一種用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片的制作方法
【技術(shù)領域】
[0001]本實用新型屬于分子生物學領域，具體涉及一種用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片及用途。
【背景技術(shù)】
[0002]Singh于1988年建立了單細胞凝膠電泳技術(shù)(single cell gelelectrophoresis，SCGE)，即斷裂的DNA碎片在堿性或中性細胞裂解液的作用下，從DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)中釋放出來，在電泳時移向陽極呈彗星樣影像。它可以檢測到單個真核細胞中DNA單、雙鏈斷裂，堿性不穩(wěn)定性位點和DNA延遲修復位點。
[0003]目前絕大多數(shù)SCGE研究均是通過在顯微鏡下拍照記錄彗星圖像，進一步使用相關軟件分析彗星頭和尾的參數(shù)。載玻片上鋪膠是凝膠電泳成敗的關鍵，目前多用磨砂載玻片，這種方法需要三層膠依次鋪到載玻片上，每層膠制作完成后需要用蓋玻片壓平使其牢固結(jié)合載玻片或下層凝膠。每層膠凝固需要5-10分鐘，整個鋪膠需要30-60分鐘，浸入電泳緩沖液中仍然出現(xiàn)凝膠漂浮現(xiàn)象或滑落，使得操作十分繁瑣、費時，甚至導致實驗失敗。
【實用新型內(nèi)容】
[0004]為了解決現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片。
[0005]本實用新型的第一個目是避免凝膠浸入電泳緩沖液及后續(xù)沖洗過程中出現(xiàn)漂浮或滑落現(xiàn)象。
[0006]本實用新型的二個目的是簡化鋪膠的過程。
[0007]本實用新型的第三個目是避免載玻片用標記筆做的各種標記浸入電泳緩沖液及后續(xù)沖洗過程中模糊或消失。
[0008]為達到以上目的，本實用新型采用的技術(shù)方案是:為了防止凝膠后從載玻片上滑落，本實用新型提供一種用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片，所述的防脫載玻片包括:載玻片主體，凹槽，T型圓柱；所述凹槽位于所述載玻片主體上，所述T型圓柱位于所述凹槽的中心。
[0009]本實用新型所述的載玻片上設計兩個圓形的凹槽，加入凹槽中熔化后瓊脂糖液體，液面低于載玻片表面，進入電泳緩沖液的過程時不易漂浮。在凹槽中心點設計有圓柱，熔化后瓊脂糖液體凝固后可以包裹圓柱，同時圓柱設計成“T型”結(jié)構(gòu)，頂部的結(jié)構(gòu)可以防止凝膠漂浮后滑脫，采用以上技術(shù)方案可以將瓊脂糖凝膠有效固定到載玻片凹槽及圓柱上。
[0010]進一步本實用新型采用上述技術(shù)方案設計，不需依靠蓋玻片壓到熔化后瓊脂糖形成膠面，加入兩個圓形的凹槽的熔化后瓊脂糖液體依靠自身重量形成平整的膠面，本實用新型采用只需用滴加一層細胞溶液和凝膠按一定比例的混合物，使得鋪膠過程簡單，操作方便。
[0011]進一步，載玻片的一端刻有編號，避免后期用標記筆做的各種標記浸入電泳緩沖液及后續(xù)沖洗過程中模糊或消失，導致所觀察的樣品編號混亂。
【附圖說明】
[0012]圖1為本實用新型防脫載玻片的平面結(jié)構(gòu)示意圖；
[0013]圖2為本實用新型防脫載玻片的剖面結(jié)構(gòu)示意圖；
[0014]圖中所示:
[0015]1、載玻片主體，2、凹槽，3、T型圓柱，4、標記編號。
【具體實施方式】
[0016]下面結(jié)合附圖和實施例對本實用新型進行詳細的描述。
[0017]如圖1所示，為了避免凝膠浸入電泳緩沖液及后續(xù)沖洗過程中出現(xiàn)漂浮或滑落現(xiàn)象，本實用新型載玻片上主體I設計兩個圓形的凹槽2，凹槽直徑l-2cm，并在凹槽中心點設計有圓柱3，圓柱高度與凹槽的深度一致為1-1.5mm,圓柱設計成T型結(jié)構(gòu)，圓柱直徑
1.5_2mm，頂部長度 2-2.5mm,厚度 0.3-0.5mm。
[0018]鋪膠時需要將裝有PBS (磷酸鹽緩沖液)溶解瓊脂糖的錐形瓶加熱，等待溫度下降到所需溫度，滴到載玻片上冷卻后形成凝膠。本實用新型設計了兩個圓形的凹槽，加入熔化后瓊脂糖液體，液面低于載玻片表面，進行各種操作時外力不容易使得凹槽中的凝膠漂浮。同時在凹槽中心點設計有圓柱，熔化后瓊脂糖液體滴加到凹槽，確保液面覆蓋整個凹槽底面，且液面高度低于載玻片表面，這樣凝固后凝膠可以包裹圓柱，凹槽四周和圓柱的共同作用增加凝膠附著載玻片的力度。同時圓柱設計成“T型”結(jié)構(gòu)，頂部的結(jié)構(gòu)可以防止凝膠漂浮后通過圓柱滑脫，采用以上技術(shù)方案可以將瓊脂糖凝膠有效固定到載玻片凹槽及圓柱上，防止凝膠從載玻片上漂浮或滑落。
[0019]進一步本實用新型采用上述技術(shù)方案設計，不需依靠蓋玻片壓到熔化后瓊脂糖形成膠面，加入兩個圓形的凹槽的熔化后瓊脂糖液體依靠自身重量形成平整的膠面。傳統(tǒng)方法需要鋪三層膠，依靠第一層與磨砂載玻片牢固結(jié)合，中間膠含有細胞，上層再加一層膠，形成“三明治”樣的結(jié)構(gòu)。鋪膠過程需要依靠蓋玻片壓到熔化后瓊脂糖并在溫度降低后凝固形成膠面，然后小心抽掉蓋玻片，表面涂上礦物油，繼續(xù)相同的步驟制作第二、第三層膠。操作過程需要熟練并掌握一定的技巧，才能保證操作成功。本實用新型的防脫載玻片由于采用了凹槽結(jié)構(gòu)，“T型”圓柱等多重防止凝膠脫離載玻片措施，可以避免凝膠漂浮、滑落。所以采用本實用新型的防脫載玻片只需用滴加一層細胞溶液和凝膠按一定比例的混合物，使得鋪膠過程簡單，操作方便，成功率高。
[0020]本實用新型載玻片的一端刻有編號4，遇到中性，酸性，堿性液體，水溶性，脂溶性液體均不會破壞刻有的標記編號。標號從001-999，在一次或一批實驗過程中樣品基本不會重復?？毯玫木幪柋苊夂笃谟脴擞浌P做的各種標記浸入電泳緩沖液或后期沖洗過程中模糊或消失，導致所觀察的樣品編號標記混亂。同時標記的編號為雕刻從上向下凹進去，凝膠所含的細胞需要染色后在暗室中進行熒光顯微鏡觀察，這時可以預先在標記編號上滴加少許熒光染料，暗室中觀察凝膠細胞的圖像時可以方便記錄樣品的編號。
[0021]顯然，本領域的技術(shù)人員可以對本實用新型進行各種改動和變型而不脫離本實用新型的精神和范圍。這樣，倘若對本實用新型的這些修改和變型屬于本實用新型權(quán)利要求及其同等技術(shù)的范圍之內(nèi)，則本實用新型也意圖包含這些改動和變型在內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.一種用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片，其特征在于:所述的防脫載玻片包括:載玻片主體(1)，凹槽(2)，T型圓柱(3);所述凹槽位于所述載玻片主體上，所述T型圓柱位于所述凹槽的中心。2.如權(quán)利要求1所述的用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片，其特征在于:所述凹槽有兩個，每個凹槽直徑l_2cm，所述圓柱高度與凹槽的深度一致為1-1.5mm，圓柱直徑1.5_2mm，頂部長度 2-2.5mm,厚度 0.3-0.5mm。3.如權(quán)利要求1或2所述的用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片，其特征在于:所述載玻片的一端刻有標記編號(4)。
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于單細胞凝膠電泳的防脫載玻片，所述的防脫載玻片包括：載玻片主體，凹槽，T型圓柱；所述凹槽位于所述載玻片主體上，所述T型圓柱位于所述凹槽的中心。所述載玻片的一端刻有標記編號。本實用新型所述的載玻片上設計兩個圓形的凹槽，加入凹槽中熔化后瓊脂糖液體，液面低于載玻片表面，進入電泳緩沖液的過程時不易漂浮。在凹槽中心點設計有圓柱，熔化后瓊脂糖液體凝固后可以包裹圓柱，同時圓柱設計成“T型”結(jié)構(gòu)，頂部的結(jié)構(gòu)可以防止凝膠漂浮后滑脫，采用本實用新型可以將瓊脂糖凝膠有效固定到載玻片凹槽及圓柱上。
【IPC分類】G02B21/34
【公開號】CN204855929
【申請?zhí)枴緾N201520454101
【發(fā)明人】劉建功, 黨旭紅, 董娟聰, 張慧芳, 張睿鳳, 張忠新, 劉紅艷, 段志凱
【申請人】中國輻射防護研究院
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年6月29日