專利名稱：反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種硫酸軟骨素的生產(chǎn)工藝改進(jìn)。
背景技術(shù)：
硫酸軟骨素，英文名chondroitin sulfate，是以動物(豬、牛、馬、羊、雞、鯊魚等) 的軟骨為原料的一種高分子酸性粘多糖，其分子結(jié)構(gòu)為β -D-葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基半 乳糖通過β 1 — 3糖苷鍵形成的重復(fù)二 糖單位所組成的多糖鏈。它是一種白色或微黃色粉 末，吸水性強(qiáng)，易溶于水而成粘稠液體，不溶于酒精、丙酮、乙醚和氯仿等有機(jī)溶劑。其鹽類 對熱較穩(wěn)定。目前，硫酸軟骨素通常提取方法是采用堿-酶解提取法，主要包括以下步驟1)堿提、酶解原料(軟骨)加水浸沒，用氫氧化鈉調(diào)ΡΗ8.5，升溫至55-60°C，保 溫4-6小時，然后加入2%的堿性蛋白酶，保持PH8. 5，保溫55-60°C攪拌6_8小時，升溫至沸 騰15分鐘左右，過濾，得濾液；2)酒精沉淀濾液中加入3%重量的氯化鈉，降溫至室溫，按體積的2. 5倍加入 95 %酒精，靜止8小時，取沉淀。3)氧化按沉淀水的重量比為1 10的比例混合水，同時加入3%重量的氯化 鈉，調(diào)PH10-12，加入2 %重量雙氧水氧化8小時，過濾，取濾液。4)酒精沉淀、干燥濾液調(diào)PH6，加入體積的2. 5倍量酒精第二次沉淀，沉淀再用 95%酒精脫水兩次，干燥粉碎得到硫酸軟骨素成品。由于硫酸軟骨素溶液比較粘稠，在醇沉?xí)r傳統(tǒng)的做法是將酒精加入到硫酸軟骨素 溶液中使硫酸軟骨素結(jié)晶析出沉淀下來，這樣產(chǎn)生的硫酸軟骨素沉淀結(jié)晶體容易結(jié)塊而且 粘稠，結(jié)晶體中包含的有機(jī)溶劑在脫水干燥過程中由于顆粒形狀較大且堅(jiān)硬致密，不容易 揮發(fā)，致使產(chǎn)品的溶劑殘留偏高(2%以上)，影響產(chǎn)品質(zhì)量，滿足不了客戶要求。其次由于 沉淀結(jié)塊粘稠，使得脫水、烘干、粉碎等操作變得困難，浪費(fèi)能耗。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法，產(chǎn)生的硫 酸軟骨素沉淀質(zhì)地疏松、顆粒細(xì)小、容易脫水和烘干，產(chǎn)品不需要粉碎，能耗低，產(chǎn)品中有機(jī) 溶劑殘留極低，產(chǎn)品質(zhì)量好。本發(fā)明采取以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法，包括下列步驟(1)堿提、酶解軟骨原料加水浸沒，用堿調(diào)PH至8-9，升溫至55-60°C，保溫4-6小 時，然后加入堿性蛋白酶，保持PH8-9，保溫55-60°C攪拌6-8小時，升溫至沸騰12-18分鐘， 過濾得到硫酸軟骨素溶液；(2)酒精沉淀將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，在攪拌狀態(tài)下，向溶 液中加入氯化鈉，使溶液含氯化鈉重量濃度為1_4%，再加入溶液體積2-3倍的重量濃度為90%以上的酒精，靜止6小時以上，過濾得到硫酸軟骨素沉淀；(3)氧化將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入水中溶解，同時向水中加入氯化鈉，使其含氯化鈉重量濃度為1_4%，含硫酸軟骨素重量濃度為3-5%，調(diào)PH至10-12，加入 溶液重量的1-3%雙氧水或過錳酸鉀氧化6小時以上，過濾得濾液；(4)反向沉淀調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5-6，溫度控制在 15-20°C，在攪拌狀態(tài)下，將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到是其體積4-6倍的、重量濃度為 90%以上的酒精中，加完后繼續(xù)攪拌0. 5-1. 5小時，再靜止沉淀10小時以上；(5)脫水烘干沉淀結(jié)束后棄去上層酒精，收集沉淀，進(jìn)入脫水干燥工序，即得硫 酸軟骨素成品。本發(fā)明進(jìn)一步改進(jìn)方案是，所述酒精的重量濃度為95%、或95%以上。其中步驟 (4)的溶液含酒精的重量濃度始終保持在75%、或75%以上。本發(fā)明取得的效果是一、本發(fā)明將經(jīng)過氧化得到的硫酸軟骨素溶液，調(diào)節(jié)PH至5-6，溫度控制在 15-20°C，緩慢加入到攪拌中的95%酒精中，整個過程中酒精重量濃度始終保持在75%及 其以上。經(jīng)沉淀得到的硫酸軟骨素質(zhì)地酥松，容易脫水、烘干。二、產(chǎn)品的色澤好，質(zhì)量穩(wěn)定，硫酸軟骨素的含量在98%以上。
三、產(chǎn)品的有機(jī)溶劑殘留極少，低于0. 2 %。四、生產(chǎn)工序短、操作簡單，得到的硫酸軟骨素由于質(zhì)地酥松、顆粒細(xì)小，不需要粉碎，具有節(jié)約能源、節(jié)約生產(chǎn)成本的優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式(1)堿提、酶解原料(軟骨)100Kg加水浸沒，用氫氧化鈉調(diào)PH至8. 5，升溫至 55-60°C，保溫5小時，然后加入2Kg的堿性蛋白酶，保持PH8. 5，保溫55_60°C攪拌7小時， 升溫至沸騰15分鐘左右，過濾，得濾液500L ；(2)酒精沉淀將步驟⑴得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，在攪拌狀態(tài)下，向溶 液中加入氯化鈉15Kg，再加入溶液體積2. 5倍的重量濃度為95%的酒精1250L，靜止8小 時，過濾得到硫酸軟骨素沉淀；(3)氧化將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入200L水中溶解，同時向水中加 入6Kg氯化鈉，使其含氯化鈉重量濃度為3 %，含硫酸軟骨素重量濃度為5 %，用氫氧化鈉調(diào) PH至11，加入4Kg重量濃度為20%雙氧水氧化8小時，過濾得濾液；(4)反沉淀調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5-6，溫度控制在17°C左 右，在攪拌狀態(tài)下，將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到重量濃度為95%的1000L酒精中，加完后 繼續(xù)攪拌1小時，再靜止沉淀16小時；(5)脫水烘干沉淀結(jié)束后棄去上層酒精，收集沉淀，進(jìn)入脫水干燥工序，即得硫 酸軟骨素成品13. 6Kg，含量98%，得率為13.3%。
權(quán)利要求
反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法，其特征在于包括下列步驟(1)堿提、酶解軟骨原料加水浸沒，用堿調(diào)PH至8-9，升溫至55-60℃，保溫4-6小時，然后加入堿性蛋白酶，保持PH8-9，保溫55-60℃攪拌6-8小時，升溫至沸騰12-18分鐘，過濾得到硫酸軟骨素溶液；(2)酒精沉淀將步驟(1)得到的硫酸軟骨素溶液降至室溫，在攪拌狀態(tài)下，向溶液中加入氯化鈉，使溶液含氯化鈉重量濃度為1-4％，再加入溶液體積2-3倍的重量濃度為90％以上的酒精，靜止6小時以上，過濾得到硫酸軟骨素沉淀；(3)氧化將步驟(2)得到的硫酸軟骨素沉淀加入水中溶解，同時向水中加入氯化鈉，使其含氯化鈉重量濃度為1-4％，含硫酸軟骨素重量濃度為3-5％，調(diào)PH至10-12，加入溶液重量的1-3％雙氧水或過錳酸鉀氧化6小時以上，過濾得濾液；(4)反向沉淀調(diào)節(jié)步驟(3)得到的硫酸軟骨素溶液PH至5-6，溫度控制在15-20℃，在攪拌狀態(tài)下，將硫酸軟骨素溶液緩慢加入到是其體積4-6倍的、重量濃度為90％以上的酒精中，加完后繼續(xù)攪拌0.5-1.5小時，再靜止沉淀10小時以上；(5)脫水烘干沉淀結(jié)束后棄去上層酒精，收集沉淀，進(jìn)入脫水干燥工序，即得硫酸軟骨素成品。
2.如權(quán)利要求1所述的反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法，其特征在于所述酒精的重 量濃度為95%、或95%以上。
3.如權(quán)利要求1所述的反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法，其特征在于其中步驟(4) 的溶液含酒精的重量濃度始終保持在75%、或75%以上。
全文摘要
本發(fā)明公開了反向沉淀生產(chǎn)硫酸軟骨素的方法，本發(fā)明將經(jīng)過氧化得到的硫酸軟骨素溶液，調(diào)節(jié)pH至5-6，溫度控制在15-20℃，緩慢加入到攪拌中的95％酒精中，整個過程中酒精重量濃度始終保持在75％及其以上。經(jīng)沉淀得到的硫酸軟骨素質(zhì)地酥松，容易脫水、烘干，不需要粉碎，具有節(jié)約能源、節(jié)約生產(chǎn)成本的優(yōu)點(diǎn)。產(chǎn)品的色澤好，質(zhì)量穩(wěn)定，硫酸軟骨素的含量在98％以上。產(chǎn)品的有機(jī)溶劑殘留極少，低于0.2％。
文檔編號C08B37/08GK101824446SQ201010112838
公開日2010年9月8日 申請日期2010年2月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月24日
發(fā)明者劉榜惠, 張志斌, 袁紅英 申請人:淮安麥德森化學(xué)有限公司