專利名稱：治療糖尿病的新的3－苯基丙酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及為3-苯基丙酸衍生物的新化合物，包含這些化合物的藥物組合物及其在治療和/或預(yù)防過(guò)氧化物酶體增殖子激活受體γ(PPARγ)介導(dǎo)的疾病和病癥中的應(yīng)用。這些化合物表現(xiàn)出結(jié)合PPARγ受體和改變其活性的能力。
本領(lǐng)域的狀態(tài)20多年前，發(fā)現(xiàn)了噻唑烷二酮類化合物，它們?cè)?型糖尿病和胰島素抵抗嚙齒動(dòng)物模型中表現(xiàn)出活性。盡管對(duì)其作用機(jī)制尚不了解，但是這些化合物已經(jīng)成功地應(yīng)用于2型糖尿病療法。證實(shí)它們通過(guò)核PPAR γ受體發(fā)揮其作用的公開(kāi)文獻(xiàn)僅在上世紀(jì)90年代中期公布。目前，眾所周知PPAR家族的胞內(nèi)受體蛋白控制涉及調(diào)節(jié)脂質(zhì)-碳水化合物代謝的基因表達(dá)。
諸如高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、肥胖和2型糖尿病這類疾病不僅受到發(fā)達(dá)工業(yè)化國(guó)家的密切關(guān)注。據(jù)估計(jì)世界上有超過(guò)1億5000萬(wàn)人患有2型糖尿病，并且預(yù)計(jì)這一數(shù)字到2025年會(huì)加倍。在波蘭，目前約2百萬(wàn)人患有該病，并且相同數(shù)量的人處于發(fā)生該病的風(fēng)險(xiǎn)中。在糖尿病患者中的醫(yī)療保健成本達(dá)到總醫(yī)療保健預(yù)算的6-8％。在初期階段，糖尿病可能是無(wú)癥狀的并且可能在任意年齡時(shí)開(kāi)始；然而，最常見(jiàn)的是在中年和老年人中發(fā)生。2型糖尿病的進(jìn)展是生理紊亂，諸如組織胰島素抵抗、胰腺胰島素產(chǎn)生不足、葡萄糖異生強(qiáng)化后升高的胰島素產(chǎn)生重疊的結(jié)果。最常見(jiàn)的糖尿病并發(fā)癥為視網(wǎng)膜、腎和神經(jīng)系統(tǒng)中的微血管改變，導(dǎo)致失明的風(fēng)險(xiǎn)增加，腎功能不全和神經(jīng)病變。糖尿病也為心臟梗死和腦中風(fēng)的主要誘發(fā)因素。
屬于核受體家族的PPARγ受體在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和貯存中起作用。它們?cè)谥窘M織和大腸中表達(dá)并且涉及脂肪形成過(guò)程?；罨疨PARγ受體的配體可以促進(jìn)胰島素作用并且降低血糖水平。它們還可以用于控制和治療脂質(zhì)代謝和能量平衡紊亂。
存在許多已知的為酪氨酸衍生物或類似物的化合物，它們通過(guò)調(diào)節(jié)PPARγ受體反應(yīng)發(fā)揮其作用，由此對(duì)葡萄糖代謝、脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)(hemostasis)和能量平衡起作用。
在國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)朩O03/011834和WO03/011814中披露了N-(2-苯甲?；交?-L-酪氨酸衍生物，它們具有部分PPARγ激動(dòng)劑活性并且可以特別用于治療和預(yù)防葡萄糖耐量受損；1和2型糖尿?。谎系K；與X綜合征相關(guān)的障礙，諸如高血壓、肥胖、胰島素抵抗、高血糖、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血、冠心病、腎臟病；并且用于改善認(rèn)知功能和治療糖尿病并發(fā)癥。所披露的化合物代表了L-酪氨酸衍生物，其中酪氨酸羥基被乙烯基取代且酪氨酸氨基上的氮被2-苯甲?；交〈?br> 在國(guó)際專利申請(qǐng)WO01/17994中披露了作為PPARγ拮抗劑的唑化合物，它們可以用于治療糖尿病、肥胖、代謝綜合征、葡萄糖耐量受損、X綜合征和心血管疾病，包括血脂障礙。這些化合物代表了L-酪氨酸衍生物，其中酪氨酸羧基被5-元雜環(huán)取代，酪氨酸羥基被(5-甲基-2-苯基唑-4-基)乙基取代且酪氨酸氨基上的氮被2-苯甲酰基苯基取代。
在國(guó)際專利申請(qǐng)WO97/31907中披露了具有對(duì)PPARγ的激動(dòng)劑活性的4-羥基苯基鏈烷酸衍生物。其中披露了L-酪氨酸衍生物，其中酪氨酸羥基被5-元雜環(huán)取代，5-元雜環(huán)自身可以被取代，且酪氨酸氨基上的氮被2-取代的苯基，包括2-苯甲酰基苯基取代。
本領(lǐng)域仍然存在對(duì)新化合物-PPARγ配體的需求，它們可以用于治療和/或預(yù)防糖尿病和因糖尿病導(dǎo)致或與糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥，尤其是脂質(zhì)代謝障礙和心血管疾病。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及新化合物，即式(I)的3-苯基丙酸衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中W表示COOH基團(tuán)或其生物電子等排體或-COO-C1-C4-烷基；Y表示NH、N-C1-C10-烷基、O或S；Z表示NH、N-C1-C10-烷基、N-芳基、N-雜芳基、S或O；X表示O、S、NH、N-C1-C10-烷基、N-芳基、NSO2-C1-C10-烷基、N-SO2-芳基或N-SO2-雜芳基；R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8各自獨(dú)立地表示氫原子或選自下列的取代基C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C3-C7-環(huán)烷基、C3-C7-環(huán)烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、C3-C7-環(huán)硫代烷氧基、鹵原子、鹵素取代的C3-C7-環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-NO2、-CN、-SO2-NH2、-SO2-NH-C1-C4-烷基、-SO2-N(C1-C4-烷基)2、-CO-C1-C4-烷基、-O-CO-C1-C4-烷基、-CO-O-C1-C4-烷基、-CO-芳基；-CO-NH2、-CO-NH-C1-C4-烷基、-CO-N(C1-C4-烷基)2；A表示C1-C4-烷基、C3-C7-環(huán)烷基、鹵素取代的C3-C7-環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-NH-CO-C1-C4-烷基、-N(C1-C4-烷基)-CO-C1-C4-烷基、-NH-CO-芳基、-N(C1-C4-烷基)-CO-芳基、-N(C1-C4-烷基)-CO-C3-C7-環(huán)烷基、-NH-CO-NH2、-NH-CO-NH-C1-C4-烷基、-NH-CS-NH-C1-C4-烷基、-NH-CO-NH-芳基、-NH-CS-NH-芳基、-SO2-C1-C4-烷基、-SO2-芳基或-SO2-雜芳基；其中芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、亞乙二氧基、CN、鹵素或苯基，所述的苯基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基和鹵原子；且n表示0-4的整數(shù)，包括端值。
本發(fā)明的一組化合物包括那些化合物，其中W表示COOH。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Y表示NH。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Y表示O。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Y表示N-C1-C4-烷基，尤其是N-CH3。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Z表示O。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Z表示S。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Z表示N-C1-C4-烷基，尤其是N-CH3。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中Z表示N-苯基。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中X表示O。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中X表示S。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中X表示NSO2-C1-C4-烷基，尤其是NS2-CH3。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中W表示COOH，Y表示NH，Z表示O且X表示O。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中W表示COOH，Y表示O，Z表示O且X表示O。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中W表示COOH，Y表示NH，Z表示O且X表示NSO2-C1-C4-烷基，尤其是NSO2-CH3。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中W表示COOH，Y表示NH，Z表示S且X表示NSO2-C1-C4-烷基，尤其是NSO2-CH3。
如上述定義的式(I)的化合物的具體實(shí)施方案為那些化合物，其中R1-R8各自表示氫原子。
如上述定義的式(I)的化合物的另一具體實(shí)施方案為那些化合物，其中n等于1或2。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中A表示雜環(huán)基，所述的雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、CN、鹵原子和苯基。
在上述基團(tuán)中，A優(yōu)選表示任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代的異唑基，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、尤其是-CH3。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中A表示苯基，所述的苯基任選被取代，尤其是被亞乙二氧基取代。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中A表示-N(C1-C4-烷基)-CO-C3-C7-環(huán)烷基，尤其是-N(CH3)-CO-環(huán)己基。
本發(fā)明的另一組化合物包括那些化合物，其中A表示-N(C1-C4-烷基)-CO-雜芳基，其中雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、CN、鹵原子、苯基和任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基和鹵原子的取代基取代的苯基。
優(yōu)選的雜芳基為嘧啶基，其任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、鹵原子、苯基和任選被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基和鹵原子的取代基取代的苯基。
作為本發(fā)明具體化合物的實(shí)例，可以提及下列化合物1.(2 S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2，3-二氫-1，4-苯并二英-6-基甲氧基)苯基]丙酸；2.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-((3，5-二甲基異唑-4-基)甲氧基)苯基]丙酸；3.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸；4.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[5-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-4-基]乙氧基)苯基]丙酸；
5.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(4-{2-[[6-(2-氯苯基)-5-氰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基](甲基)氨基]乙氧基})苯基]-丙酸；6.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-(2-叔丁基-5-甲基-1，3-唑-4-基)乙氧基)苯基]丙酸；7.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-(2-叔丁基-5-甲基-1，3-唑-4-基)乙氧基)苯基]丙酸；8.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]硫代乙氧基)苯基]丙酸；9.(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙基甲磺?；被?苯基]丙酸；和10.(2 S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氧基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明的化合物具有對(duì)過(guò)氧化物酶體增殖子激活受體γ(PPARγ)具有高度親和力。因此，這些化合物表現(xiàn)出結(jié)合PPARγ和調(diào)節(jié)其活性的能力。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，它包含至少一種如上述所定義的式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，任選與其它藥理學(xué)活性組分和一種或多種藥學(xué)可接受的載體和/或賦形劑。
本發(fā)明還涉及如上述所定義的式(I)的化合物作為藥物的應(yīng)用。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及如上述所定義的式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備用于治療和/或預(yù)防過(guò)氧化物酶體增殖子激活受體γ(PPARγ)介導(dǎo)的疾病和病癥的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及對(duì)有需要的哺乳動(dòng)物受試者治療和/或預(yù)防過(guò)氧化物酶體增殖子激活受體γ(PPARγ)介導(dǎo)的疾病和病癥的方法，該方法包括對(duì)所述的哺乳動(dòng)物給予治療或預(yù)防有效量的如上述所定義的式(I)的化合物。
這類PPARγ-介導(dǎo)的疾病和病癥特別包括胰島素耐量受損；胰島素抵抗；1和2型糖尿病；因糖尿病導(dǎo)致或與糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥，諸如周圍神經(jīng)病、腎功能不全、視網(wǎng)膜病、血脂障礙；X綜合征相關(guān)病癥，諸如高血壓、肥胖、高血糖、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血、冠心病和其它心血管疾??；和腎臟病。
本發(fā)明的化合物還可以用于改善認(rèn)知功能。
發(fā)明詳述定義本文所用的術(shù)語(yǔ)“生物電子等排體”意指一種化學(xué)部分，它取代活性化合物分子中的另一部分而不會(huì)顯著影響其生物活性?；钚曰衔锏钠渌匦?，諸如，例如其作為藥物的穩(wěn)定性在這種方式中可能受影響。
作為羧基(COOH)的生物電子等排體，可以提及的尤其是帶有1-4個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的5-元雜環(huán)基，諸如，例如1，3，4-二唑基、1，2，3-二唑基、1，2，5-二唑基、1，2，4-二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、異唑基、異噻唑基和N-取代的四唑基。5-元雜環(huán)基可以任選被1或2個(gè)取代基取代，所述的取代基選自苯基、吡啶基、直鏈或支鏈烷基、氨基、羥基、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟硫代甲氧基、烷氧基和硫代烷氧基。
作為羧基(COOH)的生物電子等排體，可以提及的還有苯基和帶有1-4個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子的6-元雜環(huán)基，諸如，例如吡啶基、吡嗪基、噠嗪基、嘧啶基、三嗪基、四嗪基等。苯基和6-元雜環(huán)基可以任選被1或2個(gè)取代基取代，所述的取代基選自苯基、吡啶基、直鏈或支鏈烷基，氨基、羥基、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、三氟甲氧基、三氟硫代甲氧基、烷氧基和硫代烷氧基。
術(shù)語(yǔ)″鹵素″意指選自F、Cl、Br和I的原子。
術(shù)語(yǔ)″烷基″意指帶有指定數(shù)量的碳原子的飽和直鏈或支鏈烴基。作為具體的烷基取代基，可以提及下列基團(tuán)甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、1，1-二甲基乙基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、3，3-二甲基丁基、庚基、1-乙基戊基、辛基、壬基和癸基。
術(shù)語(yǔ)″芳基″意指帶有6-14個(gè)碳原子的單-或雙環(huán)芳族基團(tuán)。芳基的實(shí)例為苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基，諸如萘-1-基、萘-2-基、1，2，3，4-四氫萘-5-基和1，2，3，4-四氫萘-6-基。
術(shù)語(yǔ)″雜芳基″意指帶有5-13個(gè)碳原子和1-4個(gè)選自N、O和S的雜原子的單-或雙環(huán)雜芳族基團(tuán)。雜芳基的實(shí)例為吡咯-1-基、吡咯-2-基、吡咯-3-基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、唑基、噻唑基、異唑基、1，2，4-三唑基、二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、1，3，5-三嗪基、吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、氮雜吲哚基、cynnolyl、異喹啉基和咔唑基。
術(shù)語(yǔ)″環(huán)烷基″意指帶有3-7個(gè)碳原子的飽和或部分不飽和環(huán)烴基。環(huán)烷基的實(shí)例為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)戊二烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基和環(huán)庚基。
術(shù)語(yǔ)″雜環(huán)基″意指帶有1-4個(gè)選自N、O和S的雜原子的飽和或部分不飽和5-6-元環(huán)烴基。優(yōu)選的飽和或部分不飽和環(huán)烴基為單環(huán)的并且包括4或5個(gè)碳原子和1-3個(gè)雜原子。雜環(huán)基的實(shí)例為哌啶基、哌嗪基、嗎啉基和吡咯烷基。
本發(fā)明的化合物在具有W基團(tuán)的碳原子上帶有手性中心并且可以以相應(yīng)的對(duì)映體、對(duì)映體混合物和外消旋混合物的形式存在。
因此，式(I)化合物的R和S對(duì)映體、對(duì)映體化合物和外消旋混合物形成本發(fā)明的組成部分。
因此，在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及具有諸如式(IA)中所示立體化學(xué)構(gòu)型的式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽
其中W、X、Y、Z、A、n和R1-R8具有如上述對(duì)式(I)所定義的相同的含義。
在第二個(gè)具體的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及具有諸如式(IB)中所示立體化學(xué)構(gòu)型的式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中W、X、Y、Z、A、n和R1-R8具有如上述對(duì)式(I)所定義的相同的含義。
可以，按照常規(guī)和已知方式通過(guò)用合適的酸在有機(jī)溶劑，諸如醇、酮、醚或氯化溶劑中處理，將帶有堿性基團(tuán)的式(I)的化合物轉(zhuǎn)化成與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸的鹽，并且按照常規(guī)方式回收鹽。這類鹽的實(shí)例為那些與藥學(xué)可接收的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸形成的鹽。作為無(wú)機(jī)酸鹽的實(shí)例可以提及鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、焦硫酸鹽、亞硫酸鹽、焦亞硫酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽和焦磷酸鹽。作為有機(jī)酸鹽的實(shí)例可以提及的是乙酸鹽、丙酸鹽、丙烯酸鹽、4-羥基丁酸鹽、辛酸鹽、己酸鹽、癸酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、戊二酸鹽、己二酸鹽、庚二酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、苯基乙酸鹽、扁桃酸鹽、癸二酸鹽、辛二酸鹽、苯甲酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、烷基-和芳基磺酸鹽，諸如甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、水楊酸鹽、肉桂酸鹽、谷氨酸鹽、天冬氨酸鹽、葡萄糖醛酸鹽和半乳糖醛酸鹽。
可以按照常規(guī)和已知方式，通過(guò)使式(I)的化合物與合適的有機(jī)或無(wú)機(jī)堿反應(yīng)，將帶有酸性基團(tuán)的式(I)的化合物轉(zhuǎn)化成與無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿形成的鹽。與藥學(xué)上可接受的堿形成的鹽包括堿金屬或堿土金屬鹽，諸如Li、Na、K、Mg或Ca、銨鹽和與堿性有機(jī)化合物，例如精氨酸、組氨酸、哌啶、嗎啉、哌嗪、乙二胺或三乙胺形成的鹽以及季銨鹽。
本發(fā)明還涉及藥物組合物，其包含式(I)的化合物與依賴于所選給藥途徑而不同的藥用賦形劑。
本發(fā)明的實(shí)施方案之一為適合于口服給藥的藥物組合物。適合于口服給藥的藥物組合物可以為片劑、膠囊、丸劑、錠劑、粉劑或顆粒或在液體中的溶液或分散液或類似物的形式。所述的劑型各自包含預(yù)定量的本發(fā)明化合物作為活性組分。可以使用本領(lǐng)域中已知用于該目的和常用于制備固體藥物組合物的任意藥用賦形劑制備片劑形式的組合物。這類賦形劑的實(shí)例為淀粉、乳糖、微晶纖維素、硬脂酸鎂和粘合劑，例如聚乙烯吡咯烷酮。此外，可以將活性化合物配制成控釋制劑，諸如包含親水性或疏水性基質(zhì)的片劑。
可以使用常規(guī)操作步驟，例如通過(guò)將活性化合物與賦形劑的混合物摻入硬膠囊配制膠囊形式的藥物組合物。或者，可以形成活性化合物和高分子量聚乙二醇的半固體基體并且將其填充入硬膠囊，或可以給軟膠囊填充活性化合物在聚乙二醇中的溶液或其在食用油中的分散體。還關(guān)注使用前再溶解的粉末(例如凍干粉)?；蛘撸€可以使用注射制劑用油媒介物。
可以配制通過(guò)注射或連續(xù)輸注給藥的非腸道給藥用液體劑型。
可接受的通過(guò)注射的給藥途徑為靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)和皮下，通常優(yōu)選靜脈內(nèi)注射。靜脈內(nèi)注射用典型組合物包括例如包括活性化合物和葡萄糖或氯化鈉的無(wú)菌等滲水溶液或分散液。其它合適的賦形劑的實(shí)例為注射用乳酸鹽林格溶液，具有葡萄糖的注射用乳酸鹽林格溶液、具有葡萄糖的Normosol-M、注射用酰化林格溶液。注射劑可以任選包括共溶劑，例如聚乙二醇；螯合劑，例如乙二胺四乙酸；穩(wěn)定劑，例如環(huán)糊精；和抗氧化劑，例如焦硫酸鈉。
給藥劑量取決于患者病情和給藥途徑并且由臨床醫(yī)師調(diào)整。
可以使用下述并且在實(shí)施例中示例的方法制備本發(fā)明的化合物。
可以通過(guò)用A(CH2)n-基團(tuán)取代式(II)化合物中的X上的氫原子制備式(I)的化合物，其中W具有非-COOH或-COO-C1-C4-烷基的含義 其中X、Y、Z、A、n和R1-R8具有如上述對(duì)式(I)所定義的含義，并且W具有非-COOH或-COO-C1-C4-烷基的含義。
所述的取代可以按照方案1，通過(guò)如上所述定義的式(II)的化合物與式A(CH2)n-OH的化合物的Mitsunobu反應(yīng)進(jìn)行，其中A和n具有如上述所定義的含義方案1
Mitsunobu反應(yīng)一般可以在-20-20℃下在有重氮化合物，諸如DEAD、DIAD、ADDP和三苯膦存在下的無(wú)水溶劑，諸如乙醚或鹵化烷中進(jìn)行。
或者，按照方案2，所述的X上氫原子的取代可以通過(guò)下列步驟進(jìn)行在有能夠由化合物(II)產(chǎn)生陰離子的強(qiáng)堿，諸如，例如氫化鈉存在下用式A(CH2)n-V的化合物使式(II)的化合物烷基化，從而形成式(I)的化合物，在式(II)的化合物中，X、Y、Z和R1-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義，且W具有非-COOH或-COO-C1-C4-烷基的含義，在式A(CH2)n-V的化合物中，A和n具有上述對(duì)式(I)所定義的含義，且V表示選自鹵素和烷基磺酰基或芳基磺?；碾x去基方案2 烷基化反應(yīng)可以在惰性有機(jī)溶劑，諸如無(wú)水DMF、THF、DMSO中進(jìn)行。能夠產(chǎn)生陰離子的強(qiáng)堿可以為氫化鈉。可以使用干燥的氫化鈉或?qū)⑵渥鳛樵诘V物油中的混懸液使用。產(chǎn)生陰離子可以在室溫下進(jìn)行，直到氫氣放出完全。然后在第二階段中，加入純凈或作為在惰性有機(jī)溶劑，諸如DMF、THF、DMSO中的溶液形式的烷基化試劑A(CH2)n-V。烷基化的第二個(gè)步驟在0-100℃下進(jìn)行。
可以通過(guò)下列步驟制備本發(fā)明式(I)的化合物，其中W表示-COOH或-COO-C1-C4-烷基，并且X、Y、Z、A、n和R1-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義a)用A(CH2)n-基團(tuán)取代式(III)化合物的X上的氫原子 其中R表示C1-C4烷基，并且X、Y、Z和R1-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義，從而形成式(I)的化合物，其中W表示酯基-COOR，其中R表示C1-C4烷基，并且X、Y、Z、A、n和R1-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義；隨后b)任選將酯基-COOR堿性水解成-COOH基團(tuán)而形成式(I)的化合物，其中W表示-COOH。
按照方案3，可以通過(guò)式(III)的化合物與式A(CH2)n-OH的化合物的Mitsunobu反應(yīng)進(jìn)行步驟a)中所述的取代，從而形成式(IV)的化合物，在A(CH2)n-OH的化合物中A和n具有上述對(duì)式(I)所定義的含義方案3 Mitsunobu反應(yīng)可以如上所述通常在-20-20℃下，在有重氮化合物，諸如DEAD、DIAD、ADDP和三苯膦存在下的無(wú)水溶劑，諸如乙醚或鹵化烷中進(jìn)行。
或者，按照方案4，所述的X上氫原子的取代可以通過(guò)下列步驟進(jìn)行在有能夠由化合物(III)產(chǎn)生陰離子的強(qiáng)堿，諸如，例如氫化鈉存在下通過(guò)使式(III)的化合物與式A(CH2)n-V的化合物反應(yīng)，從而形成式(IV)的化合物，在式(III)的化合物中，R表示C1-C4烷基且X、Y、Z和R1-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義，在式A(CH2)n-V的化合物中，A(CH2)n-具有如上述對(duì)式(I)所定義的含義，且V表示選自鹵素和烷基磺?；蚍蓟酋；碾x去基方案4 如上述對(duì)制備式(I)的化合物所述進(jìn)行反應(yīng)，其中W具有非COOH或-COO-C1-C4-烷基的含義。
可以在堿性條件下，按照本領(lǐng)域公知的方式進(jìn)行步驟b)中酯基的水解。作為堿的實(shí)例，可以提及堿金屬氫氧化物，諸如氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰。為了制備式(I)化合物的單一對(duì)映體，優(yōu)選使用氫氧化鋰進(jìn)行水解，以便保留構(gòu)型。
按照下示方案5，例如，可以在由THF(四氫呋喃)、甲醇和水組成的三-溶劑系統(tǒng)中進(jìn)行步驟b)中的堿性水解，以便獲得均勻的反應(yīng)混合物。在水解結(jié)束時(shí)，可以使用鹽酸中和該反應(yīng)混合物，且如果需要，例如，可以使用乙酸乙酯萃取游離酸產(chǎn)物
方案5 按照方案6，可以在有于醇溶液中的堿存在下，通過(guò)使式(V)的化合物與式(VI)的化合物反應(yīng)制備式(I)的化合物，在式(I)的化合物中，Y＝S，且X、W、Z、A、n和R1-R8具有如上述對(duì)式(I)所定義的含義，在式(V)的化合物中，W、X、A、n和R1-R4具有上述對(duì)式(I)所定義的含義，在式(VI)的化合物中，Z和R5-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義。
方案6 就制備其中W表示COOH基團(tuán)的式(I)的化合物而言，上述過(guò)程中的起始化合物為式(V)的化合物，其中W為酯保護(hù)的COOH基團(tuán)，如方案7中例示。在該反應(yīng)結(jié)束時(shí)，通過(guò)堿性水解使COOH基團(tuán)脫保護(hù)。
按照方案7，根據(jù)Y.Kawamatsu、H.Asakawa、T.Saraie、E.Imamiya、K.Nishikawa、Y.Hamuro、Arzneim.For sch./Drug Res./，30(I)，4，1980，585-589所述的方法進(jìn)行第一步反應(yīng)步驟，得到2-氯-3-苯基丙酸乙酯衍生物。使Meerwein反應(yīng)中獲得的氯酯與1，3-苯并唑-2-硫醇在有在醇溶液中的堿存在下反應(yīng)，而得到相應(yīng)的乙基α-(1，3-苯并唑-2-基硫基)酯。使酯在NaOH或KOH水-醇溶液中水解。用稀鹽酸使游離酸從鹽中釋放。
方案7 按照類似方式，獲得下列典型化合物。

當(dāng)以旋光物質(zhì)為起始原料時(shí)，可制備外消旋形式和單一對(duì)映體形式的式(I)的化合物?；蛘?，可以使用本領(lǐng)域中公知的常規(guī)技術(shù)將式(I)的外消旋化合物拆分成對(duì)映體。
按照Shyam B.Advani，Joseph Sam，Journal of PharmaceuticalSciences，Vol.57，10，1968獲得式(III)的酪氨酸衍生物，其中X＝O，Y＝NH，且Z＝O。例如，按照方案8，通過(guò)在有亞硫酰氯存在下用甲醇酯化L-酪氨酸，隨后使L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽與2-氯-1，3-苯并異唑在有三乙胺存在的苯中反應(yīng)而獲得L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽。就D-酪氨酸和D，L-酪氨酸而言，使用類似的操作步驟。
方案8 可以通過(guò)采用上述Shyam B.Advani，Joseph Sam，Journal ofPharmaceutical Sciences，Vol.57，10，1968的方法制備式(III)的酪氨酸化合物，其中X＝O，Y＝NH，且Z＝NH、N-烷基、N-芳基、N-雜芳基或S。
按照方案9，可以根據(jù)Edward S.Lazer，Clara K.Miao，Hin-ChorWong，Rondla Sorcek，Denice M.Spero，Alex Galman，Kollol Pal，Mark Behnke，Anne G.Graham，Jane M.Watrous，Carol A.Homon，Juergen Nagle，Arvind Shah，Yvan Guindon，Peter R.Farina，Julian Adams，J.Med.Chem.，1994，37，913-923所述的方法制備式(III)的酪氨酸衍生物，其中X＝O，Y＝NH，且Z＝S。
方案9 按照方案10，由按照Helen S.M.Lu，Martin Volk，YuriyKholodenko，Edward Gooding，Robin M.Hochstrasser，William F.DeGrado，Journal of the American Chemical Society，119，31，1997，7173-7180獲得的4-巰基苯丙氨酸制備式(III)的4-巰基苯丙氨酸衍生物，其中Y＝NH，Z＝O，且X＝S。用三苯甲基保護(hù)4-巰基苯丙氨酸上的巰基(SH)，隨后用2-苯并唑基取代α-氨基氮原子上的一個(gè)氫原子。合成的最終步驟為SH基團(tuán)的脫保護(hù)。
方案10 如方案11所例示的，對(duì)X＝NSO2-CH3的化合物，由4-硝基-N-鄰苯二甲酰基苯丙氨酸甲酯獲得式(III)的4-氨基苯丙氨酸衍生物，其中Y＝NH，Z＝O，且X＝NSO2-CH3。按照F.Bergel，J.A.Stock，Journalof Organic Chemistry，1956，90-96進(jìn)行合成的第一個(gè)步驟。在有催化量的DMAP存在下的吡啶中用甲磺酰氯使由此獲得的4-氨基-N-鄰苯二甲?；奖彼峒柞ゼ谆酋；?。隨后的步驟為通過(guò)與6M HCl水溶液一起加熱除去鄰苯二甲?；?。通過(guò)在有亞硫酰氯存在下的甲醇中酯化將如此獲得的4-甲磺酰氨基苯丙氨酸轉(zhuǎn)化成甲酯鹽酸鹽。隨后的步驟為在有三乙胺存在的苯中使4-甲磺酰氨基苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽與2-氯苯并唑反應(yīng)。
方案11
如方案12所例示的，在式(VII)化合物的反應(yīng)中，可以按照RogerLok，Rondla E.Leone，Antony J.Williams，J.Org.Chem.，61，3289-3297獲得式(VI)的起始化合物，其中Z＝O，即取代的2-巰基苯并唑，在式(VII)化合物中，R5-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義。
方案12
可以通過(guò)使用或采用Fortuna Haviv，James D.Ratajczyk，Robert W.DeNet，F(xiàn)rancis A.Kerdesky，Rolad L.Walters，StevenP.Schmidt，James H.Holmes，Patrick R.Young，George W.Carter，J.Med.Chem.，1988，31，1719-1728中所述的操作步驟，按照方案13，通過(guò)使式(VI)的化合物與五氧化二磷反應(yīng)獲得式(VIII)的起始化合物，即取代的2-氯苯并唑，在式(VI)的化合物中，R5-R8具有上述對(duì)式(I)所定義的含義。
方案13 按照Takamura Makoto，Yanagisawa Hiroaki，Kanai Motoru，Shibasaki Masakatsu，Efficient Synthesis of Antihyperglycemic(S)-α-Aryloxy-β-phenylpropionic Amides Using a BifunctionalAsymmetric Catalyst，Chem.Pharm.Bull.，50，8，2002，1118-1121獲得3-[4-(芐氧基)苯基]-2-羥基丙酸乙酯。隨后按照方案14用氫化鈉且然后用2-氯苯并唑處理該酯。
方案14
本文使用下列縮寫(xiě)DIAD偶氮二羧酸二異丙酯DEAD偶氮二羧酸二乙酯ADDP偶氮二羰基二哌啶實(shí)施例實(shí)施例1(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2，3-二氫-1，4-苯并二英-6-基甲氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝O，Y＝NH，n＝1，A＝下式的2，3-二氫-1，4-苯并二英-6-基
將2，3-二氫-1，4-苯并二英-6-基甲醇(0.25g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(0.31g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DIAD(0.61g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24小時(shí)。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為50％。MS(ES)446(M+，100％)實(shí)施例2(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-((3，5-二甲基異唑-4-基)甲氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，Y＝NH，X＝O，Z＝O，n＝1，A＝下式的3，5-二甲基異唑-4-基 將(3，5-二甲基異唑-4-基)甲醇(0.28g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(0.31g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24小時(shí)。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為60％。MS(ES)407(M+，100％)實(shí)施例3(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝O，Y＝NH，n＝2，A＝下式的(環(huán)己基羰基)甲氨基 將N-(2-羥乙基)-N-甲基環(huán)己烷羧基酰胺(0.19g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(0.31g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入ADDP(0.76g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24小時(shí)。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH水溶液(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1MHCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為40％。MS(ES)465(M+，100％)實(shí)施例4(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[5-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-4-基]乙氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝O，Y＝NH，n＝2，A＝下式的[5-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-4-基] 在室溫下向2-[4-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-5-基]乙醇(2.93g，10mmol)于30ml吡啶中的溶液中分批加入4-甲苯磺酰氯(1.9g，10mmol)。隨后將該反應(yīng)混合物在室溫下攪拌5小時(shí)，且然后傾入200ml水并且用50ml二氯甲烷萃取(3x)。用1M HCl、碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌合并的萃取物。用硫酸鎂干燥有機(jī)相并且蒸發(fā)溶劑而得到具有約95％純度的產(chǎn)物4-甲苯磺酸2-[4-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-5-基]乙酯。
在室溫下和氬氣環(huán)境中向3.12g(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯在50ml二甲基甲酰胺中的溶液中分批加入NaH在礦物油(0，4g)中的60％的混懸液。當(dāng)氣體停止放出時(shí)，滴加4-甲苯磺酸2-[4-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-5-基]乙酯(4.47g，10mmol)在二甲基甲酰胺中的溶液。在攪拌的同時(shí)在80℃下加熱該混合物。冷卻后，將該混合物傾入11的水并且用乙酸乙酯萃取幾次。用鹽水洗滌合并的萃取物，用硫酸鎂干燥并且蒸發(fā)溶劑而得到(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[5-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-4-基]乙氧基)苯基]丙酸甲酯粗品。
將上述獲得的2.9g粗反應(yīng)產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，20ml)。加入1M LiOH(8ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HC1中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為40％。MS(ES)573(M+，100％)實(shí)施例5
(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(4-{2-[[6-(2-氯苯基)-5-氰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基](甲基)氨基]乙氧基})苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝O，Y＝NH，n＝2，A＝下式的[6-(2-氯苯基)-5-氰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基](甲基)氨基 將4-(2-氯苯基)-6-[(2-羥乙基)(甲基)氨基]-2-(甲硫基)嘧啶-5-腈(0.50g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(0.31g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24h。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為58％。MS(ES)614(M+，100％)實(shí)施例6(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-(2-叔丁基-5-甲基-1，3-唑-4-基)乙氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝O，Y＝NH，n＝2，A＝下式的2-叔丁基-5-甲基-1，3-唑-4-基
將2-(2-叔丁基-4-甲基-1，3-唑-5-基)乙醇(0.27g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(0.31g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24h。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為55％。MS(ES)463(M+，100％)實(shí)施例7(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]硫代乙氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝S，Z＝O，Y＝NH，n＝2，A＝下式的(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基 將N-(2-羥乙基)-N-甲基環(huán)己烷羧基酰胺(0.19g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-巰基苯基)丙酸甲酯(0.33g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24h。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為46％。MS(ES)481(M+，100％)實(shí)施例8(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙基甲磺酰氨基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝CH3SO2N，Z＝O，Y＝NH，n＝2，A＝下式的(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基 將N-(2-羥乙基)-N-甲基環(huán)己烷羧基酰胺(0.19g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-(4-甲磺酰氨基苯基)丙酸甲酯(0.39g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24h。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為35％。MS(ES)542(M+，100％)實(shí)施例9
(2S)-2-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝S，Y＝NH，n＝2，A＝下式的(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基 將N-(2-羥乙基)-N-甲基環(huán)己烷羧基酰胺(0.19g，1.5mmol)、(2S)-2-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-3-(4-羥基苯基)丙酸甲酯(0.33g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24h。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為48％。MS(ES)481(M+，100％)實(shí)施例10(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氧基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸及其甲酯R1-R8＝H，W＝COOH/COOCH3，X＝O，Z＝O，Y＝O，n＝2A＝下式的(環(huán)己基羰基)甲基氨基乙基 將N-(2-羥乙基)-N-甲基環(huán)己烷羧基酰胺(0.19g，1.5mmol)、2-(1，3-苯并唑-2-基氧基)-3-(4-羥基苯基)丙酸乙酯(0.33g，1mmol)和三苯膦(0.26g，1mmol)溶于5ml四氫呋喃(THF)。將該反應(yīng)混合物冷卻至5℃。然后加入DEAD(0.52g，3mmol)并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌18-24h。隨后蒸發(fā)THF而得到產(chǎn)物，為標(biāo)題的酸性甲酯。
將該粗產(chǎn)物溶于THF/MeOH/H2O混合物(6∶0.1∶1，2ml)。加入1MLiOH(1.6ml)并且在室溫下將該反應(yīng)體系攪拌3天。然后用1M HCl中和該反應(yīng)混合物，加入少量水并且用乙酸乙酯萃取該混合物。蒸發(fā)溶劑。通過(guò)色譜法進(jìn)行純化。產(chǎn)率為40％。MS(ES)466(M+，100％)生物試驗(yàn)使用下列方法測(cè)定本發(fā)明化合物結(jié)合PPAR γ受體和改變其活性的能力。
體外結(jié)合使用從配體-受體復(fù)合物的競(jìng)爭(zhēng)性放射性配體取代方法，按照下述操作步驟測(cè)定所述化合物結(jié)合PPAR γ受體的能力(體外)。將終濃度為10nM的PPAR激動(dòng)劑3H-羅西格列酮用作放射性配體。另外將終濃度為20μM的過(guò)量的未標(biāo)記的測(cè)試化合物加入到該反應(yīng)體系中。本試驗(yàn)中的受體源為含有PPAR γ的LBD(配體結(jié)合域)的人重組蛋白。通過(guò)葡聚糖包被的活性炭技術(shù)進(jìn)行未結(jié)合受體的放射性配體的分離。使用LS6500-Beckman Coulter閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)定放射性。將獲得的閃爍計(jì)數(shù)值與從和放射性配體一起孵育的樣品獲得的值(推定為0％取代)并且與從含有放射性配體和過(guò)量未放射性標(biāo)記的羅西格列酮(推定為100％取代)的樣品獲得的值進(jìn)行比較。獲得的值包含在0-130％范圍中。
參考文獻(xiàn)1.ADDl/SREBP1 activates PPAR gamma through the productionof endogenous ligand.Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1998 Apr14；95(8)4333-7。
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脂肪細(xì)胞中的結(jié)合為了證實(shí)測(cè)試分子在體內(nèi)結(jié)合的能力，使用分化成脂肪細(xì)胞的鼠成纖維細(xì)胞3T3-L1細(xì)胞系進(jìn)行類似的實(shí)驗(yàn)。在10天期限過(guò)程中在12-孔平板上進(jìn)行成纖維細(xì)胞分化。在實(shí)驗(yàn)的當(dāng)天，在37℃下，在含有30pM濃度的氚標(biāo)記的參比化合物(羅西格列酮)和不同濃度的測(cè)試化合物(在100pM-20μM濃度范圍)的DMEM培養(yǎng)基中進(jìn)行1小時(shí)孵育前，用PBS溶液將細(xì)胞洗滌兩次。然后用PBS溶液將細(xì)胞洗滌三次并且在1M NaOH溶液中增溶。在如上所述制備的溶解產(chǎn)物中，測(cè)定放射性(使用LS 6500 Beckman Coulter閃爍計(jì)數(shù)器)和蛋白質(zhì)濃度(使用Bradford方法)。在有未標(biāo)記的參比化合物(20μM濃度下)存在下評(píng)估非特異性結(jié)合。
將獲得的閃爍計(jì)數(shù)值與從和放射性配體一起孵育的樣品獲得的值(推定為0％取代)以及與從含有放射性配體和過(guò)量未放射性標(biāo)記的(推定為100％取代)的樣品獲得的值進(jìn)行比較。獲得的值包含在0-130％范圍中。
參考文獻(xiàn)1.Identification of high-affinity binding sites for theinsulin sensitizer rosiglitazone (BRL-49653) in rodent andhuman adipocytes using a radioiodinated ligand for peroxisomalproliferator-activated受體gamma.J.Pharmacol.Exp.Ther.1998 Feb；284(2)751-9。
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脂肪形成將3T3-L1細(xì)胞系細(xì)胞(來(lái)自ATCC)維持在補(bǔ)充了10％胎牛血清和抗生素的Dulbecco改進(jìn)的Eagle培養(yǎng)基中。在本實(shí)驗(yàn)前2天，使細(xì)胞傳代入12-孔微量培養(yǎng)板(30×104個(gè)細(xì)胞/孔)并且維持隨后的2天至融合。此后，用DMEM+FBS+抗生素更換培養(yǎng)基并且將50μM終濃度的測(cè)試化合物加入到細(xì)胞中。在這些條件下，將細(xì)胞維持14天，每隔2天改變一次含有測(cè)試化合物的培養(yǎng)基。在10-14天后，用油紅O染色分化的細(xì)胞，此后進(jìn)行攝影。
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葡萄糖攝取將分化的3T3-L1成纖維細(xì)胞在補(bǔ)充了10％FBS和抗生素的DMEM中與測(cè)試化合物(在20μM濃度下)一起孵育48小時(shí)。此后，用PBS洗滌細(xì)胞且然后向細(xì)胞中加入不含血清的DMEM。將細(xì)胞保持在孵育器中3小時(shí)(37℃/5％CO2)且然后用KHR緩沖液(25mM HEPES-NaOH；pH7.4；125mM NaCl；5mM KCl；1.2mM MgSO4；1.3mM CaCl2；1.3mM KH2PO4)更換培養(yǎng)基，并且在37℃下將細(xì)胞孵育30分鐘。通過(guò)向各測(cè)試孔中加入含有0，5mM 2脫氧-D-[1，2-3H]葡萄糖(0，5μCi)和100nM胰島素的50μl KRH緩沖液?jiǎn)?dòng)葡萄糖攝取。在37℃下孵育10分鐘后，抽吸培養(yǎng)基并且用冰冷的KRH緩沖液將細(xì)胞洗滌三次。然后將細(xì)胞溶于1M NaOH。在如上所述制備的溶解產(chǎn)物中，測(cè)定放射性(使用LS6500 Beckman Coulter閃爍計(jì)數(shù)器)和蛋白質(zhì)濃度(使用Bradford方法)。在有未標(biāo)記的參比化合物(20μM濃度下)存在下評(píng)估非特異性結(jié)合。
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權(quán)利要求
1.式(I)的新3-苯基丙酸衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中W表示COOH基團(tuán)或其生物電子等排體或-COO-C1-C4-烷基；Y表示NH、N-C1-C10-烷基、O或S；Z表示NH、N-C1-C10-烷基、N-芳基、N-雜芳基、S或O；X表示O、S、NH、N-C1-C10烷基、N-芳基、NSO2-C1-C10-烷基、N-S2-芳基或N-S2-雜芳基；R2-R8各自獨(dú)立地表示氫原子或選自下列的取代基C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C3-C7-環(huán)烷基、C3-C7-環(huán)烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、C3-C7-環(huán)硫代烷氧基、鹵原子、鹵素取代的C3-C7-環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-NO2、-CN、-SO2-NH2、-SO2-NH-C1-C4-烷基、-SO2-N(C1-C4-烷基)2、-CO-C1-C4-烷基、-O-CO-C1-C4-烷基、-CO-O-C1-C4-烷基、-CO-芳基、-CO-NH2、-CO-NH-C1-C4-烷基、-CO-N(C1-C4-烷基)2；A表示C1-C4-烷基、C3-C7-環(huán)烷基、鹵素取代的C3-C7-環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-NH-CO-C1-C4-烷基、-N(C1-C4-烷基)-CO-C1-C4-烷基、-NH-CO-芳基、-N(C1-C4-烷基)-CO-芳基、-N(C1-C4-烷基)-CO-C3-C7-環(huán)烷基、-NH-CO-NH2、-NH-CO-NH-C1-C4-烷基、-NH-CS-NH-C1-C4-烷基、-NH-CO-NH-芳基、-NH-CS-NH-芳基、-SO2-C1-C4-烷基、-SO2-芳基或-SO2-雜芳基；其中芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、亞乙二氧基、CN、鹵素或苯基，所述的苯基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基和鹵原子；且n表示0-4的整數(shù)，包括端值。
2.權(quán)利要求1所述的化合物，其中W表示COOH。
3.權(quán)利要求1或2中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Y表示NH。
4.權(quán)利要求1或2中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Y表示O。
5.權(quán)利要求1或2中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Y表示N-C1-C4-烷基，尤其是N-CH3。
6.權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Z表示O。
7.權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Z表示S。
8.權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Z表示N-C1-C4-烷基、尤其是N-CH3。
9.權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中Z表示N-苯基。
10.權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X表示O。
11.權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X表示S。
12.權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中X表示NSO2-C1-C4-烷基，尤其是NSO2-CH3。
13.權(quán)利要求1所述的化合物，其中W表示COOH，Y表示NH，Z表示O，且X表示O。
14.權(quán)利要求1所述的化合物，其中W表示COOH，Y表示O、Z表示O，且X表示O。
15.權(quán)利要求1所述的化合物，其中W表示COOH，Y表示NH，Z表示O，和X表示NSO2-C1-C4-烷基、尤其是NSO2-CH3。
16.權(quán)利要求1所述的化合物，其中W表示COOH，Y表示NH，Z表示S，且X表示NSO2-C1-C4-烷基，尤其是NSO2-CH3。
17.如權(quán)利要求1-16中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中R1-R8各自表示氫原子。
18.如權(quán)利要求1-17中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中n等于1或2。
19.如權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中A表示雜環(huán)基，所述的雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、C1-C4-硫代烷氧基、CN、鹵原子和苯基。
20.如權(quán)利要求19所述的化合物，其中A表示任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代的異唑基，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基，尤其是-CH3。
21.如權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中A表示苯基，所述的苯基任選被亞乙二氧基取代。
22.如權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中A表示-N(C1-C4-烷基)-CO-C3-C7-環(huán)烷基。
23.如權(quán)利要求22所述的化合物，其中A表示-N(CH3)-CO-環(huán)己基。
24.如權(quán)利要求1-18中任意一項(xiàng)所述的化合物，其中A表示-N(C1-C4-烷基)-CO-雜芳基，所述的雜芳基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基，C1-C4-硫代烷氧基、CN、鹵原子或苯基，所述的苯基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基和鹵素。
25.如權(quán)利要求24所述的化合物，其中雜芳基為嘧啶基，其任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基、鹵原子和苯基，所述的苯基任選被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，所述的取代基獨(dú)立地選自C1-C4-烷基、C1-C4-烷氧基和鹵原子。
26.如權(quán)利要求1-25中任意一項(xiàng)所述的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，具有如式(IA)中所示的立體化學(xué)構(gòu)型
27.如權(quán)利要求1-25中任意一項(xiàng)所述的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，具有如式(IB)中所示的立體化學(xué)構(gòu)型
28.權(quán)利要求1所述的化合物，所述的化合物選自下列化合物-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2，3-二氫-1，4-苯并二英-6-基甲氧基)苯基]丙酸；-(2 S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-((3，5-二甲基異唑-4-基)甲氧基)苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[5-甲基-2-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-唑-4-基]乙氧基)苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(4-{2-[[6-(2-氯苯基)-5-氰基-2-(甲硫基)嘧啶-4-基](甲基)氨基]乙氧基})苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-(2-叔丁基-5-甲基-1，3-唑-4-基)乙氧基)苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-(2-叔丁基-5-甲基-1，3-唑-4-基)乙氧基)苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]硫代乙氧基)苯基]丙酸；-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氨基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙基甲磺?；被?苯基]丙酸；和-(2S)-2-(1，3-苯并唑-2-基氧基)-3-[4-(2-[(環(huán)己基羰基)(甲基)氨基]乙氧基)苯基]丙酸；及其藥學(xué)上可接受的鹽。
29.藥物組合物，包含如權(quán)利要求1-28中任意一項(xiàng)所定義的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與藥學(xué)上可接受的載體和/或賦形劑。
30.如權(quán)利要求1-28中任意一項(xiàng)所定義的化合物作為藥物的應(yīng)用。
31.如權(quán)利要求1-28中任意一項(xiàng)所定義的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防過(guò)氧化物酶體增殖子激活受體γ(PPARγ)介導(dǎo)的疾病和病癥中的應(yīng)用。
32.權(quán)利要求31所述的應(yīng)用，其中所述的疾病或病癥選自1型糖尿病、2型糖尿病、胰島素抵抗、代謝綜合征、因糖尿病導(dǎo)致或與糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥、心血管病癥、動(dòng)脈粥樣硬化、肥胖、認(rèn)知障礙和脂質(zhì)代謝障礙。
33.對(duì)需要的哺乳動(dòng)物受試者治療和/或預(yù)防過(guò)氧化物酶體增殖子激活受體γ(PPARγ)介導(dǎo)的疾病和病癥的方法，該方法包括對(duì)所述的哺乳動(dòng)物給予治療或預(yù)防有效量的如權(quán)利要求1-28中任意一項(xiàng)所定義的化合物。
34.權(quán)利要求33所述的方法，其中所述的疾病或病癥選自1型糖尿病、2型糖尿病、胰島素抵抗、代謝綜合征、因糖尿病導(dǎo)致或與糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥、心血管病癥、動(dòng)脈粥樣硬化、肥胖、認(rèn)知障礙和脂質(zhì)代謝障礙。
全文摘要
本發(fā)明涉及為式I的3－苯基丙酸衍生物的新化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，其中W表示COOH基團(tuán)或其生物電子等排體或－COO－C
文檔編號(hào)C07D413/12GK101084203SQ200580043841
公開(kāi)日2007年12月5日 申請(qǐng)日期2005年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月20日
發(fā)明者Z·馬伊卡, T·斯塔文斯基, K·魯辛, A·薩維茨基, K·庫(kù)羅夫斯基, K·毛圖斯維琴, D·蘇利維斯基, P·科瓦爾奇克 申請(qǐng)人:阿達(dá)梅德公司