈(SPANOC)的高反應(yīng)性。例如，將張力促進(jìn)的炔烴-硝酮環(huán)加成(SPANC)應(yīng)用于蛋白質(zhì)的N-末端修飾。SPAAC和SPANC環(huán)加成反應(yīng)自發(fā)地進(jìn)行，因此在沒有(金屬)催化劑的存在下進(jìn)行，這些和選定數(shù)量的其他環(huán)加成還稱為“無金屬點(diǎn)擊反應(yīng)(metal-freeclickreactions)”。關(guān)于苯基疊氮化物與環(huán)辛炔的反應(yīng)的最初報(bào)道可追溯到50多年前，但直到2004年才認(rèn)識(shí)到SPAAC用于兩種分子實(shí)體的官能連接(分別連接至疊氮化物或環(huán)辛炔)的實(shí)際應(yīng)用。例如，Bertozzi等人已經(jīng)在J.Am.Chem.Soc.2004，126，15046(通過引用將其納入)中證實(shí)，采用疊氮化物官能化的甘露糖胺孵育Jurkat細(xì)胞使得細(xì)胞表面有效地暴露于疊氮化物，如通過采用結(jié)合了環(huán)辛炔的生物素處理，然后采用FITC-抗生物素蛋白染色并通過流式細(xì)胞儀所觀察到的。然而，已發(fā)現(xiàn)，簡(jiǎn)單的環(huán)辛炔與疊氮化物的反應(yīng)速率相對(duì)較低，例如，效率低于類似的采用銅催化的疊氮化物與生物素化末端炔烴(CuAAC)或與膦試劑(施陶丁格連接)的環(huán)加成對(duì)疊氮化物標(biāo)記的細(xì)胞的染色。因此，在隨后的數(shù)年中，許多注意力都集中于開發(fā)具有優(yōu)異反應(yīng)速率的環(huán)辛炔，例如二氟環(huán)辛炔(DIFO)、二苯并環(huán)辛炔醇(DIBO)、二苯并氮雜環(huán)辛炔(dibenzoazacyclooctyne)(DIBAC/DBCO)和雙芳基氮雜環(huán)辛炔(bisarylazacyclooctynone)(BARAC)、二環(huán)[6.1.0]壬炔(BCN)及羧甲基單苯并環(huán)辛炔(carboxymethylmonobenzocyclooctyne)(COMBO)。其中，最經(jīng)常使用的環(huán)辛炔是DIBO、DIBAC和BCN，所有這些都是市售可得的，它們不僅在與疊氮化物的環(huán)加成中顯示出高反應(yīng)性，而且在與其他1，3-偶極子例如硝酮、氧化腈和重氮化合物的環(huán)加成中也顯示出高反應(yīng)性。環(huán)壬炔的實(shí)例是以下所示的苯并環(huán)壬炔，由Tummatorn等人，J.Org.Chem.2012，77，2093所公開，通過引用將其納入。SPAAC操作的簡(jiǎn)易性和得到的三唑官能度的高度穩(wěn)定性導(dǎo)致寬范圍的應(yīng)用，包括體外和體內(nèi)標(biāo)記、固體表面的圖案形成、從蛋白質(zhì)、核酸和聚糖形成生物結(jié)合物、醫(yī)學(xué)應(yīng)用等。決定用于特定應(yīng)用的環(huán)辛炔的選擇的兩個(gè)主要參數(shù)是親油性和反應(yīng)速率。由于絕大多數(shù)環(huán)辛炔主要以碳?xì)浠衔锒嬖?，它們通常是疏水的，因此水溶性較差。為提高水溶性，Bertozzi等人從碳水化合物前體開發(fā)了二甲氧基-氮雜環(huán)辛炔(DIMAC)，如在Org.Lett.2008，10，3097(通過引用將其納入)中所報(bào)道的，但極性的增加伴隨著減弱的反應(yīng)性。顯然，先前所提及的苯并成環(huán)的(benzoannulated)環(huán)辛炔(DIBO、DIBAC和BARAC)具有高反應(yīng)性，但因探針的疏水性而導(dǎo)致在含水體系中的應(yīng)用欠佳。圖1(來自Delft等人，Acc.Chem.Res.2011，44，805，通過引用將其納入)中提供了絕大多數(shù)所報(bào)道的環(huán)辛炔(與疊氮化物)的反應(yīng)性相對(duì)于親油性(ClogP)的比較。盡管它們的親油性欠佳，但是目前最經(jīng)常采用二苯并成環(huán)的環(huán)辛炔DIBO或DIBAC來進(jìn)行SPAAC，DIBO和DIBAC均相對(duì)穩(wěn)定、市售可得且與一系列1，3-偶極子(包括硝酮和疊氮化物)具有高度反應(yīng)性。進(jìn)一步提高苯并成環(huán)的環(huán)辛炔的性能的一個(gè)策略是通過增加水溶性，如由通過芳烴磺化(Boons等人，2012，134，5381，通過引用將其納入)或通過四甲氧基-取代(Leeper等人，2011，2，932，通過引用將其納入)的DIBO的衍生化所證實(shí)的。然而，從空間的角度考慮，同樣明確的是期望避免在環(huán)辛炔整體中存在(龐大的)芳族官能度。另一個(gè)方法涉及類似的增加脂族環(huán)辛炔例如DIFO或BCN的水溶性，但這通常涉及過長(zhǎng)的合成路線，潛在地使反應(yīng)性受損。同時(shí)，已被公認(rèn)并被充分證實(shí)的是，在偶極環(huán)加成中DIFO和BCN的反應(yīng)性比苯并成環(huán)的環(huán)辛炔差?？傊瑥姆磻?yīng)性角度來看，相對(duì)于脂族環(huán)辛炔，疊氮化物或硝酮或1，3-偶極子與(二)苯并成環(huán)的環(huán)辛炔的反應(yīng)通常是優(yōu)選的，但從空間和水溶性角度來看是欠佳的。因此，優(yōu)化環(huán)辛炔的密切相關(guān)的極性和反應(yīng)性的期望持續(xù)地推動(dòng)著進(jìn)一步改進(jìn)的研究工作。在最近的報(bào)道中，Bertozzi等人在J.Am.Chem.Soc.2012，134，9199(通過引用將其納入)中明確提及BARAC與疊氮化物的反應(yīng)比任何其他所報(bào)道的環(huán)辛炔更快，因此強(qiáng)調(diào)了普遍的觀點(diǎn)——環(huán)辛炔的反應(yīng)速率不受疊氮化物取代基(脂族或芳族或取代的形式)的影響。該報(bào)道的一項(xiàng)重要發(fā)現(xiàn)涉及芐基疊氮化物與BARAC的反應(yīng)速率在BARAC二氟化時(shí)提高。根據(jù)自由能計(jì)算，可以得出的結(jié)論是，反應(yīng)速率的提高是電子調(diào)制(electronicmodulation)的結(jié)果，所述電子調(diào)制在過渡態(tài)下產(chǎn)生增強(qiáng)的穩(wěn)定的相互作用。在環(huán)辛炔BARAC上引入吸電子的氟化物取代基使得與疊氮化物的反應(yīng)速率增加的這一發(fā)現(xiàn)恰好與早期對(duì)不同形式的DIFO(Bertozzi等人Proc.Natl.Acad.Sci.2007，104，16793和J.Am.Chem.Soc.2008，130，11486，通過引用將其納入)的觀察結(jié)果一致。在這兩種情況中，可以推斷，引入氟原子導(dǎo)致環(huán)辛炔LUMO的降低，由此增加其與疊氮化物的HOMO的相互作用能。因此，可以得出的結(jié)論是，具有更高HOMO的富電子疊氮化物與環(huán)辛炔的反應(yīng)比缺電子疊氮化物更快。Pezacki等人(Org.Biomol.Chem.2012，10，3066，通過引用將其納入)已經(jīng)研究了芳族取代基對(duì)苯甲醛衍生的硝酮與BARAC的反應(yīng)速率的影響。有趣地的是，已經(jīng)證實(shí)環(huán)加成反應(yīng)對(duì)偶極子上的取代基并不敏感，因此無法通過芳族取代來獲得顯著的速率提高。最后，在標(biāo)記領(lǐng)域中具有特定應(yīng)用的一種鹵化芳基疊氮化物是4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲酸(N3-TFBA)。最初由Fleet等人在Nature1969，224，511(通過引用將其納入)中公開，芳基疊氮化物已經(jīng)成為作為多用途的光親和標(biāo)記試劑的氮賓(nitrene)的常用前體。在光解時(shí)，N2被釋放并在原位形成高度不穩(wěn)定的單線態(tài)苯基氮賓，所述單線態(tài)苯基氮賓在多種反應(yīng)中與相鄰的分子反應(yīng)。全氟苯基疊氮化物由于形成高度穩(wěn)定的氮賓中間體而在光親和標(biāo)記領(lǐng)域中特別令人感興趣，所述氮賓中間體以中等至良好的收率經(jīng)歷插入和加成反應(yīng)而不進(jìn)行分子間重排。為此目的，4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲酸(N3-TFBA)的多種衍生物均是市售可得的，且已被應(yīng)用于生物分子、聚合物、小分子、碳材料、金/銀、金屬氧化物和硅酸鹽/半導(dǎo)體的標(biāo)記中，如尤其是Liu等人，Acc.Chem.Res.2011，43，1434和Welle等人，Synthesis2012，44，2249所綜述的(通過引用將兩篇文獻(xiàn)納入)。然而，早期的N3-TFBA的應(yīng)用均未提及通過張力-促進(jìn)的環(huán)加成反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記或結(jié)合。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明涉及一種包括使(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔反應(yīng)的步驟的方法；其中(雜)芳基1，3-偶極化合物被定義為包含1，3-偶極官能團(tuán)的化合物，其中所述1，3-偶極官能團(tuán)鍵接于(雜)芳基；其中：(i)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特(Hammett)取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基是缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基為：(ii-a)其中(雜)芳環(huán)體系攜帶正電荷的(雜)芳基，和/或(ii-b)其中{(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)}：{(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)}的比率對(duì)6-元環(huán)而言小于0.167或?qū)?-元環(huán)而言小于0.200的(雜)芳基；并且其中所述(雜)環(huán)炔如式(1)所示：其中：a為0-8；a’為0-8；a”為0-8；雜件是a+a’+a”＝4、5、6、7或8；n為0-16；R1獨(dú)立地選自-OR2、-NO2、-CN、-S(O)2R2、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被取代，其中所述烷基、環(huán)烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷，且其中R2獨(dú)立地選自氫、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基；B和B’獨(dú)立地選自O(shè)、S、C(O)、NR3和C(R3)2，其中R3獨(dú)立地選自氫、R1或(L)p-(A)r；任選地，當(dāng)n為2或更大時(shí)，兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)環(huán)烷基，所述(雜)環(huán)烷基任選地被(L)p-(A)r取代基取代；任選地，當(dāng)a”為2或更大且n為2或更大時(shí)，存在于相鄰a”-C-原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)芳基，所述(雜)芳基任選地被(L)p-(A)r取代基取代；p為0或1；r為1-4；L為接頭；A獨(dú)立地選自D、E和Q，其中D、E和Q如下文所定義；q為0-4；條件是：如果q為0，則B和/或B’為NR3，其中R3為(L)p-(A)r，和/或B和/或B’為C(R3)2，其中一個(gè)或多個(gè)R3為(L)p-(A)r；和/或n為2或更大，且兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)環(huán)烷基，其中所述(雜)環(huán)烷基被(L)p-(A)r取代基取代；和/或a”為2或更大且n為2或更大，且存在于相鄰a”-C-原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)芳基，其中所述(雜)芳基被(L)p-(A)r取代基取代；D為目標(biāo)分子；E為固體表面；且Q為官能團(tuán)。特別地，本發(fā)明涉及一種如上所定義的方法，其中所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物或(雜)芳基重氮化合物；其中所述(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)炔，其中脂族(雜)環(huán)炔被定義為其中(雜)環(huán)炔碳-碳三鍵的兩個(gè)sp1C原子均鍵接于sp3C原子的(雜)環(huán)炔；且其中所述(雜)環(huán)炔為式(1)的(雜)環(huán)辛炔或(雜)環(huán)壬炔，其中當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔時(shí)：a為1、2、3或4；a’為1、2、3或4；a”為1、2、3或4；條件是a+a’+a”＝4；且n為0-8；或當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔時(shí)：a為1、2、3、4或5；a’為1、2、3、4或5；a”為1、2、3、4或5；條件是a+a’+a”＝5；且n為0-10。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而獲得的化合物。特別地，本發(fā)明涉及式(12a)或(12d)的化合物：其中：R1、n、B、B’、a、a’、a”、L、p、q、r和A如上文所定義；t為0或1；u為1-4；m為0-8；條件是，當(dāng)m為0時(shí)，則T為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基如上文所定義；g為0或1；L’為接頭；A’獨(dú)立地選自D、E和Q，其中D、E和Q如上文所定義；T選自(雜)芳基；R4獨(dú)立地選自對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的吸電子取代基；W選自C1-C24亞烷基、C2-C24亞烯基、C3-C24亞環(huán)烷基、C2-C24亞(雜)芳基、C3-C24烷基亞(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基亞烷基，其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被取代，且其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷；且R15選自氫、C1-C24烷基、C2-C24烯基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、烯基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被取代，且其中所述烷基、烯基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。本發(fā)明特別涉及式(12a)或(12d)的化合物，其中n為0-8且a、a’和a”獨(dú)立地為1、2、3或4，條件是a+a’+a”＝4；或其中n為0-10且a、a’和a”獨(dú)立地為1、2、3、4或5，條件是a+a’+a”＝5。附圖說明在圖1中，提供了一些所報(bào)道的環(huán)辛炔與疊氮化物的相對(duì)反應(yīng)速率(X-軸)相對(duì)于親油性(ClogP，Y-軸)的比較。圖2示出了芐基疊氮化物或苯基疊氮化物與Sondheimer二炔在MeOH中的環(huán)加成反應(yīng)和反應(yīng)速率常數(shù)。圖3示出了制備化合物3o的合成方案。圖4示出了制備化合物3p和3n的合成方案。圖5示出了制備4-羥基環(huán)辛炔醇(22)的芐基氨基甲酸酯衍生物和MOFO(24)的丙基酰胺衍生物的合成方案。圖6示出了一鍋法的反應(yīng)方案，雙疊氮化物25與BCN衍生物6b和DIBAC衍生物26b的混合物的化學(xué)選擇性無銅點(diǎn)擊反應(yīng)，得到雙三唑26。圖7示出了GalNAc(31)的雙氟疊氮苯基衍生物的化學(xué)合成的反應(yīng)方案。圖8示出了在采用endoS然后采用GalT(Y289L)連續(xù)地對(duì)抗體進(jìn)行修剪(trim)時(shí)，將經(jīng)修飾的UDP-GalNAryl底物31轉(zhuǎn)移到抗體32的核心N-GlcNAc上，得到經(jīng)修飾的抗體33的示意方案。圖9示出了在與BCN-PEG2000(凝膠中下部的條帶)結(jié)合之前且在與BCN-PEG2000(凝膠中上部的條帶)結(jié)合之后，采用N-疊氮乙酰基-D-半乳糖胺(trast-(GalNAz)2，頂部的凝膠)和33(trast-(GalNBAz)2，下部的凝膠)修飾的曲妥單抗的脫糖基化的疊氮基衍生物的重鏈的SDS-PAGE。圖10示出了重氮甲苯(34a)與BCN衍生物6b的張力促進(jìn)的環(huán)加成，得到環(huán)加成物12i的示意方案。還示出了重氮化合物34b、34c和34d的結(jié)構(gòu)。具體實(shí)施方式定義本說明書和權(quán)利要求書中所使用的動(dòng)詞“包含”及其變形以其非限制性含義使用，意指包括該詞后面的項(xiàng)目，但并不排除未具體提及的項(xiàng)目。此外，除非上下文明確表示有且只有一個(gè)要素，否則當(dāng)以不定冠詞“一(a)”或“一個(gè)(an)”提及一種要素時(shí)不排除存在多于一個(gè)所述要素的可能性。因此，不定冠詞“一”或“一個(gè)”通常表示“至少一個(gè)”。本說明書和權(quán)利要求書中所公開的化合物可包含一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心，且可存在所述化合物的不同的非對(duì)映異構(gòu)體和/或?qū)τ钞悩?gòu)體。除非另有說明，否則本說明書和權(quán)利要求書中對(duì)任何化合物的描述均意指包括單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體，以及對(duì)映異構(gòu)體的任何混合物(外消旋的或其他的)。當(dāng)將化合物的結(jié)構(gòu)描述為具體的對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，應(yīng)當(dāng)理解的是，本申請(qǐng)的發(fā)明并不限于所述具體的對(duì)映異構(gòu)體。所述化合物可以以不同的互變異構(gòu)形式存在。除非另有說明，本發(fā)明的化合物意在包括所有的互變異構(gòu)形式。當(dāng)將化合物的結(jié)構(gòu)描述為具體的互變異構(gòu)體時(shí)，應(yīng)理解本申請(qǐng)的發(fā)明并不限于所述具體的互變異構(gòu)體。本說明書和權(quán)利要求書中所公開的化合物還可存在外型(exo)和內(nèi)型(endo)非對(duì)映異構(gòu)體。除非另有說明，否則本說明書和權(quán)利要求書中對(duì)任何化合物的描述意在包括化合物的單個(gè)外型和單個(gè)內(nèi)型非對(duì)映異構(gòu)體，以及其混合物。當(dāng)將化合物的結(jié)構(gòu)描述為具體的內(nèi)型或外型非對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，應(yīng)理解本申請(qǐng)的發(fā)明并不限于所述具體的內(nèi)型或外型非對(duì)映異構(gòu)體。此外，本說明書和權(quán)利要求書中所公開的化合物還可存在順式和反式異構(gòu)體。除非另有說明，否則本說明書和權(quán)利要求書中對(duì)任何化合物的描述意在包括化合物的單個(gè)順式和單個(gè)反式異構(gòu)體，以及其混合物。作為實(shí)例，當(dāng)將化合物的結(jié)構(gòu)描述為順式異構(gòu)體時(shí)，應(yīng)理解本申請(qǐng)的發(fā)明并不排除其相應(yīng)的反式異構(gòu)體或順式和反式異構(gòu)體的混合物。當(dāng)將化合物的結(jié)構(gòu)描述為順式或反式異構(gòu)體時(shí)，應(yīng)理解本申請(qǐng)的發(fā)明并不限于所述具體的順式或反式異構(gòu)體。未取代的烷基具有通式CnH2n+1，且可為直鏈或支鏈。任選地，所述烷基被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。烷基的實(shí)例包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、叔丁基、1-己基、1-十二烷基等。未取代的環(huán)烷基包含至少3個(gè)碳原子，并且具有通式CnH2n-1。任選地，所述環(huán)烷基被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。未取代的烯基具有通式CnH2n-1，并且可為直鏈或支鏈。合適的烯基的實(shí)例包括但不限于，乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、戊烯基、癸烯基、十八烯基和二十二烯基等。未取代的烯基還可包含環(huán)狀部分，并因此具有相應(yīng)的通式CnH2n-3。芳基包含6至12個(gè)碳原子，并且可包括單環(huán)和雙環(huán)結(jié)構(gòu)。任選地，所述芳基可被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。芳基的實(shí)例為苯基和萘基。芳基烷基和烷基芳基包含至少7個(gè)碳原子，并且可包括單環(huán)和雙環(huán)結(jié)構(gòu)。任選地，所述芳基烷基和烷基芳基可被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。例如，芳基烷基為芐基。例如，烷基芳基為4-叔丁基苯基。雜芳基包含至少2個(gè)碳原子(即至少C2)以及一個(gè)或多個(gè)雜原子N、O、P或S。雜芳基可具有單環(huán)或雙環(huán)結(jié)構(gòu)。任選地，所述雜芳基可被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。合適的雜芳基的實(shí)例包括吡啶基、喹啉基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、吡咯基、呋喃基、三唑基、苯并呋喃基、吲哚基、嘌呤基、苯并噁唑基、噻吩基、磷雜環(huán)戊二烯基(phospholyl)和噁唑基。雜芳基烷基和烷基雜芳基包含至少3個(gè)碳原子(即至少C3)，并且可包括單環(huán)和雙環(huán)結(jié)構(gòu)。任選地，所述雜芳基可被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。當(dāng)將芳基表示為(雜)芳基時(shí)，該形式意在包括芳基和雜芳基。同樣地，烷基(雜)芳基意在包括烷基芳基和烷基雜芳基，且(雜)芳基烷基意在包括芳基烷基和雜芳基烷基。因此，C2-C24(雜)芳基應(yīng)理解為包括C2-C24雜芳基和C6-C24芳基。同樣地，C3-C24烷基(雜)芳基意在包括C7-C24烷基芳基和C3-C24烷基雜芳基，且C3-C24(雜)芳基烷基意在包括C7-C24芳基烷基和C3-C24雜芳基烷基。除非另有說明，否則烷基、烯基、烯烴、炔烴、(雜)芳基、(雜)芳基烷基、烷基(雜)芳基、亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基、(雜)芳基亞烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基、烯氧基、(雜)芳氧基、炔氧基和環(huán)烷氧基可被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代：C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C5-C12環(huán)烯基、C8-C12環(huán)炔基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基、C3-C12環(huán)烷氧基、鹵素(F、Cl、Br、I)、氨基、氧代和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基可由式(RSi)3Si-表示，其中RSi獨(dú)立地選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基和C3-C12環(huán)烷氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基、烯氧基、炔氧基和環(huán)烷氧基任選地被取代，所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基和環(huán)烷氧基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。炔基包含碳-碳三鍵。包含一個(gè)三鍵的未取代的炔基具有通式CnH2n-3。末端炔基為其中三鍵位于碳鏈末端位置的炔基。任選地，所述炔基被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代，和/或被選自氧、氮和硫的雜原子中斷。炔基的實(shí)例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、辛炔基等。環(huán)炔基為環(huán)狀炔基。包含一個(gè)三鍵的未取代的環(huán)炔基具有通式CnH2n-5。任選地，環(huán)炔基被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。環(huán)炔基的實(shí)例為環(huán)辛炔基。雜環(huán)炔基為被選自氧、氮和硫的雜原子中斷的環(huán)炔基。任選地，雜環(huán)炔基被本文中進(jìn)一步指定的一個(gè)或多個(gè)取代基取代。雜環(huán)炔基的實(shí)例為氮雜環(huán)辛炔基。術(shù)語“(雜)芳基”包含芳基和雜芳基。術(shù)語“烷基(雜)芳基”包含烷基芳基和烷基雜芳基。術(shù)語“(雜)芳基烷基”包含芳基烷基和雜芳基烷基。術(shù)語“(雜)炔基”包含炔基和雜炔基。術(shù)語“(雜)環(huán)炔基”包含環(huán)炔基和雜環(huán)炔基。(雜)環(huán)炔化合物在本文中被定義為包含(雜)環(huán)炔基的化合物。本說明書和權(quán)利要求書中所描述的一些化合物可被描述為稠合(雜)環(huán)炔化合物，即其中第二個(gè)環(huán)結(jié)構(gòu)與(雜)環(huán)炔基稠合(即，成環(huán))的(雜)環(huán)炔化合物。例如，在稠合(雜)環(huán)辛炔化合物中，環(huán)烷基(例如，環(huán)丙基)可與(雜)環(huán)辛炔基成環(huán)。除非另有說明，在稠合(雜)環(huán)辛炔化合物(其中(雜)環(huán)烷基與(雜)環(huán)辛炔稠合)中，(雜)環(huán)辛炔基的三鍵可位于三個(gè)可能位置中的任何一個(gè)，即位于環(huán)辛炔部分的2、3或4位(根據(jù)“IUPAC有機(jī)化學(xué)命名法”規(guī)則A31.2編號(hào))。本說明書和權(quán)利要求書對(duì)于其中(雜)環(huán)烷基與(雜)環(huán)炔稠合的稠合(雜)環(huán)辛炔化合物的描述意在包括環(huán)辛炔部分的所有三種單個(gè)區(qū)域異構(gòu)體。(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔的環(huán)加成本發(fā)明公開了一種(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔的環(huán)加成方法。1，3-偶極化合物與炔烴的環(huán)加成也被稱為1，3-偶極環(huán)加成。在第一方面，本發(fā)明涉及一種方法，其包括使(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔反應(yīng)的步驟，以形成所述(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔的環(huán)加成產(chǎn)物；其中(雜)芳基1，3-偶極化合物被定義為包含1，3-偶極官能團(tuán)的化合物，其中所述1，3-偶極官能團(tuán)鍵接于(雜)芳基；其中：(i)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基為：(ii-a)其中(雜)芳環(huán)體系攜帶正電荷的(雜)芳基，和/或(ii-b)其中{(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)}：{(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)}的比率對(duì)6-元環(huán)而言小于0.167或?qū)?-元環(huán)而言小于0.200的(雜)芳基；并且其中所述(雜)環(huán)炔如式(1)所示：其中：a為0-8；a’為0-8；a”為0-8；條件是a+a’+a”＝4、5、6、7或8；n為0-16；R1獨(dú)立地選自-OR2、-NO2、-CN、-S(O)2R2、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被取代，其中所述烷基、環(huán)烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷，且其中R2獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基；B和B’獨(dú)立地選自O(shè)、S、C(O)、NR3和C(R3)2，其中R3獨(dú)立地選自氫、R1或(L)p-(A)r；任選地，當(dāng)n為2或更大時(shí)，兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)環(huán)烷基，所述(雜)環(huán)烷基任選地被(L)p-(A)r取代基取代；任選地，當(dāng)a”為2或更大且n為2或更大時(shí)，存在于相鄰a”-C-原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)芳基，所述(雜)芳基任選地被(L)p-(A)r取代基取代；p為0或1；r為1-4；L為接頭；A獨(dú)立地選自D、E和Q，其中D、E和Q如下文所定義；q為0-4；條件是：如果q為0，則B和/或B’為NR3，其中R3為(L)p-(A)r，和/或B和/或B’為C(R3)2，其中一個(gè)或多個(gè)R3為(L)p-(A)r；和/或n為2或更大，且兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)環(huán)烷基，其中所述(雜)環(huán)烷基被(L)p-(A)r取代基取代；和/或a”為2或更大且n為2或更大，且存在于相鄰a”-C-原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)芳基，其中所述(雜)芳基被(L)p-(A)r取代基取代；D為目標(biāo)分子；E為固體表面；且Q為官能團(tuán)。在本發(fā)明方法的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物或(雜)芳基重氮化合物。最優(yōu)選地，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)炔，其中脂族(雜)環(huán)炔被定義為其中(雜)環(huán)炔碳-碳三鍵的兩個(gè)sp1C原子均鍵接于sp3C原子的(雜)環(huán)炔。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，如上文所定義的式(1)的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔或(雜)環(huán)壬炔。最優(yōu)選地，式(1)的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。當(dāng)式(1)的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔時(shí)，a為0、1、2、3或4；a’為0、1、2、3或4；a”為0、1、2、3或4；條件是a+a’+a”＝4；且n為0-8。當(dāng)式(1)的(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)辛炔時(shí)，a為1、2、3或4；a’為1、2、3或4；a”為1、2、3或4；條件是a+a’+a”＝4；且n為0-8。當(dāng)式(1)的(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)壬炔時(shí)，a為1、2、3、4或5；a’為1、2、3、4或5；a”為1、2、3、4或5；條件是a+a’+a”＝5；且n為0-10。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物或(雜)芳基重氮化合物(優(yōu)選為(雜)芳基疊氮化物)，且式(1)的(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)辛炔或脂族(雜)環(huán)壬炔(優(yōu)選為(雜)環(huán)辛炔)。脂族(雜)環(huán)炔在本文中被定義為其中(雜)環(huán)炔碳-碳三鍵的兩個(gè)sp1C原子均鍵接于sp3C原子的(雜)環(huán)炔。所述(雜)芳基1，3-偶極化合物和所述(雜)環(huán)炔，以及其優(yōu)選的實(shí)施方案，將在下文中詳細(xì)地描述。(雜)芳族1，3-偶極化合物和(雜)環(huán)炔的環(huán)加成方法優(yōu)選在合適的溶劑中進(jìn)行，所述溶劑例如為二氯甲烷、氯仿、THF、Me-THF、乙酸乙酯、二乙醚、DMF、DMA、甲苯、苯、二甲苯、丙酮或己烷。所述方法還可在水或水與水混溶性溶劑(即，乙腈或THF)的混合物中進(jìn)行。或者，該反應(yīng)可在沒有任何溶劑(無水的)的情況下進(jìn)行。所述方法優(yōu)選在約-78℃至約300℃、更優(yōu)選在-40℃至200℃、甚至更優(yōu)選在約-20℃至100℃且最優(yōu)選在約0℃至60℃的溫度下進(jìn)行。所述方法優(yōu)選以10∶1(或者反之亦然)、更優(yōu)選以5∶1、甚至更優(yōu)選以2∶1且最優(yōu)選以接近1∶1的試劑的化學(xué)計(jì)量來進(jìn)行。因此，優(yōu)選地，所述方法以10∶1至1∶10的試劑的化學(xué)計(jì)量來進(jìn)行。更優(yōu)選地，所述方法以5∶1至1∶5、甚至更優(yōu)選以2∶1至1∶2的試劑的化學(xué)計(jì)量來進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)一種試劑過量存在時(shí)，優(yōu)選的是所述(雜)芳基1，3-偶極化合物過量存在，即所述方法以(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔的比率優(yōu)選為10∶1、更優(yōu)選為5∶1、甚至更優(yōu)選為2∶1來進(jìn)行。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)一種試劑過量存在時(shí)，優(yōu)選的是所述(雜)環(huán)炔過量存在，即所述方法以(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物的比率優(yōu)選為10∶1、更優(yōu)選為5∶1、甚至更優(yōu)選為2∶1來進(jìn)行。最優(yōu)選地，所述方法以接近1∶1的試劑的化學(xué)計(jì)量來進(jìn)行。(雜)芳基1，3-偶極化合物(雜)芳基1，3-偶極化合物在本文中被定義為包含1，3-偶極官能團(tuán)的化合物，其中所述1，3-偶極官能團(tuán)鍵接于(雜)芳基。更精確地，(雜)芳基1，3-偶極化合物是包含1，3-偶極官能團(tuán)的化合物，其中所述1，3-偶極官能團(tuán)鍵接于構(gòu)成所述(雜)芳基的(雜)芳環(huán)體系的一部分的原子。優(yōu)選地，所述1，3-偶極官能團(tuán)鍵接于(雜)芳環(huán)體系的C原子。所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基：(i)包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基，和/或(ii)為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基為：(ii-a)其中所述(雜)芳環(huán)體系攜帶正電荷的(雜)芳基，和/或(ii-b)其中{(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)}：{(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)}的比率對(duì)6-元環(huán)而言小于0.167或?qū)?-元環(huán)而言小于0.200的(雜)芳基；當(dāng)所述(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基時(shí)，這些取代基鍵接于構(gòu)成所述(雜)芳基的(雜)芳環(huán)體系的一部分的原子。術(shù)語“(雜)芳基”在本文中指的是芳基和雜芳基。術(shù)語“(雜)芳基”在本文中指的是單環(huán)(雜)芳基和雙環(huán)(雜)芳基。所述(雜)芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基取代：C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C5-C12環(huán)烯基、C8-C12環(huán)炔基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基、C3-C12環(huán)烷氧基、氨基、氧代和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基可由式(RSi)3Si-表示，其中RSi獨(dú)立地選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基和C3-C12環(huán)烷氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基、烯氧基、炔氧基和環(huán)烷氧基任選地被取代，所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基和環(huán)烷氧基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。如果所述(雜)芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，則優(yōu)選所述取代基獨(dú)立地選自C1-C12烷基、氨基、氧代和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基如上文所定義，且其中所述烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。這些取代基是任選的，且除了如上文在(i)中所定義的任何取代基——即同樣可存在于所述(雜)芳基上的對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基——之外，可存在這些取代基。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物中的(雜)芳基選自苯基、萘基、蒽基、吡咯基、吡咯鎓(pyrrolium)基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、噁唑鎓(oxazolium)基、異噻唑基、噻唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、二唑基、1-氧雜-2，3-二唑基、1-氧雜-2，4-二唑基、1-氧雜-2，5-二唑基、1-氧雜-3，4-二唑基、1-硫雜-2，3-二唑基、1-硫雜-2，4-二唑基、1-硫雜-2，5-二唑基、1-硫雜-3，4-二唑基、四唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡二嗪基、吡啶鎓(pridiniumyl)基、嘧啶鎓(pyrimidinium)基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[3，2-c]吡啶基、吡咯并[3，2-b]吡啶基、咪唑并[4，5-b]吡啶基、咪唑并[4，5-c]吡啶基、吡唑并[4，3-d]吡啶基、吡唑并[4，3-c]吡啶基、吡唑并[3，4-c]吡啶基、吡唑并[3，4-b]吡啶基、異吲哚基、吲唑基、嘌呤基、二氫吲哚基(indolininyl)、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[1，5-a]吡啶基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、吡咯并[1，2-b]噠嗪基、咪唑并[1，2-c]嘧啶基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、1，6-萘啶基、1，7-萘啶基、1，8-萘啶基、1，5-萘啶基、2，6-萘啶基、2，7-萘啶基、吡啶并[3，2-d]嘧啶基、吡啶并[4，3-d]嘧啶基、吡啶并[3，4-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-b]吡嗪基、吡啶并[3，4-b]吡嗪基、嘧啶并[5，4-d]嘧啶基、吡嗪并[2，3-b]吡嗪基和嘧啶并[4，5-d]嘧啶基，所有基團(tuán)任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基選自苯基、吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡嗪基、吡二嗪基、吡咯基、吡咯鎓基、呋喃基、噻吩基、二唑基、喹啉基、咪唑基、噁唑基和噁唑鎓基，更優(yōu)選地選自苯基、吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡咯基、呋喃基和噻吩基，所有基團(tuán)任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。更優(yōu)選地，所述(雜)芳基選自苯基、吡啶基和吡啶鎓基，所有基團(tuán)任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。術(shù)語“1，3-偶極官能團(tuán)”在本文中是指包含三原子π電子體系的基團(tuán)，所述三原子π電子體系含有在三個(gè)原子上離域的四個(gè)電子。1，3-偶極化合物，即包含1，3-偶極官能團(tuán)的化合物，是本領(lǐng)域中公知的。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物選自(雜)芳基硝酮、(雜)芳基疊氮化物、(雜)芳基重氮化合物、(雜)芳基氧化腈、(雜)芳基氮酸酯、(雜)芳基腈亞胺、(雜)芳基悉尼酮(sydnone)、(雜)芳基磺酰肼、(雜)芳基氧化吡啶、(雜)芳基噁二唑1-氧化物、由烷基化的吡啶鎓化合物的去質(zhì)子化得到的(雜)芳基偶極子、(雜)芳基[1，2，3]三唑-8-鎓-1-化物、(雜)芳基1，2，3-噁二唑-3-鎓-5-醇鹽和(雜)芳基5-氧代吡唑烷-2-鎓-1-化物。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物選自(雜)芳基硝酮、(雜)芳基疊氮化物、(雜)芳基重氮化合物、(雜)芳基氧化腈、(雜)芳基氮酸酯、(雜)芳基腈亞胺、(雜)芳基悉尼酮、(雜)芳基磺酰肼、(雜)芳基氧化吡啶和(雜)芳基噁二唑1-氧化物，更優(yōu)選選自(雜)芳基硝酮、(雜)芳基疊氮化物、(雜)芳基重氮化合物和(雜)芳基氧化腈，且甚至更優(yōu)選選自(雜)芳基硝酮、(雜)芳基疊氮化物和(雜)芳基氧化腈。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物或(雜)芳基重氮化合物。最優(yōu)選地，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物。如上所述，在本發(fā)明的方法中：(i)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基是缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基為：(ii-a)其中(雜)芳環(huán)體系攜帶正電荷的(雜)芳基，和/或(ii-b)其中{(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)}：{(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)}的比率對(duì)6-元環(huán)而言小于0.167或?qū)?-元環(huán)而言小于0.200的(雜)芳基。在本文中，缺電子(雜)芳基是指其中(雜)芳環(huán)體系攜帶正電荷，和/或其中{(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)}：{(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)}的比率對(duì)6-元環(huán)而言小于0.167或?qū)?-元環(huán)而言小于0.200的(雜)芳基。所述比率是(雜)芳基的電子性質(zhì)的度量，如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，且更詳細(xì)地描述于，例如“OrganicChemistry”，T.W.GrahamSolomons和CraigB.Fryhle，第7版，JohnWiley&Sons，Inc.，NY1999(ISBN0-471-19095-0)，本文通過引用將其納入。在本文中，所述比率也被稱為比率(pi/質(zhì)子)。如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，“pi”也可稱為“π”，因此“比率(pi/質(zhì)子)”也可稱為“比率(π/質(zhì)子)”。比率(π/質(zhì)子)是指在(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子總數(shù)，除以形成與1，3-偶極官能團(tuán)鍵接的(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子總數(shù)。在本文中，在(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)是指在(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳環(huán)體系的π電子體系中存在的π電子的總數(shù)。當(dāng)(雜)芳基包含二環(huán)芳環(huán)體系時(shí)，應(yīng)考慮在芳環(huán)體系的兩個(gè)環(huán)的π電子體系中存在的π電子的總數(shù)。在(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)是指在形成所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子的總數(shù)。例如，碳原子核中的質(zhì)子數(shù)為6，氮原子核中的質(zhì)子數(shù)為7，氧原子核中的質(zhì)子數(shù)為8且硫原子核中的質(zhì)子數(shù)為16。當(dāng)(雜)芳基包含二環(huán)芳環(huán)體系時(shí)，應(yīng)考慮在芳環(huán)體系的兩個(gè)環(huán)的原子核中存在的π電子的總數(shù)。苯的比率(π/質(zhì)子)被用作6元芳族體系的參考值。苯的比率(π/質(zhì)子)為0.167，因?yàn)楸降摩须娮芋w系中有6個(gè)π電子，且苯環(huán)的6個(gè)碳原子核共具有36個(gè)質(zhì)子(即，每個(gè)碳原子具有6個(gè)質(zhì)子)。當(dāng)(雜)芳基的比率(π/質(zhì)子)比苯高時(shí)，則該(雜)芳基被認(rèn)為是富電子(雜)芳基。當(dāng)(雜)芳基的比率(π/質(zhì)子)比苯低時(shí)，即低于0.167，則該(雜)芳基被認(rèn)為是缺電子(雜)芳基。環(huán)戊二烯基陰離子的比率(π/質(zhì)子)被用作5元芳族體系的參考值。環(huán)戊二烯基陰離子的比率(π/質(zhì)子)為0.2，因?yàn)榄h(huán)戊二烯基陰離子的π電子體系中有6個(gè)π電子，且環(huán)戊二烯基環(huán)的5個(gè)碳原子核共具有30個(gè)質(zhì)子(即，每個(gè)碳原子具有6個(gè)質(zhì)子)。當(dāng)(雜)芳基的比率(π/質(zhì)子)比環(huán)戊二烯基陰離子高時(shí)，該(雜)芳基被認(rèn)為是富電子(雜)芳基。當(dāng)(雜)芳基的比率(π/質(zhì)子)比環(huán)戊二烯基陰離子低時(shí)，即低于0.2，則該(雜)芳基被認(rèn)為是缺電子(雜)芳基。在表1中，列出了在(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子，在(雜)芳環(huán)體系原子核中存在的質(zhì)子數(shù)，以及其比率。從表1中可以看出，吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基和喹啉基為缺電子(雜)芳基的實(shí)例。表1；一些(雜)芳基的π電子、質(zhì)子數(shù)及比率(π/質(zhì)子)1在與1，3-偶極官能團(tuán)鍵接的(雜)芳環(huán)體系中存在的pi電子總數(shù)。2在形成(雜)芳族1，3-偶極化合物的(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子總數(shù)。3在(雜)芳環(huán)體系中存在的pi電子總數(shù)除以形成與1，3-偶極官能團(tuán)鍵接的(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子總數(shù)。在本文中攜帶正電荷的(雜)芳基是指其中(雜)芳基的(雜)芳環(huán)攜帶正電荷的(雜)芳基。攜帶正電荷的(雜)芳基的實(shí)例包括吡啶鎓基、嘧啶基、喹啉鎓基(quinoliniumyl)、咪唑啉鎓基(imidazoliniumyl)、吡唑啉鎓基(pyrazoliniumyl)、噁唑啉鎓基(oxazoliniumyl)、異噁唑啉鎓基(isoxazoliniumyl)、氮雜噻唑啉鎓基(azathiazolinium)。應(yīng)注意，當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基是如上文所定義的缺電子(雜)芳基時(shí)，則所述(雜)芳基還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳環(huán)為6元環(huán)、不攜帶正電荷且具有如上文所定義的0.167或更高的比率(π/質(zhì)子)時(shí)，即當(dāng)(雜)芳基為苯基或富電子(雜)芳基時(shí)，則該(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。所述一個(gè)或多個(gè)取代基鍵接于構(gòu)成所述(雜)芳環(huán)的一部分的原子。當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳環(huán)為5元環(huán)、不攜帶正電荷且具有如上文所定義的0.200或更高的比率(π/質(zhì)子)時(shí)，即當(dāng)(雜)芳基為環(huán)戊二烯基或富電子(雜)芳基時(shí)，則該(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。所述一個(gè)或多個(gè)取代基鍵接于構(gòu)成所述(雜)芳環(huán)的一部分的原子。當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為6元環(huán)、攜帶正電荷、和/或具有低于0.167的比率(π/質(zhì)子)時(shí)，即當(dāng)(雜)芳基為缺電子(雜)芳基時(shí)，則該(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還可任選地包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。所述一個(gè)或多個(gè)取代基鍵接于構(gòu)成所述(雜)芳環(huán)的一部分的原子。當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為5元環(huán)、攜帶正電荷、和/或具有低于0.200的比率(π/質(zhì)子)時(shí)，即當(dāng)(雜)芳基為缺電子(雜)芳基時(shí)，則該(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外可任選地包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。所述一個(gè)或多個(gè)取代基鍵接于構(gòu)成所述(雜)芳環(huán)的一部分的原子。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，且所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外不包含任何σp和/或σm為正值的取代基。在該實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選，所述(雜)芳基選自吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基和喹啉基。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基、苯基或富電子(雜)芳基，且所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基。在該實(shí)施方案中，所述(雜)芳基可為任何(雜)芳基。(雜)芳基和優(yōu)選的(雜)芳基如上文所定義。所述缺電子(雜)芳基、苯基和富電子(雜)芳基可額外地被一個(gè)或多個(gè)上文對(duì)(雜)芳基所定義的取代基取代。對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基及其優(yōu)選的實(shí)施方案將在下文更詳細(xì)地描述。優(yōu)選地，取代基的對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和間位-哈米特取代基常數(shù)σm均為正值。然而，當(dāng)取代基的間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值、但對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp為0.0或更小時(shí)，則優(yōu)選，相對(duì)于1，3-偶極官能團(tuán)的位置，所述取代基在間位上。當(dāng)取代基為例如-OH(σm為0.12且σp為-0.37)、-OMe(σm為0.12且σp為-0.27)、-O(C6H5)(σm為0.25且σp為-0.03)或-OSiMe3(σm為0.13且σp為-0.27)時(shí)，正是這種情況。當(dāng)σm和/或σm的值大于0.00時(shí)，取代基的σp和/或σm為正值。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，σp和/或σm的值為約0.03或更大，優(yōu)選約0.05或更大，更優(yōu)選約0.07或更大，甚至更優(yōu)選約0.10或更大，甚至還更優(yōu)選約0.15或更大，且最優(yōu)選約0.20或更大。如本領(lǐng)域公知的，哈米特取代基常數(shù)σ是官能團(tuán)的取代基效應(yīng)的度量。由于取代基效應(yīng)的大小取決于取代基在芳環(huán)上的位置，因此對(duì)于對(duì)位、間位和鄰位取代基而言有不同的取代基常數(shù)σ：分別為σp、σm和σo。當(dāng)哈米特取代基常數(shù)為正值時(shí)，該官能團(tuán)被認(rèn)為是吸電子取代基，而哈米特取代基常數(shù)為負(fù)值的官能團(tuán)被認(rèn)為是給電子取代基。通常，較少使用鄰位哈米特取代基常數(shù)，因?yàn)猷徫簧洗嬖诘娜〈奈蛔栊?yīng)會(huì)干擾電子效應(yīng)。哈米特σ常數(shù)基于在25℃下苯甲酸及間位-和對(duì)位-取代的苯甲酸在水中的酸解離。哈米特取代基常數(shù)σ是按照下式確定的：σ＝logK/K0其中K0為苯甲酸電離的酸解離常數(shù)，且K為在芳環(huán)的給定位置上具有給定取代基的取代的苯甲酸電離的酸解離常數(shù)。對(duì)于給定取代基的σp的確定而言，K為在芳環(huán)對(duì)位上具有所述取代基的取代的苯甲酸電離的酸解離常數(shù)，對(duì)于給定取代基的σm的確定而言，K為在芳環(huán)間位上具有所述取代基的取代的苯甲酸電離的酸解離常數(shù)。根據(jù)定義，相對(duì)于氫來確定哈米特取代基常數(shù)，因此氫的哈米特取代基常數(shù)σ為0.0。σp和/或σm為正值的基團(tuán)包括例如F、Cl、Br、I、NO2、CN和許多其他基團(tuán)。眾多取代基的對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和間位-哈米特取代基常數(shù)σm是已知的(參見例如C.Hansch等人，Chem.Rev.1991，91，165-195，通過引用將其納入)。本文通過引用將Hansch等人，Chem.Rev.1991，91，第168-175頁的表1明確地納入，該表公開了眾多官能團(tuán)的間位-和對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σm和σp。如上所述，當(dāng)符合下列條件時(shí)，(雜)芳基1，3-偶極化合物中的(雜)芳基在本文中被認(rèn)為是缺電子(雜)芳基：(ii-a)(雜)芳基的(雜)芳環(huán)體系攜帶正電荷，和/或(ii-b){(雜)芳環(huán)體系中存在的π電子數(shù)}：{(雜)芳環(huán)體系的原子核中存在的質(zhì)子數(shù)}的比率對(duì)6元環(huán)而言小于0.167，或?qū)?元環(huán)而言小于0.200。如上所述，當(dāng)(雜)芳基不滿足缺電子(雜)芳環(huán)的要求時(shí)，即當(dāng)(雜)芳基為富電子(雜)芳環(huán)時(shí)，則該(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基。然而，當(dāng)(雜)芳基滿足缺電子(雜)芳環(huán)的要求時(shí)，則該(雜)芳基可任選地包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外，還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基時(shí)，則所述一個(gè)或多個(gè)取代基獨(dú)立地選自-XR11、鹵素(-F、-Cl、-Br、-I，更優(yōu)選-F、-Cl、-Br)、C1-C12鹵代烷基(優(yōu)選C1-C12氯代烷基或C1-C12氟代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CCl3、-C2Cl5)、-CN、-NC、-NO2、-NCO、-OCN、-NCS、-SCN、-N+(R11)3、-C(X)N(R11)2、-C(X)R11、-C(X)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)2R11、-OS(O)OR11、-OS(O)2OR11、-P(O)(R11)(OR11)、-P(O)(OR11)2、-OP(O)(OR11)2、-XC(X)R11、-XC(X)XR11、-XC(X)N(R11)2，其中X為氧或硫，且其中R11獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，所述C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基任選地被取代并任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)和N的雜原子中斷。在再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，X為氧。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C12烷基、C3-C12環(huán)烷基、C2-C12(雜)芳基、C3-C12烷基(雜)芳基和C3-C12(雜)芳基烷基，所述C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C12(雜)芳基、C3-C12烷基(雜)芳基和C3-C12(雜)芳基烷基任選地被取代并任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11獨(dú)立地選自氫、鹵素和C1-C6烷基，更優(yōu)選選自氫、鹵素和C1-C4烷基。最優(yōu)選地，R11獨(dú)立地選自氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和叔丁基。更優(yōu)選地，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外，還包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：-XR11、鹵素(-F、-Cl、-Br、-I，更優(yōu)選-F、-Cl)、C1-C6鹵代烷基(優(yōu)選C1-C6氯代烷基或C1-C6氟代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CCl3、-C2Cl5)、-CN、-NC、-NO2、-NCO、-OCN、-NCS、-SCN、-N+(R11)3、-C(X)N(R11)2、-C(X)R11、-C(X)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)2R11、-OS(O)OR11、-OS(O)2OR11、-P(O)(R11)(OR11)、-P(O)(OR11)2、-OP(O)(OR11)2、-XC(X)R11、-XC(X)XR11、-XC(X)N(R11)2，其中X和R11以及X和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。更優(yōu)選地，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外，還包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：-OR11、鹵素(-F、-Cl、-Br、-I，更優(yōu)選-F、-Cl、-I)、C1-C6鹵代烷基(優(yōu)選C1-C6氯代烷基或C1-C6氟代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CCl3、-C2Cl5)、-CN、-NC、-NO2、-NCO、-OCN、-NCS、-SCN、-N+(R11)3、-C(O)N(R11)2、-C(O)R11、-C(O)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)2R11、-OC(O)R11、-OC(O)OR11、-OC(O)N(R11)2，其中R11和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。甚至更優(yōu)選地，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外，還包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：OR11、鹵素(優(yōu)選-F、-Cl)、-NO2、-CN、-N+(R11)3、-C(O)R11、-C(O)OR11、-C(O)N(R11)2、-S(O)R11和-S(O)2R11，其中R11和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。最優(yōu)選地，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外，還包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：OR11、鹵素(優(yōu)選-F、-Cl)、-NO2、-CN、-N+(R11)3、-C(O)R11、-C(O)OR11、-C(O)N(R11)2、-S(O)R11和-S(O)2R11，其中R11為氫或C1-C12烷基。當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基是缺電子(雜)芳基時(shí)，如上文所定義，則所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還任選地包含一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基。所述(雜)芳基還可包含額外的取代基。優(yōu)選地，這些任選的額外的取代基獨(dú)立地選自如下文所定義的(L’)t-(A’)u、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C5-C12環(huán)烯基、C8-C12環(huán)炔基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基、C3-C12環(huán)烷氧基、氨基和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基可由式(RSi)3Si-表示，其中RSi獨(dú)立地選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基和C3-C12環(huán)烷氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基、烯氧基、炔氧基和環(huán)烷氧基任選地被取代，所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基和環(huán)烷氧基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。如果所述(雜)芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，則優(yōu)選所述取代基獨(dú)立地選自C1-C12烷基、氨基和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基如上文所定義，且其中所述烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，且所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基及其優(yōu)選的實(shí)施方案如上文所定義。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，且所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外不包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(2)所示：其中：t為0或1；u為1-4；g為0或1；m為0-8；條件是，當(dāng)m為0時(shí)，則T為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基如上文所定義；Z為1，3-偶極官能團(tuán)；L’為接頭；A’獨(dú)立地選自D、E和Q，其中D、E和Q如下文所定義；T為(雜)芳基；R4獨(dú)立地選自對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的吸電子取代基；且W選自C1-C24亞烷基、C2-C24亞烯基、C3-C24亞環(huán)烷基、C2-C24亞(雜)芳基、C3-C24烷基亞(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基亞烷基，其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被取代，且其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。如上所述，當(dāng)m為0時(shí)，則T為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基如上文所定義。換言之，當(dāng)(雜)芳基T為缺電子(雜)芳基(即，(雜)芳基的比率(π/質(zhì)子)對(duì)于6元環(huán)而言小于0.167，或?qū)τ?元環(huán)而言小于0.200)時(shí)，則m僅可為0。當(dāng)(雜)芳基為苯基(比率(π/質(zhì)子)為0.167)或富電子(雜)芳基(即(雜)芳基的比率(π/質(zhì)子)對(duì)于6元環(huán)而言高于0.167，或?qū)τ?元環(huán)而言高于0.200)時(shí)，則m為1-7。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基且m為0，即所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外不包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基R4。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，且m為1-7，即所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基R4。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為苯基或富電子(雜)芳基，且m為1-7，即所述(雜)芳基除1，3-偶極官能團(tuán)之外還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基及其優(yōu)選的實(shí)施方案，在上文和下文中進(jìn)行了詳細(xì)地描述。T為(雜)芳基。(雜)芳基在上文進(jìn)行了詳細(xì)地描述。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，T選自苯基、萘基、蒽基、吡咯基、吡咯鎓基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、噁唑鎓基、異噻唑基、噻唑基、1，2，3-三唑基、1，3，4-三唑基、二唑基、1-氧雜-2，3-二唑基、1-氧雜-2，4-二唑基、1-氧雜-2，5-二唑基、1-氧雜-3，4-二唑基、1-硫雜-2，3-二唑基、1-硫雜-2，4-二唑基、1-硫雜-2，5-二唑基、1-硫雜-3，4-二唑基、四唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡二嗪基、吡啶鎓基、嘧啶鎓基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、吡咯并[2，3-c]吡啶基、吡咯并[3，2-c]吡啶基、吡咯并[3，2-b]吡啶基、咪唑并[4，5-b]吡啶基、咪唑并[4，5-c]吡啶基、吡唑并[4，3-d]吡啶基、吡唑并[4，3-c]吡啶基、吡唑并[3，4-c]吡啶基、吡唑并[3，4-b]吡啶基、異吲哚基、吲唑基、嘌呤基、二氫吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[1，5-a]吡啶基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、吡咯并[1，2-b]噠嗪基、咪唑并[1，2-c]嘧啶基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、酞嗪基、1，6-萘啶基、1，7-萘啶基、1，8-萘啶基、1，5-萘啶基、2，6-萘啶基、2，7-萘啶基、吡啶并[3，2-d]嘧啶基、吡啶并[4，3-d]嘧啶基、吡啶并[3，4-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-b]吡嗪基、吡啶并[3，4-b]吡嗪基、嘧啶并[5，4-d]嘧啶基、吡嗪并[2，3-b]吡嗪基和嘧啶并[4，5-d]嘧啶基，所述基團(tuán)任選地被C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C5-C12環(huán)烯基、C8-C12環(huán)炔基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基、C3-C12環(huán)烷氧基、氨基和甲硅烷基取代，其中所述甲硅烷基可由式(RSi)3Si-表示，其中RSi獨(dú)立地選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基和C3-C12環(huán)烷氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基、烯氧基、炔氧基和環(huán)烷氧基任選地被取代，所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基和環(huán)烷氧基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。如果(雜)芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，則優(yōu)選所述取代基獨(dú)立地選自C1-C12烷基、氨基和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基如上文所定義，且其中所述烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，T選自苯基、吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡嗪基、吡二嗪基、吡咯基、吡咯鎓基、呋喃基、噻吩基、二唑基、喹啉基、咪唑基、噁唑基和噁唑鎓基，所述基團(tuán)任選地被一個(gè)或多個(gè)選自以下的取代基取代：C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C5-C12環(huán)烯基、C8-C12環(huán)炔基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基、C3-C12環(huán)烷氧基、氨基和甲硅烷基，其中所述甲硅烷基可由式(RSi)3Si-表示，其中RSi獨(dú)立地選自C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C3-C12環(huán)烷基、C1-C12烷氧基、C2-C12烯氧基、C2-C12炔氧基和C3-C12環(huán)烷氧基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、烷氧基、烯氧基、炔氧基和環(huán)烷氧基任選地被取代，所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基和環(huán)烷氧基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷。Z為1，3-偶極官能團(tuán)。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Z選自硝酮基團(tuán)、疊氮基團(tuán)、重氮基團(tuán)、氧化腈基團(tuán)、氮酸酯基團(tuán)、腈亞胺基團(tuán)、悉尼酮基團(tuán)、磺酰肼基團(tuán)、氧化吡啶基團(tuán)、噁二唑1-氧化物基團(tuán)、由烷基化的吡啶鎓化合物的去質(zhì)子化得到的1，3-偶極官能團(tuán)、[1，2，3]三唑-8-鎓-1-化物基團(tuán)、1，2，3-噁二唑-3-鎓-5-醇鹽基團(tuán)和5-氧代吡唑烷-2-鎓-1-化物基團(tuán)。更優(yōu)選地，Z選自硝酮基團(tuán)、疊氮基團(tuán)、重氮基團(tuán)、氧化腈基團(tuán)、氮酸酯基團(tuán)、腈亞胺基團(tuán)、悉尼酮基團(tuán)、磺酰肼基團(tuán)、氧化吡啶基團(tuán)和噁二唑1-氧化物基團(tuán)，更優(yōu)選選自硝酮基團(tuán)、疊氮基團(tuán)、重氮基團(tuán)和氧化腈基團(tuán)，甚至更優(yōu)選選自硝酮基團(tuán)、疊氮基團(tuán)和氧化腈基團(tuán)。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Z為疊氮基團(tuán)或重氮基團(tuán)。最優(yōu)選地，Z為疊氮基團(tuán)。R4，如果存在，則獨(dú)立地選自對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的吸電子取代基。哈米特常數(shù)σp和σm在上文進(jìn)行了詳細(xì)地描述。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R4獨(dú)立地選自-XR11、鹵素(-F、-Cl、-Br、-I，更優(yōu)選-F、-Cl、-Br)、C1-C12鹵代烷基(優(yōu)選C1-C12氯代烷基或C1-C12氟代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CCl3、-C2Cl5)、-CN、-NC、-NO2、-NCO、-OCN、-NCS、-SCN、-N+(R11)3、-C(X)N(R11)2、-C(X)R11、-C(X)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)2R11、-OS(O)OR11、-OS(O)2OR11、-P(O)(R11)(OR11)、-P(O)(OR11)2、-OP(O)(OR11)2、-XC(X)R11、-XC(X)XR11、-XC(X)N(R11)2，其中X為氧或硫，且其中R11獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，所述C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基任選地被取代并任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)和N的雜原子中斷。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，X為氧。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C12烷基、C3-C12環(huán)烷基、C2-C12(雜)芳基、C3-C12烷基(雜)芳基和C3-C12(雜)芳基烷基，所述C1-C6烷基、C3-C6環(huán)烷基、C2-C12(雜)芳基、C3-C12烷基(雜)芳基和C3-C12(雜)芳基烷基任選地被取代并任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)和N的雜原子中斷。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R11獨(dú)立地選自氫、鹵素和C1-C6烷基，更優(yōu)選選自氫、鹵素和C1-C4烷基。最優(yōu)選地，R11獨(dú)立地選自氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和叔丁基。更優(yōu)選地，R4獨(dú)立地選自-XR11、鹵素(-F、-Cl、-Br、-I，更優(yōu)選-F、-Cl、-I)、C1-C6鹵代烷基(優(yōu)選C1-C6氯代烷基或C1-C6氟代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CCl3、-C2Cl5)、-CN、-NC、-NO2、-NCO、-OCN、-NCS、-SCN、-N+(R11)3、-C(X)N(R11)2、-C(X)R11、-C(X)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)2R11、-OS(O)OR11、-OS(O)2OR11、-P(O)(R11)(OR11)、-P(O)(OR11)2、-OP(O)(OR11)2、-XC(X)R11、-XC(X)XR11、-XC(X)N(R11)2，其中X和R11，以及X和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。甚至更優(yōu)選地，R4獨(dú)立地選自-OR11(優(yōu)選-OMe)、鹵素(優(yōu)選-F、-Cl)、-NO2、-CN、-N+(R11)3、-C(O)R11、-C(O)OR11、-S(O)R11和-S(O)2R11，其中R11和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。(雜)芳基T可包含至多8個(gè)取代基R4(m為0-8)。應(yīng)注意，如上所述，當(dāng)T為缺電子(雜)芳基時(shí)m僅可為0，其中缺電子(雜)芳基如上文所定義。當(dāng)T為苯基時(shí)或當(dāng)T為富電子(雜)芳基(其中富電子(雜)芳基如上文所定義)時(shí)，則m為1、2、3、4、5、6、7或8，優(yōu)選地，m為1、2、3、4、5或6，更優(yōu)選m為1、2、3或4，且最優(yōu)選m為1或2。當(dāng)T為缺電子(雜)芳基時(shí)，則T可任選地進(jìn)一步包含一個(gè)或多個(gè)取代基R4，即在此情況下m為0、1、2、3、4、5、6、7或8。優(yōu)選地，m為0、1、2、3、4、5或6，更優(yōu)選m為0、1、2、3或4，且最優(yōu)選m為0、1或2。W，如果存在，優(yōu)選選自C1-C12亞烷基、C2-C12亞烯基、C3-C12亞環(huán)烷基、C2-C12亞(雜)芳基、C3-C12烷基亞(雜)芳基和C3-C12(雜)芳基亞烷基，其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被取代，且其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。更優(yōu)選地，W，如果存在，選自C1-C12亞烷基、C2-C12亞(雜)芳基和C3-C12烷基亞(雜)芳基，其中亞烷基、亞(雜)芳基和烷基亞(雜)芳基任選地被取代，且其中所述亞烷基、亞(雜)芳基和烷基亞(雜)芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。甚至更優(yōu)選地，W，如果存在，為C1-C6亞烷基，其任選地被取代并任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。最優(yōu)選地，W，如果存在，為亞甲基、亞乙基、亞丙基或亞丁基。A’獨(dú)立地選自D、E和Q，其中D為目標(biāo)分子，E為固體表面且Q為官能團(tuán)。目標(biāo)分子D、固體表面E和官能團(tuán)Q將在下文進(jìn)行詳細(xì)地描述。在本發(fā)明的方法中，A’獨(dú)立地選自存在于(雜)環(huán)炔中的A。在所述(雜)環(huán)炔中，A同樣被定義為目標(biāo)分子D、固體表面E和官能團(tuán)E。然而，由于A和A’是獨(dú)立地選擇的，因此，式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物中的A’及其優(yōu)選的實(shí)施方案，可與式(1)的(雜)環(huán)炔中的A及其優(yōu)選的實(shí)施方案不同。目標(biāo)分子D可為例如報(bào)道分子、診斷化合物、活性物質(zhì)、酶、氨基酸(包括非天然氨基酸)、(非催化性)蛋白、肽、多肽、寡核苷酸、單糖、寡糖、多糖、聚糖、(聚)乙二醇二胺(例如1，8-二氨基-3，6-二氧雜辛烷或包含較長(zhǎng)乙二醇鏈的等同物)、聚乙二醇鏈、聚環(huán)氧乙烷鏈、聚丙二醇鏈、聚環(huán)氧丙烷鏈或1，x-二氨基鏈烷(其中x為鏈烷中碳原子數(shù))?；钚晕镔|(zhì)為藥理學(xué)和/或生物學(xué)物質(zhì)，即具有生物學(xué)和/或藥理學(xué)活性的物質(zhì)，例如，藥物或前藥、診斷試劑、氨基酸、蛋白、肽、多肽、聚糖、脂質(zhì)、維生素、類固醇、核苷酸、核苷、多核苷酸、RNA或DNA。合適的肽標(biāo)簽的實(shí)例包括細(xì)胞穿透性肽，如人乳鐵蛋白或聚精氨酸。合適的聚糖的實(shí)例為甘露寡糖。優(yōu)選地，所述活性物質(zhì)選自藥物和前藥。更優(yōu)選地，所述活性物質(zhì)選自藥學(xué)活性化合物，特別是低分子量至中等分子量化合物(例如，約200至約1500Da，優(yōu)選約300至約1000Da)，例如細(xì)胞毒素、抗病毒劑、抗菌劑、肽和寡核苷酸。細(xì)胞毒素的實(shí)例包括喜樹堿(camptothecin)、阿霉素(doxorubicin)、正定霉素(daunorubicin)、紫杉烷(taxane)、刺孢霉素(calicheamycin)、倍癌霉素(duocarmycin)、美登素(maytansine)、奧瑞他汀(auristatin)或吡咯并苯并二氮雜卓(PBD)。細(xì)胞毒素的其他實(shí)例包括秋水仙堿(colchicine)、長(zhǎng)春花生物堿(vincaalkaloid)、微管溶素(tubulysin)、伊立替康(irinotecan)、抑制肽、鵝膏蕈堿(amanitin)、deBouganin。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，細(xì)胞毒素選自喜樹堿、阿霉素、正定霉素、紫杉烷、刺孢霉素、倍癌霉素、美登素、奧瑞他汀和吡咯并苯并二氮雜卓(PBD)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，細(xì)胞毒素選自秋水仙堿、長(zhǎng)春花生物堿、微管溶素、伊立替康、抑制肽、鵝膏蕈堿和deBouganin。報(bào)道分子是其存在很容易被檢測(cè)到的分子，例如診斷試劑、染料、熒光團(tuán)、放射性同位素標(biāo)記、造影劑、磁共振成像劑或質(zhì)量標(biāo)簽。熒光團(tuán)的實(shí)例包括所有類型的AlexaFluor(例如，AlexaFluor555)、花青染料(例如，Cy3或Cy5)、香豆素衍生物、熒光素、羅丹明、別藻藍(lán)素和色霉素。放射性同位素標(biāo)記的實(shí)例包括99mTc、111In、18F、14C、64Cu、131I或123I，其可或不可通過諸如DTPA、DOTA、NOTA或HYNIC的螯合部分連接。固體表面E為例如功能性表面(例如納米材料、碳納米管、富勒烯、病毒殼體)、金屬表面(例如金、銀、銅、鎳、錫、銠、鋅)或金屬合金表面(來自鋁、鉍、鉻、鈷、銅、鎵、金、銦、鐵、鉛、鎂、汞、鎳、鉀、钚、銠、鈧、銀、鈉、鈦、錫、鈾、鋅、鋯)、聚合物表面(例如聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚乙烯、聚丙烯、聚(二甲基硅氧烷)、聚甲基丙烯酸甲酯)，其中優(yōu)選地，E獨(dú)立地選自功能性表面或聚合物表面。優(yōu)選地，官能團(tuán)Q獨(dú)立地選自氫、鹵素、R11、-CH＝C(R11)2、-C≡CR11、-[C(R11)2C(R11)2O]q-R11(其中q在1至200的范圍內(nèi))、-CN、-N3、-NCX、-XCN、-XR11、-N(R11)2、-+N(R11)3、-C(X)N(R11)2、-C(R11)2XR11、-C(X)R11、-C(X)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)R11、-OS(O)2R11、-OS(O)OR11、-OS(O)2OR11、-P(O)(R11)(OR11)、-P(O)(OR11)2、-Op(O)(OR11)2、-Si(R11)3、-XC(X)R11、-XC(X)XR11、-XC(X)N(R11)2、-N(R11)C(X)R11、-N(R11)C(X)XR11和-N(R11)C(X)N(R11)2，其中X為氧或硫，且其中R11獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，所述C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基任選地被取代并任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)和N的雜原子中斷。優(yōu)選的，R11獨(dú)立地選自氫、鹵素和C1-C6烷基，更優(yōu)選選自氫、鹵素和C1-C4烷基。最優(yōu)選地，R11獨(dú)立地選自氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和叔丁基。X優(yōu)選為氧。任選地，官能團(tuán)Q被掩蔽或保護(hù)。更優(yōu)選地，Q獨(dú)立地選自-CN、-NCX、-XCN、-XR11、-N(R11)2、-+N(R11)3、-C(X)N(R11)2、-C(R11)2XR11、-C(X)R11、-C(X)XR11、-XC(X)R11、-XC(X)XR11、-XC(X)N(R11)2、-N(R11)C(X)R11、-N(R11)C(X)XR11和-N(R11)C(X)N(R11)2，其中X和R11以及X和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。最優(yōu)選地，Q選自-OR11、-SR11、-N(R11)2、-+N(R11)3、-C(O)N(R11)2、-C(O)OR11、-OC(O)R11、-OC(O)OR11、-OC(O)N(R11)2、-N(R11)C(O)R11、-N(R11)C(O)OR11和-N(R11)C(O)N(R11)2，其中X和R11以及X和R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，A’為目標(biāo)分子D。更優(yōu)選地，A’獨(dú)立地選自報(bào)道分子、活性物質(zhì)、酶、蛋白、糖蛋白、抗體、肽、多肽、寡核苷酸、單糖、寡糖、多糖、聚糖、診斷化合物、氨基酸、(聚)乙二醇二胺、聚乙二醇鏈、聚環(huán)氧乙烷鏈、聚丙二醇鏈、聚環(huán)氧丙烷鏈或1，x-二氨基鏈烷(其中x為鏈烷中的碳原子數(shù))。報(bào)道分子和活性物質(zhì)在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，A’為糖蛋白，優(yōu)選為抗體。當(dāng)A’為糖蛋白時(shí)，則優(yōu)選的是，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基通過糖蛋白聚糖的糖部分與糖蛋白連接。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，A’為糖部分。所述糖部分可為單糖部分、寡糖部分或多糖部分。所述單糖部分、寡糖部分或多糖部分可任選地被例如核苷酸取代。所述核苷酸優(yōu)選選自一磷酸核苷和二磷酸核苷，更優(yōu)選選自尿苷二磷酸(UDP)、鳥苷二磷酸(GDP)、胸苷二磷酸(TDP)、胞苷二磷酸(CDP)和胞苷一磷酸(CMP)，更優(yōu)選選自尿苷二磷酸(UDP)、鳥苷二磷酸(GDP)、胞苷二磷酸(CDP)。最優(yōu)選地，所述核苷酸為UDP。在本說明書、權(quán)利要求書和附圖中，當(dāng)核苷酸為UDP時(shí)，即當(dāng)-Nuc為-UDP時(shí)，該核苷酸具有以下所示的結(jié)構(gòu)。優(yōu)選的，所述糖部分為單糖部分，更優(yōu)選為選自以下的糖部分：半乳糖(Gal)、甘露糖(Man)、N-乙酰氨基葡糖(GlcNAc)、葡萄糖(Glc)、N-乙酰氨基半乳糖(GalNAc)、巖藻糖(Fuc)和N-乙酰神經(jīng)氨酸(唾液酸Sia或NeuNAc)，甚至更優(yōu)選選自GlcNAc、Glc、Gal和GalNAc，還甚至更優(yōu)選選自Gal或GalNAc。最優(yōu)選地，所述單糖部分為GalNAc。所述核苷酸優(yōu)選連接至單糖部分的C1，且所述(雜)芳基優(yōu)選經(jīng)由GalNAc部分的N-乙?；I接。其中A’為糖蛋白(例如抗體)且其中A’為糖部分的(雜)芳基1，3-偶極化合物的優(yōu)選實(shí)施方案將在下文進(jìn)行詳細(xì)地描述。當(dāng)t為1時(shí)，(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基經(jīng)由L’鍵接于A’。L’為接頭，在本文中也被稱為連接單元。所述(雜)芳基可經(jīng)由接頭L’(u為1、2、3或4)鍵接于一個(gè)或與多個(gè)A’。當(dāng)存在一個(gè)以上的A’(u為2、3或4)時(shí)，獨(dú)立地選擇各個(gè)A’，即各個(gè)A’可彼此不同。優(yōu)選地，u為1或2，最優(yōu)選u為1。接頭L’獨(dú)立地選自存在于(雜)環(huán)炔中的接頭L。換言之，式(2)所示的(雜)芳基1，3-偶極化合物中的接頭L’及其優(yōu)選的實(shí)施方案可與式(1)所示的(雜)環(huán)炔中的接頭L及其優(yōu)選的實(shí)施方案不同。接頭是本領(lǐng)域公知的。例如L’和L’可獨(dú)立地選自直鏈或支鏈C1-C200亞烷基、C2-C200亞烯基、C2-C200亞炔基、C3-C200亞環(huán)烷基、C5-C200亞環(huán)烯基、C8-C200亞環(huán)炔基、C7-C200烷基亞芳基、C7-C200芳基亞烷基、C8-C200芳基亞烯基、C9-C200芳基亞炔基。任選地，所述亞烷基、亞烯基、亞炔基、亞環(huán)烷基、亞環(huán)烯基、亞環(huán)炔基、烷基亞芳基、芳基亞烷基、芳基亞烯基和芳基亞炔基是被取代的，且任選地，所述基團(tuán)被一個(gè)或多個(gè)雜原子——優(yōu)選1至100個(gè)雜原子——中斷，所述雜原子優(yōu)選選自O(shè)、S和N。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3a)、(3b)、(3c)、(3d)、(3e)或(3f)所示：其中：Z、L’、A’、R4、W、g、m、t和u及其優(yōu)選的實(shí)施方案如上文所定義；s為0或1；G獨(dú)立地選自N、CH、CR4、CR5、C-(W)g-[(L’)t-(A’)u]、N+R5和N+-(W)g-[(L’)t-(A’)u]，其中R5選自C1-C24烷基；G，獨(dú)立地選自O(shè)、S、NR12和N+(R12)2，其中R12獨(dú)立地選自氫、R4、R5和(W)g-[(L’)t-(A’)u]；且條件是當(dāng)s為0時(shí)，G為C-(W)g-[(L’)t-(A’)u]或N+-(W)g-[(L’)t-(A’)u]，且G’為N-(W)g-[(L’)t-(A’)u]或N+(R12){-(W)g-[(L’)t-(A’)u]}。在(3a)中，(雜)芳基T可為例如苯基、吡啶基或吡啶鎓基。在(3b)中，(雜)芳基T可為例如吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、嘧啶鎓基或三嗪基。在(3c)中，(雜)芳基T可為例如喹啉基。在(3d)中，(雜)芳基T可為例如吡咯基、吡咯鎓基、吡咯烷鎓基、呋喃基或噻吩基(即硫代呋喃基)。在(3e)中，(雜)芳基T可為例如二唑基、噁唑基、咪唑基或噻唑基。在(3f)中，(雜)芳基T可為例如吡唑基、異氧雜噻唑基或異噁唑基。R5優(yōu)選選自C1-C12烷基，更優(yōu)選選自C1-C6烷基，最優(yōu)選選自甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和叔丁基。Z、L’、A’、R4、W、g、m、t和u的優(yōu)選實(shí)施方案在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。這些優(yōu)選實(shí)施方案也適用于式(3a)、(3b)、(3c)、(3d)、(3e)和(3f)所示的(雜)芳基1，3-偶極化合物。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如(3t)、(3u)、(3v)、(3w)、(3x)、(3y)或(3z)所示：其中(L’)t-(A)u如上文所定義。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，接頭L’，如果存在，為烷基酰胺，例如丙酰胺。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3za)、(3zb)或(3zc)所示：其中(L’)t-(A)u如上文所定義。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，接頭L’，如果存在，為烷基酰胺，例如丙酰胺。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3zd)、(3ze)、(3zf)或(3zg)所示：其中(L’)t-(A)u如上文所定義。如上所述，在(雜)芳基1，3-偶極化合物的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，A’為糖蛋白、優(yōu)選抗體，且在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，A’為任選取代的糖部分。此外，當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3a)、(3b)、(3c)、(3d)、(3e)或(3f)，或如式(3t)、(3u)、(3v)、(3w)、(3x)、(3y)或(3z)，或如式(3za)、(3zb)或(3zc)，或如式(3zd)、(3ze)、(3zf)或(3zg)所示時(shí)，優(yōu)選A’為糖蛋白、優(yōu)選抗體，或優(yōu)選A’為任選取代的糖部分。當(dāng)A’為任選取代的糖部分時(shí)，在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(2b)所示，且當(dāng)A’為糖蛋白時(shí)，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(2c)所示：其中：Nuc、T、W、r、m和R4及其優(yōu)選的實(shí)施方案如上文對(duì)(2)所定義的；且Z為疊氮基團(tuán)或重氮基團(tuán)。在(2b)中，優(yōu)選地，Nuc為UDP。在(2b)和(2c)中，可存在W(g為1)或不存在W(g為0)。在(2b)和(2c)的優(yōu)選實(shí)施方案中，g為0。在(2b)和(2c)的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，g為1且W選自亞甲基、亞乙基、亞丙基(優(yōu)選亞正丙基)、亞丁基(優(yōu)選亞正丁基)、亞戊基(優(yōu)選亞正戊基)和亞己基(優(yōu)選亞正己基)，更優(yōu)選g為1且W選自亞甲基、亞乙基、亞丙基(優(yōu)選亞正丙基)和亞丁基(優(yōu)選亞正丁基)，甚至更優(yōu)選g為1且W選自亞甲基、亞乙基和亞丙基(優(yōu)選亞正丙基)，還甚至更優(yōu)選g為1且W為亞甲基或亞乙基。最優(yōu)選地，當(dāng)g為1時(shí)，W為亞甲基。當(dāng)(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(2b)或(2c)所示時(shí)，特別優(yōu)選(雜)芳基部分-T(Z)(R4)m對(duì)應(yīng)于如上所述的(3t)、(3u)、(3v)、(3w)、(3x)、(3y)或(3z)，或如上所述的(3za)、(3zb)或(3zc)，或如上所述的(3zd)、(3ze)、(32f)或(3zg)的(雜)芳基部分。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，g為0。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，g為1，且W的優(yōu)選實(shí)施方案如上文對(duì)(2b)和(2c)的描述。在本發(fā)明方法的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如(2d)、(2e)、(2f)或(2g)所示：其中Z為疊氮基團(tuán)或重氮基團(tuán)。在(2d)、(2e)、(2f)和(2g)的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Z為疊氮基團(tuán)。在本發(fā)明方法的另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(2h)、(2i)、(2j)或(2k)所示：其中Z為疊氮基團(tuán)或重氮基團(tuán)。在(2h)、(2i)、(2j)和(2k)的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，Z為疊氮基團(tuán)。(雜)環(huán)炔術(shù)語“(雜)環(huán)炔”在本文中是指環(huán)炔和雜環(huán)炔。在本發(fā)明的方法中，所述(雜)環(huán)炔如式(1)所示，其中a、a’、a”、n、p、q、r、B、B’、L、A和R1如上文所定義。如上所述，a為0至8，a’為0至8且a”為0至8，條件是a+a’+a”為4、5、6、7或8。因此，式(1)的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔(a+a’+a”為4)、(雜)環(huán)壬炔(a+a’+a”為5)、(雜)環(huán)癸炔(a+a’+a”為6)、(雜)環(huán)十一炔(a+a’+a”為7)或(雜)環(huán)十二炔(a+a’+a”為8)。特別優(yōu)選a+a’+a”為4或a+a’+a”為5，即特別優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔或(雜)環(huán)壬炔，優(yōu)選為(雜)環(huán)辛炔。因此，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔時(shí)，a、a’和a”獨(dú)立地為0、1、2、3或4，條件是a+a’+a”為4；且當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔時(shí)，a、a’和a”獨(dú)立地為0、1、2、3、4或5，條件是a+a’+a”為5。當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔時(shí)，n為0、1、2、3、4、5、6、7或8且當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔時(shí)，n為0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。優(yōu)選地，n為0、1、2、3、4、5或6，甚至更優(yōu)選n為0、1、2、3或4且最優(yōu)選n為0、1或2。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)炔，其中脂族(雜)環(huán)炔被定義為其中(雜)環(huán)炔碳-碳三鍵的兩個(gè)sp1C原子均鍵接于sp3C原子的(雜)環(huán)炔。在另一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(1)的脂族(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)辛炔或脂族(雜)環(huán)壬炔。當(dāng)式(1)的(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)辛炔時(shí)，a為1、2、3或4；a’為1、2、3或4；a”為1、2、3或4；條件是a+a’+a”＝4；且n為0-8。當(dāng)式(1)的(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)壬炔時(shí)，a為1、2、3、4或5；a’為1、2、3、4或5；a”為1、2、3、4或5；條件是a+a’+a”＝5；且n為0-10。當(dāng)a為1或更大時(shí)，存在于C≡C三鍵和B之間的一個(gè)或多個(gè)C-原子在本文中也被稱為a-C原子。類似地，當(dāng)a’為1或更大時(shí)，存在于C≡C三鍵和B’之間的1個(gè)或多個(gè)C-原子在本文中也被稱為a’-C原子，且如果a”為1或更大，則存在于B和B’之間的1個(gè)或多個(gè)C原子在本文中也被稱為a”-C原子。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R1獨(dú)立地選自C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被取代，其中所述烷基、環(huán)烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。當(dāng)式(1)的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔時(shí)，n為0-8，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔時(shí)，n為0-10，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)癸炔時(shí)，n為0-12，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)十一炔時(shí)，n為0-14且當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)十二炔時(shí)，n為0-16。優(yōu)選地，n為0、1、2、3、4、5、6、7或8，更優(yōu)選地，n為0、1、2、3、4、5或6，甚至更優(yōu)選地，n為0、1、2、3或4，且最優(yōu)選地，n為0、1或2。如上所述，如果(雜)環(huán)炔(1)中的q為0，則：(i)B和/或B’為NR3，其中R3為(L)p-(A)r；(ii)B和/或B’為C(R3)2，其中一個(gè)或多個(gè)R3為(L)p-(A)r；(iii)n為2或更大，且兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)環(huán)烷基，其中所述(雜)環(huán)烷基被(L)p-(A)r取代基取代；和/或(iv)a”為2或更大且n為2或更大，且存在于相鄰a”-C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)芳基，其中所述(雜)芳基被(L)p-(A)r取代基取代。當(dāng)a”為2或更大時(shí)，則a”在B和B’之間存在2個(gè)或更多個(gè)a”-C原子。任選地，當(dāng)a”為2或更大且n為2或更大、且2個(gè)相鄰a”-C原子被R1取代時(shí)，則這兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)芳基，所述(雜)芳基任選地被(L)p-(A)r取代基取代。所述(雜)芳基環(huán)與(雜)環(huán)炔環(huán)稠合。在該實(shí)施方案中，優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔如式(1b)所示：其中B、B’、R1、L、A、a、a’、p、r和q如上文所定義；條件是a+a’為2、3、4、5或6；其中n為0、1、2、3或4；且n”為0、1、2或3。在該實(shí)施方案中，優(yōu)選a+a’為2或3，即優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔或(雜)環(huán)壬炔。更優(yōu)選地，a+a’為2，即更優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。任選地，當(dāng)n為2或更大時(shí)，兩個(gè)R1基團(tuán)——優(yōu)選在相鄰C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)——可一起形成(雜)環(huán)烷基，所述(雜)環(huán)烷基任選地被(L)p-(A)r取代基取代。優(yōu)選地，所述兩個(gè)R1基團(tuán)——優(yōu)選在相鄰C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)——一起形成(雜)環(huán)丙基、(雜)環(huán)丁基、(雜)環(huán)戊基或(雜)環(huán)己基，更優(yōu)選(雜)環(huán)丙基、(雜)環(huán)丁基或(雜)環(huán)戊基且最優(yōu)選環(huán)丙基，所有均任選地被(L)p-(A)r取代基取代。優(yōu)選地，由兩個(gè)R1基團(tuán)形成的(雜)環(huán)烷基與(雜)環(huán)炔稠合。因此，在該實(shí)施方案中，優(yōu)選a為2或更大，和/或a’為2或更大，和/或a”為2或更大。可選地，在該實(shí)施方案中，優(yōu)選a為1且B為NR1或C(R3)2，其中至少一個(gè)R3為R1，和/或a’為1且B’為NR1或C(R3)2，其中至少一個(gè)R3為R1。在該實(shí)施方案中，優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔如式(1c)所示：其中B、B’、R1、L、A、a、a’、p、r和q如上文所定義；條件是a+a’為2、3、4、5或6；其中n為0-6(優(yōu)選0、1、2、3或4)；n”為0、1、2、3或4；且a”’為0、1、2或3。在該實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選a+a’為2或3，即優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔或(雜)環(huán)壬炔。更優(yōu)選地，a+a’為2，即更優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。優(yōu)選地，a”’為0或1，換言之，所述成環(huán)的(雜)環(huán)烷基為成環(huán)的環(huán)丙基或成環(huán)的環(huán)丁基，優(yōu)選成環(huán)的環(huán)丙基。當(dāng)p為1時(shí)，則A經(jīng)由L鍵接于所述(雜)環(huán)炔。L為接頭，在本文中也稱為連接單元。所述(雜)環(huán)炔可經(jīng)由接頭L(r為1、2、3或4)鍵接于一個(gè)或多個(gè)A。當(dāng)存在多于一個(gè)的A(r為2、3或4)時(shí)，各個(gè)A為獨(dú)立選擇的，換言之，各個(gè)A可彼此不同。優(yōu)選地，r為1或2且最優(yōu)選r為1。A和A的優(yōu)選實(shí)施方案的描述對(duì)應(yīng)于A’(以及A”和A”’，如果存在)和A’的優(yōu)選實(shí)施方案(以及A”和A”’，如果存在)的描述。(雜)環(huán)炔中的A和(雜)芳基1，3-偶極化合物中的A’(以及A”和A”’，如果存在)均被定義為目標(biāo)分子D、固體表面E或官能團(tuán)E。目標(biāo)分子D、固體表面E和官能團(tuán)Q在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。然而，由于A和A’(以及A”和A”’，如果存在)為獨(dú)立選擇的，因此，式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物中的A’(以及任選的A”和A”’)以及在其優(yōu)選實(shí)施方案中的A’(以及A”和A”’，如果存在)可與式(1)、(1b)或(1c)的(雜)環(huán)炔中的A及其優(yōu)選實(shí)施方案不同。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，A為目標(biāo)分子D。更優(yōu)選地，A獨(dú)立地選自報(bào)道分子、活性物質(zhì)、酶、蛋白、糖蛋白、抗體、肽、多肽、寡核苷酸、聚糖、診斷化合物、氨基酸、(聚)乙二醇二胺、聚乙二醇鏈、聚環(huán)氧乙烷鏈、聚丙二醇鏈、聚環(huán)氧丙烷鏈和1，x-二氨基鏈烷(其中x為鏈烷中的碳原子數(shù))。報(bào)道分子和活性物質(zhì)上文進(jìn)行了詳細(xì)地描述。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，A為目標(biāo)分子D，且D為活性物質(zhì)。更優(yōu)選地，所述活性物質(zhì)選自藥學(xué)活性化合物，特別是低分子量至中等分子量化合物(例如約200至約1500Da，優(yōu)選約300至約1000Da)，例如細(xì)胞毒素、抗病毒劑、抗菌劑、肽和寡核苷酸。細(xì)胞毒素的實(shí)例包括喜樹堿、阿霉素、正定霉素、紫杉烷、刺孢霉素、倍癌霉素、美登素、奧瑞他汀或吡咯并苯并二氮雜卓(PBD)。細(xì)胞毒素的其他實(shí)例包括秋水仙堿、長(zhǎng)春花生物堿、微管溶素、伊立替康、抑制肽、鵝膏蕈堿、deBouganin。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該細(xì)胞毒素選自喜樹堿、阿霉素、正定霉素、紫杉烷、刺孢霉素、倍癌霉素、美登素、奧瑞他汀和吡咯并苯并二氮雜卓(PBD)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該細(xì)胞毒素選自秋水仙堿、長(zhǎng)春花生物堿、微管溶素、伊立替康、抑制肽、鵝膏蕈堿和deBouganin。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)A為目標(biāo)分子D時(shí)，D為報(bào)道分子，例如診斷試劑、染料、熒光團(tuán)、放射性同位素標(biāo)記、造影劑、磁共振成像劑或質(zhì)量標(biāo)簽。熒光團(tuán)的實(shí)例包括所有類型的AlexaFluor(例如AlexaFluor555)、花青染料(例如Cy3或Cy5)、香豆素衍生物、熒光素、羅丹明、別藻藍(lán)素和色霉素。放射性同位素標(biāo)記的實(shí)例包括99mTc、111In、18F、14C、64Cu、131I或123I，其可以通過螯合部分例如DTPA、DOTA、NOTA或HYNIC連接或可以不通過所述螯合部分連接。接頭L獨(dú)立地選自存在于所述(雜)芳基1，3-偶極化合物中的接頭L’(以及L”和L”’，如果存在)。換言之，式(1)、(1b)或(1c)的(雜)環(huán)炔中的接頭L及其優(yōu)選實(shí)施方案可與式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物中的接頭L及其優(yōu)選實(shí)施方案不同。連接單元在上文進(jìn)行了詳細(xì)地描述。L及L的優(yōu)選實(shí)施方案的描述對(duì)應(yīng)于L’(以及L”和L”’，如果存在)及L’的優(yōu)選實(shí)施方案的描述。然而，如上所述，L和L’(以及L”和L”’，如果存在)是彼此獨(dú)立選擇的，因此，在本發(fā)明的方法中L與L’(以及L”和L”’，如果存在)可不同。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)炔。在本文中，脂族(雜)環(huán)炔被被定義為其中(雜)環(huán)炔碳-碳三鍵的兩個(gè)sp1C原子均鍵接于sp3C原子的(雜)環(huán)炔。換言之，在本文中，脂族(雜)環(huán)炔是指其中碳-碳三鍵C≡C兩側(cè)的C原子為sp3C原子的(雜)環(huán)炔。因此，在該實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔如式(1)所示，其中a’和a獨(dú)立地為1-8。優(yōu)選地，a為1、2、3或4，更優(yōu)選為1或2，和/或a’為1、2、3或4，更優(yōu)選為1或2。還優(yōu)選a”為0、1、2、3或4，更優(yōu)選為1或2。還優(yōu)選a+a’+a”為4，即優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。甚至更優(yōu)選地，a為1，a’為1且a”為2。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選B為O且B’為O。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為1，a’為1且a”為2，B為O且B’為O，且在a”-C原子之一上存在[(L)p-(A)r]。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為1，a’為1且a”為2，B為C(R3)2且B’為C(R3)2，且在a”-C原子之一上存在[(L)p-(A)r]。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為2，a’為2且a”為0，或a為2，a’為1且a”為1。在該實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選B為C(R3)[(L)p-(A)r]且B’為C(R3)2，或B為N[(L)p-(A)r]且B’為C(R3)2。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔為式(4)所示的脂族(雜)環(huán)炔：其中：a為0、1、2、3、4、5或6；a’為0、1、2、3、4、5或6；a”為0、1、2、3、4、5或6；條件是a+a’+a”＝2、3、4、5或6；n為0-12；R1獨(dú)立地選自-OR2、-NO2、-CN、-S(O)2R2、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被取代，其中所述烷基、環(huán)烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷，且其中R2獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基；任選地，當(dāng)n為2或更大時(shí)，兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)環(huán)烷基，所述(雜)環(huán)烷基任選地被(L)p-(A)r取代基取代；任選地，當(dāng)a”為2或更大且n為2或更大時(shí)，存在于相鄰a”-C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)可一起形成(雜)芳基，所述(雜)芳基任選地被(L)p-(A)r取代基取代；R10獨(dú)立地選自(L)p-(A)r(其中L、A、p和r如下文所定義)、氫、C1-C24烷基、C3-C24環(huán)烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、環(huán)烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被取代，且其中所述烷基、環(huán)烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷；B和B’獨(dú)立地選自O(shè)、S、C(O)、NR3和C(R3)2，其中R3獨(dú)立地選自氫、R1或(L)p-(A)r；p為0或1；r為1-4；L為接頭；A獨(dú)立地選自D、E和Q，其中D、E和Q如下文所定義；q為0-4；條件是如果q為0，則B和/或B’為NR3(其中R3為(L)p-(A)r)，和/或B和/或B’為C(R3)2(其中一個(gè)或多個(gè)R3為(L)p-(A)r)，和/或n為2或更大，且兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)環(huán)烷基，其中所述(雜)環(huán)烷基被(L)p-(A)r取代基取代，和/或a”為2或更大且n為2或更大，且存在于相鄰a”-C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)芳基，其中所述(雜)芳基被(L)p-(A)r取代基取代，和/或一個(gè)或多個(gè)R10為(L)p-(A)r；D為目標(biāo)分子；E為固體表面；且Q為官能團(tuán)。如上面對(duì)式(1)的(雜)環(huán)炔所描述的R1、L’和A’的優(yōu)選實(shí)施方案也適用于式(4)的(雜)環(huán)炔的R1、L和A的優(yōu)選實(shí)施方案。進(jìn)一步優(yōu)選r為1或2。在式(4)的脂族(雜)環(huán)炔中，a+a’+a”為2、3、4、5或5。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a+a’+a”為2，即所述脂族(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a+a’+a”為3，即所述脂族(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔。在一個(gè)實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選a為0，a’為0且a”為2。在該實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選B為O且B’為O。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為0，a’為0且a”為2，B為O且B’為O，且甚至更優(yōu)選在a”-C原子之一上存在[(L)p-(A)r]。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為0，a’為0且a”為2，B為C(R3)2且B’為C(R3)2，且在a”-C原子之一上存在[(L)p-(A)r]。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為1，a’為1且a”為0。在該實(shí)施方案中，進(jìn)一步優(yōu)選B為C(R3)[(L)p-(A)r]且B’為C(R3)2，或B為N[(L)p-(A)r]且B’為C(R3)2。當(dāng)式(4)的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔時(shí)，n為0-4，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔時(shí)，n為0-6，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)癸炔時(shí)，n為0-8，當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)十一炔時(shí)，n為0-10，且當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)十二炔時(shí)，n為0-12。優(yōu)選地，n為0、1、2、3、4、5、6、7或8，更優(yōu)選n為0、1、2、3、4、5或6，甚至更優(yōu)選n為0、1、2、3或4，且最優(yōu)選n為0、1或2。如上所述，如果脂族(雜)環(huán)炔(4)中的q為0，則：(i)B和/或B’為NR3，其中R3為(L)p-(A)r；(ii)B和/或B’為C(R3)2，其中一個(gè)或多個(gè)R3為(L)p-(A)r；(iii)n為2或更大且兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)環(huán)烷基，其中所述(雜)環(huán)烷基被(L)p-(A)r取代基取代；(iv)a”為2或更大且n為2或更大且存在于相鄰a”-C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)一起形成(雜)芳基，其中所述(雜)芳基被(L)p-(A)r取代基取代；和/或(iv)一個(gè)或多個(gè)R10為(L)p-(A)r。當(dāng)在相鄰的a”-C原子上的兩個(gè)R1基團(tuán)任選地形成稠合的(雜)芳基時(shí)，優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔如式(4b)所示，當(dāng)兩個(gè)R1基團(tuán)任選地形成(雜)環(huán)烷基時(shí)，優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔如式(4c)所示：其中B、B’、R1、R10、L、A、a、a’、p、r和q如上文對(duì)(4)所定義的；條件是a+a’為0、1、2、3或4；n’為0、1、2、3或4；n”為0、1、2、3或4；且a”’為0、1、2或3。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a+a’為0，即所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。換言之，優(yōu)選a為0且a’為0。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a+a’為1，即所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔。在(4c)中，進(jìn)一步優(yōu)選a”’為0、1或2，更優(yōu)選為0或1，最優(yōu)選為0。因此，在該實(shí)施方案中，優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)與所述(雜)環(huán)炔成環(huán)，最優(yōu)選環(huán)丙基環(huán)。如上面對(duì)式(1)的(雜)環(huán)炔所描述的R1、L和A的優(yōu)選實(shí)施方案也適用于式(4b)和(4c)的(雜)環(huán)炔的a、a’、a”、R1、L和A的優(yōu)選實(shí)施方案。進(jìn)一步優(yōu)選r為1或2。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明方法中的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔，即在式(1)、(1b)或(1c)的(雜)環(huán)炔中，優(yōu)選a+a’+a”為4。更優(yōu)選地，a為1，a’為1且a”為2。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)辛炔為上文所定義的脂族(雜)環(huán)辛炔。更優(yōu)選地，所述脂族(雜)環(huán)辛炔為式(4)、(4b)或(4c)的脂族(雜)環(huán)辛炔，即在式(4)的(雜)環(huán)炔中更優(yōu)選a+a’+a”為2，且在式(4b)或(4c)的(雜)環(huán)炔中a+a’為0。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明方法中的(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)壬炔，即在式(1)、(1b)或(1c)的(雜)環(huán)炔中優(yōu)選a+a’+a”為5。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)壬炔為上文所定義的脂族(雜)環(huán)壬炔。更優(yōu)選地，所述脂族(雜)環(huán)壬炔為式(4)、(4b)或(4c)的脂族(雜)環(huán)壬炔，即在式(4)的(雜)環(huán)炔中更優(yōu)選a+a’為3，在式(4b)或(4c)的(雜)環(huán)炔中a+a’為1。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔如式(5)所示：其中：R1、L、p、r和A及其優(yōu)選的實(shí)施方案如上文所定義；n為0-8；R6獨(dú)立地選自氫、鹵素、C1-C24烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基獨(dú)立地任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷，且其中所述烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基獨(dú)立任選地被取代；且R7選自氫、(L)p-(A)r、鹵素、C1-C24烷基、C2-C24(雜)芳基、C3-C24烷基(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基烷基，其中所述烷基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基獨(dú)立地任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子中斷，且其中所述烷基、(雜)芳基、烷基(雜)芳基和(雜)芳基烷基獨(dú)立地任選地被取代。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，n為0。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R6為H。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，R7為H。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，n為0，R6為H且R7為H。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔如式(6)所示，其中L、A、p和r如上文所定義：在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，n為0，R6為H，R7為H且p為1。更優(yōu)選地，r為1或2，最優(yōu)選r為1。式(6)的(雜)環(huán)炔的實(shí)例為(雜)環(huán)炔(6b)，其中p為1，L為CH2，r為1且A為官能團(tuán)Q，即-OH。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)辛炔如式(7)、(8)、(9)、(10)或(11)所示：其中L、p、r和A以及其優(yōu)選實(shí)施方案如上文所述。當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為如式(7)所示時(shí)，優(yōu)選在所述環(huán)辛炔的C5上存在-(L)p(A)r。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔為式(35a)或(35b)所示的(雜)環(huán)壬炔：其中：L、p、r和A以及其優(yōu)選的實(shí)施方案如上所述；且R16獨(dú)立地為-(L)p(A)r、H或-OMe。環(huán)壬炔(11b)和(11c)描述于J.Org.Chem.，2012，77，2093中，通過引用將其納入本文。此外，在式(5)、(6)、(7)、(8)、(9)、(10)和(11)的(雜)環(huán)炔中，或在式(35a)或(35b)的(雜)環(huán)壬炔中，優(yōu)選r為1或2，更優(yōu)選為1，且優(yōu)選A選自報(bào)道分子、活性物質(zhì)、酶、蛋白、糖蛋白、抗體、肽、多肽、寡核苷酸、聚糖、診斷化合物、氨基酸、(聚)乙二醇二胺、聚乙二醇鏈、聚環(huán)氧乙烷鏈、聚丙二醇鏈、聚環(huán)氧丙烷鏈和1，x-二氨基鏈烷(其中x為鏈烷中的碳原子數(shù))。報(bào)道分子和活性物質(zhì)在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。A的更優(yōu)選的實(shí)施方案如上文所述。如上所述，本發(fā)明涉及式(1)的(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成的方法，其中(i)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基如上文所定義，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，如本文所述的式(1)的(雜)環(huán)炔與式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物或其優(yōu)選實(shí)施方案反應(yīng)。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，如本文所述的式(1)的(雜)環(huán)炔與式(3)的(雜)芳基1，3-偶極化合物或其優(yōu)選實(shí)施方案反應(yīng)。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，脂族(雜)環(huán)炔(其中脂族(雜)環(huán)炔被定義為其中(雜)環(huán)炔碳-碳三鍵的兩個(gè)sp1C原子鍵接于sp3C原子的(雜)環(huán)炔，如上所述)與(雜)芳基1，3-偶極化合物反應(yīng)，其中(i)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基如上所定義，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述脂族(雜)環(huán)炔如式(4)所示。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，如本文中所述的式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物或其優(yōu)選實(shí)施方案與如上文所定義的脂族(雜)環(huán)炔反應(yīng)，更優(yōu)選與式(4)的脂族(雜)環(huán)炔或如本文中所述的其優(yōu)選實(shí)施方案反應(yīng)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，如本文中所述的式(3)的(雜)芳基1，3-偶極化合物或其優(yōu)選實(shí)施方案與如上文所定義的脂族(雜)環(huán)炔反應(yīng)，更優(yōu)選與如本文所述的式(4)的脂族(雜)環(huán)炔或其優(yōu)選實(shí)施方案反應(yīng)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(5)、(6)、(7)、(8)、(9)、(10)或(11)或式(35a)或(35b)的(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物反應(yīng)，其中(i)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，其中缺電子(雜)芳基如上文所定義，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(5)、(6)、(7)、(8)、(9)、(10)或(11)或式(35a)或(35b)的(雜)環(huán)炔與如本文所述的式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物或其優(yōu)選實(shí)施方案反應(yīng)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(5)、(6)、(7)、(8)、(9)、(10)或(11)或式(35a)或(35b)的(雜)環(huán)炔與如本文所述的式(3)的(雜)芳基1，3-偶極化合物或其優(yōu)選實(shí)施方案反應(yīng)。在本發(fā)明方法的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物中的A’為糖蛋白，優(yōu)選為抗體(如上文所詳細(xì)描述的)。在所述方法的一個(gè)甚至更優(yōu)選的實(shí)施方案中，A’為糖蛋白，優(yōu)選為抗體，且A為目標(biāo)分子D，優(yōu)選為生物活性化合物，更優(yōu)選A選自藥物和前藥。甚至更優(yōu)選地，A選自藥學(xué)活性化合物，特別是低分子量至中等分子量化合物(例如約200至約1500Da，優(yōu)選約300至約1000Da)，例如細(xì)胞毒素、抗病毒劑、抗菌劑、肽和寡核苷酸。細(xì)胞毒素的實(shí)例包括喜樹堿、阿霉素、正定霉素、紫杉烷、刺孢霉素、倍癌霉素、美登素、奧瑞他汀或吡咯并苯并二氮雜卓(PBD)。在本發(fā)明方法的該實(shí)施方案中，特別優(yōu)選A為毒素，優(yōu)選為選自以下的毒素：喜樹堿、阿霉素、正定霉素、紫杉烷、刺孢霉素、倍癌霉素、美登素、奧瑞他汀和吡咯并苯并二氮雜卓(PBD)，或者選自以下的毒素：秋水仙堿、長(zhǎng)春花生物堿、微管溶素、伊立替康、抑制肽、鵝膏蕈堿和deBouganin。速率常數(shù)krel本發(fā)明的環(huán)加成方法的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔反應(yīng)的反應(yīng)速率可通過(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基的性質(zhì)來調(diào)節(jié)。所述(雜)芳基(i)為缺電子(雜)芳基，和/或(ii)包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基(即在所述(雜)芳基上包含一個(gè)或多個(gè)吸電子取代基)，且這使得(a)本發(fā)明方法的反應(yīng)速率顯著增加和(b)與芳族環(huán)炔(例如二苯并成環(huán)的環(huán)辛炔)相比，(雜)芳基1，3-偶極化合物與式(1)的(雜)環(huán)炔的反應(yīng)具有高選擇性。當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為脂族(雜)環(huán)炔、優(yōu)選式(4)的脂族(雜)環(huán)炔及其優(yōu)選實(shí)施方案時(shí)，這些效果特別顯著。式(1)的(雜)環(huán)炔及其優(yōu)選實(shí)施方案(例如式(4)的(雜)環(huán)炔及其優(yōu)選實(shí)施方案)在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為1或更大，其中所述相對(duì)速率常數(shù)krel被定義為本發(fā)明方法(即式(1)的(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物(其包含缺電子(雜)芳基，和/或包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基)的環(huán)加成)的速率常數(shù)，除以相同的式(1)的(雜)環(huán)炔與用于所述方法的參比(雜)芳基1，3-偶極化合物(苯基疊氮化物)的環(huán)加成的速率常數(shù)。優(yōu)選地，如上文所定義的相對(duì)速率常數(shù)krel為1或更大。換言之，特定的(雜)環(huán)炔與特定的(雜)芳基1，3-偶極化合物(其中(i)所述(雜)芳基為缺電子(雜)芳基，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基)的環(huán)加成的速率常數(shù)，優(yōu)選等于或大于相同的(雜)環(huán)炔與所述特定(雜)芳基1，3-偶極化合物的參比(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成的速率常數(shù)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，krel大于1。優(yōu)選地，krel為1.3或更大，更優(yōu)選為1.4或更大，甚至更優(yōu)選1.5或更大，甚至更優(yōu)選1.7或更大，甚至更優(yōu)選2.0或更大，還甚至更優(yōu)選2.2或更大，且最優(yōu)選2.5或更大。表2(第3-4列)示出了本發(fā)明方法的一些實(shí)施例的速率常數(shù)k和相對(duì)速率常數(shù)krel，其中所述(雜)環(huán)炔如式(6b)所示，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3k)-(3r)或(3zh)、(3zi)、(3zj)或(3zk)所示。為了確定相對(duì)速率常數(shù)krel，(3k)-(3r)的參比(雜)芳基1，3-偶極化合物為苯基疊氮化物。所述相對(duì)速率常數(shù)krel通過以下方法來確定：將本發(fā)明的環(huán)加成(即(6b)與(雜)芳基1，3-偶極化合物(3k)-(3r)的環(huán)加成)的速率常數(shù)k除以(6b)與參比化合物苯基疊氮化物的環(huán)加成的速率常數(shù)。作為對(duì)比，還示出了一些比較實(shí)施例的速率常數(shù)k和相對(duì)速率常數(shù)krel，其中使用DIBAC的β-丙氨酸衍生物作為(雜)環(huán)炔。作為對(duì)比實(shí)施例，表2(條目1)還示出了式(6b)的(雜)環(huán)炔與脂族1，3-偶極化合物(芐基疊氮化物)的環(huán)加成的反應(yīng)速率k和相對(duì)反應(yīng)速率krel。作為對(duì)比實(shí)施例，表2(條目11)包括式(6b)的(雜)環(huán)炔與3s的環(huán)加成的反應(yīng)速率k和相對(duì)反應(yīng)速率krel。甲氧基取代基的間位-哈米特常數(shù)σm為0.12且對(duì)位-哈米特常數(shù)σp為-0.27(Hansch等人，Chem.Rev.1991，91，165-195，通過引用將其納入)。如上所述，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，由于σm為正值，在相對(duì)于疊氮基的間位上可存在甲氧基取代基。然而，由于σp為負(fù)值，在相對(duì)于疊氮基的對(duì)位上不可存在甲氧基取代基。在3s中，甲氧基取代基存在于間位上，因此實(shí)施例3s為對(duì)比實(shí)施例。表2：(雜)芳基1，3-偶極化合物(3k)-(3s)(苯基疊氮化物和芐基疊氮化物)與(雜)環(huán)炔(6b)及與DIBAC衍生物的環(huán)加成的速率常數(shù)k和相對(duì)速率常數(shù)krel。所有實(shí)施例均在THF/H2O＝9/1中進(jìn)行。與本發(fā)明方法的環(huán)加成相關(guān)的條目3-8清楚地示出了本發(fā)明方法(即(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物(其包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基)的環(huán)加成)的krel大于1。條目9和10也清楚地示出本發(fā)明方法(即(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物(其中所述(雜)芳基為缺電子(雜)芳基)的環(huán)加成)的krel大于1。這不同于通常的觀點(diǎn)，即采用富電子疊氮化物與缺電子炔烴進(jìn)行(雜)環(huán)炔與1，3-偶極子的1，3-環(huán)加成反應(yīng)最有效。與上文所述的對(duì)比實(shí)施例相關(guān)的條目1和11沒有顯示出krel的增加。另外，表2的條目1和2的對(duì)比表明，式(1)的(雜)環(huán)炔與(雜)芳族1，3-偶極化合物(苯基疊氮化物，條目2)的環(huán)加成的反應(yīng)速率比式(1)的(雜)環(huán)炔與脂族1，3-偶極化合物(芐基疊氮化物，條目1)的環(huán)加成的反應(yīng)速率更高。這個(gè)結(jié)果不同于現(xiàn)有技術(shù)中采用二苯并成環(huán)的環(huán)辛炔(例如DIBAC)所得到的結(jié)果，其中與脂族1，3-偶極子環(huán)加成的反應(yīng)速率比與芳族1，3-偶極子環(huán)加成的反應(yīng)速率更高。例如，由于脂族疊氮化物比芳族疊氮化物的反應(yīng)性更高，絕大多數(shù)典型的SPAAC應(yīng)用的環(huán)加成都涉及與脂族疊氮化物(例如芐基疊氮化物或疊氮乙酸)的反應(yīng)。例如，Hosoya等人，ScientificReports2011，1，文章編號(hào)82(doi：10.1038/srep00082)(通過引用納入本文)，已經(jīng)報(bào)道了芐基疊氮化物或苯基疊氮化物與Sondheimer二炔(二苯并成環(huán)的環(huán)辛炔)在MeOH中進(jìn)行的環(huán)加成分別具有0.06或0.0088M-1s-1的反應(yīng)速率常數(shù)，因此芐基疊氮化物快6.8倍。芐基疊氮化物或苯基疊氮化物與Sondheimer二炔(二苯并成環(huán)的環(huán)辛炔)在MeOH中的環(huán)加成反應(yīng)示于圖2中。疊氮化物與DIBAC反應(yīng)的對(duì)比表明，類似地，芐基疊氮化物比苯基疊氮化物的反應(yīng)速率高7.3×(參見表2中的條目1和2)。有趣的是，Hosoya等人最近還報(bào)道了Sondheimer二炔與芳族疊氮化物的反應(yīng)速率可通過采用烷基雙重鄰位取代苯基疊氮化物的芳基部分來增加，使得對(duì)o，o-二甲基、o，o-二乙基或o，o-二異丙基取代基而言的krel分別為36、43或甚至76。還注意到引入對(duì)位-給電子取代基(MeO)對(duì)反應(yīng)速率(×3.8)產(chǎn)生適當(dāng)?shù)姆e極效果，然而吸電子基團(tuán)(p-CF3)導(dǎo)致相反效果(反應(yīng)速率×0.9)。根據(jù)這些結(jié)果可以看出疊氮化物與環(huán)炔的最有效的環(huán)加成涉及富電子疊氮化物與缺電子炔烴。對(duì)缺電子疊氮化物與富電子炔烴的提高的反應(yīng)性的其他證明來自環(huán)辛-4-炔-1-醇(圖5，化合物22)的芐基氨基甲酸酯衍生物與疊氮化物的反應(yīng)速率常數(shù)。已證實(shí)，22與對(duì)硝基苯基疊氮化物(3m)和與芐基疊氮化物的環(huán)加成的競(jìng)爭(zhēng)試驗(yàn)表明幾乎只形成(＞95％)與3m的環(huán)加成。速率常數(shù)krel(DIBAC)當(dāng)將本發(fā)明方法的反應(yīng)速率(即，式(1)的(雜)環(huán)炔與(雜)芳族1，3-偶極化合物(其中(i)所述(雜)芳基為上文所定義的缺電子(雜)芳基，和/或(ii)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基)的環(huán)加成)與例如DIBAC(也稱為DBCO)和相同(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成的反應(yīng)速率相比較時(shí)，本發(fā)明方法的反應(yīng)速率更高。因此，在本發(fā)明方法的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1或更大。所述相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)被定義為將本發(fā)明方法(即，式(1)的(雜)環(huán)炔與(雜)芳基1，3-偶極化合物(其包含一個(gè)或多個(gè)σp和/或σm為正值的取代基)的環(huán)加成)的速率常數(shù)，除以DIBAC與相同(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成的速率常數(shù)。(雜)芳基1，3-偶極化合物(3k)-(3p)與(雜)環(huán)炔(6b)的環(huán)加成的相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)也示于表3中。為了確定krel(DIBAC)，在表3中還示出了芐基疊氮化物(條目1)和苯基疊氮化物(條目2)的環(huán)加成的速率常數(shù)k。表3；(雜)芳基1，3-偶極化合物(3k)-(3p)(苯基疊氮化物和芐基疊氮化物)與(雜)環(huán)炔(6b)及與DIBAC衍生物的環(huán)加成的速率常數(shù)k，以及krel(DIBAC)。所有實(shí)驗(yàn)均在THF/H2O＝9/1中進(jìn)行。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，krel(DIBAC)大于1。優(yōu)選地，krel(DIBAC)為1.5或更大，更優(yōu)選為2.0或更大，甚至更優(yōu)選為3.0或更大，甚至更優(yōu)選為5.0或更大，甚至更優(yōu)選為10.0或更大，還甚至更優(yōu)選為15.0或更大，且最優(yōu)選為20.0更大。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為1.0或更大且相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1.0或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為1.5或更大，更優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，還甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大。在本發(fā)明方法的再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為1.3或更大且相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1.5或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，還甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大。在本發(fā)明方法的再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為1.5更大且相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1.5或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大。在本發(fā)明方法的再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為1.7或更大且相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1.5或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，還有甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大。在本發(fā)明方法的再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為2.0或更大且相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1.5或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，還甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大。在本發(fā)明方法的再一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為2.2或更大且相對(duì)速率常數(shù)kre1(DIBAC)為1.5或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，還甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述方法的相對(duì)速率常數(shù)krel為2.5或更大且相對(duì)速率常數(shù)krel(DIBAC)為1.5或更大。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選krel(DIBAC)為2.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為3.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為5.0或更大，甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為10.0或更大，還甚至更優(yōu)選krel(DIBAC)為15.0或更大，且最優(yōu)選krel(DIBAC)為20.0或更大?？傊?，與二苯并成環(huán)的環(huán)辛炔不同，式(1)的(雜)環(huán)炔(特別是當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為上文所定義的脂族(雜)環(huán)炔時(shí)、更特別地是當(dāng)所述(雜)環(huán)炔為如式(4)所示時(shí))與(雜)芳基1，3-偶極化合物(例如，芳基疊氮化物或(雜)芳基疊氮化物)的反應(yīng)速率比與脂族1，3-偶極化合物(例如，脂族疊氮化物)的更高。此外，芳基疊氮化物或(雜)芳基疊氮化物與脂族環(huán)辛炔的反應(yīng)速率可通過在芳基部分上引入吸電子取代基來增大。此外，這些取代基的合理選擇使芳基疊氮化物或(雜)芳基疊氮化物與脂族環(huán)辛炔對(duì)與芳族環(huán)辛炔的選擇性反應(yīng)成為可能，選擇系數(shù)超過20。環(huán)加成產(chǎn)物本發(fā)明還涉及通過本發(fā)明的方法而得到的環(huán)加成產(chǎn)物，所述方法包括使(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔反應(yīng)的步驟，其中所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基(i)為上文所定義的缺電子(雜)芳基，和/或(ii)包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基，且其中所述(雜)環(huán)炔如式(1)所示。式(1)的(雜)環(huán)炔及其優(yōu)選的實(shí)施方案，以及所述(雜)芳基1，3-偶極化合物及其優(yōu)選的實(shí)施方案在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。因此，本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物。本發(fā)明涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文定義的式(12a)、(12b)、(12c)或(12d)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文定義的式(12e)、(12f)、(12g)或(12h)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文定義的式(13a)、(13b)、(13c)或(13d)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文定義的式(14a)、(14b)、(14c)或(14d)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文定義的式(14e)、(14f)、(14g)或(14h)所示。如上所述，本發(fā)明的方法特別地涉及包括(雜)芳基1，3-偶極化合物與(雜)環(huán)炔反應(yīng)的步驟的方法，其中所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為(雜)芳基疊氮化物或(雜)芳基重氮化合物；其中所述(雜)芳基1，3-偶極化合物的(雜)芳基(i)為上文所定義的缺電子(雜)芳基，和/或(ii)包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)位-哈米特取代基常數(shù)σp和/或間位-哈米特取代基常數(shù)σm為正值的取代基；且其中所述(雜)環(huán)炔為式(1)所示的脂族(雜)環(huán)辛炔或式(1)所示的脂族(雜)環(huán)壬炔。式(1)的脂族(雜)環(huán)辛炔和脂族(雜)環(huán)壬炔及其優(yōu)選的實(shí)施方案，以及所述(雜)芳基疊氮化物和(雜)芳基重氮化合物及其優(yōu)選的實(shí)施方案在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。因此，本發(fā)明特別地涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(12a)或(12d)所示。本發(fā)明還特別地涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(12e)或(12h)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(13a)或(13d)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(14a)或(14d)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(14e)或(14h)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(12i)或(12j)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(13e)所示。本發(fā)明還涉及可通過本發(fā)明的方法而得到的化合物，其中所述化合物如下文所定義的式(14i)或(14j)所示。本發(fā)明還涉及式(1)的(雜)環(huán)炔與式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成產(chǎn)物。本發(fā)明還涉及化合物，其中所述化合物如式(12a)、(12b)、(12c)或(12d)所示：其中：R1、n、B、B’、a、a’、a”、L、p、q、r和A如上文對(duì)(1)所定義的；L’、A’、T、R4、W、g、t、u和m如上文對(duì)(2)所定義的；R8選自氫、C1-C12烷基和(L″)iA″，其中L″如對(duì)L′所定義的，A″如對(duì)A′所定義的，i為0或1，其中L″獨(dú)立地選自L′和L″′且其中A″獨(dú)立地選自A′和A″′；R9選自C1-C12烷基和(L″′)wA″′，其中L″′如對(duì)L′所定義的，A″′如對(duì)A′所定義的，w為0或1，其中L″′獨(dú)立地選自L′和L″且其中A″′獨(dú)立地選自A′和A″；任選地，R8和R9可一起形成(雜)環(huán)烷基，所述(雜)環(huán)烷基任選地被取代；且R15選自氫、C1-C24亞烷基、C2-C24亞烯基、C3-C24亞環(huán)烷基、C2-C24亞(雜)芳基、C3-C24烷基亞(雜)芳基和C3-C24(雜)芳基亞烷基，其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被取代，且其中所述亞烷基、亞烯基、亞環(huán)烷基、亞(雜)芳基、烷基亞(雜)芳基和(雜)芳基亞烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自O(shè)、S和N的雜原子中斷。本發(fā)明特別地涉及如上文所定義的式(12a)或(12d)的化合物。在本發(fā)明的方法中，當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為重氮化合物時(shí)，當(dāng)R15為氫時(shí)，可形成化合物(12d)的異構(gòu)體(12i)。因此本發(fā)明還涉及式(12i)所示的化合物：其中：R1、n、B、B’、a、a’、a”、L、p、q、r和A如上文對(duì)(1)所定義的；L’、A’、T、R4、W、g、t、u和m如上文對(duì)(2)所定義的；且R15為H。在式(12a)、(12b)、(12c)或(12d)的化合物或式(12i)的化合物中，優(yōu)選a+a’+a”為4。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a和a’為1且a”為2。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a和a’為2且a”為0。本發(fā)明特別地涉及式(12a)、(12d)或(12i)的化合物，其中a、a’和a”獨(dú)立地為1、2、3或4，條件是a+a’+a”＝4；且n為0-8；或其中a、a’和a”獨(dú)立地為1、2、3、4或5，條件是a+a’+a”＝5；且n為0-10。在本發(fā)明方法的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)環(huán)炔為式(4)所示的脂族(雜)環(huán)炔。因此，本發(fā)明還涉及式(4)的(雜)環(huán)炔與式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成產(chǎn)物。本發(fā)明還涉及化合物，其中所述化合物如式(12e)、(12f)、(12g)或(12h)所示：其中：a、a’、a”、n、R1、R10、B、B’、p、r、L、A、q、D、E和Q如上文對(duì)(4)所定義的；L’、A’、T、R4、W、g、t、u和m如上文對(duì)(2)所定義的；R8、R9如上文對(duì)(12b)所定義的；且R15如上文對(duì)(12d)所定義的。本發(fā)明特別地涉及如上文所定義的式(12e)或(12h)的化合物。在本發(fā)明的方法中，當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為重氮化合物時(shí)，當(dāng)R15為氫時(shí)，可形成化合物(12h)的異構(gòu)體(12j)。因此，本發(fā)明還涉及式(12j)的化合物：其中：a、a’、a”、n、R1、R10、B、B’、p、r、L、A、q、D、E和Q如上文對(duì)(4)所定義的；L’、A’、T、R4、W、g、t、u和m如上文對(duì)(2)所定義的；且R15為H。本發(fā)明特別地涉及式(12e)或(12h)或(12j)的化合物，其中a、a’和a”獨(dú)立地為0、1或2，條件是a+a’+a”＝2；且n為0-4；或其中a、a’和a”獨(dú)立地為0、1、2或3，條件是a+a’+a”＝3；且n為0-6。上面對(duì)式(1)的(雜)環(huán)炔所描述的R1、L’和A’的優(yōu)選實(shí)施方案也適用于式(4)的(雜)環(huán)炔的R1、L和A的優(yōu)選實(shí)施方案。還優(yōu)選r為1或2。在式(4)的脂族(雜)環(huán)炔中，a+a’+a”為2、3、4、5或5。優(yōu)選地，a+a’+a”為2，即所述(雜)環(huán)炔優(yōu)選為(雜)環(huán)辛炔。在一個(gè)實(shí)施方案中，還優(yōu)選a為0，a’為0且a”為2。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選B為O且B’為O。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為0，a’為0且a”為2，B為O且B’為O，且甚至更優(yōu)選在a”-C原子之一上存在[(L)p-(A)r]。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為0，a’為0且a”為2，B為C(R3)2且B’為C(R3)2，且在a”-C原子之一上存在[(L)p-(A)r]。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a為1，a’為1且a”為0。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選B為C(R3)[(L)p-(A)r]且B’為C(R3)2，或B為N[(L)p-(A)r]且B’為C(R3)2。優(yōu)選地，n為0、1、2、3、4、5、6、7或8，更優(yōu)選n為0、1、2、3、4、5或6，甚至更優(yōu)選n為0、1、2、3或4，且最優(yōu)選n為0、1或2。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選R10為氫或C1-C24烷基，更優(yōu)選氫或C1-C12烷基，甚至更優(yōu)選氫或C1-C6烷基，更優(yōu)選氫或C1-C4烷基。最優(yōu)選地，R10為氫。本發(fā)明還涉及式(5)的(雜)環(huán)炔與式(2)的(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成產(chǎn)物。因此，本發(fā)明還涉及權(quán)利要求12或權(quán)利要求13的化合物，其中所述化合物如式(13a)、(13b)、(13c)或(13d)所示：其中：L、p、q、r和A如上文對(duì)(1)所定義的；L’、A’、T、R4、W、g、t、u和m如上文對(duì)(2)所定義的；R1、n、R6和R7如上文對(duì)(5)所定義的；且R8、R9和R15如上文所定義。在本發(fā)明的方法中，當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為重氮化合物時(shí)，當(dāng)R15為氫時(shí)，可形成化合物(13d)的異構(gòu)體(13e)。因此，本發(fā)明還涉及式(13e)的化合物：其中：L、p、q、r和A如上文對(duì)(1)所定義的；L’、A’、T、R4、W、g、t、u和m如上文對(duì)(2)所定義的；R1、n、R6和R7如上文對(duì)(5)所定義的；且R15為H。在式(13a)、(13b)、(13c)、(13d)或(13e)的化合物中，優(yōu)選n為0，且R6和R7為H。最優(yōu)選地，n為0，且R6和R7為H。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(L)p-(A)r為(L)p-(Q)，其中Q為上文所定義的官能團(tuán)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，(L)p-(A)r為OH，即p為0且A為Q，其中Q為OH。本發(fā)明特別地涉及式(13a)、(13d)或(13e)的化合物，如上文所定義。優(yōu)選地，n為0且R6和R7均為H。本發(fā)明還涉及式(1)的(雜)環(huán)炔與式(3)的(雜)芳基1，3-偶極化合物的環(huán)加成產(chǎn)物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3a)所示。本發(fā)明還涉及權(quán)利要求12-14中任一項(xiàng)的化合物，其中所述化合物如式(14a)、(14b)、(14c)或(14d)所示：其中：R1、n、B、B’、a、a’、a”、L、p、q、r和A如上文所定義；L’、A’、R4、W、g、t、u和m如上文所定義；G和s如上文所定義；且R8、R9和R15如上文所定義。在式(14a)、(14b)、(14c)或(14d)的化合物中，優(yōu)選a+a’+a”為4。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，a和a’為1且a”為2。在本發(fā)明的方法中，當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為重氮化合物時(shí)，當(dāng)R15為氫時(shí)，可形成化合物(14d)的異構(gòu)體(14i)。因此，本發(fā)明還涉及式(14i)的化合物：其中：R1、n、B、B’、a、a’、a”、L、p、q、r、A、L’、A’、R4、W、g、t、u、m、G和s如上文對(duì)(14d)所定義的；且R15為H。本發(fā)明特別地涉及式(14a)、(14d)或(14i)的化合物，其中a、a’和a”獨(dú)立地為1、2、3或4，條件是a+a’+a”＝4；且n為0-8；或其中a、a’和a”獨(dú)立地為1、2、3、4或5，條件是a+a’+a”＝5；且n為0-10。所述(雜)芳基的優(yōu)選實(shí)施方案在上文進(jìn)行了詳細(xì)描述。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述雜芳基選自苯基、吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡嗪基、吡二嗪基、吡咯基、吡咯鎓基、呋喃基、噻吩基、二唑基、喹啉基、咪唑基、噁唑基和噁唑鎓基，更優(yōu)選選自苯基、吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡咯基、呋喃基和噻吩基，所有基團(tuán)均任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。最優(yōu)選地，所述(雜)芳基選自苯基、吡啶基和吡啶鎓基，所有基團(tuán)均任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。R4優(yōu)選為鹵素(F、Cl、Br或I)，更優(yōu)選R4為F、Cl或Br，最優(yōu)選為F或Cl。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(4)的脂族(雜)環(huán)炔與式(3a)、(3b)、(3c)、(3d)、(3e)或(3f)的(雜)芳基1，3-偶極化合物的1，3-環(huán)加成產(chǎn)物。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述(雜)芳基1，3-偶極化合物如式(3a)所示。因此，本發(fā)明還涉及式(14e)、(14f)、(14g)或(14h)的化合物：其中：a、a’、a”、n、R1、R10、B、B’、p、r、L、A、q、D、E和Q如上文對(duì)(4)所定義的；R4、m、W、g、L’、t、A’、u和s如上文對(duì)(3a)所定義的；且R8、R9和R15如上文所定義。在本發(fā)明的方法中，當(dāng)所述(雜)芳基1，3-偶極化合物為重氮化合物時(shí)，當(dāng)R15為氫時(shí)，可形成化合物(14h)的異構(gòu)體(14j)。因此，本發(fā)明還涉及式(14j)的化合物：其中：a、a’、a”、n、R1、R10、B、B’、p、r、L、A、q、D、E和Q如上文對(duì)(4)所定義的；R4、m、W、g、L’、t、A’、u和s如上文對(duì)(3a)所定義的；且R15為氫。在該實(shí)施方案中，優(yōu)選a+a’+a”為2，即，優(yōu)選所述(雜)環(huán)炔為(雜)環(huán)辛炔。還優(yōu)選a為0，a”為1且a’為1。還優(yōu)選所述(雜)芳基為苯基、吡啶基或吡啶鎓基。在該實(shí)施方案中，還優(yōu)選R10為氫或C1-C24烷基，更優(yōu)選氫或C1-C12烷基，甚至更優(yōu)選氫或C1-C6烷基，更優(yōu)選氫或C1-C4烷基。最優(yōu)選地，R10為氫。本發(fā)明特別地涉及式(14e)、(14h)或(14j)的化合物，其中a、a’和a”獨(dú)立地為0、1或2，條件是a+a’+a”＝2；且n為0-4；或其中a、a’和a”獨(dú)立地為1、2或3，條件是a+a’+a”＝3；且n為0-10。在式(12a)、(12b)、(12c)、(12d)、(12e)、(12f)、(12g)、(12h)、(13a)、(13b)、(13c)、(13d)、(14a)、(14b)、(14c)、(14d)、(14e)和(14f)、(14g)的環(huán)加成物中，以及在式(14h)、(12i)、(12j)、(13e)、(14i)、(14j)的環(huán)加成物中，(雜)芳基T可為任何(雜)芳基。T的優(yōu)選實(shí)施方案在上文進(jìn)行了描述。更優(yōu)選地，(雜)芳基T選自苯基、吡啶基、吡啶輸基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡嗪基、吡二嗪基、吡咯基、吡咯鎓基、呋喃基、噻吩基、二唑基、喹啉基、咪唑基、噁唑基和噁唑鎓基，更優(yōu)選選自苯基、吡啶基、吡啶鎓基、嘧啶基、嘧啶鎓基、吡咯基、呋喃基和噻吩基，所有基團(tuán)均任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。更優(yōu)選地，所述(雜)芳基選自苯基、吡啶基和吡啶鎓基，所有基團(tuán)均任選地被一個(gè)或多個(gè)如上文所定義的取代基取代。在式(12a)、(12b)、(12c)、(12d)、(12e)、(12f)、(12g)、(12h)、(13a)、(13b)、(13c)、(13d)、(14a)、(14b)、(14c)、(14d)、(14e)和(14f)、(14g)的環(huán)加成物中，以及在式(14h)、(12i)、(12j)、(13e)、(14i)、(14j)的環(huán)加成物中，R4，如果存在，則為如上文所定義的。更優(yōu)選地，所述環(huán)加成物中(雜)芳基的(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：-OR11、鹵素(-F、-Cl、-Br、-I，更優(yōu)選-F、-Cl、-I)、C1-C6鹵代烷基(優(yōu)選C1-C6氯代烷基或C1-C6氟代烷基，例如-CF3、-C2F5、-CCl3、-C2Cl5)、-CN、-NC、-NO2、-NCO、-OCN、-NCS、-SCN、-N+(R11)3、-C(O)N(R11)2、-C(O)R11、-C(O)XR11、-S(O)R11、-S(O)2R11、-S(O)OR11、-S(O)2OR11、-S(O)N(R11)2、-S(O)2N(R11)2、-OS(O)2R11、-OC(O)R11、-OC(O)OR11、-OC(O)N(R11)2，其中R11及R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。甚至更優(yōu)選地，所述環(huán)加成物包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：OR11、鹵素(優(yōu)選-F、-Cl)、-NO2、-CN、-N+(R11)3、-C(O)R11、-C(O)OR11、-C(O)N(R11)2、-S(O)R11和-S(O)2R11，其中R11及R11的優(yōu)選實(shí)施方案如上文所定義。最優(yōu)選地，所述(雜)芳基包含一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的取代基：OR11、鹵素(優(yōu)選-F、-Cl)、-NO2、-CN、-N+(R11)3、-C(O)R11、-C(O)OR11、-C(O)N(R11)2、-S(O)R11和-S(O)2R11，其中R11為氫或C1-C12烷基。優(yōu)選地，當(dāng)所述(雜)芳基為上文所定義的缺電子(雜)芳基時(shí)，m為0、1、2、3或4，優(yōu)選0、1或2，最優(yōu)選0。當(dāng)所述(雜)芳基為富電子時(shí)，m優(yōu)選為1、2、3或4。本領(lǐng)域技術(shù)人員將明白，在本發(fā)明的方法中，環(huán)加成產(chǎn)物中的m和R4對(duì)應(yīng)于與(雜)環(huán)炔反應(yīng)的(雜)芳基1，3-偶極化合物中的m和R4。因此，環(huán)加成物中m和R4的優(yōu)選實(shí)施方案對(duì)應(yīng)于上文詳細(xì)描述的(雜)芳基1，3-偶極化合物的優(yōu)選實(shí)施方案。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，式(12a)、(12b)、(12c)、(12d)、(12e)、(12f)、(12g)、(12h)、(13a)、(13b)、(13c)、(13d)、(14a)、(14b)、(14c)、(14d)、(14e)和(14f)、(14g)的環(huán)加成物以及式(14h)、(12i)、(12j)、(13e)、(14i)、(14j)的環(huán)加成物中的(雜)芳基部分為2，5-二氯苯基或2，5-二氟苯基。實(shí)施例疊氮化物的合成實(shí)施例1.苯基疊氮化物(疊氮苯)的合成根據(jù)文獻(xiàn)方法：S.W.Kwok等人，Org.Synth.2010，12，4217(通過引用將其納入)來制備苯基疊氮化物。實(shí)施例2.1-疊氮基-2，6-二氯苯(3k)的合成根據(jù)專利WO2007/140174A2，2007(通過引用將其納入)中的方法來合成。實(shí)施例3.1-疊氮基-2，6-二氟苯(3l)的合成根據(jù)文獻(xiàn)方法：L.Jin等人，Angew.Chem.Int.Ed.，2013，52，5309(通過引用將其納入)來合成。實(shí)施例4.1-疊氮基-4-硝基苯(3m)的合成根據(jù)文獻(xiàn)方法：S.W.Kwok等人，Org.Synth.2010，12，4217(通過引用將其納入)來合成。實(shí)施例5.1-疊氮基-2，3，5，6-四氟-4-(正丙基甲酰氨基)苯(3n)的合成，圖4(底部)中所示向4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲酸N-琥珀酰亞胺基酯(19，250mg，0.753mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入nPrNH2(620mL，7.53mmol)。將該混合物在室溫下攪拌15分鐘。將過量的nPrNH2蒸出，將殘余物溶于DCM中并用H2O洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/戊烷，1∶4)純化，以得到產(chǎn)物(173mg，83％)，其為白色固體。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ5.95(bs，1H)，3.46-3.41(m，2H)，1.69-1.60(m，2H)，0.99(t，3H)ppm。實(shí)施例6.1-疊氮基-2-硝基-4-(正丙基甲酰氨基)苯(3o)的合成，圖3中所示在0℃下，向4-氨基-3-硝基苯甲酸(15，4.55g，25.0mmol)于HOAc(50mL)和濃H2SO4(50mL)的混合物中的溶液中緩慢地加入NaNO2(1.80g，26mmol)于濃H2SO4(25mL)中的溶液。在0℃下攪拌1.5h之后，將混合物倒入冰(100g)中并過濾。將濾液加入NaN3(115mmol)于H2O(25mL)中的溶液中。將疊氮化物沉淀、過濾并干燥，以得到黃色固體(16，5.10g，98％)。在0℃下，向疊氮化物(16，250mg，1.20mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入ClCO2iBu(171mL，1.32mmol)和NEt3(184mL，1.32mmol)。將混合物在0℃下攪拌0.5h。在0℃下滴加nPrNH2(148mL，1.80mmol)于THF(2mL)中的溶液。在0℃下攪拌1h之后，將混合物用H2O(20mL)猝滅，并用EtOAc(3×30mL)萃取。將有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/DCM，1∶7)純化，以得到丙基酰胺(3p，180mg，60％)，其為淡黃色固體。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ8.30(s，1H)，8.08(d，1H)，7.40(d，1H)，6.35(bs，1H)，3.47-3.41(m，2H)，1.71-1.62(m，2H)，1.02(t，3H)ppm。實(shí)施例7.1-疊氮基-2，6-二氟-4-(正丙基甲酰氨基)苯(3p)的合成，圖4(上部)所示首先，根據(jù)文獻(xiàn)方法：Bléger等人，J.Am.Chem.Soc.2012，134，20597來制備4-氨基-3，5-二氟苯甲酸(17)。然后，在0℃下，向4-氨基-3，5-二氟苯甲酸(17，1g，4.77mmol)于TFA(25mL)中的溶液中緩慢地加入NaNO2(658mg，9.54mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。按小份加入NaN3(3.10g，47.7mmol)以保持溫度低于5℃。加入Et2O(20mL)并將溶液在室溫下攪拌2h。將混合物用H2O(30mL)猝滅，并用Et2O萃取。將有機(jī)層用飽和NaCl洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。產(chǎn)物18不經(jīng)進(jìn)一步純化而用于下一步驟中。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ7.70-7.63(m，2H)ppm。接著，在0℃下，向4-疊氮基-3，5-二氟苯甲酸(18，250mg，1.26mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入ClCO2iBu(179mL，1.38mmol)和NEt3(192mL，1.38mmol)。將混合物在0℃下攪拌0.5h。在0℃下滴加nPrNH2(155mL，1.88mmol)于THF(2mL)中的溶液。在0℃下攪拌1h之后，將混合物用H2O(20mL)猝滅，并用EtOAc(3×30mL)萃取。將有機(jī)層用飽和NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/庚烷，1∶1)純化，以得到產(chǎn)物(230mg，76％)，其為白色固體。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ7.38-7.32(m，2H)，6.10(bs，1H)，3.43-3.38(m，2H)，1.68-1.59(m，2H)，0.99(t，3H)ppm。實(shí)施例8.4-疊氮基-1-甲基吡啶(3q)的合成根據(jù)文獻(xiàn)方法：Z.Yia和Q.Zhu，Bioorg.&Med.Chem.Lett.2010，20，6222(通過引用將其納入)來合成。實(shí)施例9.4-疊氮基-1-甲基吡啶鎓碘化物(3r)根據(jù)文獻(xiàn)方法：Z.Yia和Q.Zhu，Bioorg.&Med.Chem.Lett.2010，20，6222(通過引用將其納入)來合成。實(shí)施例9-1.3-疊氮基吡啶(3zh)的合成向3-氨基吡啶(250mg，2.66mmol)于MeOH(15mL)中的溶液中加入CuSO4(33mg，0.13mmol)和1H-咪唑-1-磺?；B氮化物、HCl鹽(1.19g，5.31mmol)，并將所得懸浮液在室溫下攪拌2天。將反應(yīng)物用EtOAc(30mL)稀釋并用H2O∶鹽水1∶1(15mL)洗滌。將有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，并真空濃縮。經(jīng)快速色譜法(15∶1-2∶1戊烷(pent)∶EtOAc)純化，得到3zh(44mg，0.37mmol，14％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ8.41-8.36(m，2H)，7.40-7.29(m，2H)ppm。實(shí)施例9-2.2-疊氮基-4，6-二氯三聚氰酸(3zi)的合成根據(jù)Bucher，G.；Siegler，F(xiàn).；Wolff，J.J.；ChemCommun，1999，2113-2114來制備。向于分液漏斗中的三氯三聚氰酸(0.5g，2.7mmol)于丙酮(5mL)中的溶液中加入疊氮化鈉(160mg，2.5mmol)于水(2mL)中的溶液。將混合物振蕩5分鐘，隨后分層。將有機(jī)層部分地濃縮，隨后加入DCM(5mL)和水(5mL)。將水層用DCM(2×5mL)萃取，并將合并的有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥、過濾并濃縮。經(jīng)快速色譜法(戊烷∶DCM100∶0→1∶2)純化，得到3zi(120mg，0.63mmol，23％)。13C-NMR(100MHz，CDCl3)：δ172.6，171.4ppm。實(shí)施例9-3.5-疊氮基呋喃-2-甲酸甲酯(3zj)的合成將5-硝基呋喃-2-甲酸甲酯(250mg，1.46mmol)溶于DMSO(6mL)中，隨后加入NaN3(238mg，3.65mmol)。攪拌過夜之后，加入額外的NaN3(238mg，3.65mmol)，并將混合物再次攪拌過夜。隨后，加入DCM(20mL)和水(20mL)，并用DCM(1×10mL)萃取水層。將有機(jī)層用水(3x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。經(jīng)快速色譜法(戊烷∶EtOAc100∶0→4∶1)純化，得到產(chǎn)物(155mg，0.93mmol，64％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.17(d，J＝3.6Hz，1H)，5.89(d，J＝3.6Hz，1H)，3.88(s，3H)ppm。實(shí)施例9-4.3-疊氮基-7-(甲基羧基甲氧基)香豆素(3zk)的合成根據(jù)文獻(xiàn)方法(Sivakumar，K.；Xie，F(xiàn).；Cash，B.M.；Long，S.；Barnhill，H.N.；Wang，Q.Org.Lett.2004，6，4603)來制備3-疊氮基-7-羥基-香豆素。將3-疊氮基-7-羥基-香豆素(190mg，0.93mmol)和K2CO3(190mg，1.12mmol)懸浮于DMF(5mL)中并攪拌10分鐘，隨后加入溴乙酸甲酯(81μL，0.93mmol)。將混合物加熱至40℃保持3h，隨后冷卻至室溫并加入水(15mL)和EtOAc(15mL)。水層用EtOAc(3×15mL)萃取水層，經(jīng)合并的有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。經(jīng)快速色譜法(庚烷∶EtOAc100∶0→5∶1)純化，得到3zk(95mg，0.36mmol，40％)。1H-NMR(300MHz，CDCl3/CD3OD)：δ7.39(d，J＝8.8hz，1H)，7.30(s，1H)，6.91-6.88(m，1H)，6.83-6.82(m，1H)，4.73(s，2H)，3.76(s，3H)ppm。實(shí)施例9-5.4-疊氮基-N-芐基-3，5-二氟苯甲酰胺(3zl)的合成將4-疊氮基-3，5-二氟苯甲酸2，5-二氧代吡咯烷-1-基酯(77mg，0.259mmol)溶于DCM(3mL)中，并且加入芐胺(34μL，0.312mmol)和Et3N(54μL，0.389mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌4天，隨后在減壓下除去溶劑?？焖偕V法(4∶1-1∶1戊烷∶EtOAC)得到3zl(61mg，0.211mmol，82％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.30-7.17(m，7H)，6.79(brs，1H)，4.45(d，J＝5.6Hz，2H)ppm.LRMS(ESI+)C14H10N4O(M+H+)的計(jì)算值：289.09，實(shí)測(cè)值：289.26。環(huán)辛炔衍生物的合成實(shí)施例10.環(huán)辛炔衍生物22的合成根據(jù)文獻(xiàn)方法：J.L.Jessen等人，Chem.Ber.，1986，119，297(通過引用將其納入)來制備環(huán)辛-4-炔-1-醇20。向20(14mg，0.113mmol)于DCM(3mL)中的溶液中加入吡啶(18mL，0.226mmol)和4-硝基苯氧基氯甲酸酯(28mg，0.141mmol)。將混合物在室溫下攪拌2h，并用飽和NH4Cl猝滅。水層用DCM萃取。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/庚烷，4∶1)純化，得到碳酸酯21(16mg，49％)。向碳酸酯(21，16mg，0.055mmol)于DCM(2mL)中的溶液中加入nPrNH2(45mL，0.553mmol)。在室溫下攪拌1h之后，將溶劑蒸出。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/戊烷，1∶5)純化，得到產(chǎn)物22，其為無色油狀物(7mg，61％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ4.74-4.60(m，2H)，3.16-3.11(m，2H)，2.52-2.44(m，1H)，2.22-1.95(m，8H)，1.88-1.81(m，1H)，1.56-1.47(m，2H)，0.92(t，3H)ppm。實(shí)施例11.環(huán)辛炔衍生物24的合成向琥珀酰亞胺23(20mg，0.052mmol)(從JenaBioscience市售可得)于DCM(1mL)中的溶液中加入n-PrNH2(43mL，0.52mmol)。在室溫下攪拌0.5h之后，加入DCM(10mL)，并將混合物用H2O(1mL)洗滌。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/庚烷，4∶1)純化，得到產(chǎn)物24(14mg，82％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ6.41(bs，1H)，5.55(bs，1H)，3.56-3.19(m，4H)，2.48-2.22(m，4H)，2.17(t，2H)，2.11-1.82(m，4H)，1.71-1.63(m，3H)，1.60-1.44(m，5H)，1.39-1.32(m，2H)，0.92(t，3H)ppm。通過IR的動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)的一般程序IR實(shí)驗(yàn)向疊氮化物(1mL，20mM)于THF和H2O的混合物(9∶1)中的溶液中加入環(huán)辛炔(1mL，26mM)于THF和H2O的混合物(9∶1)中的溶液。反應(yīng)后，將溶液轉(zhuǎn)移至IR-池(CaF2)中，并以預(yù)設(shè)的時(shí)間間隔采集特定波長(zhǎng)區(qū)域(2300-1900cm-1)下的IR-光譜。該反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)通過測(cè)量由疊氮化物所引起的信號(hào)積分的降低來確定。從如此獲得的轉(zhuǎn)化率曲線中，根據(jù)以下公式計(jì)算二級(jí)速率曲線：其中k＝2級(jí)速率常數(shù)(M-1s-1)，t＝反應(yīng)時(shí)間(s)，[A]0＝底物A的初始濃度(mmol/mL)，[B]0＝底物B的初始濃度(mmol/mL)和[P]＝產(chǎn)物的濃度(mmol/mL)。所有實(shí)驗(yàn)均平行進(jìn)行兩次。實(shí)施例12.二疊氮化物25的合成在0℃下，向16(416mg，2.00mmol)于THF(10mL)中的溶液中加入ClCO2i-Bu(285μL，2.20mmol)和NEt3(306μL，2.20mmol)。將混合物在0℃下攪拌0.5h。在0℃下，滴加H2N-(POE)3-N3(523mg，3.00mmol)于THF(2mL)中的溶液。在0℃下攪拌1h之后，將混合物用H2O(20mL)猝滅，并用DCM(3×30mL)萃取。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(EtOAc/DCM，1∶3)純化，得到25(540mg，74％)，其為黃色粘性油狀物。Rf0.20(EtOAc/DCM，1∶3)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ8.35(d，J＝2.0Hz，1H)，8.09(dd，J＝8.5，2.1Hz，1H)，7.39(d，J＝8.4Hz，1H)，7.27-7.26(m，1H)，3.73-3.68(m，10H)，3.41-3.38(m，2H)ppm。13CNMR(CDCl3，125MHz)：δ164.4，140.4，137.7，132.8，131.4，124.9，121.0，70.6，70.4，70.4，70.2，69.7，69.5，50.7，40.2。HRMS(ESI+)m/zC13H16N8NaO5(M+Na)+的計(jì)算值：387.1141，實(shí)測(cè)值：387.1137。實(shí)施例13.化合物26b的合成向DIBAC-NH226a(100mg，0.362mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入Ac2O(51μL，0.543mmol)、NEt3(101μL，0.724mmol)和催化量的DMAP。在室溫下攪拌16h之后，加入水(5mL)，并且將混合物用DCM(3×10mL)萃取。將有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過濾并真空濃縮。將殘余物通過柱色譜法(MeOH/DCM，1∶19)純化，得到26b(106mg，92％)，其為白色固體。Rf0.32(MeOH/DCM，1∶19)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ7.68(d，J＝7.5Hz，1H)，7.42-7.26(m，7H)，6.07-6.02(m，1H)，5.14(d，J＝13.9Hz，1H)，3.70(d，J＝13.9Hz，1H)，3.38-3.30(m，1H)，3.24-3.16(m，1H)，2.46(ddd，J＝16.6，7.7，4.0Hz，1H)，1.96(ddd，J＝16.6，7.3，3.7Hz，1H)，1.81(s，3H)ppm。13CNMR(CDCl3，125MHz)：δ172.5，170.0，151.2，148.1，132.2，129.2，128.7，128.6，128.5，128.0，127.4，125.7，123.1，122.7，114.9，107.9，55.7，35.4，34.9，23.3。HRMS(ESI+)m/zC20H18N2NaO2(M+Na)+的計(jì)算值：341.1266，實(shí)測(cè)值：341.1275。實(shí)施例14.二疊氮化物25與6b和26b的反應(yīng)向BCN乙醇6b(28mg，0.188mmol)和DIBAC衍生物26b(60mg，0.188mmol)于THF(2mL)中的溶液中加入二疊氮化物25(34mg，0.094mmol)于THF(1mL)中的溶液。當(dāng)TLC分析表明完全轉(zhuǎn)化時(shí)，將混合物在室溫下攪拌3h。粗反應(yīng)混合物的LCQ分析表明形成三種新產(chǎn)物，具有相應(yīng)于化合物26(M+H+＝833)的主峰以及指示25與6b(M+H+＝665)的雙重SPAAC和25與26b(M+H+＝1001)的雙重SPAAC的次峰。將反應(yīng)混合物濃縮，并通過兩次連續(xù)的硅膠柱色譜法(柱1：MeOH/DCM/PhCH31∶10∶4，柱2：MeOH/DCM/PhCH31∶8∶1)純化，從而分離出26，其為純化合物(65mg，3％)。RF0.26(MeOH/DCM/PhCH31∶8∶1)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ8.79，8.77，8.72(3×d，J＝1.9Hz，1H)，8.37-8.33(m，1H)，8.19-8.15(m，1H)，7.65-7.23(m，8H)，7.16-7.10(m，1H)，6.36-6.27(m，1H)，6.11-5.97(m，1H)，4.74-3.95(m，4H)，3.83-3.47(m，10H)，3.29-3.13(m，2H)，3.01-2.89(m，1H)，2.78-2.48(m，2H)，2.36-2.26(m，1H)，2.19-1.73(m，8H)，1.65-1.52(m，2H)，1.26-0.98(m，3H)ppm。13CNMR(CDCl3，125MHz)：δ171.7，171.3，170.5，170.4，164.4，164.1，145.7，145.6，145.3，145.2，144.9，144.8，143.3，141.2，139.8，138.0，137.7，136.3，136.2，136.1，135.5，135.2，133.4，133.3，133.2，133.1，132.8，132.1，131.9，131.8，131.7，131.5，131.3，131.0，130.5，130.4，130.3，130.1，129.9，129.8，129.7，129.5，128.9，128.7，128.6，128.4，127.9，127.7，127.3，124.8，124.7，124.6，70.6，70.4，70.3，70.1，69.8，69.5，69.3，68.4，68.3，59.7，52.8，51.6，49.1，48.5，40.7，40.5，35.0，34.9，34.2，34.0，26.2，26.1，23.6，23.5，23.4，23.3，23.0，22.8，22.7，22.3，22.2，21.6，21.5，20.1，20.0，19.9。HRMS(ESI+)m/zC43H49N10O8(M+H)+的計(jì)算值：833.3735，實(shí)測(cè)值：833.3739。除26之外，還分離出雙-BCN(6b)和雙-DIBAC(26b)加合物。雙-BCN加合物(26+2×6b，4.0mg，6％)：Rf0.19(MeOH/DCM/PhCH31∶8∶1)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ8.72(dd，J＝1.8，1.1Hz，1H)，8.41(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H)，8.05-8.01(m，1H)，7.52(d，J＝8.2Hz，1H)，4.47-4.39(m，2H)，3.94(t，J＝5.4Hz，2H)，3.81-3.53(m，12H)，3.26(ddd，J＝15.8，7.6，3.2Hz，1H)，3.07(ddd，J＝15.7，7.9，3.3Hz，1H)，3.00-2.93(m，2H)，2.85-2.66(m，3H)，2.60(ddd，J＝16.1，10.3，3.2Hz)，2.36-2.12(m，4H)，1.58-1.47(m，3H)，1.25-0.98(m，7H)ppm。HRMS(ESI+)m/zC33H45N8O7(M+H)+的計(jì)算值：665.3411，實(shí)測(cè)值：665.3439。雙-DIBAC加合物(26+2×26b，5mg，5％)：Rf0.31(MeOH/DCM/PhCH31∶8∶1)。1HNMR(CDCl3，400MHz)：δ8.77-8.64(m，1H)，8.34-8.11(m，1H)，8.09(d，J＝1.4Hz，1H)，7.92-7.83(m，1H)，7.67-6.92(m，16H)，6.45-5.89(m，2H)，5.56-5.51，5.03-4.90(2×m，1H)，4.76-4.65(m，2H)，4.58-4.26(m，3H)，4.18-3.92(m，1H)，3.82-3.08(m，12H)，2.82-2.36(m，1H)，2.12-1.73(m，8H)，1.33-1.25(m，2H)ppm。HRMS(ESI+)m/zC53H52N12NaO9(M+Na)+的計(jì)算值：1023.3878，實(shí)測(cè)值：1023.3856。實(shí)施例15.2-疊氮基半乳糖1-磷酸酯衍生物(27)的合成根據(jù)Linhardt等人，J.Org.Chem.2012，77，1449-1456中對(duì)D-葡糖胺所描述的方法，從D-半乳糖胺制備化合物27。1H-NMR(300MHz，CD3OD)：δ5.69(dd，J＝7.2，3.3Hz，1H)，5.43-5.42(m，1H)，5.35(dd，J＝11.1，3.3Hz，1H)，4.53(t，J＝7.2Hz，1H)，4.21-4.13(m，1H)，4.07-4.00(m，1H)，3.82(dt，J＝10.8，2.7Hz，1H)，2.12(s，3H)，2.00(s，3H)，1.99(s，3H)ppm。LRMS(ESI-)C12H17N3O11P(M-H+)的計(jì)算值：410.06，實(shí)測(cè)值：410.00。實(shí)施例16.2-疊氮基半乳糖UDP衍生物(28)的合成根據(jù)Baisch等人Bioorg.Med.Chem.，1997，5，383-391，將化合物27連接至UMP。因此，將D-尿苷-5’-單磷酸二鈉鹽(1.49g，4.05mmol)于H2O(15mL)中的溶液用DOWEX50Wx8(H+形式)處理30分鐘并過濾。將濾液在室溫下劇烈攪拌同時(shí)滴加三丁基胺(0.966mL，4.05mm0l)。在進(jìn)一步攪拌30分鐘之后，將反應(yīng)混合物冷凍干燥并進(jìn)一步在真空下經(jīng)P2O5干燥5h。在氬氣氣氛下，將所得的三丁基銨尿苷-5′-單磷酸鹽溶于無水DMF(25mL)中。加入羰基二咪唑(1.38g，8.51mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。接著，加入無水MeOH(180μL)并攪拌15分鐘以除去過量的羰基二咪唑。在高真空下15分鐘除去剩余的MeOH。隨后，將5’-尿苷-單磷酸(UMP，2.0g，4.86mmol)溶于無水DMF(25mL)中，并將其滴加至反應(yīng)混合物中。將反應(yīng)物在室溫下攪拌2天，之后真空濃縮。通過MS監(jiān)測(cè)咪唑-UMP中間體的消耗。快速色譜法(7∶2∶1-5∶2∶1EtOAc∶MeOH∶H2O)得到產(chǎn)物28(1.08g，1.51mmol，37％)。1H-NMR(300MHz，D2O)：δ7.96(d，J＝8.0Hz，1H)，5.98-5.94(m，2H)，5.81-5.79(m，1H)，5.70(dd，J＝7.1，3.3Hz，1H)，5.49(dd，J＝15.2，2.6Hz，1H)，5.30(ddd，J＝18.5，11.0，3.2Hz，2H)，4.57(q，J＝6.0Hz，2H)，4.35-4.16(m，9H)，4.07-3.95(m，2H)，2.17(s，3H)，2.08(s，3H)，2.07(s，3H)ppm。LRMS(ESI-)C21H29N5O19P2(M-H+)的計(jì)算值：716.09，實(shí)測(cè)值：716.3。實(shí)施例17.脫乙?；?-疊氮基半乳糖UDP衍生物(29)的合成根據(jù)Kiso等人，Glycoconj.J.，2006，23，565來進(jìn)行脫乙?；?。因此，將化合物28(222mg，0.309mmol)溶于水H2O(2.5mL)中，并且加入三乙胺(2.5mL)和MeOH(6mL)。將反應(yīng)混合物攪拌3h，然后在真空下濃縮，得到粗UDP-2-疊氮基-2-脫氧-D-半乳糖(29)。1H-NMR(300MHz，D2O)：δ7.99(d，J＝8.2Hz，1H)，6.02-5.98(m，2H)，5.73(dd，J＝7.4，3.4Hz，1H)，4.42-4.37(m，2H)，4.30-4.18(m，4H)，4.14-4.04(m，2H)，3.80-3.70(m，2H)，3.65-3.58(m，1H)ppm。LRMS(ESI-)C15H23N5O16P2(M-H+)的計(jì)算值：590.05，實(shí)測(cè)值：590.2。實(shí)施例18.UDP-半乳糖胺(30)的合成向化合物29于H2O∶MeOH1∶1(4mL)的溶液中加入Lindlar催化劑(50mg)。將反應(yīng)物在氫氣氣氛下攪拌5h并經(jīng)硅藻土過濾。將濾液用H2O(10ml)沖洗并將濾液在真空中濃縮，得到UDP-D-半乳糖胺(UDP-GalNH2，30)(169mg，0.286mmol，兩步收率92％)。1H-NMR(300MHz，D2O)：δ7.93(d，J＝8.1Hz，1H)，5.99-5.90(m，2H)，5.76-5.69(m，1H)，4.39-4.34(m，2H)，4.31-4.17(m，5H)，4.05-4.01(m，1H)，3.94-3.86(m，1H)，3.82-3.70(m，3H)，3.30-3.16(m，1H)。LRMS(ESI-)C15H25N3O16P2(M-H+)的計(jì)算值：564.06，實(shí)測(cè)值：564.10。合成活化酯的一般方案向羧酸的溶液中加入二環(huán)己基碳二亞胺(1.1當(dāng)量)和N-羥基琥珀酰亞胺(1.2當(dāng)量)，并將所得懸浮液攪拌過夜，隨后真空過濾。將濾液濃縮并溶于EtOAc中，隨后用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，以在下一步反應(yīng)中使用粗產(chǎn)物。連接活化酯與UDP-D-半乳糖胺(30)的一般方案將UDP-D-半乳糖胺(30)溶于0.1MNaHCO3(0.2M)中，并加入溶于DMF(0.2M)中的活化酯(2當(dāng)量)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜并真空濃縮。經(jīng)快速色譜法(7∶2∶1-5∶2∶1EtOAc∶MeOH∶H2O)純化，得到產(chǎn)物。實(shí)施例19.UDP-GalNH2的4-疊氮基-3，5-二氟苯甲?；苌?31)的合成根據(jù)Rademann等人，Angew.Chem.Int.Ed.，2012，51，9441-9447中用于戊-4-炔酸琥珀酰亞胺酯的方法來制備4-疊氮基-3，5-二氟苯甲酸琥珀酰亞胺酯。因此，向4-疊氮基-3，5-二氟苯甲酸(18)的溶液中加入二環(huán)己基碳二亞胺(1.1當(dāng)量)和N-羥基琥珀酰亞胺(1.2當(dāng)量)，并將所得的懸浮液攪拌過夜，隨后真空過濾。將濾液濃縮并溶于EtOAc中，隨后用飽和NaHCO3和鹽水洗滌。將有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并真空濃縮，以在下一步反應(yīng)中使用粗產(chǎn)物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)：δ7.74-7.66(m，2H)，2.91(s，4H)。接著，將UDP-GalNH2(30，30mg，0.0531mmol)溶于0.1MNaHCO3(0.2M)中，并加入溶于DMF(0.2M)中的18的N-羥基琥珀酰亞胺酯(31mg，0.106mmol，2當(dāng)量)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜并真空濃縮?？焖偕V法(7∶2∶1-5∶2∶1EtOAc∶MeOH∶H2O)得到產(chǎn)物31(8mg，0.0107mmol，20％)。1H-NMR(300MHz，D2O)：δ7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52-7.31(m，2H)，5.87-5.71(m，2H)，5.65-5.57(m，1H)，5.47-5.33(m，1H)，4.43-3.96(m，8H)，3.76-3.60(m，2H)。LRMS(ESI-)C22H25F2N6O17P2(M-H+)的計(jì)算值：745.07，實(shí)測(cè)值：744.9。實(shí)施例20.UDP-GalNH2的4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲酰基衍生物的合成將UDP-GalNH2(30，41mg，0.073mmol)溶于0.1MNaHCO3(0.2M)中，并加入溶于DMF(0.2M)中的4-疊氮基-2，3，5，6-二氟苯甲酸的N-羥基琥珀酰亞胺酯(19，從Iris-Biotech市售可得)(47mg，0.0.145mmol，2當(dāng)量)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌過夜并真空濃縮。快速色譜法(8∶2∶1-5∶2∶1EtOAc∶MeOH∶H2O)得到UDP-GalNH2的4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲?；苌铩RMS(ESI-)C22H23F4N6O17P2(M-H+)的計(jì)算值：781.05，實(shí)測(cè)值：781.0。實(shí)施例21.(4-氧代-4-((芘-1-基甲基)氨基)丁基)氨基甲酸4-(1R，8S，9s)-二環(huán)[6.1.0]壬-4-炔-9-基甲基酯(BCN-芘(36))的合成將4-(1R，8S，9s)-二環(huán)[6.1.0]壬-4-炔-9-基甲氧基)羰基)氨基)丁酸(260mg，0.69mmol)溶于DCM(7mL)中，隨后加入1-氨基甲基芘HCl(221mg，0.83mmol)和Et3N(143μL，1mmol)。將反應(yīng)物攪拌過夜，隨后加入水(10mL)和DCM(10mL)。隨后，將有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(10mL)和0.1MHCl(10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并在減壓下濃縮。經(jīng)快速色譜法(戊烷∶EtOAc1∶3→1∶8)純化，得到產(chǎn)物BCN-芘(36)(227mg，0.46mmol，67％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ8.26-7.95(m，9H)，6.34(bs，1H)，5.14(d，J＝5.2Hz，2H)，4.96(bs，1H)，4.05(d，J＝8Hz，2H)，3.24-3.19(m，2H)，2.28-2.14(m，6H)，1.86(q，J＝7.2Hz，2H)，1.65-1.62(m，1H)，1.53-1.48(m，2H)，1.29-1.23(m，2H)，0.89-0.85(m，2H)。fabricator-消化的單克隆抗體的質(zhì)譜分析在37℃下，將20μg(經(jīng)修飾的)IgG的溶液與fabricator(從Genovis、Lund、Sweden市售可得)(1.25U/μL)在總體積為10μL的pH6.6磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)中溫育1h。使用AmiconUltra-0.5、Ultracel-10膜(Millipore)將fabricator-消化的樣品用milliQ洗滌三次(trice)，得到最終樣品體積為約40μL。通過電噴霧離子化飛行時(shí)間(ESI-TOF)在JEOLAccuTOF上分析Fc/2片段。使用Magtran軟件得到去卷積譜。實(shí)施例22.通過endoS處理制備經(jīng)修剪的曲妥單抗采用來自釀膿鏈球菌(Streptococcuspyogenes，從Genovis、Lund、Sweden市售可得)的EndoS進(jìn)行曲妥單抗(32)的聚糖修剪。因此，在37℃下將曲妥單抗(10mg/mL)與endoS(40U/mL)在25mMTrispH8.0中溫育約16小時(shí)。將脫糖基化的IgG使用AmiconUltra-0.5、Ultracel-10膜(Millipore)采用10mMMnCl2和25mMTris-HClpH8.0濃縮和洗滌。在峰的去卷積之后，質(zhì)譜顯示出一個(gè)輕鏈的峰和兩個(gè)重鏈的峰。這兩個(gè)重鏈的峰屬于一個(gè)由核心GlcNAc(Fuc)取代的曲妥單抗產(chǎn)生的主要產(chǎn)物(49496Da，總重鏈的90％)，以及由脫糖基化的曲妥單抗產(chǎn)生的次要產(chǎn)物(49351Da，總重鏈的±10％)。實(shí)施例23.用于半乳糖胺衍生物UDP-GalNAz與Gal-T1(Y289L)的糖基轉(zhuǎn)移的方法。參見圖8。采用Gal-T1(Y289L)進(jìn)行在經(jīng)修剪的曲妥單抗上的UDP-GalNAz(Carbosynth，Compton，Berkshire，英國(guó))的酶引入，該Gal-T1(Y289L)是由牛β(1，4)-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶[β(1，4)-Gal-T1]的突變體的殘基130-402與Y289L和C342T突變組成的催化結(jié)構(gòu)域。根據(jù)Qasba等人(Prot.Expr.Pur.2003，30，219-76229)所報(bào)道的方法將GalT(Y289L)表達(dá)，從包涵體中分離并重折疊。在30℃下，將經(jīng)修剪的曲妥單抗(10mg/mL)與31(0.7mM)和Gal-T1(Y289L)(2mg/mL)在10mMMnCl2和25mMTris-HClpH8.0中溫育過夜。接著，在4℃下，將功能化的曲妥單抗與蛋白A瓊脂糖(40μL每mgIgG)溫育2小時(shí)。將該蛋白A瓊脂糖用PBS洗滌三次，并用100mM甘氨酸-HClpH2.7洗脫IgG。將洗脫出的IgG用1MTris-HClpH8.0中和，并使用AmiconUltra-0.5、Ultracel-10膜(Millipore)采用PBS濃縮和洗滌至濃度為15-20mg/mL。經(jīng)還原的樣品的質(zhì)譜分析表明形成一個(gè)主要產(chǎn)物(49813Da，總重鏈的約90％)，該主要產(chǎn)物由31向核心GlcNAc(Fuc)-取代的曲妥單抗重鏈的轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生。實(shí)施例24.在Gal-T1(Y289L)的作用下，UDP-半乳糖胺的4-疊氮基-3，5-二氟苯甲?；苌镏两?jīng)修剪的曲妥單抗的糖基轉(zhuǎn)移在30℃下，將由曲妥單抗的endoS處理而獲得的經(jīng)修剪的曲妥單抗(10mg/mL，66μM)與UDP-半乳糖胺的4-疊氮基-3，5-二氟苯甲?；苌?31，1mM)和Gal-T1(Y289L)(1.0mg/mL)在10mMMnCl2和25mMTris-HClpH8.0中溫育過夜。經(jīng)還原的樣品的質(zhì)譜分析表明核心GlcNAc(Fuc)-取代的曲妥單抗(對(duì)于重鏈，觀察到的質(zhì)量為49502Da，計(jì)算的質(zhì)量為49506Da)完全轉(zhuǎn)化為trast(F2-GalNBAz)233(對(duì)于重鏈，觀察到的質(zhì)量為49818Da，計(jì)算的質(zhì)量為49822Da)，該trast(F2-GalNBAz)233由31向核心GlcNAc(Fuc)-取代的曲妥單抗重鏈的轉(zhuǎn)移以及隨后疊氮化物在樣品制備期間的還原而產(chǎn)生。實(shí)施例25.在Gal-T1(Y289L)的作用下，UDP-半乳糖胺的4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲?；苌镏两?jīng)修剪的曲妥單抗的糖基轉(zhuǎn)移在30℃下，將由曲妥單抗的endoS處理而獲得的經(jīng)修剪的曲妥單抗(10mg/mL，66μM)與UDP-半乳糖胺的4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲?；苌?1mM)和Gal-T1(Y289L)(1.0mg/mL)在10mMMnCl2和25mMTris-HClpH8.0中溫育過夜。fabricator-消化的樣本的質(zhì)譜分析表明核心GlcNAc(Fuc)-取代的曲妥單抗(觀察到的質(zhì)量為24139Da，計(jì)算的質(zhì)量為24136Da)部分轉(zhuǎn)化為trast(F4-GalNBAz)2(觀察到的質(zhì)量為24518Da，計(jì)算的質(zhì)量為24514Da，總Fc/2片段的約10％)，該trast(F4-GalNBAz)2由UDP-半乳糖胺的4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲?；苌镏梁诵腉lcNAc(Fuc)-取代的曲妥單抗的轉(zhuǎn)移而產(chǎn)生。實(shí)施例26.trast(F2-GalNBAz)233與BCN-芘的綴合在室溫下，將Trast(F2-GalNBAz)233(15mg/mL，100μM)與BCN-芘36(1mM)在含50％DMA的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)pH7.4中溫育過夜。fabricator-消化的樣品的質(zhì)譜分析表明Trast(F2-GalNBAz)233(觀察到的質(zhì)量為24481Da，計(jì)算的質(zhì)量為24479Da)完全轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的具有BCN-芘的三唑衍生物(觀察到的質(zhì)量為24975Da，計(jì)算的質(zhì)量為24971Da)。實(shí)施例27.trast(F4-GalNBAz)2與BCN-芘的綴合在室溫下，將Trast(F4-GalNBAz)233(15mg/mL，100μM)與BCN-芘36(1mM)在含50％DMA的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)pH7.4中溫育過夜。fabricator-消化的樣品的質(zhì)譜分析表明Trast(F4-GalNBAz)2(觀察到的質(zhì)量為24518Da，計(jì)算的質(zhì)量為24514Da)完全轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的具有BCN-芘的三唑衍生物(觀察到的質(zhì)量為25009Da，計(jì)算的質(zhì)量為25006Da)。實(shí)施例28.在不同濃度的BCN-PEG2000下，trast-(GalNAz)2和trast(F2-GalNBAz)233與BCN-PEG200038的綴合在室溫下，將在PBS中的Trast-(GalNAz)2或trast-(F2-GalNBAz)2(33)(10μMIgG)與0至20當(dāng)量的BCN-PEG2000(38)(0至200μM)溫育過夜。通過還原SDS-PAGE分離反應(yīng)產(chǎn)物，隨后進(jìn)行考馬斯染色。圖9示出了在與BCN-PEG2000(下面的帶)綴合之前和在與BCN-PEG2000(上面的帶)綴合之后的曲妥單抗-(GalNAz)2(上面的圖)和曲妥單抗-(F2-GalNBAz)233(下面的圖)的重鏈。當(dāng)與20當(dāng)量的BCN-PEG2000(上面的圖，第9道)溫育時(shí)，Trast-(GalNAz)2顯示小于50％的轉(zhuǎn)化率，而當(dāng)僅與4當(dāng)量的BCN-PEG2000(下面的圖，第4道)溫育時(shí)，trast-(F2-GalNBAz)2顯示＞50％的轉(zhuǎn)化率。實(shí)施例29.苯基疊氮化物和疊氮化物(3zh-zk)與BCN-芘36的反應(yīng)速度對(duì)比在樣品罐中，將BCN-芘原料(20μL于DMF中的10mM原料溶液)加入MeCN(550μL)中，隨后加入H2O(325μL)和疊氮化物(100μL于MeCN中的10mM疊氮化物的原料溶液)(最終濃度為0.2mMBCN-芘，1mM疊氮化物)。將反應(yīng)物在室溫下溫育，并在指定時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行HPLC測(cè)量(采用PhenomenexLuna5uC18柱和H2O/MeCN+0.1％TFA作為洗脫液)。將產(chǎn)物和起始材料在340nm下的峰強(qiáng)度用于計(jì)算轉(zhuǎn)化率。表4.在與過量(5當(dāng)量)的疊氮化物3zh-3zk溫育時(shí)BCN-芘的時(shí)間分辨的轉(zhuǎn)化率從表4中可以清楚地看出，相對(duì)于苯基疊氮化物，疊氮化物3zh-3zk在所有情況下顯示出與BCN-芘環(huán)加成的增大的反應(yīng)速率。實(shí)施例30.苯基疊氮化物和疊氮化物3zl與環(huán)辛炔的反應(yīng)速度對(duì)比在樣品罐中，將環(huán)辛炔(50μL于DMF中的100mM原料溶液)加入MeCN(533μL)中，隨后加入H2O(316μL)和疊氮化物(100μL于MeCN中的10mM疊氮化物的原料溶液)(最終濃度為5mM環(huán)辛炔，1mM疊氮化物)。將反應(yīng)物在室溫下溫育，并在指定時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行HPLC測(cè)量(采用PhenomenexLuna5uC18柱和H2O/MeCN+0.1％TFA作為洗脫液)。將產(chǎn)物和起始材料在340nm下的峰強(qiáng)度用于計(jì)算轉(zhuǎn)化率。表5.在與過量環(huán)辛炔(5當(dāng)量)溫育時(shí)苯基疊氮化物或疊氮化物3zl的時(shí)間分辨的轉(zhuǎn)化率時(shí)間(分鐘)苯基疊氮化物3zl500％28％1059％78％24023％94％從表5中可以清楚地看出，相對(duì)于苯基疊氮化物，3zl顯示出與環(huán)辛炔的環(huán)加成的顯著增大的反應(yīng)速率(快＞3倍)。實(shí)施例31.苯基疊氮化物和疊氮化物3zl與COMBO的反應(yīng)速度對(duì)比在樣品罐中，將COMBO(作為其游離的羧酸酯(37)，25μL于DMF中的10mM原料溶液)加入MeCN(140μL)中，隨后加入H2O(70μL)和疊氮化物(5μL于MeCN中的10mM疊氮化物的原料溶液)(最終濃度為1mMCOMBO，0.2mM疊氮化物，相對(duì)于疊氮化物約5當(dāng)量COMBO)。將反應(yīng)物在室溫下溫育，并在指定時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行HPLC測(cè)量(采用PhenomenexLuna5uC18柱和H2O/MeCN+0.1％TFA作為洗脫液)。將產(chǎn)物和起始材料在340nm下的峰強(qiáng)度用于計(jì)算轉(zhuǎn)化率。表6.在與過量COMBO-衍生物37(5當(dāng)量)溫育時(shí)苯基疊氮化物或疊氮化物3zl的時(shí)間分辨的轉(zhuǎn)化率時(shí)間(分鐘)苯基疊氮化物3zl1527％80％4553％90％從表6中可以清楚地看出，相對(duì)于苯基疊氮化物，3zl顯示出與COMBO-衍生物37的環(huán)加成的顯著增大的反應(yīng)速率(快2-3倍)。實(shí)施例32.苯甲醛的2，4，6-三異丙基苯磺?；甑暮铣蓪?，4，6-三異丙基苯磺酰基肼(300mg，1mmol)溶于甲醇(10mL)中，隨后加入苯甲醛(102μL，1mmol)。在5分鐘之后形成白色沉淀物，將反應(yīng)物攪拌1h，隨后過濾。將沉淀物在真空下干燥，以得到產(chǎn)物(233mg，0.6mmol，60％)，該粗產(chǎn)物被用于下一步反應(yīng)中。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：10.88(bs，1H)，7.63(s，1H)，7.30-7.26(m，2H)，7.05-7.03(m，3H)，6.89(m，2H)，4.09-4.04(m，2H)，2.70-2.61(m，1H)，1.03-1.01(m，12H)，0.99-0.97(m，6H)ppm。實(shí)施例33.4-(三氟甲基)-苯甲醛的2，4，6-三異丙基苯磺酰基腙的合成將2，4，6-三異丙基苯磺?；?300mg，1mmol)溶于甲醇(10mL)中，隨后加入4-(三氟甲基)苯甲醛(172mg，1mmol)。在5分鐘之后形成白色沉淀物，將反應(yīng)物攪拌1h，隨后過濾。將沉淀物在真空下干燥，以得到產(chǎn)物(237mg.0.59mmol，59％)，該粗產(chǎn)物被用于下一步反應(yīng)中。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：11.47(bs，1H)，7.92-7.89(m，1H)，7.67-7.51(m，4H)，7.18-7.13(m，2H)，4.32-4.27(m，2H)，2.91-2.87(m，1H)，1.32-1.20(m，18H)ppm。實(shí)施例34.產(chǎn)生重氮化合物3zd或3ze的方案向合適的2，4，6-三異丙基苯磺酰基腙于甲醇(0.1M)中的懸浮液中加入KOH(2當(dāng)量)，并將反應(yīng)物加熱至50℃直至在TLC上觀察到起始材料完全消失(約10分鐘)。將澄清溶液(深紅色)用水(2mL)猝滅，并隨后用DCM(2×1mL)萃取。將合并的有機(jī)層在暗處中保存并不經(jīng)進(jìn)一步純化而用于環(huán)加成反應(yīng)。實(shí)施例35.環(huán)辛炔的合成根據(jù)在L.Brandsma，H.D.Verkruijsse，Synthesis，1978，290中描述的方法來合成。實(shí)施例36.苯并-成環(huán)的環(huán)辛炔(COMBO)37的合成根據(jù)在B.R.Varga，M.Kállay，K.Hegyi，S.Béni，P.Kele，Chem.Eur.J.2012，18，822-828中描述的方法來合成。在該合成的最后一步中，獲得COMBO的苯甲酸衍生物而不是COMBO-甲酯。隨后的方法：將18-冠醚-6(27mg，0.10mmol)放置在氮?dú)鈿夥障隆＜尤爰和?30mL)和KOtBu(75mg，0.67mmol)，并將所得的混合物加熱至59℃。加入(E)-8-溴-5，6，9，10-四氫苯并[8]環(huán)輪烯-2-甲酸甲酯(79mg，0.27mmol)于己烷(12mL)和二氯甲烷(3mL)中的溶液，隨后加入1mL二氯甲烷。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，隨后加入額外的KOtBu(于THF中的1M溶液，0.67mL，0.67mmol)。在20min之后，加入飽和NH4Cl(50mL)水溶液和EtOAc(50mL)。在分離之后，將水相用EtOAc(50mL)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(Na2SO4)并濃縮。將殘余物通過柱色譜法(于庚烷中的EtOAc0→20％)純化，隨后進(jìn)行反相HPLC(C18，于水中的MeCN5→95％(0.1％甲酸))。將含有產(chǎn)物的流分合并，用飽和NaHCO3水溶液中和并用二氯甲烷(30mL)萃取。分離之后，將有機(jī)相用飽和NH4Cl水溶液洗滌，干燥(Na2SO4)并濃縮。得到無色膜狀產(chǎn)物(16mg，0.074mmol，27％)。1HNMR數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)數(shù)據(jù)一致。1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ7.95-7.91(m，2H)，7.28(d，J＝8.5Hz，1H)，3.47(q，J＝12.1Hz，2H)，2.92(t，J＝14.0Hz，2H)，2.54-2.45(m，2H)，2.37-2.28(m，2H)ppm。實(shí)施例37.苯并-成環(huán)的環(huán)壬炔35a的合成根據(jù)在J.Tummatorn，G.B.Dudley，Org.Lett.2011，13，1572-1575中描述的方法來合成。1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.28-7.23(m，2H)，7.18-7.15(m，2H)，3.91(brs，1H)，3.22(brs，1H)，2.84(brs，1H)；2.71(brs，2H)，2.23(brs，2H)，2.08(brs，1H)ppm。當(dāng)前第1頁1 2 3