專利名稱：具有神經(jīng)營養(yǎng)活性的靛紅衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的靛紅衍生物、包含本發(fā)明靛紅衍生物的藥物組合物、制備本發(fā)明靛紅衍生物的方法、它們在神經(jīng)變性疾病治療以及損害與損傷神經(jīng)元再生或預防變性中的用途、神經(jīng)變性疾病的治療方法以及損害與損傷神經(jīng)元的再生或預防變性的方法。
背景技術：
生長因子(或神經(jīng)營養(yǎng)因子)在發(fā)育和成年期間促進大量外周與中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元的分化、生長和生存。已經(jīng)鑒定了大量神經(jīng)營養(yǎng)因子的分子特征、調(diào)節(jié)和信號轉導機理。治療學上最有希望的這些分子是神經(jīng)生長因子(NGF)、得自腦的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)、睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、胰島素樣生長因子-I(IGF-I)和得自神經(jīng)膠質(zhì)細胞系的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)。
有數(shù)據(jù)提示，神經(jīng)營養(yǎng)因子將可用于治療神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默氏病、帕金森氏病和肌萎縮性側索硬化。另外，神經(jīng)營養(yǎng)因子在外周神經(jīng)損傷和毒素誘導神經(jīng)病的動物模型中顯示有益效果[CNSDrugs(CNS藥物)1994 2(6)465-478]。
各種大鼠研究預言，模擬或增強NGF功能的化合物能夠解救中間膽堿能神經(jīng)元，減輕見于老年性癡呆的良性健忘和記憶減弱[Science(科學)1994 264 772-774]。
最近的研究顯示，NGF對腦缺血后的海馬神經(jīng)元具有神經(jīng)保護作用，這預言NGF在腦缺血性神經(jīng)元損傷的治療中具有潛在的治療作用[NeuroReport(神經(jīng)報道)1995 6(4)669-672]。
生長因子通過與特異性細胞表面受體結合而引發(fā)它們的生物學作用。生長因子與其受體的結合激活細胞內(nèi)信號轉導，引起各種次級信使的產(chǎn)生和酶級聯(lián)的活化，涉及酪氨酸激酶和蛋白激酶C，達到生物學作用的頂峰。細胞內(nèi)信號轉導途徑尚未得到充分的認識。
NGF和有關的神經(jīng)營養(yǎng)素是大型的肽，這使它們不太可能成為治療劑的候選。藥動學參數(shù)差(例如口服吸收差和體內(nèi)半衰期短)和對靶器官給藥差是主要的問題。
繼續(xù)需要開發(fā)新穎的化合物，它們能夠相互作用于神經(jīng)營養(yǎng)素受體，顯示不同于神經(jīng)營養(yǎng)素的物理化學性質(zhì)。
發(fā)明概述按照本發(fā)明，提供了新穎的神經(jīng)營養(yǎng)活性化合物。神經(jīng)營養(yǎng)活性尚未歸因于NGF與其受體之間的相互作用中或NGF信號轉導途徑中的特定步驟。
本發(fā)明化合物的神經(jīng)營養(yǎng)活性使它們可用于治療或預防神經(jīng)的各種變性疾病，包括阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷頓氏病和肌萎縮性側索硬化(ALS)，用于減輕見于老年性癡呆或與神經(jīng)變性疾病有關的良性健忘和記憶減弱。
而且，已經(jīng)顯示本發(fā)明化合物可用于治療神經(jīng)病，特別是例如由遺傳異常導致的外周神經(jīng)病，和其他疾病，例如糖尿病、脊髓灰質(zhì)炎、皰疹和AIDS，尤其是大多數(shù)癌癥患者在化學療法之后或期間所經(jīng)歷的神經(jīng)病和外周神經(jīng)病。
本發(fā)明化合物被認為特別可用于治療外周神經(jīng)、髓質(zhì)和/或脊髓的創(chuàng)傷性損害，和腦缺血，例如心博停止、中風或新生兒窒息后腦損傷繼發(fā)的缺血性神經(jīng)元損傷或者瀕臨淹溺繼發(fā)的缺血性神經(jīng)元損傷。
本發(fā)明在第一方面提供新穎的由通式(I)代表的靛紅衍生物或其藥學上可接受的鹽， 其中，
A代表式-C(NOR2)-或-NR2-CO-基團；R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、酰基、氧代四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；
其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
本發(fā)明在另一方面提供藥物組合物，包含治療學上有效量的本發(fā)明化合物以及至少一種藥學上可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明在第三方面涉及本發(fā)明化合物的用途，用于制備治療或減輕哺乳動物、包括人的疾病或障礙或疾患的藥物，該疾病或障礙或疾患對神經(jīng)營養(yǎng)劑的活性有應答。
本發(fā)明在第四方面提供治療或減輕哺乳動物、包括人的疾病或障礙或疾患的方法，該疾病或障礙或疾患對神經(jīng)營養(yǎng)劑的活性有應答，該方法包含在需要時對所述哺乳動物給以有效量的本發(fā)明化合物。
其他發(fā)明目的通過下列詳細說明和實施例將對本領域技術人員來說是顯而易見的。
發(fā)明的詳細公開新的神經(jīng)營養(yǎng)性化合物本發(fā)明在第一方面提供新穎的由通式(I)代表的靛紅衍生物或其藥學上可接受的鹽， 其中，A代表式-C(NOR2)-或-NR2-CO-基團；R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、酰基、氧代-四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；
R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
在一種實施方式中，R1代表氫。在第二種實施方式中，R1代表烷基，特別是甲基。
在進一步的實施方式中，R2代表氫、烷基、酰基或異噁唑基，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組。
在更進一步的實施方式中，R2代表氧代-四氫呋喃或異噁唑基-烷基，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組。
在進一步的實施方式中，R2代表被一個或多個羥基或羧基取代的烷基。在特定的實施方式中，R2代表被羥基和羧基取代的C3-6-烷基，例如羥基丁酸基。
在特定的實施方式中，R2代表氫。在進一步的實施方式中，R2代表(3-甲氧基-5-甲基-異噁唑-4-基)-甲基。在更進一步的實施方式中，R2代表烷基，特別是甲基。在進一步的實施方式中，R2代表2-氧代-四氫呋喃-3-基。在更進一步的實施方式中，R2代表4-羥基丁酸-2-基。
在進一步的實施方式中，R5代表苯基，該基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基或苯基取代一次或多次。在特定的實施方式中，R5代表在4-位被鹵素、CF3、NO2、氨基、烷基或烷氧基取代的苯基。在進一步特定的實施方式中，R5代表苯基、4-氯苯基、4-三氟甲基苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、4-乙氧羰基苯基、4-溴苯基、4-三氟甲氧基苯基或4-(N，N-二甲基氨磺酰)苯基。
在更進一步的實施方式中，R5代表噻吩基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基或噻唑基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、NO2、氨基、烷基、烷氧基或苯基取代一次或多次。在特定的實施方式中，R5代表5-苯基-噻吩-2-基、5-氯吡啶-2-基、6-氯吡啶-3-基、5-氯嘧啶-2-基、2-氯嘧啶-5-基、6-氯噠嗪-3-基、5-氯吡嗪-2-基、5-氯噻吩-2-基、5-氯-1，1-二氧基-噻吩-2-基、5-氯噻唑-2-基、2-氯噻唑-5-基。
在進一步的實施方式中，R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、NO2、氨基、烷基、烷氧基或苯基取代一次或多次。
在一種實施方式中，R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH基團或烷基。
在進一步的實施方式中，R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。在特定的實施方式中，R6代表氫，R7代表氫。在進一步特定的實施方式中，R6代表甲基，R7代表甲基。
在更進一步的實施方式中，R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-NR12-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；或-CH2-NR12-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH基團或烷基。
在進一步的實施方式中，R12代表氫。在更進一步的實施方式中，R12代表烷基，例如甲基或乙基。在進一步的實施方式中，R12代表-CO-CH3。在更進一步的實施方式中，R12代表-SO2-CH3。
在進一步的實施方式中，R12代表氫、式-CH2CH2OH基團或烷基。
在優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的靛紅衍生物可以以通式(II)或其藥學上可接受的鹽為特征， 其中，R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；⒀醮?四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
在另一種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的靛紅衍生物可以以通式(III)為特征 其中R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、酰基、氧代-四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基。
在更優(yōu)選的實施方式中，通式(II)的靛紅衍生物是7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-甲基肟；5-(4-氯苯基)-7-甲基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-肟；7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3肟；7-甲基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮3-肟；7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮-3-乙酰肟；7-乙基-5-(4-氯苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽；7-乙基-5-(4-氯苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮-3-甲基肟；或其藥學上可接受的鹽。
在第三種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的靛紅衍生物可以是以通式(IV)、(V)或(VI)為特征的 其中R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；?、氧代-四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺酰基、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基。
在更優(yōu)選的實施方式中，通式(IV)的靛紅衍生物是5-[5-苯基-2-噻吩基]-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯吡啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(6-氯吡啶-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯嘧啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(2-氯嘧啶-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(6-氯噠嗪-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯吡嗪-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯-1，1-二氧基-噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯噻唑-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(2-氯噻唑-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(3-(2-氧代)四氫呋喃基)肟；5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯吡啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(6-氯吡啶-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯嘧啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(2-氯嘧啶-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(6-氯噠嗪-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯吡嗪-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)；5-(5-氯噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯-1，1-二氧基-噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯噻唑-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(2-氯噻唑-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；或其藥學上可接受的鹽。
在更優(yōu)選的實施方式中，通式(V)的靛紅衍生物是5-(4-氯苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-溴苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；
5-(4-三氟甲氧基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-三氟甲基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-甲苯甲?；?-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-甲氧基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-(4-(N，N-二甲基氨磺酰基)苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-O-((3-甲氧基-5-甲基-異噁唑-4-基)甲基)肟；8-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-(4-硝基苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-(4-氟苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-乙?；浚?-甲基-5-(4-乙基苯甲?；?-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-乙?；?5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-氯苯基)-8-甲磺?；?6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；或其藥學上可接受的鹽。
在更優(yōu)選的實施方式中，通式(VI)的靛紅衍生物是7-甲基-5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-]H-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；
5-苯基-7-甲基-6，7，8，9-四氫-1-甲基-吡咯并[3.2-f]異喹啉2，3-二酮-3-肟；7-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；7-乙基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；或其藥學上可接受的鹽。
在第四種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的靛紅衍生物可以是以通式(VII) 或其藥學上可接受的鹽為特征的，其中，R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；?、氧代四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；
-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
在第五種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的靛紅衍生物可以是以通式(VIII)為特征的 其中R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、酰基、氧代四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基。
在更優(yōu)選的實施方式中，通式(VIII)的靛紅衍生物是5-(4-氯苯基)-1，4，7，8，9，10-六氫吡啶并-8-甲基[4，3-f]喹喔啉-2，3-二酮；5-(4-硝基苯基)-1，4，7，8，9，10-六氫吡啶并-8-乙基[4，3-f]喹喔啉-2，3-二酮；或其藥學上可接受的鹽。
取代基的定義在本發(fā)明的上下文中，鹵素代表氟、氯、溴或碘原子。
在本發(fā)明的上下文中，烷基表示一價飽和的直鏈或支鏈烴鏈。烴鏈優(yōu)選地含有一至十八個碳原子(C1-18-烷基)，更優(yōu)選為一至六個碳原子(C1-6-烷基；低級烷基)，包括戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、己基和異己基。在優(yōu)選的實施方式中，烷基代表C1-4-烷基，包括丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。在本發(fā)明優(yōu)選的實施方式中，烷基代表C1-3-烷基，特別可以是甲基、乙基、丙基或異丙基。
在本發(fā)明的上下文中，烷氧基表示“烷基-O-”基團，其中的烷基是如上所定義的。
在本發(fā)明的上下文中，酰基表示羧基(-COOH)或烷基羰基(烷基-CO-)，其中的烷基是如上所定義的。本發(fā)明優(yōu)選的?；鶎嵗然⒁阴；捅；?。
在本發(fā)明的上下文中，氨基可以是伯氨基(-NH2)、仲氨基(-NH-烷基)或叔氨基(-N(烷基)2)，也就是說它可以被如上所定義的烷基取代一次或兩次。
在本發(fā)明的上下文中，雜環(huán)基是在其環(huán)結構中具有一個或多個雜原子的化合物。優(yōu)選的雜原子包括氮(N)、氧(O)和硫(S)。雜環(huán)基特別可以是芳族的(也就是雜芳基)、飽和的或部分飽和的。本發(fā)明優(yōu)選的單環(huán)雜環(huán)基包括5-與6-元單環(huán)雜環(huán)基。
本發(fā)明優(yōu)選的芳族5-或6-元雜環(huán)基實例包括1，3，2，4-或1，3，4，5-二噁二唑基、二噁三嗪基、二噁嗪基、1，2，3-、1，2，4-、1，3，2-或1，3，4-二噁唑基、1，3，2，4-或1，3，4，5-二噻二唑基、二噻三嗪基、二噻嗪基、1，2，3-二噻唑基、2-或3-呋喃基、呋咱基、1-、2-或4-咪唑基、異吲唑基、異噻唑-3-、-4-或-5-基、異噁唑-3-、-4-或-5-基、1，2，3-、1，2，4-、1，2，5-或1，3，4-噁二唑-3-、-4-或-5-基、噁四嗪基、噁三嗪基、1，2，3，4-或1，2，3，5-噁三唑基、噁唑-2-、-4-或-5-基、2-或3-吡嗪基、1-、3-或4-吡唑基、3-或4-噠嗪基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-或5-嘧啶基、1-、2-或3-吡咯基、1，2，3，4-或2，1，3，4-四唑基、噻二唑-3-、-4-或-5-基、噻唑-2-、-4-或-5-基、2-或3-噻吩基、1，2，3-、1，2，4-或1，3，5-三嗪基、和1，2，3-、1，2，4-、2，1，3-或4，1，2-三唑基。本發(fā)明最優(yōu)選的芳族雜環(huán)基包括呋喃-2-基、呋喃-3-基、2-、4-或5-咪唑基、3-、4-或5-異噁唑基、1-、2-或3-吡啶基、和1-或2-噻吩基。
本發(fā)明優(yōu)選的飽和或部分飽和5-或6-元雜環(huán)基實例包括1，3，5，6，2-二噁二嗪基、1，2，3，4，5-或1，2，3，5，4-二噁二唑基、二噁烷基、1，3-二氧雜環(huán)戊烯基、1，3，5，6，2-二噻二嗪基、1，2，3，4，5-或1，2，3，5，4-二噻二唑基、2-異咪唑基、異吡咯基、異四唑基、1，2，3-或1，2，4-異三唑基、嗎啉基、噁二嗪基、1，2，4-、1，2，6-、1，3，2-、1，3，6-或1，4，2-噁嗪基、哌嗪基、高哌嗪基、哌啶基、1，2-、1，3-或1，4-吡喃基、和1，2，3-吡咯烷基。
立體異構體本發(fā)明的化合物可以存在(+)和(-)型以及外消旋型。這些異構體的外消旋物和單獨的異構體本身屬于本發(fā)明的范圍。
外消旋型可以被已知的方法和工藝拆分為旋光對映體。分離非對映異構鹽的一種方法是利用旋光活性酸，通過堿的處理釋放旋光活性的胺化合物。拆分外消旋物為旋光對映體的另一種方法基于旋光活性基質(zhì)色譜法。本發(fā)明的外消旋化合物因而可以被拆分為它們的旋光對映體，例如通過d-或l-鹽(例如酒石酸鹽、扁桃酸鹽或樟腦磺酸鹽)的分步結晶。
本發(fā)明還可以這樣拆分，使本發(fā)明化合物與旋光活性的活化羧酸(例如從(+)或(-)苯丙氨酸、(+)或(-)苯基甘氨酸、(+)或(-)莰烷酸衍生)反應生成非對映異構酰胺，或者使本發(fā)明化合物與旋光活性的氯甲酸酯反應生成非對映異構氨基甲酸酯等。
其他拆分旋光異構體的方法是本領域已知的。這類方法包括Jaques J，Collet A，& Wilen S在″Enantiomers，Racemates，andResolutions″，John Wiley and Sons，New York(1981)中所述的那些。旋光活性化合物還可以從旋光活性原料制備。
藥學上可接受的鹽本發(fā)明化合物可以是適合于預期給藥的任意形式。適合的形式包括本發(fā)明化合物的藥學上(也就是生理學上)可接受的鹽和前體藥物形式。
藥學上可接受的加成鹽實例非限制性地包括無毒的無機和 有機酸加成鹽，例如從鹽酸衍生的鹽酸鹽、從氫溴酸衍生的氫溴酸鹽、從硝酸衍生的硝酸鹽、從高氯酸衍生的高氯酸鹽、從磷酸衍生的磷酸鹽、從硫酸衍生的硫酸鹽、從甲酸衍生的甲酸鹽、從乙酸衍生的乙酸鹽、從烏頭酸衍生的烏頭酸鹽、從抗壞血酸衍生的抗壞血酸鹽、從苯磺酸衍生的苯磺酸鹽、從苯甲酸衍生的苯甲酸鹽、從肉桂酸衍生的肉桂酸鹽、從檸檬酸衍生的檸檬酸鹽、從撲酸衍生的撲酸鹽、從庚酸衍生的庚酸鹽、從富馬酸衍生的富馬酸鹽、從谷氨酸衍生的谷氨酸鹽、從乙醇酸衍生的乙醇酸鹽、從乳酸衍生的乳酸鹽、從馬來酸衍生的馬來酸鹽、從丙二酸衍生的丙二酸鹽、從扁桃酸衍生的扁桃酸鹽、從甲磺酸衍生的甲磺酸鹽、從萘-2-磺酸衍生的萘-2-磺酸鹽、從鄰苯二甲酸衍生的鄰苯二甲酸鹽、從水楊酸衍生的水楊酸鹽、從山梨酸衍生的山梨酸鹽、從硬脂酸衍生的硬脂酸鹽、從琥珀酸衍生的琥珀酸鹽、從酒石酸衍生的酒石酸鹽、從對-甲苯磺酸衍生的甲苯-對-磺酸鹽等。通過本領域熟知和所述的程序可以生成這類鹽。
其他酸、例如草酸可能不被認為是藥學上可接受的，可用于制備在獲得本發(fā)明化合物及其藥學上可接受的酸加成鹽中用作中間體的鹽。
本發(fā)明化合物的金屬鹽包括堿金屬鹽，例如含有羧基的本發(fā)明化合物的鈉鹽。
在本發(fā)明的上下文中，含N化合物的“鎓鹽”也被認為是藥學上可接受的鹽。優(yōu)選的“鎓鹽”包括烷基-鎓鹽、環(huán)烷基-鎓鹽和環(huán)烷基烷基-鎓鹽。
本發(fā)明化合物可以是可溶解或不可溶解的形式，藥學上可接受的溶劑例如水、乙醇等?？扇苄问竭€可以包括水合形式，例如一水合物、二水合物、半水合物、三水合物、四水合物等。一般來說，可溶形式出于本發(fā)明的目的被認為等價于不可溶形式。
標記的化合物本發(fā)明化合物可以使用它們的標記或未標記形式。在本發(fā)明的上下文中，“標記”代表標記物與有關化合物的結合，有利于所述化合物的定量檢測。
本發(fā)明的標記化合物可以在各種診斷方法中用作診斷工具、放射示蹤劑或監(jiān)測劑，用于體內(nèi)受體造影。
在標記的化合物中，一個或多個原子變?yōu)樘烊淮嬖谠拥耐凰?。標記的化合物包括但不限?H(氘)、3H(氚)、13C、14C、131I、125I、123I和18F。
在優(yōu)選的實施方式中，物理檢測方法選自PET、SPECT、MRS、MRI、CAT或其組合。
制備方法本發(fā)明的靛紅衍生物可以按照常規(guī)的化學合成方法加以制備，例如工作例中所述的那些。用于本申請所述方法的原料是已知的，或者可以按照常規(guī)方法容易從商業(yè)上可得到的化學品加以制備。
這里所述反應的終產(chǎn)物可以按照常規(guī)工藝分離，例如萃取、結晶、蒸餾、色譜等。
藥物組合物本發(fā)明在另一方面提供新的藥物組合物，包含治療學上有效量的本發(fā)明化合物。
盡管用于治療的本發(fā)明化合物可以以原料藥化合物的形式給藥，不過優(yōu)選的是在藥物組合物中引入可選為生理學上可接受的鹽形式的活性成分以及一種或多種助劑、賦形劑、載體、緩沖劑、稀釋劑和/或其他慣用藥物輔助成分。
在優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明提供藥物組合物，包含本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽或衍生物以及一種或多種藥學上可接受的載體和可選的其他治療和/或預防成分。載體在與制劑其他成分相容并且對其接受者無害的意義上必須是“可接受的”。
本發(fā)明的藥物組合物可以是適合于口服、直腸、支氣管、鼻、局部(包括頰和舌下)、透皮、陰道或腸胃外(包括皮膚、皮下、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、腦內(nèi)、眼內(nèi)注射或輸注)給藥的劑型，或者是適合通過吸入或吹入給藥(包括散劑和液體氣霧劑給藥)或者通過持續(xù)釋放系統(tǒng)給藥的劑型。適合的持續(xù)釋放系統(tǒng)實例包括含有本發(fā)明化合物的固體疏水性聚合物的半透過性基質(zhì)，該基質(zhì)可以是成型物品的形式，例如膜或微囊。
本發(fā)明化合物以及常規(guī)助劑、載體或稀釋劑因而可以置入藥物組合物及其單位劑型內(nèi)。這類劑型包括固體劑型，具體為片劑、填充膠囊劑、散劑和顆粒劑，和液體劑型，具體為水性或非水性溶液、懸液、乳劑、酏劑和灌裝這些的膠囊劑，均用于口服，以及用于直腸給藥的栓劑和腸胃外使用的無菌可注射溶液。這類藥物組合物及其單位劑型可以按常規(guī)比例包含常規(guī)成分，含有或沒有另外的活性化合物或成分，并且這類單位劑型可以含有任意適合的有效量的活性成分，與所要采用的預期每日劑量范圍是相稱的。
本發(fā)明化合物可以以多種口服與腸胃外劑型給藥。對本領域技術人員來說將顯而易見的是下列劑型可以包含本發(fā)明化合物或本發(fā)明化合物的藥學上可接受的鹽作為活性組分。
關于從本發(fā)明化合物制備藥物組合物，藥學上可接受的載體既可以是固體，也可以是液體。固體制劑包括散劑、片劑、丸劑、膠囊劑、扁囊劑、栓劑和可分散的顆粒劑。固體載體可以是一種或多種物質(zhì)，也可以充當稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或包封材料。
在散劑中，載體是微細粉碎的固體，與微細粉碎的活性組分形成混合物。
在片劑中，將活性組分與具有必要粘合能力的載體按適當比例混和，壓制成所需形狀和大小。
散劑和片劑優(yōu)選地含有百分之五或十至約七十的活性化合物。適合的載體是碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟、可可脂等。術語“制劑”打算包括活性化合物與作為載體的膠囊包封材料的制劑，其中活性組分(有或沒有載體)被載體包圍，因而與之締合。類似地，包括扁囊劑和錠劑。片劑、散劑、膠囊劑、丸劑、扁囊劑和錠劑可以用作適合口服給藥的固體劑型。
關于制備栓劑，首先使低熔點蠟熔化，例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，然后通過攪拌使活性組分均勻分散其中。然后將熔化了的均勻混合物倒在適宜大小的模具內(nèi)，冷卻，由此固化。
適合陰道給藥的組合物可以是陰道栓、棉塞、霜劑、凝膠劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑，除了活性成分以外還含有本領域已知合適的載體。
液體制劑包括溶液、懸液和乳劑，例如水或水-丙二醇溶液。例如，腸胃外注射液體制劑可以被配制成在水性聚乙二醇溶液中的溶液。
根據(jù)本發(fā)明的化合物因而可以被配制成腸胃外給藥(例如注射，例如藥團注射或連續(xù)輸注)的劑型，并且可以以單位劑型存在于安瓿、預灌裝注射器、小體積輸注或多劑容器內(nèi)，其中加入防腐劑。組合物例如可以采取在油性或水性載體中的懸液、溶液或乳劑的形式，并且可以含有配制劑，例如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。作為替代選擇，活性成分可以是粉末的形式，通過無菌固體的無菌分離或溶液的冷凍干燥而得，使用前與適合的載體再生，例如無菌無熱原的水。
適合口服使用的水溶液可以這樣制備，將活性組分溶于水，根據(jù)需要加入適合的著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑。
適合口服使用的水懸液可以這樣制備，將微細粉碎的活性組分分散在水中，其中含有粘性材料，例如天然或合成的樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或其他熟知的懸浮劑。
還包括這樣的固體劑型制劑，在使用前不久轉化為用于口服給藥的液體劑型制劑。這類液體劑型包括溶液、懸液和乳劑。這些制劑除了活性組分以外還可以含有著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、人工與天然甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。
關于對表皮局部給藥，本發(fā)明化合物可以被配制成軟膏劑、霜劑或洗劑，或者透皮貼劑。軟膏劑和霜劑例如可以用水性或油性基質(zhì)進行配制，并加入適合的增稠劑和/或膠凝劑。洗劑可以用水性或油性基質(zhì)進行配制，一般也將含有一種或多種乳化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。
適合口內(nèi)局部給藥的組合物包括錠劑，在經(jīng)過矯味的基質(zhì)、通常為蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠中包含活性藥物；軟錠劑，在惰性基質(zhì)、例如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中包含活性成分；和漱口劑，在適合的液體載體中包含活性成分。
溶液或懸液借助常規(guī)手段直接應用于鼻腔，例如滴管、吸移管或噴霧器。組合物可以是單劑或多劑的形式。在后者滴管或吸移管的情況下，這可以通過患者給以適當?shù)念A定體積的溶液或懸液來實現(xiàn)。在噴霧器的情況下，這例如可以借助計量霧化噴霧泵來實現(xiàn)。
對呼吸道給藥還可以借助氣霧劑來實現(xiàn)，其中在加壓包裝內(nèi)存在活性成分和適合的推進劑，例如氯氟碳化合物(CFC)，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷，二氧化碳或其他適合的氣體。氣霧劑還可以適宜地含有表面活性劑，例如卵磷脂。藥物的劑量可以通過計量閥門加以控制。
作為替代選擇，活性成分可以是干粉的形式，例如化合物在適合散劑基質(zhì)中的粉末混合物，基質(zhì)例如乳糖、淀粉、淀粉衍生物，例如羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。散劑載體適宜在鼻腔內(nèi)形成凝膠。粉末組合物可以是單位劑型，例如明膠的膠囊劑或藥筒，或泡罩包裝，從中借助吸入器將散劑給藥。
在打算對呼吸道給藥的組合物、包括鼻內(nèi)組合物中，化合物一般將具有很小的粒徑，例如5微米或以下的級別。這樣一種粒徑可以按照本領域已知的手段得到，例如微粉化。
在需要時可以采用實現(xiàn)活性成分持續(xù)釋放的組合物。
藥物制劑優(yōu)選地是單位劑型。在這類劑型中，制劑被細分為含有適當量活性組分的單位劑量。單位劑型可以是包裝好的制劑，包裝含有不連續(xù)量的制劑，例如包裝在小瓶或安瓿內(nèi)的片劑、膠囊劑和散劑。而且，單位劑型可以是膠囊劑、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或者它可以是適量的任意這些包裝好的形式。
用于口服給藥的片劑或膠囊劑和用于靜脈內(nèi)給藥和連續(xù)輸注的液體是優(yōu)選的組合物。
關于制劑和給藥工藝的進一步細節(jié)可以在最新版的Remington’sPharmaceutical Sciences(Maack Publishing Co.，Easton，PA)中找到。
治療學上的有效劑量指活性成分改善癥狀或疾患的量。按照標準的藥理學程序，可以在細胞培養(yǎng)物或?qū)嶒瀯游镏袦y定治療功效和毒性，例如ED50和LD50。治療作用與毒性作用之間的劑量比是治療指數(shù)，可以表示為LD50/ED50之比。表現(xiàn)高治療指數(shù)的藥物組合物是優(yōu)選的。
給藥劑量當然必須根據(jù)所治療個體的年齡、體重與條件以及給藥途徑、劑型與制度和所需結果加以謹慎調(diào)整，精確的劑量當然應當由醫(yī)師決定。
實際的劑量取決于所治療疾病的性質(zhì)與嚴重性和給藥途徑，決定權在醫(yī)師，可以根據(jù)本發(fā)明的特定環(huán)境通過劑量的滴定加以改變，以產(chǎn)生所需的治療作用。不過，目前所關注的是每單個劑量含有約0.01至約500mg、優(yōu)選為約0.1至約100mg、最優(yōu)選為約1至約10mg活性成分的藥物組合物是適合治療的。
活性成分可以每天給藥一次或若干次。在某些場合中，在低達0.01μg/kg i.v.和0.1μg/kg p.o.的劑量下可以獲得令人滿意的結果。劑量范圍的上限目前被認為是約10mg/kg i.v.和100mg/kg p.o.。優(yōu)選的范圍是從約0.1μg/kg至約10mg/kg/天i.v.和從約1μg/kg至約100mg/kg/天p.o.。
生物學活性正如工作例所證明的，本發(fā)明化合物顯示神經(jīng)營養(yǎng)活性。神經(jīng)營養(yǎng)活性尚未歸因于NGF與其受體之間的相互作用中或NGF信號轉導途徑中的特定步驟。
本發(fā)明化合物的神經(jīng)營養(yǎng)活性使它們可用于治療或預防神經(jīng)系統(tǒng)的各種變性疾病。
而且，本發(fā)明化合物被認為特別可用于治療神經(jīng)病，特別是例如由遺傳異常導致的外周神經(jīng)病，和其他疾患，例如糖尿病、脊髓灰質(zhì)炎、皰疹和AIDS，尤其是大多數(shù)癌癥患者在化學療法之后或期間所經(jīng)歷的神經(jīng)病和外周神經(jīng)病。
本發(fā)明化合物被認為特別可用于治療外周神經(jīng)、髓質(zhì)和/或脊髓的創(chuàng)傷性損害，和腦缺血，例如心博停止、中風或新生兒窒息后腦損傷繼發(fā)的缺血性神經(jīng)元損傷或者瀕臨淹溺繼發(fā)的缺血性神經(jīng)元損傷。
最后，本發(fā)明化合物被認為特別可用于增加神經(jīng)元移植物的存活率。
治療方法本發(fā)明在另一方面提供治療或減輕活體動物、包括人類疾病或障礙或疾患的方法，該疾病、障礙或疾患對神經(jīng)營養(yǎng)劑的活性有應答，該方法包含在需要時對這樣一種活體動物、包括人給以有效量的本發(fā)明化合物。
在優(yōu)選的實施方式中，該疾病或障礙或疾患對神經(jīng)生長因子的活化或強化有應答。
在另一種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明提供治療外周神經(jīng)、髓質(zhì)、脊髓的創(chuàng)傷性損害、腦缺血性神經(jīng)元損傷、神經(jīng)病(包括外周神經(jīng)病)的方法。
在第三種優(yōu)選的實施方式中，該疾病是神經(jīng)變性疾病。
在更優(yōu)選的實施方式中，該神經(jīng)變性疾病是癡呆、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷頓氏病、肌萎縮性側索硬化或眼的神經(jīng)變性疾病，包括黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎、青光眼和類似疾病患者視網(wǎng)膜的光感受器喪失。
在第四種優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明提供預防與神經(jīng)變性疾病有聯(lián)系的變性改變的方法。
在更優(yōu)選的實施方式中，該神經(jīng)變性疾病是腦缺血性神經(jīng)元損傷、神經(jīng)病(尤其是外周神經(jīng)病)、阿爾茨海默氏病、亨廷頓氏病、帕金森氏病或肌萎縮性側索硬化。
按照本發(fā)明所關注的具體疾病包括興奮性氨基酸依賴性、特別是谷氨酸鹽和/或天冬氨酸鹽依賴性疾病、障礙和疾患，象牛皮癬、缺氧、缺血、帕金森氏綜合征、驚厥、偏頭痛和肌萎縮性側索硬化(ALS)。
目前所關注的是適合的劑量范圍是0.1至1000毫克每日，10-500毫克每日，尤其是30-100毫克每日，通常取決于精確的給藥模式、給藥劑型、給藥所針對的適應癥、所涉及的受治療者與所涉及受治療者的體重和進一步的主管醫(yī)師或獸醫(yī)的偏愛與經(jīng)驗。
附圖的簡要說明參照附圖進一步闡述本發(fā)明，其中

圖1闡述在有或沒有化合物G-1和NGF的存在下保溫兩天后對PC12細胞的平均軸突長度±SEM(總軸突長度/每孔總細胞數(shù))的作用；圖2闡述化合物G-1對在培養(yǎng)基中生長7天后E14大鼠VM培養(yǎng)物中TH-ir數(shù)的作用。在本實驗中，發(fā)現(xiàn)TH-免疫反應性細胞在用1μM化合物G-1處理的培養(yǎng)物中比未處理的對照培養(yǎng)物多81％(Mann-Whitney檢驗p＜0.016)，說明該化合物對大鼠這種神經(jīng)元群具有存活作用；圖3闡述化合物G-1對體外生長21天后的切片培養(yǎng)物中TH-IR數(shù)的作用。在本實驗中，發(fā)現(xiàn)TH-免疫反應性細胞在用1μM化合物G-1處理的培養(yǎng)物中比未處理的對照培養(yǎng)物多37％(Mann-Whitney檢驗p＜0.038)，說明該化合物對豬的這種神經(jīng)元群具有存活作用；圖4(A和B)闡述1-3μM化合物G-1對NGF-誘導的ERK與Akt激酶磷酸化的作用。在這些實驗中，見到μM濃度化合物G-1強化NGF-誘導的激酶(ERK與Akt激酶)磷酸化的能力，這種磷酸化對信號轉導來說具有重要意義；圖5闡述化合物G-2對沙土鼠模型瞬間普遍缺血4分鐘后海馬損傷的作用。根據(jù)海馬損傷的程度分為四組第1組CA1-層沒有損傷；第2組CA1-層部分損傷；第3組CA1-層完全損傷；第4組不僅CA1-層損傷。左右半球得分之和為總的缺血得分。使用Kendallτ檢驗進行統(tǒng)計學評價。大多數(shù)(≈80％)未處理動物顯示海馬CA1-層有總體損傷。相反，見到多數(shù)(≈50％)在缺血發(fā)作后接受化合物G-2(2×30mg/kg ip.)的動物海馬神經(jīng)元沒有或僅有部分損傷；圖6闡述用3mM化合物G-1刺激20分鐘對未分化PC12細胞CREB磷酸化的作用，單用或者加入次優(yōu)濃度(0.1nM)的NGF。加入弗司扣林作為陽性對照，因為已知它經(jīng)由細胞內(nèi)cAMP的升高和PKA的活化刺激CREB磷酸化。在5至20分鐘時間點與未刺激的細胞以及用0.1nM NGF刺激的細胞相比，顯示化合物G-1刺激CREB磷酸化。
實施例參照下列實施例進一步闡述發(fā)明，它們無論如何也不打算限制所要求保護的發(fā)明范圍。
實施例1制備例一般說明所有涉及對空氣敏感的試劑或中間體的反應均在氮下和無水溶劑中進行。在加工程序中使用硫酸鎂作為干燥劑，在減壓下蒸發(fā)溶劑。
方法A5-溴-8-硝基異喹啉在1.5小時內(nèi)，在10℃以下，將硝酸鉀(120g，1.2mol)的濃硫酸(500ml)溶液加入到5-溴異喹啉(219.4g，1.05mol)與濃硫酸(400ml)的混合物中。將反應液倒在冰(4l)上，加入濃氫氧化銨(2l)和冰(4l)中和。過濾晶體，風干。收率216.9g(82％)。Mp 129-130℃。
方法B5-溴-N-甲基-8-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉將5-溴-8-硝基異喹啉(216.9g，0.86mol)在10分鐘內(nèi)分批加入到硫酸二甲酯溶液(750ml)中。放出一定的熱。將混合物在100℃下加熱10分鐘。沉淀出5-溴-2-甲基-8-硝基喹啉鎓甲基硫酸鹽。在冰上冷卻混合物，加入二乙醚(1l)。過濾粗混合物，分離晶體。將鹽溶于乙酸(1.5l)。歷經(jīng)4小時向冰冷卻的混合物中加入硼氫化鈉(47g，1.24mol)。使溫度保持在30℃以下。蒸發(fā)粗混合物，加入氫氧化鈉(2l，1M)。過濾晶體。收率205.2g(88％)。Mp 85-87℃。
方法C5-(4-氯苯基)-N-甲基-8-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉將5-溴-N-甲基-8-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉(4.07g，15mmol)、4-氯苯基代硼酸(3.5g，22.5mmol)、碳酸鈉(8.0g，75.5mmol)、1，2-二甲氧基乙烷(60ml)、水(30ml)與四(三苯膦)鈀(O)(0.20g，0.17mmol)的混合物在回流下攪拌3.5小時。加入水(50ml)，混合物用乙酸乙酯(100ml)萃取。使粗混合物從乙醇(96％)中重結晶。收率3.62g(80％)。Mp 162-163℃。
8-乙酰氨基-5-(4-氯苯基)-四氫-1，2，3，4-萘按照方法C從1-乙酰氨基-4-溴-5，6，7，8-四氫萘制備。收率62％。Mp 217-220℃。
4-(4-氯苯基)-硝基苯按照方法C從4-溴硝基苯和4-氯苯基代硼酸制備。收率86％。Mp141.6-145.2℃。
方法D8-氨基-5-(4-氯苯基)-N-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉鹽酸鹽將5-(4-氯苯基)-N-甲基-8-硝基-1，2，3，4-四氫異喹啉(3.47g，11.5mmol)、硫酸(1ml，12mmol)、阮內(nèi)鎳(1ml，50％水漿液)與甲醇(150ml)的混合物在氫下攪拌1.5小時。將粗混合物通過C鹽過濾，蒸發(fā)。收率3.2g(90％)。Mp 213-215℃。
4-氯苯基)苯胺按照方法D從4-(4-氯苯基)硝基苯制備。所分離的產(chǎn)物是一種油。收率72％。
方法F5-(4-氯苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮將8-氨基-5-(4-氯苯基)-N-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉鹽酸鹽(3.1g，10mmol)、氯醛(1.5ml，15mmol)、硫酸鈉(14g，98.6mmol)、鹽酸羥胺(2.4g，15mmol)與水(70ml)的混合物在回流下加熱0.5小時。使混合物達到室溫。將晶體過濾，用水洗滌，然后從乙醇(96％)中重結晶。將結晶性中間體(2.0g)與甲磺酸(20ml)合并，在100℃下加熱15分鐘。將粗混合物倒在冰上，加入氫氧化鈉(25ml，10M)。使結晶性產(chǎn)物從乙醇(96％)中重結晶。收率0.54g(29％)。Mp分解225℃。
5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮按照方法F從8-氨基-5-(4-氯苯基)-N-甲基-1，2，3，4-萘制備。收率52％。Mp 286.9-290.1℃。
5-(4-氯苯基)靛紅按照方法F從4-氯苯基)苯胺制備。收率26％。Mp 246.3-251.5℃。
方法G5-(4-氯苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-1)將5-(4-氯苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮(0.50g，1.53mmol)、鹽酸羥胺(0.5g，7.2mmol)與乙醇(5ml，96％)的混合物在室溫下攪拌15分鐘。顏色從黃色變?yōu)榧t色，沉淀出產(chǎn)物。過濾產(chǎn)物，分離到0.44g(76％)。Mp分解300-305℃。
5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-2)按照方法G從5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮制備。收率79％。Mp分解250℃。
5-(4-氯苯基)靛紅-3-肟(化合物G-3)按照方法G從5-(4-氯苯基)靛紅制備。收率41％。Mp 236-237℃。
5-(4-三氟甲基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-4)按照方法G制備。Mp 295-300℃分解。
5-[5-苯基-2-噻吩基]-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-5)按照方法G制備。Mp 267-268℃。
5-(4-甲苯甲?；?-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟甲磺酸鹽(化合物G-6)按照方法G制備。Mp 225-230 C分解5-(4-甲氧基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟甲磺酸鹽(化合物G-7)按照方法G制備。Mp 228℃。
5-(4-溴苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-8)按照方法G制備。Mp＞300℃分解。
5-(4-三氟甲氧基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-9)按照方法G制備。Mp＞250℃分解。
5-(4-氯苯基)-7-甲基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-10)按照方法G制備。Mp＞250℃分解。
5-苯基-7-甲基-6，7，8，9-四氫-1-甲基-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-11)按照方法G制備。Mp 292-294℃。
8-乙?；?5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟(化合物G-12)按照方法G制備。Mp 250℃分解。
7-乙基-5-(4-氯苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-13)按照方法G制備。Mp 220℃分解。
5-(4-氯苯基)-8-甲磺?；?6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟(化合物G-14)按照方法G制備。Mp 205℃分解。
5-(4-氯苯基)-4，5-二甲基靛紅-3-肟(化合物G-15)按照方法G從5-(4-氯苯基)-4，5-二甲基靛紅制備。Mp 250℃分解。
7-甲基-5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3，2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-16)按照方法G制備。Mp 250℃分解。
7-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3，2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽(化合物G-17)按照方法G制備。Mp 310℃。
5-(4-硝基苯基)-1，4，7，8，9，10-六氫-8-乙基[4，3-f]喹喔啉-2，3-二酮鹽酸鹽(化合物G-18)按照方法G制備。Mp 300℃。
下列化合物可以按照方法G制備5-(5-氯吡啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-19)5-(6-氯吡啶-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-20)5-(5-氯嘧啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-21)5-(2-氯嘧啶-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-22)5-(6-氯噠嗪-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-23)5-(5-氯吡嗪-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-24)5-(5-氯噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-25)5-(5-氯-1，1-二氧基噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-26)5-(5-氯噻唑-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-27)5-(2-氯噻唑-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟(化合物G-28)方法H1-氨基-4-(4-氯苯基)-四氫-5，6，7，8-萘將1-乙酰氨基-4-(4-氯苯基)-四氫-5，6，7，8-萘(1.65g，5.5mmol)、氫氧化鈉水溶液(20ml，4M)與乙醇(96％)的混合物在回流下攪拌3天。加入水(50ml)，混合物用乙酸乙酯(50ml)萃取。所分離的產(chǎn)物是一種油。收率1.31g(93％)。
方法I1-乙酰氨基-4-溴-5，6，7，8-四氫萘向1-乙酰氨基-5，6，7，8-四氫萘(1.9g，10mmol)在三氟乙酸(20ml)中的混合物中加入溴(0.55ml，10mmol)的乙酸(5ml)溶液。將混合物在室溫下攪拌15分鐘。加入水(50ml)，過濾晶體。收率2.6g(97％)。Mp＝185.2-188.6℃。
方法J1-乙酰氨基-5，6，7，8-四氫萘在5℃下，將乙酸酐(20ml)加入到1-氨基-5，6，7，8-四氫萘(10g，68mmol)、乙酸鈉(20g，245mmol)與水(100ml)的混合物中。將混合物在室溫下攪拌15分鐘。在冰上冷卻混合物達1小時，然后過濾。晶體用水洗滌。收率13.0g(100％)。
方法K5-(4-氯苯基)-1，4，7，8，9，10-六氫吡啶并-8-甲基[4，3-f]喹喔啉-2，3-二酮鹽酸鹽(化合物K-1)將4-氯苯基)-7，8-二氨基-1-甲基-1，2，3，4-四氫異喹啉(1.44g，5.0mmol)、草酸二水合物(2.0g，15.8mmol)與鹽酸(30ml，4M)的混合物在回流下攪拌2小時。過濾結晶性沉淀。收率1.27g，67％。Mp＞250℃。
方法L8-甲基-5-(4-(N，N-二甲基氨磺?；?苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3，2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-O-((3-甲氧基-5-甲基-異噁唑-4-基)甲基)肟甲磺酸鹽(化合物L-1)將8-甲基-5-(4-(N，N-二甲基氨磺酰基)苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3，2-h]異喹啉-2，3-二酮(0.79g，2.0mmol)、4-(氨基-氧基-甲基)-3-甲氧基-5-甲基異噁唑(0.63g，2.67mmol)與乙醇(40ml)的混合物在回流下攪拌2小時。加入氨水，混合物用二氯甲烷萃取。
混合物經(jīng)過硅膠柱色譜純化，使用二氯甲烷∶甲醇∶濃氨(89∶10∶1)的混合物作為洗脫劑。將粗堿與甲磺酸的異丙醇溶液(5ml，0.1M)合并。過濾分離產(chǎn)物，為黃色晶體。收率0.25g(20％)。Mp 104℃。
方法M7-乙基-5-(苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-甲基肟鹽酸鹽(化合物M-1)將7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮(110mg，0.38mmol)、鹽酸甲氧基胺(90mg，1.1mmol)與乙醇(10ml，99％)的混合物在室溫下攪拌15分鐘。蒸發(fā)混合物至5ml。過濾分離所沉淀的產(chǎn)物。收率50mg，37％。Mp＞300℃。
7-乙基-5-(4-氯苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-甲基肟鹽酸鹽(化合物M-2)按照方法M制備。Mp 245℃分解。
方法Nα-鄰苯二甲酰亞氨基氧基-γ-丁內(nèi)酯鹽酸鹽向α-溴-γ-丁內(nèi)酯(3.0ml，36mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液中加入N-羥基鄰苯二甲酰胺(4.6g，28mmol)，然后加入三乙胺(7.7ml，56mmol)。在室溫下攪拌4小時后，將反應液過濾，用油泵蒸發(fā)至干。加入鹽酸(1M，28ml)和水(20ml)。濾出沉淀，用水洗滌。在空氣中干燥，得到7.1g米色晶體。
α-氨基氧基-γ-丁內(nèi)酯鹽酸鹽在回流下，將α-鄰苯二甲酰亞氨基氧基-γ-丁內(nèi)酯(1.0g，4mmol)加入到鹽酸(1M，10ml)中。在回流下5分鐘后，將反應液在冰浴上冷卻，過濾。將濾液蒸發(fā)至于。加入甲苯，共沸蒸餾除去殘余的水。得到0.75g所需物質(zhì)。
5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(3-(2-氧代)四氫呋喃基)肟(化合物N-1)向加熱至回流的5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮(1.06g，2.7mmol)的甲醇(30ml)溶液中加入α-氨基氧基-γ-丁內(nèi)酯(0.75g，4mmol)的熱甲醇(10ml)溶液。沉淀出黃色晶體。將反應液在回流下加熱另外15分鐘，冷卻至室溫。濾出產(chǎn)物，用冷甲醇洗滌，得到5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(3-(2-氧代)四氫呋喃基)肟。Mp280-282℃。
方法O5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-1)將5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(3-(2-氧代)四氫呋喃基)肟(0.75g)在水(25ml)、乙醇(5ml，96％)和1N NaOH(含水)中、在80℃下攪拌30分鐘，NaOH的量使pH在12左右。反應混合物用鹽酸酸化，沉淀出產(chǎn)物。Mp 154.5℃。
下列化合物可以按照方法O制備5-(5-氯吡啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-2)5-(6-氯吡啶-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-3)5-(5-氯嘧啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-4)5-(2-氯嘧啶-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3，2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-5)5-(6-氯噠嗪-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-6)5-(5-氯吡嗪-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-7)5-(5-氯噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-8)5-(5-氯-1，1-二氧基-噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-9)5-(5-氯噻唑-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-10)5-(2-氯噻唑-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟(化合物O-11)實施例2分化PC12細胞在無血清培養(yǎng)基中的存活在本實驗中，在分化為神經(jīng)元樣表型之后評估化合物對喪失其他存活因素的嗜鉻細胞瘤細胞系PC12存活的保護作用。
方法將細胞接種在涂有膠原的96孔平皿內(nèi)的DMEM中，細胞密度為8,000/cm2，DMEM含有7.5％胎牛血清(FCS)、7.5％供體馬血清(DHS)和2nM NGF，培養(yǎng)6天。然后將培養(yǎng)基變?yōu)椴缓宓腄MEM，其中補充有所示濃度的化合物。作為陽性對照，平行的孔接受無血清DMEM，不加入載體或3nM NGF。
保溫4天后，用MTS(3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺酰基)-2H-四唑鎓)評價細胞活力，它被有代謝活性的細胞所還原。數(shù)據(jù)以用3nM NGF所見到的應答的％表示，關于平行無血清培養(yǎng)物中殘余的MTS還原活性(NGF對照的％)進行校正。
本實驗結果列在下表1中。
表1對分化PC12細胞在無血清培養(yǎng)基中存活的作用(3nM NGF的％)

表1顯示化合物G-1、化合物G-2和化合物G-3對PC12細胞在無血清培養(yǎng)基中存活的作用，測量活力作為MTS的還原作用。所有三種化合物對無血清培養(yǎng)基中的PC12細胞顯示劑量依賴性解救作用。在5-10μM濃度下見到化合物的最大存活作用，相當于3nM NGF作用的70-75％。
實施例3對PC12細胞軸突長出的刺激作用在本實驗中，評估化合物強化NGF-誘導PC12細胞軸突長出的能力。
方法將PC12細胞接種在涂有膠原的組織培養(yǎng)平皿內(nèi)的DMEM中，細胞密度為15,000/cm2，DMEM含有7.5％FCS和7.5％DHS。第二天，將培養(yǎng)基變?yōu)檠a充有NS化合物的培養(yǎng)基，含有或者不含NGF。
改變培養(yǎng)基兩天后，將細胞固定在4％低聚甲醛中，對神經(jīng)絲染色。在含4％低聚甲醛的PBS中保溫，然后在10％DHS的存在下滲透在0.05％Triton-X100中，以阻滯非特異性結合部位，使細胞固定在組織培養(yǎng)平皿內(nèi)。洗滌后，將平皿與按1∶200稀釋在0.05％Triton-X100/10％DHS中的、來自Boehringer的抗神經(jīng)絲(NF)抗體(RT97克隆體)保溫，然后與按1∶200稀釋的、生物素基化抗小鼠免疫球蛋白RPN1001(Amersham)保溫。使用ABC-配合物/HRP試劑盒K0355(DAKO)和3，3-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽(DAB)作為底物對NF-免疫反應性細胞進行染色。
利用公平的2D立體學(與Olympus BH-2顯微鏡連接的CAST-柵格系統(tǒng))進行每孔總細胞數(shù)以及總軸突長度估計。
本實驗結果列在圖1中。從該圖可以明顯看出，單獨的化合物G-1(1和3μM)對PC12細胞軸突長出顯示一定作用，并且顯著強化NGF-誘導的軸突長出。
實施例4胚胎大鼠多巴胺能神經(jīng)元的存活在本實驗中，評估化合物G-1對大鼠E14腹側中腦(VM)離體培養(yǎng)物多巴胺能神經(jīng)元存活的作用。
方法在無菌條件下分離胚胎大鼠腦(Wistar；E14)，置于含有葡萄糖(6.5mg/ml)的冷Gey氏平衡鹽溶液(GIBCO)中。
切取腹側中腦，切成小的組織切片，置于補充有B27的Neurobasal培養(yǎng)基中，小心地通過80gm Nitex濾器。利用血細胞計數(shù)器統(tǒng)計細胞，置于6孔多皿內(nèi)，密度大約為2.0×106細胞/孔。培養(yǎng)皿預先涂有聚-D-賴氨酸。
1小時后，除去培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基(1.5ml/孔)。使一組培養(yǎng)物長期受到1μM濃度化合物G-1的處理。未處理的培養(yǎng)物充當對照。每隔一天改變培養(yǎng)基，在任何階段都不使用抗有絲分裂劑和抗生素。
培養(yǎng)7天后，對培養(yǎng)物的酪氨酸羥化酶(TH)進行免疫染色。簡而言之，將細胞在含有1％Triton X-100的0.05M Tris-緩沖鹽水(TBS，pH 7.4)中洗滌3×15分鐘，與10％胎牛血清(FBS，Life Technologies)在TBS中保溫30分鐘。然后將細胞與按1∶600稀釋在含10％FBS的TBS中的單克隆小鼠抗-TH抗體(Boehringer Mannheim)在4℃下保溫24小時。在含1％Triton-X100的TBS中清洗后，將細胞與按1∶200稀釋在含10％FBS的TBS中的生物素基化抗小鼠IgG抗體(Amersham)保溫60分鐘。然后將細胞在含1％Triton-X100的TBS中洗滌(3×15分鐘)后，與按1∶200稀釋在含10％FBS的TBS中的抗生蛋白鏈菌素-過氧化物酶(Dako)保溫60分鐘。在TBS中洗滌(3×15分鐘)后，用含有0.05％3，3-二氨基聯(lián)苯胺(Sigma)和0.01％H2O2的TBS處理，使所結合的抗體可見。手工統(tǒng)計TH-免疫反應性(ir)細胞。
本實驗的結果列在圖2中。從該圖可以看出TH-免疫反應性細胞在用1μM化合物G-1處理的培養(yǎng)物中比未處理的對照培養(yǎng)物多81％(Mann-Whitney檢驗p＜0.016)，說明該化合物對大鼠這種神經(jīng)元群具有存活作用。
實施例5E28豬腹側中腦多巴胺能神經(jīng)元的存活在本實驗中，評估化合物G-1對豬E28腹側中腦器官型切片培養(yǎng)物多巴胺能神經(jīng)元存活的作用。
方法在無菌條件下從豬胚胎(E28)中分離腹側中腦(VM)，切成400μm切片，置于含有葡萄糖(6.5mg/ml)的冷Gey氏平衡鹽溶液(GIBCO)中。按照界面培養(yǎng)法培養(yǎng)組織切片，該方法最初是由Stoppini等開發(fā)的[L.Stoppini，P.A.Buchs，D.Muller A simple method fororganotypic cultures of nervous tissue；J.Neurosci Methods(神經(jīng)科學方法雜志)1991 37 173-182]。
簡而言之，將切片放置在半多孔膜上(Millipore，0.3μm；4切片/膜)，插入到6孔平皿(Costar)內(nèi)的含有血清的培養(yǎng)基(Gibco BRL)中。每孔含有1ml培養(yǎng)基(50％Optimem，25％馬血清，25％Hank氏平衡鹽溶液(均來自GIBCO))，培養(yǎng)基補充有D-葡萄糖，終濃度為25mM。
3天后，將培養(yǎng)基用所限定的無血清培養(yǎng)基(Neurobasal培養(yǎng)基，補充有B27，來自Life Technologies)代替。使培養(yǎng)物在5％CO236℃恒溫箱內(nèi)生長21天，然后如實施例4所述對切片的TH進行免疫染色。使一組切片培養(yǎng)物長期受到1μM濃度化合物G-1的處理。未處理的培養(yǎng)物充當對照。每周改變兩次培養(yǎng)基，在任何階段都不使用抗有絲分裂劑和抗生素。
利用Olympus C.A.S.T.柵格系統(tǒng)(1.10版；Olympus，Albertslund，Denmark)對編號的切片(以便實驗分析對樣本標記是“盲的”)進行TH-ir神經(jīng)元的量化，該系統(tǒng)由Olympus BX50顯微鏡和由計算機運行的x-y-z跨距馬達載物臺組成。描繪培養(yǎng)物切片的區(qū)域，隨機放置統(tǒng)計框架，以標記所要取樣的第一個區(qū)域。然后使框架有序移動經(jīng)過切片，統(tǒng)計TH-ir細胞。
本實驗的結果列在圖3中。從該圖可以看出TH-免疫反應性細胞在用1μM化合物G-1處理的培養(yǎng)物中比未處理的對照培養(yǎng)物多37％(Mann-Whitney檢驗p＜0.038)，說明該化合物對豬的這種神經(jīng)元群具有存活作用。
實施例6PC12細胞中的NGF信號轉導在本實驗中，評估化合物G-1對NGF-誘導ERK與Akt激酶磷酸化的作用。
方法將大約200,000個PC12細胞平板接種在24孔平皿內(nèi)的DMEM中，DMEM含有7.5％FCS和7.5％DHS，ON保溫。第二天，向細胞加入NGF和化合物G-1，保溫24小時，然后在2×Laemmli樣本緩沖液中收獲細胞。
在8-18％梯度SDS凝膠上電泳全部細胞溶解產(chǎn)物，使凝膠在PVDF膜上形成電印跡。使用小鼠抗-磷酸-p44/p42 MAP激酶E10 mAb(NewEngland Biolabs#9106)和HRP-聯(lián)的抗-小鼠抗體免疫檢測磷酸化的ERK1與ERK2。使用兔磷酸-特異性Akt(Ser473)抗體(New EnglandBiolabs#9271)和HRP-聯(lián)的抗-兔抗體免疫檢測磷酸化的Akt激酶。利用ECL系統(tǒng)(Amersham)通過化學發(fā)光檢測譜帶。
本實驗的結果列在圖4A和4B中。從這些圖可以見到μM濃度化合物G-1強化NGF-誘導的激酶(ERK與Akt激酶)磷酸化的能力，這種磷酸化對信號轉導來說具有重要意義。
實施例7沙土鼠瞬間普遍缺血在本實驗中，評估化合物G-2對瞬間普遍缺血動物模型的神經(jīng)保護作用。
方法將沙土鼠用氟烷麻醉，找出左右頸動脈，閉合4分鐘。使用加熱燈使動物體溫在手術前后保持正常。在手術期間，將沙土鼠放置在加熱墊上，控制體溫在37±0.5℃。在缺血發(fā)作后15分鐘和第二天，動物接受30mg/kg化合物G-2腹膜內(nèi)給藥。
四天后，將動物處死，取出腦，冷卻至-70℃。此后，將腦切成20μm厚的切片，選擇5-7片具有海馬組織的切片，用蘇木精-曙紅染色。
本實驗的結果列在圖5中。
根據(jù)海馬損傷的程度分為四組第1組CA1-層沒有損傷；第2組CA1-層部分損傷；第3組CA1-層完全損傷；第4組不僅CA1-層損傷。
左右半球得分之和為總的缺血得分。使用Kendallτ檢驗進行統(tǒng)計學評價。
從該圖可以看出，大多數(shù)(≈80％)未處理動物顯示海馬CA1-層有總體損傷。相反，見到多數(shù)(≈50％)在缺血發(fā)作后接受化合物G-2(2×30mg/kg ip.)的動物海馬神經(jīng)元沒有或僅有部分損傷。
實施例8對未分化PC12細胞CREB磷酸化的刺激作用環(huán)AMP-應答元件結合蛋白(CREB)是一種轉譯后活化的轉錄因子，已經(jīng)參與大量神經(jīng)元功能，包括細胞存活、分化和神經(jīng)傳遞。在本實驗中，評估化合物G-1對CREB磷酸化的作用。
方法將每孔大約7.5×105個PC12細胞平板接種在涂有膠原的6孔平皿內(nèi)的DMEM中，DMEM含有0.75％FCS和0.75％DHS，保溫48小時。然后使細胞在無血清DMEM中進一步饑餓2小時，再用所示化合物刺激5、10或20分鐘。在1x加熱的樣本緩沖液(2％SDS，400mM Tris，pH8.0，10mM DTT和0.25mM Na3VO4)中收獲細胞，在8-18％梯度SDS凝膠上電泳全部細胞溶解產(chǎn)物，使凝膠在PVDF膜上形成電印跡。
使用兔抗-磷酸-CREB(UpState Biotechnology#06-519)再用HRP-聯(lián)的抗-兔抗體(Amersham Life Science#NA 934)免疫檢測磷酸化的CREB。利用ECL系統(tǒng)(Amersham)通過化學發(fā)光檢測譜帶。
本實驗的結果列在圖6中。從該圖可以看出，在5至20分鐘時間點與未刺激的細胞以及用0.1nM NGF刺激的細胞相比，化合物G-1刺激CREB磷酸化。
5分鐘刺激后見到NGF與化合物G-1的加和作用(沒有顯示)。
權利要求
1.由通式(I)代表的化合物或其藥學上可接受的鹽， 其中，A代表式-C(NOR2)-或-NR2-CO-基團；R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、酰基、氧代-四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
2.權利要求1的化合物，它是通式(II)的靛紅衍生物或其藥學上可接受的鹽， 其中，R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；?、氧代-四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-；-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
3.權利要求2的靛紅衍生物，具有通式(III) 其中R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；⒀醮?四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；⑼榛?、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基。
4.權利要求3的靛紅衍生物，它是7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-甲基肟；5-(4-氯苯基)-7-甲基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3-肟；7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]二吡咯-2，3-二酮-3肟；7-甲基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮3-肟；7-乙基-5-苯基-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮-3-乙酰肟；7-乙基-5-(4-氯苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮-3-肟鹽酸鹽；7-乙基-5-(4-氯苯基)-1，6，7，8-四氫苯并[2，1-b3，4-c]-二吡咯-2，3-二酮-3-甲基肟；或其藥學上可接受的鹽。
5.權利要求2的靛紅衍生物，具有通式(IV)、(V)或(VI) 其中R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；?、氧代-四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；⑼榛?、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基。
6.權利要求5的式(IV)靛紅衍生物，它是5-[5-苯基-2-噻吩基]-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯吡啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(6-氯吡啶-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯嘧啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(2-氯嘧啶-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(6-氯噠嗪-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯吡嗪-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯-1，1-二氧基-噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(5-氯噻唑-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(2-氯噻唑-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-肟；5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(3-(2-氧代)四氫呋喃基)肟；5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯吡啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(6-氯吡啶-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯嘧啶-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(2-氯嘧啶-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(6-氯噠嗪-3-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯吡嗪-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)；5-(5-氯噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯-1，1-二氧基-噻吩-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(5-氯噻唑-2-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；5-(2-氯噻唑-5-基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]萘-2，3-二酮-3-O-(4-羥基丁酸-2-基)肟；或其藥學上可接受的鹽。
7.權利要求5的式(V)靛紅衍生物，它是5-(4-氯苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-溴苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-三氟甲氧基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-三氟甲基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-甲苯甲?；?-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-甲氧基苯基)-8-甲基-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-(4-(N，N-二甲基氨磺?；?苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-O-((3-甲氧基-5-甲基-異噁唑-4-基)甲基)肟；8-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-(4-硝基苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-(4-氟苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-乙酰基肟；8-甲基-5-(4-乙基苯甲?；?-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；8-乙?；?5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-(4-氯苯基)-8-甲磺?；?6，7，8，9-四氫-1-H-吡咯并[3.2-h]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；或其藥學上可接受的鹽。
8.權利要求5的式(VI)靛紅衍生物，它是7-甲基-5-(4-氯苯基)-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；5-苯基-7-甲基-6，7，8，9-四氫-1-甲基-吡咯并[3.2-f]異喹啉2，3-二酮-3-肟；7-甲基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；7-乙基-5-苯基-6，7，8，9-四氫-1H-吡咯并[3.2-f]異喹啉-2，3-二酮-3-肟；或其藥學上可接受的鹽。
9.權利要求1的化合物，它是通式(VII)的喹啉衍生物或其藥學上可接受的鹽， 其中，R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；?、氧代四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺?；?、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R6和R7一起構成稠合的5至7元環(huán)，由下列橋連的二價原子團之一組成(方向從R6至R7)-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-.-CH2-NR12-CH2-；-NR12-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-；-NR12-CH2-CH2-CH2-；-NR12-CH2-CH2-NR12-；-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-NR12-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-NR12-CH2-；-CH2-NR12-CH2-CH2-CH2-；-CH2-CH2-CH2-CH2-NR12-；或-NR12-CH2-CH2-CH2-CH2-；其中R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基；或者R6和R7彼此獨立地代表氫或甲基。
10.權利要求9的喹啉衍生物，具有通式(VIII) 其中R1代表氫或烷基；R2代表氫、烷基、?；?、氧代四氫呋喃基、異噁唑基-烷基或異噁唑基，該烷基可以可選地被一個或多個羥基或羧基取代，該異噁唑基可以可選地被一個或多個取代基取代，取代基選自由烷基或烷氧基組成的組；R5代表苯基、芐基、或5-或6-元單環(huán)雜環(huán)基，這些基團可以可選地被鹵素、CF3、-OCF3、NO2、氨基、氨基磺酰基、烷基、烷氧基、烷氧羰基或苯基取代一次或多次；R12代表氫、式-CH2CH2OH、-CO-CH3、-SO2-CH3基團或烷基。
12.權利要求10的喹啉衍生物，它是5-(4-氯苯基)-1，4，7，8，9，10-六氫吡啶并-8-甲基[4，3-f]喹喔啉-2，3-二酮；5-(4-硝基苯基)-1，4，7，8，9，10-六氫吡啶并-8-乙基[4，3-f]喹喔啉-2，3-二酮；或其藥學上可接受的鹽。
12.藥物組合物，包含治療學上有效量的根據(jù)權利要求1-11任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽以及至少一種藥學上可接受的載體或稀釋劑。
13.治療或減輕哺乳動物、包括人的疾病或障礙或疾患的方法，該疾病或障礙或疾患對神經(jīng)營養(yǎng)劑的活性有應答，該方法包含對有此需要的所述哺乳動物給以有效量的根據(jù)任意權利要求1-12的化合物或其藥學上可接受的鹽。
14.根據(jù)權利要求1-11任意一項的化合物或其藥學上可接受的鹽的用途，用于制備治療或減輕哺乳動物、包括人的疾病或障礙或疾患的藥物，該疾病或障礙或疾患對神經(jīng)營養(yǎng)劑的活性有應答。
15.根據(jù)權利要求14的用途，其中該疾病或障礙或疾患對神經(jīng)生長因子的活化或強化有應答。
16.根據(jù)權利要求14的用途，其中該疾病或障礙或疾患是外周神經(jīng)、髓質(zhì)、脊髓的創(chuàng)傷性損害、腦缺血性神經(jīng)元損傷、神經(jīng)病，包括外周神經(jīng)病。
17.根據(jù)權利要求14的用途，其中該疾病是神經(jīng)變性疾病。
18.根據(jù)權利要求17的用途，其中該神經(jīng)變性疾病是癡呆、阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷頓氏病、肌萎縮性側索硬化或眼的神經(jīng)變性疾病，包括黃斑變性、色素性視網(wǎng)膜炎、青光眼和類似疾病患者視網(wǎng)膜的光感受器喪失。
19.根據(jù)權利要求14的用途，用于預防與神經(jīng)變性疾病有聯(lián)系的變性改變。
20.根據(jù)權利要求19的用途，其中該神經(jīng)變性疾病是腦缺血性神經(jīng)元損傷、神經(jīng)病，尤其是外周神經(jīng)病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓氏病、帕金森氏病或肌萎縮性側索硬化。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的靛紅衍生物、包含本發(fā)明靛紅衍生物的藥物組合物、制備本發(fā)明靛紅衍生物的方法、它們在神經(jīng)變性疾病治療和損害與損傷神經(jīng)元再生或預防變性中的用途、神經(jīng)變性疾病的治療方法和損害與損傷神經(jīng)元的再生或預防變性方法。
文檔編號C07D209/60GK1395563SQ01804032
公開日2003年2月5日 申請日期2001年1月23日 優(yōu)先權日2000年1月24日
發(fā)明者M·戈羅恩伯格, D·彼得斯, A·莫勒 申請人:神經(jīng)研究公司