專(zhuān)利名稱(chēng)：吲哚酮類(lèi)衍生物及其用于制備抗腫瘤藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的吲哚酮類(lèi)衍生物、其幾何異構(gòu)體及藥學(xué)上可接受的鹽、它們的制備方法、含有所述化合物的藥物組合物。本發(fā)明還涉及吲哚酮類(lèi)衍生物用于制備具有拮抗血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抗腫瘤新生血管形成以及阻斷腫瘤惡性轉(zhuǎn)移作用的抗腫瘤藥物的用途。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤是一類(lèi)威脅人類(lèi)健康及生命的嚴(yán)重疾病。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的統(tǒng)計(jì)資料表明目前全世界每年約有1000萬(wàn)人發(fā)生腫瘤，700萬(wàn)人死亡，惡性腫瘤已成為僅次于心血管疾病的人類(lèi)第二殺手。因此，腫瘤防治受到社會(huì)各界的普遍關(guān)注。腫瘤化學(xué)治療(以下簡(jiǎn)稱(chēng)化療)是腫瘤治療的三個(gè)基本手段之一，經(jīng)過(guò)50多年的發(fā)展，用于腫瘤治療的藥物已取得了巨大的成就，獲得了一大批具有不同作用機(jī)制的臨床抗腫瘤藥物，遺憾的是這些抗腫瘤藥物都有不同程度的毒副作用，因而在臨床上使許多病人不能堅(jiān)持連續(xù)接受治療；另外，化療耐藥和腫瘤轉(zhuǎn)移是目前抗腫瘤藥物研究還未解決的另一個(gè)重要問(wèn)題，腫瘤抗藥性和腫瘤轉(zhuǎn)移性的產(chǎn)生常常使腫瘤治療達(dá)不到預(yù)期的效果。因此，需要尋找新的毒副作用小、沒(méi)有耐藥性并能夠阻止腫瘤轉(zhuǎn)移的抗腫瘤藥物。
早在20世紀(jì)70年代初期，Judah Folkman就在大量臨床實(shí)踐和經(jīng)驗(yàn)積累的基礎(chǔ)上，提出了腫瘤生長(zhǎng)依賴(lài)血管生成假說(shuō)腫瘤在形成的早期階段由于缺乏新生血管，直徑限制在2～3毫米，細(xì)胞個(gè)數(shù)不超過(guò)100萬(wàn)個(gè)；只有在腫瘤分泌的血管生成因子(tumor-angiogenesis factor，TAF)的介導(dǎo)下進(jìn)入血管生成期，獲得充足的氧氣和養(yǎng)料供應(yīng)后，腫瘤才能迅速生長(zhǎng)(Folkman J，N.Engl.J.Med.，1971，285(21)1182-1186)；并由此提出了抗血管生成的概念(Folkman J，Ann.Surg.，1972，175(3)409-416)。
經(jīng)過(guò)30多年的發(fā)展，尤其是近10年分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，關(guān)于血管生成的大量基礎(chǔ)研究成果不僅完全證實(shí)了Folkman的假說(shuō)，還發(fā)現(xiàn)血管生成也是腫瘤轉(zhuǎn)移必需的(Gasparini G，Oncol.Rep.，1994，1(1)7-12)，并且與腫瘤的多藥耐藥有關(guān)(Zhang XS，Acta.Pharmacol.Sin.，2001，22(8)731-735)。
由于腫瘤的發(fā)生和發(fā)展都依賴(lài)于新生血管的形成，而且腫瘤區(qū)血管的生長(zhǎng)是正常組織的50-200倍，以腫瘤區(qū)血管為靶來(lái)抑制其生長(zhǎng)具備以下優(yōu)點(diǎn)(1)抗血管形成治療具有良好的特異性，因?yàn)檎３赡耆搜苄纬苫就Ｖ?，只有在妊娠、月?jīng)周期、炎癥、腫瘤等情況下，血管形成才被啟動(dòng)，血管抑制劑對(duì)靜止的血管是沒(méi)有作用的。(2)內(nèi)皮細(xì)胞的基因表達(dá)相對(duì)穩(wěn)定，很少突變，細(xì)胞之間異質(zhì)性很小，故不易產(chǎn)生耐藥性，可長(zhǎng)期使用。(3)所有血管內(nèi)皮細(xì)胞全部暴露在血液中，藥物能直接發(fā)揮作用，而不需要滲透等環(huán)節(jié)，故藥物劑量小療效高。
1.血管形成過(guò)程新生血管是指從已存在的血管上發(fā)育出新的血管系統(tǒng)。正常的血管生成只在某些短期、特定的生理過(guò)程中存在，如生殖，傷口愈合等(Hyder SM，Mol Endocrinol 1999；13806-11)。血管生成是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程，包括細(xì)胞間各種細(xì)胞因子和細(xì)胞外基質(zhì)廣泛的相互作用。血管形成的步驟包括現(xiàn)存血管的內(nèi)皮細(xì)胞降解基底膜并轉(zhuǎn)移入侵到其它器官，其中需要MMPs(金屬蛋白酶)和PA系統(tǒng)參與(Mignatti P，Enzyme Protein 1996；49117-37)；第二步是內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，這一步需要的各種生長(zhǎng)因子參與；最后一步是內(nèi)皮細(xì)胞之間、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間相互作用形成毛細(xì)血管，這一步需要細(xì)胞粘性分子整合，另外細(xì)胞粘性分子也參與了上兩步過(guò)程(Bischoff J，J Clin Invest1997；100S37-9)。
2.血管形成因子與新生血管促進(jìn)腫瘤新血管形成的血管生成因子很多，從1971年Folkman等從人體和動(dòng)物實(shí)體瘤與腹水瘤中分離出一種可以促進(jìn)血管形成的可溶性物質(zhì)，稱(chēng)為腫瘤血管形成因子(TAF)(Folkman J，N.Engl.J.Med.，1971，285(21)1182-1186)開(kāi)始，近20年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，促進(jìn)血管生成因子是一大類(lèi)生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子類(lèi)的多肽物質(zhì)，稱(chēng)為腫瘤血管形成誘導(dǎo)物，如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)、巨噬細(xì)胞來(lái)源的表皮生長(zhǎng)因子、血管形成營(yíng)養(yǎng)素、IL-1、IL-8、前列腺素(PGE1，PGE2)、丁酰甘油、煙酰胺及腺苷、透明質(zhì)酸代謝產(chǎn)物及一些金屬銅的復(fù)合物等。1982年發(fā)現(xiàn)第一個(gè)血管形成因子是堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)，隨后確定了酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF)，這兩種蛋白均與肝素具有高親和力，并缺乏傳統(tǒng)的信號(hào)肽序列為特征的生長(zhǎng)因子家族成員，能促進(jìn)表皮內(nèi)皮細(xì)胞再生，促進(jìn)血管內(nèi)細(xì)胞分裂，刺激內(nèi)皮細(xì)胞向腫瘤組織趨化運(yùn)動(dòng)并形成管狀結(jié)構(gòu)，還提高組織中血纖維蛋白溶解酶原激活因子類(lèi)(PAs)及誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生其它蛋白酶，是血管生成較為直接的誘導(dǎo)物。相繼又確定了另一種分泌蛋白稱(chēng)為血管通透性因子(VPF)或血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)，它是一種分子量為40KD-45KD的分泌性糖蛋白，其兩種主要受體是flt-1和flk-1，VEGF可高效特異性地作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，對(duì)其有強(qiáng)烈的促分裂作用和趨化作用。體外可促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)，體內(nèi)可誘導(dǎo)血管發(fā)生，實(shí)驗(yàn)證明腫瘤細(xì)胞可以合成和分泌VEGF，VEGF在腫瘤組織中的表達(dá)水平比瘤旁組織高，而正常組織中僅腎、卵巢等少數(shù)臟器有高水平表達(dá)(Neufeld G，F(xiàn)ASEBJ，1999，13(1)9-22)。在有些腫瘤中證實(shí)其與惡性程度、侵襲、轉(zhuǎn)移有關(guān)，所以VEGF是誘導(dǎo)腫瘤血管發(fā)生的調(diào)節(jié)因素(Warren RS，Endocr.Rev.，1997，18(1)4-25)。
腫瘤細(xì)胞分泌的多種血管生成因子之間相互聯(lián)系和調(diào)控，其中VEGF處于核心地位，是目前已知活性最強(qiáng)、專(zhuān)屬性最高的血管生成因子，其它血管生成因子大都通過(guò)增強(qiáng)VEGF的表達(dá)產(chǎn)生血管生成的作用(Zhang QX，J.Surg.Res.，1997，67(2)147-154)，而且VEGF有相當(dāng)于組胺5萬(wàn)倍的促血管通透性增加的活性，有利于血管的轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散(Berkman RA，Science，1983，219(4587)983-985)。因此VEGF是抗血管生成藥物的理想作用靶點(diǎn)。
3.Bcl-2與腫瘤新生血管形成腫瘤新生血管形成還與其它(非血管生成因子)類(lèi)型的基因有關(guān)，Bcl-2基因家族就是一例。Bcl-2參與新血管的形成是通過(guò)以下兩種途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的1)Bcl-2能夠阻止微血管上皮細(xì)胞的凋亡，從而對(duì)微血管在腫瘤中的存在和密度起著重要作用(Jacques E，American Journal of Patbology 1999；154375-384)。2)引發(fā)其它血管生成因子的表達(dá)，由其它血管生成因子刺激新血管的生成，這種關(guān)系主要體現(xiàn)在Bcl-2誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)VEGF方面(Blancher C，F(xiàn)ASED J，2000，14652-660)，這說(shuō)明了Bcl-2在新血管生成過(guò)程中的重要作用，提示人們?cè)诳寡苌芍委熤幸瑫r(shí)抑制Bcl-2的作用，否則很難達(dá)到使腫瘤消退的治療效果。
另外，Bcl-2基因及其基因家族的主要功能是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡，在保持細(xì)胞的合適形態(tài)以及通過(guò)消除有害或無(wú)用的細(xì)胞來(lái)調(diào)整細(xì)胞的數(shù)量方面起著重要作用(Adams J，Science 281，1322-1326)。Bcl-2能阻止由許多刺激誘發(fā)的細(xì)胞凋亡，如化療、射線、熱休克、某些病毒、自由基、脂質(zhì)過(guò)氧化、p53、c-myc等。Bcl-2存在于一些長(zhǎng)壽命和易損傷的正常組織細(xì)胞中，如神經(jīng)細(xì)胞、非分泌腺的導(dǎo)管細(xì)胞、基底角朊細(xì)胞、結(jié)腸腺管底部細(xì)胞、成人和胚胎的皮膚以及胚胎的腎臟與軟骨組織(Adams J，Science 281，1322-1326)。但在異常情況下Bcl-2基因的高效表達(dá)，不僅是腫瘤形成的原因之一(Folkman J，Cell 79，185-188)，也是腫瘤產(chǎn)生耐藥性的原因之一(Ellis LM，Eur.J.Cancer 32a，2451-2460)，因?yàn)樗軌蜃柚狗N類(lèi)繁多且作用機(jī)制不同的化療藥物所誘導(dǎo)的細(xì)胞調(diào)亡；因此Bcl-2基因及其受體也是很好的抗腫瘤靶點(diǎn)。Bcl-2蛋白抑制劑能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞調(diào)亡，并增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)其它化療藥物的敏感性，因此能夠作為抗腫瘤藥物使用；而且Bcl-2的生物功能在正常細(xì)胞中并不是絕對(duì)必需的，抑制Bcl-2蛋白功能將不會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生很大影響。
本發(fā)明所涉及的吲哚酮類(lèi)衍生物可以靶向Bcl-2蛋白，誘導(dǎo)高表達(dá)Bcl-2蛋白的腫瘤細(xì)胞調(diào)亡及提高腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性；同時(shí)本發(fā)明化合物可以阻斷FGF受體和VEGF受體的信號(hào)傳導(dǎo)功能，阻斷血管內(nèi)皮細(xì)胞形成新生血管的能力，抑制腫瘤新生血管的形成，阻止腫瘤的惡性轉(zhuǎn)移。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供能夠選擇性地阻斷或打開(kāi)Bcl-2/BAX異二聚體，通過(guò)調(diào)節(jié)Bcl-2/BAX異二聚與BAX/BAX同二聚之間的比率來(lái)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡及提高腫瘤對(duì)化療藥物治療的敏感性，并通過(guò)抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，阻斷血管內(nèi)皮細(xì)胞形成新生血管的能力來(lái)抑制腫瘤新生血管的形成并阻止腫瘤的惡性轉(zhuǎn)移。
本發(fā)明已經(jīng)發(fā)現(xiàn)通式I吲哚酮類(lèi)衍生物可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡和抑制腫瘤新生血管的形成，因此通式I吲哚酮類(lèi)衍生物可以用于治療和/或預(yù)防Bcl-2蛋白高表達(dá)的惡性腫瘤，包括結(jié)腸癌、直腸癌、鼻咽癌、骨髓癌、乳腺癌、非何杰金氏淋巴癌、胃癌、前列腺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和肺癌。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明涉及通式I吲哚酮類(lèi)衍生物、其幾何異構(gòu)體、及藥學(xué)上可接受的鹽
其中n等于2或3；R1為選自呋喃，噻吩，吡咯，吡唑，咪唑，噻唑，噁唑，異惡噁唑，吡啶，噠嗪，嘧啶，吡嗪，吲哚，苯并呋喃或喹啉的雜芳基，所述雜芳基可以未被取代或被1或2個(gè)選自下面的取代基取代鹵素，硝基，羥基，羥甲基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1～C6直鏈或支鏈烷基，C2～C6直鏈或支鏈烯基，C1～C4烷氧基，C1～C4烷氧?；?，C2～C4烯氧基，苯氧基，芐氧基，羧基或氨基；R2選自氫，鹵素，氰基，亞砜基，砜基，硝基，羧基，C1～C3烷氧基，C1～C3烷?；?，C1～C3烷酯基，C1～C3烷酰氨基；R3、R4獨(dú)立選自C1～C6直鏈或支鏈烷基，C2～C7直鏈或支鏈烯基；或R3和R4和與它們相連的氮原子一起構(gòu)成4～6元雜環(huán)，其選自四氫吡咯，哌啶，嗎啉，哌嗪或氮甲基哌嗪。
本發(fā)明的一方面涉及通式I吲哚酮類(lèi)衍生物，其幾何異構(gòu)體或其可藥用鹽或水合物。本發(fā)明出乎意料地發(fā)現(xiàn)，當(dāng)n等于2或3時(shí)，通式I吲哚酮類(lèi)衍生物及其幾何異構(gòu)體具有優(yōu)良的藥學(xué)穩(wěn)定性，特別適合工業(yè)化大量制備和長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
PCT專(zhuān)利WO0190104、WO0190103和WO0190068披露了3-(3’，5’-二甲基-2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮衍生物的麥尼氏堿(Mannich Base)前藥，但該類(lèi)化合物不穩(wěn)定，例如，在10％的乙醇溶液中、溫度為4～30℃、時(shí)間為30分鐘的條件下，3-(3’，5’-二甲基-2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮的哌啶麥尼氏堿大約有5％分解，不適合大量制備和長(zhǎng)期儲(chǔ)存，不符合藥物穩(wěn)定性的質(zhì)量控制要求。而本發(fā)明通式I吲哚酮類(lèi)衍生物具有優(yōu)異的藥學(xué)穩(wěn)定性，例如，在10％的乙醇溶液中、溫度為4～30℃、時(shí)間為30分鐘的條件下，1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮完全不分解，藥物的純度保持不變，符合藥物穩(wěn)定性的質(zhì)量控制要求，特別適合大量工業(yè)化制備和長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案，本發(fā)明涉及通式I化合物、其幾何異構(gòu)體及藥學(xué)上可接受的鹽 其中n等于2；R1為選自呋喃，噻吩，吡咯或吡啶的雜芳基；所述雜芳基可以未被取代或被1或2個(gè)選自下面的取代基取代鹵素，C1～C6直鏈或支鏈烷基，C1～C4烷氧酰基；R2選自氫，鹵素；R3和R4和與它們相連的氮原子一起構(gòu)成4～6元雜環(huán)，其選自哌啶，嗎啉。
本發(fā)明式I化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽特別優(yōu)選以下化合物，但這些化合物并不意味著對(duì)本發(fā)明的任何限制。
表1.式(I)吲哚酮類(lèi)衍生物中優(yōu)選的化合物

本發(fā)明最優(yōu)選的化合物為(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮 本發(fā)明的另一方面涉及制備通式I化合物的方法，其包括反應(yīng)方案1
a) 將式II的吲哚酮衍生物 其中R2的定義同通式I化合物，與具式III的氨基鹵代烴衍生物反應(yīng) 其中n、R3和R4的定義同通式I化合物，X為Cl或Br，具體來(lái)說(shuō)，將式II的吲哚酮衍生物(購(gòu)自ACROS公司)和式III的氨基鹵代烴衍生物(購(gòu)自ACROS公司)溶于適量丙酮中，并加入適量的碳酸鉀、四丁基溴化銨和KI，升溫至回流溫度反應(yīng)8小時(shí)左右，過(guò)濾，真空濃縮，得到粗品，用硅膠柱純化得到中間體化合物IV(可參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428)，
其中n、R2、R3和R4的定義同通式I化合物，b)將式IV化合物與雜芳基甲醛V反應(yīng) 其中R1的定義同通式I化合物，將步驟a得到的式IV化合物與雜芳基甲基醛V(購(gòu)自商品試劑來(lái)源或按照文獻(xiàn)De Groot JA，Org.prep.precedures Int.1981，13(2)97-101提供的方法制備)在一種合適的溶劑或分散劑如一種合適的醇如甲醇或乙醇中，于10℃～50℃的溫度下，加入堿如無(wú)機(jī)堿如碳酸鈉，或有機(jī)堿如二乙胺或哌啶，或通入酸性氣體如氯化氫，催化反應(yīng)8～24小時(shí)得到通式I的化合物(參考Adreani A，Eur.Jmed.Chem.，1990，25，187-190)， 其中n、R1、R2、R3和R4的定義同通式I化合物。
本發(fā)明化合物可選擇多種反應(yīng)路線制備，通式I化合物還可以通過(guò)下面的反應(yīng)方案制備反應(yīng)方案2 c)將式II吲哚酮衍生物 其中R2的定義同通式I化合物，與具式V的雜芳基甲醛反應(yīng) 其中R1的定義同通式I化合物，將式II的吲哚酮衍生物(購(gòu)自ACROS公司)與雜芳基甲基醛V(購(gòu)自商品試劑或按照文獻(xiàn)De Groot JA，Org prep precedures Int1981，13(2)97-101提供的方法制備)在一種合適的溶劑或分散劑如一種合適的醇如甲醇或乙醇中，于10℃～50℃的溫度下，加入堿如無(wú)機(jī)堿如碳酸鈉，或有機(jī)堿如二乙胺或哌啶，或通入酸性氣體如氯化氫，催化反應(yīng)8～24小時(shí)得到式VI化合物(參考Adreani A，Eur.J.med.Chem.，1990，25，187-190)，
其中R1和R2的定義同通式I化合物，d)將式VI化合物與氨基鹵代烴衍生物III反應(yīng) 其中n、R3和R4的定義同通式I化合物，X為Cl或Br，將步驟c得到的式VI化合物和鹵代烴衍生物III溶解丙酮中，并加入適量的碳酸鉀、四丁基溴化銨和KI，升溫回流反應(yīng)8小時(shí)左右，過(guò)濾，真空濃縮，得到粗品，用硅膠柱純化得到目的化合物I(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428)， 其中n、R1、R2、R3和R4的定義同通式I的化合物。
本發(fā)明化合物可以采用的純化方式為高真空蒸餾或者層析，這里所使用的硅膠為常規(guī)層析用硅膠，顆粒度10～40微米，洗脫劑由單一或者多種溶劑配制而成，優(yōu)選由氯仿與甲醇按不同比例配制而成的混合溶劑。
本發(fā)明的另一方面涉及藥物組合物，其包括至少一種通式I吲哚酮類(lèi)化合物或其幾何異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥用載體或賦形劑。
本發(fā)明中的藥物組合物可按本領(lǐng)域已知方法制備，如將式I化合物、其幾何異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽與藥用載體或賦形劑混合。
本發(fā)明的另一方面涉及至少一種通式I吲哚酮類(lèi)化合物、其幾何異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療與Bcl-2高表達(dá)有關(guān)的疾病或癥狀的藥物的用途，或用于制備具有拮抗血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤新生血管形成或阻斷腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)移作用的抗腫瘤藥物的用途。
本發(fā)明還提供了對(duì)式I吲哚酮類(lèi)化合物進(jìn)行細(xì)胞學(xué)功能評(píng)價(jià)的方法、抗腫瘤活性的測(cè)試結(jié)果以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的活性測(cè)試結(jié)果。
本發(fā)明中的術(shù)語(yǔ)“藥用鹽”可以是藥用無(wú)機(jī)或有機(jī)鹽。本發(fā)明通式I中具有堿性基團(tuán)的化合物可以與無(wú)機(jī)酸形成藥用鹽，例如硫酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽；也可與有機(jī)酸形成藥用鹽，例如乙酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、馬來(lái)酸鹽等。本發(fā)明通式I中具有酸性基團(tuán)(如R1中含有游離羧基)的化合物可以與堿金屬或堿土金屬形成藥用鹽，優(yōu)選但不限于鈉鹽、鉀鹽，鎂鹽或鈣鹽。
本發(fā)明化合物可以單獨(dú)或以藥物組合物的形式給藥。給藥途徑可以是口服、非腸道或局部給藥。藥物組合物可根據(jù)給藥途徑配成各種適宜的劑型。
本發(fā)明化合物的藥物組合物可以以下面的任意方式施用口服，噴霧吸入，直腸用藥，鼻腔用藥，頰部用藥，局部用藥，非腸道用藥，如皮下，靜脈，肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，鞘內(nèi)，心室內(nèi)，胸骨內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸入，或借助一種外植儲(chǔ)器用藥。其中優(yōu)選口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥方式。
當(dāng)口服用藥時(shí)，本發(fā)明化合物可制成任意口服可接受的制劑形式，包括但不限于片劑、膠囊、水溶液或水懸浮液。其中，片劑使用的載體一般包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂。膠囊制劑使用的稀釋劑一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。水懸浮液制劑則通常是將活性成分與適宜的乳化劑和懸浮劑混合使用。任選地，以上口服制劑形式中還可加入一些甜味劑、芳香劑或著色劑。
當(dāng)局部用藥時(shí)，特別是治療局部外敷容易達(dá)到的患面或器官，如眼睛、皮膚或下腸道神經(jīng)性疾病時(shí)，可根據(jù)不同的患面或器官將本發(fā)明化合物制成不同的局部用藥制劑形式，具體說(shuō)明如下當(dāng)眼部局部施用時(shí)，本發(fā)明化合物可配制成一種微粉化懸浮液或溶液的制劑形式，所使用載體為等滲的具有一定pH的無(wú)菌鹽水，其中可加入也可不加防腐劑如氯化芐基烷醇鹽。對(duì)于眼用，也可將化合物制成膏劑形式如凡士林膏。
當(dāng)皮膚局部施用時(shí)，本發(fā)明化合物可制成適當(dāng)?shù)能浉?、洗劑或霜?jiǎng)┲苿┬问?，其中將活性成分懸浮或溶解于一種或多種載體中。軟膏制劑可使用的載體包括但不限于礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、乳化蠟和水；洗劑或霜?jiǎng)┛墒褂玫妮d體包括但不限于礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、吐溫60、十六烷酯蠟、十六碳烯芳醇、2-辛基十二烷醇、芐醇和水。
本發(fā)明化合物還可以無(wú)菌注射制劑形式用藥，包括無(wú)菌注射水或油懸浮液或無(wú)菌注射溶液。其中，可使用的載體和溶劑包括水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，滅菌的非揮發(fā)油也可用作溶劑或懸浮介質(zhì)，如單甘油酯或二甘油酯。
另外需要指出，本發(fā)明化合物的使用劑量和使用方法取決于諸多因素，包括患者的年齡、體重、性別、自然健康狀況、營(yíng)養(yǎng)狀況、化合物的活性強(qiáng)度、服用時(shí)間、代謝速率、病癥的嚴(yán)重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。優(yōu)選的使用劑量介于0.01～100mg/kg體重/天，其中最優(yōu)劑量在20mg/kg-30mg/kg體重/天。
具體實(shí)施方案本發(fā)明可以通過(guò)下面的實(shí)施例得到說(shuō)明，但這些實(shí)施例不意味著對(duì)本發(fā)明有任何限制。
實(shí)施例1(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(3’，5’-二甲基-2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮取等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(2.44g，0.01mol，參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和3，5-二甲基-2-吡咯甲醛(1.23g，0.01mol，按照De Groot JA，Org.prep.preceduresInt.1981，13(2)97-101文獻(xiàn)制備)置于圓底燒瓶中，加入20.0ml甲醇，0.20ml哌啶，于室溫氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌反應(yīng)24小時(shí)，抽濾，用甲醇洗滌，得到粗品，用無(wú)水乙醇結(jié)晶得到標(biāo)題化合物純品，其為黃色固體，產(chǎn)率70.9％.
1H-NMRδppm(CDCl3)0.71(s，1H)，8.74(s，2H)，7.71(d，2H)，7.56(s，1H)，7.36～7.41(d，1H)，7.34～7.24(t，1H)，6.89～6.86(t，1H)，(d，1H)。MS(m/e)223[M+1]。
鹽酸鹽的制備將游離堿溶于三氯甲烷中，加入無(wú)水乙醚-氯化氫溶液至強(qiáng)酸性，過(guò)濾，用無(wú)水乙醚洗滌，得到的粗品用無(wú)水乙醇結(jié)晶，得到純品。
實(shí)施例2(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和2-吡咯甲醛〔購(gòu)自ACROS公司〕為原料進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物純品，其為黃色固體，收率90.5％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)13.38(寬單峰，1H)，10.88(寬單峰，1H)，8.02～8.01(d，1H)，7.69(s，1H)，7.23～7.20(q，1H)，6.82～6.80(d，1H)，6.03(s，1H)，2.50(s，3H)，2.30(s，3H)。MS(m/e)317(95)，319(100)，238，133，112，85，69。
實(shí)施例3(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和4’-溴-2’-噻吩甲醛(購(gòu)自ACROS公司)為原料進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物。黃色固體，收率95％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)12.01(寬單峰，1H)，10.84(寬單峰，1H，)，8.22(s，1H)，7.87(s，1H)，7.75～7.73(d，1H)，7.65～7.64(d，1H)，7.50～7.52(d，1H)，7.27～7.23(t，1H)，7.20～7.17(t，2H)，6.95～6.91(t，1H)，6.89～6.87(d，1H)。Ms(m/e)261[M+，100]，232，204.0，117實(shí)施例4(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(2’-吡啶甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和2-吡啶甲醛(購(gòu)自ACROS公司)為原料進(jìn)行反應(yīng)，得標(biāo)題化合物，其為紅色固體，產(chǎn)率83.7％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)10.31(s，1H)，9.11(d，1H)，8.92(d，1H)，8.00～7.97(m，1H)，7.69(s，1H)，7.52～7.50(m，1H)，7.43～7.40(m，1H)，7.32～7.30(d，1H)，7.13～7.10(t，1H)，4.28～4.23(t，2H)，3.62～3.60(d，2H)，3.33～3.30(q，2H)，3.00～2.94(q，2H)，1.83～1.70(m，5H)，1.39～1.36(m，1H)。Ms(m/e)333.2[M]，2307.1，290.2，192.1，98.1(100)，71.1。
實(shí)施例5(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(5’-乙酰氧甲基-2-呋喃甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和5-乙酰氧甲基-2-呋喃甲醛(購(gòu)自ACROS公司)為原料進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，其為紅色固體，產(chǎn)率94％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)7.74(d，1H)，7.56(s，1H)，7.50～7.48(m，2H)，7.29～7.26(m，1H)，7.06～7.04(m，2H)，4.34(s，2H)，4.30～4.28(t，2H)，3.51～3.50(d，2H)，3.30～3.29(q，2H)，3.00～2.93(q，3H)，2.40(s，3H)，1.80～1.68(m，5H)，1.350～1.32(m，1H)。Ms(m/e)394[M]，283，98.1(100)。
實(shí)施例6(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(3’-甲基-2’-呋喃甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和3-甲基-2-呋喃甲醛(購(gòu)自ACROS公司)為原料進(jìn)行反應(yīng)，所不同的是反應(yīng)溫度為14℃，反應(yīng)時(shí)間為48小時(shí)，得到標(biāo)題化合物的粗品。用乙醇重結(jié)晶得到純品，其為黃色固體，收率88.7％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)7.82(d，1H)，7.6(s，1H)，7.50～7.48(m，2H)，7.29～7.26(m，1H)，7.06～7.04(m，2H)，4.34(s，2H)，3.51～3.50(d，2H)，3.30～3.29(q，2H)，3.23(s，3H)，3.00～2.93(q，2H)，2.40(s，3H)，1.80～1.68(m，5H)，1.350～1.32(m，1H).Ms(m/s)336.2(M)，111.1，98(100)。
實(shí)施例7(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(3’-甲基-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和3-甲基-2-噻吩甲醛(購(gòu)自ACROS公司)為原料進(jìn)行反應(yīng)，所不同的是反應(yīng)溫度為16℃，反應(yīng)時(shí)間為46小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體，收率93.4％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)7.74(d，1H)，7.56(s，1H)，7.50～7.48(m，2H)，7.29～7.26(m，1H)，7.06～7.04(m，2H)，4.34(s，2H)，4.30～4.28(t，2H)，3.51～3.50(d，2H)，3.30～3.29(q，2H)，2.40(s，3H)，1.80～1.68(m，5H)，1.350～1.32(m，1H)。MS(m/e)352.1[M]，241.1，98(100)，77.0。
實(shí)施例8(Z)-1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和4-溴-2-噻吩甲醛〔購(gòu)自ACROS公司〕為原料進(jìn)行反應(yīng)，所不同的是反應(yīng)溫度為25℃，反應(yīng)時(shí)間為35小時(shí)，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體，產(chǎn)率93.8％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)8.09(s，1H)，7.99(d，1H)，7.98～7.97(d，1H)，7.71～7.70(d，1H)，7.32～7.29(m，1H)，7.09～7.06(m，2H)，3.90～3.88.(t，2H)，3.52～3.50(t，4H)，2.55～2.51(s，4H)，2.50～2.49(m，2H)。MS(m/e)420(M+2)，418[M]，256，100(100)。
實(shí)施例9(Z)-1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-3-(3’，5’-二甲基-2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和3，5-二甲基-2-吡咯甲醛(按照DeGroot JA，Org.prep.precedures Int.1981，13(2)97-101文獻(xiàn)制備)為原料進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體，產(chǎn)率80.9％。
1H-NMRδppm(CDCl3)13.18(s，1H)，7.49～7.47(d，1H)，7.37(s，1H)，7.25(s，1H)，7.18～7.15(t，1H)，7.06～7.03(t，1H)，6.95～6.94(d，1H)，4.10(t，2H)，4.03～4.01(t，4H)，2.64(t，3H)，2.54(m，4H)，2.38(s，3H)，1.45(m，2H)。MS(m/e)351[M]，238，98.1(100).
實(shí)施例10(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(5’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮按實(shí)施例1方法，以等摩爾的1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-2-吲哚酮(參考Mokrosz，M.J.，Pharmazie[PHARAT]1997，52(6)，423-428文獻(xiàn)提供的方法制備)和3-溴-2-噻吩甲醛〔購(gòu)自ACROS公司〕為原料進(jìn)行反應(yīng)，得到標(biāo)題化合物，其為黃色固體，產(chǎn)率80.9％。
1H-NMRδppm(DMSO-d6)8.08(s，1H)，7.99(d，1H)，7.98～7.97(d，1H)，7.71～7.70(d，1H)，7.32～7.29(m，1H)，7.09～7.06(m，2H)，3.90～3.88.(t，2H)，3.52～3.50(t，4H)，2.55～2.51(s，4H)，2.50～2.49(m，2H)。MS(m/e)420(M+2)，418(M)，256，100(100)。
實(shí)施例11吲哚酮類(lèi)化合物抑制內(nèi)皮細(xì)胞(ECV-304)增殖及對(duì)bFGF和VEGF選擇性抑制作用實(shí)驗(yàn)。
內(nèi)皮細(xì)胞(ECV-304)購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)細(xì)胞庫(kù)。取處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期的細(xì)胞接種于96孔板中，每孔3-4×103個(gè)細(xì)胞/100μl，24h后，吸取培養(yǎng)液，每孔加入100μl含不同濃度藥物的完全培養(yǎng)液(生長(zhǎng)因子選擇性抑制試驗(yàn)中，完全培養(yǎng)液由1％胎兒牛血清培養(yǎng)液中分別補(bǔ)充10ng/ml bFGF或VEGF的培養(yǎng)液替換)。繼續(xù)培養(yǎng)72h，棄去培養(yǎng)液，每孔加0.5mg/ml的四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)100μl，37℃，孵育4h，吸取四甲基偶氮唑藍(lán)液，每孔加入100μl的二甲基亞砜(DMSO)，輕輕震搖10min，用BIORAD 550型讀板機(jī)于490nm波長(zhǎng)下測(cè)定96孔板每一孔的光密度OD值，每一化合物在10-6-10-4間設(shè)定5-6個(gè)濃度，每一測(cè)試設(shè)3-4個(gè)平行孔，重復(fù)3-4次。
藥物對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率(％)＝(溶劑對(duì)照組平均OD值-用藥組平均OD值)/對(duì)照組平均OD值，然后根據(jù)不同藥物濃度對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率(％)計(jì)算藥物的IC50值。
表1.吲哚酮類(lèi)化合物抑制ECV-304細(xì)胞增殖四甲基偶氮唑藍(lán)比色法測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果 注細(xì)胞濃度(4×103個(gè)/孔)，I.R(3×10-5)藥物在3×10-5Mol時(shí)的抑制率，此時(shí)藥物抑制作用最為敏感，便于比較不同化合物的抑制作用強(qiáng)弱。
由圖表中可以看出，所試化合物對(duì)ECV-304在1％NBS+1640培養(yǎng)條件下的增殖具有不同程度的抑制作用；對(duì)VEGF和bFGF具有不同的選擇性抑制作用。其中，化合物1和2對(duì)bFGF誘導(dǎo)的增殖作用選擇性強(qiáng)于VEGF，化合物3、4和8對(duì)VEGF的選擇性強(qiáng)于bFGF，化合物5對(duì)兩種生長(zhǎng)因子的選擇性抑制作用相當(dāng)。
實(shí)施例12溴化胸腺嘧啶(Brdu)摻入法評(píng)價(jià)吲哚酮類(lèi)化合物對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC增殖的抑制作用HUVEC細(xì)胞株購(gòu)自美國(guó)Cascade Biologics公司，培養(yǎng)液為HUVEC專(zhuān)用培養(yǎng)基medium200補(bǔ)充LSGS添加物。按照Roche公司，Cell Proliferation ELISA，BrdU(colorimetric)Kit方法進(jìn)行試驗(yàn)。簡(jiǎn)述如下，取對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的HUVEC，接種于96孔板中，每孔4×103個(gè)細(xì)胞/100μl，24h后，棄去培養(yǎng)液，每孔加入100μl含不同濃度藥物的培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)72h，每孔加入10μl(100μM)BrdU摻入液，繼續(xù)培養(yǎng)18h，棄去培養(yǎng)液，每孔加入200μl的固定變性液，處理40min，吸干固定變性液，室溫40min；每孔加入10μl抗BrdU-POD抗體工作液，室溫孵育90min，用200-300μl清洗工作液洗板3次，棄去清洗工作液；每孔加入100ul底物反應(yīng)液，室溫顯色10min，每孔加入25μl 1mol/L硫酸終止反應(yīng)。采用BIORAD 550型讀板機(jī)于450nm波長(zhǎng)(690參比波長(zhǎng))下測(cè)定96孔板每一孔的光密度OD值，每一化合物在10-6-10-4間設(shè)定4-5個(gè)濃度，每一測(cè)試設(shè)3-4個(gè)平行孔，重復(fù)2-3次。
藥物對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率(％)＝(溶劑對(duì)照組平均OD值-用藥組平均OD值)/對(duì)照組平均OD值，然后根據(jù)不同藥物濃度對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率(％)計(jì)算藥物的IC50值。
表2.溴化胸腺嘧啶(Brdu)摻入法評(píng)價(jià)吲哚酮類(lèi)化合物對(duì)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC增殖的抑制作用的試驗(yàn)結(jié)果實(shí)施例化合物IC50(X±SD)(μmol/L)1 11.2±1.93 4.8±0.54 19.4±1.87由圖表中數(shù)據(jù)可以看出，三種化合物對(duì)HUVEC的DNA合成具有不同程度的抑制作用，其抑制作用的強(qiáng)弱順序是3＞1＞4。
實(shí)施例13(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮化合物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞U937的凋亡研究胰酶消化不同處理貼壁的腫瘤細(xì)胞U937，離心，用PB輕輕洗細(xì)胞，收集細(xì)胞105個(gè)以上，以75％冰冷乙醇固定細(xì)胞，PI染色DNA，流式細(xì)胞儀上檢測(cè)DNA含量的分布。(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮化合物在濃度為50μM、處理時(shí)間72h時(shí)可明顯誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞U937凋亡，流式細(xì)胞儀上檢測(cè)DNA含量的分布表明藥物引起的是明顯的凋亡而不是壞死。
權(quán)利要求
1.通式I化合物、其幾何異構(gòu)體及其藥學(xué)上可接受的鹽， 其中n等于2或3，R1為選自呋喃，噻吩，吡咯，吡唑，咪唑，噻唑，噁唑，異噁唑，吡啶，噠嗪，嘧啶，吡嗪，吲哚，苯并呋喃或喹啉的雜芳基；所述雜芳基可以未被取代或被1或2個(gè)選自下面的取代基取代鹵素，硝基，羥基，羥甲基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1～C6直鏈或支鏈烷基，C2～C6直鏈或支鏈烯基，C1～C4烷氧基，C1～C4烷氧?；?，C2～C4烯氧基，苯氧基，芐氧基，羧基或氨基，R2選自氫，鹵素，氰基，亞砜基，砜基，硝基，羧基，C1～C3烷氧基，C1～C3烷?；?，C1～C3烷酯基，C1～C3烷酰氨基，R3、R4獨(dú)立選自C1～C6直鏈或支鏈烷基，C2～C7直鏈或支鏈烯基；或R3和R4和與它們相連的氮原子一起構(gòu)成4～6元雜環(huán)，其選自四氫吡咯，哌啶，嗎啉，哌嗪或氮甲基哌嗪。
2.權(quán)利要求1所述的化合物， 其中n等于2；R1為選自呋喃，噻吩，吡咯和吡啶的雜芳基；所述雜芳基可以未被取代或被1或2個(gè)選自下面的取代基取代鹵素，C1～C6直鏈或支鏈烷基，C1～C4烷氧酰基；R2選自氫，鹵素；R3和R4和與它們相連的氮原子一起構(gòu)成4～6元雜環(huán)，其選自哌啶或嗎啉。
3.權(quán)利要求1的化合物，其包括(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(3’，5’-二甲基-2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(2’-吡啶甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(5’-乙酰氧甲基-2’-呋喃甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(3’-甲基-2’-呋喃甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(3’-甲基-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-3-(4’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-嗎啉)]乙基-3-(3’，5’-二甲基-2’-吡咯甲烯基)-2-吲哚酮，(Z)-1-[2’-(1’-哌啶)]乙基-3-(5’-溴-2’-噻吩甲烯基)-2-吲哚酮。
4.藥物組合物，其含有權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的化合物、其幾何異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽以及至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
5.制備權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述化合物的方法，該方法包括將式II的吲哚酮衍生物 其中R2同權(quán)利要求1式(I)化合物的定義，與具式III的氨基鹵代烴衍生物反應(yīng)， 其中n、R3和R4同權(quán)利要求1式(I)化合物的定義，X為Cl或Br，得到式IV化合物， 其中n、R2、R3和R4同權(quán)利要求1式(I)化合物的定義，將式IV化合物與雜芳基甲醛V反應(yīng)， 其中R1同權(quán)利要求1式(I)化合物的定義，得到通式I化合物， 其中n、R1、R2、R3和R4的定義同權(quán)利要求1式I化合物；或者，使式II的吲哚酮衍生物 其中R2的定義同權(quán)利要求1式I化合物。與具式V的雜芳基甲醛反應(yīng)， 其中R1的定義同權(quán)利要求1式I化合物，得到式VI化合物， 其中R1和R2的定義同權(quán)利要求1式I化合物，將式VI化合物與氨基鹵代烴衍生物III反應(yīng) 其中n、R3和R4的定義同權(quán)利要求1式I化合物，X為Cl或Br，得到通式I的化合物， 其中n、R1、R2、R3和R4的定義同權(quán)利要求1式I化合物。
6.權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的化合物用于制備抗腫瘤藥物的用途。
7.權(quán)利要求6的用途，其中的抗腫瘤作用包括誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抗腫瘤新生血管形成、防止腫瘤化療耐藥和阻止腫瘤惡性轉(zhuǎn)移。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式I的吲哚酮類(lèi)衍生物、其幾何異構(gòu)體、及其藥學(xué)上可接受的鹽，式中各個(gè)基團(tuán)的定義如權(quán)利要求書(shū)所述。本發(fā)明還涉及制備式I化合物的方法、含有上述化合物的藥物組合物以及所述化合物用于制備具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抗腫瘤新生血管形成、防止腫瘤化療耐藥和阻止腫瘤惡性轉(zhuǎn)移作用的藥物的用途。
文檔編號(hào)C07D401/14GK1566091SQ03146229
公開(kāi)日2005年1月19日 申請(qǐng)日期2003年7月4日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月4日
發(fā)明者李松, 劉繼周, 王莉莉, 鄭志兵, 劉洪英, 阮成邁, 謝云德, 沈倍奮 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所