專利名稱：一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法。背景技術(shù)：
芍藥的有效成分為芍藥總苷，包括芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷、氧化芍藥苷的三十多種單萜苷類。隨著對(duì)中藥的研究深入，也越來越注重中藥中有效成分、有效部位的提取分離純化。其中，芍藥苷作為芍藥中的主要成分之一，其在藥材中含量高，純品較易獲得，一直以來作為芍藥及相關(guān)制品的質(zhì)量控制指標(biāo)，其研究報(bào)道相對(duì)較多。
近年來，研究表明，芍藥內(nèi)酯苷作為芍藥中的另一種有效成分，具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗驚厥、抗炎、抗病原微生物等多種藥理作用，在臨床上被用于抗癲癇、鎮(zhèn)痛、治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等，因而，對(duì)芍藥內(nèi)酯苷的研究日益增多，其高純度單體的制備需求日益增大。
目前，對(duì)芍藥內(nèi)酯苷和芍藥苷的制備已有很多報(bào)道，例如申請(qǐng)?zhí)枮?201110410067. 9的發(fā)明申請(qǐng)專利公開了 “一種芍藥苷和白芍苷的制備方法”以牡丹科植物為原料提取后，以大孔樹脂對(duì)粗提液進(jìn)行吸附，以3(Γ75%乙醇水洗脫液濃縮干燥后得精制提取物，再以加壓色譜柱對(duì)其進(jìn)行分離純化，可獲得純度大于90%的芍藥苷和白芍苷成品。申請(qǐng)?zhí)枮?01010249421. X的發(fā)明專利公開了“一種同時(shí)制備芍藥內(nèi)酯苷和芍藥苷的方法”，即以芍藥藥材或提取物為原料，采用柱層析方法進(jìn)行芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的純化，優(yōu)選后的方法制備芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的純度可達(dá)91% 97%。申請(qǐng)?zhí)枮?00910100680. 3的發(fā)明專利申請(qǐng)公開了 “一種模擬移動(dòng)床色譜法分離制備芍藥內(nèi)酯苷的方法”，即采用白芍總苷提取物為原料，應(yīng)用模擬移動(dòng)床色譜法分離制備芍藥內(nèi)酯苷，模擬移動(dòng)床的固定相采用C18硅膠，流動(dòng)相采用甲醇或乙腈與水、甲酸、異丙醇的混合溶液，最終可制備純度達(dá)90% 以上的芍藥內(nèi)酯苷，再如申請(qǐng)?zhí)枮?2133298. 3的發(fā)明專利公開了一種“芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的組合物及其制備方法”以芍藥為原料，通過吸附樹脂精制、氧化鋁柱層析和硅膠柱層析值得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的組合物，其中芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷在該組合物中的比例為 7:3 9:1。
通過長期研究，對(duì)白 芍總苷的提取純化工藝已較為成熟，但對(duì)芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷單體的制備報(bào)道較少。文獻(xiàn)中有以反相硅膠模擬移動(dòng)床色譜、硅膠柱層析及加壓柱層析對(duì)二者進(jìn)行分離制備，但均存在制備工藝流程復(fù)雜，柱效低、制備周期長、檢測(cè)操作復(fù)雜等各種弊端，均難以實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
迄今為止，尚未有一種適合工業(yè)化大生產(chǎn)同時(shí)快速高效制備高純度芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的工藝路線報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種純度大于89%、易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的提取工藝。
本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法，所述方法如下
(I)選取含芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的植物原料，以2(Γ70% (ν/ν)乙醇溶液提取廣3 次，提取液合并，濃縮，干燥，得粗提物；
(2)步驟(I)粗提物上大孔吸附樹脂，上樣結(jié)束后先以清水清洗除雜，再以 109Γ40% (ν/ν)乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，干燥，得大孔樹脂富集物；所述大孔吸附樹脂為常規(guī)非極性或弱極性大孔吸附樹脂；
(3)步驟(2)大孔樹脂富集物采用高速逆流色譜，以正丁醇-乙酸乙酯-水為溶劑體系進(jìn)行分離，分別收集含有芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷的流份，濃縮，干燥，分別得到芍藥苷成品和芍藥內(nèi)酯苷成品，所得成品中芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷純度為89°/Γ98%);所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比為廣4 Γ4 :5。
所述植物原料為白芍、赤芍或牡丹的根，以粉末形式進(jìn)行提取為好。
步驟(I)所述提取為回流提取、超聲提取、索氏提取或微波輔助提取，優(yōu)選為超聲提取。
所述大孔吸附樹脂優(yōu)選為下列之一 D101、AB-8、DM130、HPD-450、HPD-620、 HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2，更優(yōu)選為 DlOl 或 AB-8。
步驟(3)所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比優(yōu)選為4 :1 :5或2 :3 :5。
本發(fā)明方法可同時(shí)制備芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，制備工藝簡單，為工業(yè)生產(chǎn)放大提供參考依據(jù)。
本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)咋
1.應(yīng)用本發(fā)明方法，可以在同一工藝流程中，制備得到芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，充分利用藥材資源；
2.應(yīng)用本發(fā)明方法，可以在同一工藝流程中獲得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的富集物， 有效地簡化了后續(xù)純化工藝負(fù)擔(dān)；
3.應(yīng)用本發(fā)明方法，創(chuàng)新性地以高速逆流色譜分離芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的富集物，實(shí)現(xiàn)了單體純化工藝的自動(dòng)化和可操作性，可一次性獲得純度大于89%的單體成品；
4.本發(fā)明制備工藝方法簡單，精制效率高，耗能低，環(huán)保，操作工藝條件易于控制。

圖1為實(shí)施例4的高速逆流色譜圖；峰I為芍藥內(nèi)酯苷，峰2為芍藥苷；
圖2為實(shí)施例4的芍藥苷純度圖3為實(shí)施例4的芍藥內(nèi)酯苷 純度圖4為實(shí)施例9方法I的高速逆流色譜圖；峰I為芍藥內(nèi)酯苷，峰2為芍藥苷。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于此
實(shí)施例1 :大孔樹脂靜態(tài)吸附性能考察
稱取200g白芍藥材(根部)粉末，用2L 50%乙醇循環(huán)超聲提取2次，每次O. 5h， 所用儀器為“弘祥隆”CTXNW-2B超聲循環(huán)提取機(jī)，超聲頻率59kHz，橫波間隙3秒，攪拌速度950rpm。提取液濾過,合并濾液,減壓濃縮至無醇味，凍干，備用。
稱取各型號(hào)分別精密稱取已處理好(將實(shí)驗(yàn)的9種大孔吸附樹脂分別置于三角瓶中，以無水乙醇浸泡3次，每次24h，除去浸液上層漂浮的雜質(zhì)后，用蒸餾水沖洗至無醇味， 濕態(tài)保存?zhèn)溆谩?的8種型號(hào)大孔吸附樹脂各lg，置100ml錐形瓶中。精密稱取粗提物粉末各0. 3g，分別用30ml去離子水溶解，加入錐形瓶中，放入恒溫?fù)u床振搖24h，溫度20°C，轉(zhuǎn)速 200rpm。將吸附后的白芍提取液真空抽濾，濾液適當(dāng)稀釋，用HPLC法測(cè)定芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的含量，并計(jì)算各型號(hào)大孔吸附樹脂的比吸附量。吸附好的樹脂用水洗3次，真空干燥后,加入10 ml 95%乙醇,放入恒溫?fù)u床振搖24h,溫度20°C,轉(zhuǎn)速200rpm,進(jìn)行解吸附。解吸液經(jīng)適當(dāng)稀釋后用HPLC法測(cè)定芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的含量，并計(jì)算各型號(hào)大孔吸附樹脂的解吸率。公式為
權(quán)利要求
1.一種快速高效提取芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的方法，所述方法如下(1)選取含芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的植物原料，以2(Γ70%乙醇溶液提取f3次，提取液合并，濃縮，干燥，得粗提物；(2)步驟(I)粗提物上大孔吸附樹脂，上樣結(jié)束后先以清水清洗除雜，再以109Γ40%乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，干燥，得大孔樹脂富集物；所述大孔吸附樹脂為非極性或弱極性大孔吸附樹脂；(3)步驟(2)大孔樹脂富集物采用高速逆流色譜，以正丁醇-乙酸乙酯-水為溶劑體系進(jìn)行分離，分別收集含有芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷的流份，濃縮，干燥，即得芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷成品；所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯水的體積比為廣4 Γ4 :5。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述植物原料為白芍、赤芍或牡丹的根。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(I)所述提取為回流提取、超聲提取、索氏提取或微波輔助提取。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂為下列之一D101、AB-8、 DMl30、HPD-450、HPD-620、HPD-750、HPD-826、ADS-17、ADS-7-2。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔吸附樹脂為DlOl或AB-8。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)所述溶劑體系中正丁醇乙酸乙酯 水的體積比為4 :1 :5或2 :3 :5。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的高效同時(shí)制備方法，其特征在于該方法為以含有芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷的藥材為原料，采用醇水混合溶劑進(jìn)行提取，提取液濃縮；所得提取液用大孔樹脂柱富集，以乙醇水混合溶劑進(jìn)行洗脫，收集乙醇水洗脫液，濃縮；大孔樹脂富集液采用高速逆流色譜進(jìn)行分離純化，分別收集含有芍藥苷或芍藥內(nèi)酯苷的流分，濃縮，干燥，即可獲得純度89%-98%的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷。本發(fā)明工藝簡單、純化效率高、制備周期短，可在同一工藝流程中低成本、低能耗得到高純度的芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷，所用溶劑毒性低、環(huán)保，制備效率高。
文檔編號(hào)C07H1/08GK103044503SQ20121056994
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月24日
發(fā)明者顏繼忠, 楚楚, 李行諾, 童勝強(qiáng), 陳岑 申請(qǐng)人:浙江工業(yè)大學(xué)