專利名稱：多道熒光濾光器立方盒及熒光顯微成像系統(tǒng)的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種熒光顯微成像裝置，特別涉及到一種熒光顯微成像裝置中能夠對激發(fā)光、發(fā)射光等進行頻段修改的熒光濾光器立方盒裝置以及包含該裝置的多道熒光顯微成像裝置。
背景技術：
熒光顯微成像系統(tǒng)是目前生物醫(yī)學研究、臨床醫(yī)學研究以及制藥業(yè)研究的基礎工具。激發(fā)熒光成像技術是在分子水平上對基因、蛋白、藥物與細胞相互作用過程進行觀察的最基本技術，在該成像技術中，是對生物樣本中所感興趣的目標物質及其隨空間的分布進行觀察，在生物熒光觀察系統(tǒng)或成像系統(tǒng)，一般需要對某種目標物質(如疾病標志物)的一個或幾個特征波段進行成像。在現(xiàn)代分子生物實驗中，為了對感興趣的目標物質進行對比度高、特異性高、或者說靈敏度高的觀察，常常使用具有特異標定性能的熒光標志物，該熒光標定物與感興趣的目標物質的結合，使得結合產物在一定頻率的激發(fā)光照射下產生特定的波長一般長于激光光波長的熒光。常見熒光標定物質所對應的激發(fā)光波長、受激熒光波長如表一所不，常見突光發(fā)射團的激發(fā)波長分布為320到750納米,所發(fā)射的突光波長分布范圍為380納米到780納米。表一
權利要求
1.一種多道熒光濾光器立方盒，包括有盒體框架和固定于盒體框架上的激發(fā)濾光片組、發(fā)射濾光片組、二相色鏡或分光鏡(19),激發(fā)濾光片(17)與發(fā)射濾光片(18)分別固定于立方盒(9)相鄰的兩個垂直平面上，二相色鏡或分光鏡(19)位于激發(fā)濾光片(17)與發(fā)射濾光片(18)之間45度的夾角面上，在立方盒(9)與發(fā)射濾光片(18)的相對面上開有孔(50)，其特征在于所述的激發(fā)濾光片組由至少兩片激發(fā)濾光片(17)等距離鑲嵌在底襯(51)上，底襯(51)的兩端固定于激發(fā)濾光片轉輪(29)上，所述的發(fā)射濾光片組由至少兩片發(fā)射濾光片(18)等距離鑲嵌在底襯(52)上，底襯(52)的兩端固定于發(fā)射濾光片轉輪(32)上。
2.根據(jù)權利要求I所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的固定激發(fā)濾光片(17)的底襯(51)上下兩端邊緣開有定位齒孔(53)，在立方盒上固定有與定位齒孔(53)相配合的定位裝置。
3.根據(jù)權利要求I所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的固定發(fā)射濾光片(18)的底襯上下兩端邊緣開有定位齒孔，在立方盒上固定有與定位齒孔相配合的定位>j-U ρ α裝直。
4.根據(jù)權利要求I所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的二相色鏡或分光鏡是二相色鏡組或分光鏡組，由至少兩片二相色鏡濾光片或分光鏡(19)等距離鑲嵌在底襯(21)上，底襯的兩端固定于轉輪(35)上。
5.根據(jù)權利要求4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的固定二相色鏡(19)的底襯(21)上下兩端邊緣開有定位齒孔，在立方盒上固定有與定位齒孔相配合的定位裝置。
6.根據(jù)權利要求I或4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的襯底是整塊柔軟可以重復卷曲的材料，激發(fā)濾光片(17)、發(fā)射濾光片(18)和二相色鏡濾光片(19)鑲嵌在柔軟襯底的表面，底襯背面有高于激發(fā)濾光片(17)、發(fā)射濾光片(18)、二相色鏡濾光片或分光鏡(19)的支撐凸起物(64)。
7.根據(jù)權利要求I或4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的襯底是由多塊帶有定位齒孔的材料的組合，相鄰襯底之間由柔軟帶有定位齒孔的材料連接，激發(fā)濾光片(17)、發(fā)射濾光片(18)和二相色鏡或分光鏡(19)鑲嵌在柔軟襯底的表面，底襯背面有高于激發(fā)濾光片(17)、發(fā)射濾光片(18)、二相色鏡濾光片或分光鏡(19)的支撐凸起物(64)。
8.根據(jù)權利要求I或4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的激發(fā)濾光片(17)兩端的激發(fā)濾光片轉輪(29)、發(fā)射濾光片(18)兩端的發(fā)射濾光片轉輪(32)和二相色鏡或分光鏡(19)兩端的轉輪(35)分別與電機轉動軸相連。
9.根據(jù)權利要求I或4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于激發(fā)濾光片組帶有計算機可以自動識別的標定相應濾片的標記41;發(fā)射濾光片組帶有計算機可以自動識別的標定相應濾片的標記；二相色鏡或分光鏡組帶有計算機可以自動識別的標定相應濾片/分光鏡的標記。
10.根據(jù)權利要求9所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的標記為條形碼或磁條。
11.根據(jù)權利要求I所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的發(fā)射濾光片組中包含一個空白透通孔，允許發(fā)射光源的所有頻率成分未經(jīng)任何修改地通過。
12.根據(jù)權利要求4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的二相色鏡或分光鏡組包含一個空白透通孔，不對任何入射的激發(fā)光進行反射，只是允許從樣品來的光全部透過。
13.根據(jù)權利要求I所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的激發(fā)濾光片組包含的濾片為窄帶帶通濾片，濾片組的峰值透過濾覆蓋300納米到750納米，單個激發(fā)濾片直徑在10毫米到40毫米之間，一般選擇25毫米；在短波段即λ ( 600納米，單個激發(fā)濾光片(17)的峰值透過率中心波長是逐漸遞增的，一個激發(fā)濾光片與相鄰激發(fā)濾光片(17)的峰值透過率中心波長的差值的絕對值大于或等于5納米，濾片組包含2-46個激發(fā)濾片(17)。
14.根據(jù)權利要求I所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的發(fā)射濾光片組包含的濾片為窄帶帶通濾片，濾片組的峰值透過濾覆蓋380納米到780納米，單個發(fā)射濾片直徑在10毫米到40毫米之間，一般選擇25毫米；在短波段即λ ( 600納米，單個發(fā)射濾片(18)的峰值透過率中心波長是逐漸遞增的，一個發(fā)射濾片與相鄰發(fā)射濾片的峰值透過率中心波長的差值的絕對值大于或等于5納米，發(fā)射濾片組包含2-41個發(fā)射濾片(18)。
15.根據(jù)權利要求4所述的一種多道熒光濾光器立方盒，其特征在于所述的分光鏡組包含的分光鏡為長波通過短波反射分光鏡，二相色相鏡組或分光鏡組發(fā)射與透過分界波長覆蓋300納米到750納米，單個分光鏡片邊長在10毫米到40毫米之間，一般選擇26毫米X 36毫米矩形分光鏡；在短波段即λ < 600納米，單個分光鏡片(19)的發(fā)射與透過分界波長是逐漸遞增的，一個分光鏡片(19)與相鄰分光鏡片(19)發(fā)射與透過分界波長的差值的絕對值大于或等于5納米,分光鏡組包含高達2-46個分光鏡片。
16.一種利用如權利要求1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15所述的多道熒光濾光器立方盒制作的多道熒光顯微成像裝置，它包含顯微成像裝置、多道熒光濾光器立方盒、激發(fā)光系統(tǒng)以及控制系統(tǒng)，其特征在于控制系統(tǒng)包括有計算機(13)，計算機內存有控制激發(fā)濾片運動、發(fā)射濾片運動和二相色鏡或分光鏡運動的軟件，控制系統(tǒng)與多道熒光濾光器立方盒(9)相連，控制激發(fā)濾片運動、發(fā)射濾片運動、二相色鏡或分光鏡運動、識別激發(fā)濾片組標記(41)、識別發(fā)射濾片組標記、識別二相色鏡組標記；控制系統(tǒng)與顯微成像裝置相連，控制其攝像系統(tǒng)(11)、載物臺(6 )、物鏡轉換器(8 )。
全文摘要
一種多道熒光濾光器立方盒,包括包含激發(fā)濾光片組、發(fā)射濾光片組、二相色鏡或分光鏡，激發(fā)濾光片與發(fā)射濾光片分別固定于立方盒相鄰的兩個垂直平面上，二相色鏡或分光鏡位于激發(fā)濾光片與發(fā)射濾光片之間45度的夾角面上，在立方盒與發(fā)射濾光片的相對面上開有孔，其要點在于所述的激發(fā)濾光片組由至少兩片激發(fā)濾光片等距離鑲嵌在底襯上,底襯的兩端固定于轉輪上，所述的發(fā)射濾光片組由至少兩片發(fā)射濾光片等距離鑲嵌在底襯上，底襯的兩端固定于轉輪上。本發(fā)明可以在較小體積內很容易實現(xiàn)大量的濾片的存儲，能夠對多于10種熒光團進行觀察，使用多道熒光濾光器立方盒的熒光成像設備可以既對空間高分辨率成像，還可以對光譜高分辨率成像。
文檔編號G02B5/20GK102621119SQ201210094680
公開日2012年8月1日 申請日期2012年4月1日 優(yōu)先權日2012年4月1日
發(fā)明者孔令華 申請人:孔令華