一種硝卡芥原料藥物的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于醫(yī)用硝卡芥制備【技術(shù)領(lǐng)域】，為了解決現(xiàn)有硝卡芥制備方法所生產(chǎn)的硝卡芥中雜質(zhì)含量較大，且現(xiàn)有制備方法不適用于工業(yè)化生產(chǎn)的問題，提供了一種硝卡芥原料藥物的制備方法，包括溴代反應(yīng)，NCIV的合成；親核取代反應(yīng)，NCV的合成；氯代反應(yīng)，NCVI的合成；水解反應(yīng)，硝卡芥NC的合成以及精制硝卡芥原料藥物。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所述制備方法易于操作，適合工業(yè)化生產(chǎn)，所制備的硝卡芥原料藥物純度提高到99%以上，單一雜質(zhì)均控制在0.1%以下。
【專利說明】一種硝卡芥原料藥物的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)用硝卡芥制備【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種硝卡芥原料藥物的制備方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 硝卡芥（NC)為細胞周期非特異性藥物，對癌細胞分裂各期均有影響，其中以前期 及中期的分裂相下降最為明顯。抑制DNA及RNA的合成，對DNA的合成更為顯著。注射后 在血中維持時間較長，24小時后減少54%。分布以膽囊和腎中最多，瘤、肝、肺次之，腦中最 少。主要通過腎臟排泄，24小時后排出53%。
[0003] 硝卡芥（NC)是我國獨有的氮芥類抗腫瘤化學藥物，文獻報道[學報 _1965_12(4)_267 ;藥學學報_1979_14(11)_676 ;全國原料藥工藝匯編，國家醫(yī)藥管理總 局，1980年，p356~359]，硝卡芥的合成有2種，但均是以NCIII類似物為原料，經(jīng)溴代、胺 化、氯化、水解脫羧、精制制得。兩種方法的基本原理相同，不同之處，在于氨基保護基不一 樣，一種是乙?；Ｗo，另一種是甲酰基保護。采用甲酰基保護的甲酰氨基丙二酸二乙酯 較貴，市場上無規(guī)?；a(chǎn)品供應(yīng)，而工業(yè)化生產(chǎn)工藝是采用乙?；Ｗo，并且乙酰氨基丙二 酸二乙酯有規(guī)模化產(chǎn)品供應(yīng)。但是不論是乙?；Ｗo還是甲?；Ｗo的合成方法，所得到 的終產(chǎn)品中雜質(zhì)含量較大，且中間步驟需要進行過柱分離除雜操作，操作繁雜；在氯代工序 中，后處理工序為反應(yīng)結(jié)束后，用碳酸鈉水溶液中和，于水油兩相下持續(xù)攪拌，冰水冷卻析 出晶體，這種方法也不適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0004] 硝卡芥聚乳酸毫微粒凍干針劑生物利用度低，而專利號為200410104449. 9名稱 為《硝卡芥脂質(zhì)體及其制備方法》的專利申請將硝卡芥制成脂質(zhì)體或前脂質(zhì)體，所制備的硝 卡芥脂質(zhì)體的生物利用度并沒有詳細敘述，并且在脂質(zhì)體或前脂質(zhì)體中加入較多的輔料， 使得血糖過高或者血脂過高病人不能使用，降低了硝卡芥的使用范圍。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明為了解決采用現(xiàn)有的硝卡芥制備方法所生產(chǎn)的硝卡芥中雜質(zhì)含量較大，且 現(xiàn)有制備方法不適用于工業(yè)化生產(chǎn)的問題，提供了一種硝卡芥原料藥物的制備方法。
[0006] 本發(fā)明由如下技術(shù)方案實現(xiàn)的：一種硝卡芥原料藥物的制備方法，包括如下步 驟： 包括如下步驟： (1)溴代反應(yīng)合成NCIV :氯仿作為溶劑，將二乙基-2- (2-甲基-5-硝基苯）-2-乙酰 胺基馬龍酸酯即NCIII、N-溴代丁二酰亞胺和偶氮二異丁腈加熱回流反應(yīng)，回流后每隔一 個小時再加入N-溴代丁二酰亞胺繼續(xù)回流反應(yīng)，反應(yīng)完畢后，降溫析出固體，濾液分別用 NaHSO3飽和液、純化水、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，氯仿分液，氯仿層溶液干燥過濾，濾液 減壓濃縮，即得NCIV粗品，NCIV粗品用無水乙醇溶解，活性炭脫色，過濾后濾液降溫析晶， 干燥得到NCIV ; (2) 親核取代反應(yīng)合成NCV :得到的NCIV與無水乙醇、二乙醇胺以及NaI加熱回流反 應(yīng)，反應(yīng)完畢后緩慢降溫至室溫，反應(yīng)液滴入水中，攪拌使二溴雜質(zhì)析出；抽濾后濾液用乙 酸乙酯萃取，乙酸乙酯層干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，得NCV粗品；粗品在室溫下用乙酸 乙酯溶解，然后緩慢滴加石油醚使NCV析出；1:1的石油醚：乙酸乙酯溶液清洗析出物，所得 干燥固體即為NCV ; (3) ;氯代反應(yīng)合成NCVI :二氯甲烷溶解NCV，溶液滴加氯化亞砜后回流反應(yīng)，反應(yīng)完畢 后濃縮溶液，繼續(xù)用二氯甲烷溶解濃縮物，調(diào)節(jié)PH至中性，靜置分層，油層用飽和食鹽水清 洗后再用無水硫酸鈉干燥抽濾，濃縮獲得的粗品用無水乙醇多次溶解、抽濾，干燥獲得晶體 即 NCVI ; (4) 水解反應(yīng)合成硝卡芥NC :水解反應(yīng)全程蔽光操作，干燥晶體NCVI和濃鹽酸加熱反 應(yīng)，釋放出大量氣體后繼續(xù)加熱回流反應(yīng)，反應(yīng)完畢后冷卻至室溫，減壓濃縮反應(yīng)液除去鹽 酸水溶液及乙醇，濃縮物繼續(xù)用濃鹽酸溶解加熱回流，再次濃縮除去鹽酸水溶液，濃縮物水 溶解后活性炭除雜，濾液調(diào)節(jié)pH為3. 5-4,抽濾所得固體用乙酸乙酯沖洗獲得NC ; (5) 精制硝卡芥：全程潔凈避光操作，鹽酸水溶液溶解獲得的NC，活性炭除雜，抽濾后 濾液中加入乙酸乙酯，用醋酸鈉水溶液調(diào)整PH為4,攪拌后抽濾，濾餅用乙酸乙酯沖洗，干 燥獲得硝卡芥精制品。
[0007] 具體步驟如下： (1) 溴代反應(yīng)，NCIV的合成：反應(yīng)釜中，50-70轉(zhuǎn)/分鐘邊攪拌邊加入氯仿20-30L， 2_3kg的二乙基-2- (2-甲基-5-硝基苯）-2-乙酰胺基馬龍酸酯即NCIII、以NCIII的加 入量為計算基準，N-溴代丁二酰亞胺加入量為0· 75eq_0. 9eq當量，偶氮二異丁腈60_70g, 加熱至80_90°C進行回流反應(yīng)，回流后每隔一個小時再加入0· 75eq-0. 9eq當量的N-溴代丁 二酰亞胺，繼續(xù)攪拌回流，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，自然冷卻降溫，析出固體，過 濾，濾液分別用NaHSO 3飽和液、純化水、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，分液，氯仿層溶液用無 水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮，得淡黃色糖漿狀NCIV粗品； NCIV粗品除雜：NCIV粗品加入到無水乙醇中，加熱回流溶解，加入40-60g活性炭脫色 20-40min，趁熱過濾；攪拌濾液使溫度緩慢降至15°C _20°C，繼續(xù)攪拌使其充分析晶，過濾， 固體40°C鼓風干燥4h-6h，得白色固體NCIV，根據(jù)液相結(jié)果折算NCIV的收率52%-65% ;液相 檢測結(jié)果：NCIV>60% ;二溴雜質(zhì)〈40% ;其他單雜0· 5% ; (2) 親核取代反應(yīng)，NCV的合成：反應(yīng)釜內(nèi)，攪拌下加入4-10L無水乙醇、700-850g二乙 醇胺、制備好的白色固體NCIV和20-30g的Nal，加熱反應(yīng)液至回流，回流反應(yīng)3h-5h，TLC 跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后溫度緩慢降至室溫，將反應(yīng)液滴入10-14L水中，100-140轉(zhuǎn) /分攪拌使二溴雜質(zhì)緩慢析出，抽濾，濾液用20-40L乙酸乙酯萃取三至四次，濾餅用體積比 為1:1乙醇/水溶液3-10L打漿2h，過濾，濾液用5-20L乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯層，無 水Na 2SO4干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，得NCV粗品； NCV粗品除雜：室溫下，NCV粗品用乙酸乙酯溶解，然后緩慢滴加與乙酸乙酯等體積的 石油醚，滴加至一半時，NCV開始析出，滴加結(jié)束后，繼續(xù)120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌lh，抽濾，用 體積比為1:1的石油醚：乙酸乙酯溶液清洗濾餅，得到的固體20-40°C送風干燥4h-6h，得 到淡黃色晶體即NCV，NCV的收率74. 3%，液相檢測結(jié)果：NCV>95% ;其他單雜1% ; (3) 氯代反應(yīng)，NCVI的合成：將2-5L二氯甲烷和制備好的NCV依次加入到反應(yīng)釜內(nèi)， 攪拌溶解，冷卻下控制反應(yīng)釜內(nèi)的溫度至25-40°C，緩慢滴加1000-1 IOOg氯化亞砜，滴加 完畢后，緩慢升溫至回流溫度，回流2~3h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，減壓濃縮 溶液，向濃縮物中加入3-10L二氯甲烷，攪拌使?jié)饪s物溶解，然后滴加飽和碳酸氫鈉水溶液 至PH中性，靜置分層，得到的油層用3-10L飽和食鹽水清洗一次，繼續(xù)靜置分層，油層用 400-600g無水硫酸鈉干燥3h-5h后抽濾，濃縮得到粗品，粗品中加入3000-3200g無水乙醇 使粗品溶解，再次抽濾，濃縮得到黃色固體粗品；黃色固體粗品中加入無水乙醇加熱至回流 溶解，靜置3h使溫度緩慢降低至反應(yīng)釜內(nèi)溫度為20°C -25°C，然后持續(xù)攪拌0. 5-2h，抽濾， 濾餅用冷的無水乙醇沖洗，得到的固體于20-40°C送風干燥過夜，得到淡黃色晶體即NCVI， 收率79%，液相檢測結(jié)果：NCVI>99%，其他單雜〈0. 5% ; (4) 水解反應(yīng)，硝卡芥NC的合成：水解反應(yīng)全程蔽光操作，將所制備的NCVI淡黃色晶 體2倍質(zhì)量的濃鹽酸和所制備的NCVI依次加入到反應(yīng)瓶中，邊攪拌邊加熱至80°C，持續(xù) 120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌0. 5-2h，釋放出大量氣體，然后加熱至反應(yīng)瓶內(nèi)溫度為80-KKTC， 持續(xù)攪拌〇. 5-2h，最后加熱反應(yīng)液使反應(yīng)瓶內(nèi)溫度為95°C _103°C，反應(yīng)瓶外油浴溫度為 115°C _120°C，回流反應(yīng)3h-6h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，停止加熱，冷卻至室 溫，反應(yīng)液呈酸性，將反應(yīng)液移至單口瓶，用溫度為50°C -60°C水泵減壓濃縮反應(yīng)液除去鹽 酸水溶液及乙醇，再加入800-1200g濃鹽酸使?jié)饪s物重新溶解，加熱回流2h，再次濃縮除 去鹽酸水溶液；向得到的濃縮物中加入5-10L水，攪拌澄清液后，轉(zhuǎn)入到反應(yīng)瓶中，再加入 10-25g活性炭，蔽光下20°C -25°C持續(xù)120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，然后抽濾，除去活性 炭，得到的濾液加入到反應(yīng)釜中，蔽光攪拌，滴加醋酸鈉水溶液至PH=4. 0-4. 5,然后持續(xù)攪 拌lh，抽濾得到固體，濾餅用乙酸乙酯沖洗，得到的固體于40°C -45°C干燥8h-12h，得到類 白色固體NC，收率80. 76%，液相檢測結(jié)果：NC>97. 5%，其他單雜〈1% ; (5) 精制硝卡芥：全程于潔凈區(qū)內(nèi)避光操作，向IOL的反應(yīng)瓶中，加入6-10kg純化水、 400-450g濃鹽酸，攪拌使其混合均勻，然后加入步驟（4)中制備的類白色固體NC，攪拌使其 溶解，將反應(yīng)瓶內(nèi)溫度控制在l〇°C -20°C，溶清后加入15-30g活性炭，攪拌脫色20-50min， 抽濾，濾液入潔凈區(qū)內(nèi)的結(jié)晶釜，200-250轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，加入10-18kg過濾過的乙酸乙酯， 緩慢滴加過濾的由質(zhì)量比為1:1的飽和醋酸鈉水溶液和純水制備的醋酸鈉水溶液，使溶液 PH=4,繼續(xù)攪拌0. 5-lh，抽濾，乙酸乙酯沖洗濾餅，4(T50°C送風干燥，得到硝卡芥精制品，重 復精制兩次，兩次精制回收率72%，得到硝卡芥原料藥物。
[0008] 所述TLC跟蹤的檢測條件為：硅膠GF254或硅膠HF254預制板，展開劑：乙酸乙酯：石 油醚=1:10,檢視條件：254nm波長檢視。
[0009] 由于四氯化碳是一類溶劑，在中間體和原料藥生產(chǎn)過程中應(yīng)避免使用，本發(fā)明 步驟（1)中選用二類溶劑氯仿取代四氯化碳，使反應(yīng)得到較好的結(jié)果；N-溴代丁二酰亞 胺投料量和加入方式直接影響溴代反應(yīng)產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量，本發(fā)明采用多次分批加入 I. 5eq_L 8eq當量的N-溴代丁二酰亞胺，使NCIII的轉(zhuǎn)化率達到98%以上；另外本發(fā)明采用 了無水乙醇重結(jié)晶的方式除去了大量的二溴代雜質(zhì)以外的其他雜質(zhì)，對該步驟進行提純。 [0010] 在親核取代工序中加入碘化鈉作為催化劑使反應(yīng)加速，反應(yīng)時間可以減少到五個 小時左右；反應(yīng)過后采用滴加石油醚的方法去除大量的二溴雜質(zhì)，然后再通過乙酸乙酯和 石油醚結(jié)晶的方式精制本步的中間體，不僅避免了現(xiàn)有技術(shù)中眾多過柱分離的操作，簡化 了操作過程，降低了產(chǎn)品中間體的損耗，而且除去大量的二溴雜質(zhì)。 toon] 在氯代工序中，將原路線中反應(yīng)結(jié)束后，用碳酸鈉水溶液中和，于水油兩相下持續(xù) 攪拌，冰水冷卻析出晶體的步驟改為添加二氯甲烷，分液，既可以避免無機雜質(zhì)的影響，又 可以達到分離的目的；濃縮后的粗品，使用無水乙醇進行重結(jié)晶，使得所述方法簡單，易于 操作，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0012] 在水解脫羰工序中，反應(yīng)之后，加入活性炭脫色，過濾后的濾液中加入乙酸乙酯， 在攪拌下的兩相體系中滴加醋酸鈉水溶液至PH=4. 0-4. 5,然后抽濾得到硝卡芥粗品，除去 溶于有機溶劑的雜質(zhì)。全程避光操作，減少光致降解的可能性。
[0013] 在精制工序中，對精制過程進行了優(yōu)化，加入活性炭脫色，使精制后產(chǎn)品的純度在 99%以上，單一雜質(zhì)均控制在0. 1%以下。
[0014] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明所述制備方法易于操作，適合工業(yè)化生產(chǎn)，所制備的硝卡 芥原料藥物純度提高到99%以上，單一雜質(zhì)均控制在0. 1%以下。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0015] 圖1為本發(fā)明硝卡芥原料藥物合成路線圖。
[0016] 圖中：NBS :N-溴代丁二酰亞胺；AIBN :偶氮二異丁腈；HN(CH2CH2OH)2 :二乙醇胺； SOCl2 :氯化亞砜；DCM :二氯甲烷；35% HCl aq:濃鹽酸水溶液；NaOAc aq :醋酸鈉水溶液。

【具體實施方式】
[0017] 硝卡芥原料藥物的制備方法，包括如下步驟： 1.溴代反應(yīng)，合成NCIV的實施例： 例1 :反應(yīng)釜中，50轉(zhuǎn)/分鐘邊攪拌邊加入氯仿20L，2kg的二乙基-2-(2-甲基-5-硝 基苯)-2-乙酰胺基馬龍酸酯即NCIII以NCIII的加入量為計算基準，N-溴代丁二酰亞胺加 入量為0. 75eq當量，偶氮二異丁腈60g，加熱至85°C進行回流反應(yīng)，回流后每隔一個小時再 加入0. 75eq當量的N-溴代丁二酰亞胺，繼續(xù)攪拌回流，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢 后，自然冷卻降溫，析出固體，過濾，濾液分別用NaHSO 3飽和液、純化水、飽和氯化鈉水溶液 依次洗滌，分液，氯仿層溶液用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮，得淡黃色糖漿狀NCIV 粗品； NCIV粗品除雜：NCIV粗品加入到無水乙醇中，加熱回流溶解，加入40g活性炭脫 色40min，趁熱過濾；攪拌濾液使溫度緩慢降至15°C，繼續(xù)攪拌使其充分析晶，過濾，固體 40°C鼓風干燥6h，得白色固體NCIV，根據(jù)液相結(jié)果折算NCIV的收率52% ;液相檢測結(jié)果： NCIV>60% ;二溴雜質(zhì)〈40% ;其他單雜(λ 5% ; 例2 :反應(yīng)釜中60轉(zhuǎn)攪拌下加入氯仿25g，2. 5kgNCIII、0. 8eq當量的N-溴代丁二酰亞 胺、65g偶氮二異丁腈，加熱至80°C回流，繼續(xù)加入0. 8eq當量的N-溴代丁二酰亞胺、50g活 性炭脫色20min，降溫至18°C，干燥5h，其余步驟與例1相同，NCIV的收率為60%。
[0018] 例3 :反應(yīng)釜中70轉(zhuǎn)/分鐘攪拌下加入氯仿30g，3kgNCIII、0. 9eq當量的N-溴代 丁二酰亞胺、70g偶氮二異丁腈，加熱至90°C回流，繼續(xù)加入0. 9eq當量的N-溴代丁二酰亞 胺、60g活性炭脫色30min，降溫至20°C，干燥4h，其余步驟與例1相同，NCIV的收率為65%。
[0019] 2.親核取代反應(yīng)，合成NCV的實施例： 例4:反應(yīng)釜內(nèi)，攪拌下加入4L無水乙醇、700g二乙醇胺、制備好的白色固體NCIV和 20g的NaI，加熱反應(yīng)液至回流，回流反應(yīng)3h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后溫度緩慢 降至室溫，將反應(yīng)液滴入IOL水中，100轉(zhuǎn)/分攪拌使二溴雜質(zhì)緩慢析出，抽濾，濾液用20L 乙酸乙酯萃取三次，濾餅用體積比為1:1乙醇/水溶液5L打漿2h，過濾，濾液用IOL乙酸乙 酯萃取，合并乙酸乙酯層，無水Na 2SO4干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，得NCV粗品； NCV粗品除雜：室溫下，NCV粗品用乙酸乙酯溶解，然后緩慢滴加與乙酸乙酯等體積的 石油醚，滴加至一半時，NCV開始析出，滴加結(jié)束后，繼續(xù)120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌lh，抽濾，用 體積比為1:1的石油醚：乙酸乙酯溶液清洗濾餅，得到的固體20°C送風干燥6h，得到淡黃 色晶體即NCV，NCV的收率74. 3%，液相檢測結(jié)果：NCV>95% ;其他單雜1% ; 例5 :加入6L無水乙醇、800g二乙醇胺、25gNaI，回流反應(yīng)4h，反應(yīng)液滴入12L水中，120 轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，濾液用30L乙酸乙酯萃取四次，濾餅用乙醇水溶液3L打漿，再用5L乙酸乙 酯萃取，在粗品除雜中固體在30°C送風干燥5h，其他步驟與例4相同。
[0020] 例6 :加入IOL無水乙醇、850g二乙醇胺、30gNaI，回流反應(yīng)5h，反應(yīng)液滴入14L水 中，140轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，濾液用40L乙酸乙酯萃取四次，濾餅用乙醇水溶液IOL打漿，再用20L 乙酸乙酯萃取，在粗品除雜中固體在40°C送風干燥6h，其他步驟與例4相同。
[0021] 3.氯代反應(yīng)，合成NCVI的實施例： 例7 :2L二氯甲烷和制備好的NCV依次加入到反應(yīng)釜內(nèi)，攪拌溶解，冷卻下控制反應(yīng)釜 內(nèi)的溫度至25°C，緩慢滴加 IOOOg氯化亞砜，滴加完畢后，緩慢升溫至回流溫度，回流2h， TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，減壓濃縮溶液，向濃縮物中加入5L二氯甲烷，攪拌使 濃縮物溶解，然后滴加飽和碳酸氫鈉水溶液至pH中性，靜置分層，得到的油層用3L飽和食 鹽水清洗一次，繼續(xù)靜置分層，油層用500g無水硫酸鈉干燥3h后抽濾，濃縮得到粗品，粗品 中加入3000g無水乙醇使粗品溶解，再次抽濾，濃縮得到黃色固體粗品；黃色固體粗品中加 入無水乙醇加熱至回流溶解，靜置3h使溫度緩慢降低至反應(yīng)釜內(nèi)溫度為25°C，然后持續(xù)攪 拌0. 5h，抽濾，濾餅用冷的無水乙醇沖洗，得到的固體于20°C送風干燥過夜，得到淡黃色晶 體即NCVI，收率79%，液相檢測結(jié)果：NCVI>99%，其他單雜〈0. 5% ; 例8 :3L二氯甲烷加入反應(yīng)釜，反應(yīng)釜內(nèi)溫度為30°C，升溫回流2. 5h，向濃縮物中加入 3L二氯甲烷，油層用6L飽和食鹽水清洗，粗品中加入3100g無水乙醇使粗品溶解，400g無 水硫酸鈉干燥4h，靜置后反應(yīng)釜內(nèi)溫度為20°C攪拌2h，固體在40°C送風干燥，其他步驟與 例7相同。
[0022] 例9 :5L二氯甲烷加入反應(yīng)釜，反應(yīng)釜內(nèi)溫度為40°C，升溫回流3h，向濃縮物中 加入IOL二氯甲烷，油層用IOL飽和食鹽水清洗，粗品中加入3200g無水乙醇使粗品溶解， 600g無水硫酸鈉干燥5h，靜置后反應(yīng)釜內(nèi)溫度為23°C攪拌lh，固體在30°C送風干燥，其他 步驟與例7相同。
[0023] 4.水解反應(yīng)，合成硝卡芥NC的實施例： 例10 :水解反應(yīng)全程蔽光操作，將所制備的NCVI淡黃色晶體2倍質(zhì)量的濃鹽酸和所制 備的NCVI依次加入到反應(yīng)瓶中，邊攪拌邊加熱至80°C，持續(xù)120轉(zhuǎn)/分鐘攪拌0. 5h，釋放 出大量氣體，然后加熱至反應(yīng)瓶內(nèi)溫度為80°C，持續(xù)攪拌0. 5h，最后加熱反應(yīng)液使反應(yīng)瓶 內(nèi)溫度為95°C，反應(yīng)瓶外油浴溫度為115°C，回流反應(yīng)3h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢 后，停止加熱，冷卻至室溫，反應(yīng)液呈酸性，將反應(yīng)液移至單口瓶，用溫度為50°C水泵減壓濃 縮反應(yīng)液除去鹽酸水溶液及乙醇，再加入800g濃鹽酸使?jié)饪s物重新溶解，加熱回流2h，再 次濃縮除去鹽酸水溶液；向得到的濃縮物中加入5L水，攪拌澄清液后，轉(zhuǎn)入到反應(yīng)瓶中，再 加入IOg活性炭，蔽光下20°C持續(xù)130轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，然后抽濾，除去活性炭，得到的 濾液加入到反應(yīng)釜中，蔽光攪拌，滴加醋酸鈉水溶液至PH=3. 5,然后持續(xù)攪拌lh，抽濾得到 固體，濾餅用乙酸乙酯沖洗，得到的固體于40°C干燥8h，得到類白色固體NC，收率80. 76%， 液相檢測結(jié)果：NC>97. 5%，其他單雜〈1% ; 例11 :反應(yīng)瓶內(nèi)攪拌Ih，加熱至瓶內(nèi)溫度90°C，持續(xù)130轉(zhuǎn)/分鐘攪拌Ih，最后加熱至 瓶內(nèi)溫度為l〇〇°C，反應(yīng)瓶外油浴溫度為118°C，回流反應(yīng)5h，溫度為55°C的水泵減壓濃縮， 濃縮物中加入7L水，轉(zhuǎn)到反應(yīng)瓶內(nèi)后加入18g活性炭，23°C避光攪拌，滴加醋酸鈉水溶液至 PH=4. 2,得到的固體于42°C干燥10h，其他步驟與例10相同。
[0024] 例12 :反應(yīng)瓶內(nèi)攪拌》1，加熱至瓶內(nèi)溫度KKTC，持續(xù)150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌2h，最后 加熱至瓶內(nèi)溫度為l〇3°C，反應(yīng)瓶外油浴溫度為120°C，回流反應(yīng)6h，溫度為60°C的水泵減 壓濃縮，濃縮物中加入IOL 7K，轉(zhuǎn)到反應(yīng)瓶內(nèi)后加入25g活性炭，25°C避光攪拌，滴加醋酸鈉 水溶液至PH=4. 5,得到的固體于45°C干燥12h，其他步驟與例10相同。
[0025] 5.精制硝卡芥的實施例： 例13 :全程于潔凈區(qū)內(nèi)避光操作，向IOL的反應(yīng)瓶中，加入6kg純化水、400g濃鹽酸，攪 拌使其混合均勻，然后加入步驟（4)中制備的類白色固體NC，攪拌使其溶解，將反應(yīng)瓶內(nèi)溫 度控制在KTC，溶清后加入15g活性炭，攪拌脫色20min，抽濾，濾液入潔凈區(qū)內(nèi)的結(jié)晶釜， 200轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，加入IOkg過濾過的乙酸乙酯，緩慢滴加過濾的由質(zhì)量比為1:1的飽和醋 酸鈉水溶液和純水制備的醋酸鈉水溶液，使溶液PH=4,繼續(xù)攪拌0. 5h，抽濾，乙酸乙酯沖洗 濾餅，40°C送風干燥，得到硝卡芥精制品，重復精制兩次，兩次精制回收率72%，得到硝卡芥 原料藥物。
[0026] 例14 :反應(yīng)瓶內(nèi)加入8kg純化水、420g濃鹽酸，反應(yīng)瓶內(nèi)溫度控制為15°C，加入 23g活性炭，攪拌脫色35min，230轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，加入15kg過濾過的乙酸乙酯，攪拌0. 8h， 濾餅45°C送風干燥，其余步驟同例13。
[0027] 例15 :反應(yīng)瓶內(nèi)加入IOkg純化水、450g濃鹽酸，反應(yīng)瓶內(nèi)溫度控制為20°C，加入 3〇g活性炭，攪拌脫色50min，250轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，加入18kg過濾過的乙酸乙酯，攪拌Ih,濾 餅50°C送風干燥，其余步驟同例13。
[0028] 檢測結(jié)果：所得到的硝卡芥原料藥物結(jié)構(gòu)通過元素分析，IR, UV，ESI-MS，H-NMR， C-NMR等結(jié)構(gòu)確證手段確定分子式為：C14H19Cl2N3O 4，分子量為364. 22,結(jié)構(gòu)式為：

【權(quán)利要求】
1. 一種硝卡芥原料藥物的制備方法，其特征在于：包括如下步驟： (1) 溴代反應(yīng)合成NCIV:氯仿作為溶劑，將二乙基-2- (2-甲基-5-硝基苯）-2-乙酰 胺基馬龍酸酯即NCIII、N-溴代丁二酰亞胺和偶氮二異丁腈加熱回流反應(yīng)，回流后每隔一 個小時再加入N-溴代丁二酰亞胺繼續(xù)回流反應(yīng)，反應(yīng)完畢后，降溫析出固體，濾液分別用 NaHSO 3飽和液、純化水、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，氯仿分液，氯仿層溶液干燥過濾，濾液 減壓濃縮，即得NCIV粗品，NCIV粗品用無水乙醇溶解，活性炭脫色，過濾后濾液降溫析晶， 干燥得到NCIV ; (2) 親核取代反應(yīng)合成NCV :得到的NCIV與無水乙醇、二乙醇胺以及NaI加熱回流反 應(yīng)，反應(yīng)完畢后緩慢降溫至室溫，反應(yīng)液滴入水中，攪拌使二溴雜質(zhì)析出；抽濾后濾液用乙 酸乙酯萃取，乙酸乙酯層干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，得NCV粗品；粗品在室溫下用乙酸 乙酯溶解，然后緩慢滴加石油醚使NCV析出；1:1的石油醚：乙酸乙酯溶液清洗析出物，所得 干燥固體即為NCV ; (3) ;氯代反應(yīng)合成NCVI :二氯甲烷溶解NCV，溶液滴加氯化亞砜后回流反應(yīng)，反應(yīng)完畢 后濃縮溶液，繼續(xù)用二氯甲烷溶解濃縮物，調(diào)節(jié)PH至中性，靜置分層，油層用飽和食鹽水清 洗后再用無水硫酸鈉干燥抽濾，濃縮獲得的粗品用無水乙醇多次溶解、抽濾，干燥獲得晶體 即 NCVI ; (4) 水解反應(yīng)合成硝卡芥NC :水解反應(yīng)全程蔽光操作，干燥晶體NCVI和濃鹽酸加熱反 應(yīng)，釋放出大量氣體后繼續(xù)加熱回流反應(yīng)，反應(yīng)完畢后冷卻至室溫，減壓濃縮反應(yīng)液除去鹽 酸水溶液及乙醇，濃縮物繼續(xù)用濃鹽酸溶解加熱回流，再次濃縮除去鹽酸水溶液，濃縮物水 溶解后活性炭除雜，濾液調(diào)節(jié)pH為3. 5-4,抽濾所得固體用乙酸乙酯沖洗獲得NC ; (5) 精制硝卡芥：全程潔凈避光操作，鹽酸水溶液溶解獲得的NC，活性炭除雜，抽濾后 濾液中加入乙酸乙酯，用醋酸鈉水溶液調(diào)整PH為4,攪拌后抽濾，濾餅用乙酸乙酯沖洗，干 燥獲得硝卡芥精制品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種硝卡芥原料藥物的制備方法，其特征在于：具體步驟如 下： (1) 溴代反應(yīng)，NCIV的合成：反應(yīng)釜中，50-70轉(zhuǎn)/分鐘邊攪拌邊加入氯仿20-30L， 2_3kg的二乙基-2- (2-甲基-5-硝基苯）-2-乙酰胺基馬龍酸酯即NCIII、以NCIII的加 入量為計算基準，N-溴代丁二酰亞胺加入量為0? 75eq_0. 9eq當量，偶氮二異丁腈60_70g, 加熱至80_90°C進行回流反應(yīng)，回流后每隔一個小時再加入0? 75eq-0. 9eq當量的N-溴代丁 二酰亞胺，繼續(xù)攪拌回流，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，自然冷卻降溫，析出固體，過 濾，濾液分別用NaHSO 3飽和液、純化水、飽和氯化鈉水溶液依次洗滌，分液，氯仿層溶液用無 水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮，得淡黃色糖漿狀NCIV粗品； NCIV粗品除雜：NCIV粗品加入到無水乙醇中，加熱回流溶解，加入40-60g活性炭脫色 20-40min，趁熱過濾；攪拌濾液使溫度緩慢降至15°C -20°C，繼續(xù)攪拌使其充分析晶，過濾， 固體40°C鼓風干燥4h-6h，得白色固體NCIV，根據(jù)液相結(jié)果折算NCIV的收率52%-65% ;液相 檢測結(jié)果：NCIV>60% ;二溴雜質(zhì)〈40% ;其他單雜0? 5% ; (2) 親核取代反應(yīng)，NCV的合成：反應(yīng)釜內(nèi)，攪拌下加入4-10L無水乙醇、700-850g二乙 醇胺、制備好的白色固體NCIV和20-30g的Nal，加熱反應(yīng)液至回流，回流反應(yīng)3h-5h，TLC 跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后溫度緩慢降至室溫，將反應(yīng)液滴入10-14L水中，100-140轉(zhuǎn) /分攪拌使二溴雜質(zhì)緩慢析出，抽濾，濾液用20-40L乙酸乙酯萃取三至四次，濾餅用體積比 為1:1乙醇/水溶液3-10L打漿2h，過濾，濾液用5-20L乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯層，無 水Na2SO 4干燥，過濾，濾液減壓濃縮至干，得NCV粗品； NCV粗品除雜：室溫下，NCV粗品用乙酸乙酯溶解，然后緩慢滴加與乙酸乙酯等體積的 石油醚，滴加至一半時，NCV開始析出，滴加結(jié)束后，繼續(xù)120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌lh，抽濾，用 體積比為1:1的石油醚：乙酸乙酯溶液清洗濾餅，得到的固體20-40°C送風干燥4h-6h，得 到淡黃色晶體即NCV，NCV的收率74. 3%，液相檢測結(jié)果：NCV>95% ;其他單雜1% ; (3) 氯代反應(yīng)，NCVI的合成：將2-5L二氯甲烷和制備好的NCV依次加入到反應(yīng)釜內(nèi)， 攪拌溶解，冷卻下控制反應(yīng)釜內(nèi)的溫度至25-40°C，緩慢滴加IOOO-IlOOg氯化亞砜，滴加 完畢后，緩慢升溫至回流溫度，回流2~3h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，減壓濃縮 溶液，向濃縮物中加入3-10L二氯甲烷，攪拌使?jié)饪s物溶解，然后滴加飽和碳酸氫鈉水溶液 至PH中性，靜置分層，得到的油層用3-10L飽和食鹽水清洗一次，繼續(xù)靜置分層，油層用 400-600g無水硫酸鈉干燥3h-5h后抽濾，濃縮得到粗品，粗品中加入3000-3200g無水乙醇 使粗品溶解，再次抽濾，濃縮得到黃色固體粗品；黃色固體粗品中加入無水乙醇加熱至回流 溶解，靜置3h使溫度緩慢降低至反應(yīng)釜內(nèi)溫度為20°C -25°C，然后持續(xù)攪拌0. 5-2h，抽濾， 濾餅用冷的無水乙醇沖洗，得到的固體于20-40°C送風干燥過夜，得到淡黃色晶體即NCVI， 收率79%，液相檢測結(jié)果：NCVI>99%，其他單雜〈0. 5% ; (4) 水解反應(yīng)，硝卡芥NC的合成：水解反應(yīng)全程蔽光操作，將所制備的NCVI淡黃色晶 體2倍質(zhì)量的濃鹽酸和所制備的NCVI依次加入到反應(yīng)瓶中，邊攪拌邊加熱至80°C，持續(xù) 120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌0. 5-2h，釋放出大量氣體，然后加熱至反應(yīng)瓶內(nèi)溫度為80-KKTC， 持續(xù)攪拌〇. 5-2h，最后加熱反應(yīng)液使反應(yīng)瓶內(nèi)溫度為95°C -103°C，反應(yīng)瓶外油浴溫度為 115°C -120°C，回流反應(yīng)3h-6h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，確定反應(yīng)完畢后，停止加熱，冷卻至室 溫，反應(yīng)液呈酸性，將反應(yīng)液移至單口瓶，用溫度為50°C -60°C水泵減壓濃縮反應(yīng)液除去鹽 酸水溶液及乙醇，再加入800-1200g濃鹽酸使?jié)饪s物重新溶解，加熱回流2h，再次濃縮除 去鹽酸水溶液；向得到的濃縮物中加入5-10L水，攪拌澄清液后，轉(zhuǎn)入到反應(yīng)瓶中，再加入 10-25g活性炭，蔽光下20°C -25°C持續(xù)120-150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌30分鐘，然后抽濾，除去活性 炭，得到的濾液加入到反應(yīng)釜中，蔽光攪拌，滴加醋酸鈉水溶液至PH=3. 5-4,然后持續(xù)攪拌 Ih，抽濾得到固體，濾餅用乙酸乙酯沖洗，得到的固體于40°C -45°C干燥8h-12h，得到類白 色固體NC，收率80. 76%，液相檢測結(jié)果：NC>97. 5%，其他單雜〈1% ; (5) 精制硝卡芥：全程于潔凈區(qū)內(nèi)避光操作，向IOL的反應(yīng)瓶中，加入6-10kg純化水、 400-450g濃鹽酸，攪拌使其混合均勻，然后加入步驟（4)中制備的類白色固體NC，攪拌使其 溶解，將反應(yīng)瓶內(nèi)溫度控制在l〇°C -20°C，溶清后加入15-30g活性炭，攪拌脫色20-50min， 抽濾，濾液入潔凈區(qū)內(nèi)的結(jié)晶釜，200-250轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，加入10-18kg過濾過的乙酸乙酯， 緩慢滴加過濾的由質(zhì)量比為1:1的飽和醋酸鈉水溶液和純水制備的醋酸鈉水溶液，使溶液 PH=4,繼續(xù)攪拌0. 5-lh，抽濾，乙酸乙酯沖洗濾餅，4(T50°C送風干燥，得到硝卡芥精制品，重 復精制兩次，兩次精制回收率72%，得到硝卡芥原料藥物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種硝卡芥原料藥物的制備方法，其特征在于：所述TLC跟 蹤的檢測條件為：硅膠GF254或硅膠HF254預制板，展開劑：乙酸乙酯：石油醚=1:10,檢視條 件：254nm波長檢視。
【文檔編號】C07C227/20GK104311439SQ201410506067
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月28日
【發(fā)明者】高治華, 劉近榮, 沈達, 劉豐羽 申請人:山西振東泰盛制藥有限公司