專利名稱:一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法。背景技術(shù):
芍藥的有效成分為芍藥總苷,包括芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、氧化芍藥苷的三十多種單萜苷類。隨著對(duì)中藥的研究深入,也越來越注重中藥中有效成分、有效部位的提取分離純化。其中,芍藥苷作為芍藥中的主要成分之一,其在藥材中含量高,純品較易獲得,一直以來作為芍藥及相關(guān)制品的質(zhì)量控制指標(biāo),其研究報(bào)道相對(duì)較多。
近年來,研究表明,芍藥內(nèi)酯苷作為芍藥中的另一種有效成分,具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗驚厥、抗炎、抗病原微生物等多種藥理作用,在臨床上被用于抗癲癇、鎮(zhèn)痛、治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等,因而,對(duì)芍藥內(nèi)酯苷的研究日益增多,其高純度單體的制備需求日益增大。
目前,對(duì)芍藥內(nèi)酯苷和芍藥苷的制備已有很多報(bào)道,例如申請(qǐng)?zhí)枮?201110410067. 9的發(fā)明申請(qǐng)專利公開了 “一種芍藥苷和白芍苷的制備方法”以牡丹科植物為原料提取后,以大孔樹脂對(duì)粗提液進(jìn)行吸附,以3(Γ75%乙醇水洗脫液濃縮干燥后得精制提取物,再以加壓色譜柱對(duì)其進(jìn)行分離純化,可獲得純度大于90%的芍藥苷和白芍苷成品。申請(qǐng)?zhí)枮?01010249421. X的發(fā)明專利公開了“一種同時(shí)制備芍藥內(nèi)酯苷和芍藥苷的方法”,即以芍藥藥材或提取物為原料,采用柱層析方法進(jìn)行芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的純化,優(yōu)選后的方法制備芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的純度可達(dá)91% 97%。申請(qǐng)?zhí)枮?00910100680. 3的發(fā)明專利申請(qǐng)公開了 “一種模擬移動(dòng)床色譜法分離制備芍藥內(nèi)酯苷的方法”,即采用白芍總苷提取物為原料,應(yīng)用模擬移動(dòng)床色譜法分離制備芍藥內(nèi)酯苷,模擬移動(dòng)床的固定相采用C18硅膠,流動(dòng)相采用甲醇或乙腈與水、甲酸、異丙醇的混合溶液,最終可制備純度達(dá)90% 以上的芍藥內(nèi)酯苷,再如申請(qǐng)?zhí)枮?2133298. 3的發(fā)明專利公開了一種“芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的組合物及其制備方法”以芍藥為原料,通過吸附樹脂精制、氧化鋁柱層析和硅膠柱層析值得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的組合物,其中芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在該組合物中的比例為 7:3 9:1。
通過長期研究,對(duì)白 芍總苷的提取純化工藝已較為成熟,但對(duì)芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷單體的制備報(bào)道較少。文獻(xiàn)中有以反相硅膠模擬移動(dòng)床色譜、硅膠柱層析及加壓柱層析對(duì)二者進(jìn)行分離制備,但均存在制備工藝流程復(fù)雜,柱效低、制備周期長、檢測(cè)操作復(fù)雜等各種弊端,均難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
迄今為止,尚未有一種適合工業(yè)化大生產(chǎn)同時(shí)快速高效制備高純度芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的工藝路線報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種純度大于89%、易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的提取工藝。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法,所述方法如下
(I)選取含芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的植物原料,以2(Γ70% (ν/ν)乙醇溶液提取廣3 次,提取液合并,濃縮,干燥,得粗提物;
(2)步驟(I)粗提物上大孔吸附樹脂,上樣結(jié)束后先以清水清洗除雜,再以 109Γ40% (ν/ν)乙醇溶液洗脫,洗脫液濃縮,干燥,得大孔樹脂富集物;所述大孔吸附樹脂為常規(guī)非極性或弱極性大孔吸附樹脂;
(3)步驟(2)大孔樹脂富集物采用高速逆流色譜,以正丁醇-乙酸乙酯-水為溶劑體系進(jìn)行分離,分別收集含有芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷的流份,濃縮,干燥,分別得到芍藥苷成品和芍藥內(nèi)酯苷成品,所得成品中芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷純度為89°/Γ98%);所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比為廣4 Γ4 :5。
所述植物原料為白芍、赤芍或牡丹的根,以粉末形式進(jìn)行提取為好。
步驟(I)所述提取為回流提取、超聲提取、索氏提取或微波輔助提取,優(yōu)選為超聲提取。
所述大孔吸附樹脂優(yōu)選為下列之一 D101、AB-8、DM130、HPD-450、HPD-620、 HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2,更優(yōu)選為 DlOl 或 AB-8。
步驟(3)所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比優(yōu)選為4 :1 :5或2 :3 :5。
本發(fā)明方法可同時(shí)制備芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷,制備工藝簡單,為工業(yè)生產(chǎn)放大提供參考依據(jù)。
本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)咋
1.應(yīng)用本發(fā)明方法,可以在同一工藝流程中,制備得到芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷,充分利用藥材資源;
2.應(yīng)用本發(fā)明方法,可以在同一工藝流程中獲得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的富集物, 有效地簡化了后續(xù)純化工藝負(fù)擔(dān);
3.應(yīng)用本發(fā)明方法,創(chuàng)新性地以高速逆流色譜分離芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的富集物,實(shí)現(xiàn)了單體純化工藝的自動(dòng)化和可操作性,可一次性獲得純度大于89%的單體成品;
4.本發(fā)明制備工藝方法簡單,精制效率高,耗能低,環(huán)保,操作工藝條件易于控制。
圖1為實(shí)施例4的高速逆流色譜圖;峰I為芍藥內(nèi)酯苷,峰2為芍藥苷;
圖2為實(shí)施例4的芍藥苷純度圖3為實(shí)施例4的芍藥內(nèi)酯苷 純度圖4為實(shí)施例9方法I的高速逆流色譜圖;峰I為芍藥內(nèi)酯苷,峰2為芍藥苷。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此
實(shí)施例1 :大孔樹脂靜態(tài)吸附性能考察
稱取200g白芍藥材(根部)粉末,用2L 50%乙醇循環(huán)超聲提取2次,每次O. 5h, 所用儀器為“弘祥隆”CTXNW-2B超聲循環(huán)提取機(jī),超聲頻率59kHz,橫波間隙3秒,攪拌速度950rpm。提取液濾過,合并濾液,減壓濃縮至無醇味,凍干,備用。
稱取各型號(hào)分別精密稱取已處理好(將實(shí)驗(yàn)的9種大孔吸附樹脂分別置于三角瓶中,以無水乙醇浸泡3次,每次24h,除去浸液上層漂浮的雜質(zhì)后,用蒸餾水沖洗至無醇味, 濕態(tài)保存?zhèn)溆谩?的8種型號(hào)大孔吸附樹脂各lg,置100ml錐形瓶中。精密稱取粗提物粉末各0. 3g,分別用30ml去離子水溶解,加入錐形瓶中,放入恒溫?fù)u床振搖24h,溫度20°C,轉(zhuǎn)速 200rpm。將吸附后的白芍提取液真空抽濾,濾液適當(dāng)稀釋,用HPLC法測(cè)定芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的含量,并計(jì)算各型號(hào)大孔吸附樹脂的比吸附量。吸附好的樹脂用水洗3次,真空干燥后,加入10 ml 95%乙醇,放入恒溫?fù)u床振搖24h,溫度20°C,轉(zhuǎn)速200rpm,進(jìn)行解吸附。解吸液經(jīng)適當(dāng)稀釋后用HPLC法測(cè)定芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的含量,并計(jì)算各型號(hào)大孔吸附樹脂的解吸率。公式為
權(quán)利要求
1.一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法,所述方法如下(1)選取含芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的植物原料,以2(Γ70%乙醇溶液提取f3次,提取液合并,濃縮,干燥,得粗提物;(2)步驟(I)粗提物上大孔吸附樹脂,上樣結(jié)束后先以清水清洗除雜,再以109Γ40%乙醇溶液洗脫,洗脫液濃縮,干燥,得大孔樹脂富集物;所述大孔吸附樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂;(3)步驟(2)大孔樹脂富集物采用高速逆流色譜,以正丁醇-乙酸乙酯-水為溶劑體系進(jìn)行分離,分別收集含有芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷的流份,濃縮,干燥,即得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷成品;所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比為廣4 Γ4 :5。
2.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述植物原料為白芍、赤芍或牡丹的根。
3.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于步驟(I)所述提取為回流提取、超聲提取、索氏提取或微波輔助提取。
4.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述大孔吸附樹脂為下列之一D101、AB-8、 DMl30、HPD-450、HPD-620、HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2。
5.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述大孔吸附樹脂為DlOl或AB-8。
6.如權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于步驟(3)所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯 水的體積比為4 :1 :5或2 :3 :5。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的高效同時(shí)制備方法,其特征在于該方法為以含有芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的藥材為原料,采用醇水混合溶劑進(jìn)行提取,提取液濃縮;所得提取液用大孔樹脂柱富集,以乙醇水混合溶劑進(jìn)行洗脫,收集乙醇水洗脫液,濃縮;大孔樹脂富集液采用高速逆流色譜進(jìn)行分離純化,分別收集含有芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷的流分,濃縮,干燥,即可獲得純度89%-98%的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷。本發(fā)明工藝簡單、純化效率高、制備周期短,可在同一工藝流程中低成本、低能耗得到高純度的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷,所用溶劑毒性低、環(huán)保,制備效率高。
文檔編號(hào)C07H1/08GK103044503SQ20121056994
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月24日
發(fā)明者顏繼忠, 楚楚, 李行諾, 童勝強(qiáng), 陳岑 申請(qǐng)人:浙江工業(yè)大學(xué)