專利名稱：抗菌化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及碳代青霉烯類化合物，特別是那些含有羧基取代噻吩基的這類化合物。本發(fā)明進(jìn)一步涉及它們的制備方法，在它們的制備過程中的中間體，它們作為治療藥劑的應(yīng)用以及含有它們的藥物組合物。本發(fā)明的化合物是抗菌素并且可用來治療那些通常用抗菌素治療的任何疾病，例如用來治療哺乳動物包括人類的細(xì)菌感染。
碳代青霉烯類化合物是1974年首次由發(fā)酵介質(zhì)中析離的并被發(fā)現(xiàn)具有廣譜抗菌活性。自從這一發(fā)現(xiàn)之后，為制造新的碳代青霉烯衍生物進(jìn)行了大量研究并發(fā)表了數(shù)百篇專利和科學(xué)論文。
第一個(gè)，也是迄今唯一的市售碳代青霉烯化合物稱為imipenem(N-甲酰亞胺基thiemamycin(6-(1-羥乙基)-3-[[2-[(亞胺基甲基)氨基)乙基]硫基]-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2-烯-2-羧酸)。這一化合物具有廣譜抗菌活性。
本發(fā)明提供具有廣譜抗菌活性，包括對革蘭氏陽性和陰性菌、需氧和厭氧細(xì)菌在內(nèi)的化合物，它們對β-內(nèi)酰胺酶具有良好的穩(wěn)定性。此外本發(fā)明的代表性化合物還呈現(xiàn)令人滿意的藥物動力學(xué)特性。
這里涉及的碳代青霉烯衍生物是按照一般接受的半系統(tǒng)命名法則
按此，本發(fā)明提供具有下式(Ⅰ)的化合物
其中R1是1-羥乙基，1-氟乙基或羥甲基;
R2是氫或C1-4烷基;
R3是氫或C1-4烷基;
并且其中的噻吩環(huán)可進(jìn)一步任意地被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的基團(tuán)所取代鹵素，氰基，C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基、三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基、C1-4烷基氨基，二-C1-4烷基氨基、磺酸、C1-4烷S(O)n-基(其中的n值為0-2)、C1-4烷酰胺基、C1-4烷酰(N-C1-4烷基)氨基、氨基甲?；?、C1-4烷基氨基甲?；?、二-C1-4烷基氨基甲?；蚇-C1-4烷磺酰胺基;或者被連接在噻吩環(huán)的相鄰兩個(gè)碳原子上的四亞甲基所取代;本發(fā)明也提供上述化合物的藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯。
術(shù)語烷基包括所有直鏈和支鏈的結(jié)構(gòu)，例如，C1-4烷基包括正丁基和2-甲基丙基。
最好R1是1-羥乙基。
R2是氫或C1-4烷基，例如甲基，乙基，正丙基，1-甲基乙基和正丁基。
最好R2是氫或甲基，特別是R2是甲基。
R3是氫或C1-4烷基，例如甲基，乙基，正丙基，1-甲基乙基和正丁基。
最好R3是氫或甲基，特別是R3是氫。
噻吩環(huán)上合適的取代基包括，例如鹵素氟、氯、溴和碘;
C1-4烷基甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基和2-甲基丙基;
C1-4烷氧基甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基和2-甲基丙氧基;
C1-4烷基氨基甲?；谆被柞；?、乙基氨基甲酰基和丙基氨基甲?；?
二-C1-4烷基氨基甲酰基二甲基氨基甲?；一被柞；?
C1-4烷基氨基甲胺基，乙胺基，丙胺基;
二-C1-4烷基氨基二甲胺基，二乙胺基，甲基乙胺基;
C1-4烷基S(O)n-甲硫基，甲基亞磺酰基和甲基磺?；?
C1-4烷酰胺基乙酰胺基，丙酰胺基;
C1-4烷氧羰基甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基;
C1-4烷酰(N-C1-4烷基)氨基N-甲基乙酰胺基和N-乙基乙酰胺基;
N-C1-4烷磺酰胺基N-甲烷磺酰胺基和N-乙烷磺酰胺基;
最好是，當(dāng)噻吩環(huán)被任意地取代時(shí)，這任意的取代基是選自鹵素，氰基，C1-4烷基，硝基，羧基，羥基，C1-4烷氧基，氨基甲?；被?，三氟甲基和四亞甲基。
尤其優(yōu)選的是，噻吩環(huán)沒有被進(jìn)一步取代或只被一個(gè)羥基、甲基或四亞甲基所進(jìn)一步取代。
本發(fā)明包括所有那些具有式(Ⅰ)的差向異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體和互變異構(gòu)體形式，其中在5-位上的絕對立體化學(xué)構(gòu)型如在式(Ⅰ)中說明。當(dāng)一個(gè)鍵用一個(gè)楔形表示時(shí)，它是指在三維空間中這鍵是指向紙平面外，而當(dāng)一個(gè)鍵用影線表示時(shí)，它是指在三維空間中這鍵是指向紙平面內(nèi)，式(Ⅰ)化合物還有一些別的立體化學(xué)中心，即在R1基團(tuán)中(當(dāng)R1是1-羥乙基或1-氟乙基時(shí));在6位;在1位(當(dāng)R2是C1-4烷基時(shí));以及在吡咯烷環(huán)的2′位和4′位
優(yōu)選的化合物是那些其中β-內(nèi)酰胺上的質(zhì)子彼此具有反式構(gòu)型的化合物。當(dāng)R1是1-羥乙基或1-氟乙基時(shí)，最好是8位取代基具有R構(gòu)型，這樣，具有式(Ⅲ)的化合物和它的藥物上的可接受的鹽以及在體內(nèi)可水解的酯是一類經(jīng)優(yōu)選的化合物
式中R2，R3和噻吩環(huán)上的任意取代基的定義與前面相同。
當(dāng)R2是C1-4烷基，例如甲基時(shí)，最好是化合物是以1R構(gòu)型的形式存在。
優(yōu)選的化合物是那些吡咯烷環(huán)的2′位和4′位具有下述立體化學(xué)絕對構(gòu)型的化合物
合適的一類本發(fā)明的化合物是具有下列式(Ⅳ)的化合物和它的藥物上可接受的鹽以及在體內(nèi)可水解的酯
其中R3以及噻吩環(huán)上任意取代基的定義與前面式(Ⅰ)中的相同。
另一方面，合適的一類化合物是那些式(Ⅳ)化合物，其中的R3是氫、甲基或乙基;并且在噻吩環(huán)上的任意取代基與式(Ⅰ)中定義的相同。
還有另一類合適的具有式(Ⅳ)的化合物，其中的噻吩環(huán)進(jìn)一步被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的取代基所取代甲基，乙基，羥基，羧基，氰基，氟，氯，溴，氨基甲?；趸?，甲氧基，乙氧基和丙氧基;或者被連接在噻吩環(huán)上相鄰碳原子上的四亞甲基所取代;R3的定義與式(Ⅰ)中的限定相同。
本發(fā)明的一類具體的化合物是這樣的式(Ⅳ)化合物，其中R3是氫或甲基;噻吩環(huán)任意地進(jìn)一步被一個(gè)選自甲基、乙基，羥基，羧基，氰基，氯，溴，硝基，甲氧基，乙氧基和四亞甲基的取代基所取代。
本發(fā)明的一類優(yōu)選的化合物是這樣的式(Ⅳ)化合物，其中R3是氫;
噻吩環(huán)進(jìn)一步被一個(gè)選自甲基、羥基、氯、四亞甲基和羧基的取代基所取代;
本發(fā)明的一類更為優(yōu)選的化合物是這樣的式(Ⅳ)化合物，其中R3是氫;
噻吩環(huán)或者是沒有被進(jìn)一步取代，或者是被一個(gè)選自甲基或羥基的取代基所取代，或者被四亞甲基所取代。
具體的本發(fā)明化合物是，例如，下面這些式(Ⅳ)化合物(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2(2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;以及它們的藥物上可接受的鹽類和在體內(nèi)可水解的酯類。
合適的藥物上可接受的鹽類包括與酸加成的鹽類諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽以及與磷酸和硫酸形成的鹽。另一方面，合適的鹽類也可以是與堿形成的鹽諸如堿金屬鹽例如鈉鹽或鉀鹽，堿土金屬鹽例如鈣鹽或鎂鹽，與有機(jī)胺形成的鹽例如與三乙胺，嗎啉、N-甲基哌啶，N-乙基哌啶，普魯卡因，二芐胺，N，N-二芐基乙胺形成的鹽，或與氨基酸例如賴氨酸形成的鹽。
為避免疑慮，依賴于羧酸官能基的數(shù)目和所說的陽離子的價(jià)數(shù)，可以有一種，兩種，三種或四種形成鹽的陽離子。
優(yōu)選的藥物上可接受的鹽是鈉鹽和鉀鹽。但在制備過程中為使鹽的析離變得容易，一些在選擇的溶劑中較少溶解的鹽類可以更合適，而不管它是否是藥物上可接受的鹽。
在體內(nèi)可水解的酯類是那些藥物上可接受的酯類，它在人體內(nèi)可水解產(chǎn)生母體的羥基和羧基化合物。這類酯可通過把待試驗(yàn)的化合物給試驗(yàn)動物給藥，例如靜脈注射，然后檢驗(yàn)試驗(yàn)動物的體液來鑒定。合適的與羥基形成體內(nèi)可水解酯的基團(tuán)包括乙?；?、丙酰基、新戊酰基，C1-4烷氧羰基例如乙氧羰基和苯乙?；?。合適的與羧基形成體內(nèi)可水解酯的基團(tuán)包括C1-6烷氧甲基酯例如甲氧甲基;C1-6烷酰氧甲基酯例如新戊酰氧甲基;C3-8環(huán)烷氧羰氧C1-6烷基例如1-環(huán)己基氧羰氧乙基;1，3-二氧雜環(huán)戊-2-烯酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧雜環(huán)戊-2-烯-酮基甲基;2-苯并[c]呋喃酮酯和C1-6烷氧羰氧乙基酯例如1-甲氧羰氧乙基等，并且可在本發(fā)明的化合物中的任何一個(gè)羧基上成酯。
為了把式(Ⅰ)化合物或它的藥物上可接受的鹽或體內(nèi)可水解的酯用于哺乳動物包括人類的治療，特別是治療感染，通常是按照標(biāo)準(zhǔn)的藥物實(shí)踐的做法把它配制成藥物組合物。
這樣，本發(fā)明的另一個(gè)特點(diǎn)是提供一種藥物組合物，它包含式(Ⅰ)化合物或它的一種藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯以及一種藥物上可接受的載體。
本發(fā)明的藥物組合物可以標(biāo)準(zhǔn)方式給需要治療的疾病患者用藥，例如通過口服、經(jīng)腸道或不經(jīng)腸道用藥。為這種目的本發(fā)明的化合物可用本專業(yè)已知的方法配制成，例如，片劑、膠囊、水溶液、油溶液或懸浮液、乳液，可分散的粉劑、栓劑以及消毒的可注射的水溶液或油溶液或懸浮液。
本發(fā)明的化合物可配制成充在小瓶中的干粉，它可以是只包含本發(fā)明的化合物，也可以是與輔劑混在一起的干粉混合物。例如一種本發(fā)明的酸性化合物可以與一種堿金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽干燥混合。本發(fā)明化合物單獨(dú)地或與標(biāo)準(zhǔn)的賦形劑在一起配成冷凍干燥制劑也是可能的。標(biāo)準(zhǔn)的賦形劑包括結(jié)構(gòu)成形劑、冷凍防護(hù)劑和pH調(diào)節(jié)劑，諸如甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、氯化鈉、糊精、蔗糖、麥芽糖、明膠、小牛血清白蛋白(BSA)、甘氨酸、甘露糖，核糖，聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)，纖維素衍生物，谷氨酸，肌醇，谷氨酸鉀，赤蘚醇，絲氨酸以及別的氨基酸和緩沖劑，例如磷酸氫二鈉和檸檬酸鉀。
除本發(fā)明的化合物以外，本發(fā)明的藥物組合物也可包含，(或一同給藥)一種或多種已知的其它臨床使用的抗菌劑(例如別的β-內(nèi)酰胺類或氨基葡糖苷)，β-內(nèi)酰胺酶抑制劑(例如棒酸)，腎小管阻滯劑(例如丙磺舒)，以及代謝酶的抑制劑(例如脫氫肽(水解)酶的抑制劑，例如Z-2-酰胺基-3-取代的丙烯酸鹽諸如cilastatin)以及N-?；陌被嶂T如betamipron(也可參看本發(fā)明的合適的藥物組合物是那種適合于以單位劑型口服的組合物，例如包含100毫克至1克本發(fā)明化合物的片劑或膠囊。
一種優(yōu)選的本發(fā)明的藥物組合物是那種適宜于靜脈注射，皮下注射或肌內(nèi)注射的組合物，例如含有1至50%W/W本發(fā)明化合物的可注射組合物。
組合物的具體實(shí)例，是以1%在水中的溶液冷凍干燥后構(gòu)成的，并可通過加入0.9%氯化鈉水溶液而做成所需要的濃度，它的含量最好是在1毫克-10毫克/毫升之間，如下所示組合物1實(shí)例1的化合物 50毫克組合物2實(shí)例1的化合物 50毫克甘氨酸 31毫克組合物的進(jìn)一步的具體實(shí)例和上面相似，但是用實(shí)例2至7中的任何一種化合物替換實(shí)例1的化合物。
本發(fā)明的藥物組合物通常是給人類施藥，用來防治細(xì)菌引起的感染，施藥方法與imipenem所用的一般方法相同，但考慮到本發(fā)明的化合物相對于imipenem臨床使用的藥物動力學(xué)，應(yīng)藉助劑量水平來留有適當(dāng)?shù)挠嗟?。這樣，每位患者一天可通過靜脈注射、皮下注射或肌內(nèi)注射接受0.05至5克，最好是0.1至2.5克本發(fā)明化合物。組合物每天1-4次給藥，最好是一天1或2次。靜脈、皮下或肌內(nèi)給藥可藉助注射進(jìn)行。另外，靜脈注射劑量也可通過在一定時(shí)間內(nèi)的連續(xù)輸注來給出。此外，每位患者每天接受的口服劑量與每日的非經(jīng)腸道給藥的劑量接近相等。即合適的每日口服劑量也是0.05至5克本發(fā)明化合物，組合物每天1至4次給藥。
發(fā)明化合物，組合物每天1至4次給藥。
本發(fā)明進(jìn)一步的特點(diǎn)是提供一種制備式(Ⅰ)化合物或它的藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯的方法，這方法包括把具有下式(Ⅴ)的化合物進(jìn)行脫保護(hù)基的反應(yīng)
其中的噻吩環(huán)可任意地被進(jìn)一步取代，如式(Ⅰ)中那樣。式(Ⅴ)中的R2定義與前面相同;R10是R3基團(tuán)或氨基保護(hù)基;R13是R1基團(tuán)，保護(hù)好的羥甲基或1-(保護(hù)的羥基)乙基;R11是氫或一個(gè)羧基保護(hù)基;R12是氫或氨基保護(hù)基，R18是羧基或保護(hù)的羧基，并且其中噻吩環(huán)上任意地取代基也被選擇性地保護(hù);其中至少存在一個(gè)保護(hù)基;此后如果必需;
(ⅰ)形成藥物上可接受的鹽(ⅱ)酯化以形成體內(nèi)可水解的酯。
保護(hù)基可一般選自文獻(xiàn)中已敘述的或?qū)κ炀毜幕瘜W(xué)家所熟知的、對于所述要保護(hù)的基團(tuán)是合適的任何一種基團(tuán)，并且可用通常的方法引入。
保護(hù)基也可用文獻(xiàn)中已敘述的或?qū)κ炀毜幕瘜W(xué)家是熟知的、對于所述要脫去的保護(hù)基合適的任何一種方便的方法來脫去，在選擇這類方法時(shí)應(yīng)力圖在有效除去保護(hù)基的同時(shí)把對分子中其它部分的干擾減至最小。
具有式(Ⅴ)的化合物是新的，并形成了本發(fā)明的另一特點(diǎn)。
為方便起見下面給出了保護(hù)基的具體實(shí)例，其中“低級的”是指有關(guān)基團(tuán)中最好只有1-4個(gè)碳原子。應(yīng)當(dāng)理解這些實(shí)例不是詳盡無遺的。同樣，下面所給出的除去保護(hù)基的方法的具體實(shí)例也不是詳盡無遺的。沒有具體敘述的使用保護(hù)基和脫去保護(hù)基的方法當(dāng)然也在本發(fā)明的范圍以內(nèi)。
羧基保護(hù)基可以是一種能形成酯的脂肪或芳香脂肪醇的基，或能形成酯的硅醇(所說的醇或硅醇最好是含有1-20個(gè)碳原子)羧基保護(hù)基的實(shí)例包括直鏈或帶叉鏈的(1-12C)烷基(例如異丙基或叔丁基);低級烷氧基低級烷基(例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、異丁氧基甲基);低級脂肪酰氧基低級烷基，(例如乙酰氧基甲基，丙酰氧基甲基、丁酰氧基甲基，新戊酰氧基甲基);低級烷氧羰氧基低級烷基(例如1-甲氧羰氧基乙基、1-乙氧羰氧基乙基);芳基低級烷基(例如對甲氧基芐基、鄰硝基芐基、對硝基芐基、二苯甲基和2-苯并[c]呋喃酮基);三(低級烷基)甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基;三(低級烷基)甲硅烷基低級烷基(例如三甲基甲硅烷基乙基);二芳基(低級烷基)甲硅烷基(例如叔丁基二苯基甲硅烷基);和(2-6C)烯基(例如烯丙基和乙烯基乙基)。
具體的適合于除去羧基保護(hù)基的方法包括例如，酸-、堿-、金屬-、或酶催化水解，對于諸如對硝基芐氧羰基這類基團(tuán)可用氫化，對于鄰硝基芐氧羰基這類基團(tuán)可用光解。
羥基保護(hù)基的實(shí)例包括低級烯基(例如烯丙基);低級烷?；?例如乙?；?;低級烷氧羰基(例如叔丁氧羰基);低級烯氧羰基(諸如烯丙基氧羰基);芳基低級烷氧羰基(例如苯甲酰氧羰基，對甲氧基芐氧羰基、鄰硝基芐氧羰基、對硝基芐氧羰基;三低級烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基);二芳基(低級烷基)甲硅烷基(例如叔丁基二苯基甲硅烷基)和芳基低級烷基(例如芐基)等。
氨基保護(hù)基的實(shí)例包括甲?；?、芳烷基、(例如芐基和取代的芐基，如對甲氧基芐基、硝基芐基、2，4-二甲氧基芐基和三苯甲基);二-茴香基甲基和呋喃甲基;低級烷氧羰基(例如叔丁氧羰基);低級烯氧羰基(例如烯丙基氧羰基);芳基低級烷氧羰基(例如芐氧羰基，對甲氧基芐氧羰基，鄰硝基芐氧羰基，對硝基芐氧羰基);三烷基甲硅烷基(例如三甲基甲硅烷基和叔丁基二甲基甲硅烷基);二芳基(低級烷基)甲硅烷基(例如叔丁基二苯基甲硅烷基);亞烷基(例如亞甲基);亞芐基和取代的亞芐基。
適當(dāng)?shù)某チu基和氨基保護(hù)基的方法包括，例如，酸-，堿-，金屬-或酶催化水解，對于諸如對-硝基芐氧羰基這類基團(tuán)可用氫化，對于諸如鄰硝基芐氧羰基這類基團(tuán)可用光解。
在式(Ⅰ)化合物中經(jīng)優(yōu)選的羧基和羥基保護(hù)基是烯丙基和對硝基芐基。經(jīng)優(yōu)選的除去烯丙基的方法，是在DMF中或一種偶極非質(zhì)子溶劑和四氫呋喃組成的混合物中，諸如二甲基亞砜/四氫呋喃或1，3-二甲基-2-氧雜-四氫嘧啶/四氫呋喃、或一種醇/四氫呋喃混合物諸如異丙醇/四氫呋喃或乙醇/四氫呋喃中，最好是在室溫用四(三苯基膦)鈀和Meldrum氏酸進(jìn)行鈀催化脫保護(hù)基。另外，在二氯甲烷中可用甲基苯胺代替Meldrum氏酸。在這些反應(yīng)條件下可通過加入鈉鹽，諸如2-乙基己酸鈉，使產(chǎn)物的鈉鹽沉淀而析離。
一種優(yōu)選的除去對硝基芐基的方法是用鈀催化劑進(jìn)行氫化。
本發(fā)明的另一個(gè)方面是通過下面的方法制備式(Ⅰ)和式(Ⅴ)化合物a)把式(Ⅵ)和式(Ⅶ)化合物進(jìn)行反應(yīng)
其中R2、R10、R11、R12、R13和R18的定義與前面相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義也與前面相同，L是一個(gè)離去基團(tuán)，b)把具有下式(Ⅷ)的化合物環(huán)化
其中R2，R10，R11，R12，R13和R18的定義與前面相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義也與前面相同，R14，R15，R16可獨(dú)立地選自C1-6烷氧基，芳氧基，二-C1-6烷基氨基和二芳基氨基或R14-R16中的任意兩個(gè)代表鄰-亞苯基二氧基，或者R14-R16中一個(gè)是C1-4烷基，烯丙基，芐基或苯基，而另外兩個(gè)基團(tuán)可獨(dú)立地選自C1-4烷基、三氟甲基或苯基，其中的任何一個(gè)苯基可任意地被C1-3烷基或C1-3烷氧基所取代;并且其中任何官能團(tuán)都可選擇性地保護(hù);然后，如果必需(ⅰ)脫去任何存在的保護(hù)基;
(ⅱ)形成藥物上可接受的鹽;
(ⅲ)酯化以形成在體內(nèi)可水解的酯。
適當(dāng)?shù)刈龇ㄊ窃谑?Ⅵ)化合物中L是羥基的活潑酯諸如磺酸酯(例如C1-6烷磺酰氧基，三氟甲烷磺酰氧基，苯磺酰氧基，甲苯磺酰氧基)，磷酸酯[例如二芳基磷酸酯，如二苯基磷酸酯)或者L是一個(gè)鹵化物(例如氯化物)。另一種可供選擇的L是砜類，例如-SOCH＝CH-NHCOCH3，它可容易地被置換。
最好是L是二苯基磷酸酯(-O-P(O)(OPh)2)。
式(Ⅵ)化合物以及它們的制備在有關(guān)碳代青霉烯的文獻(xiàn)中是眾所周知的，例如可參看EP-A-126587，EP-A-160391，EP-A-243686和EP-A-343499。
式(Ⅵ)和式(Ⅶ)化合物之間的反應(yīng)，典型地是在一種堿，諸如一種有機(jī)胺例如二異丙基乙胺或一種無機(jī)堿例如一種堿金屬碳酸鹽諸如碳酸鉀存在的條件下完成的。反應(yīng)可方便地在-25℃和室溫之間，合適地是在4℃完成。反應(yīng)一般是在一種有機(jī)溶劑諸如乙腈或二甲基甲酰胺中完成的，反應(yīng)一般是按類似于文獻(xiàn)中對類似的反應(yīng)所敘述的方法來完成的。
具有式(Ⅶ)的化合物是新的并形成本發(fā)明的另一個(gè)方面。
式(Ⅶ)化合物可通過把下列式(Ⅸ)化合物脫去保護(hù)基而制得
其中R10，R12和R18的定義與前相同，噻吩環(huán)上的任意取代基的定義也與前相同，R17是一個(gè)保護(hù)基，例如C1-6烷?；?，C1-6烷氧羰基或苯甲?；?。最好是R17是乙酰基和叔丁氧羰基。式(Ⅸ)化合物可通過標(biāo)準(zhǔn)的脫保護(hù)基的方法而轉(zhuǎn)化為式(Ⅶ)化合物，例如乙酰基可通過在水醇溶液中，或烯醇例如烯丙醇，或四氫呋喃中進(jìn)行堿性水解而除去，
具有式(Ⅸ)的化合物是新的，并且形成了本發(fā)明的另一個(gè)方面。
式(Ⅸ)化合物可通過直接形成的式(Ⅹ)化合物的活潑衍生物與式(Ⅺ)化合物進(jìn)行反應(yīng)而制得
其中R10，R12和R17和R18的定義與前相同，噻吩環(huán)上的任意取代基的定義也與前相同。式(Ⅹ)化合物的活化衍生物包括相應(yīng)于式(Ⅹ)的硫代羧酸的酰鹵、酸酐和‘活化’酯，諸如1H-苯并[1，2，3]-三唑-1-基酯，五氟苯基酯和2，4，5-三氯苯基酯，或苯并咪唑-2-基酯。式(Ⅹ)和式(Ⅺ)化合物的反應(yīng)是在標(biāo)準(zhǔn)方法的條件下完成的，例如在室溫，在磺酰氯存在的條件下完成。
式(Ⅹ)和式(Ⅺ)化合物可通過熟練的化學(xué)家所熟知的標(biāo)準(zhǔn)方法來制備，諸如那些在后面實(shí)例中敘述的方法，在EP-A-126587中敘述的方法或和這些方法類似或相似的方法。
適當(dāng)?shù)厥?，在?Ⅷ)化合物中R14，R15和R16可獨(dú)立地選自C1-6烷氧基諸如甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丙氧基或正丁氧基;芳氧基諸如任意取代的苯氧基，二-C1-6烷基氨基諸如二甲氨基或二乙氨基;二芳基氨在諸如二苯基氨基，或者R14-R16中的任何兩個(gè)基團(tuán)代表鄰-亞苯基二氧基。最好是R14-R16每個(gè)都有相同的意義并且都是C1-6烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、異丙氧基、正丁氧基或是苯氧基。
式(Ⅷ)化合物可在本專業(yè)已知的通常的反應(yīng)條件下環(huán)化而形成式(Ⅴ)化合物。典型的反應(yīng)條件是在60-150℃的溫度范圍內(nèi)，在一種基本是惰性的有機(jī)溶劑諸如甲苯，二甲苯或乙酸乙酯中加熱。典型地，反應(yīng)是在氮?dú)獗Ｗo(hù)下完成的，并且是在游離基消除劑例如氫醌存在的條件下進(jìn)行反應(yīng)的。
式(Ⅷ)化合物可以直接形成并環(huán)化。式(Ⅷ)化合物可通過把式(Ⅻ)化合物與(ⅩⅢ)化合物反應(yīng)而方便地制得
其中R2，R10-R16和R18的定義與前面相同，并且噻吩環(huán)的任意取代基的定義也與前面相同。合適地是，式(ⅩⅢ)化合物是亞磷酸酯或是這類化合物的官能團(tuán)等價(jià)物。
式(Ⅻ)和式(ⅩⅢ)化合物之間的反應(yīng)可在一種有機(jī)溶劑諸如甲苯、二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、乙腈或二甲基甲酰胺中方便地完成。典型地，反應(yīng)是在升高的溫度例如60℃～150℃進(jìn)行的。
式(Ⅻ)化合物可通過一些本專業(yè)已知的方法來制備。例如式(Ⅻ)化合物可通過把具有式(ⅩⅣ)的化合物進(jìn)行酰化反應(yīng)來制備
式中R2，R10、R12、R13和R18的定義與前相同，并且噻吩環(huán)上任意取代基的定義也與前相同。?；噭┦蔷哂惺?ⅩⅤ)的化合物
其中R11的定義與前面相同。
式(ⅩⅣ)化合物可以通過把具有式(ⅩⅥ)的化合物與式(Ⅶ)化合物反應(yīng)而制得
其中R2和R13的定義與前面相同。式(ⅩⅥ)化合物在本專業(yè)內(nèi)是已知的并且可以與式(Ⅶ)化合物在普通的本專業(yè)已知的?；椒ǖ臈l件下進(jìn)行反應(yīng)。
式(Ⅶ)、(Ⅻ)和(ⅩⅣ)化合物是新的，并由此而形成本發(fā)明的另一個(gè)特點(diǎn)。
下面的生物試驗(yàn)方法，數(shù)據(jù)和實(shí)例是用來解釋本發(fā)明的。
抗菌活性本發(fā)明的藥物上可接受的碳代青霉烯類化合物是具有廣譜活性的有用的抗菌劑，它在體外對標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室微生物，包括革蘭氏陰性和革蘭氏陽性菌都呈現(xiàn)出抗菌活性，這可用來篩分出對致病的細(xì)菌有活性的藥物。一個(gè)具體化合物的抗菌譜和藥效可在一種標(biāo)準(zhǔn)的試驗(yàn)體系中測定。特別是本發(fā)明的碳代青霉烯類化合物顯示出對β-內(nèi)酰胺酶的良好穩(wěn)定性并且在哺乳動物中具有特別好的排除半衰期，一般這些化合物顯示出超過imipenem的有意義的改進(jìn)。
本發(fā)明化合物的抗菌性能用普通的試驗(yàn)在體內(nèi)也可被證實(shí)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)碳代青霉烯化合物對于溫血?jiǎng)游镆话闶窍鄬o毒性的，這一通則對于本發(fā)明的化合物也是適用的。當(dāng)把本發(fā)明的代表性化合物以超過為防止細(xì)菌感染所需要的劑量給大鼠施藥時(shí)，并未觀察到明顯的中毒癥狀或由于施用的化合物引起的不良效果。
用診斷靈敏度試驗(yàn)，在一種標(biāo)準(zhǔn)的體外試驗(yàn)系統(tǒng)中為本發(fā)明的有代表性的化合物取得了下面的試驗(yàn)結(jié)果，抗菌活性是借助最小抑菌濃度(MIC)來表示的，后者可用接種規(guī)模為104CFU/斑點(diǎn)通過瓊脂稀釋技術(shù)來測定。
最小抑菌濃度(MIC)(μg/ml)生物體 實(shí)例1化合物牛津金色鏈霉菌 0.125Oxford大腸埃希氏桿菌 0.008DCO摩氏變形菌 0.008I+001陰溝腸桿菌 0.008P-99脆弱桿菌 0.125AMP S
在以下作為本發(fā)明范圍的有代表性的實(shí)例中(a)除非特別說明，NMR譜是在200MHz或400MHz的儀器上做的;
(b)烯丙氧基是指丙烯-1-基氧基-OCH2CH＝CH2;
(c)THF指四氫呋喃;
(d)DMF指二甲基甲酰胺(e)DMSO指二甲基亞砜(f)溶劑的蒸發(fā)是在減壓下進(jìn)行的;
(g)HPLC是指高壓液相色譜;
(h)溫度是用攝氏溫標(biāo)(i)TFA指三氟醋酸;
(j)tlc指薄層色譜。
實(shí)例1(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)把4-硝基芐基(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸鹽(二異丙基乙胺鹽)(等價(jià)于250毫克游離酸，0.31mM)在水(10毫升)和碳酸氫鉀(65毫克，0.629mM)中形成的溶液在鈀/炭(10%)(200毫克)催化劑存在的條件下，在大氣壓下進(jìn)行氫化。用HPLC跟蹤反應(yīng)的進(jìn)行。在反應(yīng)終了后過濾除去催化劑，殘余的溶液用制備性的HPLC提純(Nucleosiol C-18，10μM，直徑2.4厘米;長度25cm)。用水作洗脫劑，含有所需化合物的餾分經(jīng)濃縮和冷凍干燥即給出標(biāo)題化合物(65毫克，37%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，2H);1.75(m，1H);2.65(m，1H);2.82(m，1H);3.2(dd，1H);3.3-3.5(m，2H);3.65(m，1H);3.85-4.05(m，2H);4.15(dd，1H);7.72(s，1H);7.78(s，1H).
原料的制備方法如下4-硝基-2-噻吩羧酸把2-噻吩羧酸(6.4克，50mM)懸浮于醋酐(15毫升)中，在攪拌下于1小時(shí)內(nèi)往其中慢慢滴加發(fā)煙硝酸(16毫升)在冰醋酸中(25毫升)的溶液，同時(shí)保持反應(yīng)混合物的溫度在30℃以下。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，產(chǎn)物經(jīng)過HP20SS樹脂柱層析(470毫升)提純，用甲醇/(水+1%醋酸)0/100→50/50作為洗脫劑。即得到純凈的標(biāo)題化合物(1.3克)以及4-和5-硝基噻吩-2-羧酸的混合物(4.4克)。
NMR(CDCl3)δ8.35(d，1H);8.5(d，1H)4-氨基-2-噻吩羧酸把4-硝基-2-噻吩羧酸(1克，5.7毫摩爾)在攪拌下加到SnCl.2H2O(3.25克，14.4毫摩爾)在濃鹽酸(10毫升)中所形成的溶液中。混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)后在HP20SS樹脂上進(jìn)行層析提純，用水作為洗脫液，即給出標(biāo)題化合物(0.59克，71%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ7.6(S，2H)(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫代醋酸酯在室溫，把(2S，4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷(1.5克，4.08毫摩爾)溶解于亞硫酰氯中(10毫升)。混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，蒸出亞硫酰氯，殘余的油狀物溶于二氯甲烷/甲苯中(10毫升，1∶1)然后蒸去溶劑、殘余的油狀物真空干燥1小時(shí)后溶解于二氯甲烷中(25毫升)。在0℃把這溶液加到由4-氨基-2-噻吩羧酸(0.58克，4.08毫摩爾)，三甲基甲硅基氯(1毫升，8.2毫摩爾)和二異丙基乙胺(3毫升，17.25毫摩爾)在二氯甲烷(40毫升)中所形成的溶液中。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?2小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，殘余物溶解在DMF中并在HP20SS樹脂上進(jìn)行層析，用乙腈/水/醋酸(40∶60∶1)洗脫，然后濃縮并冷凍干燥，即得到標(biāo)題化合物(0.84克，42%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.92(m，1H)，2.32(s，3H)，2.76(m，1H)，3.35(m，1H);3.9-4.2(m，2H);4.42(m，1H);5.0-5.35(m，2H);7.45(d，1H);7.65(d，1H);7.76(s，2H);7.96(d，1H);8.22(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫醇把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(0.475克，0.963毫摩爾)溶于二噁烷/水(1∶1)組成的混合物(20毫升)中并用1M NaOH水溶液(2.5毫升，2.4毫摩爾)處理，反應(yīng)用HPLC監(jiān)測。1小時(shí)后，用6M鹽酸水溶液在0℃把反應(yīng)液的pH調(diào)節(jié)到3。然后把反應(yīng)混合物蒸發(fā)并在真空下干燥1小時(shí)。
(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(二異丙基乙胺鹽)
把(1R，5R，6R，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸4-硝基芐基酯(0.575克，0.968毫摩爾)在DMF(5毫升)中形成的溶液加到(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇在DMF(5毫升)中所形成的溶液中。往反應(yīng)混合物中加入二異丙基乙胺(0.505毫升，2.9毫摩爾)，三正丁基膦(0.24毫升，0.968毫摩爾)和水(20微升，0.968毫摩爾)，并在4℃攪拌14小時(shí)。標(biāo)題化合物可在HP20SS樹脂(100毫升)上進(jìn)行層析來提純，用乙腈/水(30∶70)作為洗脫劑。蒸發(fā)并冷凍干燥即給出標(biāo)題化合物(0.375克，49%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(t，15H);1.25(2d，6H);1.95(m，1H);2.81(m，1H);3.15(q，2H);3.3(m，1H);3.42(m，1H);3.5-3.7(m，3H);3.9-4.2(m，3H);4.2-4.35(m，1H);4.35-4.55(m，1H);5.15-5.45(m，4H);7.35-8.05(m，8H);8.15(s，1H);8.18(s，1H).
實(shí)例2(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)把(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯二異丙基乙胺鹽(等價(jià)于0.49克游離酸，0.7毫摩爾)在THF(25毫升)中形成的溶液用三苯基膦(20毫克，0.076毫摩爾)，己酸鉀(0.46M在乙酸乙酯中的溶液，3.2毫升，1.47毫摩爾)，己酸(0.235毫升，1.47毫摩爾)和四(三苯基膦)鈀(70毫克)在室溫處理1小時(shí)。然后往反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯并通過過濾來收集沉淀。把沉淀用乙酸乙酯洗滌后干燥(0.45克，87%)。粗產(chǎn)物被溶解于水(10毫升)中并在大氣壓下用鈀/炭催化劑(10%，0.35克)進(jìn)行氫化。用分析用的HPLC跟蹤脫保護(hù)基的過程。當(dāng)反應(yīng)終了(通常約0.5至1小時(shí))時(shí)，濾出催化劑，濾液濃縮后經(jīng)制備性色譜提純(Nucleosil C-18)，用水作洗脫劑，把洗脫液中需要的餾份濃縮并冷凍干燥后，即給出標(biāo)題化合物(0.13克，38%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.75(m，1H);2.5-2.7(m，2H);3.18(dd，1H);3.2-3.65(m，3H);3.9-4.05(m，2H);4.15(dd，1H);7.55(d，1H);7.98(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫代醋酸酯這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例1的方法，由3-硝基-2-噻吩羧酸制備的，只是不必甲硅烷基化。氨基酸可用二異丙基乙胺增溶，使溶解于二氯甲烷中。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4，TFA-d)δ2.15(m，1H);2.27(s，3H);2.85(m，1H);3.4(m，1H);3.85-4.3(m，2H);4.53(dd，1H);5.22(d，2H);7.5(d，2H)，7.75(d，1H);7.92(d，1H);8.05(d，2H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例1的方法，由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇和(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(s，15H);1.3(2d，6H);2.05(m，1H);2.88(m，1H);3.15(q，2H);3.25(dd，1H);3.32-3.58(m，2H);3.62(qi，2H);3.9-4.05(m，2H);4.05-4.3(m，2H);4.4-4.65(m，3H);5.0-5.4(m，4H);5.85(m，1H);7.45(d，1H);7.64(d，1H)，7.7(d，1H);7.85-8.02(m，2H);8.25(d，1H).
實(shí)例3(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-4-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)。
這標(biāo)題化合物是用相似于實(shí)例2的方法，由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙酯二異丙基乙胺鹽制備的NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.16(2xd，6H);1.67(m，1H);2.55(m，1H);2.64(m，1H);3.2(dd，1H);3.39-3.43(m，2H);3.60(m，1H);3.93-3.97(m，2H);4.15(dd，1H);7.15(s，1H);7.67(s，1H).
2-硝基-4-噻吩羧酸烯丙基酯在室溫，在碳酸鉀(4克，28.9毫摩爾)存在的條件下把2-硝基-4-噻吩羧酸(2.5克，14.45毫摩爾)懸浮于DMF(25毫升)中。往這溶液中加入烯丙基溴(5毫升，57.8基摩爾)并把混合物在室溫?cái)嚢柽^夜?；旌衔镉盟♂?，并用乙酸乙酯提取。濃縮后，殘余物通過硅膠層析提純，用乙酸乙酯/石油醚作為洗脫劑(10∶30)，即給出標(biāo)題化合物(2.45克，77%)。
NMR(CDCl3)δ4.78(m，1H);4.80(m，1H);5.25(m，1H);5.45(d，1H);6.0(m，1H);8.25(d，1H);8.75(d，1H).
2-氨基-4-噻吩羧酸烯丙基酯在0℃把2-硝基-4-噻吩羧酸烯丙基酯懸浮于濃HCl中(25毫升)。加入SnCl2·2H2O(7.44克，32.36毫摩爾)并在室溫?cái)嚢?小時(shí)后用NaOH把pH值調(diào)節(jié)到10，用乙酸乙酯提取并通過快速硅膠色譜提純，用乙酸乙酯/石油醚(25∶75)作為洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物(1.15克，55%)。
NMR(CDCl3)δ3.75(m，2H);4.65(m，1H);4.72(m，1H);5.2(m，1H);5.35(d，1H);6.(m，1H);6.57(d，1H);7.35(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(二異丙基乙胺鹽)這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例1的方法，由2-氨基-4-噻吩羧酸烯丙基酯制備的，不同之處是像實(shí)例2中所敘述的那樣用二異丙基乙胺增溶，把2-氨基-4-噻吩羧酸烯丙基酯溶解于二氯甲烷中。
NMR(DMSO-d6)δ1.9(m，1H);2.35(s，3H);2.75(m，1H);3.25(m，1H);3.85-4.25(m，2H);4.5(m，1H);4.65-4.85(m，2H);5.05-5.5(m，4H);6.0(m，1H)，6.9-8.4(m，6H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯。
這標(biāo)題化合物是用相似于實(shí)例2的方法，由(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(4-烯丙氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.9(m，1H);2.8(m，1H);3.25(dd，1H);3.35(m，1H);3.55(m，1H);3.9-4.05(m，2H);4.2(m，1H);4.4-4.75(m，5H);5.0-5.4(m，6H);5.8-6.1(m，1H);7.4-8.3(m，6H).
實(shí)例4(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基-硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例2的方法，由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯二異丙基乙胺鹽制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.60-1.85(m，4H);2.4-2.85(m，6H);3.18(dd，1H);3.3-3.65(m，3H);3.88-4.1(m，2H);4.15(dd，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例2的方法，由2-氨基-3-羧基-4，5，6，7-四氫苯并[b]噻吩制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.62-1.82(m，4H);2.15(m，1H);2.5-2.9(m，5H);3.45(m，1H);3.95-4.25(m，2H);4.6(dd，1H);5.15(d，1H);5.37(d，1H);7.5(d，2H);8.05(d，2H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羧乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例1的方法，由(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯和(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(2d，6H);1.7(s，4H);2.05(m，1H);2.65(s，4H);3.25(dd，1H);3.3-4.75(m，10H);4.9-5.45(m，4H);5.75(m，1H);7.1-8.35(m，4H).
實(shí)例5(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羧乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸(二鉀鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例2的方法，由(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-羧酸烯丙基酯二異丙基乙胺鹽制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD d4)1.15(2d，6H);1.7(m，1H);2.32(s，3H);2.52(m，1H);2.67(m，1H);3.18(dd，1H);3.19(m，1H);3.50(m，2H);3.95(m，1H);4.02(m，1H);4.15(dd，1H);6.55(s，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-乙氧羰基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯。
這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例2的方法，由2-氨基-4-甲基-3-噻吩羧酸乙酯制備的，不同之處是在二異丙基乙胺存在的條件下把2-氨基-4-甲基-3-噻吩羧酸乙酯溶解于二氯甲烷中。
NMR(CDCl3)δ1.35(m，3H);2.2(m，1H);2.35(2s，6H);2.82(m，1H);3.52(m，1H);4.0(m 1H);4.12-4.4(m，3H);4.4-4.7(m，1H);4.9-5.5(m，2H);6.42(s，1H);7.2-8.3(m，4H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇在60℃把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-乙氧羰基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(0.86克，1.6毫摩爾)在二烷(10毫升)和水(5毫升)中用1MNaOH(5毫升4.8毫摩爾)處理3小時(shí)。反應(yīng)混合物在0℃用6MHCl中和至pH值為6。濾出沉出的白色固體，用水洗并在真空下干燥。
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(二異丙基乙胺鹽)。
這標(biāo)題化合物是用類似于實(shí)例1的方法，由(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯和(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇制備的。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)1.15(m，6H);2.05(m，1H);2.15(m，3H);2.9(m，1H);3.12(dd，1H);3.4-3.6(m，2H);3.9-4.15(m，2H);4.42(m，2H);4.6(m，3H);5.0-5.4(m，4H);5.6-6.05(m，1H);6.62(m，1H);7.2-8.3(m，4H).
實(shí)例6(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸，二鉀鹽往(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸-4-硝基芐酯(1克，1.2毫摩爾)在二氯甲烷(5毫升)和乙酸乙酯(5毫升)的混合物中所形成的溶液中加入三苯基膦(32毫克，0.12毫摩爾)，四(三苯基膦)鈀(48毫克，0.04基摩爾)以及2-乙基己酸鉀在乙酸乙酯中形成的0.4M溶液(3.5毫升，1.38基摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋，濾出沉淀用醚洗并在真空下干燥。把粗品酸溶解于含有碳酸氫鉀(132毫克，1.32毫摩爾)的水(30毫升)溶液中并與10%鈀炭催化劑(0.5克)混合?；旌衔镌跉錃鈮合聰嚢?小時(shí)。濾出催化劑，棄去有機(jī)相，水溶液相經(jīng)部分濃縮后用反相層析提純(Nucleosil C1810μ，3.5×20厘米)，用水做洗脫劑，冷凍干燥后即給出標(biāo)題化合物(183毫克，27%)。
NMR(DMSO-d6，AcOD-d4)δ1.15(d，3H);1.17(d，3H);1.75(m，1H);2.63(m，1H);2.76(m，1H);3.20(dd，1H);3.34-3.43(m，2H);3.64(m，1H);3.94-4.02(m，2H);4.15(dd，1H);6.87(d，1H);7.49(d，1H).
MS(FAB+Ve)482(M+H)+;520(M+K)+。
原料可用下面的方法制備5-硝基-2-噻吩羧酸這標(biāo)題化合物是按前面實(shí)例1中所敘述的那樣由2-噻吩羧酸作起始原料制得的，同時(shí)還得到4-硝基-2-噻吩羧酸。
NMR(CDCl3)δ7.65(d，1H);7.88(d，1H).
5-硝基噻吩羧酸烯丙基酯往5-硝基-2-噻吩羧酸(20克，0.11摩爾)在DMF(140毫升)的溶液中相繼地加入烯丙基溴(40毫升，0.46摩爾)和三乙胺(64毫升，0.46摩爾)，同時(shí)冷卻以使反應(yīng)混合物的溫度維持在30℃以下。加完試劑后，反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后用乙酸乙酯稀釋，濾出沉淀出來的固體，濾液用水洗，用飽和氯化鈉水溶液洗，在MgSO4上干燥后濃縮。殘余物在硅膠柱上層析提純，用CH2Cl2-石油醚(3∶7)的混合物作為洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物，為一白色固體(8.8克，38%)。
NMR(CDCl3)δ4.84(d，2H);5.36-5.45(m，2H);6.00(m，1H);7.71(d，1H);7.88(d，1H).
5-氨基-2-噻吩羧酸烯丙酯在冷卻下，往5-硝基-2-噻吩羧酸烯丙基酯(3.2克，15克摩爾)在濃鹽酸(35毫升)的溶液中加入SnCl2·H2O(10.1克，45毫摩爾)，混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋，用5N NaOH堿化至pH10。有機(jī)相用水洗，用飽和氯化鈉水溶液洗，用MgSO4干燥后濃縮。殘余物通過硅膠層析提純，用乙酸乙酯和石油醚(3∶7)的混合物作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色油狀物(1.94克，72%)NMR(CDCl3)δ4.34(br s，2H);4.73(d，2H);5.23(d，1H);5.36(d，1H);5.99(m，1H);6.09(d，1H);7.48(d，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯。
往(2S，4S)-4-乙酰硫基-2-羧基-1-(4-硝基芐氧羰基)吡咯烷(3.79克，10.3毫摩爾)在CH2Cl2(12毫升)中形成的溶液中加入亞硫酰氯(3.75毫升，51.5毫摩爾)和DMF(0.055毫升)?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?6小時(shí)，濃縮，把殘余的油狀物溶于CH2Cl2-甲苯中，再重新蒸發(fā)。殘余物在真空下干燥并被溶解于CH2Cl2(25毫升)中。把這溶液冷至0℃并往其中加入N-二異丙基乙胺(2.05毫升，11.8毫摩爾)和5-氨基-2-噻吩羧酸烯丙基酯(1.9克，10.3毫摩爾)的溶液。在室溫反應(yīng)15分鐘后蒸去溶劑，殘余物溶于水和乙酸乙酯的混合物中。有機(jī)層用MgSO4干燥，并蒸發(fā)至干。殘余物通過硅膠層析提純，用CH2Cl2-醚(9∶1)的混合物作洗脫液，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色泡沫狀物(4.68克，85%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ2.33(s，3H);2.80(m，1H);3.38(m，1H);4.00-4.15(m，2H);4.52(m，2H);4.77(d，2H);5.02-5.42(m，4H);6.00(m，1H);6.77(m，1H);7.45(m，1H);7.60-7.68(m，2H);7.95(m，1H);8.23(m，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇在0℃，往(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(1.06克，2毫摩爾)在二氯甲烷(2毫升)中所形成的溶液中加入乙醇(4毫升)，接著加入5N甲胺在乙醇中的溶液(0.8毫升，4毫摩爾)。反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。然后用6N HCl酸化至pH4。往溶液中加入乙酸乙酯，有機(jī)相用水和氯化鈉水溶液洗，用MgSO4干燥并蒸發(fā)，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色泡沫狀物(0.96克，97%)，NMR(DMSO-d6-TFA)δ1.87(m，1H);2.73(m，1H);3.29(m，1H);3.44(m，1H);4.01(m，1H);4.42(m，1H);4.72(br s，2H)，5.02-5.40(m，4H);6.01(m，1H);7.76(m，1H);7.43(d，1H);7.61-7.68(m，2H);7.93(d，1H);8.25(d，1H).
(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸-4-硝基芐基酯往(1R，5S，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基-碳代青霉烯-3-羧酸-4-硝基芐酯(940毫克，1.9毫摩爾)在乙腈(10毫升)中所形成的溶液中相繼地加入N-二異丙基乙胺(0.33毫升，1.9毫摩爾)，(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(2-烯丙氧羰基-5-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫醇(1克，1.9毫摩爾)在三-正丁基膦(0.095毫升，0.38毫摩爾)和水中形成的混合物，反應(yīng)混合物在4℃保持過夜，蒸發(fā)至干，殘余物通過硅膠柱層析提純，用CH2Cl2-CH3CN(7∶3)的混合物作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物，為一黃色泡沫狀物(1.03克，72%)。
NMR(DMSO-d6-AcOD-d4)δ1.17(d，3H);1.19(d，3H);1.95(m，1H);2.83(m，1H);3.30-3.62(m，3H);3.96-4.30(m，4H);4.47-4.60(dt，1H);4.73(br s，2H);5.03-5.44(m，6H);6.00(m，1H);6.77(dd，1H);7.44(d，1H);7.61(dd，1H);7.67(d，1H);7.7(d，2H);7.94(d，1H);8.21(d，1H);8.24(d，2H).
實(shí)例7(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羥酸把(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(-5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸鈉(92毫克，0.13毫摩爾)在水(5毫升)碳酸氫鈉中形成的溶液(把pH值調(diào)節(jié)到7.5)在Pd/C催化劑(10%)(45%毫克)存在下在大氣壓力下氫化。用分析用HPLC監(jiān)測，反應(yīng)約進(jìn)行45分鐘。濾出催化劑，把水溶液濃縮，通過制備性HPLC提純(Nucleosil C-18)，用水洗脫。把適當(dāng)?shù)酿s份冷凍干燥即給出標(biāo)題化合物(30毫克，42%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)δ1.15(m，6H);1.7(m，1H);2.65(m，2H);3.2(dd，1H);3.45(m，2H);3.6(m，1H);3.95(dq，1H);4.05(t，1H);4.15(dd，1H);7.18(s，1H).
原料可按下法制備3-叔丁氧基-2-乙氧羰基-5-噻吩羧酸叔丁酯把3-羥基-5-羧基-2-噻吩羧酸乙酯(25克，0.115摩爾)在干燥的CH2Cl2(200毫升)中所形成的溶液在室溫用二異丙基一叔丁基異脲(175毫升)滴加處理。這將引起放熱并使混合物熱至回流。然后把反應(yīng)混合物攪拌12小時(shí)，過濾除去固體，并把CH2Cl2蒸發(fā)。殘余的油狀物進(jìn)行硅膠層析，用石油醚∶乙醚(90∶10)洗脫，即給出兩種產(chǎn)物的混合物(28.5克)。這兩種產(chǎn)物通過快速層析分離，用CH2Cl2∶石油醚(1∶1)洗脫，即給出標(biāo)題化合物(12.6克，33%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.29(t，3H);1.36(s，9H);1.53(s，9H);4.25(q，2H);7.41(s，1H).
3-叔丁氧基-2-羧基-5-噻吩羧酸叔丁酯把3-叔丁氧基-2-乙氧羰基-5-噻吩羧酸叔丁酯(11.5克，35毫摩爾)在二烷中與NaOH(2N)(34.5毫升，70毫摩爾)所形成的溶液在50℃加熱1.45小時(shí)?；旌衔锢鋮s至0℃，用HCl(2N)中和，蒸去溶劑，殘余物與濃的Na2CO3水溶液(400毫升)以及醚(200毫升)一起研制，回收水溶液相，冷卻至0℃，用HCl(5N)酸化，用醚提取。干燥后把醚相濃縮，用快速硅膠柱層析提純，即得到標(biāo)題化合物(3.45克)。
NMR(CDCl3)δ1.55(s，9H);1.58(s，9H);7.5(s，1H).
2-疊氮羰基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯在0℃，把2-羧基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯(3克，0.01摩爾)在干燥丙酮(100毫升)中形成的溶液用三乙胺(1.7毫升，0.012摩爾)滴加處理。把混合物在0℃攪拌15分鐘并滴加氯甲酸乙酯(1.25毫升，0.013摩爾)，30分鐘之后，在0℃慢慢加入疊氮化鈉(1.1克，0.017摩爾)在水(5毫升)中的溶液。在室溫?cái)嚢?小時(shí)后，把反應(yīng)混合物過濾并蒸發(fā)溶劑。油狀的殘余物被溶解于CH2Cl2中，溶液用水洗(兩次)，用MgSO4干燥，蒸發(fā)溶劑即給出標(biāo)題化合物(3.25克，100%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.50(s，9H);1.60(s，9H);7.45(s，1H).
2-烯丙氧羰基氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯把2-疊氮羰基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯(1.5克，4.6毫摩爾)在烯丙醇(0.5毫升，7.3毫摩爾)和干燥甲苯(15毫升)中所形成的溶液在100℃加熱30分鐘，直到氮?dú)獾姆懦鐾Ｖ埂⒒旌衔镎舭l(fā)，殘余物通過快速硅膠柱層析提純，用石油醚∶乙醚(4∶1)作為洗脫液，即給出標(biāo)題化合物(1.64克，100%)。
NMR(CDCl3)δ1.28(s，9H);1.49(s，9H);4.66(m，2H);5.25-5.37(m，2H);6.0(m，1H);7.25(m，1H).
2-氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯把2-烯丙氧羰基氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩羧酸叔丁酯(1.64克，4.62毫摩爾)在無水THF(50毫升)中形成的溶液用PPh3(240毫克，0.923毫摩爾)，雙甲酮(1.3克，9.23毫摩爾)和Pd(PPh3)4(300毫克，0.277毫摩爾)處理。30分鐘后，蒸發(fā)溶劑，殘余物通過快速硅膠柱層析提純，用石油醚∶乙醚(80∶20)作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物(975毫克，98%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.24(s，9H);1.45(s，9H);6.0(s，2H);7.08(s，1H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-叔丁氧基-5-叔丁氧羰基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫代醋酸酯把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-4-乙酰硫基-2-羧基吡咯烷(1.5克，4毫摩爾)溶解于干燥CH2Cl2中(15毫升)并用亞硫酰氯(1.5毫升，20毫摩爾)和催化量的DMF(20毫升)處理?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?2小時(shí)，蒸發(fā)溶劑，殘余的油狀物在真空下干燥2小時(shí)，溶解于CH2Cl2(15毫升)中，并在0℃加到2-氨基-3-叔丁氧基-5-噻吩甲酸叔丁酯(1.1克，4毫摩爾)在CH2Cl2(15毫升)和二異丙基乙胺(0.85毫升，4.9毫摩爾)中所形成的溶液中。混合物攪拌30分鐘，蒸發(fā)溶劑，殘余物通過快速硅膠柱層析提純，用石油醚∶乙醚(20∶80)作洗脫劑，即給出標(biāo)題化合物(2.17克，85%)。
NMR(CDCl3)δ1.56(s，9H);1.58(s，9H);2.32(s，3H);2.55(m，1H);2.74(m，1H);3.38(m，1H);4.01(m，1H);4.15(m，1H);4.63(m，1H);5.3(m，2H);7.39(s，1H);7.52(m，2H);8.22(m，2H).
(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫醇。
把(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-叔丁氧基-5-叔丁氧羰基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫代醋酸酯(1克，1.6毫摩爾)溶解于CH2Cl2(2毫升)和干燥的乙醇(5毫升)中，并用甲胺(4.24M)在乙醇中的溶液(1.15毫升，4.83毫摩爾)處理，反應(yīng)的進(jìn)行程通過tlc監(jiān)測。1.5小時(shí)后，把混合物蒸發(fā)，殘余物溶解于CH2Cl2(5毫升)中并在室溫用TFA(5毫升)處理1.5小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，殘余物與醚一起研制即得標(biāo)題化合物(1.1克，100%)。
NMR(DMSO-d6)δ1.8(m，1H);2.7(m，1H);3.4(m，1H);4.00(m，2H);4.62(m，1H);5.00-5.26(m，2H);7.16(m，1H)，7.45(m，1H)，7.65(m，1H);7.94(m，1H);8.23(m，1H).
(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥2基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯在氬氣保護(hù)下把(1R，5R，6S，8R)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-2-二苯基膦酰氧基碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(800毫克，1.6毫摩爾)在DMF(8毫升)中所形成的溶液在室溫用(2S，4S)-1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)-吡咯烷-4-基硫醇(752毫克，1.6毫摩爾)，二異丙基乙胺(0.835毫升，4.8毫摩爾)，三丁基膦(200微升，0.8毫摩爾)和水(5毫升，0.8毫摩爾)處理12小時(shí)。然后把混合物在HP20SS柱上進(jìn)行層析提純，用乙腈，水進(jìn)行梯度洗脫，即得到標(biāo)題化合物(286毫克，25%)。
NMR(DMSOd6+AcOD-d4)δ1.1-1.3(m，6H);1.85(m，1H);2.75(m，1H);3.25(dd，1H);3.3(m，1H);3.5-3.7(m，1H);3.7-4.3(m，4H);4.5-4.8(m，3H);4.9-5.5(m，4H);5.9(m，1H);7.17(m，1H);7.46(m，1H);7.66(m，1H);7.96(m，1H);8.73(m，1H).
(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸。
在氬氣保護(hù)下，把(1R，5R，6S，8R，2′S，4′S)-2-(1-(4-硝基芐氧羰基)-2-(3-羥基-5-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸烯丙基酯(240毫克，0.335毫摩爾)在DMF(4毫升)中形成的溶液用Pd(PPh3)4(30毫克，0.026毫摩爾)和Meldrum氏酸(48毫克，0.335毫摩爾)處理?；旌衔镌谑覝?cái)嚢?小時(shí)，蒸去溶劑，殘余物溶于水中，用NaHCO3把pH值調(diào)節(jié)到7.5，再經(jīng)C18(Nucleosil)色譜提純，用水乙腈(梯度)洗脫，即給出標(biāo)題化合物(92毫克，39%)。
NMR(DMSO-d6+AcOD-d4)1.15(m，6H);1.85(m，1H);2.5(m，1H)(underDMSO);2.77(m，1H);3.19(dd，1H);3.25-3.5(m，1H);3.8-4.2(m，3H);4.6(m，1H);4.7(m，1H);5.0-5.3(m，2H);7.15(s，1H);7.46(m，1H);7.67(m，1H);7.97(m，1H);8.24(m，1H).
權(quán)利要求
1.一種具有式(Ⅰ)的化合物
或它的藥物上可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯；其中R1是1-羥乙基，1-氟乙基或羥甲基；R2是氫或C1-4烷基R3是氫或C1-4烷基并且其中的噻吩環(huán)可進(jìn)一步任意地被一個(gè)或兩個(gè)選自下列的基團(tuán)所取代鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羥基、羧基、C1-4烷氧基，三氟甲基、C1-4烷氧羰基、氨基、C1-4烷基氨基、二-C1-4烷基氨基、磺酸、C1-4烷S(O)n-基，(其中的n值為0-2)C1-4烷酰胺基、C1-4烷酰-(N-C1-4烷基)氨基、氨基甲?；1-4烷基氨基甲?；?、二-C1-4烷基氨基甲酰基和N-C1-4烷磺酰胺基；或者被連接在噻吩環(huán)的相鄰兩個(gè)碳原子上的四亞甲基所取代。
2.一種權(quán)利要求1的化合物，其中的R1是1-羥乙基。
3.一種權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中的R2是氫或甲基。
4.一種權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的化合物，其中的R2是甲基。
5.一種權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)中的化合物，其中的R3是氫。
6.一種權(quán)利要求1-4中任意一項(xiàng)中的具有下式(Ⅳ)的化合物
其中R3和噻吩環(huán)上的任意取代基的定義與權(quán)利要求1中的相同。
7.一種權(quán)利要求6中的化合物，在其中的噻吩環(huán)上可任意地被鹵素、氰基、C1-4烷基、硝基、羧基、羥基、C1-4烷氧基、氨基甲?；?、氨基、三氟甲基或四亞甲基所取代。
8.一種權(quán)利要求6或7中的化合物，其中的R3是氫，并且噻吩環(huán)或者是未被進(jìn)一步取代，或者是被一個(gè)選自甲基或羥基或四亞甲基的取代基所取代。
9.一種權(quán)利要求1的化合物，它們是(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-4-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-3-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(4-羧基-2-噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(3-羧基-2-(4，5，6，7)-四氫苯并[b]噻吩基氨基甲酰基)吡咯烷-4-基硫基-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(3-羧基-4-甲基-2-噻吩基氨基甲酰基)-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(2-羧基-5-噻吩基氨基甲?；?吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基碳代青霉烯-3-羧酸;(1R，5S，6S，8R，2′S，4′S)-2-(2-(5-羧基-3-羥基-2-噻吩基氨基甲?；?-吡咯烷-4-基硫基)-6-(1-羥乙基)-1-甲基-碳代青霉烯-3-羧酸;以及它們的藥物上可接受的鹽類。
10.一種含有權(quán)利要求1至9的任何一項(xiàng)中的化合物的藥物組合物和一種藥物上可接受的載體。
11.一種通過給需要治療的患者服用抗菌有效劑量的式(Ⅰ)化合物來治療感染的方法。
12.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，它包括把具有下式(Ⅴ)的化合物進(jìn)行脫保護(hù)基的反應(yīng)
其中R2的定義與權(quán)利要求1中的相同;R10是一個(gè)R3基團(tuán)(定義與權(quán)利要求1中的相同)或一個(gè)氨基保護(hù)基;R13是一個(gè)R1基團(tuán)(定義與權(quán)利要求1中的相同)，保護(hù)的羥甲基或1-(保護(hù)的羥基)乙基;R11是氫或一個(gè)羧基保護(hù)基;R12是氫或一個(gè)氨基保護(hù)基，R18是羧基或一個(gè)保護(hù)的羧基，并且其中在噻吩環(huán)上的任意取代基的定義與權(quán)利要求1中的相同，并且是選擇性地保護(hù)的;其中至少存在一個(gè)保護(hù)基;如果必需，還可進(jìn)行下述后處理(ⅰ)形成藥物上可接受的鹽，(ⅱ)進(jìn)行酯化以形成一種在體內(nèi)可水解的酯。
13.一種如在權(quán)利要求12中定義的具有式(Ⅴ)的化合物。
14.一種制備權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求12中式(Ⅴ)所定義的化合物的方法，它包括a)把具有下式(Ⅵ)和(Ⅶ)的化合物進(jìn)行反應(yīng)
其中R2，R10，R11，R12，R13和R18的定義與權(quán)利要求12中的相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義與權(quán)利要求12中的相同，并且L是一個(gè)離去基團(tuán)，或者b)把具有下式Ⅷ的化合物進(jìn)行環(huán)化反應(yīng)
其中R2，R10，R11，R12，R13和R18的定義與權(quán)利要求12中的相同，噻吩環(huán)上任意的取代基的定義與權(quán)利要求12中的相同，并且R14，R15和R16是獨(dú)立地選自C1-6烷氧基，芳氧基，二-C1-6烷基氨基、二芳基氨基;或者R14-R16中的任意兩個(gè)代表鄰一亞苯基二氧基，或R14-R16中的一個(gè)是C1-4烷基，烯丙基，芐基或苯基，而另外兩個(gè)基團(tuán)是獨(dú)立地選自C1-4烷基，三氟甲基或苯基，其中任意一個(gè)苯基上還可任意地取代著C1-3烷基或C1-3烷氧基;并且其中任何一個(gè)官能團(tuán)都可任意地被保護(hù)，如果必需，還可進(jìn)行下述后處理(ⅰ)除去保護(hù)基;(ⅱ)形成藥物上可接受的鹽;(ⅲ)酯化以形成在體內(nèi)可水解的酯。
15.一種如權(quán)利要求1中所定義的式(Ⅰ)化合物，是以非藥物上可接受的鹽的形式存在。
16.一種權(quán)利要求14中定義的具有式(Ⅶ)或式(Ⅷ)的化合物。
17.一種具有下式(Ⅸ)，(Ⅻ)或(ⅩⅣ)的化合物
其中R2，R10-R13，R18的定義與權(quán)利要求12中的相同，并且R17是保護(hù)基。
全文摘要
本發(fā)明是關(guān)于青霉烯類抗生素，并提供一種具有上式(I)的化合物，及其可接受的鹽或在體內(nèi)可水解的酯。本發(fā)明也敘述了它們的制備方法，在它們的制備過程中涉及到的中間體，它們作為治療藥劑的應(yīng)用以及包含它們的藥物組合物。
文檔編號C07F9/568GK1077957SQ93102800
公開日1993年11月3日 申請日期1993年3月26日 優(yōu)先權(quán)日1992年3月26日
發(fā)明者F·H·容 申請人:曾尼卡有限公司, 曾尼卡制藥有限公司