專利名稱：紫杉醇溶劑化物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及帶有有機(jī)溶劑的紫杉醇的新晶態(tài)溶劑化物，其可用作用于治療性處理的紫杉醇的來源。本發(fā)明的概念進(jìn)一步包括由包含紫杉醇的物質(zhì)形成該類溶劑化物的方法、以及由這些溶劑化物獲得紫杉醇的方法。
相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)的描述紫杉醇，一種具有顯著抗腫瘤活性的具有如下結(jié)構(gòu)的二萜紫杉烷(taxane)化合物 是一種最初由短葉紫杉樹，Taxus brevifolia的樹皮提取的天然產(chǎn)物。其可以以Taxol(Bristol-Myers Squibb Co)的形式通過商業(yè)途徑獲得。已經(jīng)表明Taxol在體內(nèi)動(dòng)物模型中具有極佳的抗腫瘤活性，并且最近的研究已經(jīng)闡明了其獨(dú)特的作用方式，其涉及細(xì)胞循環(huán)期間微管蛋白的異常聚合和有絲分裂的破壞。已批準(zhǔn)Taxol用于治療難治的晚期卵巢癌、乳癌、非小細(xì)胞肺癌和與AIDS有關(guān)的卡波濟(jì)氏肉瘤。
在科學(xué)期刊上對(duì)紫杉醇臨床研究的結(jié)果進(jìn)行了報(bào)道，許多作者已經(jīng)對(duì)其進(jìn)行了綜述，如Rowinsky等人，Pharmac.Ther.，52，35-84(1991)；Spencer等人，Drugs，48(5)，794-847(1994)；K.C.Nicolau等人，Angew.Chem.，Int.Ed.Eng.，33，15-44(1994)；F.A.Holmes等人，“紫杉烷抗癌劑-基礎(chǔ)研究和目前的狀態(tài)”，由GundaI.Georg等人所編輯，31-57 American Chemical Society，Washington，D.C.(1995)；S.G.Arbuck等人，“Taxol科學(xué)和應(yīng)用”，由Matthew Suffness所編輯，379-416，CRC Press，Boca Raton，F(xiàn)lorida(1995)，和其中所引用的參考資料。
專利文獻(xiàn)對(duì)許多將紫杉醇從植物來源中分離出來的方法進(jìn)行了描述，這些方法中的許多方法包括用各種有機(jī)溶劑系統(tǒng)進(jìn)行提取，然后進(jìn)行色譜分離。
例如，Rao在US 5,380,916、5,475,120、和5,670,673(還有PCT公開號(hào)為WO 92/07842的申請(qǐng))中使用了一系列先使用乙醇、氯仿、輕石油、苯和甲醇進(jìn)行溶劑提取，然后用使用HPLC柱和乙腈洗脫劑的反相色譜進(jìn)行處理的方法。
Naie在US 5,279,949和5,478,736(也是公開號(hào)為WO 97/09443的申請(qǐng))中所描述的方法是用活性炭對(duì)最初的70％乙醇/水提取物進(jìn)行脫色并用Celite(硅藻土)進(jìn)行早期過濾。隨后，將進(jìn)行了脫色的提取物用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，然后蒸發(fā)至沉淀出紫杉烷類物質(zhì)。將紫杉烷類物質(zhì)重新溶解于乙酸乙酯中并將其裝填到用己烷/乙酸乙酯梯度洗脫的第一根硅膠柱上，然后通過串聯(lián)的硅膠柱進(jìn)行進(jìn)一步純化，或者用反相色譜來進(jìn)行純化。
US 6,136,989公開了一種制備包含紫杉醇的丙酮混合物的方法，其包括用甲醇對(duì)包含紫杉醇的物質(zhì)進(jìn)行提取從而得到一種甲醇提取物；通過使用二氯甲烷和水進(jìn)行的液-液萃取來對(duì)該甲醇提取物進(jìn)行分配，從而形成一種具有包含甲醇/水的甲醇相和包含二氯甲烷和紫杉醇的二氯甲烷相；從二氯甲烷中除去甲醇和水從而獲得一種包含紫杉醇的濃縮的提取物；將該濃縮的提取物與硅石基質(zhì)進(jìn)行接觸，然后對(duì)該硅石基質(zhì)進(jìn)行洗脫，從而獲得包含至少5％(w/w)紫杉醇的洗脫液，向該洗脫液中加入丙酮，得到一種丙酮混合物。根據(jù)該發(fā)明，包含至少5％紫杉醇的丙酮混合物的丙酮/水沉淀將提供一種包含至少20％紫杉醇的沉淀物，包含至少10％紫杉醇的丙酮混合物的丙酮/水沉淀將提供一種包含40％至50％紫杉醇的沉淀物。
雖然上面的這些專利涉及紫杉醇的分離，但是這些專利文獻(xiàn)中沒有任何文獻(xiàn)對(duì)新的、先前未知的紫杉醇溶劑化物從紫杉醇和一種或多種有機(jī)溶劑的溶液中結(jié)晶進(jìn)行描述。
在藥物制劑的研制中，在現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)將紫杉醇與有機(jī)溶劑一起使用。已知紫杉醇在水中的溶解性很差，其限制了將紫杉醇給藥于患者的制劑的獲得。常用的制劑包含50％(v/v)的醇和88-倍過量的聚氧乙烯化蓖麻油(CremophorEL)。
已經(jīng)進(jìn)行了各種努力來尋找用于將紫杉醇給藥于患者的其它媒介。例如，US 5,877,205描述了將紫杉醇溶解于第一種有機(jī)溶劑(例如N，N′-二甲基乙酰胺或二甲基亞砜)中，然后用第二種溶劑，如聚乙二醇400來進(jìn)行在水性溶劑中的最后稀釋。
US 6,017,948公開了據(jù)稱適于給藥于患者的紫杉醇制劑，其包含在水可溶混的非水性溶劑中的紫杉醇溶液，所說的溶劑如N-甲基吡咯烷酮、丙二醇、乙酸乙酯、二甲基亞砜、N，N′-二甲基乙酰胺、苯甲醇、2-吡咯烷酮、或苯甲基芐醇。
上述的兩篇專利都涉及通過輸入來進(jìn)行給藥的液體制劑。上面的專利中沒有任何專利公開紫杉醇溶劑化物從其各自制劑的結(jié)晶。
發(fā)明概述已知紫杉醇存在不同的結(jié)晶形式。本發(fā)明一方面涉及紫杉醇的新型生物學(xué)活性有機(jī)溶劑化物，所說的物質(zhì)以結(jié)晶形式存在并且可以從其中分離出高純度的紫杉醇。
這里所描述的紫杉醇的新溶劑化物是之前未知的紫杉醇分子的三維結(jié)晶排列，其包括用于適宜有機(jī)溶劑分子的部位。適宜的有機(jī)溶劑是具有可以被混入到該溶劑部位而不會(huì)改變這里所述的紫杉醇分子的獨(dú)特排列的分子的這些物質(zhì)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該類紫杉醇的新溶劑化物可以在紫杉醇的純化中用作中間體。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該溶劑化物本身具有生物學(xué)活性。
在某些實(shí)施方案中，這里所描述的新型溶劑化物可得自包含紫杉醇的物質(zhì)如粗制紫杉烷混合物，其中紫杉烷類物質(zhì)衍生自例如天然來源。在其它實(shí)施方案中，該新型溶劑化物可以得自半合成的紫杉醇，或者可以由通過將相對(duì)純的紫杉醇溶解于一種或多種有機(jī)溶劑中而制得的混合物來獲得。
在另一方面，本發(fā)明包含一種用于由一種混合物來制備晶態(tài)紫杉醇溶劑化物的方法，混合物含有包含紫杉醇的物質(zhì)和一種有機(jī)溶劑，有機(jī)溶劑具有可以與上文所述紫杉醇分子的獨(dú)特晶態(tài)排列中的溶劑部位相容的溶劑分子。將固態(tài)的、包含紫杉醇和位于晶體結(jié)構(gòu)內(nèi)的溶劑分子的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物從該混合物中分離出來。
本發(fā)明進(jìn)一步包含一種從這里所描述的溶劑化物中回收紫杉醇的方法，其包括從該晶態(tài)溶劑化物結(jié)構(gòu)中除去溶劑分子。這種方法在這里被稱為“去溶劑化”步驟，其可以用現(xiàn)有技術(shù)中公知的任何溶劑除去手段來完成。
本發(fā)明另一方面還涉及用于抑制人和/或其它哺乳動(dòng)物腫瘤的方法，其包括給荷瘤主體使用抗腫瘤有效量的這些新紫杉醇形式。
附圖簡(jiǎn)要說明

圖1是觀測(cè)到的散裝的D型粉末X-射線衍射(PXRD)圖，所說的D型是一種以前未知的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物，其中NMPO、乙腈和水被混入到晶體結(jié)構(gòu)中。所觀測(cè)到的上部圖案(在室溫下由在最初溶劑混合物中的漿液所測(cè)得的)與在-43℃下由得自單晶的完全X-射線分析的原子坐標(biāo)所模擬的下部圖案相一致。
圖2是模擬的E型粉末X-射線衍射(PXRD)圖，E型是一種以前未知的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物，其中DMF和水被混入到該晶體結(jié)構(gòu)中。這種模擬圖是由在-53℃下得自完全單X-射線分析的原子坐標(biāo)來進(jìn)行計(jì)算的。
圖3是對(duì)在D型溶劑化物的一部分中紫杉醇分子和溶劑分子的固態(tài)排列的描述。其是以所觀測(cè)的原子坐標(biāo)為基礎(chǔ)的。沒有表示出乙腈分子。
圖4是對(duì)在D型溶劑化物的另一部分中不依賴于對(duì)稱的紫杉醇和溶劑分子的固態(tài)排列的描述，其是以所觀測(cè)的原子坐標(biāo)為基礎(chǔ)的。沒有表示出乙腈分子。
圖5是對(duì)在E型溶劑化物的一部分中紫杉醇分子和溶劑分子的固態(tài)排列的描述，其是以所觀測(cè)的原子坐標(biāo)為基礎(chǔ)的。
圖6是對(duì)在E型溶劑化物的另一部分中不依賴于對(duì)稱的紫杉醇和溶劑分子的固態(tài)排列的描述，其是以所觀測(cè)的原子坐標(biāo)為基礎(chǔ)的。
圖7是表示得自紫杉醇的細(xì)胞毒性(IC50值)的表格。
圖8是表示得自本發(fā)明所制備的紫杉醇NMPO溶劑化物的細(xì)胞毒性(IC50值)的表格。
優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描述商品Taxol所用的紫杉醇是以無溶劑的結(jié)晶粉末(在這里被稱為A型)的形式被制造的。在對(duì)本發(fā)明的特性進(jìn)行描述的過程中，已經(jīng)通過單晶X-射線衍射研究測(cè)得A型是正交晶、并且其晶胞包含兩個(gè)用氫鍵相連從而形成一種氫鍵鍵合的“二聚物”的晶體學(xué)獨(dú)立的紫杉醇分子，并且不包含溶劑分子。這里所用的短語“紫杉醇二聚物”和術(shù)語“二聚物”指的是彼此氫鍵鍵合的兩個(gè)紫杉醇分子。十一個(gè)氫鍵的網(wǎng)絡(luò)將兩個(gè)紫杉醇分子連接成對(duì)稱相關(guān)的鄰居。這種排列的另一個(gè)特征是存在埋在兩個(gè)獨(dú)立的紫杉醇分子間裂縫中的大溶劑部位；但是，該晶體結(jié)構(gòu)、以及由此而獲得的A型中紫杉醇分子的排列與這里所公開的新形式中的任何一種都完全不同。
A型紫杉醇(伸長(zhǎng)的薄片)主要以高度水不溶的結(jié)晶、顆粒狀的、不含溶劑的形式存在。其在正常的實(shí)驗(yàn)室條件(相對(duì)濕度(RH)約為50-60％；20-30℃)下基本不吸濕。但是，當(dāng)與相對(duì)濕度高于約90％的大氣相接觸、或者在水性混懸液、分散體或乳液中時(shí)，A型轉(zhuǎn)換成(受時(shí)間、溫度、攪拌等等影響)一種熱力學(xué)更穩(wěn)定的形式(在這里被稱為B型)。B型是一種每?jī)蓚€(gè)獨(dú)立的紫杉醇分子(一種紫杉醇“二聚物”)具有六個(gè)水部位的三水合物正交晶型。這些水合的結(jié)晶是細(xì)的發(fā)絲狀外觀的物質(zhì)，并且其水溶性比A型更差。
B型三水合物是在水性混懸液中形成的或者是通過在存在大量過量水的情況下由水性溶劑進(jìn)行結(jié)晶來獲得的。在專利申請(qǐng)EP 717,041中公開了這種形式，其在這里被全部引入作為參考。在對(duì)本發(fā)明的特性進(jìn)行描述的過程中，已經(jīng)通過單晶X-射線衍射研究測(cè)得B型是正交晶、并且其晶胞包含兩個(gè)用氫鍵相連從而形成一種“二聚物”的晶體學(xué)獨(dú)立的紫杉醇分子。該晶體結(jié)構(gòu)、和由此而獲得的B型中紫杉醇分子的排列與A型和這里所公開的新形式中的任何一種都完全不同。
Mastropaolo，等人公開了一種通過從Taxol在二噁烷、水和二甲苯的溶液中蒸發(fā)掉溶劑而獲得的新的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物。Proc.Natl.Acad.Sci.USA 92，6920-24(1995年7月)。這種溶劑化物在這里被稱為C型，但是表明其不穩(wěn)定，并且無論如何，與本發(fā)明的新溶劑化物不同，C型一直沒有表明完成粗紫杉醇的純化。據(jù)報(bào)道，該薄片狀的結(jié)晶中每?jī)蓚€(gè)紫杉醇分子包含五個(gè)水分子和三個(gè)二噁烷分子。該晶體結(jié)構(gòu)、以及由此而形成的C型中紫杉醇分子的分子排列與這里所公開的新型物質(zhì)中的任何一種都完全不同。
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，新型、相對(duì)穩(wěn)定的紫杉醇溶劑化物是以受控的方式從包含位于一種或多種有機(jī)溶劑中的含有紫杉醇物質(zhì)的溶液中結(jié)晶的。該結(jié)晶是通過以受控的方式加入作為逆溶劑的水并聯(lián)合溫度振動(dòng)來完成的。在這方面，以等分試樣的方式加入水從而使得該新型溶劑化物的結(jié)晶優(yōu)于三水合物的沉淀。這種控制優(yōu)化了收率和晶態(tài)紫杉醇溶劑化物的質(zhì)量并且基本避免了三水合物的形成。
優(yōu)選地，有機(jī)溶劑選自二甲基亞砜(DMSO)、N，N′-二甲基甲酰胺(DMF)、N，N′-二甲基乙酰胺(DMAC)、N-甲基-2-吡咯烷酮(NMPO)、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮(DMEU)、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮(DMPU)、和乙腈以及其混合物。但是，也可以使用與本發(fā)明所公開的溶劑化物的晶體結(jié)構(gòu)中的溶劑部位相容的其它溶劑。在下面對(duì)由這些溶劑中的一種或多種所形成的溶劑化物的各種實(shí)例進(jìn)行了描述。
例如，在E型的一個(gè)實(shí)施方案中，從包含紫杉醇和水性DMF的溶液中進(jìn)行的結(jié)晶產(chǎn)生了DMF∶紫杉醇表觀分子比為約0.5∶1的溶劑化物。在E型的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，從位于水性DMF的紫杉醇溶液中進(jìn)行的結(jié)晶產(chǎn)生了一種三元晶體結(jié)構(gòu)，其每個(gè)紫杉醇“二聚物”包含一個(gè)DMF溶劑分子和約兩個(gè)水分子。
在D型的一個(gè)實(shí)施方案中，從包含紫杉醇和水性NMPO的溶液中進(jìn)行的結(jié)晶產(chǎn)生了NMPO∶紫杉醇表觀分子比為約1∶1的溶劑化物。在D型的優(yōu)選實(shí)施方案中，從包含紫杉醇、乙腈(CH3CN)、醋酸、和NMPO的水性溶液中進(jìn)行的結(jié)晶產(chǎn)生了一種D型溶劑化物，其特征為每?jī)蓚€(gè)紫杉醇分子(“二聚物”)具有約三分子水、約兩分子NMPO、和約一分子乙腈。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，從包含紫杉醇和水性水性DMPU的溶液進(jìn)行的沉淀產(chǎn)生了一種包含分子比為約1∶1的DMPU和紫杉醇的結(jié)構(gòu)未知的固體。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，從包含紫杉醇和DMSO的溶液中進(jìn)行的沉淀產(chǎn)生了一種包含分子比為約1-2∶1的DMSO和紫杉醇的結(jié)構(gòu)未知的固體。
本發(fā)明的溶劑化物應(yīng)被解釋為包括具有相似晶體結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和大約相同的溶劑紫杉醇比例的等同物。
制備該溶劑化物的方法包括將得自各種來源的包含紫杉醇的物質(zhì)與一種或多種有機(jī)溶劑的水性溶液相結(jié)合。該混合物可包括或不包括用于抑制形成異構(gòu)體——7-表-紫杉醇的酸化劑。任何合適的酸化劑都可以使用。這些酸化劑的非限制性實(shí)例包括稀醋酸或枸櫞酸。然后可以通過過濾將紫杉醇與溶劑相結(jié)合所形成的固體分離出來，然后用現(xiàn)有技術(shù)中公知的任何方法除去過量的未結(jié)晶的溶劑。所得的被分離出來的產(chǎn)品包含一定比例的位于該晶態(tài)溶劑化物形式中的溶劑。在隨后的步驟中，被分離出來的溶劑化物可以被“去溶劑化”，即，用現(xiàn)有技術(shù)中公知的溶劑除去方法來從晶體結(jié)構(gòu)中除去溶劑分子并完成溶劑化物的轉(zhuǎn)化，例如轉(zhuǎn)化成A型紫杉醇。還可以任選地通過去溶劑化將本發(fā)明的E型溶劑化物轉(zhuǎn)化成B型。
這里所描述的溶劑化物，并且特別是紫杉醇的D型NMPO溶劑化物出乎意料地改善了得自粗產(chǎn)品管流的紫杉醇的純度。當(dāng)被溶解時(shí)，該溶劑化物還具有與A型相似的生物學(xué)活性。此外，可以通過在真空下進(jìn)行加熱來將其轉(zhuǎn)化成A型。甚至在相對(duì)高濕度的條件下D型也能轉(zhuǎn)化成A型。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包含一種將紫杉醇溶劑化物分離出來的方法，其包括將包含紫杉醇的物質(zhì)如得自植物來源的紫杉烷類物質(zhì)的粗混合物與有機(jī)溶劑進(jìn)行接觸，可任選地進(jìn)行加熱以促進(jìn)紫杉醇的溶解。紫杉烷類物質(zhì)的粗混合物一般是通過用溶劑對(duì)植物原始物質(zhì)進(jìn)行提取而獲得的位于有機(jī)溶劑中的紫杉烷類物質(zhì)的混合物。優(yōu)選地加入酸化劑。然后，可以如這里所述的這樣使該溶劑化物從該混合物中沉淀出來。在沉淀后，對(duì)漿液進(jìn)行過濾以將該溶劑化物分離出來。
如果先將溫度升至漿液在該溫度下變稀的溫度，然后將溫度降低直至該漿液變稠，然后將這種操作重復(fù)多次，則可以增加由給定數(shù)量的粗紫杉烷混合物和有機(jī)溶劑所獲得的漿液的質(zhì)量。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以不需要進(jìn)行過多試驗(yàn)就能調(diào)節(jié)和優(yōu)化給定溶劑系統(tǒng)的溫度設(shè)定點(diǎn)的上限和下限。
該分離操作還可有效地對(duì)包含粗和半合成紫杉醇的物質(zhì)進(jìn)行純化，并且大概還可以有效使用全合成的紫杉醇。
在下面的詳細(xì)說明中，特定量和處理?xiàng)l件(包括時(shí)間、溫度等等)僅是為了進(jìn)行舉例說明，并且應(yīng)被理解為包括等值的范圍。不管是否進(jìn)行了這種清楚的說明，所有該類數(shù)值性實(shí)例應(yīng)被理解為可以被術(shù)語“約”所修飾，并且術(shù)語“約”是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以不需要進(jìn)行過多試驗(yàn)就能決定值的范圍。
用于紫杉醇分離的適宜的包含紫杉醇的物質(zhì)可以選自包含高紫杉醇含量的任何組織，所說的高含量?jī)?yōu)選地為干基重的至少約0.005％重量。適宜的包含紫杉醇物質(zhì)的實(shí)例包括來自各種紫杉植物的組織，包括紅豆杉屬植物，最優(yōu)選地是短葉紅豆杉或云南紅豆杉的樹皮，以及觀賞性紅豆杉植物如東北紅豆杉、直立雜種紅豆杉、暗綠垂直紅豆杉和中國紅豆杉、西藏紅豆杉、加拿大紅豆杉、T.globosa、T.sumatrana、和佛羅里達(dá)紅豆杉的根和針葉。其它的適宜物質(zhì)包括得自紅豆杉屬類植物的植物組織培養(yǎng)物。用于獲得所培養(yǎng)的組織的方法在例如Cociancich和Pace的US 5,744,333、EP 553,780 B1以及Strobel等人的US 5,451,392中進(jìn)行了全面描述。
該包含紫杉醇的物質(zhì)還可以得自半合成的或其它天然的來源。例如，US 5,451,392對(duì)用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的培養(yǎng)基進(jìn)行了描述，其也適用于本發(fā)明的操作。表達(dá)可提取的紫杉醇的微生物也是適用的，例如在細(xì)胞糊或發(fā)酵肉湯中進(jìn)行表達(dá)。適宜微生物的實(shí)例是如Page等人在US 5,451,392中所描述的與一些紫杉屬類物質(zhì)有關(guān)的歐文氏菌屬類的微生物。另外的實(shí)例包括Taxomyces屬的微生物，并且特定地是Taxomyces andreanae，其能產(chǎn)生紫杉醇。其它的實(shí)例還包括被設(shè)計(jì)為用重組DNA技術(shù)來產(chǎn)生紫杉醇的微生物。
在其它的實(shí)施方案中，通過由包含相對(duì)純的紫杉醇和有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑混合物的水性溶液進(jìn)行沉淀來獲得該溶劑化物。雖然并不會(huì)對(duì)本發(fā)明構(gòu)成限制，但在這種方法中所用的相對(duì)純的紫杉醇一般具有高于約90％的純度。
在對(duì)該溶劑化物進(jìn)行沉淀時(shí)，可以使用或不使用晶種來使得結(jié)晶開始。在這一方面，可以向該溶液中引入所需溶劑化物的晶種以誘導(dǎo)溶劑化物的形成。
本發(fā)明另一方面提供了一種將新的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物轉(zhuǎn)化成A型紫杉醇的方法，其可用于商業(yè)上。優(yōu)選地，該轉(zhuǎn)化包括將該溶劑化物在升高的溫度下在真空下進(jìn)行干燥。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，將本發(fā)明的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物去溶劑化并在真空和溫度的適宜組合情況下，在真空干燥的過程中將其轉(zhuǎn)化成A型紫杉醇。
本發(fā)明的化合物既表現(xiàn)出體外抗腫瘤活性又表現(xiàn)出體內(nèi)抗腫瘤活性。對(duì)于各種腫瘤的治療而言，可以以與使用A型紫杉醇的方法相似的方法來使用本發(fā)明的化合物；例如，見Physician′s Desk Reference，第49版，Medical Economics，682頁，1995。對(duì)本發(fā)明化合物的給藥劑量、方式、和時(shí)間表并沒有特別的限制。癌癥治療現(xiàn)有技術(shù)中的腫瘤學(xué)普通技術(shù)人員將可以不進(jìn)行過多試驗(yàn)就能確定將本發(fā)明化合物進(jìn)行給藥的適宜治療方案。因此，可以通過任何適宜的給藥途徑如胃腸外或口服將該活性化合物進(jìn)行給藥。胃腸外給藥包括靜脈內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、和皮下給藥。
用于實(shí)施本發(fā)明的治療方法的給藥劑量是使其可以進(jìn)行預(yù)防性處理或引起最大的治療響應(yīng)的給藥劑量。可以根據(jù)給藥的類型、所選擇的特定產(chǎn)品、和被治療個(gè)體的個(gè)人特性對(duì)該給藥劑量進(jìn)行變化。一般而言，該劑量對(duì)于由異常細(xì)胞增生所造成的病癥而言是治療有效的。可以根據(jù)需要來對(duì)本發(fā)明的化合物進(jìn)行給藥以獲得所需的治療作用。一些患者可能對(duì)相對(duì)高或低的劑量迅速響應(yīng)，然后需要溫和的維持劑量或根本不需要維持劑量。通過靜脈內(nèi)途徑給藥時(shí)，該劑量可以為例如在1至100小時(shí)期間約20至500mg/m2。通過口服途徑進(jìn)行給藥時(shí)，該劑量可以為5-1000mg/kg體重/天。所用的實(shí)際劑量將根據(jù)所制備的特定組合物、給藥途徑、和被治療腫瘤的特定部位、主體、和類型來進(jìn)行變化。在決定劑量時(shí)將考慮許多改變藥物作用的因素，包括患者的年齡、體重、性別、飲食和身體情況。
本發(fā)明還提供了包含抗腫瘤有效量的活性化合物和一種或多種可藥用載體、賦形劑、稀釋劑、或助劑的藥物組合物?？梢杂贸Ｒ?guī)方法來制備該組合物。可以按照在US4,960,790和4,814,470中的實(shí)施例來制備本發(fā)明的組合物。例如，可以將活性化合物制備成片劑、丸劑、粉狀混合物、膠囊、注射劑、溶液、栓劑、乳劑、分散體、食品預(yù)混合料、以及其它適宜形式。其還可以被制備成無菌固體組合物的形式，例如，冷凍干燥的形式，并且如果需要的話可以與其它可藥用的賦形劑合用。在用于胃腸外給藥前可以立即將該類固體組合物用無菌水、生理鹽水、或水和有機(jī)溶劑的混合物、或一些其它的無菌可注射介質(zhì)進(jìn)行重組，所說的有機(jī)溶劑如丙二醇、乙醇等等。
典型的可藥用載體有例如甘露醇、脲、葡聚糖、乳糖、馬鈴薯和玉米淀粉、硬脂酸鎂、滑石粉、植物油、聚亞烷基二醇、乙基纖維素、聚(乙烯吡咯烷酮)、碳酸鈣、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、苯甲酸芐酯、碳酸鈉、明膠、碳酸鉀、和硅酸。
該藥物制劑還可以包含無毒的輔助物質(zhì)如乳化劑、防腐劑或潤(rùn)濕劑等等，如脫水山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺、聚氧乙烯單硬脂酸酯、甘油三棕櫚酸酯、和二辛基磺基琥珀酸鈉等等。
下面的實(shí)施例對(duì)制備和使用本發(fā)明物質(zhì)的方式和過程進(jìn)行了描述并且只是為了進(jìn)行解釋而不是要進(jìn)行限制。
實(shí)施例1D型紫杉醇溶劑化物(NMPO)將533mg紫杉醇溶解于26.6mL NMPO中。向其中加入13.3mL乙腈，然后向其中加入13.3mL 0.1％的水性醋酸。將該溶液加熱至40℃，并以分成兩份的形式向其中加入0.1％醋酸水溶液(26.6mL)。然后將其在90分鐘內(nèi)冷卻至20℃并將其進(jìn)行超聲。然后將該漿液加熱至58℃，然后在90分鐘內(nèi)將其冷卻至20℃。然后將該漿液加熱至58℃，攪拌1小時(shí)并在4.5小時(shí)內(nèi)將其冷卻至20℃。然后，將該漿液進(jìn)行超聲處理，在30分鐘內(nèi)將其重新加熱至58℃并在58℃下攪拌1小時(shí)。然后，將該漿液在4.5小時(shí)內(nèi)冷卻至20℃，并緩慢攪拌16小時(shí)。然后將該漿液倒出和過濾。將濾餅用25％位于0.1％水性醋酸(2mL)中的乙腈進(jìn)行洗滌。然后將該濾餅在真空下在40℃下進(jìn)行干燥，得到一種無色的固體(450mg)。由1H NMR獲得的NMPO與紫杉醇比例為1.0∶1，其與D型的單晶結(jié)構(gòu)相一致(效力＝855μg/mg；面積％為99.7)。(D型晶體理想地以3∶2∶1∶2的摩爾比包含H2O、NMPO、CH3CN、和紫杉醇)。
D型NMPO溶劑化物晶體由在-43℃下具有下面晶胞參數(shù)的伸長(zhǎng)的薄片所組成。(在Stout & Jensen的第3章，X-射線結(jié)構(gòu)測(cè)定實(shí)際指導(dǎo)，MacMillan Co.，紐約(1968)中可以找到對(duì)晶胞的詳細(xì)描述，其在這里被引入作為參考。)晶胞大小a＝9.541(1)b＝28.456(4)c＝37.238(5)體積10,1103空間群P212121正交晶晶胞的理想組成8紫杉醇，8NMPO，4CH3CN，12H2O密度(所計(jì)算的)1.315g/cm3在圖3和4中對(duì)D型中紫杉醇和溶劑分子的獨(dú)特排列進(jìn)行了說明，并且是以在下面表1-2中所列的小數(shù)級(jí)的原子坐標(biāo)為基礎(chǔ)的。
在表1-3中所報(bào)告的各型的近似小數(shù)級(jí)坐標(biāo)包含另外的由紫杉醇和除所舉例的溶劑之外的溶劑所組成的同晶型晶態(tài)溶劑化物形式。在表中，原子數(shù)小于40表示紫杉醇“二聚物”的分子“b”中的原子。分子“a”中的相應(yīng)原子具有高于分子“b”中的相應(yīng)原子數(shù)的數(shù)目。因此，例如，表1中的“N44′”是在分子“a”中，并且與分子“b”的N4′相對(duì)應(yīng)。分子“a”和分子“b”是在圖中所標(biāo)出的紫杉醇“二聚物”的兩個(gè)分子。原子0111、0112、和0113是三個(gè)水分子。原子N101、C102、和C103是乙腈分子。原子N91、092、和C93-C96是兩個(gè)NMPO溶劑分子中的一個(gè)。除一些輕微的天然晶格膨脹外，該晶體結(jié)構(gòu)在環(huán)境條件下仍然相同。因此，表1中的近似坐標(biāo)將根據(jù)測(cè)量溫度而變化。這些坐標(biāo)中的統(tǒng)計(jì)學(xué)變量也可以與所報(bào)告的誤差值相一致的存在。
表1







下面的坐標(biāo)表示一種NMPO溶劑分子和分子A的側(cè)鏈苯基。
表2


實(shí)施例2D型向A型的轉(zhuǎn)化將實(shí)施例1的NMPO-溶劑化的紫杉醇樣品在82℃下在高真空下進(jìn)一步干燥16小時(shí)以得到一種包含0.05摩爾當(dāng)量NMPO的物質(zhì)并且通過X-射線粉末衍射證明其是A型。
實(shí)施例3紫杉醇的純化包含10.66g紫杉醇的粗紫杉烷混合物(在227nm下，紫杉醇面積％＝56)以在1.055L由比例為2∶1∶1(v∶v∶v)的NMPO/乙腈/0.1％醋酸所組成的溶劑混合物中的溶液形式存在。在攪拌的同時(shí)將該溶液加溫至40℃，然后在80分鐘內(nèi)向其中加入0.1％帶有晶種的醋酸水溶液(520mL，以分成4份的形式)。在將其40℃下放置30分鐘后，使該漿液在90分鐘內(nèi)冷卻至20℃，然后將其在20℃放置30分鐘。然后將該漿液加熱至58℃，將其攪拌30分鐘，然后使其在90分鐘內(nèi)冷卻至20℃。將該漿液在20℃攪拌30分鐘，然后將其重新加熱至58℃。在達(dá)到58℃后，以一份的形式向其中再加入另外的0.1％水性醋酸(520mL)。然后進(jìn)行如下的溫度振動(dòng)循環(huán)設(shè)定值1＝58℃；時(shí)期1＝45分鐘。
設(shè)定值2＝58℃；時(shí)期2＝180分鐘。
設(shè)定值3＝20℃；時(shí)期3＝30分鐘。
設(shè)定值4＝20℃。
將其在20℃的最后溫度下進(jìn)行放置后，將該漿液攪拌4小時(shí)，過濾，然后連續(xù)用各自為80mL的25％在0.1％水性醋酸中的乙腈和然后的0.1％水性醋酸進(jìn)行洗滌，最后進(jìn)行干燥。
干燥后的濾餅產(chǎn)生了含有10.52g晶態(tài)紫杉醇溶劑化物的13.47g物質(zhì)。由1H NMR確定的NMPO與紫杉醇的比例為1.0∶1。產(chǎn)物在227nm下的紫杉醇面積％是92。母液在227nm下的紫杉醇面積％為9.5。
實(shí)施例4E型紫杉醇溶劑化物(DMF)將252mg紫杉醇溶解于12.5mL DMF和6.25mL CH3CN中并將其在20℃下進(jìn)行攪拌。以一份的形式向其中加入6.25mL 0.1％醋酸。將該溶液加熱至40℃，并在1分鐘內(nèi)以三份的形式向其中再加入12.5mL 0.1％的水性醋酸。將該溶液在40℃下放置1小時(shí)，在這時(shí)沒有觀察到結(jié)晶。將該混合物在90分鐘內(nèi)在進(jìn)行最小程度攪拌的情況下冷卻至20℃，在這時(shí)觀察到形成一種漿液，將其在20℃下放置1小時(shí)。其后，將該混合物在30分鐘內(nèi)加熱至58℃以使得該漿液變稀。在攪拌的同時(shí)將該混合物在58℃下加熱30分鐘，然后將其在90分鐘內(nèi)冷卻至20℃。將其在20℃下放置16小時(shí)后(在此期間，該漿液變稠)，在攪拌的同時(shí)將該混合物加熱至58℃(并且觀察到該漿液變稀)。將該漿液在58℃下放置1小時(shí)。然后在1分鐘內(nèi)以3份的形式向其中加入12.5mL0.1％的醋酸，在這時(shí)該漿液顯著變稠。將該漿液在58℃下攪拌30分鐘，然后在3小時(shí)內(nèi)將其冷卻至20℃并在攪拌的同時(shí)將其在20℃下進(jìn)行放置。觀察到該漿液稍微有些沉淀(約20％)。取出約2mL的漿液并在約5分鐘的時(shí)間內(nèi)將其進(jìn)行過濾。將濾餅用25％CH3CN/0.1％醋酸(2mL)進(jìn)行洗滌，然后將其在40℃下在高真空干燥16小時(shí)，得到210.0mg固體。由1H NMR光譜測(cè)得的DMF與紫杉醇的摩爾比為約0.5∶1.0，其與E型的單晶結(jié)構(gòu)相一致。
E型DMF溶劑化物的單晶(針狀)在-53℃下具有下面的晶胞參數(shù)晶胞大小a＝9.512(1)Ab＝27.787(4)c＝34.788(5)體積9,1953空間群P212121正交晶晶胞的理想組成8紫杉醇，4DMF，8H2O密度(所計(jì)算的)1.312g/cm3圖5和6對(duì)E型中紫杉醇和溶劑分子的獨(dú)特排列進(jìn)行了說明，其是以下表3中所列的小數(shù)級(jí)原子坐標(biāo)為基礎(chǔ)的。除一些輕微的天然晶格膨脹外，該晶體結(jié)構(gòu)在環(huán)境條件下保持相同。因此，表3中的近似坐標(biāo)將根據(jù)測(cè)量溫度而變化。這些坐標(biāo)中的統(tǒng)計(jì)學(xué)變量也可以與所報(bào)告的誤差值相一致的存在。
表3







實(shí)施例5紫杉醇的DMAC溶劑化物將250mg紫杉醇溶解于12.5mL DMAC和6.25ml乙腈中并將其在20℃下進(jìn)行攪拌。向其中加入6.25mL 0.1％的醋酸并將所得的混合物加熱至40℃。在1分鐘內(nèi)以3份的形式再向其中加入12.5mL0.1％的醋酸溶液并將所得的混合物在40℃下加熱1小時(shí)，在此時(shí)觀察到開始出現(xiàn)沉淀。在最小程度攪拌的情況下在90分鐘內(nèi)將該混合物冷卻至20℃并將其在該溫度下放置1小時(shí)，在該時(shí)間結(jié)束時(shí)該混合物是一種濃稠的漿液。然后將該漿液在30分鐘內(nèi)加熱至58℃并將其在攪拌的情況下在該溫度下再放置30分鐘，觀察到該漿液變稀。將該變稀了的漿液在90分鐘內(nèi)冷卻至20℃并將其在20℃下放置16小時(shí)。在攪拌的條件下，將所得的混合物加熱至58℃。觀察到一些沉淀。將該漿液在58℃下放置1小時(shí)。在1分鐘內(nèi)以3份的形式向其中加入12.5mL 0.1％的醋酸。將該漿液在58℃下再放置30分鐘。將該混合物在3小時(shí)內(nèi)冷卻至20℃并將其在進(jìn)行攪拌的情況下在該溫度下進(jìn)行放置。在約10天后，80％的混合物被沉積。取出2mL漿液，迅速過濾并用2mL 25％乙腈和0.1％醋酸的溶液對(duì)其進(jìn)行洗滌。得到一種結(jié)構(gòu)未知的固體。但是，1H NMR光譜分析表明DMAC與紫杉醇的摩爾比為1.0∶1.0。在洗滌后固體出現(xiàn)這種數(shù)量的溶劑表明形成了一種晶態(tài)的溶劑化物。
實(shí)施例6紫杉醇的DMSO溶劑化物將253mg紫杉醇溶解于12.5mL DMSO和6.25mL CH3CN和6.25mL 0.1％醋酸水溶液中。將所得的混合物加熱至40℃并再向其中加入12.5mL 0.1％的醋酸。將該混合物在40℃下加熱30分鐘，觀察到了顯著的沉淀。將該漿液在90分鐘內(nèi)冷卻至20℃并將其在20℃下攪拌1小時(shí)。然后將該漿液在30分鐘內(nèi)加熱至58℃并將其在58℃下放置30分鐘，迅速攪拌5分鐘，然后在3小時(shí)內(nèi)將其冷卻至20℃并將其在20℃下放置30分鐘。將該溶液在30分鐘內(nèi)加熱至58℃并將其在該溫度下放置30分鐘，然后迅速攪拌5分鐘。將該溶液暫時(shí)性地加熱至67℃并向其中加入12.5mL 0.1％水性醋酸。然后使該溶液在3小時(shí)內(nèi)冷卻至20℃，然后將其在20℃下放置18小時(shí)。在觀察到沉淀完全后，觀察到一些沉積物(約20％至30％)。將該漿液用濾紙進(jìn)行過濾，用2mL25％ CH3CN/0.1％醋酸進(jìn)行洗滌。將濾餅在40℃下在高真空下干燥18小時(shí)，產(chǎn)生230mg結(jié)構(gòu)未知的固體。但是，根據(jù)1H NMR分析，測(cè)得的DMSO與紫杉醇的摩爾比為約1.3∶1。在洗滌后固體中出現(xiàn)這種數(shù)量的溶劑表明形成了一種晶態(tài)的溶劑化物。
實(shí)施例7紫杉醇的DMPU溶劑化物將258mg紫杉醇溶解于12.5mL DMPU、6.25mL CH3CN和6.25mL0.1％醋酸中。再向其中加入12.5mL 0.1％的醋酸。進(jìn)行上面實(shí)施例1所述的溫度振動(dòng)方案。在將其放置10至20小時(shí)后，對(duì)漿液進(jìn)行分析并測(cè)得沉淀完全。沒有觀察到沉淀。將漿液在15分鐘內(nèi)進(jìn)行過濾并用3mL 0.1％醋酸/25％CH3CN溶液對(duì)其進(jìn)行洗滌。將濾餅在40℃下在高真空下干燥18小時(shí)，得到235mg結(jié)構(gòu)未知的固體。但是，1H NMR光譜分析表明DMPU∶紫杉醇的摩爾比為約1.0∶1.0。在固體中出現(xiàn)這種數(shù)量的溶劑表明形成了一種晶態(tài)溶劑化物。
比較實(shí)施例1將1.062g粗紫杉醇物質(zhì)的樣品溶解于4ml丙酮中并通過向其中加入0.1％水性醋酸來進(jìn)行沉淀，使其沉淀至基本與上面所述方法相一致的濁點(diǎn)。循環(huán)加熱和冷卻該混合物并向其中加入更多的丙酮(2mL)和水。觀察到緩慢進(jìn)行沉淀。將該混合物攪拌一整夜(16小時(shí))并將該物質(zhì)倒出。HPLC分析測(cè)得沉淀物的純度沒有增加至用酰胺(amidic)有機(jī)溶劑或DMSO進(jìn)行結(jié)晶時(shí)所獲得的相同程度。通過顯微鏡檢查，觀察到針形結(jié)晶，但是沒有進(jìn)一步對(duì)溶劑含量進(jìn)行定性或檢查。但是，注意到當(dāng)根據(jù)實(shí)施例1或4-7的操作使用純紫杉醇和丙酮時(shí)，1H NMR分析觀察到為1∶10的相對(duì)較低的溶劑紫杉醇比。
實(shí)施例8細(xì)胞毒性用T.L.Riss，等人在“MTT、XTT、和一種新型四唑鎓化合物——MTS用于體外增殖和化學(xué)敏感性試驗(yàn)的比較，”Mol.Biol.Cell3(Suppl.)184a，1992年中所報(bào)道的MTS(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-硫苯基)-2H-四唑鎓，內(nèi)鹽)試驗(yàn)用細(xì)胞系對(duì)實(shí)施例1的NMPO溶劑化物的細(xì)胞毒性進(jìn)行評(píng)估。將細(xì)胞以4,000個(gè)細(xì)胞/孔的數(shù)量接種在96孔微量滴定板中，24小時(shí)后向其中加入藥物并將其連續(xù)稀釋。將細(xì)胞在37℃下培養(yǎng)72小時(shí)，在這時(shí)以333μg/ml(終濃度)向其中加入四唑鎓染料MTS和25μM(終濃度)的電子偶聯(lián)劑甲基硫酸吩嗪?；罴?xì)胞中的脫氫酶降低了MTS，從而在492nm下形成了吸收光，可以用分光光度法對(duì)其進(jìn)行定量。吸收越多，活細(xì)胞的數(shù)目越多。將結(jié)果表示為IC50，其是將未進(jìn)行處理的對(duì)照細(xì)胞的細(xì)胞增殖(即，在450nm下的吸收)抑制50％所需的藥物濃度。圖7和圖8中所示的數(shù)據(jù)表明NMPO的紫杉醇溶劑化物具有可以與紫杉醇相媲美的體外生物活性。
權(quán)利要求
1.一種包含紫杉醇和水性溶劑的晶態(tài)溶劑化物，所說的水性溶劑選自二甲基亞砜、N，N′-二甲基甲酰胺、N，N′-二甲基乙酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮、和乙腈以及其組合。
2.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中所說的溶劑是N-甲基-2-吡咯烷酮和乙腈。
3.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中每?jī)蓚€(gè)紫杉醇分子包含約三個(gè)水分子、約兩個(gè)N-甲基-2-吡咯烷酮分子、和約一個(gè)乙腈分子。
4.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中所說的溶劑是N，N′-二甲基甲酰胺。
5.如權(quán)利要求4所述的溶劑化物，其中每?jī)蓚€(gè)紫杉醇分子包含約一個(gè)N，N′-二甲基甲酰胺分子。
6.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中所說的溶劑是N，N′-二甲基乙酰胺。
7.如權(quán)利要求6所述的溶劑化物，其中每一個(gè)紫杉醇分子包含約一個(gè)N，N′-二甲基乙酰胺分子。
8.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中所說的溶劑是1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮。
9.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中每一個(gè)紫杉醇分子包含約一個(gè)1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮分子。
10.如權(quán)利要求1所述的溶劑化物，其中所說的溶劑是二甲基亞砜。
11.如權(quán)利要求10所述的溶劑化物，其中每個(gè)紫杉醇分子包含約1-2個(gè)二甲基亞砜分子。
12.D型晶態(tài)的如權(quán)利要求1所述的紫杉醇溶劑化物。
13.D型晶態(tài)的如權(quán)利要求3所述的紫杉醇溶劑化物。
14.E型晶態(tài)的如權(quán)利要求1所述的紫杉醇溶劑化物。
15.E型晶態(tài)的如權(quán)利要求5所述的紫杉醇溶劑化物。
16.一種制備紫杉醇的方法，其包括將如權(quán)利要求1所述的晶態(tài)溶劑化物轉(zhuǎn)化成A型紫杉醇。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中所說的轉(zhuǎn)化包括將所說的溶劑化物在升高的溫度下在真空下去溶劑化從而獲得A型紫杉醇。
18.一種用于制備晶態(tài)紫杉醇溶劑化物的方法，其包括a)形成一種包含下面物質(zhì)的混合物(i)包含紫杉醇的物質(zhì)；和(ii)一種或多種有機(jī)溶劑，每種所說的溶劑具有可以與該溶劑化物的晶態(tài)排列中的溶劑部位相容的溶劑分子；和b)將溶劑從該混合物中除去以回收一種固體的、在晶體結(jié)構(gòu)內(nèi)具有紫杉醇和溶劑分子的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中每種所說溶劑是有機(jī)溶劑的水性溶液。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中所說的有機(jī)溶劑選自二甲基亞砜、N，N′-二甲基甲酰胺、N，N′-二甲基乙酰胺、N-甲基-2-吡咯烷酮、1，3-二甲基-2-咪唑啉酮、1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2-(1H)-嘧啶酮、和乙腈以及其組合。
21.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所說的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物包含由約兩個(gè)紫杉醇分子所形成的二聚物和約0.5至約2個(gè)有機(jī)溶劑分子。
22.如權(quán)利要求18所述的方法，其在開始步驟(b)前進(jìn)一步包含將步驟(a)的混合物進(jìn)行溫度振動(dòng)。
23.如權(quán)利要求18所述的方法所形成的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物。
24.如權(quán)利要求20所述的方法所形成的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物。
25.如權(quán)利要求20所述的方法所形成的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物，其由約兩個(gè)紫杉醇分子、約三個(gè)水分子、約2個(gè)N-甲基-2-吡咯烷酮分子和約一個(gè)乙腈分子所組成。
26.如權(quán)利要求20所述的方法所形成的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物，其由約兩個(gè)紫杉醇分子、約兩個(gè)水分子和約一個(gè)N，N′-二甲基甲酰胺分子所組成。
27.一種包含約兩個(gè)紫杉醇分子、約三個(gè)水分子、約2個(gè)N-甲基-2-吡咯烷酮分子和約一個(gè)乙腈分子的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物。
28.一種包含約兩個(gè)紫杉醇分子、約兩個(gè)水分子和約一個(gè)N，N′-二甲基甲酰胺分子的晶態(tài)紫杉醇溶劑化物。
29.一種對(duì)包含紫杉醇的物質(zhì)進(jìn)行處理以獲得紫杉醇的方法，其包括a)形成一種包含下面物質(zhì)的混合物(i)包含紫杉醇的物質(zhì)，和(ii)包含一種或多種有機(jī)溶劑的水性溶液；和b)從該混合物中除去溶劑從而分離出一種晶態(tài)紫杉醇溶劑化物；和c)將該晶態(tài)固體去溶劑化。
30.如權(quán)利要求29所述的方法，其中在步驟(c)中將晶態(tài)溶劑化物進(jìn)行加熱。
31.如權(quán)利要求29所述的方法，其中在步驟(b)中，將所說的混合物進(jìn)行溫度振動(dòng)。
32.如權(quán)利要求29所述的方法，其中在步驟(a)中，向該混合物中加入酸化劑。
33.一種用于治療腫瘤的藥物組合物，其包含a)抗腫瘤有效量的根據(jù)權(quán)利要求16的方法所獲得的紫杉醇；和b)一種或多種選自載體、賦形劑、稀釋劑和助劑的組分。
34.如權(quán)利要求33所述的組合物，其包含A型紫杉醇。
35.一種治療人類腫瘤的方法，其包括使用抗腫瘤有效量的根據(jù)權(quán)利要求16的方法所獲得的紫杉醇。
36.具有由a)紫杉醇分子；和b)位于晶體結(jié)構(gòu)的溶劑部位中的溶劑分子所組成的晶態(tài)排列的D型紫杉醇溶劑化物。
37.具有由a)紫杉醇分子；和b)位于晶體結(jié)構(gòu)的溶劑部位中的溶劑分子所組成的晶態(tài)排列的E型紫杉醇溶劑化物。
38.一種包含溶劑的正交晶的紫杉醇溶劑化物晶體，其特征為晶胞參數(shù)a為約9.54，b為約28.46，和c為約37.24；和空間群對(duì)稱P 212121；該晶體在與表1所表示的小數(shù)級(jí)原子坐標(biāo)相一致的排列和構(gòu)象中包含8個(gè)紫杉醇分子；其中紫杉醇分子的排列形成了溶劑部位，所說溶劑部位的具體尺寸根據(jù)其中所包含的溶劑而變化。
39.一種包含溶劑的正交晶的紫杉醇溶劑化物晶體，其特征為晶胞參數(shù)a為約9.51，b為約27.79，和c為約34.79；和空間群對(duì)稱P 212121；該晶體在與表1所表示的小數(shù)級(jí)原子坐標(biāo)相一致的排列和構(gòu)象中包含8個(gè)紫杉醇分子；其中紫杉醇分子的排列形成了溶劑部位，所說溶劑部位的具體尺寸根據(jù)其中所包含的溶劑而變化。
全文摘要
用極性、質(zhì)子惰性有機(jī)溶劑使生物學(xué)活性的紫杉醇晶態(tài)溶劑化物沉淀。還公開了一種藥物組合物以及該新型溶劑化物的制備以及其用作抗腫瘤劑的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07D409/12GK1596250SQ02823790
公開日2005年3月16日 申請(qǐng)日期2002年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月30日
發(fā)明者D·A·貝尼尼, J·Z·古古塔斯, J·D·迪馬科 申請(qǐng)人:布里斯托爾-邁爾斯斯奎布公司