本發(fā)明屬于食用菌菌種的培養(yǎng)方法技術領域，尤其涉及一種食用菌固體液化菌種的制備工藝。

背景技術：

食用菌菌種的生產是食用菌栽培中的關鍵環(huán)節(jié)，要實現食用菌栽培的優(yōu)質、高效，首先要做到菌種的高質量、高效率、低成本生產?，F有食用菌菌種的生產，主要有固體菌種和液體菌種兩種生產方法，固體菌種的生產，其工藝路線是：母種→原種→栽培種→菌包（或栽培瓶），即在無菌條件下，用1支20mm×200mm的母種接到4瓶～6瓶（750ml/瓶）經徹底滅菌的固體培養(yǎng)基中， 在適溫下發(fā)菌培養(yǎng)成為原種；然后用1瓶原種擴接到40瓶～50瓶（750ml/瓶）固體培養(yǎng)基中，經過發(fā)菌培養(yǎng)成栽培種；最后用1瓶栽培種再擴接22袋～25袋固體料袋，經過發(fā)菌培養(yǎng)成菌包。該方法的優(yōu)點是接種時機械損傷小，適應環(huán)境能力強，發(fā)菌溫度要求不高。但是，其存在以下缺點：一是要經歷母種、原種、栽培種三個環(huán)節(jié)，生產環(huán)節(jié)多，污染幾率大；二是生產周期長，菌種生產周期需77天～120天；三是菌齡長，原種、栽培種、菌包發(fā)菌時間長，上下菌齡不一致，上部菌齡長，活力下降；四是菌種生產占用場地大，設施投入多。液體菌種的生產工藝為：母種→一級培養(yǎng)→二級培養(yǎng)（小型發(fā)酵罐）→大型發(fā)酵罐→菌包，即1支20mm×200mm的母種接500ml一級培養(yǎng)液，經兩次發(fā)酵得100L液體菌種，100L液體菌種接菌包3000袋。該方法優(yōu)點：一是生產周期短，制備液體菌種一般只要5～7天；二是菌齡短，液體發(fā)酵5～7天時的菌絲體正值旺盛生長期，接種后菌包萌發(fā)快，菌絲活力強；三是成本相對較低，不到固體菌種的1/3。但缺點：一是液體發(fā)酵需要投資整套的發(fā)酵設備，而該設備價格昂貴，投入大，非一般的菇農所能接受，所以目前其只能用于工廠化生產，推廣到菇農有一定的困難；二是污染不容易控制，食用菌液體發(fā)酵過程中間任何一個環(huán)節(jié)都要嚴格控制，一旦出現菌種帶雜菌、接種操作不當、培養(yǎng)基或設備滅菌不徹底、空氣過濾不嚴格、中間補料操作不當等，都會污染發(fā)酵罐，從而影響菌種的生產。

發(fā)明專利內容

為了解決上述問題，本發(fā)明專利提供了一種食用菌固體液化菌種的制備工藝。

本發(fā)明的目的是由以下技術方案來實現的：一種食用菌固體液化菌種的制備工藝，其步驟包括固體菌種的純化培養(yǎng)、無菌水的制備：

步驟1：固體菌種的純化培養(yǎng):固體培養(yǎng)基經高壓滅菌后接入純菌種，在適溫下培養(yǎng)成固體菌種；所說的固體培養(yǎng)基主要成分及重量配比，根據不同的食用菌品種和不同的生產條件而定，所說的高壓滅菌為0.15Mpa壓力下保持2小時～2.5小時，所說的適溫為22℃～28℃，保持空氣濕度在60%～75%，通風、避光發(fā)菌培養(yǎng)后得到固體菌種；

步驟2：無菌水的制備：采用蒸汽滅菌制備無菌水，或直接機械過濾制備無菌水，或者以其它方法制備無菌水；

步驟3：固體菌種的液化：在無菌條件下，將所得到的固體菌種搗碎成顆粒狀，與等量的無菌水混合，然后加入粉碎機粉碎成漿糊狀菌種，再加入10倍～100倍的無菌水進行稀釋，稀釋后即成液化菌種；

步驟4：液化菌種的接種：將經過高壓滅菌消毒后的食用菌栽培料包（袋）置于潔凈的冷卻室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將液化菌種攪拌均勻，然后用器具將液化菌種倒入料包（袋）中，將接好菌種的食用菌栽培菌包（袋）移入食用菌培養(yǎng)房，在合適的溫度、濕度下進行發(fā)菌管理。

本發(fā)明專利具有以下有益效果：

1、工藝簡化，生產周期短，成本低：液化菌種的制備工藝，與原有菌種制備技術相比，減少了一次發(fā)菌環(huán)節(jié)，工藝更簡化，生產周期縮短，發(fā)菌時間縮短1/3以上，減少了使用場地、設施、原材料及勞動力的消耗，降低了成本；

2、接種簡便，發(fā)菌快，菌齡齊：液化菌種可以現配現用，接種簡單到可以用器具倒入培養(yǎng)料中，解決了原有固體菌種多代擴繁，發(fā)菌時間長、上下菌齡不一致、活力下降的難題，具有發(fā)菌快，菌齡齊的特點，出菇更早、更集中，更優(yōu)質，產量高；

3、效率高，投資?。嚎朔艘后w菌種復雜的全封閉連續(xù)發(fā)酵技術工藝、潛在雜菌污染的缺點，液化菌種生產可以分批進行，數量可控，污染風險小，無需整套發(fā)酵設備，只需要簡單的粉碎機，接種簡單到可以用器具倒入培養(yǎng)料中，工作效率高，投資和運行成本小。

具體實施方式

下面結合實施例對本發(fā)明一種食用菌固體液化菌種的制備工藝作進一步說明。

實施例1

秀珍菇液化菌種的制備：

步驟1：秀珍菇固體菌種的純化培養(yǎng)：選用固體培養(yǎng)基成分及重量配比為：棉籽殼︰木屑︰麥麩︰玉米粉︰石膏︰石灰︰=42︰40︰10︰5︰2︰1，加入水后含水量達到58%～62%，混合均勻后裝瓶（750ml/瓶），經0.15Mpa壓力下滅菌2小時～2.5小時，置潔凈的冷卻室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將秀珍菇母種接到固體培養(yǎng)基內，1支20mm×200mm的母種接4～6瓶固體培養(yǎng)基，然后移入23℃～25℃的培養(yǎng)室，保持空氣濕度在60%～75%，通風、避光發(fā)菌30天～35天后，培養(yǎng)成秀珍菇固體菌種；

步驟2：無菌水的制備：采用蒸汽滅菌制備無菌水，即將蒸汽通入潔凈的水中，使之沸騰2分鐘～3分鐘，冷卻至25℃以下備用；

步驟3：秀珍菇固體菌種的液化：在無菌條件下，將所得到的秀珍菇固體菌種搗碎成顆粒狀，與等量的無菌水混合，加入消過毒的粉碎機內，粉碎成漿糊狀秀珍菇菌種，粉碎細度在80目～200目之間，然后倒入消過毒的大器皿后再加入10倍至100倍的無菌水進行攪拌稀釋，稀釋后即成秀珍菇液化菌種，裝罐備用；

步驟4：秀珍菇液化菌種的接種：選用與固體菌種培養(yǎng)基相同的成分及重量配比制成秀珍菇培養(yǎng)基，裝包（袋）后在0.15Mpa壓力下滅菌2小時～2.5小時，滅菌消毒后置于潔凈的室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將備用液化菌種攪拌均勻，然后用勺子將秀珍菇液化菌種舀入栽培菌包（袋）中，每包（袋）舀入5g～15g，將接好菌種的栽培菌包（瓶）移入培養(yǎng)房，在溫度23℃～25℃、空氣濕度65%～75%、通風、避光條件下，進行發(fā)菌管理。

實施例2

金針菇液化菌種的制備：

步驟1：金針菇固體菌種的純化培養(yǎng)：選用固體培養(yǎng)基成分及重量配比為：棉籽殼︰木屑︰麥麩︰玉米粉︰米糠︰石膏粉︰石灰︰=50︰18︰15︰10︰5︰1.5︰0.5，加入水后含水量達到58%～62%，混合均勻后裝瓶（750ml/瓶），經0.15Mpa壓力下滅菌2小時～2.5小時，置潔凈的冷卻室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將金針菇母種接到固體培養(yǎng)基內，1支20mm×200mm的母種接4瓶～6瓶固體培養(yǎng)基，然后移入21℃～23℃的無菌房內，保持空氣濕度在60%～75%，通風、避光發(fā)菌35天～40天后，培養(yǎng)成金針菇固體菌種；

步驟2：無菌水的制備：采用直接燒開水的方法制備無菌水，開水沸騰2分鐘～3分鐘，冷卻至23℃以下備用；

步驟3：金針菇固體菌種的液化：在無菌條件下，將所得到的金針菇固體菌種搗碎成顆粒狀，然后加入消過毒的粉碎機內，加入10倍至60倍的無菌水，直接粉碎成金針菇液化菌種，粉碎細度在80目～200目之間，裝罐備用；

步驟4：金針菇液化菌種的接種：選用與固體菌種培養(yǎng)基相同的成分及重量配比制成金針菇培養(yǎng)基，裝包（袋）后在0.15Mpa壓力下滅菌2小時～2.5小時，滅菌消毒后置于潔凈的室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將備用液化菌種攪拌均勻，然后加入消過毒的噴霧器中，用加壓方法將金針菇液化菌種噴入栽培菌包（袋）中，每包（袋）噴入5g～15g，將接好菌種的栽培菌包（瓶）移入培養(yǎng)房，在溫度21℃～23℃、空氣濕度65%～75%、通風、避光條件下，進行發(fā)菌管理。

實施例3

海鮮菇液化菌種的制備：

步驟1：海鮮菇固體菌種的純化培養(yǎng)：選用固體培養(yǎng)基成分及重量配比為：棉籽殼︰木屑︰麥麩︰玉米粉︰米糠︰石膏粉=50︰15︰15︰10︰9︰1，加入水后含水量為58%～62%，混合均勻后裝瓶（750ml/瓶），經0.15Mpa壓力下滅菌2小時～2.5小時，置潔凈的冷卻室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將海鮮菇母種接到固體培養(yǎng)基內，1支20mm×200mm的母種接4～6瓶固體培養(yǎng)基，然后移入23℃～25℃的無菌房內發(fā)菌35天～40天后，培養(yǎng)成海鮮菇固體菌種；

步驟2：無菌水的制備：采用水過濾器直接制備無菌水；

步驟3：海鮮菇固體菌種的液化。在無菌條件下，將所得到的海鮮菇固體菌種搗碎成顆粒狀，然后加入消過毒的粉碎機內，加入10倍至100倍的無菌水，直接粉碎成海鮮菇液化菌種，粉碎細度在80目～200目之間，裝罐備用；

步驟4：海鮮菇液化菌種的接種：選用與固體菌種培養(yǎng)基相同的成分及重量配比制成海鮮菇培養(yǎng)基，裝包（袋）后在0.15Mpa壓力下滅菌2小時～2.5小時，滅菌消毒后置于潔凈的室內冷卻至28℃以下，在無菌條件下，將備用液化菌種攪拌均勻，然后用勺子將海鮮菇液化菌種舀入栽培料包（袋）中，每包（袋）舀入5g～15g，將接好菌種的栽培菌包（瓶）移入培養(yǎng)房，在溫度23℃～25℃、空氣濕度65%～75%、通風、避光條件下，進行發(fā)菌管理，未使用完的液化菌種可以封裝冷藏備用，冷藏溫度為4℃～6℃。

利用本發(fā)明所述的技術方案，或本領域的技術人員在發(fā)明技術方案的啟發(fā)下，設計出類似的技術方案，而達到上述技術效果的，均是落入本發(fā)明的保護范圍。