本發(fā)明屬于生物提取技術(shù),具體涉及玄參中哈巴苷和哈巴俄苷提取工藝。
背景技術(shù):
玄參是著名傳統(tǒng)中藥。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為中品。主要分布在我國浙江、四川、重慶、湖北、貴州、河南等地。具有涼血滋陰、瀉火解毒的功效。用于熱病傷陰、津傷便秘、目赤、咽痛等。玄參藥材所含化學(xué)成分較為復(fù)雜,目前較為深入的生物活性研究建立在其主要活性成分的基礎(chǔ)上。玄參主要含環(huán)烯醚萜類、苯丙素苷類、植物甾醇、有機(jī)酸類、黃酮類、三萜皂苷、揮發(fā)油、糖類、生物堿及微量的單萜和二萜等成分。其中,環(huán)烯醚萜類與苯丙素苷類被證實是玄參主要活性成分。玄參的環(huán)烯醚萜成分分成4類:環(huán)戊烷型,如哈巴苷(harpagide)、哈巴俄苷(harpagoside)等;環(huán)戊烯型,如桃葉珊瑚苷(aucubin)、京尼平苷(geniposide)和scrophulninoside A等;環(huán)氧環(huán)戊烷型,如6-O-甲基梓醇(6-methylcatalpol)、球花苦苷(globularin)、scropolioside A 與B等;變異環(huán)烯醚萜,如玄參苷元(Ningpogoside)、玄參苷A(Ningpogoside A)與玄參苷B(Ningpogoside B)等。苯丙素類成分是玄參中含量較高的水溶性成分,包括:安格洛苷C(Agroside C)、肉蓯蓉苷D(Cistanoside D)、類葉升麻苷(Aeteoside)等。
哈巴苷(harpagide)和哈巴俄苷(harpagoside)是玄參環(huán)戊烷型環(huán)烯醚萜的代表性成分,也是玄參主要活性成分,具有抗炎、神經(jīng)保護(hù)等方面具有多重活性。如:哈巴俄苷可抑制HepG2由LPS-誘導(dǎo)的COX-2mRNA水平與蛋白表達(dá),原因與抑制NF-κB核轉(zhuǎn)移與IκBα降解有關(guān)。同時,哈巴俄苷能抑制RAW 264.7細(xì)胞上LPS-誘導(dǎo)的NF-κB報告基因活性,表明哈巴俄苷直接干擾轉(zhuǎn)錄基因激活。哈巴苷能顯著降低天門冬氨酸(NMDA)或紅藻氨酸(kainic acid)對大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元的神經(jīng)毒性,且采用預(yù)處理和后處理方式均有效果。哈巴苷還能顯著防止內(nèi)源性抗氧化物谷胱甘肽的減少。同時,減少細(xì)胞內(nèi)NO與過氧化物的產(chǎn)生。表明哈巴苷的神經(jīng)保護(hù)作用與其對抗氧化系統(tǒng)和谷氨酸能受體作用有關(guān)。哈巴俄苷能顯著減少中腦神經(jīng)元酪氨酸羥化酶(TH)陽性神經(jīng)元丟失與減輕神經(jīng)突觸變短。哈巴俄苷可增強(qiáng)MPTP損傷小鼠運動能力,增加黑質(zhì)致密部位酪氨酸羥化酶(TH)陽性神經(jīng)元數(shù)量與紋狀體多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白(DAT)密度。還能顯著提高GDNF mRNA與蛋白水平, 而這些作用可被Ret 抑制劑PP1或抗GDNF抗體所阻滯了,提示其機(jī)制與提高膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)營養(yǎng)因子有關(guān)。
現(xiàn)有哈巴苷和哈巴俄苷提取方法有溶劑直接提取法,水提醇沉和大孔樹脂吸附等方法,這些方法各有利弊,溶劑直接提取法提取效率低,而且成本也高。水提醇沉和大孔樹脂吸附也相對成本較高,經(jīng)濟(jì)效益較差,且樹脂吸附精制法在沉淀液與渣方面很難處理??梢?,目前有關(guān)玄參中哈巴苷和哈巴俄苷提取方法還相對較少,本發(fā)明所采用的微波提取法還尚未見報道。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于提供一種玄參中哈巴苷和哈巴俄苷的制備方法。所述方法包括:
1)原料預(yù)處理
玄參根塊50℃干燥后,粉碎,過70目篩,備用。
)加入萃取劑
按料液比1:20加入10%乙醇
3)微波處理
微波萃取,微波功率為600W,微波時間45min。
)過濾
將萃取液進(jìn)行抽濾,提抽濾液。
)濃縮
將提抽濾液進(jìn)行減壓濃縮。
)干燥
進(jìn)行恒溫干燥,溫度控制在60℃左右。
權(quán)利要求保護(hù)整個制備過程,也包括具體的過程中的每一步的反應(yīng)設(shè)計及條件。
本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
①、采用微波輔助提取工藝技術(shù),較為簡單實用,可以降低生產(chǎn)成本。
②、有利于提高哈巴苷和哈巴俄苷的最終收率,進(jìn)一步降低成本。
③、玄參經(jīng)清洗除雜后再由精選低溫烘干,能夠既達(dá)到除雜,提高產(chǎn)品質(zhì)量,又達(dá)到保留目標(biāo)成分不被破壞,最大限度提高產(chǎn)率的目的。