專(zhuān)利名稱(chēng)：環(huán)縮酚酸肽pf1022衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有一種環(huán)—四縮酚酸肽共同骨架結(jié)構(gòu)的PF1022的新衍生物，它是一種環(huán)縮酚酸肽，并具有抗蠕蟲(chóng)活性，特別是具有優(yōu)良的抗蠕蟲(chóng)活性；也涉及含有該衍生物的抗蠕蟲(chóng)劑，本發(fā)明的新PF1022衍生物對(duì)寄生在動(dòng)物體的蠕蟲(chóng)具有優(yōu)良的抗蠕蟲(chóng)活性，由此可用作抗蠕蟲(chóng)劑。
PF1022物質(zhì)是在研究抗家禽蛔蟲(chóng)的抗蠕蟲(chóng)化合物過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的一種環(huán)縮酚酸肽[見(jiàn)日本專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)(kokai)號(hào)HEI 3—35796，歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)0382173A2和“J.Antibiotics”，45，692(1992)]。此外，PF1022菌株(以FERM BP—2671保藏于布達(dá)佩斯條約規(guī)定下的Fsukua—shi的生物科學(xué)和人體技術(shù)國(guó)際研究院)產(chǎn)生的，并且是用下列式(A)表示的一種環(huán)縮酚酸肽
PF1022物質(zhì)是L—N—甲基亮氨酸[(CH3)2—CH—CH2—CH(NH—CH3)COOH]，D—乳酸[CH3—CH(OH)COOH]和D—苯基乳酸[C6H5—CH2—CH(OH)COOH]通過(guò)酯鍵和酰胺鍵形成的一種縮酚酸肽，并用下列化學(xué)式(A’)表示環(huán)—[L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac](A’)其中Meleu是用下列化學(xué)式表示的一個(gè)N—甲基亮氨酸殘基 Lac是用下列化學(xué)式表示的一種乳酸 以及Phlac是用下列化學(xué)式表示的苯基乳酸 培養(yǎng)上述絲狀真菌PF1022菌株，除可生產(chǎn)上述PF1022物質(zhì)外，還可生產(chǎn)下列式(B)的PF1022B物質(zhì)，式(C)的PF1022C物質(zhì)，式(D)的PF1022D物質(zhì)和式(E)的PF1022E物質(zhì)。它們都具有抗蠕蟲(chóng)活性，并由本發(fā)明人全部分離出來(lái)[見(jiàn)日本專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)朒EI3—163085，現(xiàn)在的日本專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)(Kokai)號(hào)HEI 5—170749；但提到PF1022E的是日本專(zhuān)利申請(qǐng)HEI 4—279094(1992年10月19日申請(qǐng)但還沒(méi)有公開(kāi))]。 PF 1022B物質(zhì) PF 1022C物質(zhì)
PF 1022D物質(zhì) PF 1022E物質(zhì)順便說(shuō)一下，PF1022E物質(zhì)是一個(gè)至今還沒(méi)有報(bào)道的新化合物。
上述PF 1022物質(zhì)和PF 1022B到E物質(zhì)都具有抗蠕蟲(chóng)活性，并具有顯著的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，即它們都有一個(gè)大的環(huán)—四縮酚酸肽結(jié)構(gòu)作基本骨架，并且不僅有四個(gè)N—甲基和四個(gè)異丁基側(cè)鏈，而且還有0—3個(gè)甲基和1—4個(gè)芐基側(cè)鏈，并且它們的結(jié)構(gòu)中含有八個(gè)不對(duì)稱(chēng)原子。在這組PE1022物質(zhì)中的環(huán)縮酚酸肽骨架結(jié)構(gòu)中，由4個(gè)酯鍵和4個(gè)酰胺鍵形成的一個(gè)24節(jié)環(huán)。可推測(cè)出這個(gè)結(jié)構(gòu)在開(kāi)發(fā)生物活性中起著重要的作用。
所謂的蠕蟲(chóng)感染不僅能對(duì)人和動(dòng)物的健康有害，還對(duì)農(nóng)業(yè)引起嚴(yán)重的損害。人們一直尋求一種具有抗蠕蟲(chóng)活性的新的和有用的物質(zhì)以及這種抗蠕蟲(chóng)活性物質(zhì)的有益的制備方法。本發(fā)明人對(duì)這種要求極大關(guān)注，并為制備和提供與PF 1022物質(zhì)相關(guān)的新物質(zhì)作了研究。
PF 1022物質(zhì)是上述絲狀真菌的一種發(fā)酵產(chǎn)物。Makoto Ohyama等人提出了一種全部合成制備PF 1022物質(zhì)的方法，該方法包括如下列反應(yīng)流程圖(A)所示的步驟[見(jiàn)日本專(zhuān)利申請(qǐng)HEI 4—131139(申請(qǐng)日1992年5月22日)和日本專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)HEI 5—320148(已公開(kāi)1993年12月3日)]。反應(yīng)流程圖(A)
順便提一下，作為到目前為止已知制備環(huán)縮酚酸肽的全部合成方法的一個(gè)例子，是“Agric.Biol.Chem.”43(5)，1079—1083(1979)所報(bào)道的方法，它是與恩鐮刀菌素C的全部合成相關(guān)的方法。
為了提供與PF 1022物質(zhì)具有共同的環(huán)—四縮酚酸肽骨架結(jié)構(gòu)但卻具有優(yōu)于PF 1022物質(zhì)的抗蠕蟲(chóng)活性的新環(huán)縮酚酸肽，本發(fā)明人已進(jìn)行了各種研究。結(jié)果已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過(guò)在溫和的反應(yīng)條件且有銠催化劑存在下，氫化PF 1022物質(zhì)或PF 1022B物質(zhì)或PF 1022E物質(zhì)的多芐基中的一個(gè)或多個(gè)苯基形成環(huán)己基，或者通過(guò)取代反應(yīng)來(lái)化學(xué)改變苯基都能夠合成一系列PF 1022物質(zhì)的新衍生物或相關(guān)產(chǎn)物。也發(fā)現(xiàn)按照總合成方法能制備PF 1022物質(zhì)的一系列新衍生物，這種全合成方法是將L—N—甲基亮氨酸(L—Meleu)或L—亮氨酸與α—羥基羧酸，特別是D—或L—乳酸衍生物，(它們可以在其β—碳原子上帶有取代基)結(jié)合，然后通過(guò)酯鏈縮合亮氨酸化合物的羧基和乳酸化合物的α-羥基，通過(guò)一個(gè)酰胺鍵縮合所得到的酯化產(chǎn)物的羧基與亮氨酸化合物的氨基，按需要繼續(xù)進(jìn)一步縮合已縮合的產(chǎn)物，由此合成一個(gè)鏈狀四縮酚酸酞，然后環(huán)化這個(gè)四縮酚酸肽。
如上所述本發(fā)明人所合成的一系列PF 1022的新衍生物一般能用下述式(1)來(lái)表示。用動(dòng)物試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)這些合成的新衍生物具有有用的抗蠕蟲(chóng)活性。
本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供一種環(huán)縮酚酸肽，即用下列化學(xué)式表示的PF 1022的衍生物 其中(i)R2和R4各是環(huán)己甲基或芐基，R1和R3各是甲基或環(huán)己甲基或芐基，而X，Y，Z和Q各是甲基，此時(shí)要求R1，R2，R3和R4中至少一個(gè)是環(huán)己甲基，或者(ii)R1，R2，R3和R4各是含1到11個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，它們可以相同也可以不同，和X，Y，Z和Q各是甲基，或(iii)R1和R3各是含1到11個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，它們可以相同也可以不同，和R2和R4各是未取代的芐基，X，Y，Z和Q各是甲基，但此時(shí)要求當(dāng)R1是甲基時(shí)R3不是甲基，或者(iv)R1，R2，R3各為含1到11個(gè)碳原子的支鏈或直鏈烷基，它們相互可以相同也可以不同，和R4是芐基的苯核上有取代基或無(wú)取代基的芐基，而X，Y，Z和Q各是甲基，或者(v)當(dāng)R2和R4二者都是芐基時(shí)R1和R3二者都是甲基，且X、Y、Z和Q中至少一個(gè)是氫，但其余的都是甲基，或者(vi)R1，R3，X、Y、Z和Q都是甲基，R2是芐基苯核上有取代基或無(wú)取代基的芐基，R4是芐基苯核上有取代基的芐基。
實(shí)施本發(fā)明的最佳方案作為優(yōu)選實(shí)施方案，上述式(I)的PF 1022新衍生物其中包括用下述式(I—i—a)表示的PF 1022物質(zhì)的氫化衍生物；如下述式(l—i—b)表示的PF 1022B物質(zhì)的氫化衍生物；下述式(I—ii0的環(huán)縮酚酸肽，下述式(I—iii)的環(huán)縮酚酸肽，下述式(I—iv)的環(huán)縮酚酸肽，下述式(I—v)的環(huán)縮酚酸肽，下述式(I—vi—a)的環(huán)縮酚酸肽以及下述式(I—vi—b)的環(huán)縮酚酸肽。
(1)如下式表示的pH 1022物質(zhì)的氫化衍生物 其中R2a和R4a各是環(huán)己甲基或芐基，但要求R2a和R4a中至少一個(gè)是環(huán)己甲基。
(2)如下式表示的PF 1022B物質(zhì)的氫化衍生物 其中R1b，R2b，R3b和R4b各是環(huán)己甲基或芐基，但要求R1b，R2b，R3b和R4b中至少一個(gè)是環(huán)己甲基。
(3)用下式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中R1c，R2c，R3c和R4c各是含1到11個(gè)碳原子的，尤其是含1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，它們可以相同也可以不同。
(4)用下式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中R1d和R3d各是含1到11個(gè)碳原子，尤其是含1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，它們可以相同或不同，但要求R1d和R3d不同時(shí)為甲基。
(5)用下式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中R1c，R2c和R3c各是含1到11個(gè)碳原子，尤其是含1到6個(gè)碳原子的直鏈或直鏈烷基，它們可以相同或不同，G，L和M分別表示氫或取代基，特別是鹵原子，羥基，烷氧基，低級(jí)鏈烯基氧基，苯基—低級(jí)烷氧基，烷基羰基氧基，四氫吡喃基氧基或三苯甲氧基。
(6)用下式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中Xa，Ya，Za和Qa中至少一個(gè)是氫，其余都為甲基；優(yōu)選當(dāng)Ya和Qa是氫時(shí)Xa和Za為甲基，或者當(dāng)Ya和Qa為甲基時(shí)Xa和Za是氫。
(7)用下式表示環(huán)縮酚酸肽 其中G’，L’的M’分別表示取代基，特別是鹵原子，羥基，烷氧基，低級(jí)鏈烯氧基，苯基—低級(jí)烷氧基，烷基羰基氧基，四氫吡喃基氧基，或三苯甲氧基。
(8)用下式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中G1，L1和M1分別表示取代基，特別是鹵原子，羥基，烷氧基，低級(jí)鏈烯氧基，苯基—低級(jí)烷基，烷基羰基氧基，四氫吡喃氧基或三苯甲氧基。
下列表1列出了本發(fā)明第一方面的式(I)PF 1022衍生物的例子。表1中，每個(gè)例號(hào)對(duì)應(yīng)于本文后面將要描述的制備例中相應(yīng)化合物的例號(hào)。
表1中，Me表示甲基，Bn為芐基，ChxyMe為環(huán)己甲基，i—Pr為異丙基，n—Bu為正丁基，Sec—Bu為仲丁基而i—Bu為異丁基。
表1 實(shí)施例 物質(zhì)編號(hào) R1R2R3R4X Y Z Q1&2 PF1022-AHHMe ChxyMe Me Bn Me MeMeMe1 PF1022-ADHMe ChxyMe Me ChxyMe Me MeMeMe1 PF1022-BTHChxyMe ChxyMe ChxyMe ChxyMe Me MeMeMe
表1(續(xù)-1)實(shí)施例 物質(zhì)編號(hào)R1R2R3R4X Y Z Q3PF1022-002Me Me Me Me MeMeMeMe13PF1022-209Me i-Pr Me i-PrMeMeMeMe15PF1022-217Men-C16H13Men-C6H13MeMeMeMe9PF1022-203i-PrBn i-PrBn MeMeMeMe10PF1022-205sec-Bu Bn sec-Bu Bn MeMeMeMe11PF1022-207n-BuBn n-BuBn MeMeMeMe12PF1022-225Me Bn n-BuBn MeMeMeMe14PF1022-216Men-C6H13Me Bn MeMeMeMe16PF1022-218Me Bn Me Bn MeH MeH17PF1022-219Me Bn Me Bn H MeH Me4PF1022-003Me Bn Me i-BuMeMeMeMe
表1 (續(xù)-2)實(shí)施例 物質(zhì)編號(hào) R1R2R3R4X Y Z Q6 PF1022E Me BnMe 對(duì)-羥基-芐基 Me Me Me Me5 PF1022-005Me BnMe 對(duì)-甲氧基- Me Me Me Me芐基7 PF1022-201Me 對(duì)-芐基- Me 對(duì)-芐基- Me Me Me Me氧芐基氧芐基8 PF1022-202Me 對(duì)-羥基-芐基 Me 對(duì)-羥基-芐基 Me Me Me Me18 PF1022-215Me BnMe 對(duì)-叔-丁氧基 Me Me Me Me-芐基19 PF1022-006Me BnMe 對(duì)-硬脂酰氧Me Me Me Me芐基20 PF1022-011 Me BnMe 3，5-二-碘-Me Me Me Me4-羥基芐基21 PF1022-012 Me BnMe 3，5-二-碘-Me Me Me Me4-甲氧基芐基表1(續(xù)3)實(shí)施例 物質(zhì)編號(hào) R1R2R3R4X Y Z Q22 PF1022-013 MeBnMe對(duì)-異丁氧基羰基氧基MeMeMeMe芐基23 PF1022-016 MeBnMe對(duì)-乙氧基芐基 MeMeMeMe24 PF1022-018 MeBnMe對(duì)-正-丙氧基芐基 MeMeMeMe25 PF1022-019 MeBnMe對(duì)-異丙氧基芐基MeMeMeMe26 PF1022-020 MeBnMe對(duì)-烷氧基芐基 MeMeMeMe27 PF1022-021 MeBnMe對(duì)-正-丁氧基芐基 MeMeMeMe28 PF1022-022 MeBnMe對(duì)-芐基氧基芐基MeMeMeMe29 PF1022-023 MeBnMe3，5-二氯-4- MeMeMeMe羥基芐基表1(續(xù)4)實(shí)施例 物質(zhì)編號(hào)R1R2R3R4X Y Z Q30 PF1022-025MeBnMe3，5-二溴-4- Me MeMeMe羥基芐基31 PF1022-026MeBnMe3，5-二溴-4- Me MeMeMe甲氧基芐基32 PF1022-029MeBnMe對(duì)-正-辛氧基-芐基 Me MeMeMe33 PF1022-224MeBnMe對(duì)-四氫吡喃氧基芐基Me MeMeMe34 PF1022-223MeBnMe對(duì)-三苯甲氧基芐基 Me MeMeMe
表1中，實(shí)施例1的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—AHH，—ADH和—BTH)是用通式(I—i—a)或(I—i—b)表示的衍生物的例子，而實(shí)施例13和15的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—209和—217)是用通式(I—ii)表示的衍生物的例子。實(shí)施例9，10，11和12的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—203，—205，—207和—225)是用通式(I—iii)表示的衍生物的例子。實(shí)施例14的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—216)是用通式(I—iv)表示的衍生物的例子。實(shí)施例16和17的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—218和—219)是用通式(I—v)表示的衍生物的例子。實(shí)施例7和8的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—201和—202)是用通式(I—vi—a)表示的衍生物的例子。而且，實(shí)施例5，6和18—34的物質(zhì)(物質(zhì)編號(hào)為PF 1022—005，PF 1022E，PF1022—215，—006，—011，—012，—)13，—016，—018，—019，—020，—021，—022，—023，—025，—026，—029，—224和—223)是用通式(I—vi—b)表示的衍生物的例子。
本文下面將描述制備本發(fā)明的通式(I)的PF1022衍生物的方法。
(a)用氫化法制備PF 1022物質(zhì)和PF 1022B物質(zhì)用發(fā)酵法制得的PF 1022物質(zhì)或PF 1022B物質(zhì)作起始物分別合成本發(fā)明通式(I)的衍生物中的通式為(I—i—a)或(I—i—b)的氫化衍生物或氫—衍生物。
人們一般認(rèn)為化學(xué)改良，特別是氫化苯環(huán)如苯基比其它反應(yīng)如作為親電子取代反用的硝化反應(yīng)或?；磻?yīng)更難。一般在高溫和高壓下進(jìn)行廣泛的氫化，把苯基還原為環(huán)己基。PF 1022物質(zhì)具有天然產(chǎn)生的復(fù)雜化學(xué)結(jié)構(gòu)?？梢酝茰y(cè)如果PF 1022物質(zhì)在高溫高壓和常規(guī)條件下進(jìn)行氫化，也會(huì)有因水解而發(fā)生的降解反應(yīng)。在溫和反應(yīng)條件下氫化的方法，即在常溫常壓下進(jìn)行的氫化對(duì)有效還原PF1022物質(zhì)中的苯基是最理想的。從這個(gè)觀點(diǎn)出發(fā)，本發(fā)明人已對(duì)各種還原催化劑的使用進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)銠催化劑最適合于氫化PF 1022物質(zhì)的支鏈芐基中的苯基形成環(huán)己基。
氫化PF 1022來(lái)制備本發(fā)明通式(I—i—a)或(I—i—b)的衍生物步驟中可以使用的還原催化劑的例子有銠，銠—載體催化劑如銠—碳和銠—礬土，和陽(yáng)離子銠的絡(luò)合物如三(三苯基膦)銠。在使用中，優(yōu)選銠—碳催化劑。這個(gè)氫化過(guò)程能夠盡可能降低對(duì)催化還原的氫壓和加熱程度，但是為了縮短反應(yīng)時(shí)間和抑制副產(chǎn)物的產(chǎn)生，升高壓力和加熱到一定程度也是允許的。為了使反應(yīng)平穩(wěn)地進(jìn)行，需要把起始物溶于惰性溶劑如甲醇，乙醇或乙酸乙酯中，然后攪拌所得到的溶液進(jìn)行反應(yīng)。
反應(yīng)向用已知方法例如過(guò)濾，柱層析或用惰性溶劑部分結(jié)晶法進(jìn)行目標(biāo)產(chǎn)物(I—i—a)或(I—i—b)的分離(b)用完全合成法制備用一種完全合成法制備本發(fā)明的通式為(I)的衍生物，也就是，提供下列化合物(1)，(2)，(3)，(4)，(5)和(6)，通過(guò)一個(gè)酯鍵或一個(gè)酰胺鍵在適當(dāng)結(jié)合中連續(xù)縮合。所用的起始物如下化合物(1)N—甲基—L—亮氨酸(結(jié)構(gòu)式(CH3)2—CH—CH2—CH(NH—CH3)COOH，縮寫(xiě)H—L—Melen—OH)化合物(2)L—亮氨酸(結(jié)構(gòu)式(CH3)2—CH—CH2—CH(NH2)COOH，縮寫(xiě)H—L—Len—OH)化合物(3)在其β—碳原子上引入一個(gè)所需取代基的D—或L—α—羥基羧酸，優(yōu)選，D—或L—乳酸或乳酸，分別用下列式子表示D—或L—R1—CH(OH)COOH順便說(shuō)一下， 基團(tuán)在下文將縮寫(xiě)為A1?；衔?4)D—或L—α—羥基羧酸，用下式表示D—或L—R2—CH(OH)COOH順便說(shuō)一下， 基團(tuán)在下文將縮寫(xiě)為A2?；衔?5)D—或L—α—羥基羧酸，用下式表示D—或L—R3—CH(OH)COOH順便說(shuō)一下， 基團(tuán)在下文將縮寫(xiě)為A3。化合物(6)D—或L—α—羥基羧酸，用下式表示D—或L—R4—CH(OH)COOH順便說(shuō)一下，基團(tuán) 將在下文縮寫(xiě)為A4。
在上述化學(xué)式中，R1，R2，R3和R4具有與前文給出的通式(I)所定義的R1，R2，R3和R4的相同含義。
在完全合成工藝中的第一個(gè)步驟中，化合物(1)或(2)的羧基與化合物(3)，(4)，(5)或(6)的α—羥基反應(yīng)。把下列分別在一端具有氨基和另一端具有羧基的四個(gè)化合物(7)—(10)制成含有酯鍵的初級(jí)縮合物。
化合物(7)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A1—OH化合物(8)H—L-MeLeu(或Leu)—D—A2—OH化合物(9)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A3—OH化合物(10)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A4—OH在完全合成工藝的第二和隨后步驟中，通過(guò)酰胺鍵以適當(dāng)結(jié)合把化合物(7)—(10)中的兩個(gè)相互縮合，由此以下述的反應(yīng)流程圖B或C的圖示順序合成制備化合物(11)，化合物(12)，化合物(13)和化合物(14)，或者以本文后面給出的反應(yīng)流程圖D所圖示的順序合成制得化合物(15)。通過(guò)—個(gè)酰胺鍵環(huán)化一端有氨基而另一端有羧基的鏈狀化合物(13)或化合物(15)，制得通式為(I)的環(huán)狀PF 1022衍生物。
化合物(11)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A1—L—Meleu(或Leu)—D—A2—OH，化合物(12)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A1—L-Meleu(或Leu)—D—A2—L—MeLeu(或Leu)—D—A3—OH化合物(13)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A1—L—Meleu(或Leu)—D—A2—L—MeLeu(或Leu)—D—A3—L—MeLeu(或Leu)—D—A4—OH化合物(14)H—L—MeLeu(或Leu)—D—A3—L—Meleu(或Leu)—D—A4—OH化合物(15)H—[L—MeLeu(或Leu)—D—A1—L—Meleu(或Leu)—D—A2]—OH反應(yīng)流程圖B 反應(yīng)流程圖c
例如，當(dāng)用乳酸作為各個(gè)化合物(3)，(4)，(5)和(6)時(shí)，就能獲得通式為(I)的這樣一種衍生物，其中R1，R2，R3和R4分別為甲基。當(dāng)用2—羥基異戊酸作為各個(gè)化合物(3)，(4)，(5)和(6)時(shí)，就獲得通式為(1)的這樣一種衍生物，其中R1，R2，R3和R4分別是異丙基。當(dāng)用2—羥基—己酸作為各個(gè)化合物(3)，(4)，(5)和(6)時(shí)，就能獲得式(I)的這樣一種衍生物，其中R1，R2，R3和R4分別是一個(gè)正丁基。當(dāng)用2—羥基—3—甲基戊酸作為各個(gè)化合物(3)，(4)，(5)和(6)時(shí)，就能獲得式(I)的這樣一種衍生物，其中R1，R2，R3和R4分別為仲丁基。當(dāng)用2—羥基—4—甲基—正戊酸作為各個(gè)化合物(3)，(4)，(5)和(6)時(shí)，就能得到式(I)的這樣一種衍生物，其中R1，R2，R3和R4別為異丁基。例如，當(dāng)使用2—羥基辛酸作為化合物(4)時(shí)，就能得到式(I)這樣一種衍生物，其中R2為n—C6H13。當(dāng)使用苯基乳酸和對(duì)—羥基苯基乳酸分別作為化合物(4)和(6)時(shí)，就能得到式(I)的這樣一種衍生物，其中R2和R4分別為芐基和對(duì)—羥基芐基。
—般，將相應(yīng)的α—氨基酸與硝酸鈉反應(yīng)，將其氨基轉(zhuǎn)化為重氮基(—N2)，然后經(jīng)酸處理將重氮基轉(zhuǎn)化為羥基來(lái)制備作為化合物(4)，(5)或(6)的α—羥基羧酸。
當(dāng)具有通式(I)的PF 1022衍生物的R1和R3相同而R2和R4也相同時(shí)，也就是說(shuō)，當(dāng)起始化合物(3)的R1和化合物(5)的R3相同而起始化合物(4)的R2和化合物(6)的R4相同時(shí)，唯一必要的是把化合物(3)和(4)作為起始α—羥基羧酸按照完全合成的方法制備這樣一種PF 1022衍生物。按照下述反應(yīng)流程圖D詳述的順序，用亮氨酸化合物(1)或(2)與化合物(3)或(4)結(jié)合，通過(guò)酯化作用將基縮合，通過(guò)形成酰胺鍵分別制備中間產(chǎn)物(7)和(8)，借助化合物(11)生產(chǎn)鏈狀化合物(15)，然后將化合物(15)環(huán)化來(lái)制備這種PF 1022的目標(biāo)衍生物(I)(其中R1＝R3，而R2＝R4)。反應(yīng)流程圖D
在通式為(I)的PF 1022衍生物和作為起始物的α—羥基羧酸化合物(3)—(6)中，R1，R2，R3和R4各是一個(gè)C1—C11的烷基。這類(lèi)烷基的具體例子有甲基，乙基，丙基(特別是，正丙基，異丙基)，丁基(特別是，正丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基)，戊基(特別是，正戊基，異戊基，仲戊基，1，2—二甲丙基，新戊基，1—乙基丙基，1，1—二甲基丙基)，己基，庚基，辛基，壬基和癸基。優(yōu)選C1—C6的低級(jí)烷基。
在通式為(I)的化合物或化合物(3)，(4)，(5)或(6)中，當(dāng)R1，R2，R3和R4各為一個(gè)取代的或未取代的苯基或芐基時(shí)，另—方面，這些取代的具體例子有苯基；鄰—，間—和對(duì)—羥基苯基；鄰—，間—和對(duì)—(C1—C10)烷基苯基；鄰—，間—和對(duì)—(C1—C10)烷基苯基；鄰—，間—和對(duì)—鹵代(F，Cl，Br，I)苯基。其它例子有芐基；鄰—，間—和對(duì)—羥基芐基，鄰—，間—和對(duì)—(C1－10)烷基芐基；鄰—，間—和對(duì)—(C1－10)烷氧基芐基；和鄰—，間—和對(duì)—鹵代(F、Cl、Br、I)芐基。在芐基苯核上亞取代數(shù)為1—4。
按照本發(fā)明完全合成法制備通式(I)表示的PF 1022衍生物的方法將在本文后面用上述的反應(yīng)流程圖(B)或(C)來(lái)進(jìn)行描述。概括為，第一步驟通過(guò)酯鍵分別把化合物(1)或(2)與化合物(3)；化合物(1)或(2)與化合物(4)；化合物(1)或(2)與化合物(5)；和化合物(1)或(2)與化合物(6)縮合來(lái)制備化合物(7)，(8)，(9)和(10)。
同時(shí)，使用氨基保護(hù)的亮氨酸化合物(1)或(2)和α—羧基保護(hù)的化合物(3)，(4)，(5)和(6)，也就是α—羧基—保護(hù)的α—羥基羧酸。作為酯鍵縮合的方法，需要在縮合劑存在下，使用各具有其游離形式α—羥基的化合物(3)—(6)進(jìn)行縮合。當(dāng)羧基保護(hù)的化合物(3)，(4)，(5)或(6)是D—異構(gòu)體時(shí)，它的縮合是在DCC和一種附加劑(一種在普通成肽反應(yīng)中不發(fā)生外消旋作用的試劑，如N—羥基丁二酰亞胺，N—羥基苯并三唑等)存在下進(jìn)行的。另一方面，當(dāng)羧基保護(hù)的化合物(3)，(4)，(5)或(6)是L—異構(gòu)體時(shí)，在轉(zhuǎn)化化合物(3)，(4)，(5)或(6)的α—羥基的構(gòu)象時(shí)進(jìn)行縮合。因?yàn)镃ohen氏反應(yīng)不引起外消旋作用，所以用它作縮合方法是最理想的。
而且，通過(guò)酯鍵把氨基保護(hù)的亮氨酸化合物(1)或(2)與一個(gè)反應(yīng)衍生物在羧基保護(hù)的化合物(3)，(4)，(5)和(6)的α-OH基處進(jìn)行縮合。在這種方法中，當(dāng)α—羧基保護(hù)的化合物(3)，(4)，(5)或(6)是D—異構(gòu)體時(shí)，最好該化合物已進(jìn)行了用氯原子，溴原子等取代α—羥基的反應(yīng)。當(dāng)合物是L—異構(gòu)體時(shí)，最好把α—羥基轉(zhuǎn)化成一個(gè)磺酸酯如甲苯磺酸酯，甲基磺酸酯等。
按照上述縮合方法，制備了酯型化合物(7)，(8)，(9)或(10)，其中羰基和氨基均已被保護(hù)。在制備以上化合物(7)—(10)所用的起始物化合物(1)或(2)和化合物(3)—(6)中引入的每個(gè)保護(hù)基應(yīng)當(dāng)優(yōu)選是可除去的。
這類(lèi)羧基保護(hù)基的例子包括在酸水解或還原條件下能除去的那些基團(tuán)，如叔丁基，芐基，對(duì)甲氧基芐基，二苯甲基，和三苯甲基，和中性條件下可除去的那些基團(tuán)如烯丙基。
氨基保護(hù)基的例子包括酸水解或還原條件下可除去的那些基團(tuán)，如芐基氧基羰基，叔丁氧基羰基，對(duì)甲氧基芐氧基羰基和甲?；缓椭行詶l件下可除去的以及肽化學(xué)中常用的那些基團(tuán)，如芳氧基羰基。
必須從這樣獲得的各個(gè)保護(hù)的酯型化合物(7)，(8)，(9)和(10)中分別并優(yōu)選除去羧基保護(hù)基和氨基保護(hù)基。當(dāng)該羧基保護(hù)基在還原條件下可除去時(shí)，必須選擇一個(gè)酸水解條件下可除去的氨基保護(hù)基作該氨基保護(hù)基。相反情況也是可行的。當(dāng)該氨基保護(hù)基在中性條件下可除去時(shí)，例如，是一個(gè)芳氧基羰基，必須選擇一個(gè)在酸水解條件下可除去的羧基保護(hù)基作該羧基保護(hù)基。相反情況也是可行的。
就除去羧基保護(hù)基或氨基保護(hù)基的方法而言，當(dāng)該保護(hù)基在酸水解條件下可除去時(shí)，用三氟乙酸，甲磺酸，三氟甲磺酸等處理它。最優(yōu)選用三氟乙酸處理。當(dāng)它在還原條件下可除去時(shí)，在用鈀催化劑的還原條件下處理是最好的。當(dāng)保護(hù)基在中性條件下可除去時(shí)，如，是芳基，芳氧基羰基等，在零價(jià)鈀催化劑存在下把它與2—乙基己酸鈀反應(yīng)來(lái)脫去保護(hù)。
在下一個(gè)步驟中，如反應(yīng)流程圖B中所示，通過(guò)酰胺鍵縮合脫去保護(hù)的化合物(7)和脫去保護(hù)的化合物(8)來(lái)制備化合物(11)。如上所述，當(dāng)在化合物(8)和(7)之間進(jìn)行縮合時(shí)，可能在化合物(7)的氨基和化合物(8)的羧基之間或者在化合物(8)的氨基和化合物(7)的羧基之間形成一個(gè)酰胺鍵。由化合物(7)和(8)縮合得到的化合物(11)與化合物(9)進(jìn)一步縮合。這里可能在化合物(11)的氨基和化合物(9)的羧基之間或在化合物(9)的氨基和化合物(11)的羧基之間形成一個(gè)酰胺鍵。由化合物(11)和(9)縮合得到的化合物(12)然后與化合物(10)縮合。在這個(gè)縮合步驟中，可能在化合物(12)的氨基和化合物(10)的羧基之間或者在化合物(10)的氨基和化合物(12)的羧基之間形成一個(gè)酰胺鍵。結(jié)果，制得了化合物(13)。
在上述各個(gè)縮合步驟中，保護(hù)基的除去和重新引入是按形成一個(gè)所需酰胺鍵的要求適當(dāng)進(jìn)行的。
如反應(yīng)流程圖C中所述，化合物(9)也能與化合物(10)縮合。在這種情況下，可能在化合物(9)的氨基和化合物(10)的羧基之間或者在化合物(10)的氨基和化合物(9)的羧基之間形成了一個(gè)酰胺鍵。由化合物(8)和(7)縮合已得到的化合物(11)能夠與由化合物(9)和(10)縮合已得到的化合物(14)縮合。在這種情況下，可能在化合物(11)的氨基和化合物(14)的羧基之間或者在化合物(14)的氨基和化合物(11)的羧基之間形成一個(gè)酰胺鍵。如反應(yīng)流程圖D中所述，用一個(gè)酰胺鍵把兩個(gè)化合物(11)的分連在一起制成化合物(15)。
用這樣得到的化合物(13)或化合物(15)的分子內(nèi)閉環(huán)制成通式為(I)的衍生物。用二環(huán)己基碳二亞胺(DDC)或1)—(3—二甲基氨基—丙基)—3—乙基碳二亞胺(EDCI)和一種添加劑[N—羥基丁二酰亞胺(HOSU)，1—羥基苯并三唑(HOBt)等]一起處理化合物(13)或化合物(15)形成閉環(huán)。
在上述閉環(huán)反應(yīng)中使用的溶劑例子有醚類(lèi)溶劑如乙醚，四氫呋喃(THF)和1，4—二噁烷，以及質(zhì)子惰性溶劑如N，N—二甲基甲酰胺(DMF)，乙腈，和氯仿。優(yōu)選四氫呋喃和N，N—二甲基甲酰胺的混合溶劑。在0—50℃，優(yōu)選20—30℃進(jìn)行閉環(huán)反應(yīng)。
如上所述的完全合成方法適合于制備本發(fā)明通式為(I)衍生物中式(I—ii)，(I—iii)，(I—iv)和(I—v)的衍生物。(c)把取代基引入PF 1022或PF 1022E物質(zhì)的制備按照已知的化學(xué)方法，用各種取代基取代芐基(即PF 1022物質(zhì)的側(cè)鏈)苯環(huán)(苯基)上的氫或者取代對(duì)羥苯甲基(具體說(shuō)是，芐基)(即PF 1022E物質(zhì)的側(cè)鏈)的酚羥基中的氫來(lái)制備通式為(I)的新衍生物中式(I—vi—a)和(I—vi—b)的衍生物[參見(jiàn)日本專(zhuān)利申請(qǐng)HEI 4—279094(未公開(kāi))，和將在實(shí)施例6中隨后描述的合成例]。
可以引入到苯環(huán)(即PF 1022物質(zhì)的芐基苯核)或PF 1022E物質(zhì)的芐基酚羥基中的取代基例子有直鏈或支鏈烷基，鏈烯基，炔基，取代或未取代的芐基，二苯甲基，三苯甲基和酰基。特別優(yōu)選烷醇基(alkanoyl)，氨基甲?；?，甲氧基甲基，甲基硫代甲基，和四氫吡喃基?？扇〈江h(huán)上氫的取代基例子有鹵原子，以及象普通親電子取代芳香環(huán)上的氫的取代基。
在一種惰性溶劑中用醚化作用，酰化作用，氨基甲酰化作用等進(jìn)行上述引入取代基的反應(yīng)。通過(guò)與二唑甲烷或雙苯二唑甲烷反應(yīng)，在酸性催化劑存在下與異丁烷或二氫吡喃反應(yīng)，或者與烷基鹵化物，鏈烯基鹵化物，炔基鹵化物，芐基鹵化物，取代的芐基鹵化物或三苯甲基氯化物(具體說(shuō)是三苯甲基氯)反應(yīng)可進(jìn)行酯化。在一種有機(jī)堿如三乙胺或一種無(wú)機(jī)堿如碳酸鉀存在下，與?；u或氯甲酸烷基酯反應(yīng)進(jìn)行?；?。大多數(shù)已知的改性酚羥基的反應(yīng)均可如此應(yīng)用。對(duì)親電子取代反應(yīng)敏感的對(duì)位酚羥基，也能使用鹵化或其它已知的親電子取代。
本發(fā)明通式為(I)的衍生物即，化學(xué)式為(I—i—a)，(I—i—b)，(I—ii)，(I—iii)，(I—iv)，(I—v)，(I—vi—a)和(I—vi—b)的衍生物都具有有用的抗蠕蟲(chóng)活性，并對(duì)哺乳動(dòng)物顯示了較低的急性毒性。
把本發(fā)明的PF 1022的新衍生物與制藥學(xué)上可接受的無(wú)機(jī)酸如鹽酸，硫酸或磷酸，或者與制藥學(xué)上可接受的有機(jī)酸如醋酸，丙酸，檸檬酸或甲磺酸反應(yīng)能將其轉(zhuǎn)化為它們的酸加成鹽。此外，將本發(fā)明PF 1022衍生物或其鹽與一種制藥學(xué)上可接受的固體或液體載體混合能將其配制成抗蠕蟲(chóng)組合物。
所以，本發(fā)明的第二方面是提供一種抗蠕蟲(chóng)組合物，其特征在于該組合物含有一種用通式(I)表示的新的環(huán)縮酚酸肽或其鹽作為活性成分。
本發(fā)明通式為(I)的新衍生物或者含有該衍生物的組合物能夠?qū)?dòng)物口服給藥或非腸道給藥例如直腸給藥。經(jīng)過(guò)一個(gè)適當(dāng)?shù)某跗谠囼?yàn)，根據(jù)所要消除寄生物的種類(lèi)，所治療的宿主動(dòng)物種類(lèi)和各種其它因素。可以確定該衍生物的劑量作為一般原則，當(dāng)口服時(shí)，例如消除家禽回腸，建議以0.05mg/kg或更大的劑量，優(yōu)選0.2mg到3mg/kg口服式(I)化合物，它對(duì)寄生物具有抗蟲(chóng)活性。
用與PF 1022物質(zhì)所使用的完全相同的方法把本發(fā)明式(I)化合物配制成一種抗蠕蟲(chóng)組合物，這種方法在已公開(kāi)的日本專(zhuān)利申請(qǐng)HEI 3—35796或歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)0382173A2中進(jìn)行了描述。
能使用本發(fā)明PF 1022的式(I)衍生物作為抗蠕蟲(chóng)藥的動(dòng)物例子包括家畜，家禽，試驗(yàn)動(dòng)物和寵物，如豬、牛、馬、兔、綿羊，山羊，家禽，鴨，火雞，鼠，小白鼠，荷蘭豬，猴子，狗，貓和小鳥(niǎo)。在這些動(dòng)物上能說(shuō)明問(wèn)題的寄生蟲(chóng)包括牛和羊上的寄生蟲(chóng)如螺旋形捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)，屬于胃線蟲(chóng)屬的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)，小毛蟲(chóng)，屬于古柏線蟲(chóng)屬的線蟲(chóng)。屬于結(jié)節(jié)線蟲(chóng)屬的小結(jié)蟲(chóng)，端盤(pán)吸蟲(chóng)(amphisomes)，腸道絳蟲(chóng)(Moniezia benedeni)，肺蠕蟲(chóng)和肝吸蟲(chóng)；豬上的寄生蟲(chóng)如蛔蟲(chóng)，鞭蟲(chóng)和結(jié)蟲(chóng)；狗身上的寄生蟲(chóng)如蛔蟲(chóng)，鉤蟲(chóng)、鞭蟲(chóng)和犬惡絲蟲(chóng)；在貓身上的寄生蟲(chóng)，如蛔蟲(chóng)和Spirometra mansoni；和雞身上的寄生蟲(chóng)如蛔蟲(chóng)，毛蟲(chóng)和盲蟲(chóng)。本發(fā)明的化合物對(duì)消除人體內(nèi)的寄生蟲(chóng)如蛔蟲(chóng)，蟯蟲(chóng)，鉤蟲(chóng)(十二指腸鉤蟲(chóng)，Ancylostoma ceylanicum，Necator ameri-canus)，定向發(fā)蟲(chóng)，類(lèi)圓線蟲(chóng)和鞭蟲(chóng)也是有效的。
本發(fā)明PF 1022的新衍生物也能用于防治寄生蟲(chóng)傳染。用于治療時(shí)，該衍生物可口服或非胃腸道給藥。當(dāng)口服時(shí)，把該衍生物的液體制劑用一個(gè)胃管等強(qiáng)制給藥，或?qū)⑵渑c每日飼料或飲用水混合后服用，或者將其以適合于口服的普通劑量形式如片劑，膠囊，顆粒，大藥丸，粉末或軟膠囊服用。當(dāng)非胃腸道給藥時(shí)，它可以皮下，肌肉內(nèi)，靜脈內(nèi)，腹膜內(nèi)給藥或者經(jīng)相似的途徑注射以花生油，豆油等的水不溶制劑形式或甘油，聚乙二醇等水溶制劑形式制成的式(I)衍生物。
為預(yù)防寄生蟲(chóng)傳染，常用的一種措施是口服PF 1022衍生物與每天食物的混合物。盡管對(duì)以預(yù)防為目的的服藥時(shí)間沒(méi)有限定，但在大多數(shù)情況下，雛雞服藥2個(gè)月左右，豬服藥5個(gè)月左右。
根據(jù)接受治療動(dòng)物的種類(lèi)，寄生蟲(chóng)的類(lèi)型和給藥方式的不同本發(fā)明PF 1022衍生物的劑量也有所不同。例如，用一根胃導(dǎo)管口服液體制劑去除家禽蛔蟲(chóng)時(shí)，以0.05mg/kg或更多劑量給藥。作為預(yù)防使用，以1ppm或更高濃度，優(yōu)選5到10ppm的濃度把該衍生物與飼料混和連續(xù)給藥。
而且，對(duì)動(dòng)物來(lái)說(shuō)，可以把存在于液狀載體中的本發(fā)明PF 1022衍生物的溶液或懸浮液以皮下或肌肉內(nèi)注射等方式給藥。對(duì)于非腸道給藥，可使用有植物油如花生油或豆油的非水制劑。含有水溶性載體如甘油或聚乙二醇的含水非腸道制劑也能用來(lái)非腸道給藥。這些制劑一般含有0.1到10wt％的本發(fā)明化合物。即使給小鼠以300mg/kg的劑量口服本發(fā)明的PF 1022衍生物，能得到正常的體重增長(zhǎng)而沒(méi)有任何異常。這表明該物質(zhì)的毒性較低。
下列試驗(yàn)將描述本發(fā)明式(I)PF 1022衍生物的抗蠕蟲(chóng)活性。
實(shí)驗(yàn)1雞蛔蟲(chóng)去除試驗(yàn)用已經(jīng)人工傳染了雞蛔蟲(chóng)并用糞便觀察方法確認(rèn)已受傳染的雞(每組三只雞)作試驗(yàn)動(dòng)物。服用各試驗(yàn)物質(zhì)時(shí)，按每只雞的體重(kg)精確計(jì)算的劑量稱(chēng)量試驗(yàn)物質(zhì)，并將其懸浮于含羧甲基纖維素的水中，用一根胃管把所得到的懸浮液以單劑量單位口腔給藥。給藥后，每天計(jì)數(shù)雞排出的蟲(chóng)數(shù)。給藥后七天，處死雞并進(jìn)行解剖，計(jì)數(shù)在雞腸道內(nèi)存留的蟲(chóng)數(shù)。按下列計(jì)算式計(jì)算殺蟲(chóng)百分比 下面表2中總結(jié)了試驗(yàn)結(jié)果。每個(gè)試驗(yàn)物質(zhì)用上面表1所示的相應(yīng)物質(zhì)編號(hào)表示。表2(續(xù))
表2(續(xù))<
<p>試驗(yàn)2對(duì)線蟲(chóng)的體內(nèi)抗蟲(chóng)活性試驗(yàn)分別用蛇形毛園線蟲(chóng)(本文以下縮寫(xiě)為“T”)和捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(chóng)(本文以下縮寫(xiě)為“T”)人工傳染給每只羊，按羊體重(mg)精確計(jì)算的劑量稱(chēng)量試驗(yàn)物質(zhì)，并將其以明膠膠囊形式給每只羊口服。
定量記錄給藥前后羊糞中排出的寄生蟲(chóng)卵數(shù)來(lái)測(cè)定抗蟲(chóng)功效的程度。用定級(jí)數(shù)0，1，2或2評(píng)價(jià)抗蟲(chóng)功效。當(dāng)無(wú)抗蟲(chóng)活性時(shí)把抗蟲(chóng)功效定為“0’級(jí)，當(dāng)觀察到排出的寄生蟲(chóng)卵時(shí)為“2”級(jí)，當(dāng)觀察到寄生蟲(chóng)卵的排出停止時(shí)為“3”級(jí)，也就是，寄生蟲(chóng)已被完全消滅。
表3顯示了對(duì)上述兩種類(lèi)型的羊寄生蟲(chóng)的抗蟲(chóng)活性的試驗(yàn)結(jié)果。
表3
試驗(yàn)3按照下列方法測(cè)試特定PF 1022衍生物對(duì)鼠腸道線蟲(chóng)的抗蟲(chóng)功效。
把16只雄性Wistar鼠分成八組(每組兩只)，給每只鼠皮下注入2000個(gè)巴西日?qǐng)@線蟲(chóng)幼蟲(chóng)。注入后七天，分別給每組小鼠以每只鼠10mg/kg的用量非腸道強(qiáng)迫使用作為試驗(yàn)物質(zhì)的PF 1022，PF1022E，PF 1022—002，PF 1022—003，PF 1022—209，PF 1022—218和PF 1022—219。在給藥時(shí)，把各試驗(yàn)物質(zhì)(8mg)溶于0.2ml的二甲亞砜，然后用蒸餾水稀釋所得到的溶液得到2ml的懸浮液。給藥后十天，解剖每只小鼠并記錄寄生在小腸上的成蟲(chóng)數(shù)。
表4顯示了試驗(yàn)結(jié)果，包括八組小鼠中每只小鼠的存留蟲(chóng)的平均數(shù)和每組試驗(yàn)物質(zhì)的功效百分比與傳染對(duì)照組的功效百分率。PF1022顯示的功效百分比為80％，而PF 1022—003和PF 1022—209分別顯示的功效百分率為66.1％和59.3％。
表4各衍生物對(duì)巴西日?qǐng)@線蟲(chóng)傳染的小鼠的抗蟲(chóng)作用表4
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下列實(shí)施例將詳細(xì)描述本發(fā)明式(I)的新衍生物的制備，其中的縮寫(xiě)具有下列含義Bn芐基Boc叔丁氧基羰基BH二苯甲基(二苯甲基)Cbz芐氧羰基All烯丙基(1—丙烯基)THP四氫吡喃基Tr三苯甲基(三苯甲基)TYR酪氨酸殘基 TYRA對(duì)—羥基苯基乳酸殘基 Lac乳酸殘基 Phlac苯基乳酸殘基
MeleuN—甲基亮氨酸殘基 Leu亮氨酸殘基 LEUA從亮氨酸合成的2—羥基—4—甲基—正戊酸殘基 norLeu正亮氨酸 norLEAU2—羥基—L—己酸殘基 isoLEAU2—羥基—3—甲基-L—戊酸殘基
VALA2—羥基異戊酸殘基 OctA2—羥基辛酸殘基 HOBt1—羥基苯并三唑BOP—ClN，N—雙(2—氧代—3—惡唑烷基)磷酸氯化物DCC雙環(huán)己基碳二亞胺EDCI1—(3—二甲基氨丙基)3—乙基碳二亞胺TFA三氟乙酸THF四氫呋喃DMFN，N—二甲基甲酰胺DMSO二甲基亞砜NMMN—甲基嗎啉DEAD偶氮二甲酸二乙酯在下列實(shí)施例1—2中詳細(xì)說(shuō)明氫化制備方法。
實(shí)施例1
PF 1022和PF 1022B物質(zhì)氫化產(chǎn)物的制備把2.20g PF 1022和PF 1022B物質(zhì)的混和物加入70ml乙醇和30ml乙酸乙酯中，使前者溶于后者。再把1.0g 5％銠—碳催化劑加入到所得到的溶液，在氫氣1個(gè)大氣壓下攪拌上述反應(yīng)混合物使其進(jìn)行催化還原。開(kāi)始攪拌后22小時(shí)，也就是說(shuō)，當(dāng)消耗了222ml氫時(shí)，停止攪拌并從反應(yīng)混合物中濾除催化劑。減壓濃縮濾液，由此得到一種無(wú)色樹(shù)脂狀殘余物。將其溶于10L的己烷—乙酸乙酯(1∶1)混合溶劑，然后將所得到的溶液在裝有1kg硅膠(“硅膠60”，Merck&amp; Co的產(chǎn)品)的硅膠柱上進(jìn)行色譜層析分離。用0.9L己烷—乙酸乙酯(2∶1)1.0L的己烷—乙酸乙酯(3∶2)和4.0L己烷—乙酸乙酯(1∶1)作洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集下列四個(gè)餾分的洗出液餾分1(0.7L)其中含有部分PF 1022的氫化產(chǎn)物；餾分2(0.9L)其中含有PF 1022的氫化產(chǎn)物；餾分3(0.9L)其中含有部分PF 1022的氫化產(chǎn)物；和餾分4(1.5L)其中含有部分PF 1022的氫化產(chǎn)物和起始物PF1022的混合物。
(1)減壓濃縮餾分2得到一種無(wú)色殘余物。把10ml水加到殘余物，然后攪拌5小時(shí)。過(guò)濾收集這樣沉淀的晶體(448mg)。
在這種物質(zhì)的NMR譜(CD3OD中)中，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)芳基氫原子的峰。而且，在EI質(zhì)譜中，可看到在960，905處的分子離子峰(M+)和在864處的片段峰。在其UV光譜(甲醇液)中，對(duì)PF 1022物質(zhì)來(lái)說(shuō)在263.6nm和257.6nm處已觀察到的最大吸收已經(jīng)消失。所以發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)是十二氫—PF 1022，即通式為(I—i—a)的化合物(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—ADH)，其中R2a和R4a分別是環(huán)己甲基。
分子式C52H88H4O12旋光率[α]D—56.6°(C＝0.15，甲醇)1H—NMR譜(在氚—甲醇中)，δ(ppm)0.84-1.0827H(m)1.17-2.0838H(m)1.42 3H(d，J＝6.8)2.87 3H(s) 2.973H(s)3.07 3H(s) 3.173H(s)4.81 1H(dd，J＝4.1，10.4)5.19 1H(q，J＝6.8)5.29 1H(dd，J＝4.1，11.5)5.43-5.665H(m)(2)減壓濃縮餾分3獲得一種無(wú)色殘余物，把20ml己烷和0.5ml甲醇加到該殘余物中。靜置所得到的混合物，由此沉淀出無(wú)色晶體。過(guò)濾收集到457mg晶體。計(jì)算這樣得到的物質(zhì)，從其N(xiāo)MR譜(CD3OD中)發(fā)現(xiàn)它含有5個(gè)芳環(huán)氫。而且，在UV譜上，看到263.6和257.8nm處的最大吸收變?nèi)?。另一方面，在EI質(zhì)譜中，該物質(zhì)在954(M+)，899和858處有分子離子峰。已發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)是六氫—PF1022(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—AHH)，即，通式為(I—i—a)的化合物，其中R2a是芐基，R4a是環(huán)己甲基。
分子式C52H82N4O12旋光率[α]D—79.6°(C＝0.15，甲醇)1H—NMR譜(氚—甲醇中)，δ(ppm)
0.75-1.07 27H(m)1.20-2.07 28H(m)2.84，2.89，2.92，2.95，3.00，3.07，3.1812H(each s，conformer)3.05-3.22 2H(m)4.75-4.82 1H(m)5.14-5.32 2H(m)5.36-5.85 5H(m)7.25-7.34 5H(m)(3)濃縮餾分1并將所得到的殘余物溶于一種溶劑中。如上所述，在一只硅膠柱上把所得到的溶液進(jìn)行色譜層析，然后用己烷—乙酸乙酯(1∶1)洗脫。從流出液餾分中，得到PF 1022B物質(zhì)的氫化產(chǎn)物，鑒別出這樣得到的固體是式(1—i—b)的氫化產(chǎn)物(物質(zhì)編號(hào)PF 1022—BTH)，其中PF 1022B物質(zhì)的四個(gè)芐基已還原為四個(gè)環(huán)己甲基。
實(shí)施例2 十二氫—PF1022的制備把30ml乙醇和250mg 5％的鈀—碳加入500mg的pH 1022物質(zhì)中，然后在1個(gè)大氣壓下的氫氣中催化還原兩天。在確認(rèn)氫的消耗停止后，終止反應(yīng)。用C鹽作過(guò)濾助劑從反應(yīng)混和物中濾除催化劑。減壓濃縮濾液。向所得的殘余物加入水和少量甲醇和異丙醚，然后攪拌。過(guò)濾收得沉淀的晶體499mg。
已鑒定所得物為十二氫PF 1022(即，PF 1022—ADH)。順便說(shuō)一下，在硅膠板上的薄層層析(洗脫己烷—乙酸乙酯，1∶1)結(jié)果中，沒(méi)有鑒別出起始物PF 1022或六氫PF 1022的殘余物。
下列實(shí)施例3—4和6—17將詳細(xì)說(shuō)明用完全合成法制備式(I-ii)—(I—v)的衍生物。
實(shí)施例3環(huán)—(L—meLeu—D—Lac—)4(編號(hào)PF 1022—002)的合成a. Boc—L—MeLeu—D—Lac—OH的合成把1.065g(2.54mmo1)的Boc—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶于10ml甲醇中，然后再加入128mg 10％Pd—C。在氫氣流下把所得到的混合物催化反應(yīng)(脫芐基)。過(guò)濾所得的反應(yīng)混合物。然后，濃縮濾液，由此得制800mg目標(biāo)化合物(產(chǎn)率99％)。所得化合物不用純化，用于下一步反應(yīng)。
b.H—L—MeLeu—D—Lac—OBn的合成把1.065g(2.68mmol)的Boc—L—Meleu—D—Lac—OBn溶于5ml二氯甲烷中，然后冷卻到5℃。在相同溫度下把2ml TFA加到所得到的溶液中，然后室溫下反應(yīng)30分鐘(去除Boc)。濃縮所得到的反應(yīng)混合物并將濃縮物溶于50ml的乙酸乙酯中。用一種碳酸氫鈉的飽和水溶液和一種氯化鈉的飽和水溶液洗滌所得到的溶液，然后在硫酸鈉上干燥。從干燥溶液中蒸去溶劑得到822mg化合物(產(chǎn)率100％)。這樣獲得的化合物不用純化，用于下一個(gè)反應(yīng)中。
C.Boc—(—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn把800mg(2.54mmol)的步驟a)中合成的化合物和822mg(2.68mmol)的步驟b)中合成的化合物溶于10ml THF中。向所得到的溶液中加入542mg HOBt，0.3ml的NMM和0.86g的DCC，然后在4℃下縮合兩天(形成酰胺鍵)。從所得的反應(yīng)混合物中濾除不溶物，向?yàn)V液中加入50ml乙酸乙酯和30ml己烷。用一種5％硫酸氫鉀水溶液、一種碳酸氫鈉的飽和水溶液和一種氯化鈉的飽和水溶液洗滌所得到的溶液，然后在硫酸鈉上干燥。從干燥過(guò)的溶液中蒸去溶劑后，把殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜層析(氯仿乙酸乙酯，501)來(lái)進(jìn)行目標(biāo)化合物的分離和純化。這樣，獲得1.20g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率78％)。[α]D21-44.7°(c＝0.12，CHCl3)EI-MS m/s607(M+)1H-NMR(CDCl3)δ0.88(d，3H，J＝6.4Hz)，0.92(d，3H，J＝6.4Hz)，0.93(d，6H，J＝6.4Hz)，1.44 and 1.46(eachs，9H)，1.51(d，3H，J＝6.4Hz)，1.53(d，3H，J＝6.4Hz)，1.40-1.84(m，6H)，2.81，2.83，2.93 and 2.95(each s，6H)，4.74 and 4.93(dd and t，J＝4，11Hz，and J＝8Hz)，5.10(q，1H，J＝6.4Hz)，5.12(q，1H，J＝12.2Hz)，5.20(d，1H，J＝12.2Hz)，5.25-5.36(m，2H)，7.30-7.39(m，5H).
d.Boc—(—L—MeLeu—D—Lac—)2—OH的合成用與實(shí)施例3的步驟a)的相似方法，使595mg(0.98mmol)的Boc—(—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn進(jìn)行催化還原以脫去芐基，由此獲得505mg標(biāo)題化合物(產(chǎn)率100％)。這樣所得化合物不用純化，用于下一步驟。
e.H—(—L—MeLeu—D—Lac—)2—OBn的合成用與實(shí)施例3的步驟b)的相似方法，使634mg(1.04mmol)的Boc—(—L—MeLeu—D—Lac—)2—OBn進(jìn)行脫—Boc反應(yīng)，由此獲得526mg標(biāo)題化合物(產(chǎn)率為100％)。這樣所得的化合物不用純化，直接用于下一步驟。
t.Boc—(—L—Meleu—D—Lac—)4—OBn把505mg(0.98mmol)的步驟d)中合成的化合物和526mg(1.04mmol)的步驟e)中合成的化合物溶于6ml的THF中。向所得到的溶液中加入204mg HOBt，0.11ml的NMM和0.33g的DCC，然后在4℃下進(jìn)行縮合反應(yīng)24小時(shí)。把所得反應(yīng)混合物進(jìn)行與實(shí)施例3步驟C)中的相似處理，由此獲得832mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率83％)。[α]D21-58.3°(c＝0.28，CHCl3)EI-Ms m/z1005(M+)1H-NMR(CDCl3)δ0.86-1.03(10d，24H，J＝6.4 and 6.7Hz)，1.45 and 1.46(each s，9H)，1.38-1.58(m，16H)，1.64-1.85(m，8H)，2.83-3.11(each s，12H)，4.45-4.56 and4.74(m and dd，1H，J＝4.1 and 11.1)，4.94(t，0.5H，J＝8.1Hz)，5.10(q，1H，J＝7.1Hz)，5.12(d，1H，J＝12.2Hz)，5.20(d，1H，J＝12.2Hz)，5.13-5.40(m，5.5H)，7.30-7.39(m，5H).
g.環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—)4的合成用與實(shí)施例3步驟b)的相似方法，把813mg(0.89mmol)的Boc—(—L—Meleu—D—Lac—)4—OBn與TFA反應(yīng)脫去保護(hù)。所得反應(yīng)混合物再進(jìn)行相似后處理，并把所得粗品進(jìn)行與實(shí)施例3步驟d)相似的催化還原和后處理。
把所得的氨基酸衍生物H(L—Meleu—D—Lac)4—OH溶于200nl THF中，然后加入0.55g HOBt和0.18ml的NMM。把所得混合物加入到0.60g氯化鉀，1.55g氯化銫和1.56g EDCl·HCl的DMF(200ml)—THF(400ml)懸浮液中，然后反應(yīng)5天進(jìn)行閉環(huán)反應(yīng)。
向所得到的反應(yīng)混合物中加入150ml的乙酸乙酯，然后用80ml的水，80ml的碳酸氫鈉飽和水溶液，80ml的5％硫酸氫鉀飽和水溶液和80ml氯化鈉飽和水溶液洗滌，并在硫酸鈉上干燥。從干燥過(guò)的溶液中除去溶劑。把殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜層析(氯仿∶乙酸乙酯＝5∶→1∶1)來(lái)分離和純化目標(biāo)化合物，由此獲得559mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率為86％)。D21-68.2°(C＝0.15，甲醇)m.p.168-170℃FAB-MS m/z797(M+)1H-NMR(CDCl3)δ0.85 and 0.95(each d，6H，J＝6.6Hz)，0.89 and 0.98(each d，6H，J＝6.8Hz)，0.91 and0.98(each d，6H，J＝6.8Hz)，1.01 and 1.07(each d，6H，J＝6.6Hz)，0.99(d，3H，J＝6.8Hz)，1.36-1.51(m，3H，J＝6.4Hz)，1.55-1.65(m，1H)，1.42(d，3H，J＝6.8Hz)，1.44(d，3H，J＝6.8)，1.45(d，3H，J＝6.8Hz)，1.67-1.99(m，8H)，2.85(s，3H)，2.96(s，3H)，3.07(s，3H)，3.16(s，3H)，4.78(dd，1H，J＝4.3 and 11.1Hz)，5.19(q，1H，J＝6.8Hz)，5.29(dd，1H，J＝5.6 and 10.4Hz)，5.44(dd，1H，J＝5.4 and 11.1Hz)，5.48(dd，1H，J＝5.8 and10.0Hz)，5.58(q，1H，J＝6.8Hz)，5.64(q，1H，J＝6.8Hz)，5.69(q，1H，J＝6.8Hz).
實(shí)施例 4環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—Meleu—D—Lac—L—Meleu—D—LEUA)(編號(hào)PF 1022—003)的合成a.合成Boc—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLea—D—Lac—OBn把1.85g(3mmol)的用與實(shí)施例3步驟a)中相似方法合成的Boc—L—MeLeu—D—PhLac—OH和1.016g(3.3mmol)實(shí)施例3步驟b)中合成的H—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶于15ml THF中，然后在冰冷卻下加入1.5ml吡啶，535mg(3.6mmol)HOBt和817mg(3.6mmol)的DCC。所得到的混合物反應(yīng)15小時(shí)，由此通過(guò)酰胺鍵縮合反應(yīng)物。從反應(yīng)混合物中除去不溶物，然后按照實(shí)施例3步驟c)所述進(jìn)行后處理。隨后從該溶液中除去溶劑，把所得到的殘余物在硅膠柱上進(jìn)行色譜層析(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1→5∶1)來(lái)分離和純化，由此獲得1.37g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率67％)。這樣得到的化合物不需進(jìn)一步純化，用于下—步反應(yīng)。
b.合成H—L—MeLeu—D—Phlac—L—MeLeu—D—Lac—OBn用與實(shí)施例3步驟e)相似的方法，從1.37g(2mmol)上述步驟a)所得到的保護(hù)性化合物中獲得1.15g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率98％)。該化合物不進(jìn)一步純化，用于下一步反應(yīng)。
c.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—Meleu—D—Lac—OBn的合成用與實(shí)施例4步驟a)的相似方法，通過(guò)一個(gè)酰胺鍵把1.15g(1.97mmol)實(shí)施例4步驟b)合成的H—L—MeLeu—D—Phlac—L—MeLeu—D—Lac—OBn和720mg(1.97mmol)實(shí)施例3步驟a)合成的Boc—L—MeLeu—D—Lac—OBn相互縮合，由此獲得1.30g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率75％)。不需進(jìn)一步純化該化合物，直接用于下一步反應(yīng)。
d.H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—D—Lac—OBn的合成用與實(shí)施例3步驟e)相似的方法，處理1.30g(1.47mmol)上述步驟c)所得到的保護(hù)性化合物來(lái)除去Boc，由此獲得1.28g標(biāo)題化合物。不進(jìn)一步純化該化合物，直接用于下一步反應(yīng)。
e.Boc—L—MeLeu—D—LEUA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—Phlac—L—MeLeu—D—Lac—OBn的合成用與實(shí)施例4步驟a)相似的方法，把1.28g(1.47mmol)上述實(shí)施例4步驟d)所合成的粗品H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn和590mg(1.64mmol)與實(shí)施例3步驟b)相似方法合成的Boc—L—MeLeu—D—LEUA—OH相互縮合，由此獲得1.2g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率73％)。不進(jìn)一步純化該化合物，直接用于下一步反應(yīng)。f.環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—LEUA—)的合成用與實(shí)施例3步驟g)相似的方法，使1.2g(1.07mmol)實(shí)施例4步驟e)所合成的化合物進(jìn)行脫保護(hù)和閉環(huán)反應(yīng)，由此獲得433mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率44％)。D21-66.2°(C＝0.15，甲醇)FAB-MS m/s915(M+)1H-NMR(CD3OD)δ0.81 and 0.85(each d，6H，J＝6.4Hz)，
0.86 and 0.95(each d，6H，J＝6.6Hz)，0.89 and 0.98(eachd，6H，J＝6.8Hz)，0.91 and 0.98(each d，6H，J＝6.8Hz)，1.01 and 1.07(each d，6H，J＝6.6Hz)，0.99(d，3H，J＝6.8Hz)，1.36-1.65(m，6H)，1.44(d，3H，J＝6.8Hz)，1.45(d，3H，J＝6.8Hz)，1.67-1.99(m，8H)，2.85(s，3H)，2.96(s，3H)，3.07(s，2H)，3.16(s，3H)，4.78(dd，1H，J＝4.3and 11.1Hz)，5.19(q，1H，J＝6.8Hz)，5.29(dd，1H，J＝5.6and 10.4Hz)，5.44(dd，1H，J＝5.4 and 11.1Hz)，5.48(dd，1H，J＝5.8 and 10.0Hz)，5.58(q，1H，J＝6.8Hz)，5.64(q，1H，J＝6.8Hz)，5.69(q，1H，J＝6.8Hz)，7.23-7.34(5H，m)。
實(shí)施例5環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—TYRA(OMe)(編號(hào)PF1022—005)的合成把99.2mg(0.103mmol)的PF 1022E物質(zhì)—也能表達(dá)為“環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—TYRA)”一溶于3ml THF中，然后用冰冷卻。在氮?dú)饬飨拢阉玫降娜芤杭尤?.02ml(0.32mmol)的甲基碘中，再加入9mg(溶于60％油中，0.23mmol)的氫化鈉，然后反應(yīng)40分鐘(來(lái)鄰位甲基化)。在所得到的反應(yīng)混合物中加入20ml乙酸乙酯，然后用10ml氯化鈉飽和溶液洗滌，并在硫酸鎂上干燥。從該溶液中除去溶劑后，把所得到的殘余物進(jìn)行制備性TLC(氯仿∶乙酸乙酯＝3∶1)來(lái)進(jìn)行分離和純化，由此得到88.4mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率88％)。D21—104°(C＝0.13，甲醇)m.p.103—105℃(由MeOH—H2O—AcOEt重結(jié)晶)FAB-MS m/z979(M+)1H-NMR(CD3OD)δ0.78-1.05(each d，27H，J＝6.4-7.0Hz)，1.38(d，3H，J＝7.0Hz)，1.3-1.5(m，4H)，1.5-1.9(m，8H)，2.81(s，3H)，2.88(s，3H)，2.90(s，3H)，2.99(s，3H)，3.08(dd，1H，J＝8.0 and 13.2Hz)，3.09(dd，1H，J＝7.8 and13.2Hz)，3.17(dd，1H，J＝7.3 and 13.2Hz)，3.18(dd，1H，J＝7.2 and 13.2Hz)，3.30(s，3H)，4.78(dd，1H，J＝4.3 and11.1Hz)，5.19(q，1H，J＝6.8Hz)，5.29(dd，1H，J＝5.6 and10.4Hz)，5.44(dd，1H，J＝5.4 and 11.1Hz)，5.48(dd，1H，J＝5.8 and 10.0Hz)，5.58(q，1H，J＝6.8Hz)，5.64(q，1H，J＝6.8Hz)，5.69(q，1H，J＝6.8Hz)，6.80(d，2H，J＝8.3Hz)，7.20(d，2H，J＝8.3Hz)，7.24-7.34(5H，m).實(shí)施例6PF 1022物質(zhì)，即也可表達(dá)為“環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—pHLac)”的合成a.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在14ml的THF溶解1.40g的Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—OH，1.16g的H—L—MeLeu—D—Lac—MeLeu—D—PhLac—OBn和247mg的HOBT在冰冷卻下在所得到的溶液中加入410mg DCC，然后室溫?cái)嚢柽^(guò)夜(來(lái)進(jìn)行縮合反應(yīng))。濾除這樣產(chǎn)生的沉淀后，濃縮濾液。把50ml的乙酸乙酯加入殘余物中。用5％的亞硫酸鈉溶液，碳酸氫鈉的飽和水溶液和氯化鈉的飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混合物，并用無(wú)水硫酸鎂干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液，并在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1)對(duì)殘余物進(jìn)行分離和純化，由此獲得1.16g的無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率46.0％)。
b.H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在11ml二氯甲烷中溶解Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OBn(1.10g)。在冰冷卻下把4ml TFA加入所得到的溶液中，然后室溫下攪拌一小時(shí)。把少量甲苯加入所得到的反應(yīng)混合物中，然后濃縮。把乙酸乙酯(50ml)加入到濃縮物中，然后用碳酸氫鈉的飽和水溶液和水連續(xù)洗滌，并在無(wú)水硫酸鎂上干燥。過(guò)濾后，濃縮濾液，保留該殘余物用于下一步反應(yīng)。
c.H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OH在10ml甲醇和1ml水的混合液中，溶解1.05g H—L-MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在氮?dú)庵?，?00mg 10％的Pd—C加入所得到的溶液中，然后常壓室溫下用氫催化氫化5小時(shí)。用Hyflo Sup-per Cel，濾除催化劑，并濃縮濾液。該殘余物用于下一步反應(yīng)。
d.環(huán)—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA—L—MeLeu-D—Lac—L—Mekeu—D—PhLac)(即，PF 1022E物質(zhì))在800ml THF和240ml DMF的液體混合物中，加入477mg的氯化鋰，840mg的氯化鉀，610mg的氯化鈉，1.75g的氯化銫和4.1g的ED Cl·HCl。再向所得到混合物中，加入1.01g的H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OH，720mg的HOBt和0.24ml的NMM的120ml THF溶液，然后攪拌過(guò)夜。蒸去溶劑后，把450ml的乙酸乙酯和220ml的水加入所得到的殘余物中。使所得到的混合物分為兩層。用碳酸氫鈉的飽和水溶液，5％亞硫酸鈉溶液和氯化鈉的飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的有機(jī)層，然后在無(wú)水硫酸鎂上干燥，并過(guò)濾該有機(jī)溶液。
然后濃縮濾液，在硅膠柱上用色譜層析法(氯仿∶乙酸憶酯＝3∶1)純化所得到的殘余物，再在甲硅烷基化硅膠柱(CH3CN—H2O＝85∶15)，由此得到324mg的白色粉末狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率33％)。D25—100℃(C＝1.0，甲醇)1H-NMR(CD3OD)δ0.78-1.00(m，24H，δ-Me(MeLeu))，1.04，1.05，1.38，1.39(each d，total 6H，β-Me(Lac))，1.28-1.90(m，12H，β-CH2，τ-H(MeLeu))，2.82-3.00(m，12H，NMe)，2.93-3.20(m，4H，β-CH2，(TYRA，PhLac))，4.76-5.81(m，8H，α-H)，each 2H，J＝8.4，aromatic(TYRA))，7.24MS(EI)M+＝964實(shí)施例7環(huán)—(L-MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn))2(編號(hào)PF1022—201)的合成a.鄰芐氧基—L—苯基乳酸(H—L—TYRA(OBn)—OH，即 在75ml 1，4—二惡烷和50ml水的混和液中，懸浮5.46g鄰芐基—L—酪氨酸(H—L—TYR(OBn)—OH)。在冰冷卻下向所得到的懸浮液中加入25ml 2.4N鹽酸，使后者溶于前者中。向所得到的溶液中，加入4.14g硝酸鈉水溶液，再加入75ml二惡烷，15ml水和10ml2N鹽酸，然后反應(yīng)30分鐘(重氮化酪氨酸的氨基)，向所得到的反應(yīng)混合物中加入1.38g硝酸鈉水溶液和10ml 2N鹽酸，然后室溫下反應(yīng)2小時(shí)(把重氮基轉(zhuǎn)化為羥基)。
向所得到的反應(yīng)混合物中加入200ml乙酸乙酯。使所得到的混和物分為兩層。再用乙酸乙酯萃取得到的水層。把乙酸乙酯提取液與有機(jī)層合并，然后用每份50ml 30％氯化鈉水溶液洗滌兩次，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后減壓濃縮，由此得到1.33g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率24.3％)。1H-NMR(DMSO-d6)δ＝2.78(ddd，2H，J＝0，4，0.8，1.4，4.4，β-CH2)，4.08(q，1H，J＝0.4，0.8，α-H)，5.06(s，2H，CH2Ph)，7.01(d×2，4H，J＝0.8，C6H4)，7.41(m，5H，Ph)b.H—L—TYRA(OBn)—OK(鄰芐基—L—苯基乳酸鉀)的合成在5.5ml甲醇和7.65ml氯仿的混和液中，加熱溶解1.10g的H—L—TYRA(OBn)—OH，然后加入2—乙基己酸鉀的乙酸乙酯溶液(1g/10ml)。當(dāng)開(kāi)始出現(xiàn)沉淀時(shí)，再向所得到溶液中加入15ml的乙酸乙酯，然后攪拌17小時(shí)。過(guò)濾收集這樣得到的沉淀，用乙酸乙酯洗滌，并減壓干燥，由此獲得950mg的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率76.6％)。
CH—L—TYRA(OBn)—O—All(鄰芐基—L—苯基乳酸烯丙酯)在15ml DMF中冰冷卻下溶解2.5g H—L—TYRA(OBn)—OK和0.34g碳酸氫鈉。向所得到的溶液中加入0.91ml的烯丙基碘，它們?cè)谙嗤瑴囟认路磻?yīng)12小時(shí)。向反應(yīng)混和物中加入75ml乙酸乙酯，然后用50ml水洗滌一次，用每份50ml 30％氯化鈉水溶液洗滌兩次，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，再濃縮。在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝6∶1)純化所得到的殘余物，由此獲得2.15g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率86.0％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝3.00(ddd，2H，J＝0.5，0.7，1.4，4.1，β-CH2)，4.43(q，1H，J＝0.4，0.7，α-H)，4.64(m，2H，CH2(allyl))，5.03(s，2H，CH2Ph)，5.32(m，2H，CH2(Allyl))，5.90(m，1H，CH(allyl))，7.02(d×2，4H，J＝0.9，C6H4)，7.37(m，5H，Ph)d.Boc—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All的合成在8ml THF中溶解1.71g Boc—L—MeLeu—OH和1.75g三苯膦。在冰冷卻下向所得到的溶液中滴加2.08g H—L—TYRA(OBn)—O—All和1.09mlDEAD的4mlTHF溶液，然后在相同溫度下反應(yīng)16小時(shí)(通過(guò)酯鍵進(jìn)行縮合)。濃縮所得到的反應(yīng)混合物，并在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝20∶1)純化殘余物，由此獲得3.51g的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率98.0％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.91(s×2，6H，δ-CH3(Me-Leu))，1.47(s×2，9H，CH3(Boc))，1.38-1.64(m，3H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，2.72(d，3H，J＝1.24，N-CH3)，3.10(m，2H，β-CH2(TYRA))，4.59(m，2H，CH2(allyl))，4.7-5.0(m，1H，α-H(MeLeu))，5.03(s，2H，CH2Ph)，5.17-5.32(m，3H，α-H(TYRA)，CH2(allyl))，5.83(m，1H，CH(allyl))，7.02(d×2，4H，J＝0.8，C6H4)，7.36(m，5H，Ph)e.H—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All的合成在15ml的TFA中，溶解3.49g的Boc—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All，然后在20℃反應(yīng)20分鐘(除去Boc)。濃縮所得的反應(yīng)溶液。把甲苯加入濃縮物中，共沸除去TFA。把殘余物溶于50ml乙酸乙酯。分別用50ml 7％碳酸氫鈉水溶液，水和30％的氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌所得到的溶液，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，并減壓濃縮，由此得到2.68g標(biāo)題化合物(94.4％)。所得到的產(chǎn)物用于下一步反應(yīng)。
f.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All的合成在20ml THF和2ml的吡啶混合液中，溶解1.98g H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All和2.47g Boc—L—MeLeu—D—Lac—OH。在冰冷卻下把0.96g HOBt和1.13g DDC加入所得到的溶液中，然后在相同溫度下攪拌16.5小時(shí)。濾除沉淀后，濃縮濾液。在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝6∶1)純化所得到的殘余物，由此獲得2.58g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率77.4％)。
g.H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All的合成在6.5ml的二氯甲烷中，溶解1.2g Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—Meleu—D—TYRA(OBn)—O—All。在冰冷卻下向所得到的溶液中滴加TFA(6.45ml)，然后攪拌20分鐘。減壓濃縮反應(yīng)混和物。把甲苯加入濃縮物中，并共沸除去TFA。把殘余物溶于乙酸乙酯中。用7％碳酸氫鈉的水溶液，水和30％氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌所得到的溶液，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后濃縮，由此獲得1.05g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率94.0％)。這樣提供該產(chǎn)物用于下一步反應(yīng)。
h.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—OH的合成在6.5ml二氯甲烷中，溶解1.2g Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All，然后加入44mg三苯膦。在氮?dú)庵邢蛩玫降娜芤褐屑尤?.7mg四(三苯膦)鈀，使反者溶于前者。向所得到的溶液中加入0.87mg的2N2—乙基己酸鉀，然后攪拌5分鐘。濃縮反應(yīng)混和物，并且用乙酸乙酯溶解殘余物。用鹽酸酸化所得到的溶液。再將酸化的溶液用水和30％氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌，在無(wú)水硫酸鈉上干燥，然后濃縮，由此獲得標(biāo)題化合物。這樣提供所得產(chǎn)物用于下一步反應(yīng)。
i.Boc—(—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2—O—All的合成在16ml的四氫呋喃中，溶解1.51g Boc-L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—OH，1.04g的H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—O—All，260mg HOBt和0.27ml的三乙胺。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入428mg DCC，然后攪拌13小時(shí)(進(jìn)行縮合)。濾除所得到的沉淀物，然后濃縮濾液。用乙酸乙酯溶解殘余物。將所得到的溶液用5％硫酸氫鉀，7％碳酸氫鈉水溶液和20％氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌所得到的溶液，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后減壓濃縮。把殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝4∶1)進(jìn)行純化，由此獲得950mg標(biāo)題化合物(產(chǎn)率44.4％)。
j.Boc—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2—O—BH的合成在4.75ml二氯甲烷中溶解950mg Boc—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2—O—All。向所得到的溶液中加入18mg三苯膦，然后在氮?dú)庵屑尤?mg四(三苯膦)鈀。把它們完全溶解后，向所得到的溶液中加入0.36ml 2N2—乙基己酸鉀，然后攪拌5分鐘。
用2N鹽酸酸化所得到的反應(yīng)混合物，然后用水和30％氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌，并在無(wú)水硫酸鈉上干燥。接著濾除無(wú)水硫酸鈉，向所得到的濾液中加入196mg二苯重氮甲烷的乙酸乙酯溶液。濃縮所得到的混和物，并在硅膠柱上用色譜層析法(苯∶乙酸乙酯＝5∶1)純化殘余物，由此得到1.08g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率100％)。
k.Boc—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2—OH的合成在5.4ml二氯甲烷中溶解900mg Boc—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2—O—BH。在冰冷卻下把2.7mlFFA滴加到所得到的溶液中，然后在相同溫度下反應(yīng)1.5小時(shí)。減壓濃縮反應(yīng)混合物。把甲苯加入濃縮物中，并且共沸除去TFA，由此獲得1.12g標(biāo)題化合物。提供這樣獲得的化合物用于下一步反應(yīng)。
1.環(huán)—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2)(編號(hào)PF 1022—201)的合成向263mg氯化鋰，362mg氯化鈉，463mg氯化鉀，1.04g氯化銫，1.19g EDCl、HCl，650ml THF和190ml的DMF混合物中加入734mgH—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)2—OH，419gmg HOBt和0.2ml NMM的100ml THF溶液。室溫下攪拌所得到的混合物36小時(shí)。
濃縮反應(yīng)混合物。然后用200ml乙酸乙酯溶解殘余物。用水，7％碳酸氫鈉水溶液，5％硫酸氫鉀水溶液和30％氯化鈉水溶液各200ml連續(xù)洗滌所得到的溶液，在無(wú)水硫酸鈉上干燥，然后減壓濃縮。把殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(氯仿∶乙酸乙酯＝3∶1)進(jìn)行純化，由此獲得436mg標(biāo)題化合物(產(chǎn)率60.5％)。D20—84.5°(c＝1.0，甲醇)1H-NMR(CD3OD)δ0.82-1.05(m，27H，δ-CH3(MeLeu)，β-CH3(Lac))，1.38(d，3H，J＝0.7，β-CH3(Lac))，1.40-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.82，2.86，2.91，2.99(each s，12H，N-CH3)，2.90-3.20(m，4H，β-CH2(TYRA))，5.05(s，4H，CH2Ph)，4.70-5.82(m，8H，α-H(MeLeu，TYRA，Lac))，7.08(d×2，8H，J＝0.9，C6H4)，7.35(m，10H，Ph)實(shí)施例8環(huán)—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA)2(編號(hào)PF1022—202)的合成在3ml甲醇中溶解271mg環(huán)—(L—Meleu—D—Lac—L—Meleu—D—TYRA(OBn))2。向所得到的溶液中加27mg 10％Pd/C進(jìn)行催化氫化。大約在開(kāi)始催化氫化后30分鐘，出現(xiàn)白色沉淀物。把所形成的沉淀物溶于0.75ml THF中并，向其中加少量醋酸。把所得到的溶液再進(jìn)行氫化22小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入27mg 10％Pd/C，并再繼續(xù)氫化30小時(shí)。濾除催化劑后，減壓濃縮濾液。把殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(氯仿∶乙酸乙酯＝2∶1→1∶1)進(jìn)行純化，由此獲得142mg白色粉末狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率63.0％)。D20—110°(c＝0.1，甲醇)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.83-1.06(m，27H，δ-CH3(MeLeu)，β-CH3(Lac))，1.38(d，3H，J＝0.6，β-CH3(Lac))，1.39-1.95(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.82，2.86，2.92，2.99(each s，12H，N-CH3)，2.70-3.15(m，4H，β-CH2(TYRA))，4.70-5.80(m，8H，α-H(MeLeu，TYRA，Lac))，6.91(d×2，8H，J＝0.9，C6H4)實(shí)施例9環(huán)—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—PhLac)2((編號(hào)PF 1022—203)的合成a.L—2—羥基異戊酸向170ml水，170ml醋酸和40ml 1，4—二惡烷的液體混合液中加入23.4g(0.2mol)L—纈氨酸，然后加熱到40℃使纈氨酸溶解于所述液體中。向所得到的溶液中，滴加41.4g硝酸鈉的50毫升水溶液。攪拌所得到的混合物，并在室溫下反應(yīng)3小時(shí)。在冰冷卻下，向所得到的反應(yīng)混合物中加入300ml氯化鈉飽和溶液和750ml乙酸乙酯的混合液。使所得到的混合物分成兩層。用每份100ml的乙酸乙酯萃取四次所得到的水層。在無(wú)水硫酸鎂上干燥所合并的有機(jī)層。濾除硫酸鎂，并減壓濃縮濾液，由此得到標(biāo)題化合物。
b.L—2—羥基異戊酸二苯甲酯(H—L—VALA—O—BH)把乙酸乙酯(300ml)加到步驟a)所得到的化合物使后者溶于前者。向所得到的溶液中滴加二苯基重氮甲烷的乙酸乙酯溶液(38.8g/400ml)，然后室溫下攪拌過(guò)夜。向反應(yīng)混合物中加入醋酸(30ml)，然后用每份300ml碳酸氫鈉的飽和溶液洗滌三次。在無(wú)水硫酸鎂上干燥有機(jī)層，然后過(guò)濾。減壓濃縮濾液，并在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝20∶1)純化所得到的殘余物，由此獲得28.3g油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率49.7％)。1H-NMR(CD3OD)δ＝0.76(d，3H，J＝7.0，Me)，1.02(d，3H，J＝7.0，Me)，2.67(d，J＝6.2，OH)，6.96(s，1H，CHPh2)，7.25-7.40(m，10H，Ph)c.L—2—(對(duì)—甲苯磺酰氧基)異戊酸二苯甲酯在270ml二氯甲烷中溶解26.8g(94mmol)步驟b)所得到的化合物。向所得到的溶液中加入57.2g甲苯磺酰氯化物和32.4ml吡啶，然后室溫下攪拌過(guò)夜。向反應(yīng)混合物中加入二氯甲烷和水(每種250ml)。使所得到的混合物分成兩層。用2％碳酸氫鈉水溶液，200ml水和200ml水連續(xù)洗滌有機(jī)層，并在無(wú)水硫酸鎂上干燥。從有機(jī)層中濾除硫酸鎂。減壓濃縮濾液，然后在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)純化殘余物，由此獲得29.5g淡黃色晶體的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率69.9％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝2.37(s，3H，CH3C6H4SO2)，6.79(s，1H，CHPh2)，7.18(d，2H，J＝8.4，CH3C6H4SO2)，7.22-7.35(m，10H，Ph)，7.70(d，2H，J＝8.4，CH3C6H4SO2)d.Boc—L—MeLeu—D—VALA—OBH在20ml DMSO中，加熱到50℃下溶解4.90g(20mmol)Boc—L—MeLeu—OH和13.2g上述步驟C所得到的化合物(甲苯磺酰酯)，然后緩慢加入5.52g碳酸鉀。攪拌所得到的混合物，并在50℃下反應(yīng)4.5小時(shí)(酯化)。向反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和水(各50ml)。使所得到的混合物分成兩層。再用50ml乙酸乙酯萃取所得到的水層。用10％氯化鈉水溶液洗滌合并的有機(jī)層(提取液)，然后在無(wú)水硫酸鎂干燥。過(guò)濾后，濃縮濾液，然后在硅膠柱上用色譜層析法(氯仿∶乙酸乙酯＝50∶1)純化所得到殘余物，由此獲得3.75g淡黃色晶體標(biāo)題化合物(產(chǎn)率36.6％)。[α]D-57.1°(c＝0.15，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝1.46(s，9H，t-Bu)，2.72(d，3H，NMe)，6.91(s，1H，CHPh2)，7.26-7.34(m，10H，Ph)e.Boc-L-MeLeu-D-VALA-OH在30ml甲醇和3ml水的混合液中溶解3.0g(5.86mmol)上述步驟d)所得到的化合物。在氮?dú)庵邢蛩玫降娜芤杭尤?00mg 10％Pd—C，然后室溫1大氣壓下用氫氣催化氫化5小時(shí)(除去二苯甲基，BH)。用Hgflo Super Cel濾除催化劑，并濃縮濾液。這樣提供濃縮物用于下一步反應(yīng)。
fH—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在5ml二氯甲烷中溶解4.51g(9.33mmol)的Boc—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在冰冷卻下向所得到的溶液中加4ml TFA，然后室溫下攪拌3小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入少量甲苯并濃縮。然后向濃縮物中加入乙酸乙酯(75ml)。用碳酸氫鈉飽和水溶液和水洗滌所得到的混合物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液，并提供這種殘余物用于下一步反應(yīng)。
g.Boc—L—MeLeu—D—VALA—L-MeLeu—D—Phlac—OBn在30ml THF和3ml吡啶混合液中溶解2.8g Boc—L—MeLeu—D—VALA—OH，2.47g H—L—MeLeu—D—Phlac—OBn和950mgHOBt。在冰冷卻下向所得到溶液中加入1.452g DCC，然后室溫下攪拌過(guò)夜。從反應(yīng)混合物中濾除沉淀，并濃縮濾液。然后把乙酸乙酯(280ml)加入殘余物中。用140ml 5％亞硫酸鈉溶液，140ml碳酸氫鈉飽和水溶液和140ml氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾，濃縮濾液。然后用硅膠柱用色譜層析法(甲苯→甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)純化所得到的濃縮物，由此，獲得3.20g無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率74.2％)。[α]D—38.5°(c＝0.5，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.82-1.08(m，18H，δ-Me(MeLeu)，γ-Me(VALA))，1.43，1.45(each s，9H，t-Bu)，2.85，2.86(eachs，each 3H，NMe)，7.16-7.36(m，10H，Ph)h.H-L-MeLeu-D-VALA-L-MeLeu-D-PhLac-OBn在2ml二氯甲烷中溶解1.1g(1.74mmol)Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac—OBn。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入2ml TFA，然后室溫下攪拌1.5小時(shí)。向反應(yīng)混和物中加入少量甲苯，并將其濃縮。然后向濃縮物中加入乙酸乙酯(50ml)。用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液。直接提供含有標(biāo)題化合物的濃縮物用于下一步反應(yīng)。
i.Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac—OH在10ml甲醇和1ml水的混和液中溶解1.1g(1.74mmol)Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac—OBn。在氮?dú)庵邢蛩玫降娜芤褐屑尤?10mg 10％Pd—C，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化2小時(shí)。用Hyflo Supper Cel濾除催化劑，并濃縮濾液，提供殘余物用于下一步反應(yīng)。
j.Boc—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac)2—OBn在10mlTHF中溶解990mg L—Boc—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac—OH，987mg H—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac—OBn和282mg HOBt。在冰冷卻下，把431mg DCC加入所得到的溶液中，然后室溫下攪拌過(guò)夜(進(jìn)行縮合反應(yīng))。濾除沉淀物并濃縮濾液。把乙酸乙酯(30ml)加到濃縮物中，用5％亞硫酸鈉溶液，碳酸氫鈉的飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液。然后在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1)純化所得到的殘余物，由此獲得1.38g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率67％)。[α]D—63.9°(c＝0.1，CHCl3)k.H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn在4ml二氯甲烷中溶解1.20g(1.02mmol)的Boc—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac)2—OBn。在冰冷卻下把2ml TFA加入到所得到的溶液中，然后室溫下攪拌一小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入少量甲苯并將其濃縮。然后向濃縮物中加入乙酸乙酯(30ml)。用一種碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混合物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液，并提供這樣得到的殘余物用于下一步反應(yīng)中。
1.H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac)2—OH在10ml甲醇和1ml水的混和液中溶解1.15gH—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac)2—OBn，然后在氮?dú)庵屑尤?10mg 10％Pd—C。在室溫常壓下用氫氣把所得的混合物催化氫化兩小時(shí)。用Hyflo Supper Cel濾除催化劑并濃縮濾液。這樣提供殘余物用于下一步反應(yīng)。
m.環(huán)—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac)2(編號(hào)PF1022—203)向680ml THF和200ml DMF的混合液中加入390mg氯化鋰，685mg氯化鉀，537mg氯化鈉，1.55g氯化銫和1.76g EDCI·HCl。再向所得到的混和物中加入910mg H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Phlac)2—OH，620mg HOBt和0.2ml NMM的110ml THF溶液，然后室溫下攪拌過(guò)夜(閉環(huán)反應(yīng))。
從反應(yīng)混和物中濾除溶劑后，向殘余物中加入230ml乙酸乙酯和110ml水。使所得到的混合物分為兩層。用碳酸氫鈉飽和水溶液，5％亞硫酸鈉溶液和氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的有機(jī)層，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液。在硅膠上用色譜層析法純化所得到的殘余物，由此獲得645mg無(wú)色粉末狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率56.5％)[α]D—71.6°(c＝0.2，MeOH)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.79-1.01(m，36H，δ-CH3(MeLeu)，γ-CH3(VALA))，1.38(d，3H，J＝0.6，β-CH3(Lac))，1.53-2.05(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-H(VALA))，2.60，2.79，2.82，2.89，2.90，3.11(each s，12H，N-CH3)，
2.70-3.27(m，4H，β-CH2(PhLac)，4.36-5.98(m，8H，α-H(MeLeu，VALA，PhLac))，7.24-7.28(m，10H，Ph)MS(FD)M+＝1004實(shí)施例10環(huán)—(L—MeLeu—D—異LEUA—L—MeLeu—D—Phlac)2(編號(hào)PF 1022—205)的合成a.2—羥基—3—甲基—L—戊酸(H—L—iso LEUA—OH，即，CH3CH2CH(CH3)—CH(OH)COOH)在500ml 1N鹽酸和50ml 1，4—二惡烷中在40℃加熱溶解25g(0.2mol)L—異亮氨酸，然后冷卻到室溫。把硝酸鈉溶液(39.5g/50ml)滴加到所得到的溶液中，室溫下把它們攪拌5小時(shí)。把所得到的反應(yīng)混合物加入冰冷卻的300ml氯化鈉飽和水溶液和750ml乙酸乙酯混合液中。使所得到的混合物分為兩層。用每份100ml乙酸乙酯萃取水層四次。在無(wú)水硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)層。濾除硫酸鎂后，減壓濃縮濾液。這樣提供該殘余物用于下一步反應(yīng)。
b.2—羥基—3—甲基—L—戊酸二苯甲酯(H—L—isoLEUA—OBH)。
在300ml乙酸乙酯中溶解上述步驟中得到的2—羥在—3—甲基—L—戊酸。向所得到的溶液中滴加二苯基重氮甲烷的乙酸乙酯溶液(41.2g/60ml)，然后室溫下攪拌過(guò)夜。把30ml醋酸加入所得到的反應(yīng)混合物中，然后用每份300ml的碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌兩次。在無(wú)水硫酸鎂上干燥有機(jī)層，然后過(guò)濾。減壓濃縮濾液。把所得到的殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯20∶1)進(jìn)行純化，由此得到9.97g油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率17％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.82(t，3H，J＝7.3，δ-Me)，0.97(d，3H，J＝6.6，γ-Me)，1.19(m，2H，CH2)，1.90(m，1H，β-H)，2.70(d，1H，J＝5.90，OH)，4.2(m，1H，α-H)，7.0(s，1H，CHPh2)，7.26-7.40(m，10H，Ph)c.Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—OBH在30ml THF中溶解5.25g三苯膦和5.97g(20mmol)H—L—isoLEUA—OBH。向所得到的溶液中滴加5.89g Boc—L—MeLeu—OH和3.78ml DEAD的10ml THF溶液，然后室溫下攪拌過(guò)夜。濾除沉淀并向殘余物中加入300ml乙酸乙酯。用碳酸氫鈉飽和水溶液，氯化鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混和物。在無(wú)水硫酸鎂上干燥。過(guò)濾后，濃縮濾液。把殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝50∶1→10∶1)進(jìn)行純化，由此獲得7.01克油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率66.7％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝1.44(s，9H，t-Bu)，4.8，5.1(each m，1H，α-H(MeLeu))，5.14(t，1H，α-H(isoLEUA))，6.96(s，1H，CHPh2)，7.26-7.37(m，10H，Ph)[α]D＝-13.8°(c＝0.55，CHCl3)d.Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—OH在50毫升甲醇和5毫升水的混和液中溶解5.26克(10mmol)的Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—OBH。在氮?dú)庵邢蛩玫降娜芤褐屑尤?30mg 10％的Pd—C，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化5小時(shí)。用Hyflo Super Cel濾除催化劑并濃縮濾液。這樣提供殘余物用于下一步反應(yīng)。e.H—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在2ml二氯甲烷中溶解2.90克(6.0mmol)的Boe—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入2ml TFA，然后室溫下攪拌3小時(shí)。向反應(yīng)混和物中加入少量甲苯并將其濃縮。向濃縮物中加入乙酸乙酯(50ml)。用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液，并提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。f.Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在30ml THF中溶解2.93克的Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—OH，2.14g的H—L—MeLeu—D—PhLac—OBn和904mg HOBt。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入1.38g DCC，然后室溫下攪拌過(guò)夜(縮合)。從反應(yīng)混和物中濾出沉淀后，濃縮濾液。向殘余物中加入100ml乙酸乙酯。用100ml 5％亞硫酸鈉飽和水溶液，100ml碳酸氫鈉飽和水溶液和100ml氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并將其過(guò)濾。然后濃縮濾液。把所得到的殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)進(jìn)行純化，由此獲得1.80g無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率47.9％)。
g.H—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在2ml二氯甲烷中溶解875mg(1.2mmol)Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入2ml TFA，室溫下攪拌1.5小時(shí)。把少量甲苯加入反應(yīng)混和物并濃縮。向濃縮物中加入乙酸乙酯(30ml)。用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥然后過(guò)濾。濃縮濾液提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
h.Boe—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OH在10ml甲醇和1ml水的混和液中溶解875mg(1.2mmol)Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在氮?dú)庵邢蛩玫降娜芤豪锛尤?5mg 10％Pd/C，在室溫常壓下用氫氣催化氫化3小時(shí)。用Hyflo Super Cel濾除催化劑，并濃縮濾液。提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
i.Boc—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn在10ml THF中溶解688mg Boc—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OH，732mg H—L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn和194mg HOBt。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入297mg DCC，室溫下攪拌過(guò)夜(縮合)。濾除沉淀后濃縮濾液，向殘余物中加入乙酸乙酯(30ml)。用5％亞硫酸鈉溶液、碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液，在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶→5∶1)純化所得到的殘余物，由此獲得555mg無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率37.3％)。
j.H—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn在2ml二氯甲烷中溶解555mg(0.45mmol)Boc—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入2ml TFA，室溫下攪拌一小時(shí)，向反應(yīng)混和物中加入少量甲苯并濃縮。把乙酸乙酯(30ml)加入濃縮物中用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。然后濃縮濾液，提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
k.H—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OH在5ml甲醇和0.5ml水的混和液中溶解506mg H—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn。在氮?dú)庵邪?0mg10％Pd—C加入所得到的溶液中，在室溫常壓下用氫氣催化氫化2小時(shí)。用Hyflo Super Cel濾除催化劑并濃縮濾液。提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
1.環(huán)—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2(編號(hào)PF 1022—205)向400ml pHF和120ml DMF的混和液中加入216mg氯化鋰，380mg氯化鉀，298mg氯化鈉，859mg氯化銫和977mg EDCI·HCL。在室溫下向所得到的混和物中加入一種溶液，該溶液是用529mgH—[L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OH，345mg HOBt和0.11ml NMM溶于60ml THF中的方法事先獲得的，然后攪拌過(guò)夜(閉環(huán)反應(yīng))。蒸去溶劑后把230ml的乙酸乙酯和110ml的水加入殘余物中。使所得到的混和物分為兩層。用碳酸氫鈉飽和水溶液5％亞硫酸鈉水溶液和氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的有機(jī)層，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液，然后在硅膠柱上用色譜層析法(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶1→5∶1)純化，再用甲硅烷基化硅膠柱進(jìn)行反相色譜層析(CH3CN∶H2O＝85∶15→90∶10)。冷凍干燥所純化的產(chǎn)物，由此獲得134mg白色粉未狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率29.0％)[α]D＝-74°(c＝0.37，MeOH)MS(FD)M+＝1032實(shí)施例11合成環(huán)—(L—MeLeu—D—isoLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2(編號(hào)PF 1022—207)a.2—羥基—L—己酸(縮寫(xiě)為H—L—norLEUA—OH，即，CH3—(CH2)3—CH(OH)COOH)在140ml 1N—HCl和10ml 1，4—二惡烷的混和液中溶解9.18g(70mmol)L—正亮氨酸。把亞硫酸鈉水溶液(14.5g/20mol)滴加到所得到的溶液中，室溫下攪拌3小時(shí)。冰冷卻后，將所得到的反應(yīng)混合物加入到200ml氯化鈉飽和水溶液和400ml乙酸乙酯的混合液中。使所得到的混合物分為兩層。用每次100ml乙酸乙酯萃取所得到的水層兩次。在無(wú)水硫酸鎂上干燥合并的有機(jī)層。濾除硫酸鎂并減壓濃縮濾液。提供所得到的濃縮物用于下一步反應(yīng)。
b.2—羥基—L—己酸二苯甲酯(H—L—norLEUA—OBH)在90ml的乙酸乙酯中溶解2—羥基—L—己酸(H—L—nor-LEUA—OH)。把二苯重氮甲烷的乙酸乙酯溶液(15.1g/30ml)滴加到所得到溶液中，然后室溫下攪拌過(guò)夜。用2N—HCl調(diào)反應(yīng)混合物的pH為2，然后用碳酸氫鈉飽和水溶液(各200ml)洗滌三次。在無(wú)水硫酸鎂上干燥所得到的有機(jī)層并過(guò)濾。然后減壓濃縮濾液。把殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝20∶1)進(jìn)行純化，由此獲得11.35g淡黃色晶體的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率54.7％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.85(t，3H，J＝7.0，Me)，1.28-1.83(m，6H，β-，γ-，δ-CH2)，2.70(d，1H，J＝6.2，OH)，4.30(dd，1H，J＝2.9，6.2，α-H)，6.95(s，1H，CHPh2)，7.25-7.38(m，10H，Ph)
C.Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—OBH在30ml THF中溶解3.98g三苯膦和5.37g H—L—norLEUA—OBH。向所得到的溶液中滴加3.68g Boc—L—MeLeu—OH和2.36mlDEAD的10ml THF溶液，然后室溫下攪拌過(guò)夜。從縮合反應(yīng)所得到的反應(yīng)溶液中濾除沉淀。把乙酸乙酯(200ml)加入濾液。用碳酸氫鈉飽和水溶液，氯化鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液。把所得的殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝20∶1→10∶1)進(jìn)行純化，由此獲得7.5g油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率95％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.82-0.94(m，9H，δ-Me(MeLeu)，ε-Me(norLEUA))，1.44(d，9H，t-Bu)，2.71(d，3H，NMe)，4.74-4.78，4.98-5.02(each m，1H，α-H(MeLeu))，5.11(t，1H，α-H(norLEUA))，6.96(s，1H，CHPh2)，7.26-7.37(m，10H，Ph)[α]D＝—9.4°(c＝0.55，CHCl3)d.Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—OH在50ml甲醇和5ml水的混合液中溶解5.00g(9.52mmol)Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—OBH。在氮?dú)庀孪蛩玫降娜芤褐屑尤?00mg 10％Pd—C，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化2小時(shí)。用Hyflo Super Cell濾除催化劑并濃縮濾液。提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
d.H—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在2ml二氯甲烷中溶解2.41g(5.0mmol)Boc—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入2ml TFA，然后室溫下攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入少量甲苯然后濃縮。把乙酸乙酯(50ml)加入濃縮物。用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混合物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。然后濃縮濾液，并提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
e.Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在30ml THF中溶解3.0g Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—OH，2.19g H—L—MeLeu—D—PhLac—OBn和924mg HOBt。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入1.41g DCC，然后室溫下攪拌過(guò)夜。濾除沉淀后，濃縮濾液。把100ml乙酸乙酯加入殘余物中，用100ml 5％亞硫酸鈉水溶液，100ml碳酸氫鈉飽和水溶液和100ml氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混和物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液。然后把所得到的殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)進(jìn)行純化，由此獲得2.17g無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率52.5％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.83-0.98(m，15H，δ-Me(MeLeu)，ε-Me(norLEUA)，1.44(d，t-Bu)，2.80(m，6H，NMe)，7.13-7.36(m，10H，Ph)f.H—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn在2ml二氯甲烷中溶解985mg(1.36mmol)Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—MeLeu—D—PhLac—OBn。在冰冷卻下把TFA(2ml)加入所得到的溶液中，然后室溫下攪拌30分鐘。向反應(yīng)混和物中加入少量甲苯，然后濃縮。把乙酸乙酯(30ml)加入濃縮物中，用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混合物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾，濃縮濾液，并提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
g.Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OH
在10ml甲醇和1ml水的混合液中溶解1.10g(1.52mmol)Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在氮?dú)庀掳?10mg 10％Pd—C加入所得到的溶液中，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化4小時(shí)。用Hyflo Super Cel濾除催化劑，并濃縮濾液。提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
h.Boc—(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn在10ml THF中溶解892mg Boc—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLae—OH，800mg L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn和220mg HOBt。在冰冷卻下向所得到的溶液中加入337mg DCC，然后室溫下攪拌過(guò)夜。濾除所形成的沉淀，并濃縮濾液。把乙酸乙酯(30ml)加入殘余物中，用5％亞硫酸鈉水溶液，碳酸氫鈉飽和水溶液和氯化鈉飽和水溶液連續(xù)洗滌所得到的混合物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液后，把所得到的殘余物在硅膠柱上用色譜層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1→5∶1)進(jìn)行純化，由此獲得920mg的無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(產(chǎn)率54.5％)。[α]D＝—50.5°(c＝0.3，CHCl3)i.H—(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn在2ml二氯甲烷中溶解920mg(0.74mmol)Boc—(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn。在冰冷卻下把1mlTFA加入所得到的溶液中，然后室溫下攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入少量甲苯然后濃縮，再加入30ml乙酸乙酯。用碳酸氫鈉飽和水溶液和水連續(xù)洗滌所得到的混合物，在無(wú)水硫酸鎂上干燥并過(guò)濾。濃縮濾液，并提供所得到的殘余物用于下一步反應(yīng)。
j.H—(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OH在10ml甲醇和1ml水的混合液中溶解850mg H—(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OBn。在氮?dú)庀掳?0％Pd—C加入所得到的溶液，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化2小時(shí)。用Hyflo Supper Cel濾除催化劑。然后濃縮濾液。提供殘余物用于下一步反應(yīng)。
k.環(huán)—(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2(編號(hào)PF 1022—207)在500ml THF和150ml DMF的混合液中溶解270mg氯化鉀，4.7g氯化鉀，370g氯化鈉，1.06g氯化銫和1.2g EDCI·HCl。向所得到的混和物中加入633mg的(L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)2—OH，426mg HOBt和0.13ml的NMM的80mlTHF溶液，然后室溫下攪拌過(guò)夜。蒸除溶劑后，向殘余物中加入150ml乙酸乙酯和80ml水。使所得到的混合物分為兩層。用碳酸氫鈉的飽和水溶液，5％亞硫酸鈉水溶液和氯化鈉的飽和溶液連續(xù)洗滌所獲得的有機(jī)層，在無(wú)水硫酸鎂上干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液。在硅膠上用色譜層析法(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶1→5∶1)純化所得到的殘余物，由此獲得274mg淡黃白色粉末的標(biāo)題化合物(產(chǎn)率35.8％)。[α]D＝-57.2°(c＝0.1，MeOH)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.79-1.04(m，30H，δ-Me(MeLeu)，ε-Me(norLEUA))，1.37-1.70(m，β-，γ-，δ-CH2(norLEUA)，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.72-3.20(m，12H，NMe)，4.88(d，4H，CH2-Ph)，5.09-5.92(m，8H，α-H)，7.27-7.31(m，10H，Ph)MS(FD)M+＝1032實(shí)施例12合成環(huán)—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac)(編號(hào)PF1022—225)a.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn將1.02g Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—OH和0.98g H—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn溶于20ml二氯甲烷中。所得溶液在冰冷卻下加入0.74ml二異丙基乙胺和0.52g BOP—Cl，隨繼在同溫度下攪拌16小時(shí)(使之縮合)。反應(yīng)混合物加入50ml二氯甲烷。然后將反應(yīng)混合物以5％硫酸氫鉀水溶液、7％碳酸氫鈉水溶液以及20％氯化鈉水溶液各50ml依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝6∶1→5∶1)純化，即得到1.52g標(biāo)題化合物，為白色粉末(產(chǎn)率80.5％)。[α]D20-58.1°(c＝0.21，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.70-1.00(m，27H，δ-Me(MeLeu)，ε-ME(norLEUA))，1.44(s，9H，t-Bu)，1.15-1.85(m，21H，β-Me(Lac)，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2，γ-CH2，δ-CH2(norLEUA)，2.65-3.30(m，16H，N-Me，β-CH2(PhLac))，4.30-5.50(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(PhLac)，α-H(Lac)，α-H(norLEUA))，5.12(d，2H，J＝0.89，CH2Ph)，7.10-7.40(m，15H，Ph)b.H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn將1.48g Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OBn溶于6ml二氯甲烷中。在冰冷卻下向所得溶液中滴加3ml TFA，隨繼在室溫下反應(yīng)30分鐘(以除去Boc)。濃縮反應(yīng)混合物，隨繼加入甲苯通過(guò)共沸而除去TFA。所得殘?jiān)苡?00ml乙酸乙酯。所得溶液以7％碳酸氫鈉水溶液和20％氯化鈉水溶液各100ml依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂充分干燥并減壓濃縮，即得到1.37g化合物b，為一無(wú)色油狀物。該油狀物不需精制而用于下一步反應(yīng)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.82-0.99(m，27H，δ-Me(MeLeu)，ε-Me(norLEUA))，1.20-1.81(m，21H，β-Me(Lac)，β-CH2(MeLeu)，γ-H(MeLeu)，β-CH2，γ-CH2，δ-CH2(norLEUA))，2.73-3.35(m，16H，N-Me，β-CH2(PhLac))，5.06-5.55(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(PhLac)，α-H(Lac)，α-H(norLEUA))，5.12(d，2H，J＝0.89，CH2Ph)，7.18-7.37(m，15H，Ph)c.H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OH將1.32g H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—Phlac—OBn溶于26ml甲醇中。在氮?dú)猸h(huán)境中向所得溶液中加入0.13g 10％鈀—碳和一滴乙酸，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)一小時(shí)。
然后濾去催化劑，濃縮濾液，即得到1.21g標(biāo)題化合物，為白色粉末。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。[α]D20-22.1°(c＝0.21，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.70-1.05(m，27H，δ-Me(MeLeu)，ε-ME(norLEUA))，1.15-1.85(m，21H，β-Me(Lac)，β-CH2(MeLeu)，γ-H(MeLeu)，β-CH2，γ-CH2，δ-CH2(norLEUA)，2.40-3.15(m，16H，N-Me，β-CH2(PhLac))，5.05-5.70(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(PhLac)，α-H(Lac)，α-H(norLEUA))，7.25(m，10H，Ph)d.環(huán)—(L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac(編號(hào)PF1022—225)將1.18g H—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—norLEUA—L—MeLeu—D—PhLac—OH，0.79g HOBt和0.51ml NMM溶于165mlTHF中。所得溶液加入一混合物中，該混合物包括0.50g氯化鋰、0.68g氯化鈉、0.87g氯化鉀、1.97氯化銫、2.24g EDCI—HCl、1060ml THF和307ml DMF，隨繼在室溫下攪拌16小時(shí)(使之發(fā)生閉環(huán)反應(yīng))。濃縮反應(yīng)混合物并將所得殘?jiān)苡?20ml乙酸乙酯中。所得溶液以7％碳酸氫鈉水溶液、5％硫酸氫鉀水溶液和20％氯化鈉水溶液各120ml依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并減壓濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝3∶1→2∶1)，即得到0.95g標(biāo)題化合物，為白色粉末(產(chǎn)率82.0％)。[α]D20-70.6°(c＝0.23，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.80-1.05(m，27H，δ-Me(MeLeu)，ε-Me(norLEUA))，1.23-1.76(m，21H，β-Me(Lac)，β-CH2(MeLeu)，γ-H(MeLeu)，β-CH2，γ-CH2，δ-CH2(norLEUA)，2.67-3.15(m，16H，N-Me，β-CH2(PhLac))，5.00-5.70(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(PhLac)，α-H(Lac)，α-H實(shí)施例13合成環(huán)—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2(編號(hào)PF—1022—209)a.Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OBn將2.22g Boc—L—MeLeu—D—VALA—OH，2.22g H—L—MeLeu—D—Lac—OBn和1.04g HOBt溶于35ml THF中。所得溶液在冰冷卻下加入1.59g DCC，隨繼在5℃下攪拌47小時(shí)。濾除如此形成的沉淀并將濾液濃縮。殘?jiān)苡?00ml乙酸乙酯。所得溶液以100ml 7％碳酸氫鈉水溶液和100ml 30％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥并濃縮。殘?jiān)?jīng)硅膠柱層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1→5∶1)，即得到2.12g標(biāo)題化合物。(產(chǎn)率52％)。[α]D20-50°(c＝0.17，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.87-1.02(m，18H，δ-Me(Me-Leu)，γ-ME(VALA))，1.45(m，9H，t-Bu)，1.51(d，3H，β-Me(Lac))，1.41-1.74(m，7H，β-CH2，γ-H(Me-Leu)，β-H(VALA)，2.84(m，3H，NMe)，2.97(d，3H，NMe)，5.15(d，2H，CH2Ph)，5.01-5.23(m，4H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))，7.35(s，5H，Ph)b.Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OH
將1.48g Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OBn在氮?dú)猸h(huán)境中溶于15ml甲醇。向所得溶液中加入0.15g 10％Pd/C，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)一小時(shí)。使用Hyflo Super Cel濾去催化劑。將濾液濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.90-0.98(m，18H，δ-Me(MeLeu)，γ-Me(VALA)，1.45(s，9H，t-Bu)，1.58(d，3H，β-Me(Lac))，2.81(s，3H，NMe)，3.06(d，3H，NMe)，4.91-5.30(m，4H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))c.H—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OBn將1.62g Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶于8ml二氯甲烷中。在冰冷卻下向所得溶液中滴加2.4mlTFA，隨繼在室溫下攪拌一小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，隨繼將甲苯加入殘?jiān)⒐卜姓麴s出TFA和甲苯。所得殘?jiān)苡?0ml乙酸乙酯。所得溶液以80ml 7％碳酸氫鈉水溶液和30％氯化鈉水溶液進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.88-0.99(d×2，12H，δ-Me(MeLeu))，1.02(d，6H，γ-Me(VALA))，2.37(s3H，NMe)，3.01(d，3H，NMe)，5.20(d，2H，CH2Ph)，5.06-5.34(m，4H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))，7.35(s，5H，Ph)d.Boc—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn在28ml THF中溶解1.12g Boc—L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OH，1.20g L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac—OBn，0.33g HOBt和0.30ml三乙胺。向所得溶液在冰冷卻下加入0.55g DCC，隨繼在5℃下攪拌2天。濾除沉淀后，將濾液濃縮。然后將殘?jiān)?5ml乙酸乙酯溶解。所得溶液以75ml 5％硫酸氫鉀水溶液、75ml 7％碳酸氫鈉水溶液和75ml 30％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1)，即得到1.40g標(biāo)題化合物，為白色晶體(產(chǎn)率64.0％)。D20-63.1°(c＝0.2，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.87-0.95(m，24H，δ-Me(MeLeu))，1.00(d，12H，γ-Me(VALA)，1.45(d，9H，t-Bu)，1.44-1.53(d×2，6H，β-Me(Lac))，1.50-1.76(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.13(m，2H，β-H(VALA))，2.83-3.12(m，12H，NMe)，5.15(d，2H，CH2Ph)，5.02-5.33(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))，7.36(s，5H，Ph)e.H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn將1.30g Boc—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn溶于8ml二氯甲烷中。向所得溶液在冰冷卻下滴加4ml TFA，隨繼在同溫度下攪拌一小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物，隨繼加入甲苯并共沸蒸餾出TFA和甲苯。這樣所得殘?jiān)苡?5ml乙酸乙酯。所得混合物分別用65ml 7％碳酸氫鈉水溶液和35ml 30％氯化鈉水溶液進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為白色晶體。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.87-1.04(m，36H，δ-Me(MeLeu)，γ-Me(VALA))，1.45(d×2，6H，β-Me(Lac))，1.70-1.80(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.15(m，2H，β-H(VALA)，2.92-3.16(m，12H，NMe)，5.17(d，2H，CH2Ph)，5.02-5.37(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))，7.32(s，5H，Ph)f.H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2—OH在氮?dú)猸h(huán)境中將1.15g H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn溶于12ml甲醇中。所得溶液加入0.12g 10％Pd/C，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)1.5小時(shí)。使用Hyflo Super Cel濾去催化劑。將濾液濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.85-1.06(m，36H，δ-Me(MeLeu)，γ-Me(VALA))，1.45(d，6H，β-Me(Lac))，1.71-1.86(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.20(m，2H，β-H(VALA))，2.51-3.14(m，12H，NMe)，5.16-5.28(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))g.環(huán)—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2在140ml THF中溶解1.0g H—(L—MeLeu—D—VALA—L—MeLeu—D—Lac)2，0.77g HOBt和0.51ml NMM。所得溶液加入一溶液，該溶液是由在900ml THF和260ml DMF混合液中分別溶解0.49g氯化鋰，0.67g氯化鈉，0.85g氯化鉀，1.93g氯化銫和2.20gEDCI·HCl而制備的。所得混合物在室溫下攪拌23小時(shí)。將所得反應(yīng)混合物濃縮，并將殘?jiān)苡?00ml乙酸乙酯。所得溶液以100ml7％碳酸氫鈉水溶液，100ml 5％硫酸氫鉀水溶液和100ml 30％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂充分干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝3∶1)，即得到0.90g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率92％)。[α]D20-65.1°(c＝0.1，MeOH)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.86-1.08(m，36H，δ-Me(MeLeu)，γ-Me(VALA))，1.43(d，6H，β-Me(Lac))，1.60-2.30(m，14H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-H(VALA))，2.86-3.22(m，12H，NMe)，4.82-5.90(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(VALA)，α-H(Lac))實(shí)施例14合成環(huán)—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF 1022—216)a.H—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn將993mg(1.45mmol)Boc—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶于2ml二氯甲烷。所得溶液在冰冷卻下加入2mlTFA，隨繼在室溫下攪拌一小時(shí)。反應(yīng)混合物加入少量甲苯并濃縮。然后將乙酸乙酯(25ml)加入濃縮液。所得混合物依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和水進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾。濃縮濾液，將殘?jiān)糜谙乱徊椒磻?yīng)。
b.Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OH在10ml甲醇和1ml水的混合液中溶解984mg(1.45mmol)Boc—L-MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OBn(其中OctA代表上述的2—羥基辛酸殘留物)。所得混合物在氮?dú)猸h(huán)境中加入98mg10％Pd/C，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)3小時(shí)。使用Hyflo Supper Cel濾除催化劑并將濾液濃縮。殘?jiān)糜谙乱徊椒磻?yīng)。
c.Boe—L—MeLeu—D—OetA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn在20ml THF中溶解845mg Boc—L—MeLeu—D—OCtA—L—MeLeu—D—Lac—OH，844mg H—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn和235mg HOBt。所得溶液在冰冷卻下加入359mgDCC，隨繼在室溫下攪拌4小時(shí)。濾去沉淀后，將濾液濃縮。向殘?jiān)屑尤胍宜嵋阴?100ml)。所得混合物以5％亞硫酸鈉水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾。然后將濾液濃縮。所得殘?jiān)糜诠枘z柱上用色譜層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)，即得到1.14g標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物(產(chǎn)率68.4％)。[α]D＝-45.7°(c＝0.1，MeOH)d.H—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn將1.13g(O.984mmol)Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶于2ml二氯甲烷中。所得溶液在冰冷卻下加入2ml TFA，隨繼在室溫下攪拌30分鐘。反應(yīng)混合物加入少量甲苯并濃縮。向濃縮液中加乙酸乙酯(30ml)。所得混合物依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和水進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾。將濾液濃縮，殘?jiān)糜谙乱徊椒磻?yīng)。
e.H—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—MeLeu—D—Lac—OHH—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶于10ml甲醇與1ml水的混合液中。所得溶液在氮?dú)猸h(huán)境中加入114mg 10％Pd/C，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)2小時(shí)。使用Hyflo Super Cel濾除催化劑。然后將濾液濃縮。殘?jiān)糜谙乱徊椒磻?yīng)。
f.環(huán)—(L-MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—216)在650ml THF和195ml DMF混合液中加入417mg氯化鋰，733mg氯化鉀，575mg氯化鈉，1.66g氯化銫和1.89g EDCI·HCl。所得混合物加入一溶液，該溶液是由預(yù)先在100ml THF中溶解865mgH—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—OH，664mg HOBt和0.22ml NMM而得到的，隨繼在室溫下攪拌過(guò)夜。
從反應(yīng)混合物中蒸餾出溶劑后，殘?jiān)尤?00ml乙酸乙酯和400ml水。使反應(yīng)混合物能分離為兩層。這樣得到的有機(jī)層依次以飽和碳酸氫鈉水溶液，5％亞硫酸鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾。將濾液濃縮。濃縮液用硅膠柱層析法(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶→4∶1)和反相甲硅烷化的硅膠柱層析法(MeCN∶H2O＝9∶1)進(jìn)行純化，即得到210mg標(biāo)題化合物，為白色粉末。[α]D＝-73°(c＝0.17，MeOH)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.80-1.05(m，27H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu))，1.29-1.37(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-，CH2(OctA))，1.41(d，6H，β-Me(Lac))，1.68-1.85(m，14H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.74-3.17(m，12H，NMe)，4.46-4.52，5.07-5.71(m，8H，α-H(MeLeu，OctA，Lac))，7.27(bs，5H，Ph)MS(FD)M+＝942實(shí)施例15合成環(huán)—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2(編號(hào)PF 1022—217)a.2—羥基—D—辛酸二苯甲酯(H—D—OctA—OBH)將1.68g 2—羥基—D—辛酸溶于25.5ml乙酸乙酯中。在室溫下于1小時(shí)內(nèi)向所得溶液中滴加二苯基重氮甲烷的乙酸乙酯溶液(2.14g/19ml)，隨繼攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物加入0.63ml乙酸，隨繼攪拌3小時(shí)以分解過(guò)量的二苯基重氮甲烷。然后在冰冷卻下用7％NaHCO3水溶液調(diào)整反應(yīng)溶液的pH值為6.5。經(jīng)此處理后的溶液能分離成兩層。所得有機(jī)層用水洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝100∶1→50∶1)，即得到3.27g標(biāo)題化合物，為白色結(jié)晶(產(chǎn)率95.5％)。D20+22.0°(c＝0.28，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.86(t，3H，Me)，1.23-1.42(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2)，1.62-1.86(m，2H，β-CH2)，2.75(d，1H，OH)，4.30(m，lH，α-H)，6.95(s，1H，CHPh2)，7.33(s，10H，Ph)b.Boc—L—MeLeu—D—OctA—OBH將2.46g Boc—L—MeLeu—OH溶于30ml吡啶中。所得溶液在冰冷卻下加入3.27g H—D—OctA—OBH，1.62g HOBt和2.48g DCC，隨繼在同溫度下攪拌37小時(shí)。濾去沉淀后，將濾液濃縮。殘?jiān)苡?50ml乙酸乙酯中。所得溶液以150ml 5％硫酸氫鉀水溶液，150ml7％碳酸氫鈉水溶液和150ml 5％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法純化(甲苯∶乙酸乙酯＝100∶1→50∶1)，即得到4.73g標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物(產(chǎn)率85.4％)。D20-8.5°(c＝0.84，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.85(t，3H，Me(OctA))，0.92(dd，6H，δ-Me(MeLeu))，1.23(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.44(d，9H，t-Bu)，2.72(d，3H，NMe)，4.74-5.02(dd×2，1H，α-H(MeLeu))，5.12(t，1H，OH(OctA))，6.90(s，1H，CHPh2)，7.32(s，10H，Ph)c.Boc—L—MeLeu—D—OctA—OH將4.66g Boc—L—MeLeu—D—OctA—OBH在氮?dú)猸h(huán)境中溶于47ml甲醇。所得溶液加入0.47g 10％Pd/C和一滴乙酸，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)一小時(shí)。使用Hyflo Super Cel(濾去催化劑。將濾液濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.88(t，3H，Me(OctA))，0.95(t，6H，δ-Me(MeLeu))，1.28(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.45(d，9H，t-Bu)，2.81(s，3H，NMe)，4.80(dd×2，1H，α-H(MeLeu))，5.01(t，1H，α-H(OctA))d.Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OBn在50ml四氫呋喃中溶解3.26g Boc—L—MeLeu—D—OctA—OH，2.81g H—L—MeLeu—D—Lac—OBn和1.37g HOBt。所得溶液在冰冷卻下加入2.08g DCC和2.7ml吡啶。隨繼在室溫下攪拌40小時(shí)。濾去沉淀后，將濾液濃縮。殘?jiān)苡?00ml乙酸乙酯中。所得溶液以300ml 5％硫酸氫鉀水溶液，300ml 7％碳酸氫鈉水溶液和300ml20％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)進(jìn)行純化，即得到3.23g標(biāo)題化合物，為白色結(jié)晶(產(chǎn)率56.8％)。D20-37.9°(c＝0.27，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.87-1.01(m，15H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu)，1.28(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA)，1.45(d，9H，t-Bu)，1.51(d，3H，β-Me(Lac))，1.64-1.79(m，8H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.87(d，3H，NMe)，2.95(d，3H，NMe)，5.07-5.34(m，6H，CH2Ph)，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac)，7.38(s，5H，Ph)e.Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OH將990mg Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OBn在氮?dú)猸h(huán)境中溶于10ml甲醇。所得溶液加入99mg 10％Pd/C和一滴乙酸，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)一小時(shí)。使用Hyflo Super Cel濾去催化劑。然后將濾液濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.84-0.92(m，15H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu))，1.23(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.41(d，9H，t-Bu)，1.43(d，3H，β-Me(Lac))，1.62-1.72(m，8H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.77(s，3H，NMe)，3.97(d，3H，NMe)，4.80-5.32(m，4H，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac))f.H—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D-L—ac—OBn
將962.4mg Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OBn在氮?dú)猸h(huán)境中溶于1.5ml TFA中。所得溶液在同溫度下攪拌30分鐘，隨繼在室溫下進(jìn)一步攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物濃縮。然后將甲苯加入濃縮液，濃縮液共沸蒸餾除去TFA。所得殘?jiān)苡?5ml乙酸乙酯。所得溶液依次用75ml 7％碳酸氫鈉水溶液和75ml 30％氯化鈉水溶液進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.85-0.99(m，15H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu))，1.27(m，8H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.46(d，6H，β-Me(Lac))，1.66-1.82(m，8H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.39(s，3H，NMe)，2.96(s，3H，NMe)，5.07-5.36(m，2H，CH2Ph)，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac))，7.37(s，5H，Ph)g.Boc—(L—MeLeu-D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn在13ml THF中溶解857mg Boc—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OH，819mg H—L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac—OBn，237mg HOBt和0.24ml吡啶。所得溶液在冰冷卻下加入362mg DCC，隨繼在室溫下攪拌16小時(shí)。濾除沉淀并濃縮濾液。殘?jiān)苡?5ml乙酸乙酯中。所得溶液以75ml 5％硫酸氫鉀水溶液，75mg 7％碳酸氫鈉水溶液和75ml 20％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝5∶1)進(jìn)行純化，即得到875mg標(biāo)題化合物，為白色結(jié)晶(產(chǎn)率53.8％)。[α]D20-48.8°(c＝0.1，CHCl3)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.85-1.01(m，30H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu))，1.28(bs，16H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.45(d，9H，t-Bu)，1.52(d，6H，β-Me(Lac))，1.72-1.77(m，16H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.83-3.10(s，12H，N-Me)，5.14-5.30(m，10H，CH2Ph)，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac))，7.36(s，5H，Ph)h.H—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn將870mg Boc—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn溶于4.4ml二氯甲烷。所得溶液在冰冷卻下滴加26ml TFA，隨繼在室溫下攪拌一小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物濃縮。濃縮液中加入甲苯，從而共沸蒸餾除去TFA。這樣得到的殘?jiān)苡?0ml乙酸乙酯。所得溶液依次用50ml 7％碳酸氫鈉水溶液和50ml 20％氯化鈉水溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.86-1.01(m，30H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu))，1.26(d，16H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.41-1.77(m，22H，β-Me(Lac)，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.93(s，6H，NMe)，3.10(d，6H，NMe)，5.20(d，2H，CH2Ph)，5.08-5.35(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac))，7.35(s，5H，Ph)i.H—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2—OH將794.0mg H—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2—OBn在氮?dú)猸h(huán)境中溶于8ml甲醇中。向所得溶液中加入80mg 10％Pd/C和一滴乙酸，隨繼在室溫和常壓下加氫氣進(jìn)行催化加氫反應(yīng)1.5小時(shí)。使用Hyflo Super Cel濾去催化劑。將濾液濃縮，即得到標(biāo)題化合物，為一無(wú)色油狀物。該化合物不需精制而用于下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.88-1.06(m，30H，Me(OctA)，δ-CH3(MeLeu))，1.26(bs，16H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.46(d，6H，β-Me(Lac)，1.60-1.95(m，16H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，3.02(t，6H，NMe)，3.08(d，6H，NMe)，4.50-5.44(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac))j.環(huán)—(L-MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2在140ml THF中溶解1.00g H—(L—MeLeu—D—OctA—L—MeLeu—D—Lac)2—OH，0.77g HOBt和0.51ml NMM。所得溶液加入一混合物，它包括0.49g氯化鋰，0.67g氯化鈉，0.85g氯化鉀，1.93g氯化銫，2.20g EDCI·HCl，900ml THF和260ml DMF，隨繼在室溫下攪拌23小時(shí)。將反應(yīng)混合物濃縮后，殘?jiān)苡?00ml乙酸乙酯。所得溶液以100ml 7％碳酸氫鈉水溶液，100ml 5％硫酸氫鉀水溶液和100ml 30％氯化鈉水溶液依次進(jìn)行洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。殘?jiān)霉枘z柱層析法(甲苯∶乙酸乙酯＝3∶1)純化，即得到0.90g標(biāo)題化合物(產(chǎn)率92％)。[α]D20-46.3°(c＝0.1，MeOH)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.84-1.06(m，30H，Me(OctA)，δ-Me(MeLeu))，1.29(bs，16H，ζ-，ε-，δ-，γ-CH2(OctA))，1.43(d，6H，β-Me(Lac)，1.68-1.85(m，16H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，β-CH2(OctA))，2.87(d，6H，NMe)，3.08(d，6H，NMe)，5.41-5.53(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(OctA)，α-H(Lac))實(shí)施例16環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2(編號(hào)PF1022—218)的合成a.Boc—L—Leu—D—Lac—OBH將5.13g(20毫摩爾)H—L—Lac—OBH和10.5g三苯膦溶解在30ml THF中。在冰冷卻下，向所得的溶液滴入5.64g Boc—L—Leu—OH和6.08ml的DEAD的THF溶液，然后在室溫下攪拌三天。濃縮反應(yīng)混合物，過(guò)濾掉沉淀物，然后進(jìn)一步濃縮。將300ml乙酸乙酯加入殘余物中，先后用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液和水洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。所得殘余物通過(guò)硅膠柱(甲苯∶乙酸乙酯＝20∶1→10∶1)層析法提純。由此獲得9.57g標(biāo)題化合物，此為化學(xué)計(jì)算產(chǎn)量(9.57g)。
1H-NMRδ＝1.5(s，9H，t-Bu)，4.4(m，1H，CH)，4.9(d，1H，J＝6.3，CH)，5.2(d，2H，J＝4.9，CH2Ph)，7.26-7.30(m，10H，Ph)b.Boc—L—Leu—D—Lac—OH將9.56g(20.4毫摩爾)Boc—L—Leu—D—Lac—OH溶解在100ml甲醇和10ml水的液體混合物中，然后在氮?dú)庀录尤?56mg10％Pd—C。在室溫常壓下用氫氣催化氫化所得混合物2小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑，濃縮濾液。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
c.Boc—L—Leu—D—Lac—OBn將5.0g Boc—L—Leu—D—Lac—OH溶解在35ml DMSO中。在35℃下將1.52ml芐基溴加入所得溶液。溫度上升到40℃之后，將2.94g碳酸鉀加入所得混合物中，然后在相同溫度下攪拌5小時(shí)。將200ml乙酸乙酯加入反應(yīng)混合物中，先后用水和10％氯化鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，在后濃縮濾液。所得的殘余物通過(guò)硅膠柱層析法提純。由此獲得無(wú)色油狀的標(biāo)題化合物4.19g(收率100％)。
d.Boc—L—Leu—D—Lac—OH將4.0g(10.3毫摩爾)的Boc—L—Leu—D—Lac—OBn溶解在4ml二氯甲烷中。在冰冷下，將6ml TFA加入所得溶液中，然后在室溫下攪拌三小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入少量甲苯，然后濃縮。將200ml乙酸乙酯加入所得殘余物。先后用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，濃縮濾液。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
e.Boc—L—MeLeu—D—PhLac—OH在60ml甲醇和6ml水的液體混合物中，溶解5.84g(12毫摩爾)Boc—L—MeLeu—D—PhLac—OBn。在氮?dú)庀?，?84mg 10％的Pd—C加入所得溶液中，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化4小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑，濃縮濾液。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
f.Boc—L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OBn將4.45g Boc—L—MeLeu—D—PhLac—OH，2.87g H—L—Leu—D—Lac—OBn和1.95g HOBt溶解在50ml THF中。將2.97g DCC在冰冷卻下加入所得溶液中，然后在室溫下攪拌三小時(shí)。過(guò)濾掉沉淀物，濃縮濾液。將100ml乙酸乙酯加入濃縮液中。先后用水，飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，濃縮濾液。所得殘余物通過(guò)硅膠柱(甲苯∶乙酸乙酯＝50∶1→10∶1)層析法提純。由此獲得無(wú)色油狀的標(biāo)題化合物6.12g(收率90％)。
1H-NMRδ＝0.85-0.91(m，12H，Me×4)，1.45(s，9H，t-Bu)，2.8(s，3H，NMe)，5.07-5.18(m，2H，CH2Ph)，7.19-7.39(m，10H，Ph)g.H—L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OBn將2.68g(1.74毫摩爾)的Boc—L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OBn溶解在3ml二氯甲烷中。將3mlTFA在冰冷卻下加入所得溶液中，然后在室溫下攪拌三小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入少量甲苯，然后濃縮。將(50ml)乙酸乙酯加入所得殘余物中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
h.Boc—L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OH將2.68g(4毫摩爾)Boc—l—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OBn溶解在30ml甲醇和3ml水的液體混合物中。在氮?dú)庀?，?68mg 10％Pd—C加入所得溶液中，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化三小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
i.Boc—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2—OBn將2.20g Boc—L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OH，2.18g H—L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac—OBn和649mgHOBt溶解在30ml THF中。在冰冷卻下，將990mg DCC加入所得溶液，然后在室溫下攪拌4小時(shí)。過(guò)濾掉沉淀物，濃縮濾液。向濃縮液中加乙酸乙酯(100ml)。先后用5％硫酸氫鈉溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，濃縮濾液。向濃縮液中加入乙酸乙酯(100ml)。先后用5％硫酸氫鈉溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，濃縮濾液。所得殘余物通過(guò)硅膠柱(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)層析法提純，由此獲得無(wú)色油狀的標(biāo)題化合物3.18g(收率70.4％)。
j.H—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2—OBn將3.10g(2.75毫摩爾)Boc—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2—OBn溶解在6ml二氯甲烷中。在冰冷卻下將5ml TFA加入所得溶液，然后在室溫下攪拌一小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加少量甲苯，然后濃縮。將乙酸乙酯(100ml)加入所得殘余物中，先后用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
k.H—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2—OH將3.06g H—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2—OBn溶解在30ml甲醇和30ml水的液體混合物中。在氮?dú)庀拢瑢?06mg10％Pd—C加入所得溶液中，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化三小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑，濃縮濾液。所得的殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
L.環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2(編號(hào)PF 1022—218)向1875ml THF和563ml DMF的液體混合物中加1.16g氯化鋰，2.05g氯化鉀，1.6g氯化鈉，4.62g氯化銫和5.262g EDCI·HCl。在室溫下向所得混合物中加一種溶液，它是將2.47g H—(L—MeLeu—D—PhLac—L—Leu—D—Lac)2—OH，1.85g HOBt和0.6ml NMM溶于300ml THF而單獨(dú)制備的一種溶液。在室溫下攪拌所得混合物過(guò)夜。蒸發(fā)掉溶劑后，向殘余物中加400ml乙酸乙酯和400ml水。所得混合物分離成兩層，這樣所得的有機(jī)層先后用飽和碳酸氫鈉水溶液，5％硫酸鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，然后過(guò)濾。濃縮濾液，所得殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶1)層析法提純，由此獲得無(wú)色粉末狀的標(biāo)題化合物1.57mg。(收率62％)。[α]D＝-41°(c＝0.5，MeOH)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.83-0.94(m，24H，δ-Me(MeLeu，Leu)，1.39-1.42(bd，6H，Me(Lac))，1.69-2.22(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu，Leu))，2.93-3.34(m，10H，N-Me(MeLeu)，CH2(PhLac)，3.74-3.77，4.52-4.58，4.80-4.85，5.10-5.31(m，8H，α-H(MeLeu，Leu，PhLac，Lac))，7.21-7.36(m，10H，Ph)MS(FD)M+＝920實(shí)施例17環(huán)—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2(編號(hào)PF1022—219)的合成a.Boc—L—Leu—D—PhLac—OBn將2.33g Boc—L—Leu—OH，2.30g H—D—PhLac—OBnt 1.34gHOBt溶解在30ml吡啶中。在冰冷卻下將2.23g DCC加入所得溶液，攪拌混合物過(guò)夜。過(guò)濾掉沉淀物，將400ml乙酸乙酯加入濾液。用5％硫酸氫鉀水溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液和5％氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。然后通過(guò)硅膠柱(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1)色層析法提純所得殘余物，由此獲得油狀標(biāo)題化合物3.57g(收率84.5％)。
1H-NMR(CDCl3)δ＝0.69(d，3H，J＝6.5，Me)，0.78(d，3H，J＝6.5，Me)，1.43(s，9H，t-Bu)，2.35(s，1H，NH)，3.1-3.25(m，1H，CH)，4.36，4.81(m，1H，CH)，5.14(s，2H，CH2Ph)，7.13-7.40(m，10H，Ph)b.H-L-Leu-D-PhLac-OBn將3.14g(6.7毫摩爾)Boc—L—Leu—D—PhLac—OBn溶解在2ml二氯甲烷中。在冰冷卻下將4mlTFA加入所得溶液中，然后在室溫下攪拌二小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加少量甲苯，然后濃縮。將乙酸乙酯(50ml)加入所得殘余物。先后用飽和碳酸氫鈉水溶液和水洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
c.Boc—L—MeLeu—D—Lac—OH將2.85g(7毫摩爾)Boc—L—MeLeu—D—Lac—OBn溶解在30ml甲醇和3ml水的液體混合物中。在氮?dú)庀孪蛩萌芤褐屑?85mg 10％Pd—C，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化15小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑。濃縮濾液，殘余物準(zhǔn)備下一步反應(yīng)使用。
d.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OBn將2.21g H—Leu—L-D—PhLac—OBn和948mg HOBt溶解在30ml THF中。在冰冷卻下將1.73g DCC加入所得溶液，然后在室溫下攪拌三小時(shí)。過(guò)濾掉沉淀物后，濃縮濾液。將乙酸乙酯(100ml)加入所得殘余物中。先后用水，飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾。然后濃縮濾液，通過(guò)硅膠柱(甲苯∶乙酸乙酯＝10∶1→5∶1)層析法提純所得殘余物，由此獲得無(wú)色油狀標(biāo)題化合物6.38g(收率72.2％)。
e.H—L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OBn將1.55g(23.1毫摩爾)Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OBn溶解在3ml二氯甲烷中。在冰冷卻下將3ml TFA加入所得溶液，然后在室溫下攪拌三小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加少量甲苯，然后濃縮。將乙酸乙酯(50ml)加入所得殘余物中，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。殘余物供下一步反應(yīng)使用。
f.Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OH將1.61g(2.4毫摩爾)Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OBn溶解在15ml甲醇和1.5ml水的液體混合物中。在氮?dú)庀聦?60mg 10％Pd—C加入所得溶液中，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化三小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑。殘余物供下一步反應(yīng)使用。
g.Boc—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2—OBn將1.25g Boc—L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OH，1.29g L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac—OBn和373mgHOBt溶解在20ml THF。在冰冷卻下向所得溶液加569mg DCC，然后在室溫下攪拌4小時(shí)。過(guò)濾掉沉淀物后，濃縮濾液。將乙酸乙酯(100ml)加入殘余物中。先后用5％硫酸鈉水溶液，飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液。通過(guò)硅膠柱(甲苯∶乙酸乙酯＝3∶1)層析法提純所得殘余物，由此獲得無(wú)色油狀標(biāo)題化合物1.29g(收率49.7％)。
h.H—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2—OBn將1.28g(1.13毫摩爾)Boc—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2—OBn溶解在4ml二氯甲烷中。在冰冷卻下將2ml TFA加入所得溶液，然后在室溫下攪拌一小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加少量甲苯，然后濃縮。將乙酸乙酯(100ml)加入所得殘余物，先后用飽和碳酸氫鈉水溶液和水連續(xù)洗滌所得混合物，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并過(guò)濾，然后濃縮濾液，殘余物供下一步反應(yīng)使用。i.H—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2—OH將1.22g H—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2—OBn溶解在10ml甲醇和1ml水的液體混合物中。在氮?dú)庀孪蛩萌芤褐屑?22mg 10％Pd—C，然后在室溫常壓下用氫氣催化氫化3小時(shí)。用Hyflo Super Cel過(guò)濾掉催化劑，濃縮濾液，殘余物供下一步反應(yīng)使用。
j.環(huán)—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2(編號(hào)PF1022—219)將446mg氯化鋰，786mg氯化鉀，615mg氯化鈉，1.7g氯化銫和2.02g EDCI·HCl加入到750mlTHF和225ml DMF液體混合物中。向反應(yīng)混合物中加一種溶液，它是將990mg H—(L—MeLeu—D—Lac—L—Leu—D—PhLac)2—OH，712mg HOBt和0.23ml NMM溶解于120ml THF中而制備的溶液。如此獲得的混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。蒸發(fā)掉溶劑后，將200ml乙酸乙酯和100ml水加入所得殘余物中。所得的混合物分離成二層。所得的有機(jī)層先后用飽和碳酸氫鈉水溶液，5％硫酸鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液連續(xù)洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，然后過(guò)濾，濃縮濾液。然后用硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶1)層析法提純所得殘余物，由此獲得白色粉末狀的標(biāo)題化合物586mg(收率55.8％)。[α]D＝-94°(c＝0.48，MeOH)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.86-0.99(m，24H，δ-Me(MeLeu，Leu)，1.34-1.37(bd，6H，Me(Lac))，1.70-2.27(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu，Leu))，3.18-3.31(m，10H，N-Me(MeLeu)，CH2(PhLac)，4.02-4.08，4.55-4.62，4.80-4.95，5.45-5.55(m，8H，α-H(MeLeu，Leu，PhLac，Lac))，7.12-7.22(m，10H，Ph)MS(FD)M+＝920通過(guò)加入取代基制備PF 1022衍生物的方法在下列實(shí)施例18—34中描述。實(shí)施例18環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(o—t—Bu)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF—1022—215)的制備將701mg環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA—L—MeLeu—D—Lac)(也就是，PF—1022E物質(zhì))溶解在含有二氯甲烷(10ml)的試管中，然后在-40℃下加入1.4ml異丁烯和0.11ml濃硫酸。密封試管后，使所得混合物的溫度回升到室溫。攪拌反應(yīng)混合物2小時(shí)。冰冷卻反應(yīng)混合物，用0.6ml三乙胺將pH調(diào)到9.0，然后濃縮。將殘余物溶于70ml乙酸乙酯，然后依次用70ml 5％硫酸氫鉀水溶液和70ml％30％氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥并濃縮。用硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝4∶1)層析法提純殘余物，由此獲得578mg標(biāo)題化合物(收率77.6％)。[α]D20-92.0°(c＝0.1，MeOH)1H-NMR(CDCl3)δ＝0.80-1.05(m，24H，δ-Me(MeLeu))，1.32(d，9H，t-Bu)，1.40(d，6H，β-Me(Lac))，1.10-1.80(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，2.70-3.20(m，16H，NMe，β-CH2(PhLac))，5.30-5.80(m，8H，α-H(MeLeu)，α-H(PhLac)，α-H(Lac))，7.00(dd，4H，t-BuOC6H4)，7.26(d，5H，Ph)實(shí)施例19環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OCOC17H35)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF—1022—006)的制備將202mg PF1022E物質(zhì)，105mg硬脂酸，59.2mg HOBt和O.05mlNMM溶解在1.8ml THF中，然后在冰冷卻下加入82.3mgEDCI·HCl。在4℃下攪拌所得混合物24小時(shí)。用40ml乙酸乙酯和20ml己烷稀釋反應(yīng)混合物，然后依次用40ml水，40ml飽和碳酸氫鈉水溶液和40ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，用少量的硅膠層析過(guò)濾，經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥，在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。所得白色結(jié)晶粉末用硅膠柱(氯仿∶己烷＝1∶1→氯仿∶乙酸乙酯＝5∶1)層析法提純，然后通過(guò)己烷—甲醇—水結(jié)晶，由此獲得白色結(jié)晶標(biāo)題化合物173mg(m.p.47—48℃，收率67.1％)。[α]D22-71°(c＝0.15，MeOH)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.79-1.28(m，60H，C16H33CH2)，1.25-1.88(12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.38(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.27-2.56(m，2H，α-H，C16H33CH2)，3.05-3.21(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，2.82-3.04(m，12H，NMe)，4.77-5.81(m，8H，α-H)，7.04-7.35(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1231實(shí)施例20環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(3，5—二碘)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—011)的制備將130mg乙酸鈉加入5ml含203mg PF1022E物質(zhì)的二氯甲烷溶液中。冰冷卻所得混合物，然后加入210mg碘。冰冷卻30分鐘后，使反應(yīng)混合物溫度回升到室溫。向反應(yīng)混合物中加三乙胺(0.06ml)，然后在同一溫度下攪拌2.5小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加3ml 10％硫代硫酸鈉水溶液后，再加20ml水和30ml氯仿，使反應(yīng)混合物分離成兩層。水層用20ml乙酸乙酯和8ml己烷的液體混合物提取。對(duì)結(jié)合的有機(jī)層用少量硅膠層析過(guò)濾，然后經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。用硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝5∶1)層析法提純殘余物，由此獲得標(biāo)題化合物結(jié)晶109mg(m.p.124—126℃，收率42.4％)。[α]D20-92°(c＝0.08，MeOH)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.08(m，27H，γ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.33-1.91(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.39(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.82-3.04(m，12H，NMe)，2.91-
3.21(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，4.77-5.82(m，8H，α-H)，7.24-7.70(m，7H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1217實(shí)施例21環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(O—Me，3，5—di—I)—L—Meleu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—012)的制備將70mg PF 1022E物質(zhì)的3，5—二碘化物溶解在2ml THF中，然后在冰冷卻下加0.02ml碘代甲烷和7mg 60％氫化鈉。在0℃下攪拌所得混合物3.5小時(shí)。用20ml乙酸乙酯稀釋反應(yīng)混合物，然后用10ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此所得的殘余物用硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝3∶1)制備層析法提純，由此獲得白色粉末狀的標(biāo)題化合物43.8mg(m.p.108—110℃，收率61.9％)。[α]D20-98°(c＝0.11，MeOH)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.79-1.08(m，27H，γ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.12-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.38，1.39(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.81-3.14(m，12H，NMe)，4.76-5.82(m，8H，α-H)，7.24-7.81(m，7H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1231實(shí)施例22環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OCOO—isoNu)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022-013)的制備將263mg cbz—GABA(也就是，γ—氨基丁酸)溶解在5ml乙酸乙酯和5ml二氯甲烷的液體混合物中。在冰冷卻下向所得溶液中加0.3ml三乙胺和0.15ml氯甲酸異丁酯，加入5分鐘后，再將640mgPF 1022E加入所得混合物，然后在冰冷卻下攪拌一小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋后，用50ml 5％硫酸氫鉀水溶液洗滌一次，并用50ml飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥，然后在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝20∶1→10∶1→8∶1)層析法提純，然后從醚—己烷中結(jié)晶，由此獲得標(biāo)題化合物晶體414mg(m.p.95—97℃，收率58.6％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.80-1.04(m，27H，γ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.00(d，6H，J＝6.7，γ-Me(isobutyl))，1.40(d×2，3H，β-Me(Lac))，1.42-1.79(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.05(m，1H，β-H(isobutyl))，2.72-3.06(m，12H，NMe)，3.05-3.18(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，4.02(d×2，2H，α-CH2(isobutyl))，4.48-5.71(m，8H，α-H)，7.08-7.14，7.21-7.40(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1065實(shí)施例23環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OEt)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—016)的制備將153mg PF 1022E物質(zhì)溶解在4ml THF中，然后在冰冷卻下加入0.02ml乙基碘和15mg 60％氫化鈉。在0℃下攪拌所得混合物30分鐘。反應(yīng)混合物用30ml乙酸乙酯稀釋后，用20％氯化鈉水溶液和10ml 10％硫代硫酸鈉水溶液的液體混合物洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。然后在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝8∶1→5∶1)層析法提純后，用1，4—二惡烷冷凍干燥，由此獲得158mg標(biāo)題化合物。[α]D20-67°(c＝0.11，CHCl3)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.05(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.37(t，3H，Me(ethyl))，1.38(d×2，3H，β-Me(Lac))，1.46-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.81-3.00(m，12H，NMe)，3.01-3.20(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA))，4.00(q，2H，CH2(ethyl))，4.76-5.81(m，8H，α-H)，6.85-7.33(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝993實(shí)施例24環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(O—n—Pr)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—018)的制備將217mgPF 1022E物質(zhì)溶解在8ml THF中，然后在冰冷卻下加入0.2ml正丙基碘和27mg 60％氫化鈉。在0℃下攪拌所得混合物2小時(shí)，然后在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋后，用30ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝7∶1→3∶1)層析法提純，然后用1，4—二惡烷冷凍干燥，由此獲得107mg標(biāo)題化合物(收率47％)。1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.11(m，30H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac)，OCH2CH2CH3)，1.30-1.89(m，14H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，OCH2CH2CH3)，1.38，1.39(d×2，J＝7.0，3H，β-Me(Lac))，2.82-3.00(m，12H，NMe)，2.92-3.21(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，3.90，3.97(each t，2H，OCH2CH2CH3)，4.75-5.83(m，8H，α-H)，6.85-7.33(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1007實(shí)施例25環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(o—iso—Pr)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—019)的制備將206mg PF 1022E物質(zhì)溶解在8ml THF中，然后在冰冷卻下加入0.2ml異丙基碘和19mg 60％氫化鈉。所得混合物在0℃下攪拌2小時(shí)后，在室溫下攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋后，用12ml飽和氯化鈉水溶液和28ml 5％硫代硫酸鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝8∶1→4∶1)層析法提純后，用1，4—二惡烷冷凍干燥，由此獲得108mg標(biāo)題化合物(收率50％)。1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.06(m，27H，γ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac)，1.29，1.30(d×2，6H，Me(isopropyl)，1.38，
1.39(d×2，3H，β-Me(Lac))，1.45-1.89(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，2.82-3.00(m，12H，NMe)，2.91-3.21(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，4.55(m，1H，CH(iso-propyl))，4.74-5.82(m，8H，α-H)，6.84-7.34(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1007實(shí)施例26環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(o—All)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF 1022—020)的制備將206mg PF 1022E物質(zhì)溶解在8ml THE中。然后在冰冷卻下加入0.18ml烯丙基碘和20mg 60％氫化鈉。在0℃下攪拌所得混合物一小時(shí)。反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋后，用30ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝7∶1→4∶1)層析法提純后，從醚—己烷中結(jié)晶，由此獲得158mg標(biāo)題化合物(收率73.8％)。1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.07(m，27H，γ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac)，1.30-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.38，1.39(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.81-3.00(m，12H，NMe)，2.90-3.20(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，4.52(m，2H，allyl)，4.74-5.17，5.44-5.82(m，8H，α-H)，5.20-5.25，5.34-5.41，6.05(each m，each 1H，allyl)，6.88-7.35(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1005實(shí)施例27環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu
—D—TYRA(o—n—Bu)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—021)的制備將204mg PF 1022E物質(zhì)溶解在8ml THF中，然后在冰冷卻平加入0.24ml正丁基碘化物和16mg 60％氫化鈉。所得混合物在0℃下攪拌一小時(shí)后，在室溫下再攪拌一小時(shí)。反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋后，用30ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝8∶1→4∶1)層析法提純后，用1，4—二惡烷冷凍干燥，由此獲得159mg標(biāo)題化合物(收率73.7％)。
1H-NMR(CD3OD)δ＝0.77-1.05(m，30H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac)，Me(butyl))，1.28-1.9O(m，16H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，OCH2CH2CH2CH3)，1.38，1.39(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.82-3.00(m，12H，NMe)，2.92-3.20(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，3.94(m，1H，OCH2CH2CH2CH3)，4.75-5.81(m，8H，α-H)，6.85-7.33(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1021實(shí)施例28環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(OBn)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—022)的制備將305mg PF1022E物質(zhì)溶解在9ml THF中，然后在冰冷卻下加入0.07ml苯甲基碘化物和28mg 60％氫化鈉。所得混合物在0℃下攪拌1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋后，用40ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶1)層析法提純后，用1，4—二惡烷和水的液體混合物冷凍干燥，由此獲得320mg標(biāo)題化合物(收率95.8％)。
1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.06(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.25-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.38，1.39(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.82-3.00(m，12H，NMe)，2.86-3.20(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA))，4.74-4.78，5.17-5.82(m，8H，α-H)，5.05(s，2H，CH2Ph)，6.95-7.50(m，14H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1055實(shí)施例29環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(3，5—di—cl)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—023)的制備將301mg PF 1022E物質(zhì)溶解在15ml二氯甲烷中，然后在冰冷卻下加入0.22ml次氯酸正丁酯。在同一溫度下攪拌所得混合物40分鐘。將30ml 5％硫代硫酸鈉的水溶液和30ml二氯甲烷加入反應(yīng)混合物中，使反應(yīng)混合物分離為二層。如此獲得的有機(jī)層通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，然后經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝8∶1→4∶1)層析法提純，由此獲得120mg標(biāo)題化合物(收率37.2％)。1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.07(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.26-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.40，1.41(d×2，3H，β-Me(Lac))，2.80-3.18(m，12H，NMe)，
2.80-3.20(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA))，4.78-5.85(m，8H，α-H)，7.24-7.35(m，7H，aroma-tic)MS(FAB)(M＋H)+＝1033，1035實(shí)施例30環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(3，5—di—Br)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—025)的制備將406mg PF 1022E物質(zhì)溶解在20ml二氯甲烷中。在冰冷卻下向所得溶液中加0.12ml三乙胺和0.07ml溴，然后在0℃下攪拌20分鐘。將40ml氯仿和30ml 5％硫代硫酸鈉水溶液加入反應(yīng)混合物中，使所得混合物分離為二層。如此獲得的水層用20ml乙酸乙酯和10ml己烷的液體混合物提取。結(jié)合的有機(jī)層通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾后，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。然后在減壓下將溶劑蒸發(fā)掉。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝9∶1→7∶1)層析法提純，由此獲得420mg標(biāo)題化合物(收率89.0％)。[α]D20-90°(c＝0.2，MeOH)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.07(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.38(d，J＝6.7，β-Me(Lac))，1.28-1.91(m，12H，β-CH2，γ-H(Me-Leu))，2.82-3.01(m，12H，NMe)，2.92-3.21(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，4.77-5.82(m，8H，α-H)，7.26-7.46(m，7H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1121，1123，1125實(shí)施例31環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu
—D—TYRA(3，5，—di—Br，o—Me)—L—Meleu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—026)的制備將200mg PF 1022E物質(zhì)的3，5—二溴化物溶解在8ml THF中，在冰冷卻下向所得溶液加0.1ml碘代甲烷和16mg 60％氫化鈉，然后在0℃下攪拌1.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用50ml乙酸乙酯稀釋后，用30ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，并通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。然后在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝10∶1)層析法提純，由此獲得108mg標(biāo)題化合物(收率53.1％)。
1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.08(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.28-1.90(m，12H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.28-1.90(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.38，1.39(d×2，J＝6.7，β-Me(Lac))，2.81-3.13(m，12H，NMe)，2.90-3.20(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA))，4.77-5.82(m，8H，α-H)，7.24-7.59(m，7H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1135，1137，1139實(shí)施例32環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(o—Oct)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—029)的制備將253mg PF 1022E物質(zhì)溶解在5ml THF中。在冰冷卻下向所得溶液中加2.4ml辛基碘和23mg 60％氫化鈉，然后在0℃下攪拌一小時(shí)。用40ml乙酸乙酯和10ml己烷稀釋反應(yīng)混合物后，用30ml飽和氯化鈉水溶液洗滌，通過(guò)少量硅膠層析過(guò)濾并經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥。然后在減壓下蒸發(fā)掉溶劑。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(氯仿∶乙酸乙酯＝20∶1→10∶1→5∶1)層析法提純，由此獲得199mg標(biāo)題化合物(收率70.6％)。實(shí)施例33環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(O—THP)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—224)的制備將202mg PF 1022E物質(zhì)溶解在5ml二氯甲烷中。向所得溶液中加4.5mg對(duì)—甲苯磺酸水合物和0.04ml 2，3—二氫吡喃，然后在室溫下攪拌40分鐘。向反應(yīng)混合物中加0.01ml三乙胺，然后濃縮。如此獲得的殘余物通過(guò)硅膠柱(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)層析法提純，由此獲得200mg標(biāo)題化合物(收率91％)。1H-NMR(CDCl3)δ＝0.79-1.05(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.23-2.05(m，18H，β-CH2，γ-H(MeLeu)，OCH2(CH2)3(THP))，1.40(d，J＝6.7，β-Me(Lac))，2.72-3.01(s×10，12H，NMe)，3.02-3.18(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA)，3.57-3.62，3.85-3.91(m，each1H，OCH2CH2(THP))，4.47-5.70(m，9H，α-H，OCHO(THP))，6.94-6.99，7.11-7.15，7.21-7.31(m，9H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1049實(shí)施例34環(huán)—(L—MeLeu—D—PhLac—L—MeLeu—D—Lac—L—MeLeu—D—TYRA(O—Tr)—L—MeLeu—D—Lac)(編號(hào)PF1022—223)的制備將410mg PF 1022E物質(zhì)溶解在16ml二氯甲烷中。向所得溶液加210mg三苯甲基氯，0.08ml三乙胺和16mg 4—二甲胺吡啶，然后在室溫下攪拌24小時(shí)。反應(yīng)混合物用8ml甲苯稀釋?zhuān)缓笸ㄟ^(guò)硅膠柱(乙酸乙酯∶己烷＝2∶1)層析法提純，由此獲得287mg標(biāo)題化合物白色粉末(收率56％)。m.p.109-115℃(dec.)1H-NMR(CD3OD)δ＝0.78-1.05(m，27H，δ-Me(MeLeu)，β-Me(Lac))，1.24-1.80(m，12H，β-CH2，γ-H(MeLeu))，1.40(d，3H，J＝7，β-Me(Lac))，2.51-3.01(s×10，12H，NMe)，2.77-3.18(m，4H，β-CH2(PhLac，TYRA))，4.41-5.70(m，8H，α-H)，6.57-6.62，6.81-6.84，7.18-7.31，7.41-7.45(m，24H，aromatic)MS(FAB)(M＋H)+＝1207本發(fā)明提供的用通式(I)代表的PF基1022衍生物都對(duì)寄生于人體、家畜和寵物上的各種寄生蟲(chóng)具有驅(qū)蟲(chóng)作用。因此它們可用作預(yù)防和治療寄生蟲(chóng)感染的驅(qū)蟲(chóng)藥。
權(quán)利要求
1.一種環(huán)縮酚酸肽，稱(chēng)之為PF1022衍生物，用下面的通式表示 其中(i)R2和R4各是環(huán)己甲基或芐基，R1和R3各是甲基或環(huán)己甲基或芐基，和X，Y，Z和Q各是甲基，條件是R1，R2，R3和R4至少一個(gè)是環(huán)己甲基，或者(ii)R1，R2，R3和R4各是含1到11個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，它們可以相同或不同，而X，Y，Z和Q各是甲基，或者(iii)R1和R3各是含1至11個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，它們可以相同或不同，而R2和R4各是未取代的芐基，并且X，Y，Z和Q各是甲基，條件是R1是甲基時(shí)R3不是甲基，或者(iv)R1，R2和R3各是含1到11個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，它們可以相同或不同，R4是芐基的苯核上具有或不具有取代基的芐基，和X，Y，Z和Q各是甲基，或者(v)當(dāng)R2和R4各是芐基時(shí)R1和R3都是甲基，且至少X，Y，Z和Q中之一是氫，而基余的都是甲基，或者(vi)R1，R3，X，Y，Z和Q都是甲基，R2是芐基的苯核上具有或不具有取代基的芐基，R4是芐基的苯核上具有取代基的芐基。
2.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是PF1022物質(zhì)的氫化衍生物，用下列通式表示 其中R2a和R4a各是環(huán)己甲基或芐基，條件是R2a和R4a中至少一個(gè)是環(huán)己甲基。
3.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是PF1022B物質(zhì)的氫化衍生物，用下列通式表示 其中R1b，R2b，R3b和R4b各是環(huán)己甲基或芐基，但R1b，R2b，R3b，和R4b中至少一個(gè)是環(huán)己甲基。
4.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是用下列通式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中R1c，R2c，R3c和R4c各是含1到11個(gè)碳原子，尤其是含1到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，它們可以相同或不同。
5.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是用下列通式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中R1d和R3d各是含1到11個(gè)碳原子，尤其是含1到6個(gè)碳原子，的直鏈或支鏈烷基，它們可以相同或不同，但R1d和R3d不同時(shí)為甲基。
6.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是用下列通式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中R1c，R2c和R3c各是含1到11個(gè)碳原子，尤其是含1到6個(gè)碳原子，的支鏈或直鏈烷基，它們可以相同或不同，G，L和M分別表示氫或取代基，尤其是鹵原子，羥基，烷氧基，低級(jí)鏈烯基氧基，苯基—低級(jí)烷氧基，烷基羰基氧基，四氫吡喃基氧基或三苯甲氧基。
7.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是用下列通式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中Xa，Ya，Za和Qa中至少一個(gè)是氫，而其余都是甲基；優(yōu)選當(dāng)Ya和Qa是氫時(shí)Xa和Za是甲基，或者當(dāng)Ya和Qa是甲基時(shí)Xa和Za是氫。
8.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是用下列通式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中G’，L’的M’分別表示一個(gè)取代基，尤其是鹵原子，羥基，烷氧基，低級(jí)鏈烯氧基，苯基—低級(jí)烷氧基，烷基羰基氧基，四氫吡喃基氧基，或三苯甲氧基。
9.按照權(quán)利要求1的衍生物，它是用下列通式表示的環(huán)縮酚酸肽 其中G’，L’和M’分別表示一個(gè)取代基，尤其是鹵原子，羥基，烷氧基，低級(jí)鏈烯氧基，苯基一低級(jí)烷基，烷基基氧基，四氫吡喃氧基或三苯甲氧基。
10.一種環(huán)縮酚酸肽，用下列通式表示的PF10022E物質(zhì)，
11.一種抗蠕蟲(chóng)組合物，其特征在于該組合物含有一種如權(quán)利要求1中所定義的用通式(I)來(lái)表示的新的環(huán)縮酚酸肽或其酸加成鹽作為活性成分。
全文摘要
新的通式(I)PF1022衍生物-環(huán)縮酚酸肽(cyclodepsipeptides)，及其酸加成鹽，它對(duì)寄生在人體、家畜和寵物的各種寄生蠕蟲(chóng)具有抗蠕蟲(chóng)活性。因此它可用作防治寄生蟲(chóng)傳染的抗蠕蟲(chóng)劑。在式(I)中，R
文檔編號(hào)C07D273/00GK1119437SQ94191522
公開(kāi)日1996年3月27日 申請(qǐng)日期1994年2月18日 優(yōu)先權(quán)日1993年2月19日
發(fā)明者大山真, 大石麻紀(jì), 岡田裕美子, 鷲見(jiàn)信二郎, 村井安, 阪中治, 米田利夫, 飯沼勝春, 小山正夫, 高木誠(chéng)之, 岡田忠昭, 柴原圣至 申請(qǐng)人:明治制果株式會(huì)社