專(zhuān)利名稱(chēng)：：抗干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的抗體及其使用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明大體上涉及完全人類(lèi)抗干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的單克隆抗體，以及上述抗體的使用方法。
背景技術(shù)：
：干護(hù)乙素i秀導(dǎo)蛋白-IO(IP畫(huà)IO，CXCL10)是一種細(xì)月包表面(CXC)趨化因子，其經(jīng)由所述的細(xì)胞表面趨化因子受體3(CXCR3)受體發(fā)出信號(hào)。干擾素誘導(dǎo)蛋白-10選擇性的趨化Thl淋巴細(xì)胞以及單核細(xì)胞，并且抑制細(xì)胞因子刺激性造血祖細(xì)胞的增殖。干擾素誘導(dǎo)蛋白-10最初是作為干擾素(IFN)g誘導(dǎo)基因在單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞以及內(nèi)皮細(xì)胞中;f皮識(shí)別出來(lái)的。至此以后已經(jīng)證明，干擾素誘導(dǎo)蛋白-10mRNA同樣受到脂多糖(LPS),白細(xì)胞介素畫(huà)lb(IL-lb),月中瘤壞、死因子-a(TNF-oc),白細(xì)月包介素-12以及病毒的i秀導(dǎo)。已經(jīng)一皮證明能夠表達(dá)干護(hù)C素誘導(dǎo)蛋白-IO的另外的細(xì)胞類(lèi)型包括活化的T-淋巴細(xì)胞，脾細(xì)胞，角化細(xì)胞，造骨細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞以及平滑肌細(xì)胞。已經(jīng)在各種疾病以及障礙中牽連到水平提升的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的表達(dá)。因此，存在一種對(duì)于以干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活寸生為革a向的治療方法的需^t。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了能夠特異性的與干擾素誘導(dǎo)蛋白10(ip-io在這里也^皮稱(chēng)為cxclio)進(jìn)4亍結(jié)合的完全人類(lèi)單克隆抗體。范例性的單克隆抗體包括NI-0801,CF1N1R3P4—C7("C7")CF1H1R3P3—Gll("Gll");CF1H1R3P4_B5("B5，，)CF1A11R3P3_F3("F3");CC21R3P1—F1("CC—Fl，，)CB21R3P3—E5("E5");CC21R3P1_H6("H6");CC21R3P5_C5("C5");CB1R3P4—D3("D3，，)；CB2R2P4—C3("C3，，)；CC21R3P4—F4("F4");CC21R3P1—Cla("Cla，，)；CC21R3P3_C1("C1");CC21R3P1一E7("E7");CE7C1R3H8—J9("9");CB21R3P1—Fl("CB一F1");CC21R3P1—A2("A2");CB21R3P6—G7("G7");以及CC21R3P1—B9("B9")。或者，所述的單克隆抗體是一種在與NI-0801，C7,Gll,B5,F3,CC—Fl，E5，H6,C5,D3,F4,Cla,Cl，E7,J9,CB—Fl，A2,G7,C3，或者B9對(duì)目同的表<立上進(jìn)4亍結(jié)合的4元體?？贵w。本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體還包括這樣的抗體所述的抗體包4舌重鏈可變氨基酸序列和/或輕《連可變氨基酸序列，其中所述的重鏈可變氨基酸序列與序列(seqidno)2,12,18,26，31,41,51,54，61,68，75，83，92，102，109，116,123或者137的氨基酸序列具有至少90%,92%,95%，97%,98%，99%或者更高的同一性，所述的輕4連可變氨基酸序列與序歹'J(SEQIDNO)4，14,23，28,33，43,56,63,70,77，85,94,104,111,118，125,139或者145的氨基酸序列具有至少90%,92%，95%，97%,98%，99%或者更高的同一'性。優(yōu)選的，所述的三個(gè)重鏈互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)包括一種氨基酸序列，所述的氨基酸序列與下列序列中的每都具有至少90%,92%，95%，97%，98%，99%或者更高的同一')"生(i)重鏈可變的(VH)互補(bǔ)決定區(qū)域1序列，所述的序列選自由序列5，34，44，64,86,95以及127戶(hù)斤纟且成的纟且中；(ii)重《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2序列，所述的序列選自由序列6，15,35，45，65,87，96以及128戶(hù)斤纟且成的纟且中；(iii)重《連可變的互4卜決定區(qū)i或3序列，戶(hù)斤述的序列選自由序歹'J7,21,36,46，52，57，66，78，88,97，105,129，132以及140所組成的組中；并且輕鏈帶有三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)域，所述的互補(bǔ)決定區(qū)域包括一種氨基酸序列，所述的氨基酸序列與下列序列中的每都具有至少90%，92%,95%,97%,98%,99%或者更高的同一'性(iv)輕l連可變的(VL)互補(bǔ)決定區(qū)域1序列，所述的序列選自由序列8，16,37，47，71，79,98，106,112，119，133以及141戶(hù)斤纟且成的纟且中；(v)輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2序列，所述的序列選自由序歹'J9,38，48，58，72,80，89,99,113,120以及142所組成的組中；以及(vi)輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3序列，所述的序歹'J選自由序歹'J10,24，29,39,49，59,73,81，90,100，107，114，121,126以及143所組成的組中。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體包括可變的重鏈區(qū)域以及輕鏈可變區(qū)域，其中所述的重鏈區(qū)域包括如序列2所示的氨基酸序列，而所述的輕鏈區(qū)域包括如序列4所示的氨基g臾序列。本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體包括重鏈可變的互4卜決定區(qū)i或1,重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)i或2,以及重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3，其中所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1包括如序列5所示的氨基酸序列；所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2包4舌如序列6所示的氨基酸序列；而所述的重鏈可變的互4卜決定區(qū)域3包括如序列7所示的氨基酸序列。所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體包括輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1,輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)i或2，以及舉圣鏈可變的互^卜決定區(qū)i或3，其中所述的輕《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1包括如序列8所示的氨基酸序列；所述的輕《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)i或2包4舌如序列9所示的氨基酸序列；而所述的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列10所示的氨基酸序列。在一種優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述的人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體包4舌重《連可變的互^卜決定區(qū)i或1,重《連可變的互^卜決定區(qū)^戈2，以及重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,其中所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1包括如序列5所示的氨基酸序列；所述的重鏈可變的互4卜決定區(qū)i或2包4舌如序列6所示的氨基酸序列；而所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列7所示的氨基酸序列，并且包括輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1,輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2，以及輕《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,其中所述的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域l包4舌如序歹'J8所示的氨基酸序列；所述的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2包括如序列9所示的氨基酸序列；而所述的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列IO所示的氨基酸序列。優(yōu)選的，所述的人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體^皮編排成同型免疫球蛋白(IgG)。更加優(yōu)選的，所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體—皮編排成同型免疫5求蛋白l(IgGl)。一種范例性的免疫3求蛋白1格式的抗體是所述的免疫球蛋白1格式的NI-0801抗體，所述的抗體包括如序列135所示的重鏈序列以及如序列134所示的車(chē)至《連序列，^p下所示>NI-0801輕鏈氨基酸序列(序歹'J134)>NI-0801重鏈氨基酸序列QQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(序列135)與這里描述的所述人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體最密切的種系如下文表1中所示表l.與人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體最密切的種系<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>在另外方面，本發(fā)明提供了用于治療，預(yù)防或者緩解免疫相關(guān)性障礙的癥狀的方法，所述的方法通過(guò)向宿主施用一種人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)。例如，所述的人類(lèi)干4尤素誘導(dǎo)蛋白-10抗體蜂皮用來(lái)治療，預(yù)防或者》爰解與自身免疫性疾病或者炎性障礙相關(guān)的癥狀。任選的，對(duì)所述的宿主進(jìn)一步施用第二種試劑，所述的第二種試劑例如，但不局限于，一種抗細(xì)胞因子試劑或者抗趨化因子試劑，所述的試劑能夠識(shí)別細(xì)月包因子，例如白細(xì)月包介素1(IL-1)，白細(xì)月包介素2,白細(xì)l包介素4,白細(xì)月包介素6，白細(xì)月包介素12,白細(xì)月包介素13，白細(xì)月包介素15，白細(xì)i包介素17,白細(xì)月包介素18，白細(xì)月包介素20,白細(xì)月包介素21，白細(xì)月包介素22，白細(xì)月包介素23,白細(xì)月包介素27以及白細(xì)胞介素31,和/或趨4t因子例如巨噬細(xì)胞炎性蛋白1(MIP1)oc,巨噬細(xì)胞炎性蛋白1(3,正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌調(diào)節(jié)因子(RANTES)，單核細(xì)胞趨化蛋白l(MCPl),干擾素誘導(dǎo)蛋白-10,干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC),干擾素誘生單核因子(MIG),基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF)以及神經(jīng)趨4匕蛋白(fractalkine)。所述的宿主正患有或者容易患有一種免疫相關(guān)性障礙，例如，一種自身免疫性疾病或者一種炎性障礙。^L選的，所述的宿主是哺乳動(dòng)物，并且更加優(yōu)選的，所述的宿主是人類(lèi)。附圖1A-附圖3B是一系列的曲線圖，描述的是本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體對(duì)于人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10誘導(dǎo)的鈣通量(附圖1A-1B)或者細(xì)胞趨化現(xiàn)象(附圖2A-2B)所產(chǎn)生的劑量依賴(lài)性中和活性。附圖2A-2B描述的是其對(duì)于重組人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10所產(chǎn)生的劑量依賴(lài)性中和活性，而附圖3A-3B描述的是其對(duì)于天然人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10所產(chǎn)生的劑量依賴(lài)性中和活性。附圖4是圖表，描述的是在粘多糖(GAG)中所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合的能力。附圖5是示意圖，將抗體CF1N1R3P4—C7的免疫J求蛋白重鏈可變基因與人類(lèi)種系(生殖細(xì)月包系)DP-49或者IGHV3-30進(jìn)4亍了比較。與IGHV3-30相比，所述的C7重鏈可變區(qū)域具有5處突變，三處在所述的互補(bǔ)決定區(qū)域1中，一處在互補(bǔ)決定區(qū)域2中并且一處在所述的骨架區(qū)域四中。與IGLV6-57相比，所述的C7輕鏈可變區(qū)域具有4處突變，全部位于所述的互補(bǔ)決定區(qū)域1中。上述發(fā)生突變的氨基酸殘基在附圖5中用方才匡進(jìn)4亍了標(biāo)記。附圖6A以及6B是一組曲線圖，描述的是抗體CC21R3P1—Fl以及NI-0801對(duì)于人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的親和性。附圖7是曲線圖，描述的是所述的NI-0801抗體與干護(hù)0素誘_導(dǎo)蛋白-10的交叉反應(yīng)原性，其中所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10來(lái)自于各種不同的種類(lèi)以及其他的人類(lèi)趨化因子。附圖8A-8B是兩個(gè)曲線圖，描述的是重組人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(hITAC),人類(lèi)干擾素i秀生單核因子(hMIG)以及人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10誘導(dǎo)表達(dá)人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3(hCXCR3)的L1.2細(xì)胞的細(xì)胞趨化現(xiàn)象的能力，以及所述的NI-0801抗體中和這些趨化因子的活性的能力。附圖9是圖表，描述的是NI-0801對(duì)于干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的中和潛力，其中所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10來(lái)自于各種不同的種類(lèi)。附圖10是示意圖，描述的是來(lái)自于幾個(gè)種類(lèi)的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的蛋白序列的比對(duì)。附圖11是曲線圖，描述的是所述的NI-0801抗體與兔干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的變異形式進(jìn)行結(jié)合的能力。具體實(shí)施例方式本發(fā)明提供了對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10(IP-IO，CXCL10)具有特異性的完全人類(lèi)單克隆抗體。所述的抗體在這里被統(tǒng)稱(chēng)為人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體。所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10進(jìn)4亍特異性的結(jié)合。正如本發(fā)明中所^吏用的，所述的術(shù)語(yǔ)"對(duì)……具有特異性"，"特異性的結(jié)合"，"直接抵抗，，(及其所有的語(yǔ)法上的變形)當(dāng)用在抗體的情況中時(shí)可以互換使用，其中所述的抗體能夠識(shí)別一種干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10表位并且與之進(jìn)行結(jié)合，所述的結(jié)合發(fā)生在當(dāng)所述的結(jié)合平衡常數(shù)(Kd)<1孩史摩時(shí)，例3口，<100纟內(nèi)摩，4尤選<10納摩，并且更力口優(yōu)選《1納摩。例如，這里提供的所述的人類(lèi)干護(hù)G素誘導(dǎo)蛋白-IO抗體呈現(xiàn)出在大約《200匹摩(pM)至大約1匹摩之間的結(jié)合平衡常數(shù)。所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體是，例如，干擾素誘導(dǎo)蛋白-10拮抗劑或者抑制劑，其能夠調(diào)節(jié)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的至少一種生物學(xué)活性。干4尤素"i秀導(dǎo)蛋白-10的生物學(xué)活性包括，例如，結(jié)合所述的干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-lO受體(細(xì)l包表面趨化因子受體3),干擾素誘導(dǎo)蛋白-10所誘導(dǎo)的鈣通量，干護(hù)G素誘導(dǎo)蛋白-IO所-秀導(dǎo)的細(xì)月包的趨化現(xiàn)象，干4尤素誘導(dǎo)蛋白-10結(jié)合粘多糖，以及干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的低聚作用。例如，所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體通過(guò)部分或者全部阻滯干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10受體(細(xì)胞表面趨化因子受體3)進(jìn)行結(jié)合，13乂人而完全或者部分抑制干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活性。在所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體存在的情況下，當(dāng)所述的千擾素誘導(dǎo)蛋白-10的水平—皮降低了至少95%,例如，被:降Y氐了96%,97%，98%,99%或者100%時(shí)，我們認(rèn)為所述的干^尤素"i秀導(dǎo)蛋白-10抗體完全抑制了干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活性，這種降低是跟在不與本發(fā)明所描述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體進(jìn)行結(jié)合時(shí)所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的水平相比較而言的。在所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體存在的情況下，當(dāng)所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的水平被降低了少于95%,例如，被降低了10%,20%,25%，30%，40%,50%,60%,75%，80%,85%或者90%時(shí)，我們i^為所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體部分抑制了干擾素"i秀導(dǎo)蛋白-10的活性，這種降低是跟在不與本發(fā)明所描述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體進(jìn)行結(jié)合時(shí)所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的水平相比較而言的。本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體是通過(guò)使用干擾素誘導(dǎo)蛋白-10對(duì)動(dòng)物進(jìn)行免疫來(lái)制備的，所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10例如是，鼠科動(dòng)物或者人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-lO或其免疫原性片4史，書(shū)f生物或者變體?；蛘?，使用^皮載體轉(zhuǎn)染的細(xì)月包對(duì)所述的動(dòng)物進(jìn)4亍免疫，其中所述的載體含有編碼干護(hù)O素i秀導(dǎo)蛋白-lO的核酸分子，這4羊一來(lái)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10^皮表達(dá)并且與所述的-故轉(zhuǎn)染細(xì)胞的表面相關(guān)|^關(guān)?；蛘撸ㄟ^(guò)篩選文庫(kù)的方式獲得所述的抗體，其中所述的文庫(kù)中含有用于與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合的抗體或者抗原結(jié)合區(qū)域序列。例如可以在噬菌體中制備這樣的文庫(kù)，將其作為蛋白或者肽與噬菌體的外殼蛋白發(fā)生融合，其中所述的外殼蛋白在組合的噬菌體顆粒表面進(jìn)行表達(dá)，并且在所述的噬菌體顆并立中含有所述的編碼DNA的序列(即，"噬菌體展示文庫(kù)")。本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體包括，例如，下述表2中所示的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR),表3中所示的輕鏈互^卜決定區(qū)i或，以及它們的組合。表2,來(lái)自于與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合并且對(duì)其進(jìn)行中和的抗體克隆的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域序列<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表3.來(lái)自于與干擾素誘導(dǎo)蛋白-IO進(jìn)行結(jié)合并且對(duì)其進(jìn)行中和的抗體克隆的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域序列_輕—鏈互補(bǔ)決定區(qū)域3克隆ID^!i互補(bǔ)決定區(qū)域l輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域2N!-卿1CF1N1R3P4—C7CF1H1R3P3—G11CF1A11F13P3一F3CF1H1R3P4—B5CC21R3P1—F1CC21R3P1—B9CB21R3P3一E5CC21R3P1—H6CC21R3P5—C5CB1R3P4一D3CB2B2P4—C3CC21R3P4一F4CC21R3P1一ClaCC21FI3P3一C1CC21R3P1—E7CE7C1R3H8—CB21R3P1一F1ClC21R3P1一A2GB21R3P6—G7TGSGGS......IASNYVQ(SEQNOB)TGSGGS......工DRNYV((SEQNO16)TGSGGS……IDRNYVQ(SEQNOIS)TGSGGS......IEHRNYVQ(SEQNOIS)TGSGGS......IDKWYVQ<SEQNO16)TGSGGS......IDRNWQ(SEQNO16)QGDS........LTSYYAS(SEQNO141)Td!SSGS......工ASNYVQ(SEQNO133)GGDN........IGRKSVH(SEQ.NO98)GGSS........IESKSVH(SEQNO119)QGDS........LRSYYAS(SEQNO37)SGSSSN......工GSNTVN(SEQNO47>GGNN........工GDKSVQ(SEQNO112)GGNN........工GSRSVH<SEQNO79)GGNN........IGSKSVH(SEQMO106)SGSSSW......工GSNTVN(SEQNO47)SGSSSN......工GSNTVNISEQNO47)QGDS........IiRSYYAS(SEQNO37)SGSSSN......工GSDTVN《SEQNO71)SGSSSN......工GSNTVN(SEQNO47)_ED.....《-S￡QNOED.....(SEQNOED，…，，(SEQNOED.....(SEQNOEiD.....(SEQNOED.....(SEQMOGN.....(S印NOe:d.....(SEQNODD.....(SEQNOKD.....(SEQNOGK.....(SEQNONN.....(SEQNODD.....(SEQNOTO.....(SEQNOYD,…'(SEQ恥TN.....(SEQNOTN.....《SEQ加.....<SEQNONN.....(SEQNONN.....(SEQNONQRPS9)NQRPS9)NQRPS9)MQRPS'"NQRPS9)NQ沃PS3)DNRPS"2)DQ鵬58)99)SNRPS120》NNRPS38)DQRPS在8)SD妙S113)SDRPS80)SDRPS80)89)恥RPS89》NNRPS38>3STQRPS72》DQRPS48)QSYDPLPV........WV(SEQNO10)QSYDPLPV,......WV(SEQNO10)QSYDPIiPV........WV(SEQNO10)QSYDS工NL,......WV(S抑NO29》Q(chēng)SYVETPE........WVQSYDSINIj........WV(SEQNO29)GSRDSSGYQ.......W(SEQNO143)QSYVSSK.........WV(SEQNO59)QVWDSSIDHS......WV(SEQNO100)QVWDSSTG........W(SEQNONSRDSSGNH.......W《SEQNO39)ASWDDSLNG.......RV(SEQNO49)QVWDSSSDHPE.....W(SEQNO114)QVWOTSSGH.,.....YV<SEQNO81)QVWDSSSDH.......W(SEQNO107)AAWDDSLNGN......W(SEQNO90》AAWDDSSEPR......W(SEQ加126)NSRDSSGNH,,____VL(SEQ加工58>AAWDDSLNG.......I*V(SEQNO73)ASWDDSLNG，…'….RV(SEQNO49>_一種范例性的人類(lèi)干護(hù)G素i秀導(dǎo)蛋白-lO單克隆抗體是這里所描述的NI-0801抗體。如下文中所示，所述的NI-0801抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列2)以及輕4連可變區(qū)域(序列3),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列1所示的核酸序列進(jìn)^亍編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列4所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>NI-0801重4連可變區(qū)域的核酸序列GTCTCGAGT(序列1)>NI-0801重4連可變區(qū)i或的氨基酸序列(序列2)>NI-0801輕鏈可變區(qū)纟或的核酸序列>NI-0801輕《連可變區(qū)i或的氨基酸序歹'JRFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYDPLPVWVFGGGTKLTVL(序歹寸4)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)^:康禾口人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)J文府出片反局))。所述的NI-0801抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序歹'J:NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKYYADSVKG(序列6);以及LRDNAEYTDY(序列7)。所述的NI-0801抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列TGSGGSIASNYVQ(序歹'J8);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDPLPVWV(序歹'J10)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CF1N1R3P4_C7("C7")抗體。如下文中所示，所述的C7抗體包括重鏈可變區(qū)域(序歹'j12)以及輕鏈可變區(qū)域(序列14),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列l(wèi)l所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列13所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>CF1N1R3P4C7重鏈可變區(qū)域的核酸序列TCTCGAGTG(序歹'J11)>CF1N1R3P4C7重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列S(序列12)>CF1N1R3P4C7輕鏈可變區(qū)域的核酸序列CCGGTGTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTA(序歹'J13)>CF1N1R3P4C7輕《連可變區(qū)域的氨基酸序列18包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)i或(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康禾口人類(lèi)月良務(wù)吾卩)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)3文府出片反局))。所述的C7抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNAEYTDY(序列7)。所述的C7抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDPLPVWV(序歹'J10)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CF1H1R3P3—Gil("Gil")抗體。如下文中所示，所述的Gil抗體包括重4連可變區(qū)域(序歹'J18)以及輕鏈可變區(qū)域(序列20)，其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列17所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕《連可變區(qū)域是由如序列19所示的核酸序列進(jìn)4于編》馬的。>CF1H1R3P3Gll重鏈可變區(qū)域的核酸序列GTCTCGAGT(序歹'J17)>CF1H1R3P3Gll重《連可變區(qū)域的氨基酸序列ADSVKGR—FTISRDNSIANTLYLOMNSLRAEDTAVYYCAKLRDNGE.YLDYWGOGTLVTVSS(序列18)>CF1H1R3P3Gil輕《連可變區(qū)域的核酸序歹'jCCGGTGTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTA(序列19)>CF1H1R3P3Gil輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序歹寸包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)4建康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出片反局))。所述的Gil抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNGEYLDY(序列21)。所述的Gil4元體的輕《連互4卜決定區(qū):t或具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDPLPVWV(序歹'J10)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CF1H1R3P4—B5("B5")抗體。如下文中所示，所述的B5抗體包4舌重《連可變區(qū)i或(序列18)以及輕鏈可變區(qū)域(序列20)，其中所述的重《連可變區(qū)域是由如序列17所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列19所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>CF1H1R3P4B5重鏈可變區(qū)域的核酸序列GTCTCGAGT(序歹'J17)>CF1H1R3P4B5重《連可變區(qū)域的氨基酸序列ADSVKGRFTISRDNSIANTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAKLRDNGEYLDYWG(5GTLVTVSS(序列18)>CF1H1R3P4B5輕鏈可變區(qū)域的核酸序列CCTGAGTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTCACCGTCCTAG(序歹'J22)>CF1H1R3P4B5輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列RFSGSIDSSSNSASLTISGLKTEDEADYYCQSYVETPEWVFGGGTKLTVL(序歹'J23)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自'然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)Y建康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)iE支府出X反局))。所述的B5抗體的重《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列'.NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNGEYLDY(序列21)。所述的B5抗體的輕《連互誶卜決定區(qū)i或具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYVETPEWV(序歹'J24)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CF1A11R3P3—F3("F3")#元體。3口下文中所示，所述的F34元體包4舌重《連可變區(qū)i或(序列18)以及4至鏈可變區(qū)i或(序列28)，其中所述的重《連可變區(qū)域是由如序列17所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列27所示的核酸序列進(jìn)4于編》馬的。>CF1A11R3P3F3重《連可變區(qū)域的核酸序列GTCTCGAGT(序列17)22>CF1A11R3P3F3重《連可變區(qū)i成的氨基酸序列(序列18)>CF1A11R3P3F3輕《連可變區(qū)域的核酸序列ATCTTTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGG(序歹'J27)>CF1A11R3P3F3輕《連可變區(qū)域的氨基酸序歹ll包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)#1康和人類(lèi)月l務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)J支府出片反局))。所述的F3抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下迷序列NSGIH(序歹'J5);VISYDGSNKFYADSVKG(序歹'J15);以及LRDNGEYLDY(序列21)。所述的F3抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹'J9);以及QSYDSINLWV(序歹'J29)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CB1R3P4_D3("D3")抗體。如下文中所示，所述的D3抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列31)以及輕鏈可變區(qū)域(序列33)，其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列30所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列32所示的核酸序列進(jìn)4亍編；馬的。>CB1R3P4D3重鏈可變區(qū)域的核酸序列CCGTCTCGAGT(序歹'J30)>CB1R3P4D3重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列VSS(序歹ij31)>CB1R3P4D3輕鏈可變區(qū)域的核酸序列GGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序列32)>CB1R3P4D3輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列SGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGNHWFGGGTKLTVL(序歹'J33)24包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)1"建康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出版局))。所述的D3抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序歹'J:SYGMH(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序列35);以及AGYSTDWHPDY(序列36)。所述的D3抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列QGDSLRSYYAS(序歹'J37);GKNNRPS(序歹'J38);以及NSRDSSGNHVV(序列39)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CB2R2P4—C3("C3")抗體。如下文中所示，所述的C3抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列41)以及輕鏈可變區(qū)域(序列43),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列40所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕《連可變區(qū)i或是由如序列42所示的核S臾序列進(jìn)4亍編》馬的。>CB2R2P4C3重鏈可變區(qū)域的核酸序列CCACGGTCACCGTCTCGAGT(序歹'J40)25>CB2R2P4C3重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列SS(序歹'J41)>CB2R2P4C3輕《連可變區(qū)域的核酸序列ATGGTCGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAG(序歹'J42)>CB2R2P4C3輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列FSGSKSGTSGSLVISGLQSEDEADYYCASWDDSLNGRVFGGGTKLTVL(序列43)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)#1康和人類(lèi)月l務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)j!文府出片反局))。所述的C3抗體的重《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列TSGMSVI(序歹'J44);RIDSDDEKHYNTSLKT(序列45);以及LRAGSGPYVFDS(序列46)。所述的C3抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹'J47);NNDQRPS(序歹'j48);以及ASWDDSLNGRV(序歹'J49)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CB21R3P1—Fl("CB_F1")抗體。如下文中所示，所述的CB—Fl抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列51)以及輕鏈可變區(qū)域(序列145)，其中所述的重《連可變區(qū)域是由如序列50所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列144所示的核酸序列進(jìn)4亍編；馬的。>CB21R3P1Fl重鏈可變區(qū)域的核酸序列ACCCTGGTCACCGTCTCGAGT(序歹'J50)〉CB21R3P1Fl重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列YADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQ]ASLRAEDTAIYYCARVMGTDPHSYYYMDVWGKGTLVTVSS(序歹ij51)>CB21R3P1Fl輕《連可變區(qū)域的核酸序歹'JGCTTTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序列144)>CB21R3P1Fl輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列SGSSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCNSRDSSGNHVLFGGGTKLTVL(序歹']145)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五W反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)康,口人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)iE文府出片反局))。所述的CB—Fl抗體的重鏈互#卜決定區(qū)i或具有下述序歹'J:SYGHM(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序歹'J35);以及VMGTDPHSYYYMDV(序列52)。所述的CB—Fl抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列QGDSLRSYYAS(序歹ll37);GK麗RPS(序歹'J38);以及NSRDSSGNHVL(序歹'j39)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CB21R3P3—E5("E5")抗體。如下文中所示，所述的E5抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列54)以及輕鏈可變區(qū)域(序列56)，其中所述的重《連可變區(qū)域是由如序列53所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕《連可變區(qū)域是由如序列55所示的核酸序列進(jìn)4亍編》馬的。>CB21R3P3E5重鏈可變區(qū)域的核酸序列TCGAGT(序歹ij53)28>CB21R3P3E5重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列(序列54)>CB21R3P3E5輕《連可變區(qū)域的核酸序列AAGTGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序歹'J55)>CB21R3P3E5輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序歹'JRFSGSIDSSSNSASLTISGLRTEDEADYYCQSYVSSKWVFGGGTKLTVL(序歹'J55)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USD印artmentofHealthandHumanServices(美國(guó)#1康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)iE支府出X反局))。所述的E54元體的重《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SYGHM(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序歹'J35);以及APDGHQLDY(序列57)。所述的E5抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列TGSSGSIASNYVQ(序歹'J133);EDDQRPS(序歹'J58);以及QSYVSSKWV(序歹'J59)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CB21R3P6_G7("G7")抗體。如下文中所示，所述的G7抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列61)以及輕鏈可變區(qū)域(序列63)，其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列60所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列62所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>CB21R3P6G7重鏈可變區(qū)域的核酸序歹'j歹'J60)>CB21R3P6G7重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列MDVWGQGTLVTVSS(序列61)〉CB21R3P6G7輕鏈可變區(qū)域的核酸序列ATGGTCGGGTGTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序列62)〉CB21R3P6G7輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列FSGSKSGTSGSLVISGLQSEDEADYYCASWDDSLNGRVFGGGTKLTVL(序列63)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)Y建康禾口人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)if夂府出jf反局))。所述的G7抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SFSIT(序歹ij64);EITPMFGIANYAQKFOG(序列65);以及DGRFDVSDLLTDKPKVTINYNGMDV(序歹'J66)。所述的G7抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹'J47);NNDQRPS(序歹'J48);以及ASWDDSLNGRV(序列49)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P1—A2("A2")抗體。如下文中所示，所述的A2抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列68)以及輕鏈可變區(qū)域(序列70),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列67所示的核fi吏序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列69所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>CC21R3P1A2重鏈可變區(qū)域的核酸序列GCCAGGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGT(序列67)31>CC21R3P1A2重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列GTLVTVSS(序歹'J68)〉CC21R3P1A2輕鏈可變區(qū)域的核酸序列GGTCTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序歹'J69)>CC21R3P1A2輕《連可變區(qū)域的氨基酸序歹'J包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出版局))。所述的A2抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序歹'J:DTYMN(序歹'J127);SIYSDDSTYYADSVKG(序歹'J128);以及DKEYVTSTGGAYYYFYYMDV(序列129)。所述的A2抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列SGSSSNIGSDTVN(序列71);NNNQRPS(序歹'J72);以及AAWDDSLNGLV(序歹'J73)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P1_C1A("Cla")抗體。如下文中所示，所述的Cla抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列75)以及輕鏈可變區(qū)域(序列77)，其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列74所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列76所示的核S臾序列進(jìn)4亍編；馬的。>CC21R3P1C1A重鏈可變區(qū)域的核酸序列GT(序列74)>CC21R3P1C1A重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列(序歹'J75)>CC21R3P1C1A輕鏈可變區(qū)域的核酸序列TCTTCGGAACTGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序列76)>CC21R3P1C1A輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列GSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDTSSGHYVFGTGTKVTVL(序列77)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)i或(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康禾口人類(lèi)月艮務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出版局))。所述的Cla抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SYGMH(序歹'J34);VISYDGSNKYYADSVKG(序列6);以及DEFDAFDI(序列78)。所述的Cla抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序歹寸GGNNIGSRSVH(序歹'J79);YDSDRPS(序歹'J80);以及QVWDTSSGHYV(序列81)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P3_C1("CI")抗體。如下文中所示，所述的CI抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列102)以及輕鏈可變區(qū)域(序列104)，其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列101所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕《連可變區(qū)i或是由如序列103所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>CC21R3P3Cl重鏈可變區(qū)域的核酸序列CACCGTCTCGAGT(序歹'J101)>CC21R3P3Cl重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列200880013529.XVSS(序歹d102)〉CC21R3P3Cl輕鏈可變區(qū)域的核酸序列GGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序歹'J103)>CC21R3P3Cl輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序歹'JSGSNSGNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSSSDHWFGGGTKVTVL(序列104)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat,EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)#:康,口人類(lèi)月良務(wù)吾卩)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)j!支府出片反局))。所述的Cl抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SYGMH(序歹'J34);VISYDGSIKYYADSVKG(序歹'J35);以及DWGFSGSLTF(序列105)。所述的Cl抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列GGNNIGSKSVH(序歹'106);YDSDRPS(序歹'J80);以及QVWDSSSDHVV(序歹'J107)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P1—E7("E7")抗體。如下文中所示，所述的E7抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列83)以及輕鏈可變區(qū)域(序列85),其中所述的重《連可變區(qū)域是由如序列82所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列84所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的。>CC21R3P1E7重鏈可變區(qū)域的核酸序列TCGAGT(序列82)>CC21R3P1E7重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列(序歹寸83)>CC21R3P1E7輕鏈可變區(qū)域的核酸序列ATGGTAATGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTA(序歹'J84)>CC21R3P1E7輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列RFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSLNGNWFGGGTKVTVL(序列85)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出版局))。所述的E7抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列TYGMH(序歹'J86);VISYDGGTKYYADSVKG(序歹'J87);以及DLGDLPPGLDY(序列88)。所述的E7抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹l)47);T麗QRPS(序歹'J89);以及AAWDDSLNGNVV(序列90)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P1_H6("H6")抗體。如下文中所示，所述的H6抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列92)以及輕鏈可變區(qū)域(序列94),其中所述的重《連可變區(qū)域是由如序列91所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列93所示的核酸序列進(jìn)4亍編；馬的。>CC21R3P1H6重鏈可變區(qū)域的核酸序列GAGT(序歹ij91)>CC21R3P1H6重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列(序列92)>CC21R3P1H6輕鏈可變區(qū)域的核酸序列>CC21R3P1H6輕《連可變區(qū)域的氨基酸序列包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康詳口人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出版局))。所述的H6抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列NYGMH(序歹'J95);VISYDGSNRYYADSVKG(序歹'J96);以及DAGGPLDY(序歹寸97)。所述的H6抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列GGDNIGRKSVH(序歹'J98);DDTDRPS(序歹'J99);以及QVWDSSIDHSWV(序列100)。一種范例性的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P4—F4("F4")4元體。3口下文中戶(hù)斤示，所述的F4抗體包括重4連可變區(qū)域(序列109)以及輕鏈可變區(qū)域(序列111),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列108所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列110所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。38>CC21R3P4F4重鏈可變區(qū)域的核酸序列GAGT(序歹'J108)〉CC21R3P4F4重《連可變區(qū)域的氨基酸序列(序歹'J109)>CC21R3P4F4輕《連可變區(qū)域的核酸序列>CC21R3P4F4輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列SGSYSRNTATLTISRVEAGDEADYYCQVWDSSSDHPEWFGGGTKLTVL(序列111)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康升口人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)政府出X反局))。所述的F4抗體的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列NYGMH(序歹'J95);VISYDGSNRYYADSVKG(序歹'J96);以及DAGGPLDY(序列97)。所述的F4抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列GG麗IGDKSVQ(序歹'j112);DDSDRPS(序列113);以及QVWDSSSDHPEVV(序列114)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P5—C5("C5")抗體。如下文中所示，所述的C5抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列116)以及輕鏈可變區(qū)域(序列118),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列115所示的核酸序列進(jìn)4亍編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列117所示的核酸序列進(jìn)4亍編；馬的。>CC21R3P5C5重《連可變區(qū)域的核酸序列CACCGTCTCGAGT(序列115)>CC21R3P5C5重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列VSS(序列116)>CC21R3P5C5輕鏈可變區(qū)域的核酸序列40TATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序歹'J117)>CC21R3P5C5輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列SGSNSGNTATLTIGRAQAGDEADYYCQVWDSSTGWFGGGTKLTVL(序歹'J118)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自'然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)<建康和人類(lèi)月l務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)讓文府出片反局))。所述的C5抗體的重《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列TYGMH(序歹'J86);VISYDGGTKYYADSVKG(序歹'J87);以及DLGDLPPGLDY(序列88)。所述的C5抗體的輕《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列GGSSIESKSVH(序歹'J119);KDSDRPS(序歹'J120);以及QVWDSSTGVV(序歹'J121)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CE7C1R3H8_J9("J9")抗體。如下文中所示，所述的J9抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列123)以及輕鏈可變區(qū)域(序列125),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列122所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列124所示的核酸序列進(jìn)4亍編；馬的。>CE7C1R3H8J9重《連可變區(qū)域的核酸序歹'JCACCGTCTCGAGT(序列122)〉CE7C1R3H8J9重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列VSS(序歹寸123)>CE7C1R3H8J9輕鏈可變區(qū)域的核酸序列(序歹'J124)>CE7C1R3H8J9輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列RFSGSKSGTSASLAISGLQSEDEADYYCAAWDDSSEPRWFGGGTKVTVL(序歹'J125)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以《自,然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五X(qián)反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)#:康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)iJ文府出片反局))。所述的J94元體的重4連互^卜決定區(qū)i或具有下述序列TYGMH(序歹'J86);VISYDGGTKYYADSVKG(序列87);以及DLGDLPPGLDY(序列88)。所述的J9抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SGSSSNIGSNTVN(序歹'47);TNNQRPS(序歹'J89);以及AAWDDSSEPRVV(序歹'J126)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P1—B9("B9")抗體。如下文中所示，所述的B9抗體包括重《連可變區(qū)域(序列137)以及輕鏈可變區(qū)域(序列139),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列136所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列138所示的核酸序列進(jìn)4亍編；馬的。>CC21R3P1B9重鏈可變區(qū)域的核酸序列ACCGTCTCGAGT(序歹'J136)>CC21R3P1B9重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列VSS(序列137)>CC21R3P1B9輕鏈可變區(qū)域的核酸序列GGTGTTCGGCGCAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(序歹'J138)>CC21R3P1B9輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列SGSNSGNTASLTITGAQAEDAADYYCGSRDSSGYQWFGAGTKLTVL(序歹'J139)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五版，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)iE支府出片反局))。所述的B94元體的重《連互補(bǔ)決定區(qū)i或具有下述序列SYGMH(序歹'J34);VISYDGSNKYYADSVKG(序歹'J6);以及DGGWYDWYFDL(序列140)。所述的B9抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列QGDSLTSYYAS(序歹'J141);GNDNRPS(序歹'J142);以及GSRDSSGYQVV(序歹'J143)。一種范例性的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體是這里所描述的CC21R3P1—Fl("CC—Fl")抗體。如下文中所示，所述的CC_F1抗體包括重鏈可變區(qū)域(序列26)以及輕鏈可變區(qū)域(序列28),其中所述的重鏈可變區(qū)域是由如序列25所示的核酸序列進(jìn)行編碼的，而所述的輕鏈可變區(qū)域是由如序列27所示的核酸序列進(jìn)行編碼的。>CC21R3P1Fl重鏈可變區(qū)域的核酸序列CGTCTCGAGT(序歹'J25)>CC21R3P1Fl重鏈可變區(qū)域的氨基酸序列(序列26)>CC21R3P1Fl輕《連可變區(qū)域的核酸序列ATCTTTGGGTTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTCACCGTCCTAGG(序列27)>CC21R3P1Fl輕鏈可變區(qū)域的氨基酸序列RFSGSIDSSSNSASLTISGLRTDDEADYYCQSYDSINLWVFGGGTKVTVL(序列28)包含所述氨基酸的互補(bǔ)決定區(qū)域(CDR)如Chothia等人以及E.A.Kabat等人所定義(參見(jiàn)ChothiaC等人于1989年在Nature《自然》342:877-883中發(fā)表的文章；Kabat，EA等人于1991年發(fā)表的文章SequencesofProteinofimmunologicalinterest《具有免疫性興趣的蛋白序列》，第五片反，USDepartmentofHealthandHumanServices(美國(guó)1"建康和人類(lèi)月良務(wù)部)，USGovernmentPrintingOffice(美國(guó)jJ支府出片反局))。所述的CC—Fl#元體的重《連互4卜決定區(qū)i或具有下述序列NSGIH(序歹'j5);VISYDGSNKFYADSVKG(序列15);以及DGSESEYLDY(序列132)。所述的CC—Fl抗體的輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)域具有下述序列TGSGGSIDSNYVQ(序歹'J16);EDNQRPS(序歹寸9);以及QSYDSINLWV(序歹'J29)。45本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體還包括這樣的抗體所述的抗體包4舌重鏈可變氨基酸序列和/或輕鏈可變氨基酸序列，其中所述的重《連可變氨基酸序列與序列2,12，18，26,31，41，51,54,61，68，75,83，92，102,109，116，123或者137的氨基酸序歹'J具有至少90%，92%,95%,97%,98%，99%或者更高的同一性，所述的輕鏈可變氨基酸序列與序列(SEQIDNO)4,14,23，28,33，43，56,63,70，77，85,94,104，111，118，125,139或者145的氨基酸序列具有至少90%,92%,95%,97%,98%,99%或者更高的同一'性?；蛘?，所述的單克隆抗體是一種在與NI-0801,C7，Gll，B5,F3，CC—Fl，B9，E5,H6,C5,D3,C3,F4,Cla，Cl,E7，J9,CB—Fl，A2和/或G7相同的表^f立上進(jìn)4亍結(jié)合的^t體。除非另外定義，在本發(fā)明中相關(guān)使用的科學(xué)術(shù)語(yǔ)以及技術(shù)術(shù)語(yǔ)應(yīng)當(dāng)具有本領(lǐng)i或普通^支術(shù)人員通常所理解的含義。進(jìn)一步的，除非上下文中另有需求，單凄史形式應(yīng)當(dāng)包4舌復(fù)凄t并且復(fù)凄t形式應(yīng)當(dāng)包括單數(shù)。一般而言，在這里所描述的用于細(xì)胞以及組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、以及蛋白和寡核苷酸及多核香酸化學(xué)以及雜交的術(shù)語(yǔ)以及^支術(shù)是本領(lǐng)域熟知并且普遍使用的。利用標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)進(jìn)行DNA的重組、寡核苦酸的合成、以及組織的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化(例如，電穿孔，脂質(zhì)轉(zhuǎn)染)。依照制造商的i兌明書(shū)完成酶反應(yīng)以及純化技術(shù)，或者按照本領(lǐng)域通常采用的方法或者按照本發(fā)明所描述的方法完成沒(méi)反應(yīng)以及純化技術(shù)。前述的技術(shù)以及操作通常依照本領(lǐng)域熟知的傳統(tǒng)方法來(lái)完成，并且依照本說(shuō)明書(shū)中所引用的以及所討論的各種一般性參考文獻(xiàn)以及更加具體的參考文獻(xiàn)所描述的方法來(lái)完成。參見(jiàn)，例3口，Sambrook等人的MolecularCloning:ALaboratoryManual《分子克隆實(shí)-險(xiǎn)室指南》(第二片反，ColdSpringHarborLaboratoryPress;令7良港實(shí)馬全室出片反3土，ColdSpring))。在這里所描述的用于分析化學(xué)、合成有機(jī)化學(xué)、以及藥物化學(xué)和制藥化學(xué)中的術(shù)語(yǔ)以及實(shí)驗(yàn)室操作和技術(shù)是本領(lǐng)域熟知并且普遍使用的。利用標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)進(jìn)行化學(xué)合成，化學(xué)分析，藥物的制備，配制，以及遞送，以及對(duì)患者進(jìn)4于的治療。正如在本發(fā)明公開(kāi)中所使用的，除非另外指明，下述術(shù)語(yǔ)應(yīng)當(dāng)4皮理解為具有下述的含義這里所^^吏用的所述術(shù)語(yǔ)"抗體，，指的是免疫^(guò)求蛋白分子以及免疫球蛋白(Ig)分子的免疫活性部分，即，含有抗原結(jié)合位點(diǎn)的分子，所述的抗原結(jié)合位點(diǎn)能夠特異性的結(jié)合(與……發(fā)生免疫反應(yīng))抗原。這樣的抗體包括，〗旦不局限于，多克隆，單克隆，嵌合，單鏈，F(xiàn)ab，F(xiàn)ab,以及F(ab，)2片段，以及Fab表達(dá)文庫(kù)。"特異性的結(jié)合"或者"與……發(fā)生免疫反應(yīng)"指的是所述的抗體與所述的目標(biāo)抗原的或者多個(gè)抗原決定簇發(fā)生反應(yīng)，而不與其他多肽發(fā)生反應(yīng)(即，結(jié)合)，或者以極低的親和性(Kd>10—6)與其他多肽發(fā)生結(jié)合。已知所述的基本抗體結(jié)構(gòu)單元包括四聚體。每個(gè)四聚體是由兩對(duì)相同的多肽鏈對(duì)組成的，每對(duì)具有"輕"鏈(大約25kDa)以及"重"鏈(大約50-70kDa)。每條鏈的氨基末端區(qū)域包括具有大約100至110或者更多個(gè)氨基酸的可變區(qū)域，主要負(fù)責(zé)進(jìn)行抗原的識(shí)別。每條鏈的羧基末端區(qū)域定義了恒定區(qū)域，主要負(fù)責(zé)效應(yīng)子功能。人類(lèi)的輕鏈j皮歸類(lèi)為K輕鏈以及人輕鏈。重鏈一皮歸類(lèi)為p，S,y，a,或者s，并且分別將所述的同型抗體定義為免疫J求蛋白M,免疫5求蛋白D，免疫5求蛋白A,免疫^(guò)求蛋白G以及免疫^(guò)求蛋白E。在輕《連以及重《連中，所述的可變區(qū)i或與恒定區(qū)域通過(guò)"J"區(qū)i或相互連^妄，其中所述的"J"區(qū)i或具有大約12或者更多個(gè)氨基酸，而所述的重鏈還包括"D"區(qū)域，所述的"D"區(qū)i或具有大約10多個(gè)氨基酸。通?？梢詤⒁?jiàn)，F(xiàn)undamentalImmunology《基礎(chǔ)免疫學(xué)》第7章(Paul，W.編輯，第二版，RavenPress,N.Y.紐約(1989年))。每個(gè)輕鏈/重4連乂于的可變區(qū)i或構(gòu)成了所述的抗體結(jié)合^f立點(diǎn)。這里所4吏用的所述術(shù)語(yǔ)"單克隆抗體"(MAb)或者"單克隆抗體組合物"指的是一類(lèi)抗體分子，所述的抗體分子僅含有分子種類(lèi)的抗體分子，由唯一的輕鏈基因產(chǎn)物以及^奉一的重《連基因產(chǎn)物構(gòu)成。具體的，在這類(lèi)分子的全部分子中，所述的單克隆抗體的互補(bǔ)決定區(qū)i或(CDR)是相同的。單克隆抗體含有抗原結(jié)合位點(diǎn)，所述的抗原結(jié)合位點(diǎn)能夠與一種特定的抗原表位發(fā)生免疫反應(yīng)，它纟皮定義為對(duì)其具有唯一的結(jié)合親和性。一般而言，從人類(lèi)中獲得的抗體分子涉及免疫球蛋白G,免疫球蛋白M,免疫球蛋白A，免疫球蛋白E以及免疫球蛋白D類(lèi)別中的4壬意，它們通過(guò)存在于分子中的重《連的性質(zhì)而相互區(qū)分。某些類(lèi)別還含有亞類(lèi)，例如，免疫J求蛋白Gl5免疫^(guò)求蛋白G2,以及其4也。此外，在人類(lèi)中，所述的輕鏈可能是K輕鏈或者是X輕鏈。所述的術(shù)語(yǔ)"抗原結(jié)合位點(diǎn)"或者"結(jié)合部分"指的是參與進(jìn)行抗原結(jié)合的所述的免疫球蛋白分子的部分。所述的抗原結(jié)合位點(diǎn)是由所述重《連("H")以及輕鏈("L，，)的N-末端可變區(qū)域("V")上的氨基酸殘基形成的。在已知^皮稱(chēng)為"骨架區(qū)域"或者"FR"的凈交為保守的側(cè)向延伸中插入三個(gè)存在于所述的重鏈以及輕鏈的可變區(qū)域中的高度分歧的延伸，其中所述的高度分歧的延伸被稱(chēng)為"超變區(qū)域"。因此，所述的術(shù)語(yǔ)"FR"指的是天然發(fā)現(xiàn)的存在于免疫^(guò)求蛋白中的超變區(qū)域中的氨基酸序列，或者鄰近所述的超變區(qū)i或的氨基酸序列。在抗體分子中，輕鏈上的所述的三個(gè)超變區(qū)i或與重鏈上的所述的三個(gè)超變區(qū)域在三維空間內(nèi)依48次排列，乂人而形成抗原結(jié)合表面。所述的抗原結(jié)合表面互補(bǔ)于一種結(jié)合抗原的所述三維表面，并且每個(gè)重鏈以及輕鏈上的所述的三個(gè)超變區(qū)域:帔稱(chēng)為"互補(bǔ)決定區(qū)域"或者"CDR"。所述的每個(gè)區(qū)i或的氛基酉臾分布與Kabat在SequencesofProteinsofImmunologicalInterest《具有免疫學(xué)興趣的蛋白序列》(NationalInstitutesofHealth美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院，Bethesda,Md.(1987年以及1991年))中定義的相一致，或者與Chothia&Lesk于1987年在J.Mol.Biol.《分子生物學(xué)雜志》196:901-917中發(fā)表的文章中所定義的一致，或者與Chothia等人于1989年在Nature《自然》342:878-883中發(fā)表的文章中所定義的一至丈。這里所-使用的所述術(shù)語(yǔ)"表位"包括能夠與免疫J求蛋白，單鏈可變區(qū)域抗體片,殳(scFv),或者T細(xì)月包受體發(fā)生特異性結(jié)合的任意的蛋白決定簇。所述的術(shù)語(yǔ)"表位"包括能夠與免疫球蛋白或者T細(xì)胞受體發(fā)生特異性結(jié)合的任意的蛋白決定簇。表位決定簇通常是由分子的化學(xué)活性表面基團(tuán)構(gòu)成的，例如氨基酸或者并唐側(cè)《連，并且通常具有特異性的三維結(jié)構(gòu)特性，以及特異性的電荷特性。當(dāng)所述的解離常數(shù)《1微摩時(shí)，抗體被認(rèn)為能夠特異性的結(jié)合抗原，例如，《100納摩，優(yōu)選<10納摩，并且更加優(yōu)選<200匹摩。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"免疫結(jié)合"以及"免疫結(jié)合性質(zhì)"指的是非共價(jià)的反應(yīng)類(lèi)型，它發(fā)生在免疫球蛋白分子與抗原之間，其中所述的免疫球蛋白分子對(duì)所述的抗原具有特異性。所述的免疫結(jié)合反應(yīng)的強(qiáng)度或者親和性可以通過(guò)所述反應(yīng)的解離常數(shù)(Kd)來(lái)表達(dá)，其中較小的解離常數(shù)代表較高的親和性。使用本領(lǐng)域熟知的方法對(duì)經(jīng)選擇的多肽的免疫結(jié)合性質(zhì)進(jìn)行量化。這類(lèi)方法中的一種方法需要測(cè)量抗原結(jié)合位點(diǎn)/抗原復(fù)合體的形成速率以及解離速率，其中這些速率取決于所述的復(fù)合體組成物(partner)的濃度，所述反應(yīng)的親和性，以及對(duì)兩個(gè)方向上的速率產(chǎn)生相等的影響的幾何學(xué)參凄t。因此，通過(guò)計(jì)算所述的濃度以及結(jié)合和解離的實(shí)際速率，可以確定所述的"結(jié)合速率常tt"(K。n)以及所述的"解離速率常數(shù)"(K。ff)。(參見(jiàn)Nature《自然》1993年361:186-87中發(fā)表的文章)。所述的解離速率常數(shù)/結(jié)合速率常ft的比例能夠消除不涉及親和性的全部參ft,并且等于所述的解離常凄tKd(通?？蓞⒁?jiàn)Davies等人于1990年在AnnualRevBiochem《生物4匕學(xué)年鑒》59:439-473中發(fā)表的文章)。當(dāng)所述的平4軒結(jié)合常凄t(Kd)《l孩支摩時(shí)，本發(fā)明所述的抗體一皮i人為能夠與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10表位發(fā)生特異性的結(jié)合，例如，<100納摩，優(yōu)選《10納摩，并且更加優(yōu)選《1納摩，上述IW直是利用例如;改射性配位體結(jié)合檢測(cè)或者本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的類(lèi)似檢測(cè)這樣的4全測(cè)方法測(cè)量得到的。例如，本發(fā)明提供的所述人類(lèi)干護(hù)G素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體表現(xiàn)出在大約<200匹摩至大約1匹摩的范圍之內(nèi)的解離常凄史。本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠認(rèn)識(shí)到，不需要過(guò)度的試驗(yàn)，就可能確定出一種人類(lèi)單克隆抗體是否與本發(fā)明所述的人類(lèi)單克隆抗體(例如，單克隆抗體NI-0801,C7，Gll,B5，F(xiàn)3，CB—Fl,B9,E5，H6，C5,D3，C3，F(xiàn)4，Cla，CI,E7,J9，CC_F1,A1或者G7)具有相同的特異性，這是通過(guò)確定前者是否阻止后者與一種干擾素誘導(dǎo)蛋白—10抗原多肽進(jìn)行結(jié)合來(lái)實(shí)現(xiàn)的。如果所述受試的人類(lèi)單克隆抗體與本發(fā)明所述的人類(lèi)單克隆抗體存在竟?fàn)?，所述的竟?fàn)幈憩F(xiàn)為本發(fā)明所述的人類(lèi)單克隆抗體的結(jié)合的減少，那么所述的兩種單克隆抗體與同樣的表位，或者高度相關(guān)的表位發(fā)生結(jié)合。確定一種人類(lèi)單克隆抗體是否具有本發(fā)明所述的人類(lèi)單克隆抗體所具有的特異性的另外一種方法是使用一種干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗原多肽對(duì)本發(fā)明所述的人類(lèi)單克隆抗體進(jìn)行預(yù)培養(yǎng)，其中本發(fā)明所述的人類(lèi)單克隆抗體對(duì)于所述的干擾50素誘導(dǎo)蛋白-10抗原多肽具有普通的反應(yīng)性，之后，加入受試的人類(lèi)單克隆抗體，乂人而確定所述受試的人類(lèi)單克隆抗體與所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗原多肽進(jìn)行結(jié)合的能力是否受到抑制。如果所述受試的人類(lèi)單克隆抗體受到抑制，那么它極有可能與本發(fā)明所述的單克隆抗體具有相同的或者功能等價(jià)的表位特異性。使用本領(lǐng)域已知的各種方法來(lái)制備直接作用于蛋白例如干擾素誘導(dǎo)蛋白-10蛋白的單克隆抗體，或者來(lái)制備針對(duì)例如干擾素誘導(dǎo)蛋白-10蛋白這樣的蛋白的衍生物、片段、類(lèi)似物、同系物或者直系同源物的單克隆抗體(參見(jiàn)，例如，Antibodies:ALaboratoryManual《4元體實(shí)-驗(yàn)室4旨南》，HarlowE,以及LaneD,1988年，ColdSpringHarborLaboratoryPress,,令7良港實(shí)馬企室出版社，ColdSpringHarbor冷泉港，NY，在此引入作為參考)。完全人類(lèi)抗體是這樣的抗體分子所述抗體分子的輕鏈以及重鏈的全部序列，包括所述的互補(bǔ)決定區(qū)域，均由人類(lèi)基因所產(chǎn)生。這樣的抗體在這里^皮稱(chēng)為"人類(lèi)抗體"或者"完全人類(lèi)抗體"。人類(lèi)單克隆抗體是通過(guò)4吏用例如在下文中#是供的實(shí)施例中所描述的方法來(lái)制備的。人類(lèi)單克隆抗體還可以通過(guò)4吏用三瘤體4支術(shù)；人類(lèi)B細(xì)J包雜交瘤才支術(shù)(參見(jiàn)Kozbor等人于1983年在ImmunolToday《當(dāng)今免疫學(xué)》4:72中發(fā)表的文章)；以及用于制備人類(lèi)單克隆抗體的EB病毒(EBV)雜交瘤技術(shù)(參見(jiàn)Cole等人于1985年在MONOCLONALANTIBODIESANDCANCERTHERAPY《單克隆抗體以及癌癥的治療》AlanR.Liss，Inc.,pp.77-96中發(fā)表的文章)來(lái)制備?？梢酝ㄟ^(guò)4吏用人類(lèi)雜交瘤(參見(jiàn)Cote等人于1983年在ProcNatlAcadSciUSA《美國(guó)科學(xué)院院刊》80:2026-2030中發(fā)表的文章)或者通過(guò)使用EB病毒體外轉(zhuǎn)化人類(lèi)B細(xì)胞的方法(參見(jiàn)Cole等人于1985年在MONOCLONALANTIBODIESANDCANCERTHERAPY《單克隆抗體以及癌癥的治療》AlanR.Liss,Inc.,pp.77-96中發(fā)表的文章)對(duì)人類(lèi)單克隆抗體進(jìn)行利用并且進(jìn)行制備。4吏用熟知的沖支術(shù)對(duì)抗體進(jìn)行純化，例如4吏用蛋白A或者蛋白G的親和色i普法。在此之后，或者可以選才奪的，可以將一種特異性的抗原或其表位固定于柱上，通過(guò)免疫親和色i普法對(duì)所述的免疫特異性抗體進(jìn)行純化，其中所述的特異性抗原是所述的免疫球蛋白所尋找的寧M立。對(duì)于免疫J求蛋白的純化由例如D.Wilkinson(TheScientist《牙牛學(xué)家》，由TheScientistInc.，卄牛學(xué)家有限7>司出版，PhiladelphiaPA,第14巻，第8期(2000年4月17曰)，pp.25-28)進(jìn)行過(guò)討論。期望對(duì)于本發(fā)明所述的抗體的效應(yīng)子功能進(jìn)^S奮飾，/人而增強(qiáng)，例如，所述抗體在治療免疫相關(guān)性疾病方面的功^:。例如，可以向所述的Fc區(qū)域中導(dǎo)入半胱氨酸殘基，從而允許在這一區(qū)域中形成鏈間二硫鍵。由此生成的所述的同型二聚抗體能夠具有改善的內(nèi)化能力和/或增加的補(bǔ)體介導(dǎo)的殺滅以及抗體依賴(lài)性的細(xì)胞毒作用(ADCC)。(參見(jiàn)Caron等人于1992年在J.ExpMed.《實(shí)馬全醫(yī)學(xué)雜志》176:1191-1195中發(fā)表的文章，以及Shopes于1992年在J.Imm腸l.《免疫學(xué)雜志》148:2918-2922中發(fā)表的文章)?？梢赃x才奪的，抗體可以被基因工程化，4吏其具有雙重的Fc區(qū)域，并且能夠因此具有增強(qiáng)的補(bǔ)體溶解以及抗體依賴(lài)性的細(xì)胞毒作用能力(參見(jiàn)Stevenson等人于1989年在Anti-CancerDrugDesign《:坑癌癥藥物的詔:計(jì)》3:219-230中發(fā)表的文章)。本發(fā)明還包括Fv,Fab,Fab,以及Fub，)2人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-IO片段，單鏈人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，雙特異性人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體以及人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體復(fù)共軛對(duì)酉己A凈勿。52雙特異性抗體是對(duì)于至少兩種不同的抗原具有結(jié)合特異性的抗體。在本發(fā)明的情況中，所述的結(jié)合特異性中的一種是針對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10。所述的第二個(gè)結(jié)合靶位是任意的其他抗原，并且有利的為一種細(xì)胞表面蛋白或者受體或者受體亞單位。用于制備雙特異性抗體的方法是本領(lǐng)域已知的。傳統(tǒng)意義上，雙特異性抗體的重組制備是以所述的兩個(gè)免疫;求蛋白重鏈/輕鏈對(duì)的共表達(dá)為基礎(chǔ)的，其中所述的兩個(gè)重鏈具有不同的特異性(參見(jiàn)Milstein以及Cuello于1983年在Nature《自然》305:537-539中發(fā)表的文章)。由于所述的免疫球蛋白重鏈以及輕鏈的隨才幾分西己，這些雜交瘤(quadromas)生成了十種不同的才元體分子的可能的混合物，其中只有一種具有所述正確的只又特異性結(jié)構(gòu)。對(duì)于所述的正確分子進(jìn)行的純化通常是通過(guò)親和色i普法步驟來(lái)完成的。類(lèi)似的才乘作在1993年5月13日/>開(kāi)的WO93/08829中以及Traunecker等人于1991年在EMBOJ.《歐洲分子生物學(xué)學(xué)會(huì)雜志》10:3655-3659中發(fā)表的文章中進(jìn)4亍了7>開(kāi)?？梢詫⒕哂兴龅哪繕?biāo)結(jié)合特異性的抗體可變區(qū)域(抗體-抗原結(jié)合位點(diǎn))融合到免疫球蛋白的恒定區(qū)域序列中。所述的融合優(yōu)選發(fā)生在免疫球蛋白的重鏈恒定區(qū)域中，包括所述的鉸鏈區(qū)域，重鏈恒定2(CH2)區(qū)域，以及重鏈恒定3(CH3)區(qū)域中的至少一部分。優(yōu)選具有所述的重鏈恒定區(qū)i或1(CH1)，其中所述的重鏈恒定區(qū)i或l中含有與輕《連結(jié)合所必需的^f立點(diǎn)，所述的4立點(diǎn)存在于至少一種融合區(qū)i或中。DNA編碼所述的免疫3求蛋白重鏈融合區(qū)域并且，如果需要的話，將所述的免疫J求蛋白輕鏈插入到單獨(dú)的表達(dá)載體中，并且共轉(zhuǎn)染至適當(dāng)?shù)乃拗饔胁艓左w中。用于產(chǎn)生雙特異性抗體的進(jìn)一步的細(xì)節(jié)可以參見(jiàn)，例如，Suresh等人于1986年在MethodsinEnzymology《酶學(xué)方法》121:210中發(fā)表的文章。用于產(chǎn)生雙特異性抗體的其他途徑在例如WO96/27011中進(jìn)行了描述，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。雙特異性抗體可以作為完全長(zhǎng)度的抗體或者抗體片段(例如，F(xiàn)ub，)2雙特異性抗體)來(lái)進(jìn)行制備。用于從抗體片段中產(chǎn)生雙特異性抗體的技術(shù)已經(jīng)在上述的文獻(xiàn)中進(jìn)行了描述。例如，可以使用化學(xué)連接的方式制備雙特異性抗體。參見(jiàn)，例如，Brennan等人于1985年在Science《科學(xué)》229:81中發(fā)表的文章，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。除此之外，可以從大腸桿菌(E.coli)中直接回收Fab,片^殳并且進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián)從而形成雙特異性抗體。參見(jiàn)，例如，Shalaby等人于1992年在J.Exp.Med.《實(shí)-驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》175:217-225中發(fā)表的文章，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。也已經(jīng)描述了用于乂人重組細(xì)月包培養(yǎng)物中直4妻制備并且分離雙特異性抗體片,殳的各種^支術(shù)。例如，可以4吏用亮氨酸4立《連對(duì)雙特異性抗體進(jìn)行制備。參見(jiàn)，例如，Kostelny等人于1992年在J.Immunol.《免疫學(xué)雜志、》148(5):1547-1553中發(fā)表的文章，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。由Hollinger等人于1993年在Proc.Natl.Acad.Sci.USA《美國(guó)-牛學(xué)P完l^完刊》90:6444-6448中發(fā)表的文章中所描述的"雙功能抗體"技術(shù)已經(jīng)為雙特異性抗體片段的制備提供了一種可供選擇的機(jī)制，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。也已經(jīng)報(bào)道了使/^單鏈Fv(sFv)二聚體制備雙特異性抗體片段的另外一種策略。參見(jiàn)，Gruber等人于1994年在J.Immunol.《免疫學(xué)雜志》152:5368中發(fā)表的文章，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此卩1入作為參考。具有多于兩種化合〗介的抗體是可以預(yù)期的。例如，可以制備三特異性抗體。參見(jiàn)，Tutt等人于1991年在J.Immunol.《免疫學(xué)雜志》147:60中發(fā)表的文章。54范例性的雙特異性抗體可以與兩個(gè)不同的表位進(jìn)行結(jié)合，所述表位中的至少起源于本發(fā)明所述的蛋白抗原。可以選擇的，將免疫3求蛋白分子的^t4元原、^,(anti-antigenicarm)與另夕卜^#進(jìn)4亍組合，所述的另外臂與存在于白細(xì)胞上的一種啟動(dòng)分子(triggeringmolecule)發(fā)生了結(jié)合，其中所述的啟動(dòng)分子是例如T細(xì)月包受體分子(例如，CD2，干護(hù)C素Y，CD28,或者B7)，或者是免疫-求蛋白G的Fc受體(FcyR)，例如FcyRI(CD64)，F(xiàn)cyRII(干4尤素y2)以及FcyRIII(CD16),從而聚焦于表達(dá)所述特定抗原的細(xì)胞的細(xì)胞防衛(wèi)機(jī)制。雙特異性抗體還可以被用來(lái)向細(xì)胞呈遞細(xì)胞毒素試劑，其中所述的細(xì)胞表達(dá)一種特定的抗原。這些抗體具有抗原結(jié)合臂以及與細(xì)胞毒素試劑或者放射性核螯合劑發(fā)生結(jié)合的臂，所述的放射性核螯合劑是例如硫脲基-L-苯基-乙二胺四乙酸(EOTUBE),二乙烯三胺五乙酸(DPTA),十二》克四乙酸(DOTA),或者三乙晞四胺(TETA)。另外一種感興趣的雙特異性抗體與本發(fā)明所描述的蛋白抗原發(fā)生結(jié)合，并且進(jìn)一步的結(jié)合la織因子(TF)?？贵w的復(fù)共輒對(duì)配合物同樣落入本發(fā)明所述的范圍之內(nèi)。復(fù)共輒對(duì)配合物抗體是由兩個(gè)共價(jià)連接的抗體所組成的。這樣的抗體已經(jīng)被提議用于例如將免疫系統(tǒng)細(xì)胞瞄向(targetto)不期望白勺纟田胞(美國(guó)專(zhuān)利No.4,676，980),以及用于治療人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)的感染(WO91/00360;WO92/200373;EP03089)。可以預(yù)期，能夠使用合成蛋白化學(xué)中的已知方法進(jìn)行所述抗體的體外制備，包括那些涉及到交聯(lián)試劑的方法。例如，可以通過(guò)使用一種二碌u化物交4奐反應(yīng)或者通過(guò)形成錄u醚4走的方式來(lái)構(gòu)建免疫毒素。用于這一目的的適合的試劑的例子包括亞氨基辟u(mài)醇鹽以及曱基_4_巰基丁基亞氨基鹽以及那些例如在美國(guó)專(zhuān)利No.4，676,980中7>開(kāi)的{式劑。本發(fā)明還涉及免疫共輒物，所述的免疫共輒物包4舌一種與細(xì)胞毒素試劑或者放射性同位素(即，放射性共軛物)共軛的抗體，其中所述的細(xì)胞毒素試劑是例如毒素(例如，細(xì)菌來(lái)源，真菌來(lái)源，才直物來(lái)源，或者動(dòng)物來(lái)源的酶活性毒素，或者所述酶活性毒素的片段)?？梢?吏用的酶活性毒素及其片革殳包4舌白喉毒素A鏈，白口娛毒素的非結(jié)合活性片段，外毒素A鏈(來(lái)自于銅綠假單胞菌)，蓖麻毒素A4連，相思豆毒素A鏈，藥蓮毒素A《連，oc-乂乂疊3求菌，油桐蛋白，香石竹毒蛋白(dianthinprotein)，美洲商陸蛋白(PAPI,PAPII，以及PAP-S)，苦瓜抑制劑，瀉果素，巴豆毒素，皂草黃抑制劑，多花白樹(shù)毒蛋白，mitogellin，局限曲霉素，酚霉素，依諾霉素，以及單端孢霉烯族毒素。可以利用各種》文射性核進(jìn)朽j文射性共輒的抗體的制備。例子包括212鉍，131碘，131銦，9GY，以及186錸。使用各種雙重功能的蛋白偶聯(lián)試劑制備所述的抗體與細(xì)胞毒素試劑的共軛物，其中所述的試劑是例如3-(2-吡咬二巰基)丙酸N-羥基琥珀酰亞胺酯(SPDP),二亞氨基蓬吩(IT),雙重功能的酰亞胺酯書(shū)f生物(例如二亞胺^己二酸二曱酯鹽酸鹽)，活性酯(例如辛二酸二琥珀酰亞胺酯)，醛(例如戊二醛)，只又疊氮基化合物(例如雙-(對(duì)疊氮基苯曱酰基)己二胺)，雙-重氮基衍生物(例如雙-(對(duì)重氮基苯曱酰基)-乙二胺)，二異氰酸鹽(例如甲苯-2,6-二異氰酸酯)，以及雙-活性氟化合物(例如1，5-二氟-2,4-二硝基苯)。例如，可以按照Vitetta等人于1987年在Science《科學(xué)》238:1098中發(fā)表的文章中所描述的方法進(jìn)4亍荒麻毒素免疫毒素的制備。碳14標(biāo)記的l-異硫氰基芐基-3-曱基二乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)是一種范例性的螯合試劑，用于將》文射性核共軛至所述的抗體之中(參見(jiàn)WO94/11026)。56本領(lǐng)域二技術(shù)人員將能夠i人識(shí)到，大量的各種不同的可能的半族能夠被偶聯(lián)到上述得到的抗體之中或者本發(fā)明所述的其他分子之中(參見(jiàn)，例^口，"ConjugateVaccines",ContributionstoMicrobiologyandImmunology《"共軛疫苗，，對(duì)于孩i生物學(xué)以及免疫學(xué)所估文出的貢獻(xiàn)》，J.M.Cmse以及R.E丄ewis，Jr(編4專(zhuān))，CargerPress,NewYork紐約，1989年，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。只要所述的抗體以及所述的其他半族保持它們各自的活性，可以利用4壬意的化學(xué)反應(yīng)完成偶耳關(guān)，這將4吏所述的兩個(gè)分子發(fā)生結(jié)合。這種連4妻可能包括許多化學(xué)機(jī)制，例如共價(jià)結(jié)合，親和結(jié)合，嵌入，平等結(jié)合以及絡(luò)合。然而所述的優(yōu)選結(jié)合方式是共價(jià)結(jié)合?？梢酝ㄟ^(guò)現(xiàn)有側(cè)《連的直4妾濃縮來(lái)完成共價(jià)結(jié)合，或者通過(guò)導(dǎo)入外部橋接分子來(lái)完成共價(jià)結(jié)合。許多二價(jià)或者多價(jià)的連接試劑可以有效的用于偶聯(lián)蛋白分子，例如將本發(fā)明所述的抗體偶聯(lián)至其他分子之中。例如，代表性的偶聯(lián)試劑可以包括有機(jī)化合物例如》克酯，-友化二亞胺，琥珀酰亞胺酯，二異氰S臾酯，戊二醛，重氮基苯以及己二胺。這種列表并不意在徹底的列出本領(lǐng)域已知的各種類(lèi)別的偶聯(lián)試劑，而僅僅是所述更多普遍的偶聯(lián)試劑的范例(參見(jiàn)Killen以及Lindstrom于1984年在Jour.Immun.《免疫學(xué)雜志》133:1335-2549中發(fā)表的文章；Jansen等人于1982年在ImmunologicalReviews《免疫學(xué)回顧》62:185-216中發(fā)表的文章；以及Vitetta等人于1987年在Science《科學(xué)》238:1098中發(fā)表的文章)。優(yōu)選的連接劑在下述文獻(xiàn)中進(jìn)行了描述(參見(jiàn)，例如，Ramakrishnan，S等人于1984年在CancerRes.《癌癥研究》44:201-208中發(fā)表的文章，其中描述了MBS(間馬來(lái)酰亞胺苯曱酰基-N-羥基琥珀酰亞胺酯)的用途。同樣可以參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利No.5,030,719,其中描述了囟4匕乙酰肼的用途，其中所述的卣化乙酰肼通過(guò)寡肽連接劑的方式^皮偶聯(lián)至一種抗體之中。特別優(yōu)選57的連接劑包括(i)EDC(1-乙基-3-(3-二曱基氨基-丙基)碳二亞胺鹽酸鹽)；(ii)SMPT(4-琥珀酰亞胺基氧基羰基-a-甲基-a-(2-吡咬二石?；?-曱苯)(PierceChem.Co.，Cat#21558G);(iii)SPDP($虎^)醜亞胺畫(huà)6畫(huà)[3-(2-(口比口定二石克基)丙醜胺)己酉臾酯](PierceChem.Co.,Cat#21651G);(iv)磺基畫(huà)LC-SPDP(磺基琥珀酰亞胺-6-[3-(2-(吡i定二石克基)丙酰胺)己酸酯](PierceChem.Co.,Cat弁2165畫(huà)G);以及(v)與EDC(l-乙基-3-(3畫(huà)二曱基氨基-丙基)碳二亞胺鹽酸鹽)共軛的磺基-NHS(N-羥基磺基-琥珀酰亞胺PierceChem.Co.,Cat#24510)。上文中所描述的這些連4妄劑含有具有不同屬性的組分，因此導(dǎo)致其以不同的生玉里"匕學(xué)性質(zhì)進(jìn)4亍共4厄。例3口，磺基-NHS(N-羥基磺基-琥珀酰亞胺)的烷基羧酸酯比磺基-NHS(N-羥基磺基-琥珀酰亞胺)的芳香基羧酸酯更加穩(wěn)定。含有連4妻劑的NHS-酯(N-羥基-琥珀酰亞胺酯)比磺基-NHS酉旨(N-羥基石黃基-琥珀酰亞胺酯)更力口難溶。而且，所述的連接劑SMPT(4-琥珀酰亞胺基氧基羰基-oc-曱基-oc-(2-吡啶二硫基)-甲苯)含有在原子空間排列上被阻礙的二好"建，并且能夠形成具有增加的穩(wěn)定性的共軛物。二碌u4建在一^:情況下沒(méi)有其他的連4妄方式穩(wěn)、定，這是因?yàn)樗龅亩?定在體外被切開(kāi)，使得能夠獲得較少的可以利用的共軛物?；腔?NHS(N-羥基磺基-琥珀酰亞胺)尤其能夠增加碳二亞胺偶聯(lián)的穩(wěn)定性。當(dāng)將碳二亞胺偶聯(lián)(例如EDC)與磺基-NHS(N-羥基磺基-琥珀酰亞胺)聯(lián)合使用時(shí)，所形成的酯比單獨(dú)進(jìn)行石友二亞胺偶耳關(guān)反應(yīng)所形成的酯具有更強(qiáng)的水解抗性。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"被分離的多核苷酸"應(yīng)當(dāng)指的是基因多核苦酸，cDNA多核苷酸,或者合成來(lái)源的多核苦酸，或者上述多核苷酸的某種組合，由于這些多核苷酸的來(lái)源，所述的"#皮分離的多核苷酸"(1)不與一種多核苷酸的全部或者部分相聯(lián)系，其中所述的"被分離的多核普酸"是天然存在的，(2)其與一種多核苦酸發(fā)生可操作的連接，其中所述的多核苷酸不是與其存在天然連4妻的，或者(3)其不會(huì)作為更大的序列的一部分而天然存在。在這里所提及的所述術(shù)語(yǔ)"被分離的蛋白"指的是cDNA蛋白，重組RNA蛋白，或者合成來(lái)源的蛋白，或者上述蛋白的某種組合，由于這些蛋白的來(lái)源或者4汙生反應(yīng)的來(lái)源，所述的'4皮分離的蛋白"(1)不與天然存在的蛋白相聯(lián)系，(2)不含有屬于同樣來(lái)源的其他蛋白，例如，不含有海洋蛋白，(3)是由來(lái)自于不同種屬的細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)的，或者(4)不是天然存在的。在這里作為專(zhuān)業(yè)術(shù)語(yǔ)一皮使用的所述術(shù)語(yǔ)"多肽"指的是多肽序列的天然蛋白，片段，或者類(lèi)似物。因此，天然蛋白片段以及類(lèi)似物屬于所述的多肽屬(genus)的種類(lèi)(species)。依照本發(fā)明，優(yōu)選的多肽包括這里所描述的人類(lèi)重鏈免疫球蛋白分子以及這里所描述的人類(lèi)輕鏈免疫球蛋白分子，以及抗體分子，以及它們的片,爻和類(lèi)似物，其中所述的抗體分子是通過(guò)所述的重鏈免疫球蛋白分子與輕鏈免疫球蛋白分子的組合而形成的，所述的輕鏈免疫^(guò)求蛋白分子例如是k輕《連免疫J求蛋白分子，并且反之亦然。這里所使用的將其應(yīng)用至物體的所述術(shù)語(yǔ)"天然存在的"指的是這樣的事實(shí)所述的物體是可以在自然中找到的。例如，一種存在于有4幾體(包括病毒)中的多肽序列或者多核苷酸序列能夠/人一種天然來(lái)源中^皮分離出來(lái)，并且所述的序列并沒(méi)有^皮實(shí)一瞼室人員或者通過(guò)另外的方式進(jìn)行有意的修飾，那么這樣的序列是天然存在的。這里所4吏用的所述術(shù)語(yǔ)"可才喿作的連4妄"指的是^皮用于這才羊描述的組分所處的位置關(guān)系允許它們以它們既定的方式發(fā)功能。對(duì)照序列"可操作的連接"至編碼序列上，指的是所述的對(duì)照序列以這樣一種方式進(jìn)行連結(jié)在能與所述的對(duì)照序列相容的條件下，完成所述編碼序列的表達(dá)。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"對(duì)照序列，，指的是對(duì)于實(shí)現(xiàn)表達(dá)以及加工(processing)編碼序列而言所必需的多核苷酸序列，其中所述的編碼序列是與所述的多核苷酸序列進(jìn)4亍連結(jié)的。這樣的對(duì)照序列的性質(zhì)是不同的，這取決于原核生物中的宿主有機(jī)體，這樣的對(duì)照序列通常包括啟動(dòng)子，核糖體結(jié)合位點(diǎn)，以及真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄終止序列，一般而言，這樣的對(duì)照序列包括啟動(dòng)子以及轉(zhuǎn)錄終止序列。所述的術(shù)i吾"對(duì)照序列"意在在最^氐禾呈度上包4舌那些》于于表達(dá)以及力口工而言必須存在的全部纟且分，并且還可以包4舌額外的組分，其中所述的額外的組分的存在是有利的，例如，前導(dǎo)序列以及融合伙伴序列。在這里所提及的所述術(shù)語(yǔ)"多核苷酸"指的是具有至少10個(gè)石成基長(zhǎng)度的核苷酸的聚合物，可以是核#唐核苷酸或者脫氧核苷酸或者4壬意類(lèi)型的核苷酸的々務(wù)飾形式。所述的術(shù)i吾包4舌單4連形式的DNA以及雙鏈形式的DNA。這里所才是及的所述術(shù)語(yǔ)寡核苦酸包括天然存在的以及經(jīng)過(guò)修飾的核苷酸，所述的核苷酸通過(guò)天然存在的以及非天然存在的寡核苷酸連4妻#^皮連4妄在一起。寡核普酸是一種多核香酸的亞類(lèi)，一般而言包括200個(gè);咸基的長(zhǎng)度或者更少的長(zhǎng)度。優(yōu)選的，寡核苷酸具有10至60個(gè)石威基的長(zhǎng)度并且更加優(yōu)選具有12,13，14,15,16,17,18，19，或者20至40個(gè)石威基的長(zhǎng)度。寡核苷酸通常是單鏈的，例如，當(dāng)用作揮:針時(shí)，盡管寡核香酸可以是雙鏈的，例如，當(dāng)用于進(jìn)行基因突變體的構(gòu)建時(shí)。本發(fā)明所述的寡核香酸可以是正義寡核香酸或者是反義寡核苦酸。這里所^是及的所述術(shù)語(yǔ)"天然存在的核香酸"包4舌脫氧核糖核香酸以及核沖唐核苦酸。這里所l是及的所述術(shù)i吾"經(jīng)過(guò)》務(wù)飾的核普酸"包括含有經(jīng)過(guò)修飾的或者經(jīng)過(guò)取代的糖基團(tuán)的核苷酸以及類(lèi)似核香酸。這里所^是及的所述術(shù)語(yǔ)"寡核苷酸連接4建"包括例如下述的寡核香酸連4妄4建好"義》粦酸鹽，二碌"<》粦酸鹽，phosphoroselerloate,phosphorodiselerloate,phosphoroanilothioate，phosphoroaniladate,phosphoronmidate,以及類(lèi)似連接鍵。參見(jiàn),例如，LaPlanche等人于1986年在Nucl.AcidsRes.《核普酸的研究》14:麵1中發(fā)表的文章；Stec等人于1984年在J.Am.Chem.Soc.《美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)雜志》106:6077中發(fā)表的文章；Stein等人于1988年在Nucl.AcidsRes.《核芬酸的研究》16:3209中發(fā)表的文章；Zon等人于1991年在AntiCancerDrugDesign《抗癌癥藥物的i殳計(jì)》6:539中發(fā)表的文章；Zon等人于1991年在OligonucleotidesandAnalogues:APracticalApproach《寡核苦酸及其類(lèi)似物一種實(shí)踐的途徑》pp.87-108中發(fā)表的文章(REckstein編輯，OxfordUniversityPress牛津大學(xué)出X反3土，OxfordEngland英國(guó)牛津)；Stec等人的美國(guó)專(zhuān)利No.5,151,510;Uhlmann以及Peyman于1990年在ChemicalReviews《4b學(xué)評(píng)i侖》90:543中發(fā)表的文章。如果需要的話，寡核苷酸可以包4舌一種用于進(jìn)^f亍:探測(cè)的標(biāo)i己。這里所^是及的所述術(shù)語(yǔ)"選4奪性的雜交"指的是可纟罙測(cè)性的以及特異性的結(jié)合。依照本發(fā)明所述的多核苷酸，寡核苦酸以及它們的片l殳選沖奪性的與核酸鏈進(jìn)行雜交，其中所述的雜交是在雜交以及洗滌的條件下進(jìn)行的，從而使與非特異性核酸發(fā)生可探測(cè)性結(jié)合的可感知?jiǎng)┝孔钚』??？梢岳酶叨葒?yán)^^各的條件來(lái)獲得本領(lǐng)域已知的以及本發(fā)明中所討i侖的選擇性的雜交條件。一4殳而言，在本發(fā)明所述的多核普酸，寡核普酸，以及片革殳與目標(biāo)核酸序列之間的核酸序列同源性將為至少80%，并且更加典型的具有^尤選的至少85%,90%，95%，99%,以及100%的土曾力口的同源寸生。如果在兩個(gè)氨基酸序列中具有部分同一性或者完全同一性，那么這兩個(gè)氨基酸序列是同源的。例如，85%的同源性意"未著當(dāng)所述61的兩個(gè)序列以最大程度的匹配進(jìn)行比對(duì)時(shí)，有85%的氨基酸是相同的。在最大程度的匹配中允許存在空位(存在于所述進(jìn)行匹配的兩個(gè)序列中的任意之上)，空位長(zhǎng)度為5或者更小是優(yōu)選的，空位長(zhǎng)度為2或者更小是更加優(yōu)選的?？梢赃x擇的并且是優(yōu)選的，兩個(gè)蛋白序列(或者來(lái)源于它們的多肽序列，具有至少30個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度)是同源的，這一術(shù)語(yǔ)用在這里指的是，當(dāng)使用帶有突變ft據(jù)矩陣以及空位罰分為6或者更高的ALIGN程序時(shí)，所述的蛋白序列得到高于5(標(biāo)準(zhǔn)偏差單位)的比對(duì)得分。參見(jiàn)Dayhoff,M.O.于AtlasofProteinSequenceandStructure《蛋白序列以及結(jié)片勾圖集》pp.101-110(Volume5，NationalBiomedicalResearchFoundation美國(guó)國(guó)家生物醫(yī)學(xué)研究基金會(huì)，1972年)以及該巻的增刊2,pp.1-10中發(fā)表的文章。當(dāng)4吏用所述的ALIGN程序進(jìn)4于最優(yōu)化的比對(duì)時(shí)，所述的兩個(gè)序列或其部分中的氨基酸具有大于或者等于50%的同一性，那么所述的兩個(gè)序列或其部分是更加優(yōu)選的同源的。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"相應(yīng)于，，指的是多核苷酸序列與參考的多核苷酸序列的整體或者部分是同源的(即，是相同的，非嚴(yán)格性進(jìn)化相關(guān))，或者多肽序列與參考的多肽序列是相同的。與之相對(duì)照區(qū)別的，這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"互補(bǔ)于"指的是所述的互補(bǔ)序列與參考的多核苷酸序列的整體或者部分是同源的。作為例子，所述的核苦酸序列"TATAC"相應(yīng)于參考序列"TATAC"而互補(bǔ)于參考序列"GTATA"。下述的術(shù)語(yǔ)-故用來(lái)描述兩個(gè)或者多個(gè)多核苷酸序列或者氨基酸序列之間的序列關(guān)系"參考序列"，"比4支窗口"，"序列同一性"，"序列同一性百分?jǐn)?shù)"，以及"本質(zhì)同一性"。"參考序列，，是被定義的序列，用來(lái)作為序列比較的基準(zhǔn)，參考序列可能是更大的序列的亞類(lèi)，例:^，作為完全長(zhǎng)度的cDNA或者基因序列的片段，其中所述的cDNA或者基因序列在序列列表中給出，或者可以包括完整的cDNA或者基因序列。一般而言，參考序列具有至少18個(gè)核苷酸或者6個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，常常具有至少24個(gè)核苷酸或者8個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，并且通常具有至少48個(gè)核苷酸或者16個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度。由于兩個(gè)多核苷酸序列或者氨基酸序列可能均(1)在所述的兩個(gè)分子中包括相似的序歹ll(即，所述的完整的多核普酸序列或者氨基酸序列的一部分)，以及(2)在所述的兩個(gè)多核苷酸序列或者氨基酸序列中可能進(jìn)一步的包括存在分歧的序列，通常通過(guò)在"比4交窗口"中對(duì)所述的兩個(gè)分子的序列進(jìn)行比較的方式來(lái)完成兩個(gè)(或者多個(gè))分子間的序列比較，用以識(shí)別以及比較局部區(qū)域的序列相似性。這里所使用的"比較窗口"指的是一種具有至少18個(gè)連續(xù)的核苷酸位置或者6個(gè)氨基酸的概念片段，其中可以將一種多核苷酸序列或者氨基酸序列與一種具有至少18個(gè)連續(xù)核苷酸或者6個(gè)氨基酸序列的參考序列進(jìn)4亍比4交，并且與所述的參考序列(不包4舌添加或者缺失)相比較而言，其中位于所述的比較窗口之內(nèi)的所述的多核苷酸序列部分可以包括20%或者更低的添加，缺失，耳又代，以及類(lèi)似情況(即，空位)，用以-使所述的兩個(gè)序列進(jìn)4于最佳的比對(duì)。用于4交準(zhǔn)比較窗口而進(jìn)行的序列的最佳比對(duì)可以利用下述方式來(lái)操作利用Smith以及Waterman于1981年在Adv.Appl.Math.《應(yīng)用凄t學(xué)的研究進(jìn)展》2:482中發(fā)表的文章中描述的局部同源性運(yùn)算法則，利用Needleman以及Wunsch于1970年在J.Mol.Biol.《分子生物學(xué)雜志》48:443中發(fā)表的文章中描述的同源性比只于運(yùn)算法則，利用Pearson以及Lipman于1988年在Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)《美國(guó)科學(xué)院院刊》85:2444中發(fā)表的文章中描述的對(duì)相似性方法的尋找，利用這些運(yùn)算法則的計(jì)算機(jī)執(zhí)行(在WisconsinGenetics軟件包版本7.0(GeneticsComputerGroup,575ScienceDr.Madison,Wis.)中的GAP,BESTFIT,FASTA,以及TFASTA,Geneworks，或者M(jìn)acVector專(zhuān)欠件包)，或者通過(guò)沖企查，并且對(duì)于由上述各種方法所產(chǎn)生的最佳比對(duì)(即，在所述的比4交窗口中產(chǎn)生最高百分比的同源性)進(jìn)4亍選擇。63所述的術(shù)語(yǔ)"序列同一性，，指的是在所述的比4交窗口中兩個(gè)多核香酸序列或者氨基酸序列是相同的(即，以核苷酸或者殘基的方式)。所述的術(shù)語(yǔ)"序列同一性的百分tt"是通過(guò)下述方式計(jì)算的在所述的比較窗口中對(duì)兩個(gè)最佳比對(duì)的序列進(jìn)行比較，確定在兩個(gè)序列中出現(xiàn)同樣的核酸石威基(例如，A,T,C,G,U或者I)或者殘基的位置的個(gè)數(shù)，從而獲得匹配位置的個(gè)數(shù)，用所述的匹配〗立置的個(gè)凄t除以在所述的比4交窗口中的^f立置的總個(gè)數(shù)(即，窗口尺寸)，并且將得到的結(jié)果乘以100,/人而得出所述的序列同一性的百分?jǐn)?shù)。這里所^吏用的所述術(shù)語(yǔ)"本質(zhì)同一性"代表的是多核苷酸序列或者氨基酸序列的性質(zhì)，其中所述的多核苷酸序列或者氨基酸序列包括具有至少85%的序列同一性的序列，^f尤選具有至少90%至95%的序列同一'l"生，更常具有至少99%的序列同一性，其中所述的序列同一性是在比庫(kù)交窗口中與參考序列進(jìn)行比較而得到的，其中所述的比較窗口具有至少18個(gè)核香酸(6個(gè)氨基酸)的^立置，通常情況下所述的窗口具有至少24-48個(gè)核苷酸(8-16個(gè)氨基酸)的位置，其中所述的序列同一性百分?jǐn)?shù)是通過(guò)下述方式來(lái)計(jì)算的將所述的參考序列與一種可能包括缺失或者添加的序列進(jìn)行比較，其中所述的參考序列的共計(jì)20%或者更少位于所述的比專(zhuān)交窗口之中。所述的參考序列可以是更大的序列的亞類(lèi)。這里所使用的二十個(gè)常規(guī)氨基酸以及它們的縮略語(yǔ)是依照常^L的用法來(lái)4吏用的。參見(jiàn)Immunology畫(huà)ASynthesis《免疫學(xué)合成方法》(第二片反，E.S.Golub以及D.R.Gren編輯，SinauerAssociates,SunderlandMass,1991年)。所述的二十個(gè)常^見(jiàn)氨基酸的立體異構(gòu)體(例如，D-氨基酸)，非天然氨基酸例如ot-,a-二取代氨基酸，N-烷基氨基酸，乳酸，以及其他非常規(guī)氨基酸也可能成為本發(fā)明所述的多肽中的適合的組分。非常規(guī)氨基酸的例子包括4-羥基脯氨酸，？羧基谷氨酸鹽，s-N,N,N-三曱基賴(lài)氨酸，s-N-乙?；?lài)氨酸，O-磷酸化絲氨酸，N-乙酰基絲氨酸，N-曱?；鶗趿虬彼?，3-甲基組氨酸，5-羥基賴(lài)氨酸，cj-N-甲基精氨酸，以及其他類(lèi)似的氨基酸以及亞氨基酸(例如，4-羥基脯氨酸)。依照標(biāo)準(zhǔn)的用法以及慣例，在本發(fā)明中所4吏用的所述多肽標(biāo)記中，左側(cè)的方向是所述的氨基末端方向而右側(cè)的方向是所述的羧基末端方向。相類(lèi)似的，除非另外指明，單鏈多核普酸序列的左側(cè)端是所述的5，端，^又鏈多核苷酸序列的左側(cè)端指的是所述的5'方向。初生RNA轉(zhuǎn)錄體的5，至3'方向的加成指的是在所述的DNA鏈上的轉(zhuǎn)錄方向序列區(qū)域與所述的RNA具有同才羊的序列并且是乂人5，到所述RNA轉(zhuǎn)錄體的5'端，這樣的序列3皮稱(chēng)為"上游序列"，到所述RNA轉(zhuǎn)錄體的3，端，這樣的序列一皮稱(chēng)為"下游序列"。當(dāng)應(yīng)用于多肽時(shí)，所述的術(shù)語(yǔ)"本質(zhì)同一性"指的是當(dāng)將兩個(gè)肽序列進(jìn)4于最佳比對(duì)時(shí)，它們享有至少80%的序列同一性，優(yōu)選至少90%的序列同一'I"生，更加優(yōu)選至少95%的序列同一'l"生，并且最優(yōu)選至少99%的序列同一性，其中所述的最佳比對(duì)是利用例如所述的GAP或者BESTFIT程序在默認(rèn)空位重量的情況下完成的。優(yōu)選的，不相同的殘基部分中存在著保守性氨基酸取代的差別。保守性氨基酸取代指的是具有類(lèi)似側(cè)鏈的殘基之間的相互交換能力。例如，具有脂肪族側(cè)鏈的一組氨基酸是甘氨酸，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，以及異亮氨酸；具有脂肪族-羥基側(cè)鏈的一組氨基酸是絲氨酸以及蘇氨酸；具有含有酰胺的側(cè)鏈的一組氨基酸是天冬酰胺以及谷氨酰胺；具有芳香族側(cè)鏈的一組氨基酸是65苯丙氨酸，酪氨酸，以及色氨酸；具有石威性側(cè)鏈的一組氨基酸是賴(lài)氨酸，精氨酸，以及組氨酸；具有含硫側(cè)鏈的一組氨基酸是半胱氨酸以及曱硫氨酸。優(yōu)選的保守性氨基酸取代組合是纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸，苯丙氨酸-酪氨酸，賴(lài)氨酸-精氨酸，丙氨酸，纈氨酸，谷氨酸-天冬氨酸，以及天冬酰胺-谷氨酰胺。正如這里所討i侖的，可以預(yù)期的是，在其氨基酸序列中具有次要變異的抗體或者免疫球蛋白分子是被包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)的，只要所述的氨基酸序列中的所述變異保持在至少75%,更加優(yōu)選至少80%，90%,95%，并且最優(yōu)選為99%。具體的，保守性氨基酸的取代是可以預(yù)期的。保守性取代指的是那些在一類(lèi)氨基酸家族中發(fā)生的取代，其中所述的氨基酸家族是通過(guò)它們的側(cè)鏈相關(guān)聯(lián)的。遺傳編碼的氨基酸通常被劃分為下述家族(l)酸性氨基酸，為天冬氨酸，谷氨酸；(2)石威性氨基酸，為賴(lài)氨酸，精氨酸，組氨酸；(3)非極性氨基酸，為丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨S臾，脯氨酸，苯丙氨酸，甲硫氨酸，色氨酸，以及(4)不帶電荷的極性氨基酸，為甘氨酸，天冬酰胺，谷氨酰胺，半胱氨酸，絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸。所述的親水性氨基酸包括精氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，谷氨酰胺，谷氨酸，組氨酸，賴(lài)氨酸，絲氨酸，以及蘇氨酸。所述的疏水性氨基酸包括丙氨酸，半胱氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，曱硫氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，色氨酸，酪氨酸以及纈氨酸。其他的氨基酸家族包括(i)絲氨酸以及蘇氨酸，它們是所述的脂肪族-羥基家族；(ii)天冬酰胺以及谷氨酰胺，它們是所述的含有酰胺的家族；(iii)丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸以及異亮氨酸，它們是所述的脂肪族家族；以及(iv)苯丙氨酸，色氨酸，以及酪氨酸，它們是所述的芳香族家族。例如，我們可以合理的預(yù)料到，利用異亮氨酸或者纈氨酸對(duì)亮氨酸進(jìn)行單獨(dú)的取代，利用谷氨酸對(duì)天冬氨酸進(jìn)行單獨(dú)的取代，利用絲氨酸對(duì)蘇氨酸進(jìn)行單獨(dú)的取代，或者利用在結(jié)構(gòu)上相關(guān)聯(lián)的氨基酸對(duì)氨基酸進(jìn)行類(lèi)似的取代，這將不會(huì)對(duì)得到的分子的結(jié)合能力或者性質(zhì)產(chǎn)生較大的影響，特別是當(dāng)所述的取代不涉及到存在于骨架位點(diǎn)內(nèi)的氨基酸時(shí)。可以通過(guò)對(duì)所述的多肽4汙生物的特異性活性進(jìn)行#:測(cè)，/人而容易的確定出氨基酸的改變是否產(chǎn)生了功能性的肽。所述的才全測(cè)會(huì)在本.發(fā)明中進(jìn)4亍詳細(xì)的描述。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員能夠容易的制備出抗體或者免疫球蛋白分子的片段或者類(lèi)似物。片段或者類(lèi)似物的優(yōu)選的氨基末端以及羧基末端出現(xiàn)在靠近功能性區(qū)i或的邊界處。可以通過(guò)將所述的核苷酸序列和/或氨基酸序列數(shù)據(jù)與公開(kāi)的序列數(shù)據(jù)庫(kù)或者私有的序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比較，來(lái)識(shí)別結(jié)構(gòu)以及功能區(qū)域。優(yōu)選的，使用計(jì)算機(jī)化的比較方法來(lái)識(shí)別序列基序或者預(yù)言蛋白的構(gòu)象區(qū)域，其中所述的序列基序或者構(gòu)象區(qū)域存在于具有已知的結(jié)構(gòu)和/或功能的其他蛋白中。用來(lái)識(shí)別被折疊成已知的三維結(jié)構(gòu)的蛋白序列的方法是已知的。參見(jiàn)Bowie等人于1991年在Science《考牛學(xué)》253:164中發(fā)表的文章。因此，下述的實(shí)施例表明，本領(lǐng)域j支術(shù)人員能夠識(shí)別序列基序以及結(jié)構(gòu)構(gòu)象，所述的序列基序以及結(jié)構(gòu)構(gòu)象可以一皮用來(lái)定義依照本發(fā)明所述的結(jié)構(gòu)以及功能區(qū)i或。優(yōu)選的氨基酸取代是這樣的，所述的氨基酸取代能夠(1)降低對(duì)蛋白質(zhì)水解的易感性，(2)降低對(duì)氧化的易感性，(3)改變用以形成蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)合親和性，(4)改變結(jié)合親和性，以及(5)賦予或者修飾這些類(lèi)似物的其他物理化學(xué)特性或者功能特性。類(lèi)似物可以包4舌序列的各種突變蛋白，其不同于所述的天然存在的肽序列。例如，可以在所述的天然存在的序列中(優(yōu)選發(fā)生在存在于形成分子間^接觸的區(qū)域之外的多肽部分中)進(jìn)4亍單個(gè)或者多個(gè)氨基酸的取代(優(yōu)選是保守性氨基酸的取代)。保守性氨基酸的取"氣應(yīng)當(dāng)不能夠在本質(zhì)上改變所述母本序列的結(jié)構(gòu)性質(zhì)(例如，耳又^的氨基酸應(yīng)當(dāng)不能夠趨向于石皮壞存在于所述母本序列中的螺旋結(jié)構(gòu)，或者石皮壞用以定義所述的母本序列的其67他類(lèi)型的次級(jí)結(jié)構(gòu))。本領(lǐng)域認(rèn)知的多肽的次級(jí)結(jié)構(gòu)以及三級(jí)結(jié)構(gòu)的例子在下述文章中有所描述Proteins,StructuresandMolecularPrinciples《蛋白的結(jié)構(gòu)以及分子原理》(Creighton編l辱，W.H.FreemanandCompany,NewYork紐約，1984年)；IntroductiontoProteinStructure《蛋白纟吉4勾的介纟召》(C.Branden以及J.Tooze編l專(zhuān)，GarlandPublishing,NewYork紐約N.Y.,1991年)；以及Thornton等人于1991年在Nature《自然》354:105中發(fā)表的文章。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"多肽片段"指的是在氨基末端和/或羧基末端上具有缺失的多肽，但是所述多肽上的其余的氨基酸序列與天然存在的序列的相應(yīng)位置是相同的，其中所述的天然存在的序列例如是乂人完全長(zhǎng)度的cDNA序列中推導(dǎo)出來(lái)的。片段通常是至少5，6,8或者10個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，優(yōu)選至少14個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，更加優(yōu)選至少20個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，通常為至少50個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，并且甚至更加優(yōu)選至少70個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"類(lèi)似物"指的是由具有至少25個(gè)氨基酸的片辜殳所構(gòu)成的多肽，其與4,導(dǎo)(deduced)的氨基酸序列的一部分具有本質(zhì)同一性，并且其具有下述特性中的至少一種(1)在適當(dāng)?shù)慕Y(jié)合條件下，與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10發(fā)生特異性的結(jié)合，或者(2)具有能夠阻礙恰當(dāng)?shù)母蓴_素誘導(dǎo)蛋白-10結(jié)合的能力。性氨基酸的耳又代(或者添加或者缺失)。類(lèi)似物通常具有至少20個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度，優(yōu)選至少50個(gè)氨基酸的長(zhǎng)度或者更長(zhǎng)，并且通?？梢耘c完全長(zhǎng)度的天然存在的多肽具有相同的長(zhǎng)度。肽的類(lèi)似物;故普遍應(yīng)用于制藥工業(yè)中，作為與所述的才莫板肽具有類(lèi)似性質(zhì)的非肽類(lèi)藥物。這些類(lèi)型的非肽類(lèi)化合物一皮稱(chēng)為"肽的才莫擬物，，或者"才莫擬肽"。參見(jiàn)Fauchere于1986年在J.Adv.DmgRes.《藥物的研究進(jìn)展雜志》15:29中發(fā)表的文章，Veber以及Freidinger于1985年在TINSp.392中發(fā)表的文章；以及Evans等人于1987年在J.Med.Chem.《藥物化學(xué)雜志》30:1229中發(fā)表的文章。這類(lèi)化合物通常要借助于計(jì)算機(jī)化的分子模型來(lái)進(jìn)行研究。肽的模擬物可以被用來(lái)制造一種等價(jià)的治療效應(yīng)或者預(yù)防效應(yīng)，其中所述的纟莫擬物在結(jié)構(gòu)上與治療有歲文性的肽的結(jié)構(gòu)相類(lèi)似。一般而言，模擬肽在結(jié)構(gòu)上類(lèi)似于模板多肽(即，具有生物化學(xué)特性或者藥理學(xué)活性的多肽)，例如人類(lèi)抗體，<旦其具有的或者多個(gè)肽連4妻4建任選的^皮選自下述組中的連4妻4建進(jìn)4亍了取代-CH2NH-，-CH2S-,-CH2-CH2-，-CH=CH-(順式以及反式)，-COCH2-，CH(OH)CH2-，以及畫(huà)CH2SO-，所述的取^通過(guò)本領(lǐng)域熟知的方法來(lái)完成。利用同樣類(lèi)型的D-氨基酸(例如，利用D-賴(lài)氨酸耳又代L-賴(lài)氨酸)對(duì)共有序列中的或者多個(gè)氨基酸進(jìn)4亍系統(tǒng)性的耳又^f戈，可以用以生成更加穩(wěn)、定的肽。除此之夕卜，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的方法(參見(jiàn)Rizo以及Gierasch于1992年在Ann.Rev.Biochem.《生物化學(xué)年鑒》61:387中發(fā)表的文章)生成一種限制性肽，所述的限制性肽包括共有序列或者本質(zhì)上相同的共有序列變體；例如，通過(guò)加入內(nèi)部半胱氨酸殘基的方法，其中所述的半胱氨酸殘基能夠形成存在于分子內(nèi)的二碌J定，所述的二石克4建能夠-使所述的肽發(fā)生環(huán)化。用在這里的所述術(shù)語(yǔ)"試劑"代表的是化學(xué)化合物，化學(xué)化合物的混合物，生物大分子，或者是來(lái)自于生物物質(zhì)的纟是取物。這里所-使用的所述術(shù)語(yǔ)"標(biāo)記"或者'4皮標(biāo)記的"指的是一種可探測(cè)性的標(biāo)記物的導(dǎo)入，例如，導(dǎo)入一種》文射性標(biāo)記的氨基酸，或者將生物素化的半族與多肽進(jìn)4亍連4妻，其中所述的生物素化的半力矣能夠^皮標(biāo)記的抗生物素蛋白(例如，含有熒光素標(biāo)記物或者酶活性的鏈親合素，所述的鏈親合素可以通過(guò)光學(xué)方法或者量熱方法進(jìn)行探測(cè))進(jìn)行探測(cè)。在某些情形中，所述的標(biāo)記或者標(biāo)記物也可以是具有治療活性的。用于標(biāo)記多肽以及糖蛋白的各種方法是本領(lǐng)域已知的并且是可以^皮使用的。用于多肽的標(biāo)記的例子包括，但不局限于，下述放射性同位素或者放射性核(例如，3氫，14碳，15氮，35硫，90Y,"锝，m銦，125碘，131碘)，熒光素標(biāo)記(例如，異碌u氰酸，若丹明，稀土石粦)，酶標(biāo)記(例如，辣根過(guò)氧化物酶，p-半乳糖苷酶，熒光素酶，堿性磷酸酶)，化學(xué)發(fā)光劑，生物素化的基團(tuán)，由二級(jí)報(bào)告基因(例如，亮氨酸拉《連對(duì)序列，次級(jí)抗體的結(jié)合位點(diǎn)，金屬結(jié)合區(qū)域，表位標(biāo)簽)識(shí)別的預(yù)先確定的多肽表位。在一些實(shí)施方式中，標(biāo)記被連4妄上各種長(zhǎng)度的間隔臂(spacerarm),用以減少可能的位阻現(xiàn)象。這里所使用的所述術(shù)語(yǔ)"藥物制劑或者藥物"指的是一種化學(xué)化合物或者組合物，當(dāng)將所述的化學(xué)化合物或者組合物以適當(dāng)?shù)男问绞┯媒o患者時(shí)，能夠引發(fā)期望的治療效應(yīng)。這里所〗吏用的其他的化學(xué)術(shù)語(yǔ)依照本領(lǐng)域的常^L用法進(jìn)4亍使用，正如在McGraw-HillDictionaryofChemicalTerms《McGraw-Hill化學(xué)術(shù)語(yǔ)詞典》(Parker,S.編輯，McGraw-Hill,SanFrancisco,1985年)中所例i正的。這里所^使用的"本質(zhì)上純的"指的是目標(biāo)種類(lèi)是以占主要地位的種類(lèi)而存在的(即，以分子計(jì)，在所述的組合物中，它比其他任〗可的各種種類(lèi)都更加豐富)，并且優(yōu)選的，本質(zhì)上純化的片段是一種組合物，其中所述的目標(biāo)種類(lèi)占所存在的全部的大分子種類(lèi)的至少大約50%(以分子計(jì))。一般而言，一種本質(zhì)上純的組合物將占存在于該組合物中的全部大分子種類(lèi)的高于大約80%，更加優(yōu)選高于大約85%,90%,95%,以及99%。最4尤選的，所述的目沖示物種3皮純4匕成為基本上是同質(zhì)的(利用常規(guī)的探測(cè)方法在所述的組合物中不能探測(cè)到污70染種類(lèi))，其中所述的組合物基本上是由一種大分子種類(lèi)所組成的。所述的術(shù)語(yǔ)患者包4舌人類(lèi)以及獸醫(yī)宿主。所述的術(shù)語(yǔ)宿主包4舌人類(lèi)以及其^也哺乳動(dòng)物。人類(lèi)抗體以及抗體的人源化利用例如下文中所提供的實(shí)施例中描述的方法，生成人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體。例如，通過(guò)轉(zhuǎn)化單鏈可變區(qū)域抗體片,殳(scFv)克隆一種免疫球蛋白G形式(format),來(lái)生成一種免疫球蛋白G人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體(參見(jiàn)，例如，實(shí)施例9)。例如，人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體被重新編排成為一種同型免疫球蛋白Gl。在其他的可供選4奪的方法中，例如，利用噬菌體展示的方法形成人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，其中在所述的方法中使用僅含有人類(lèi)序列的抗體。這樣的方法是本領(lǐng)域熟知的，例如，在WO92/01047以及美國(guó)專(zhuān)利No.6,521,404中有所描述，上述文章在此引入作為參考。在這種方法中，利用天然來(lái)源或者重組來(lái)源的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10或其片段對(duì)一種噬菌體組合文庫(kù)進(jìn)行篩選，其中所述的噬菌體組合文庫(kù)帶有輕鏈以及重鏈的隨才幾組合對(duì)。在另外一種方法中，可以使用一種過(guò)程制備人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，其中在所述的過(guò)程中的至少步驟中包4舌利用人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10蛋白對(duì)轉(zhuǎn)基因的非人類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行免疫。在這種方法中，這種異種非人類(lèi)動(dòng)物的某些內(nèi)生性重鏈位點(diǎn)和/或K輕鏈位點(diǎn)喪失了作用，并且不能夠進(jìn)4于重新排列，而所述的重新排列是生成基因編碼的免疫球蛋白用以應(yīng)答抗原所必需的。除此之外，至少人類(lèi)重4連位點(diǎn)以及至少人類(lèi)輕鏈位點(diǎn)纟皮穩(wěn)、固的轉(zhuǎn)染至所述的動(dòng)物中。因此，在4十只于#1施用的抗原所產(chǎn)生的應(yīng)答中，所71述的人類(lèi)位點(diǎn)進(jìn)行重新排列，從而提供了基因編碼的人類(lèi)可變區(qū)通過(guò)進(jìn)行免疫，異種小鼠生成了能夠分泌完全人類(lèi)免疫球蛋白的B細(xì)胞。用于制備異種非人類(lèi)動(dòng)物的各種纟支術(shù)是本領(lǐng)域熟知的。例如，參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利No.6,075,181以及No.6,150,584,上述文章中的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。在生成首個(gè)異種小鼠XenoMouseTM品系的同時(shí)，這種一般性的方法被得到了證明，這是在1994年7>開(kāi)的。參見(jiàn)Green等人于1994年在NatureGenetics《自然遺傳學(xué)》7:13-21中發(fā)表的文章，上述文章中的全部?jī)?nèi)容在此引入作為參考。同才羊可以參見(jiàn)，美國(guó)專(zhuān)利No.6，162,963,6,150,584,6,114,598,6,075,181,以及5,939,598,以及日本專(zhuān)利No.3068180B2，3068506B2,以及3068507B2,以及g欠洲專(zhuān)禾jNo.EP0463151Bl,以及國(guó)際、專(zhuān)矛j申i青No.WO94/02602,WO96/34096，WO98/24893，WO00A76310以及相關(guān)的同族申請(qǐng)。在一種可供選才奪的方法中，其他人利用了一種"孩丈小位點(diǎn)(minilocus)"的方法，通過(guò)夾雜來(lái)自于所述的免疫^(guò)求蛋白(Ig)位點(diǎn)的片段(單獨(dú)的基因)，對(duì)外生性免疫球蛋白位點(diǎn)進(jìn)行模擬。因此，或者多個(gè)重鏈可變區(qū)i或(VH)基因，或者多個(gè)重《連D區(qū)域(Dh)基因，或者多個(gè)重鏈J區(qū)域(JH)基因，p恒定區(qū)域，以及另外恒定區(qū)i或(優(yōu)選是Y恒定區(qū)i或)在構(gòu)建體中形成，所述的構(gòu)建體用于插入到動(dòng)物體內(nèi)。參見(jiàn)，例如，美國(guó)專(zhuān)利No.5,545,806;5,545,807;5,591,669;5,612,205;5,625,825;5,625,126;5,633,425;5,643,763;5,661,016;5,721,367;5,770,429;5,789,215;5,789,650;5,814,318;5,877,397;5，874，299;6，023，010j以及6,255,458;以及區(qū)欠洲專(zhuān)矛jNo.O546073Bl;以及國(guó)卩示專(zhuān)矛J申請(qǐng)No.WO92/03918,WO92/22645,WO92/22670,WO93/12227，WO94/00569,WO94/25585，WO96/14436，WO97/13852,以及WO98/2484以及相關(guān)的同力矣申"i青。經(jīng)由樣史細(xì)胞的融合、大的染色體片,殳、或者完整的染色體途徑/人小鼠中生成人類(lèi)抗體的方法已經(jīng)#L介紹并且也已經(jīng)得到了i正明。參見(jiàn)歐洲專(zhuān)矛J申"i青No.773288以及843961。人類(lèi)抗小鼠抗體(HAMA)的應(yīng)答引導(dǎo)了制備嵌合抗體或者另外的人源化抗體的工業(yè)。由于嵌合抗體具有人類(lèi)的恒定區(qū)域以及免疫可變區(qū)域，可以預(yù)料到，將能夠觀察到某些人類(lèi)嵌合抗體(HACA)的應(yīng)答，特別是在所述抗體的長(zhǎng)期應(yīng)用或者多劑量應(yīng)用中。因此，為了損害人類(lèi)抗小鼠抗體或者人類(lèi)嵌合抗體的應(yīng)答的關(guān)系和/或效應(yīng)，提供作用于干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的完全人類(lèi)抗體將是合乎人意的。具有降低的免疫原性的抗體的制備也可以經(jīng)由人源化技術(shù)以及展示才支術(shù)來(lái)完成，其中4吏用適當(dāng)?shù)奈膸?kù)?？梢愿兄氖牵軌?吏用本領(lǐng)域熟知的4支術(shù)對(duì)鼠科動(dòng)物的抗體或者來(lái)自于其他物種的抗體進(jìn)行人源化處理或者靈長(zhǎng)目源化處理。參見(jiàn)，例如，Winter以及Harris于1993年在ImmunolTday《當(dāng)今免疫學(xué)》14:43-46中發(fā)表的文章以及Wright等人于1992年在Crit，ReviewsinImmunol.《免疫學(xué)的評(píng)i侖與回顧》12125-168中發(fā)表的文章。可以利用重組DNA才支術(shù)對(duì)所述的目標(biāo)抗體進(jìn)4亍工#呈4匕處理，/人而利用相應(yīng)的人類(lèi)序列》于所述的重鏈恒定區(qū)i或(CH1)，重鏈恒定區(qū)域2(CH2),重鏈恒定區(qū)域(CH3),4交鏈區(qū)域，和/或骨架區(qū)域進(jìn)行取代(參見(jiàn)WO92102190以及美國(guó)專(zhuān)利No.5,530,101,5,585,089,5,693,761,5,693,792，5,714,350,以及5,777,085)。同樣的，使用免疫球蛋白cDNA構(gòu)建嵌合免疫球蛋白基因是本領(lǐng)域已知的(參見(jiàn)Liu等人于1987年在P.N.A.S.《美國(guó)科學(xué)院院刊》84:3439中發(fā)表的文章以及于1987年在J.Immunol.《免疫學(xué)雜73志》139:3521中發(fā)表的文章)。從雜交瘤或者制備所述抗體的其他細(xì)胞中分離出mRNA并且用于制備cDNA。4吏用特異性的引物通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可以對(duì)所述的目標(biāo)cDNA進(jìn)^f亍擴(kuò)增(參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利No.4，683,195以及4,683,202)?；蛘?，制備文庫(kù)并且對(duì)其進(jìn)行篩選，乂人而分離出所述的目標(biāo)序列。隨后，將編碼所述抗體的可變區(qū)域的所述DNA序列融合到人類(lèi)恒定區(qū)域序列中。所述的人類(lèi)恒定區(qū)域基因序列可以在Kabat等人于1991年在SequencesofProteinsofimmunologicalInterest《具有免疫學(xué)興趣的蛋白序列》N丄H美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院出版，no.91-3242中發(fā)表的文章中找到?？梢詮囊阎目寺≈腥菀椎墨@得人類(lèi)恒定區(qū)域基因?？梢岳闷谕男?yīng)子功能來(lái)指導(dǎo)同型體的選#^,所述的效應(yīng)子功能是例如補(bǔ)體結(jié)合，或者抗體依賴(lài)性細(xì)力包毒作用的活性。優(yōu)選的同型體是免疫J求蛋白Gl,免疫^(guò)求蛋白G3以及免疫5求蛋白G4。所述的人類(lèi)輕鏈恒定區(qū)域，k或者X,均可以被使用。之后，利用常規(guī)的方法使所述的嵌合的人源化抗體進(jìn)行表達(dá)。抗體片段，例如Fv，F(xiàn)Ub，)2以及Fab可以通過(guò)完整蛋白的裂解來(lái)制備，例如，通過(guò)蛋白酶裂解或者化學(xué)裂解?；蛘?，可以i殳計(jì)一種截短型基因。例如，一種編碼所述的Fub，,2片萃殳中的一部分的嵌合基因，應(yīng)當(dāng)包括編碼所述的重鏈的重鏈恒定區(qū)域1以及鉸鏈區(qū)域的DNA序列，以及翻i,終止密碼子，/人而生成所述的截短型分子?？梢允褂弥劓?H)以及輕鏈(L)的J區(qū)域中的共有序列來(lái)設(shè)計(jì)寡核苦酸，所述的寡核普酸作為引物;波用來(lái)向所述的J區(qū)域中導(dǎo)入有效的限制性位點(diǎn)，用于進(jìn)行隨后的可變區(qū)域片段與人類(lèi)恒定區(qū)i或片|殳的連4妄?？梢酝ㄟ^(guò)定點(diǎn)突變的方式只于恒定區(qū)域的cDNA進(jìn)行修飾，從而在所述的人類(lèi)序列的類(lèi)似位置處設(shè)置限制性位點(diǎn)。表達(dá)載體包括質(zhì)粒，逆轉(zhuǎn)錄病毒，酵母人工染色體(YAC),來(lái)自于EB病毒的游離體，以及類(lèi)似物質(zhì)。一種^更利的載體是這樣的它編碼一種功能完全的人類(lèi)重鏈恒定區(qū)域或者輕鏈恒定區(qū)域免疫球蛋白序列，其中在適當(dāng)?shù)南拗菩晕稽c(diǎn)上進(jìn)行了工程化處玉里，這—才羊一.來(lái)，^f壬4可的重在l可變—或.者4圣會(huì)€可變-31,序列可以#史容易的插入并且進(jìn)4亍表達(dá)。在這樣的載體中，剪4妄通常發(fā)生在所述被插入的J區(qū)域中的所述剪接供體位點(diǎn)與在所述的人類(lèi)恒定區(qū)域前面的所述剪4妄供體位點(diǎn)之間，并且也發(fā)生在存在于所述的人類(lèi)重鏈恒定區(qū)i或外顯子中的所述剪4妄區(qū)i或中。多苦酸化以及轉(zhuǎn)錄終止發(fā)生在所述的編碼區(qū)域下游的天然染色體位點(diǎn)上。所得到的嵌合抗體可以與^f壬意的強(qiáng)大啟動(dòng)子進(jìn)行結(jié)合，其中所述的啟動(dòng)子包括逆轉(zhuǎn)錄病毒長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTR),例如，SV-40早期啟動(dòng)子(參見(jiàn)Okayama等人于1983年在Mol.CellBio.《分子生物學(xué)》3:280中發(fā)表的文章)，勞斯肉瘤病毒長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTR)(參見(jiàn)Gorman等人于1982年在P.N.A.S.《美國(guó)科學(xué)院院刊》79:6777中發(fā)表的文章)，以及莫洛尼鼠白血病病毒長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTR)(參見(jiàn)Grosschedl等人于1985年在Cell《纟田胞》41:885中發(fā)表的文章)。同^f羊的，可以感知的是，天然的免疫^(guò)求蛋白啟動(dòng)子以及類(lèi)似的啟動(dòng)子是可以被使用的。而且，可以經(jīng)由展示類(lèi)才支術(shù)來(lái)生成人類(lèi)抗體或者來(lái)自于其他物種的抗體，其中所述的展示類(lèi)技術(shù)包括，^旦不局限于，噬菌體展示，逆轉(zhuǎn)錄病毒展示，核糖體展示，以及其他的技術(shù)，使用本領(lǐng)域熟知的技術(shù)進(jìn)行，并且可以對(duì)得到的分子進(jìn)行額外的成熟，例如親和力成熟，因?yàn)檫@些才支術(shù)是本領(lǐng)i或中熟知的。參見(jiàn)Wright以及Harris在前文中所述的發(fā)表的文章，Hanes以及Plucthau于1997年在PNASUSA《美國(guó)-牛學(xué)院院刊》94:4937-4942中發(fā)表的文章(核并唐體展示)，Parmley以及Smith于1988年在Gene《基因》73:305-318中發(fā)表的文章(噬菌體展示)，Scott于1992年在TIB5《生物技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)》17:241-245中發(fā)表的文章，Cwirla等人于1990年在PNASUSA《美國(guó)科學(xué)院院刊》87:6378-6382中發(fā)表的文章，Russel等人于1993年在Nucl.AcidsResearch《沖亥酉臾的研究》21:1081-1085中發(fā)表的文章，Hoganboom等人于1992年在Immunol.Reviews《免疫學(xué)評(píng)-論》130:43-68中發(fā)表的文章，Chiswell以及McCafferty于1992年在TIBTECH《生物^支術(shù)發(fā)展趨勢(shì)》10:80-8A中發(fā)表的文章，以及美國(guó)專(zhuān)利No.5,733,743。如果利用展示技術(shù)來(lái)制備不屬于人類(lèi)的抗體，可以按照上文中所描述的方法對(duì)這些抗體進(jìn)4于人源化處理。利用這些4支術(shù)，可以在干擾素"i秀導(dǎo)蛋白-10表達(dá)細(xì)胞、干擾素誘導(dǎo)蛋白-10本身、干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的各種形式、它們的表^f立或者肽、以及其中的表達(dá)文庫(kù)中生成4元體(參見(jiàn)，例如，美國(guó)專(zhuān)利No.5，703，057)，在此之后可以按照上文中所描述的方法對(duì)于所述抗體所具有的上文中所描述的活性進(jìn)4亍篩選。其4也治療劑的"i殳計(jì)以及生成導(dǎo)蛋白-10的抗體的活性，可以容易的設(shè)計(jì)出超越抗體半族的其4也的治療方法的形態(tài)。這沖羊的形態(tài)包4舌，卩旦不局限于，高級(jí)4元體治療劑，例如雙特異性抗體，免疫毒素，以及放射性標(biāo)記的治療方法，生成肽的治療方法，基因療法，特別是機(jī)體內(nèi)的反義治療方法，以及小分子。例如，在與雙特異性抗體有關(guān)的情形中，可以生成的雙特異性抗體包括(i)兩種抗體，其中一種對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10具有特異性，而另外一種對(duì)與其一同共軛的另外分子具有特異性，(ii)一種抗體，所述的抗體中的一條鏈對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10具有特異性，而另外一條鏈對(duì)另外分子具有特異性，或者(iii)一種抗體以及其他分子，其中所述的抗體對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10具有特異性。〗吏用本領(lǐng)域熟知的4支術(shù)生成這樣的雙特異性抗體，例如，當(dāng)出現(xiàn)(i)以及(ii)中所述的情況時(shí)，參見(jiàn)，例如，F(xiàn)anger等人于1994年在ImmunolMethods《免疫學(xué)方法》4:72-81中發(fā)表的文章以及Wright以及Harris在前文中所述的發(fā)表的文章，并且當(dāng)出玉見(jiàn)(iii)中所述的情況時(shí)，參見(jiàn)，例如，Traunecker等人于1992年在Int丄Cancer(Suppl.)《國(guó)際癌癥雜志(增刊)》7:51-52中發(fā)表的文章。在與免疫毒素有關(guān)的情形中，可以利用本領(lǐng)域熟知的^支術(shù)對(duì)抗體進(jìn)行<務(wù)飾，使其發(fā)揮免疫毒素的作用。參見(jiàn)，例如，Vitetta于1993年在ImmunolToday《當(dāng)今免疫學(xué)》14:252中發(fā)表的文章。同樣可以參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利No.5，194，594。在與》丈射性標(biāo)記的抗體的制備有關(guān)的情形中，同樣可以利用本領(lǐng)域熟知的技術(shù)容易的制備出這樣的經(jīng)過(guò)修飾的抗體。參見(jiàn)，例如，Junghans等人在CancerChemotherapyandBiotherapy《癌癥的4匕學(xué)療、法以及生物療法》655-686中發(fā)表的文章(第二版，Chafner以及Longo編輯，Lippi腦ttRaven,1996年)。同樣可以參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利No.4,681，581，4,735,210，5,101,827，5,102,990(RE35,500)，5,648,471，以及5,697,902。每一種免疫毒素以及i文射性標(biāo)記的分子都可能殺滅表達(dá)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的細(xì)胞，并且特別能夠殺滅那些本發(fā)明所述的抗體在其中有效的發(fā)揮作用的細(xì)胞。在與治療性肽的生成有關(guān)的情形中，通過(guò)利用與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10及其抗體相關(guān)的結(jié)構(gòu)信息，或者通過(guò)對(duì)肽文庫(kù)的篩選，能夠生成直接作用于千擾素誘導(dǎo)蛋白-10的治療活性肽，其中所述的干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10的抗體例如是本發(fā)明所述的抗體。對(duì)于肽治療劑的設(shè)計(jì)以及篩選在下述文章中進(jìn)行了討-論Houghten等人于1992年在Biotechniques《生物技術(shù)》13:412-421中發(fā)表的文章，Houghten于1985年在PNASUSA《美國(guó)牙牛學(xué)院院刊》82:5131-5135中發(fā)表的文章，Pinalla等人于1992年在Biotechniques《生4勿4支術(shù)》13:901-905中發(fā)表的文章，Blake以及Litzi-Davis于1992年在BioConjugateChem.《生物結(jié)合物4匕學(xué)》3:510-513中發(fā)表的文章。免疫毒素以及放射性標(biāo)記分子還可以以一種與在與上文中與抗體有關(guān)的內(nèi)容中所討i侖的肽半》矣相關(guān)內(nèi)容相類(lèi)似的方式進(jìn)行制備。假定所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10分子(或者是一種形式，例如是一種剪接變體或者改變的形式)在一種疾病的過(guò)程中在功能上是活化的，那么同樣有可能通過(guò)常規(guī)的技術(shù)來(lái)設(shè)計(jì)它的基因以及反義治療方法。這樣的形態(tài)可以被用來(lái)調(diào)節(jié)所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的功能。與此相關(guān)的是，本發(fā)明所述的抗體促進(jìn)了功能性檢測(cè)的設(shè)計(jì)以及使用，其中所述的功能性4企測(cè)是與所述的抗體相關(guān)的。在國(guó)際專(zhuān)利申"i青No.WO94/29444中詳細(xì)討i侖了反義治療方法的i殳計(jì)以及策略。基因療法的設(shè)計(jì)以及策略是熟知的。然而，具體的，涉及到機(jī)體內(nèi)的基因治療4支術(shù)的使用能夠一皮證明是才各外有利的。參見(jiàn)，例如，Chen等人于1994年在HumanGeneTherapy《人類(lèi)的基因治療》5:595-601中發(fā)表的文章以及Marasco于1997年在GeneTherapy《基因治療》4:11-15中發(fā)表的文章。在國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)No.WO97/38137中也對(duì)基因療法的一般設(shè)計(jì)以及涉及基因療法的顧慮進(jìn)行了討論。乂人所述的干4尤素誘導(dǎo)蛋白-10分子的結(jié)構(gòu)及其與本發(fā)明所述的其他分子間的相互反應(yīng)中收集到的知識(shí)以及其他內(nèi)容可以#皮用來(lái)理性的"i殳計(jì)其他的治療方法形態(tài)，其中所述的本發(fā)明所述的其他分子是例如本發(fā)明所述的抗體。在這一點(diǎn)上，理性的藥物設(shè)計(jì)技術(shù)例如X-射線結(jié)晶學(xué)，計(jì)算機(jī)輔助(或者協(xié)助)化的分子模型(CAMM),定量或者定性的構(gòu)效關(guān)系(QSAR),以及類(lèi)似的技術(shù)可以被用來(lái)集中進(jìn)行藥物探索的努力。理性的設(shè)計(jì)允許對(duì)蛋78白結(jié)構(gòu)或者綜合結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)言，其中所述的蛋白結(jié)構(gòu)或者綜合結(jié)構(gòu)能夠與其分子或者具體形式發(fā)生相互作用，其可以被用來(lái)修飾或者條件所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活性。這樣的結(jié)構(gòu)可以被化學(xué)合成或者在生物系統(tǒng)中進(jìn)4亍表達(dá)。這一方法已經(jīng)在下述文章中^^尋以^H侖Capsey等人于1988年在GeneticallyEngineeredHumanTherapeuticDrugs《遺傳工禾呈化的人類(lèi)治療學(xué)藥物》(Stockton出版社，紐約)。而且，可以i殳計(jì)并且合成組合文庫(kù)，并且將其用于篩選程序中，例如高通量篩選。治療劑的施用以及配制可以感知的是，依照本發(fā)明所述的治療劑實(shí)體的施用將可以與適當(dāng)?shù)妮d體，賦形劑，以及其他試劑一同進(jìn)行，其中將所述的載體，賦形劑以及其他試劑導(dǎo)入到制劑中，從而提供改善的傳遞性，遞送性，耐受性，以及類(lèi)似性質(zhì)。大多l(xiāng)t適合的制劑可以在凈皮所有的藥物4匕學(xué)家已知的頭見(jiàn)貝'J中找到Remington'sPharmaceuticalSciences《雷明頓氏制藥矛牛學(xué)》(第15片反，MackPublishingCompany,Easton，PA,1975年)，凈爭(zhēng)另'J是其中由Blaug,Seymour編寫(xiě)的第87章。這些制劑包括，例如，粉末，貝占劑，藥膏，凝膠劑，蠟劑，油劑，脂質(zhì)體，含有脂質(zhì)體(陽(yáng)離子的或者陰離子的)的泡嚢(例如LipofectinTM),DNA共軛物，無(wú)水吸收貼劑，水包油乳液以及油包7JC乳液，乳液，聚乙二醇(各種不同分子量的聚乙二醇)，半固態(tài)凝膠，以及含有聚乙二醇的半固態(tài)混合物。上述才是及的混合物中的任意一種用于本發(fā)明所述的治療以及療法中可能是恰當(dāng)?shù)模灰嬖谟谒鲋苿┲械幕钚猿煞植粫?huì)#皮所述的制劑進(jìn)行滅活，并且所述的制劑對(duì)于所述的施用途徑而言是生理學(xué)相容的以及耐受的。同樣可以參見(jiàn)BaldrickP.于2000年在Regul.ToxicolPharmacol.《常頭見(jiàn)毒物學(xué)以及常頭見(jiàn)藥理學(xué)》32(2):210-8中發(fā)表的文章"Pharmaceuticalexcipientdevelopment:theneedforpreclinicalguidance《藥4勿貝武形齊寸的發(fā)展是臨床前指導(dǎo)的需要》"，WangW.于2000年在Int丄Pharm.《國(guó)際藥理學(xué)雜志》203(1-2):1-60中發(fā)表的文章"Lyophilizationanddevelopmentofsolidproteinpharmaceuticals《固體蛋白藥#勿6勺凍干法以及發(fā)展》"，CharmanWN于2000年在JPharmSci.《藥物科學(xué)雜志》89(8):967-78中發(fā)表的文章"Lipids,lipophilicdrugs,andoraldrugdelivery-someemergingconcepts《月旨質(zhì)體，親月旨')"生藥物，以及口月l藥物的遞送中顯i見(jiàn)出的某些7見(jiàn)念》"，Powell等人于1998年在PDAJPharmSciTechnol.《PDA藥物科技雜志》52:238-311中發(fā)表的文章"Compendiumofexcipientsforparenteralformulations《用于腸胃外制劑中的賦形劑概略》"以及上述文章中所引用到的與藥物化學(xué)家熟知的制劑、i陚形劑以及載體相關(guān)的其他信息。人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體以及本發(fā)明所述的治療制劑被用來(lái)治療或者緩解與免疫相關(guān)性障礙有關(guān)的癥狀，其中所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體包括本發(fā)明中所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，其中所述的免疫相關(guān)性障礙是例如，自身免疫性疾病或者炎性障礙。自身免疫性疾病包4舌，例如獲4尋性免疫缺陷綜合癥(AIDS,它是一種帶有自身免疫成分的病毒性疾病)，斑禿，強(qiáng)直性脊柱炎，抗磷脂抗體綜合癥，自身免疫性愛(ài)迪生氏病，自身免疫性溶血性貧血，自身免疫性肝炎，自身免疫性?xún)?nèi)耳疾病(AIED),自身免疫性淋巴增生綜合癥(ALPS),自身免疫性血小板減少性紫癜(ATP)，白塞病，心月幾癥，口炎性腹瀉，皰滲樣皮炎，'隻性疲勞免疫功能紊亂綜合癥(CFIDS)，慢性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病(CIPD),瘢痕性類(lèi)天皰瘡，冷凝集素病，肢端硬皮綜合癥，克羅恩氏病，過(guò)敏性紫癜，幼年型皮肌炎，盤(pán)狀狼癡，原發(fā)性混合型冷凝3求蛋白血癥，纖維組織炎癥，葛瑞夫氏病，格-巴二氏綜合癥，橋本氏甲狀腺炎，特發(fā)性肺纖維化，特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)，免疫J求蛋白A腎病，月夷島素依賴(lài)性并唐尿病，幼年型慢性關(guān)節(jié)炎(斯蒂爾病)，幼年型風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，美尼爾氏病，混合結(jié)締iEL織病，多發(fā)性碩j匕癥，重癥月幾無(wú)力，惡'1"生貧血，結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎，多軟骨炎，多腺體綜合癥，風(fēng)濕性多肌痛，多肌炎以及皮肌炎，原發(fā)性血中丙球蛋白缺乏，原發(fā)性膽汁性肝硬化，4艮屑病，關(guān)節(jié)病性4艮屑病，雷諾氏癥候群，萊特氏綜合癥，風(fēng)濕熱，風(fēng)濕,性關(guān)節(jié)炎，肉^犬瘤病，石更皮病(進(jìn)4亍性系統(tǒng)性石更4匕癥(PSS)，也被稱(chēng)為系統(tǒng)性硬化癥(SS)),干燥綜合癥，僵人綜合癥，系統(tǒng)性紅斑《良癡，大動(dòng)月永炎，顳動(dòng)月永炎/巨細(xì)月包動(dòng)脈炎，潰瘍性結(jié)腸炎，葡萄膜炎，白癜風(fēng)以及韋格納肉芽腫。炎性障礙包括，例如，慢性炎性障礙以及急性炎性障礙。炎性障礙的例子包括阿爾茨海默氏癥，哞喘，遺傳性過(guò)敏癥，過(guò)敏癥，動(dòng)脈-更化癥，支氣管哮喘，濕滲，血管J求性腎炎，移纟直物抗宿主病，溶血性貧血，骨關(guān)節(jié)炎，膿血癥，腦卒中，組織及器官移植，脈管炎，糖尿病性視網(wǎng)膜病變以及由通氣機(jī)導(dǎo)致的肺損傷。所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體能夠調(diào)節(jié)宿主中的免疫應(yīng)答，例如，在人類(lèi)宿主中調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。在一種實(shí)施方式中，將用于治療免疫相關(guān)性障礙的所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體組合物與各種抗細(xì)胞因子試劑或者抗趨化因子試劑中的任意一種進(jìn)4亍組合施用。適合的抗細(xì)月包因子試劑或者4元趨化因子試劑，能夠識(shí)別例如，細(xì)胞因子例如白細(xì)胞介素1(IL-1)，白細(xì)胞介素2,白細(xì)月包介素4，白細(xì)月包介素6，白細(xì)月包介素12，白細(xì)月包介素13，白細(xì)月包介素15，白細(xì)月包介素17,白細(xì)月包介素18，白細(xì)月包介素20,白細(xì)月包介素21,白細(xì)月包介素22，白細(xì)月包介素23,白細(xì)胞介素27以及白細(xì)胞介素31，和/或趨化因子例如巨噬細(xì)胞炎81性蛋白1(MIP1)a,巨噬細(xì)胞炎性蛋白1(3,正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌調(diào)節(jié)因子(RANTES)，單核細(xì)月包趨化蛋白1(MCP1),干擾素誘導(dǎo)蛋白-10,干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC),干擾素誘生單核因子(MIG)，基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(SDF)以及神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine)。在一種實(shí)施方式中，將用于治療免疫相關(guān)性障礙的所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體以及所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體組合物與一種或者多種其他試劑耳關(guān)合施用，或者與其他試劑的組合聯(lián)合施用。例如，將所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體以及其他的試劑配制成一種單一的治療劑組合物，并且所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是同時(shí)施用的。或者，將所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與其他的試劑彼此分開(kāi)，例如，將每一種配制成單獨(dú)的治療劑組合物，并且所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是同時(shí)施用的，或者所述的人類(lèi)千擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是在治療方案的過(guò)程中的不同時(shí)間進(jìn)行施用的。例如，所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體是在所述的其他試劑的施用之前進(jìn)4亍施用的，所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體是在所述的其他試劑的施用之后隨之進(jìn)4亍施用的，或者所述的人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體與所述的其他試劑是以一種交替的方式進(jìn)行施用的。正如本發(fā)明中所描述的，所述的人類(lèi)干4尤素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體以及其他試劑以單一的劑量形式施用或者以多劑量的形式施用。例如，在多發(fā)性硬化癥的治療當(dāng)中，所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，或者所述抗體的治療制劑，是與一種或者多種其他的試劑一同進(jìn)行施用的，其中所述的其他的試劑是例如干擾素(3la，干擾素Plb,醋酸格拉替雷，那他珠單克隆抗體，克帕松，以及上述試劑的組合物。所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是同時(shí)施用的，或者所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是在治療方案的過(guò)程中的不同時(shí)間進(jìn)4亍施用的。在克羅恩氏病的治療當(dāng)中，所述的人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體，或者所述抗體的治療制劑，是與一種或者多種其他的試劑一同進(jìn)4亍施用的，其中所述的其他的試劑是例如抗生素，氨基水楊酸鹽，英夫利西單克隆4元體，阿達(dá)姆單克隆4元體，以及上述^式劑的組合物。適合的抗生素包括，例如，甲硝達(dá)唑和/或環(huán)丙沙星。適合的氨基水楊酸鹽包括，例如，麥色拉明和/或柳氮磺胺吡啶。所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是同時(shí)施用的，或者所述的人類(lèi)干4尤素"i秀導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是在治療方案的過(guò)程中的不同時(shí)間進(jìn)4亍施用的。在潰瘍性結(jié)腸炎的治療當(dāng)中，所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，或者所述抗體的治療制劑，是與一種或者多種其他的試劑一同進(jìn)行施用的，其中所述的其他的試劑是例如6-巰基。票呤，硝基咪唑硫。票呤，英夫利西單克隆抗體以及上述試劑的組合物。所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是同時(shí)施用的，或者所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是在治療方案的過(guò)#呈中的不同時(shí)間進(jìn)4亍施用的。在4艮屑病的治療當(dāng)中，所述的人類(lèi)干護(hù)G素誘導(dǎo)蛋白-IO抗體，或者所述抗體的治療制劑，是與一種或者多種其他的試劑一同進(jìn)行施用的，其中所述的其他的試劑是例如阿法賽特，依法利5朱單克隆抗體，阿達(dá)木單克隆抗體，英夫利西單克隆抗體，環(huán)孢霉素，曱氨蟲(chóng)萊卩令，以及上述試劑的組合物。所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其4也試劑是同時(shí)施用的，或者所述的人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其他試劑是在治療方案的過(guò)程中的不同時(shí)間進(jìn)4亍施用的。在動(dòng)脈硬化癥的治療當(dāng)中，所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體，或者所述抗體的治療制劑，是與一種或者多種其他的試劑一同進(jìn)行施用的，其中所述的其他的試劑是例如法華林，降膽固醇類(lèi)藥物，以及上述試劑的組合物。適合的降膽固醇類(lèi)藥物包括，例如，^也汀類(lèi)以及貝特類(lèi)。所述的人類(lèi)干護(hù)O素i秀導(dǎo)蛋白-lO4元體與所述的其他試劑是同時(shí)施用的，或者所述的人類(lèi)千擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體與所述的其4也試劑是在治療方案的過(guò)#呈中的不同時(shí)間進(jìn)4亍施用的。所述的人類(lèi)干護(hù)G素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體以及所述抗體的治療制劑被用在治療或者緩解與免疫相關(guān)性障礙有關(guān)的癥狀的方法之中。例如，本發(fā)明中所述的組合物#:用來(lái)對(duì)這里所描述的4壬意一種自身免疫性疾病以及炎性障礙的癥狀進(jìn)行治療或者緩解。與自身免疫性障礙相關(guān)的癥狀包括，例如，炎癥，發(fā)熱，食欲不振，體重減輕，"復(fù)部癥狀例如，腹痛，腹瀉或者侵_秘、，關(guān)節(jié)痛或者疼痛(關(guān)節(jié)痛)，疲勞，皮滲，貧血，對(duì)寒冷的才及度每l感(雷諾氏癥候群)，月幾肉4欠弱，月幾肉疲勞，皮月夫或者組織色調(diào)的改變，呼吸短促或者其4也異常的呼吸類(lèi)型，胸部疼痛或者胸部月幾肉的收縮，心率異常(例如，升高或者降低)，光敏感，視力模糊或者其他異常的視覺(jué)，以及器官功能的降低。向患有免疫相關(guān)性障礙的宿主施用本發(fā)明所述的人類(lèi)干拔』素i秀導(dǎo)蛋白-io抗體以及所述抗體的治療制劑，其中所述的免疫相關(guān)性障礙是例如一種自身免疫性疾病或者一種炎性障礙。可以利用本領(lǐng)域已知的方法對(duì)患有自身免疫性疾病或者炎性障礙的宿主進(jìn)行識(shí)別。例如，使用各種臨床檢驗(yàn)和/或?qū)崱€室檢驗(yàn)中的任意一種對(duì)免疫狀況進(jìn)行評(píng)價(jià)，乂人而對(duì)患有自身免疫性疾病的宿主進(jìn)行識(shí)別，其中所述的臨床檢驗(yàn)和/或?qū)?驗(yàn)室纟企-驗(yàn)是例如，身體檢查，放射學(xué)4全查以及血液、尿液及大便分析，其中所述的自身免疫性疾病是例如克羅恩氏病，狼瘡或者銀屑病。例如，可以通過(guò)使用例如所述的抗核抗體檢驗(yàn)(ANA)來(lái)確定在所述的血液中是否存在細(xì)胞核的自身抗體，從而對(duì)患有狼瘡的患者進(jìn)行識(shí)別?？梢酝ㄟ^(guò)使用例如上消化道(GI)攝影和/或結(jié)腸鏡檢查分別對(duì)小腸以及大腸進(jìn)行評(píng)1介，從而對(duì)患有克羅恩氏病的患者進(jìn)行識(shí)另'J。可以通過(guò)例如對(duì)取自于受到侵染的皮膚斑點(diǎn)中的組織進(jìn)行微觀檢查，從而對(duì)患有4艮屑病的患者進(jìn)行識(shí)別，而可以通過(guò)使用例如血液4企測(cè)和/或x-射線或者其4也iU象"i平估，乂人而只于患有風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者進(jìn)4亍識(shí)別。可以通過(guò)4吏用例如血液4企測(cè)，心電圖(ECG),壓力測(cè)試，冠狀血管造影術(shù)，超聲波，以及計(jì)算機(jī)斷層掃描(CT),從而對(duì)患有動(dòng)脈硬化癥的患者進(jìn)4于識(shí)別。如果實(shí)現(xiàn)了各種實(shí)驗(yàn)室結(jié)果或者臨床結(jié)果中的任何一種，則認(rèn)為向患有免疫相關(guān)性障礙的患者施用人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體是成功的，其中所述的免疫相關(guān)性障礙是例如一種自身免疫性疾病或者一種炎性障」礙。例如，當(dāng)一種或者多種與所述的障礙-相關(guān)的癥狀得到緩解、減輕、抑制或者不再發(fā)展到進(jìn)一步的狀態(tài)即惡化時(shí)，就認(rèn)為向患有免疫相關(guān)性障礙的患者施用人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體是成功的，其中所述的免疫相關(guān)性障礙是例如一種自身免疫性疾病或者一種炎性障5竽。如果所述的障-f,例如，一種自身免疫性障礙發(fā)生緩解或者不再發(fā)展到進(jìn)一步的狀態(tài)即惡化時(shí)，就i人為向患有免疫相關(guān)性障礙的患者施用人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗體是成功的，其中所述的免疫相關(guān)性障礙是例如一種自身免疫性疾病或者一種炎性障礙。診斷制劑以及預(yù)防制劑本發(fā)明所述的完全人類(lèi)抗干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體被用來(lái)作為診斷制劑以及預(yù)防制劑。在一種實(shí)施方式中，為患者施用本發(fā)明所述的人類(lèi)干護(hù)C素"i秀導(dǎo)蛋白-lO單克隆抗體，其中所述85的患者具有發(fā)展成上述提及的自身免疫性疾病中的一種的危險(xiǎn)。患者易患有一種或者多種上述提及的自身免疫性疾病的易患病體質(zhì)可以-使用基因型、血清學(xué)或者生物化學(xué)標(biāo)記物來(lái)確定。在本發(fā)明的另外一種實(shí)施方式中，向人類(lèi)個(gè)體中施用一種人類(lèi)干護(hù)L素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體，其中所述的人類(lèi)個(gè)體4皮-珍斷為患有一種或者多種上述4是及的自身免疫性疾病。在i貪斷之后，施用人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體來(lái)緩解或者逆轉(zhuǎn)由自身免疫性所產(chǎn)生的作用。本發(fā)明所述的抗體同樣可以有效的用來(lái)在患者樣本中對(duì)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行探測(cè)，并且因此可以有效的作為診斷劑。例如，本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體可以被用在體外沖企測(cè)中，例如，酶耳關(guān)免疫口及附4全觀'J(ELISA)，用來(lái)在患者樣本中探測(cè)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的水平。在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明所述的人類(lèi)干護(hù)乙素"i秀導(dǎo)蛋白-10抗體一皮固定在一種固體支持物上(例如，孩i滴定一反的孔中)。所述的固定化抗體^皮用來(lái)作為一種捕獲抗體，用于捕獲測(cè)試樣本中可能存在的4壬何的干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-10。在將所述的固定化抗體與一種患者樣本進(jìn)行接觸之前，對(duì)所述的固體支持物進(jìn)行漂洗并且4吏用阻滯劑對(duì)其進(jìn)4于處理，乂人而預(yù)防所述的,皮分析物發(fā)生非特異性的吸附，其中所述的阻滯劑是例如水貂蛋白或者白蛋白。隨后，-使用受試樣本對(duì)所述的孔進(jìn)4亍處理，其中所述的受試樣本被懷疑為含有所述的抗原，或者使用含有標(biāo)準(zhǔn)劑量的抗原的溶液對(duì)所述的孔進(jìn)行處理。這樣的樣本是，例如，來(lái)自于宿主的血清樣本，其中所述的宿主被懷疑為含有一定水平的循環(huán)抗原，#^人為可以進(jìn)4于病理學(xué)的it斷。在將所述的受試才羊本或者標(biāo)準(zhǔn)溶液漂洗#皁之后，利用另外一種經(jīng)過(guò)可纟果測(cè)性標(biāo)i己處理的抗體對(duì)所述的固體支持物進(jìn)行處理。所述的經(jīng)過(guò)標(biāo)記的另外一種抗體被用來(lái)作為^t笨測(cè)抗體。測(cè)量可^t果測(cè)性標(biāo)記的水平，并且通過(guò)與來(lái)自于所述的標(biāo)準(zhǔn)樣本的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比較，乂人而確定出存在于所述的受試樣本中的所述干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗原的濃度?？梢愿兄氖牵詚使用本發(fā)明所述的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體進(jìn)行體外診斷4企測(cè)所得到的結(jié)果為基礎(chǔ)，依據(jù)所述的干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10抗原的表達(dá)水平對(duì)宿主的疾病(例如，自身免疫性障礙或者炎性障礙)進(jìn)行分級(jí)(stage)是可能的。對(duì)于一種給定的疾病而言，從宿主中揭:耳又血液樣本，其中所述的宿主祐珍斷為處于所述疾病的發(fā)展的各種不同階,殳中，和/或處于在所述疾病的治療的各種不同的時(shí)間點(diǎn)處。使用能夠?yàn)榘l(fā)展或者治療的每個(gè)階段提供統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性結(jié)果的樣本群體，可以指定出所述的抗原的濃度范圍，這些所述的濃度范圍被認(rèn)為是各個(gè)階段的特征。在這里所引用的全部的/>開(kāi)出版物以及專(zhuān)利文獻(xiàn)均在此引入作為參考，就如同每一篇這樣的公開(kāi)出版物或者文獻(xiàn)均被具體的并且單獨(dú)的指出在此引入作為參考。公開(kāi)出版物以及專(zhuān)利文獻(xiàn)的引用并不意在認(rèn)可其中的任何一篇為相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)，也并不構(gòu)成對(duì)關(guān)于它們的內(nèi)容或者日期的"i人可。本發(fā)明現(xiàn)在通過(guò)4巽寫(xiě)"i兌明書(shū)的方式進(jìn)4亍描述，本領(lǐng)域4支術(shù)人員將可以iU只到，本發(fā)明能夠以各種實(shí)施方式的形式進(jìn)4于實(shí)踐，并且上述的i兌明以及下述的實(shí)施例的目的在于描述，并且不構(gòu)成對(duì)于隨后的4又利要求的限制。實(shí)施例下述的實(shí)施例，包括所進(jìn)行的試驗(yàn)以及所得到的結(jié)果僅僅為出于描述的目的而提供，并不能被解釋成對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1:人類(lèi)干護(hù)乙素i秀導(dǎo)蛋白-lO的克隆，表達(dá)以及純4匕克隆利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增，在表達(dá)質(zhì)粒pET43(NovagenMadison，WI)中進(jìn)4亍編石馬所述的成熟蛋白人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-IO(hIPlO)(NM001565)的基因的克隆。在所述的NusA蛋白的羧基末端導(dǎo)入所述的X因子蛋白酶裂解位點(diǎn)的序列。在所述的趨化因子編碼序列的羧基末端導(dǎo)入所述的AviTag(親抗原性，DenverCO)生物素化位點(diǎn)的序列。來(lái)自于pET的質(zhì)粒^皮用來(lái)進(jìn)4亍與pACYC184-BirA質(zhì)粒的細(xì)菌菌才木OrigamiB共轉(zhuǎn)化，其中所述的pACYC184-BirA質(zhì)并立編石馬所述的生物素連4妾酶基因。NusA-人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-lO融合蛋白的表達(dá)將隱匿(harboring)所述的表達(dá)構(gòu)建體的細(xì)菌的過(guò)夜培養(yǎng)物以1:30的比例在才及品肉湯(InvitroGen)中進(jìn)4亍稀釋?zhuān)渲兴龅牟偶捌啡鉁泻?0孩i克/毫升的氨千西才木，10樣i克/毫升的卡那霉素，5孩i克/毫升的四環(huán)素，20孩史克/毫升的氯霉素以及50微摩的生物素。將所述的培養(yǎng)物于37。C下進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，直至達(dá)至ijOD600(在600纟內(nèi)米處的吸光4直)=0.7。之后力口入異丙基石l/f戈半乳糖苷(IPTG),使之最終濃度達(dá)到1毫摩，在37。C下培養(yǎng)15分鐘并且在25。C下i告養(yǎng)過(guò)夜。融合蛋白的純化以及裂解將細(xì)菌J求重新懸浮在Bugbuster蛋白抽才是試劑(Novagen)中，其中所述的Bugbuster蛋白4由才是^式劑中含有Benzonase沖亥酸酶以及蛋白酶抑制劑CompleteEDTA-free(Roche)，并且在4°C下培養(yǎng)1小時(shí)。通過(guò)在4。C下以lOOOOg離心15分鐘的方式分離所述的可溶性片,殳以及難溶性片,史。利用十二烷基石黃酸鈉-聚丙烯酰胺凝月交電泳(SDS-PAGE)(Novex凝月交，InvitroGen)對(duì)可溶性蛋白片段以及難溶性蛋白片段進(jìn)行分析。將所述的可溶性片段以1/2的比例利用《爰沖液A(pH為8.0的Tris鹽酸100毫摩，氯化鈉600毫摩，氯化鈣10毫摩，咪唑40毫摩)進(jìn)行稀釋?zhuān)⑶遗c50%(體積/體積)的次氮基三乙酸4臬(Ni-NTA)瓊脂糖(Qiagen)進(jìn)行混合，其中所述的次氮基三乙酸鎳瓊脂糖預(yù)先使用緩沖液B(pH為8.0的Tris鹽酸50毫摩，氯化鈉300毫摩，氯化鈣5毫摩，咪唑20毫摩)進(jìn)4亍了平4軒。在室溫(RT)下將所述的混合液培養(yǎng)30分鐘并伴隨著輕柔的振蕩。經(jīng)過(guò)離心后獲得的珠(bead)裝載在Poly-Prep色i普柱(Biorad)中，-使用5體積的》爰沖液B進(jìn)行三次洗滌并且利用緩沖液C(pH為8.0的Tris鹽酸50毫摩，氯化鈉200毫摩，氯化鉤5毫摩，咪唑400毫摩)進(jìn)行洗脫。收集含有所述蛋白的洗脫餾分并JU吏用PD-10柱(Amersham)進(jìn)行脫鹽。在3(TC下，將1毫克蛋白在裂解緩沖液(pH為8.0的Tris鹽酸50毫摩，氯化鈉200毫摩，氯化4丐5毫摩)中4吏用25U的因子X(jué)i咅養(yǎng)共計(jì)24小時(shí)，乂人而通過(guò)因子X(jué)(Novagen,Madison，WI)使NusA-趨化因子融合蛋白發(fā)生裂解。對(duì)于某些融合蛋白而言，進(jìn)行最佳裂解的所述參數(shù)存在些孩l的差別，但其可以通過(guò)改變培養(yǎng)時(shí)間(4-24小時(shí))和/或溫度(25-37°C)來(lái)容易的確定。利用十二烷基石黃酸鈉-聚丙烯酰胺凝月交電泳(SDS-PAGE)對(duì)所述的裂解后的蛋白進(jìn)行分析，并且通過(guò)趨化作用對(duì)其活性進(jìn)行檢驗(yàn)。實(shí)施例2:人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3(hCXCR3)——人類(lèi)千擾素誘導(dǎo)蛋白-10的受體的克隆，表達(dá)通過(guò)轉(zhuǎn)染生成一種鼠科動(dòng)物前B'淋巴瘤L1.2細(xì)月包系，所述的細(xì)胞系能夠穩(wěn)定的表達(dá)一種趨化因子受體。通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對(duì)所述的cDNA編碼的人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3進(jìn)行克隆，在所述的克隆中4吏用了淋巴結(jié)cDNA(Clontech，PaloAlto,CA)作為才莫4反。使用XbaI以及NotI對(duì)所述的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)產(chǎn)物進(jìn)行消化，并且將其連結(jié)到哺乳動(dòng)物表達(dá)載體pCDNA3.1-C(InvitroGne)中。通過(guò)測(cè)序?qū)λ鍪荏w的所述編碼區(qū)域的序列進(jìn)行驗(yàn)證。通過(guò)利用20微克的線性化細(xì)胞表面趨化因子受體3表達(dá)質(zhì)粒進(jìn)行的電穿孔，對(duì)所述的L1.2細(xì)胞(5x106)進(jìn)行轉(zhuǎn)染。通過(guò)在1毫克/亳升的遺傳霉素(Geneticin)的存在下進(jìn)行限制性的稀釋?zhuān)⑵涫荏w表達(dá)的L1.2細(xì)胞的穩(wěn)定克隆。通過(guò);危式纟田月包術(shù)(FACScan，BectonDickinson,MountainView,CA)對(duì)受體的表達(dá)水平進(jìn)行確定，其中使用了直接作用于人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3的單克隆抗體(Sigma，St.Louis,MO)。實(shí)施例3:天然人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的制備在10毫升的培養(yǎng)基中對(duì)1x106/毫升的Tamm-Horsfall蛋白(THP)1細(xì)月包進(jìn)4亍i咅養(yǎng)，在所述的培養(yǎng)基中含有50納克/毫升的重組人干擾素y(IFNy)。在37。c下經(jīng)過(guò)過(guò)夜培養(yǎng)之后，對(duì)細(xì)胞進(jìn);f亍離心，收集上清液并且通過(guò)酶耳關(guān)免疫吸附才企測(cè)計(jì)算出所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的濃度。90實(shí)施例4:細(xì)胞在細(xì)胞表面進(jìn)行人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的表逸利用帶有c-myc標(biāo)簽的人類(lèi)干4尤素i秀導(dǎo)蛋白-10cDNA對(duì)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)月包(乂人AmericanTypeCultureCollection美國(guó)典型微生物保藏中心(ATCC)處獲得)進(jìn)行穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染，其中所述的帶有c-myc標(biāo)簽的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10cDNA在pCDNA3.1質(zhì)#立(Invitrogen,Carlsbad,CA)中進(jìn)4亍了亞克隆，在所述的質(zhì)粒中含有新霉素抗性基因。通過(guò)使用這種抗生素對(duì)轉(zhuǎn)染子進(jìn)行選擇，并且通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)完成連續(xù)的細(xì)胞分選，在所述的流式纟田胞術(shù)中使用了.抗6xHis(Sigma)4元體。通過(guò);危式細(xì)月包術(shù)i正實(shí)了人類(lèi)干4無(wú)素i秀導(dǎo)蛋白-10的表面表達(dá)，在所述的流式細(xì)胞術(shù)中使用了抗干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單克隆抗體(mAb)266(R&DSystems,MinneapolisMN)。實(shí)施例5:人類(lèi)單鏈可變區(qū)域抗體片段(scFv)文庫(kù)的篩選用于構(gòu)建并且處理人類(lèi)單《連可變區(qū)i或抗體片,殳文庫(kù)的一舶:方法在Vaughan等人(于1996年在Nat.Biotech.《天然生物技術(shù)》14:309-314中)發(fā)表的文章中進(jìn)行了描述，上述文章的全部?jī)?nèi)容在此51入作為參考。根據(jù)下述的方法對(duì)作用于人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的人類(lèi)單鏈可變區(qū)域抗體片段文庫(kù)進(jìn)行篩選。:^才目的i44奪在室溫下，在旋轉(zhuǎn)混合器中利用磷酸緩沖液(PBS)對(duì)等份的單鏈可變區(qū)域抗體片段噬菌體文庫(kù)(1012Pfu)進(jìn)行1小時(shí)的封閉，其中所述的單鏈可變區(qū)域抗體片^:噬菌體文庫(kù)來(lái)自于CambridgeAntibodyTechnology(劍才喬4元體4支術(shù)7>司)(劍橋，英國(guó))，所述的磷酸緩沖液中含有3%(重量/體積)的脫脂乳。之后，在室溫下，在旋轉(zhuǎn)混合器中利用鏈霉親和素》茲性J朱(DynalM-280)對(duì);故封閉的噬菌體進(jìn)行1小時(shí)的取消選定反應(yīng)。之后，蛋白-10(100納摩)對(duì)取消選定的噬菌體進(jìn)行2小時(shí)的培養(yǎng)。這一選擇步驟在NusA-人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-lO生物素化的融合蛋白中完成，或者在生物素化的人類(lèi)干擾素"i秀導(dǎo)蛋白-10中完成，其中所述的生物素化的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10是通過(guò)蛋白水解的裂解反應(yīng)從所述的融合蛋白中釋放出來(lái)的。利用》茲性表架捕獲所述的珠并且隨后使用磷酸緩沖液/0.1%的吐溫20進(jìn)行四次洗滌并且使用磷酸緩沖液進(jìn)行三次洗滌。之后，將所述的i朱直接加入到10毫升的指數(shù)生長(zhǎng)的曱狀腺球蛋白1(TG1)細(xì)胞中并且在37。C下在緩慢振蕩(100rpm)的條件下培養(yǎng)1小時(shí)。對(duì)一等份的所述被感染的曱狀腺球蛋白l進(jìn)行連續(xù)稀釋?zhuān)瑥亩鴮?duì)所述的選才奪通量(selectionoutput)進(jìn)4亍滴定。將剩余的^皮感染的曱狀腙_球蛋白1在3000rpm條件下離心(spun)15分鐘并且重新懸浮于0.5毫升2倍的胰化蛋白胨酵母-氨千西林葡萄糖(TY-AG)中(2倍的胰化蛋白胨酵母培養(yǎng)基，其中含有10(H效克/毫升的氨千西林以及2%的葡萄糖)并且將其涂覆于2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖瓊脂生物檢測(cè)平板上。經(jīng)過(guò)在30。C下的過(guò)夜培養(yǎng)之后，向所述的平板中加入10毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨節(jié)西林葡萄糖(TYAG),并且從所述的表面上刮下所述的細(xì)胞，并且將所述的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到50毫升的聚丙烯試管中。向所述的細(xì)胞懸浮液中加入含有50%的丙三醇的2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖，乂人而獲得最終濃度為17%的丙三醇。將本4侖中選4奪的等份在-80。C下進(jìn)行保存。細(xì)月包表面的選擇在室溫下，在旋轉(zhuǎn)混合器中利用磷酸緩沖液(PBS)對(duì)等份的單鏈可變區(qū)域抗體片段噬菌體文庫(kù)(1012Pfu)進(jìn)行1小時(shí)的封閉，其中所述的單鏈可變區(qū)域抗體片賴(lài):i寇菌體文庫(kù)來(lái)自于CambridgeAntibodyTechnology(劍橋4元體4支術(shù)公司)(劍橋，英國(guó))，所述的磷酸緩沖液中含有3%(重量/體積)的脫脂乳。之后，在37。C下5%的二氧化石友中，利用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞對(duì)#1封閉的噬菌體進(jìn)行l(wèi)小時(shí)的取消選定反應(yīng)，其中所述的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞被空的展示(pDisplay)載體(在T75長(zhǎng)頸瓶中，流量80%)進(jìn)行了轉(zhuǎn)染，并且所述的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)月包之前利用含有2%(重量/體積)的脫脂乳的磷酸緩沖液進(jìn)行了封閉。之后，在室溫下利用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢展示人類(lèi)干擾素y(CHO-pDisplay-hIFNY)細(xì)胞對(duì)所述的耳又消選定的噬菌體進(jìn)行培養(yǎng)，并伴隨著輕柔的振蕩。之后利用^粦酸纟爰沖液對(duì)細(xì)l包進(jìn)^于十次的洗滌。通過(guò)向所述的T75長(zhǎng)頸瓶中直接加入10毫升指數(shù)生長(zhǎng)的甲狀腺球蛋白1(TG1)對(duì)結(jié)合的噬菌體進(jìn)行洗脫，并且在37。C下在緩慢振蕩的條件下培養(yǎng)1小時(shí)。對(duì)一等份的所述被感染的曱狀腺球蛋白l進(jìn)行連續(xù)稀釋?zhuān)瑥亩鴮?duì)所述的選擇通量(selectionoutput)進(jìn)行滴定。將剩余的被感染的曱狀腺3求蛋白1在3000rpm條件下離心(spun)15分鐘并且重新懸浮于0.5毫升2倍的胰化蛋白胨酵母-氨千西林葡萄糖(TY-AG)中(2倍的月夷化蛋白胨酵母培養(yǎng)基，其中含有100樣吏克/毫升的氨千西林以及2%的葡萄沖唐)并且將其涂覆于2倍的胰化蛋白胨酵母氨節(jié)西林葡萄糖瓊脂生物檢測(cè)平板上。經(jīng)過(guò)在30。C下的過(guò)夜培養(yǎng)之后，向所述的平板中加入10毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖(TYAG),并且從所述的表面上刮下所述的細(xì)月包，并且將所述的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到50毫升的聚丙烯試管中。向所述的細(xì)胞懸浮液中加入含有50%的丙三醇的2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖，從而獲得最終濃度為17%的丙三醇。將本輪中選4奪的等份在-80。C下進(jìn)行保存。噬菌體營(yíng)救將100樣i升從先前的幾輪選擇中獲得的細(xì)胞懸浮液加入到20毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖中并且在37。C下進(jìn)4亍4覺(jué)才半(240rpm)i咅養(yǎng)，直至OD600(在600纟內(nèi)米下的吸光<直)達(dá)到0.3至0.5。之后，利用3.3x101G個(gè)MK13K074甫助p藍(lán)菌體對(duì)所述的培養(yǎng)物進(jìn)4亍重疊感染，并且在37。C小進(jìn)^f亍1小時(shí)的培養(yǎng)(150rpm)。之后通過(guò)在2000rpm下^1尋戶(hù)斤述的細(xì)月包離心10分4中來(lái)改變所述的培養(yǎng)基，去除所述的培養(yǎng)基并且將所述的小球重新懸浮于20毫升2倍的胰化蛋白胨酵母-氨千西林卡那霉素(TY-AK)中(100微克/毫升的氨芐西林；50微克/毫升的卡那霉素)。之后使所述的培養(yǎng)物在30。C下生長(zhǎng)過(guò)夜(240rpm)。用于進(jìn)4于酶耳關(guān)免疫吸附試—驗(yàn)(ELISA)的單克隆噬菌體營(yíng)救將單個(gè)的克隆釆集到樣"離定才反內(nèi)并且4吏其在37。C下生長(zhǎng)5-6小時(shí)(100-120rpm)，其中在所述的樣i滴定板的每個(gè)孔中含有150微升2倍的胰化蛋白胨酵母氨節(jié)西林葡萄糖培養(yǎng)基(2%的葡萄糖)。向每個(gè)孔中加入M13K07輔助噬菌體，乂人而獲得為10的感染復(fù)凄t(MOI)(即，在所述i咅養(yǎng)物中的每個(gè)細(xì)月包有IO個(gè)噬菌體)并且在37。C下進(jìn)行1小時(shí)的培養(yǎng)(100rpm)。在生長(zhǎng)過(guò)后，將所述的培養(yǎng)^反在3200rpm下離心IO分鐘。小心的除去上清液，將細(xì)胞重新懸浮于150樣i升24咅的力夷化蛋白胨酵母氨千西林卡那霉素培養(yǎng)基中并且在30。C下生長(zhǎng)過(guò)夜(120rpm)。為了進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試-驗(yàn)，通過(guò)加入15(H效升2倍濃度的磷酸緩沖液對(duì)所述的噬菌體進(jìn)行封閉，其中所述的磷酸緩沖液中含有5%的脫脂乳粉末，并且在此之后在室溫下進(jìn)行1小時(shí)的培養(yǎng)。之后，將所述的培養(yǎng)斧反在3000rpm下離心10分4中并且將含有上清液的所述的噬菌體用于進(jìn)4亍所述的酶耳關(guān)免疫吸附試-驗(yàn)。94利用存在于磷酸緩沖液中的2微克/毫升的人類(lèi)干擾素Y對(duì)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)培養(yǎng)板(Maxisorb,NUNC)進(jìn)行過(guò)夜涂覆。利用2微克/毫升的牛血清白蛋白(BSA)對(duì)對(duì)照培養(yǎng)板進(jìn)行涂覆。之后在室溫下利用3%的脫脂乳/-粦酸纟爰沖液對(duì)所述的培養(yǎng)4反進(jìn)4亍l小時(shí)的封閉。利用磷酸緩沖液、0.05%的吐溫20對(duì)培養(yǎng)板進(jìn)4亍三次洗滌，之后轉(zhuǎn)移所述的預(yù)封閉的噬菌體上清液并且在室溫下對(duì)其進(jìn)行l(wèi)小時(shí)的培養(yǎng)。利用磷酸緩沖液、0.05%的吐溫20對(duì)培養(yǎng)板進(jìn)行三次洗滌。向每個(gè)孔中加入50微升3%的脫脂乳/磷酸纟爰沖液，其中含有f束才艮過(guò)氧化物酶(HRP)-共舉厄的抗M13抗體(Amersham，以l:10000的比例進(jìn)行了稀釋)。在室溫下經(jīng)過(guò)了l小時(shí)的培養(yǎng)之后，利用磷酸緩沖液、0.05%的吐溫20對(duì)培養(yǎng)板進(jìn)行5次洗滌。通過(guò)加入50微升的四曱基聯(lián)苯胺(TMB)(Sigma)以及5(H效升2N的碌u酸來(lái)終止所述的反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)了所述的酶聯(lián)免疫吸附試-驗(yàn)。在450納米處讀取吸收強(qiáng)度。噬菌體克隆測(cè)序?qū)蝹€(gè)的克隆力文置于〗效滴定板內(nèi)并且4吏其在30°C下生長(zhǎng)過(guò)-泉(120rpm),其中在所述的孩史滴定4反的每個(gè)孔中含有15(H敬升2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖培養(yǎng)基(2%的葡萄糖)。第二天，將5微升的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至另外培養(yǎng)板中，所述的培養(yǎng)板中含有45孩i升的重水，并且將所述的重水與培養(yǎng)物進(jìn)4亍混合。之后在-2(TC下對(duì)所述的培養(yǎng)板進(jìn)行冷凍。在融化之后，使用1微升這樣的懸浮液用來(lái)進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增，所述的擴(kuò)增4吏用沖示準(zhǔn)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)方法，利用只于pCANTAB6具有特異性的引物mycseq，5，-CTCTTCTGAGATGAGTTTTTG-3，(序歹'J130)以及gene3leader,5'-TTATTATTCGCAATTCCTTTAGTTGTTCCT-3,(序歹'J131)。<吏用戶(hù)斤述的MontagePCR^t96系纟克(Millipore)在96孑L的才各式中對(duì)所述的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的反應(yīng)進(jìn)行純化。使用所述的mycseq以及gene3leader引物只于洗脫出的5孩吏升的DNA進(jìn)4亍測(cè)序。用于進(jìn)行功能檢驗(yàn)的單鏈可變區(qū)域抗體片段(scFv)周質(zhì)的制備將單獨(dú)的克隆4秦種至深孔樣t滴定4反內(nèi)并JU吏其在37°C下生長(zhǎng)5-6小時(shí)(250rpm)，其中在所述的深孔孩i滴定斧反的每個(gè)孔中含有0.9毫升2倍的胰化蛋白胨酵母氨芐西林葡萄糖培養(yǎng)基(0.1%的葡萄糖)。之后，向每個(gè)孔中加入100樣史升存在于2倍的胰化蛋白胨酵母(TY)培養(yǎng)基中的0.2毫摩的異丙基碌^代半乳糖苷(IPTG),從而得到最終濃度為0.02毫摩的異丙基硫代半乳糖苷。之后在3(TC下將培養(yǎng)^反培養(yǎng)過(guò)夜，并且伴隨著250rpm的才展蕩。將所述的深孔培養(yǎng)4反在2500rpm下離心IO分鐘并且小心的除去所述的上清液。將得到的小球重新懸浮于150微升的TES緩沖液中(50毫摩Tris/鹽酸(pH為8)，1毫摩乙二胺四乙酸(pH為8),20%的蔗糖，利用完全蛋白酶抑制劑進(jìn)行補(bǔ)充，Roche)。通過(guò)加入150孩t升經(jīng)過(guò)稀釋的TES緩沖液(1:5的TES:水的稀釋液)并且在冰上培養(yǎng)30分鐘來(lái)制造低滲性休克。之后將所述的i備養(yǎng)^反在4000rpm下離心10分4中，/人而除去細(xì)月包以及石爭(zhēng)片。將所述的上清液小心的轉(zhuǎn)移到另外微滴定板中并且將其保存在冰上，用于在功能檢測(cè)或者酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中進(jìn)行即時(shí)的檢驗(yàn)。單鏈可變區(qū)域抗體片段的大規(guī)模純化將1毫升的2倍的胰化蛋白胨酵母氨千西林葡萄糖發(fā)酵劑培養(yǎng)物4妄種至單一菌落中并且在37。C下t展蕩(240rpm)培養(yǎng)5小時(shí)，其中所述的單一菌落來(lái)自于新鮮的有條紋的2倍的胰化蛋白胨酵母氨節(jié)西林葡萄糖瓊脂平板。將0.9毫升的這種培養(yǎng)物接種至400毫升相同培養(yǎng)基的培養(yǎng)物中并且在3(TC下生長(zhǎng)過(guò)夜，并伴隨著劇烈的才展蕩(300rpm)。第二天，通過(guò)加入400樣i升1摩的異丙基碌^代半乳糖苷對(duì)所述的培養(yǎng)進(jìn)行誘導(dǎo)，并且繼續(xù)培養(yǎng)3小時(shí)。通過(guò)在4。C下于5000rpm的條件下離心10分鐘，收集所述的細(xì)胞。將成為小球的細(xì)胞重新懸浮于10毫升的冰冷的TES緩沖液中，如上所述，其中所述的TES緩沖液中補(bǔ)充有蛋白酶抑制劑。通過(guò)加入15毫升以1:5的比例稀釋的TES緩沖液并且在冰上進(jìn)行了1小時(shí)的培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)了滲壓^木克。在4。C下，將細(xì)胞在10000rpm下離心20分鐘，使細(xì)胞碎片成為小球。將所述的上清液小心的轉(zhuǎn)移至新鮮的試管中。向所述的上清液中加入。米唑，達(dá)到10毫摩的最終濃度。向每個(gè)試管中加入在磷酸緩沖液中進(jìn)行平衡的次氮基三乙酸鎳樹(shù)脂(Ni-NTA)(Qiagen)1毫升，并且在4°C下在旋轉(zhuǎn)混合器中(20rpm)進(jìn)4亍1小時(shí)的i咅養(yǎng)。將所述的試管在2000rpm下離心5分鐘并且小心的除去所述的上清液。將成為小J求的樹(shù)脂重新懸浮于IO毫升冷的(4°C)洗滌緩沖液l中(50毫摩磷酸二氫鈉，300毫摩氯化鈉，IO毫摩咪口坐，pH為8.0)。^!夸戶(hù)斤述的懸〉'孚液力o入到polyprep4主中(Biorad)。4吏用8毫升冷的洗滌纟爰沖液2(50毫摩^粦酸二氫鈉，300毫摩氯化鈉，20毫摩咪哇，pH為8.0)通過(guò)重力流作用對(duì)所述的柱進(jìn)行洗滌。利用2毫升的洗脫緩沖液(50毫摩磷酸二氫鈉，300毫摩氯化鈉，250毫摩咪哇，pH為8.0)將所述的單鏈可變區(qū)域抗體片,殳乂人所述的4主中洗脫出來(lái)。通過(guò)在280納米處的吸收作用對(duì)餾分進(jìn)行分析，并且收集含有蛋白的餾分，此后在PD10脫鹽柱(Amersham)上進(jìn)4亍1￡沖液的交4奐，其中所述的脫鹽4主利用^岸酸97緩沖液進(jìn)行了平衡。利用十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，并且通過(guò)在280納米處的吸收作用對(duì)其進(jìn)4于量4b。將所述經(jīng)過(guò)純化的單鏈可變區(qū)i或抗體片革殳進(jìn)4亍等分，并且在-20。C下以及在4。C下進(jìn)^f于存4諸。實(shí)施例6:4吏用單《連可變區(qū)域抗體片,史才是耳又物對(duì)人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10誘導(dǎo)的鈣離子流的抑制按照上文中所描述的方法，制備各種人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10單鏈可變區(qū)域抗體片段的周質(zhì)提取物。將表達(dá)人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3的L1.2細(xì)胞培養(yǎng)于RPMI培養(yǎng)基中，其中在所述的培養(yǎng)基中補(bǔ)充有10%的胎牛血清(FCS)。在室溫下，利用2-10納摩的人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-10(Peprotech,RockyHillNJ)對(duì)含有所述的單鏈可變區(qū)域抗體片段的提取物進(jìn)行30分鐘的培養(yǎng)。在磷酸《爰沖液中對(duì)細(xì)月包進(jìn)4亍洗滌并且向其中裝載2孩史摩的Fura2/AM(鈣離子熒光探針)。向96孔的黑色、透明平底培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入100孩i升經(jīng)過(guò)裝載的細(xì)胞并且通過(guò)測(cè)量位于514納米處的熒光性來(lái)記錄鈣離子流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，其中所述的熒光是利用FlexstationII4義器(MolecularDevices)在340納米或者380納米處激發(fā)的。通過(guò)與含有不相關(guān)的單鏈可變區(qū)域抗體片段的提取物進(jìn)行比較，從而評(píng)價(jià)所述的每個(gè)單鏈可變區(qū)域抗體片段提取物的抑制活性。如上文的實(shí)施例5中所描述的，所述的陽(yáng)性單鏈可變區(qū)域抗體片段待測(cè)物以更大的規(guī)模進(jìn)行了表達(dá)，并且這一結(jié)論在4丐離子流檢測(cè)的劑量應(yīng)答試驗(yàn)中被得以證實(shí)(表4)。表4.在趨化作用以及4丐離子流的功能檢測(cè)中，以單鏈可變區(qū)域抗體片段的形式受試的抗體的效能。趨化作用是使用2納摩(，)，l納摩，或者0.2納摩(§)的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10來(lái)完成的，而鈣離子流是利用10納摩的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行<table>tableseeoriginaldocumentpage99</column></row><table>實(shí)施例7:人類(lèi)干護(hù)G素誘導(dǎo)蛋白-10誘導(dǎo)的細(xì)胞趨化作用的單鏈可變區(qū)域抗體片段的抑制將野生型L1.2細(xì)胞以及表達(dá)人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3的LI.2細(xì)月包;咅養(yǎng)于RPMIi備養(yǎng)基中，其中在所述的i咅養(yǎng)基中^卜充有10%的胎牛血清(FCS)。在進(jìn)^f亍所述試-瞼的前一天，利用0.6毫克/毫升的丁酸對(duì)所述的細(xì)力包進(jìn)4于培養(yǎng)。利用0.2-10納摩的重組人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10對(duì)不同濃度的經(jīng)過(guò)純化的單鏈可變區(qū)域抗體片,殳進(jìn)4亍培養(yǎng)，并且將其》文置于96孔趨化作用培養(yǎng)4反(Neuroprobe)的底部月空室中。^!尋所述的濾柘J文置于所述的趨^(qū)M乍用培養(yǎng)板之上并且使用20微升106細(xì)胞/毫升的懸浮液對(duì)每個(gè)孔進(jìn)行覆蓋。在37。C下將所述的培養(yǎng)板進(jìn)行2小時(shí)的培養(yǎng)。利用99DRAQ5(AlexisCorporation)對(duì)經(jīng)由所述的濾玲反進(jìn)^f亍遷移的細(xì)月包進(jìn)4亍染色，并且利用FMAT8200讀凄t器(AppliedBiosystems,FosterCityCA)進(jìn)行計(jì)數(shù)。確定每個(gè)待測(cè)抗體的IC5Q(當(dāng)所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移受到50%的程度的抑制時(shí)，即，50%的4中制;:農(nóng)度)(表4)。實(shí)施例8:單鏈可變區(qū)域抗體片段轉(zhuǎn)化為免疫球蛋白G形式的重新排列利用特異性的寡核苷酸對(duì)篩選出的單鏈可變區(qū)域抗體片段的重鏈可變區(qū)域序列以及輕鏈可變區(qū)域序列進(jìn)行擴(kuò)增，在所述的5'端導(dǎo)入前導(dǎo)序列以及HindIII限制性位點(diǎn)。分別向所述的重鏈序列以及輕鏈序列的3'端導(dǎo)入Apal位點(diǎn)或者AvrII位點(diǎn)。所述的經(jīng)過(guò)擴(kuò)增的重鏈可變區(qū)域序列具有消化的HindlII/Apal并且被克隆至所述的pCon—yl表達(dá)載體(LONZA，Basel,Switzerland)中。所述的經(jīng)過(guò)擴(kuò)增的輕鏈可變區(qū)i或序列具有消4匕的HindlII/Avrl1并且一皮克隆至所述的pCon_A2表達(dá)載體(LONZA)中。通過(guò)測(cè)序?qū)λ龅臉?gòu)建體進(jìn)行一險(xiǎn)證，在此之后將其轉(zhuǎn)染至哺乳動(dòng)物細(xì)胞中。4吏用Fugene6壽爭(zhēng)染i式劑(Roche，Basel,Switzerland)戶(hù)斤述的重鏈可變區(qū)i或cDNA序列以及輕鏈可變區(qū)i或cDNA序列轉(zhuǎn)染至哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，其中所述的重鏈可變區(qū)域cDNA序列以及輕《連可變區(qū)域cDNA序列存在于它們所適合的表達(dá)載體中。簡(jiǎn)要的說(shuō)，以每孑L6x105個(gè)細(xì)胞的濃度將尖峰細(xì)胞培養(yǎng)于6孔培養(yǎng)板中，其中所述的培養(yǎng)是在含有胎牛血清的2毫升的培養(yǎng)基中進(jìn)行的。依照制造商的"i兌明書(shū)，4吏用所述的Fugene6轉(zhuǎn)染試劑將所述的編碼待測(cè)的重鏈可變區(qū)域序列以及輕鏈可變區(qū)域序列的表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染至所述的細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染之后的第一天，抽出所述的培養(yǎng)基，并且向細(xì)胞中加入3毫升不含血清的新鮮培養(yǎng)基，并且在37。C下培養(yǎng)三天。經(jīng)過(guò)了三天的培養(yǎng)周期之后，收集所述的上清液，依照制造商的"i兌明書(shū)，在蛋白G-瓊脂糖4B快速流動(dòng)柱(Sigma,St.Louis,MO)中對(duì)免疫J求蛋白G進(jìn)4亍純4匕。簡(jiǎn)要的i兌，在4°C下，^吏用ImmunoPure(G)免疫5求蛋白G結(jié)合纟爰沖、液(Pierce,RockfordIL)對(duì)來(lái)自于轉(zhuǎn)染細(xì)月包的上清液進(jìn)4亍過(guò)夜培養(yǎng)。之后，將樣本通過(guò)蛋白G-瓊脂糖4B快速流動(dòng)柱，并且由此^f吏用洗脫緩沖液對(duì)所述的免疫球蛋白G進(jìn)行純化。之后，通過(guò)逆磷S交緩沖液對(duì)所述的被洗脫的免疫球蛋白G餾分進(jìn)行透析，并且通過(guò)在280納米處的吸收作用對(duì)所述的免疫球蛋白G的含量進(jìn)行量化。利用十二烷基石黃酸鈉-聚丙烯酰胺凝月交電泳對(duì)純度以及免疫J求蛋白G的完整性進(jìn)行驗(yàn)證。所述的重新排列成免疫球蛋白Gl的NI-0801抗體的核酸序列以及氨基酸序列如下所示>NI-0801輕鏈氨基酸序列SLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS(序歹'J134)>NI-0801重鏈氨基酸序列NVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(序歹']135)實(shí)施例9:-使用重新排列成免疫J求蛋白Gl形式的單鏈可變區(qū)域抗體片段對(duì)人類(lèi)千擾素誘導(dǎo)蛋白-10誘導(dǎo)的鈣離子流或者細(xì)胞的趨化作用進(jìn)行的抑制4要照上文在實(shí)施例8中所描述的方法，將單鏈可變區(qū)域抗體片段重新排列成免疫^(guò)求蛋白Gl的形式。4吏用在實(shí)施例6以及實(shí)施例8中所描述的基于細(xì)胞的檢測(cè)，對(duì)所述的免疫球蛋白G對(duì)于人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-10i秀導(dǎo)的鈣離子流或者細(xì)月包的趨化作用所產(chǎn)生的中和效能進(jìn)4亍評(píng)1介。正如附圖1，附圖2以及附圖3中所示，這些免疫^(guò)求蛋白G克隆以一種劑量依賴(lài)的方式同時(shí)抑制重組人干擾素誘導(dǎo)蛋白-10以及天然人干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活性。在這些檢測(cè)中，每個(gè)抗體的ICso值在表5以及表6中進(jìn)行了概括。表5.在趨化作用以及4丐離子流的功能4企測(cè)中，以免疫球蛋白Gl的形式受試的抗體的效能。趨化作用是^f吏用1納摩，或者0.2納摩(§)的重組人類(lèi)干護(hù)G素i秀導(dǎo)蛋白-lO來(lái)完成的，而鈣離子流是利用10納摩的重組人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行誘導(dǎo)的。表才各的頂端部分所述的抗體是經(jīng)過(guò)親和性成熟之后獲得的。克隆ID趨化作用IC幼(納摩)鈣離子流IC抑(納摩)Nl柳10.24s6.3Cf1N1R3P4一C70.19s4.1Cf1H1R3P3一G110.2s7.9C訓(xùn)R3P4一B50.42s4.7Cf1A"R3P^F30.69s5.9CC21R3P1一F139.8CB21R3P3_E5122NDCC21R3P1一H675>200CB2R2P4J333>200CC21R3P:一F4157>200CC21R3P1一E756>200CC21R3P1一A23.29.8CB21R3P6G78.86.2102表6.在趨化作用功能檢測(cè)中，以免疫球蛋白Gl的形式受試的抗體的效能，其中所述的趨化作用功能才僉測(cè)是使用0.6納摩的天然人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-10(hIP-lO)來(lái)完成的。克隆ID<table>tableseeoriginaldocumentpage103</column></row><table>實(shí)施例10:與固定于粘多糖之上的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)4亍結(jié)合的抗體與許多的趨化因子一起，人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10能夠進(jìn)行低聚并且與在細(xì)月包表面上進(jìn)行表達(dá)的粘多if唐(GAG)進(jìn)4亍結(jié)合，其中所述的細(xì)胞是例如內(nèi)皮細(xì)胞。為了確認(rèn)所述的抗體能夠與本文中所述的人類(lèi)干擾素"i秀導(dǎo)蛋白-10進(jìn)4亍結(jié)合，在下述的4企測(cè)中對(duì)它們進(jìn)行測(cè)試。利用抗人類(lèi)恒定區(qū)域抗體片l殳(Fc)(Jackson,WestGrove，PA)只于Maxisorb96孑L培養(yǎng)4反進(jìn)4亍》'余覆，其中所述的抗人類(lèi)恒定區(qū)域抗體片段(Fc)作為受試的人類(lèi)免疫球蛋白G的捕獲試劑。使用異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記的肝磷脂(Sigma，St.Louis，MO)作為原生型粘多糖(GAG)，并且利用人類(lèi)干擾素"i秀導(dǎo)蛋白-10對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)，在此之后將其加入到所述的^皮捕獲的抗人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體中。使用一種經(jīng)過(guò)辣根過(guò)氧化物酶(HRP)偶耳關(guān)的抗異石克氰酸熒光素Fab(Roche,Basel,Switzerland)-使所述的結(jié)合顯現(xiàn)出來(lái)。如附圖4中所示，當(dāng)與粘多糖發(fā)生結(jié)合時(shí)，有些抗體能夠結(jié)合人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-io，而另外一些則不能發(fā)生這種結(jié)合，這可能是因?yàn)樵谒龅牡途劢Y(jié)構(gòu)中，它們對(duì)于人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的表位不再是可以接近的。在所述的粘多#唐情況中所述的抗體結(jié)合人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-10的能力在表7中進(jìn)行了概括。表7.抗體與被固定于粘多糖之上的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合的能力克隆ED與存在千粘多糖之上的人類(lèi)千擾素誘導(dǎo)蛋白-io的結(jié)合N1-0801有CF1N1R3P4C7有CF1H1R3P3Gll有CF1H1R3P4B5有CF1A11R3P3F3有CC21R3P1Fl有CB21R3P3E5有CC21R3P1H6有CC21R3P1A2沒(méi)有CB21R3P6G7沒(méi)有CC21R3P4F4實(shí)施例11:抗體CCFl的親和性成熟為了增加對(duì)于人類(lèi)干護(hù)C素i秀導(dǎo)蛋白-lO的親和性以及在人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的中和4企測(cè)中的效能，對(duì)篩選出的前導(dǎo)待測(cè)物(leadcandidate)(CC21R3P1—Fl)進(jìn)4亍親和性成熟處理。對(duì)存在于所述的重鏈或者輕鏈的互補(bǔ)決定區(qū)域3中的5個(gè)殘基的片段進(jìn)行隨機(jī)排列，從而生成6個(gè)文庫(kù)(文庫(kù)的大小從5x107至2x108)。換照實(shí)施例5中所描述的方法，完成三l侖高度嚴(yán)格的篩選。在一種表位竟?fàn)幮詸z測(cè)中，使用單鏈可變區(qū)域抗體片段的周質(zhì)才是耳又物完成對(duì)改進(jìn)的變體的篩選。簡(jiǎn)要的i兌，將所述的母本抗體(CC21R3P1—Fl)涂覆于培養(yǎng)板上并且向每個(gè)孔中加入經(jīng)過(guò)稀釋的周質(zhì)單鏈可變區(qū)域抗體提取物。之后加入生物素化的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10并且在室溫下進(jìn)行2小時(shí)的培養(yǎng)。進(jìn)行洗滌之后，4吏用與鏈霉親和素偶寫(xiě)關(guān)的夢(mèng)束才艮過(guò)氧化物酶(Jackson,WestGrovePA)使得仍然與所述的涂覆的母本抗體發(fā)生結(jié)合的人類(lèi)干擾素i秀導(dǎo)蛋白-10顯現(xiàn)出來(lái)。作為識(shí)別改進(jìn)的變體的一種參考，使用CC21R3P1一F1單鏈可變區(qū)域抗體片段與涂覆后的CC21R3P1_F1進(jìn)4亍竟?fàn)?，其中所述的CC21R3P1—Fl是以免疫J求蛋白G的形式存在的。在竟?fàn)幮?企測(cè)以及趨化作用與鈣離子流的檢測(cè)中，所述的克隆CF1A11R3P3—F3祐:認(rèn)為是一種更加有效能的抗體。利用克隆CF1A11R3P3—F3完成第二l侖的親和'I"生成熟處理，所述的處理是通過(guò)合并其重鏈以及輕鏈來(lái)完成的，其中所述的重鏈以及輕鏈?zhǔn)窃谒龅腃C21R3P1—Fl親和性成熟處理過(guò)程中被篩選出來(lái)的。所述的第二|侖導(dǎo)致了對(duì)于所述的克隆CF1H1R3P4—B5以及CF1H1R3P3_G11的識(shí)別。第三l侖的親和性成熟處理是在克隆CF1H1R3P3_G11的重鏈互補(bǔ)決定區(qū)i或3中完成的，并且乂人中分離出更好的改進(jìn)的抗體變體，CF1N1R3P4—C7(表4,表5以及表6)。在并4亍的處5里中，另外^寺測(cè)物CC21R3P1—E7同樣、接受了以所述的輕鏈的互補(bǔ)決定區(qū)域3為目標(biāo)的相似的親和性成熟處理。在這一過(guò)程中，所述的克隆CE7C1R3H8—J9被分離出來(lái)，并且與所述的母本抗體相比，所述的克隆在趨化作用測(cè)中更具有效妙b匕。實(shí)施例12:人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體克隆C7向生殖細(xì)月包序列的回復(fù)突變?cè)谶@里所描述的研究中，所述的CF1N1R3P4—C7克隆的核酸序列以及氨基酸序列中的核苷酸以及氨基酸殘基發(fā)生了突變，所述的突變與在所述的生殖細(xì)胞序列中發(fā)現(xiàn)的所述的核苷酸或者氨基酸殘基相一致。這一過(guò)程在這里被稱(chēng)為"回復(fù)突變"。CF1N1R3P4—C7重鏈抗體CF1N1R3P4_C7的所述免疫J求蛋白重鏈可變基因與所述的人類(lèi)生殖細(xì)月包系DP-49或者IGHV3-30(GenBankAccessionnumberM99663)具有96%的同源寸生。與IGHV3-30相比，CF1N1R3P4—C7具有5處突變，三處發(fā)生在所述的互4卜決定區(qū)i或1，一處發(fā)生在互4卜決定區(qū)i或2，而另外一處發(fā)生在所述的骨架區(qū)域四中。所述的發(fā)生突變的氨基酸殘基在附圖5中用方框進(jìn)行了標(biāo)記。所述的五處突變是在Kabat位置31處由絲氨酸突變?yōu)樘於彼?；在Kabat位置32處由酪氨酸突變?yōu)榻z氨酸；在Kabat位置34處由曱碌u氨酸突變?yōu)楫惲涟彼?；在Kabat位置58處由酪氨酸突變?yōu)楸奖彼嵋约霸贙abat位置94處由精氨酸突變?yōu)橘?lài)氨酸。CF1N1R3P4—C7中的全部五個(gè)氨基酸分別回復(fù)突變?yōu)樗鼈兊纳臣?xì)胞等價(jià)物并且在趨化作用以及鈣離子流功能檢測(cè)中對(duì)所述的突變對(duì)于抗體效能的影響進(jìn)行評(píng)價(jià)。發(fā)生在所述的互補(bǔ)決定區(qū)域l中的所有變化中觀察到了效能的顯著降低，并且因此在最終的NI-0801序列中在CF1N1R3P4—C7中發(fā)現(xiàn)所述的氨基酸未發(fā)生變化。發(fā)生在所述的互補(bǔ)決定區(qū)域2以及所述的骨架區(qū)i或四的端點(diǎn)處的突變^L有改變所述抗體的歲丈能，并且因此^皮導(dǎo)入到所述的NI-0801重鏈可變序列中。將CF1N1R3P4—C7的所述免疫^(guò)求蛋白重鏈結(jié)合(IGHJ)區(qū)域與所述的六種人類(lèi)功能化免疫球蛋白重鏈結(jié)合區(qū)域進(jìn)行比較。在所述的互補(bǔ)決定區(qū)i或3編石馬的區(qū)i或之外，具有100%的同源性的所述CF1N1R3P4—C7免疫球蛋白重鏈結(jié)合區(qū)域被認(rèn)定為是免疫球蛋白重《連結(jié)合區(qū)域4。CF1N1R3P4—C7輕鏈抗體CF1N1R3P4—C7的所述免疫J求蛋白X輕鏈可變基因(VL)屬于所述的免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)域(IGLV)6-57或者V1-22亞纟且(GenBankAccessionNumberZ73673)。與免疫球蛋白輕鏈可變區(qū)域(IGLV)6-57相比，CF1N1R3P4—C7的？i輕鏈可變基因具有四處突變，全部位于所述的互補(bǔ)決定區(qū)域l內(nèi)。所述的發(fā)生突變的氨基酸殘基在附圖5中用方框進(jìn)行了標(biāo)注。所述的四處突變是在Kabat位置25處由精氨酸突變?yōu)楦拾彼幔辉贙abat位置27出由絲氨酸突變?yōu)楦拾彼?；在Kabat位置29以及30處分別由丙氨S臾突變?yōu)樘於彼嵋约坝山z氨酸突變?yōu)?青氨酸。發(fā)生在所述的骨架區(qū)i或中的四處突變都是成對(duì)變化的(即，甘氨酸25精氨酸/甘氨酸27絲氨酸以及天冬氨酸29丙氨酸/精氨酸30絲氨酸)。在甘氨酸25精氨酸/甘氨酸27絲氨酸突變中7見(jiàn)察到效能的顯著降4氐，并且因此在CF1N1R3P4—C7的這些位置處發(fā)現(xiàn)的氨基酸是未發(fā)生變化的。天冬氨酸29丙氨酸/姊青氨酸30絲氨酸沒(méi)有改變所述抗體的效能，并且因此在所述的NI-0801X輕鏈可變基因序列中，這兩種氨基酸突變?yōu)樗鼈兊纳臣?xì)月包等1"介物。將CF1N1R3P4_C7的所述免疫J求蛋白輕鏈結(jié)合(IGLJ)區(qū)域與所述的七種人類(lèi)功能化免疫球蛋白輕鏈結(jié)合區(qū)域進(jìn)行比較。在所述的互補(bǔ)決定區(qū)i或3編碼的區(qū)域之外，具有100%的同源性的所述CF1N1R3P4—C7免疫球蛋白輕鏈結(jié)合區(qū)域凈皮認(rèn)定為是免疫^(guò)求蛋白輕鏈3結(jié)合區(qū)i或4(IGL3J4)。實(shí)施例13:人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體的親和性以及結(jié)合動(dòng)力學(xué)矛J用Biacore20004義器(BiacoreAB，Uppsala,Sweden)3于NI-0801以及CC21R3P1—Fl的所述的親和性以及結(jié)合動(dòng)力學(xué)特征進(jìn)行表征。利用碳二亞胺(EDC)/N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)化學(xué)試劑將200RU(應(yīng)答單位)的山羊抗人類(lèi)多克隆免疫J求蛋白G(ahlgG;BiacoreAB，Uppsala,Sweden)固定在CIBiacore芯片上。這個(gè)表面^皮用來(lái)捕獲NI-0801或者其他一皮定義的人類(lèi)免疫球蛋白Gl。在每個(gè)循環(huán)之后，通過(guò)注射10毫摩pH為1.5的甘氨酸對(duì)所述的表面進(jìn)4亍再生，其中所述的注射是以3(H效升/分鐘的速度注射30秒鐘，之后在羥乙基哌噢乙石危石黃酸-內(nèi)啡肽(HBS-EP)》爰沖液中進(jìn)4亍1分鐘的穩(wěn)、定。通過(guò)流經(jīng)人類(lèi)干護(hù)O素i秀導(dǎo)蛋白-10(Peprotech,RockyHillNJ)或者NusA-人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10融合蛋白，對(duì)結(jié)合進(jìn)行測(cè)量，其中所述的人類(lèi)干護(hù)G素"i秀導(dǎo)蛋白-lO(Peprotech，RockyHillNJ)或者NusA-人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10融合蛋白具有下述濃度34.7纟內(nèi)摩，11.6纟內(nèi)，，3.85纟內(nèi)，，1.28纟內(nèi)，，0.428纟內(nèi)摩，0.142纟內(nèi)摩以及0納摩。所有的溶液都在羥乙基哌、秦乙碌j黃酸-內(nèi)啡肽(HBS-EP)纟爰沖液(BiacoreAB,Uppsala，Sweden)中進(jìn)4亍了稀釋。以50微升/分鐘的速度完成3分鐘的注射，在此之后為12分鐘的解離時(shí)間并且將所述的溫度i殳定為25°C。依照1:l的朗繆爾^f莫型對(duì)所述的^t據(jù)進(jìn)行擬合(fit),并且確定所述的結(jié)合速率常數(shù)(K。n),解離速率常數(shù)(K。ff)以及解離常數(shù)(KD)的值。使用重組人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10或者所述的NusA-人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10融合蛋白能夠獲得非常相似的數(shù)值，但是在所述的融合蛋白中獲得了更好的應(yīng)答信號(hào)，這是因?yàn)槿诤系鞍拙哂懈蟮某叽纾軌蛟谒龅腂iacore上誘導(dǎo)更好的應(yīng)答。所述的抗體108CC21R3P1—Fl以及NI-0801對(duì)人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的親和性分別為90.2納摩以及109匹摩(附圖6)。因此可以看出，在所述的親和性成熟過(guò)程中，所述的CC21R3P1_F1的親和性提高了90倍。兩種抗體的親和性以及動(dòng)力學(xué)常數(shù)均在表8中進(jìn)行了概括。表8.利用Biacore測(cè)量到的動(dòng)力學(xué)常數(shù)以及親和性常數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage109</column></row><table>實(shí)施例14:人類(lèi)干護(hù)O素"i秀導(dǎo)蛋白-lO抗體的交叉反應(yīng)原性結(jié)合#r測(cè)4吏用一種捕獲酶4關(guān)免疫吸附試-驗(yàn)形式的枱r觀'J對(duì)NI-0801結(jié)合干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的能力進(jìn)行測(cè)試，其中所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10是來(lái)自于不同的物種的。簡(jiǎn)要的說(shuō)，按照實(shí)施例1中所描述的方法，對(duì)從cDNA中克隆的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行表達(dá)以及純化，其中所述的cDNA是從小鼠，大鼠，兔和獼猴以及人類(lèi)趨化因子小組中分離得到的。利用在一定濃度范圍內(nèi)的NusA融合蛋白對(duì)NI-0801進(jìn)4亍涂覆以及i咅養(yǎng)。4吏用一種抗NusA抗體4吏所述的結(jié)合水平顯現(xiàn)出來(lái)。正如附圖7中所示，NI-0801-f義與獼猴的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10發(fā)生交叉反應(yīng)，并且不與來(lái)自于受試的其他物種的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10發(fā)生交叉反應(yīng)，也不與受試的其他人類(lèi)趨化因子中的任何一種發(fā)生交叉反應(yīng)。功能性檢測(cè)人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC)以及人類(lèi)干擾素誘生單核因子(MIG)同樣是經(jīng)由人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3產(chǎn)生信號(hào)的趨化因子。在實(shí)施例7中所描述的趨化作用才企測(cè)中，^j"NI-0801中和這些其〗也的人類(lèi)細(xì)月包表面趨^(qū):因子受體3配位體的能力進(jìn)行了測(cè)試。重組的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子，人類(lèi)干擾素誘生單核因子以及人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10(Peprotech)全部能夠誘導(dǎo)表達(dá)人類(lèi)細(xì)胞表面趨化因子受體3的L1.2細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞的趨化作用，而NI-0801"f又能夠中和所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活性(附圖8A-8B)。同樣針對(duì)NI-0801對(duì)來(lái)自于不同物種的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10所產(chǎn)生的中和效能進(jìn)行了功能性的評(píng)1介。正如附圖9中所示，重組的人類(lèi)、小鼠、大鼠以及兔的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10能夠誘導(dǎo)細(xì)胞的趨化作用，但是所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的活性?xún)H僅可以被飽和劑量的NI-0801(50微克/毫升)進(jìn)4亍中和。實(shí)施例15:人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體的表位定位在一種酶聯(lián)免疫吸附;險(xiǎn)測(cè)中，NI-0801以等^f介的表面親和性與人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10以及獼猴干擾素誘導(dǎo)蛋白-10發(fā)生結(jié)合(附圖7)。為了對(duì)人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10與NI-0801進(jìn)行結(jié)合而可能需要的殘基進(jìn)行識(shí)別，我們對(duì)來(lái)自于幾個(gè)物種的所述的干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的蛋白序列進(jìn)行了比對(duì)，如附圖IO中所示。在所述的比對(duì)中，我們對(duì)這樣的殘基進(jìn)行了尋找所述的殘基在人類(lèi)序列以及獼猴序列間是保守的，并且在NI-0801不能夠進(jìn)行結(jié)合的那些物種的干護(hù)G素i秀導(dǎo)蛋白-lO中是不同的。所述的兔干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的序列與所述的人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的序列是接近的，盡管NI-0801不能對(duì)這種蛋白進(jìn)行中和。當(dāng)與人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10以及獼猴干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行比較時(shí)，我們識(shí)別出了在兔干擾素i秀導(dǎo)蛋白-lO中存在不同的幾個(gè)殘基N13,K17,D48，L48,K63,F68，R74，G75以及S77。為了在這些位置處恢復(fù)所述的人類(lèi)殘基，通過(guò)進(jìn)行位點(diǎn)指導(dǎo)的突變生成兔干擾素i秀導(dǎo)蛋白-lO的四種突變體[N13S/K17Q];[D48K];[L48S/K63N/F68V]以及[L48S/K63N/F68V/R74K/G75R/S77P]。按照實(shí)施例1中所描述的方法，將兔干4尤素i秀導(dǎo)蛋白-10的這些突110變形式作為NusA融合蛋白進(jìn)行表達(dá)。之后，我們?cè)谝豁?xiàng)酶耳關(guān)免疫吸附檢測(cè)中檢驗(yàn)這些殘基的導(dǎo)入能否使NI-0801恢復(fù)與兔干擾素誘導(dǎo)蛋白-10間的結(jié)合。在4。C下，將NusA-人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10以及上述不同的NusA-兔干擾素誘導(dǎo)蛋白-lO突變體以5微克/毫升的量在Maxisorb培養(yǎng)板(Nunc)中進(jìn)4亍涂覆過(guò)夜。在利用3%的磷酸緩沖液-牛血清白蛋白(PBS-BSA)對(duì)其進(jìn)行封閉并且利用一定劑量范圍內(nèi)的NI-0801對(duì)其進(jìn)^f亍培養(yǎng)之后，對(duì)所述的培養(yǎng)才反進(jìn)4亍洗滌并且利用山羊抗人類(lèi)免疫J求蛋白FcY-特異性抗體對(duì)其進(jìn)4亍培養(yǎng)，其中所述的Fc特異性抗體與-束才艮過(guò)氧化物酶(Jackson)發(fā)生了偶聯(lián)。在進(jìn)行洗滌之后，利用四曱基聯(lián)苯胺(TMB)^吏所述的4言號(hào)顯現(xiàn)出來(lái)并且利用碌LJ臾對(duì)其進(jìn)^f亍終止。在450納米處對(duì)所述的培養(yǎng)々反進(jìn)行讀取。正如附圖11中所示，所述的[N13S/K17Q]突變體恢復(fù)了NI-0801與兔干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的結(jié)合，逸意p未著S13以及Q17對(duì)于NI-0801在人類(lèi)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10上的表位的完整性而言是至關(guān)重要的。其他的實(shí)施方式盡管本發(fā)明通過(guò)其中的詳細(xì)說(shuō)明進(jìn)行了描述，前述的說(shuō)明意在進(jìn)行描述而不能限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明所述的范圍是由后附的^又利要求所定義的。其他的方面，優(yōu)點(diǎn)，以及々務(wù)飾均落入下述權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。權(quán)利要求1.一種分離的完全人類(lèi)單克隆抗干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體或其片段，其中所述的抗體包括(a)重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1，所述的區(qū)域1包括序列5，34，44，64，86，95，或者127所示的氨基酸序列；(b)重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2，所述的區(qū)域2包括序列6，15，35，45，65，87，96，或者128所示的氨基酸序列；以及(c)重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3，所述的區(qū)域3包括序列7，21，36，46，52，57，66，78，88，97，105，129，132或者140所示的氨基酸序列，其中所述的抗體與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗體，其中所述的抗體進(jìn)一步包括(d)輕《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1,所述的區(qū)域1包括序歹'J8，16,37,47，71，79，98，106,112，119,133或者141所示的氨基g臾序列；(e)輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2，所述的區(qū)域2包括序歹ll9，38，48，58，72,80,89,99,113，120或者142中所示的氨基S臾序列；以及(f)輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,所述的區(qū)域3包括序歹'J10，24,29,39,49，59，73，81，90，100,107,114,121，126或者143中所示的氨基酉臾序列。3.才艮據(jù)4又利要求1所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫3求蛋白G的同型體。4.4艮據(jù)4又利要求1所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫5求蛋白Gl的同型體。5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的抗體，其中所述的抗體包括重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1，重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2,重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1，輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2,以及輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,其中所述的重《連可變的互^卜決定區(qū)i或1包4舌如序列5所示的氨基酸序列；所述的重《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2包括如序列6所示的氨基酸序列；所述的重《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)i或3包4舌如序列7所示的氨基酸序列；所述的輕纟連可變的互4卜決定區(qū)域^1包括如序歹'J8所示的氨基酸序列；所述的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)i或2包括如序列9所示的氨基酸序列；而所述的輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列IO所示的氨基酸序列。6.才艮據(jù)^又利要求5所述的抗體，其中所述的抗體包括重鏈可變序列以及輕《連可變序列，其中所述的重鏈可變序列包括如序歹'J2所示的氨基酸序列，而所述的輕《連可變序列包4舌如序列4所示的氨基酸序列。7.—種分離的完全人類(lèi)單克隆抗體，所述的抗體包括重鏈序列以及輕鏈序列，其中所述的重鏈序列包括如序列134所示的氨基酸序列，而所述的輕鏈序列包括如序列135所示的氨基酸序列。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫球蛋白Gl的同型體。9.一種分離的完全人類(lèi)單克隆抗體，所述的抗體包4舌重鏈可變的氨基酸序列，其中所述的重鏈可變氨基酸序列選自由下述序列所纟且成的纟且中序歹'J2,12,18，26，31，41,51，54,61，68，75,83，92，102,109,116,123以及137,其中所述的抗體與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的抗體，其中所述的抗體進(jìn)一步包括輕鏈可變的氨基酸序列，其中所述的輕《連可變氨基酸序列選自由下述序列所組成的組中序歹'J4，14，23,28,33,43,56，63，70,77,85，94，104，111,118，125，139以及145,其中所述的抗體與干擾素"i秀導(dǎo)蛋白-10進(jìn)行結(jié)合。11.才艮據(jù)一又利要求10所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫5求蛋白G的同型體。12.才艮據(jù)權(quán)利要求11所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫^(guò)求蛋白Gl的同型體。13.—種分離的完全人類(lèi)單克隆抗體，所述的抗體包括重鏈可變的互S卜決定區(qū)i或1，重鏈可變的互S卜決定區(qū)i或2，重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1,輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)i或2，以及輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3，其中所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1包括如序列5所示的氨基酸序列；所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2包括如序列6所示的氨基S臾序列；所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列7所示的氨基S菱序列；所述的輕鏈可變的互4卜決定區(qū)域i1包4舌3。序列8所示的氨基酸序列；所述的#圣鏈可變的互#卜決定區(qū)i或2包4舌:^序列9所示的氨基酸序列；而所述的輕《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序歹'jIO所示的氨基酸序列。14.才艮據(jù)4又利要求13所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫J求蛋白G的同型體。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的抗體，其中所述的抗體是一種免疫J求蛋白Gl的同型體。16.—種藥物組合物，所述的藥物組合物中包括^L利要求1，7,9或者13中的任意一項(xiàng)所述的抗體以及一種載體。17.—種IC解自身免疫性疾病或者炎性障礙的癥狀的方法，所述的方法包括向有此需要的宿主施用根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項(xiàng)所述的抗體，以足以纟爰解由所述宿主的自身免疫性疾病或者炎性障礙所產(chǎn)生的癥狀的量進(jìn)行施用。18.4艮據(jù)4又利要求17所述的方法，其中所述的宿主是人類(lèi)。19.才艮據(jù)4又利要求17所述的方法，其中所述的抗體包括重《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)i成1，重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2,重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3,輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1，輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2,以及輕鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3，其中所述的重《連可變的互補(bǔ)決定區(qū)域1包^舌如序列5所示的氨基酸序列；所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域2包括如序列6所示的氨基酸序列；所述的重鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列7所示的氨基酸序列；所述的輕鏈可變的互4卜決定區(qū)域1包括如序歹'J8所示的氨基酸序列；所述的輕鏈可變的互^卜決定區(qū)i或2包4舌如序列9所示的氨基酸序列；而所述的豐至鏈可變的互補(bǔ)決定區(qū)域3包括如序列IO所示的氨基酸序列。20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的方法，其中所述的抗體包括重鏈可變序列以及輕4連可變序列，其中所述的重鏈可變序列包4舌如序列2所示的氨基酸序列，而所述的輕鏈可變序列包括如序列4所示的氨基酸序列。21.4艮據(jù)i又利要求19所述的方法，其中所述的抗體包括重鏈序列以及輕鏈序列，其中所述的重鏈序列包括如序列134所示的氨基酸序列，而所述的輕鏈序列包括如序列135所示的氨基酸序列。全文摘要本發(fā)明涉及完全人類(lèi)抗體及其片段，所述的抗體及其片段與干擾素誘導(dǎo)蛋白-10(IP-10，CXCL10)發(fā)生結(jié)合，從而調(diào)節(jié)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10與其受體CXCR3(細(xì)胞表面趨化因子受體3)之間的相互作用，和/或調(diào)節(jié)干擾素誘導(dǎo)蛋白-10的生物活性。本發(fā)明還涉及這樣的抗干擾素誘導(dǎo)蛋白-10抗體用于預(yù)防或者治療免疫相關(guān)性障礙的用途，以及用于改善與免疫相關(guān)性障礙有關(guān)的一種或者多種癥狀的用途。文檔編號(hào)C07K16/24GK101668774SQ200880013529公開(kāi)日2010年3月10日申請(qǐng)日期2008年2月28日優(yōu)先權(quán)日2007年2月28日發(fā)明者奧利維爾·萊格,尼古拉斯·費(fèi)希爾,馬瑞·科斯庫(kù)-維爾博斯申請(qǐng)人:諾維莫尼公司