傣藥腎葉山螞蝗在制備治療男性勃起功能障礙的藥物或保健食品中的用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了傣藥腎葉山螞蝗在制備治療男性勃起功能障礙的藥物或保健食品中的用途。本發(fā)明還提供了新的腎葉山螞蝗的提取物。本發(fā)明腎葉山螞蝗及其提取物可以有效治療勃起功能障礙，為臨床治療勃起功能障礙提供了一種新的選擇。
【專利說明】
傣藥腎葉山螞蝗在制備治療男性勃起功能障礙的藥物或保健 食品中的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及傣藥腎葉山螞蝗在制備男性勃起功能障礙藥物或保健品種的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 勃起功能障礙(ErectiIe Dysfunction，ED)是指陰莖不能持續(xù)獲得或維持充分的 勃起以完成滿意的性交，持續(xù)至少6個月以上。ED是男性常見的性功能障礙，主要影響40歲 以上的男性，其患病率隨年齡的增長而增高。據(jù)研究，40~70歲男子中有52%患有不同程度 的勃起功能障礙。近年來，隨著生活、工作、心理等各方面的壓力逐步加大，的患病率呈現(xiàn) 不斷增高并出現(xiàn)年輕化的趨勢。1998年正式上市的西地那非（Si Idenafil)為選擇性5型磷 酸二酯酶抑制劑(PDE5-Is)，被認(rèn)為是第一個可有效治療ED的口服藥物，目前，PDE5-Is已經(jīng) 成為治療的最主要的藥物。目前用于臨床治療ED的其它方式還包括:性心理治療，改善生 活方式，陰莖海綿體注射治療，睪酮替代治療，負(fù)壓縮窄裝置和手術(shù)治療等。但上述治療方 式均具有其局限性。需要尋找其他治療的藥物。
[0003] 傣藥腎葉山螞幢是豆科植物腎葉山螞幢[Desmodiumrenif 0 I ium( Linn .) Schindler]的干燥根。腎葉山螞蝗為多年生匍匐性草本，廣泛分布于亞洲熱帶地區(qū)，包括我 國的安徽、浙江、江西、福建、廣東、廣西、四川、貴州、云南、臺灣等地，澳洲熱帶亦有分布。它 具有清熱解熱、止咳化痰、通氣止痛、利水退黃、補(bǔ)氣增性的功效，可用于治療熱季感冒、咽 喉腫痛、咳嗽喘息、膽汁病出現(xiàn)的黃疸、體弱多病等。未見傣藥腎葉山螞蝗治療的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的技術(shù)方案是提供了腎葉山螞蝗及其提取物在制備治療勃起功能障礙的 藥物或保健食品中的用途。
[0005] 其中，所述的腎葉山螞幢是豆科植物腎葉山螞幢Desmodiumrenifolium(Linn·) Schindler的干燥根。
[0006] 其中，所述的腎葉山螞蝗的提取物為水提取物或者醇提取物。
[0007] 其中，所述的腎葉山螞蝗的水提取物按照如下方法制備:取腎葉山螞蝗，加5~9倍 量的水浸泡1~2h，煮沸30~60min，過濾，藥渣加3~7倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸25~50min，過 濾，再重復(fù)1~2次，合并濾液，濃縮，得水提物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:取腎葉山螞蝗， 加7倍量的水浸泡1~2h，煮沸45min，過濾，藥渣加5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸35min，過濾，再重 復(fù)1次，合并3次濾液，濃縮，得水提物。
[0008] 其中，所述腎葉山螞蝗的醇提取物按照如下方法制備：取腎葉山螞蝗，用90-95% 乙醇回流提取，得乙醇提取物。優(yōu)選地，所述腎葉山螞蝗的醇提取物按照如下方法制備：取 腎葉山螞蝗，加6~10倍量的95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)2~4次，每次30~60min，合 并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物；進(jìn)一步優(yōu)選地，按照如下方法制備：加8倍量的 95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)3次，每次45min，合并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提 取物。
[0009] 其中，所述藥物或保健食品是提高血清睪丸酮含量和/或降低血清雌二醇含量的 藥物或保健食品。
[0010] 本發(fā)明還提供了一種腎葉山螞蝗水提物，它是按照如下方法制備的：取腎葉山螞 蝗，加7倍量的水浸泡l_2h，煮沸45min，過濾，藥渣加5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸35min，過濾，再 重復(fù)1次，合并3次濾液，濃縮，得水提物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:取腎葉山螞蝗，加5~9 倍量的水浸泡l_2h，煮沸30~60min，過濾，藥渣加3~7倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸25~50min，過 濾，再重復(fù)1~2次，合并濾液，濃縮，得水提物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:取腎葉山螞蝗， 加5-9倍量的水浸泡1-2h，煮沸45min，過濾，藥渣加5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸35min，過濾，再 重復(fù)1次，合并3次濾液，濃縮，得水提物。
[0011] 本發(fā)明還提供了一種腎葉山螞蝗醇提物，它是按照如下方法制備的：取腎葉山螞 蝗，用90-95%乙醇回流提取，得乙醇提取物。優(yōu)選地，它是按照如下方法制備的：取腎葉山 螞蝗，加6~10倍量的95 %乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)2~4次，每次30~60min，合并提取 液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物;進(jìn)一步優(yōu)選地，按照如下方法制備:加8倍量的95 %乙醇 進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)3次，每次45min，合并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物。
[0012] 本發(fā)明腎葉山螞蝗及其提取物可以有效治療勃起功能障礙，且其本身無毒性，可 以制成藥物或保健食品中，為臨床治療勃起功能障礙提供了一種新的選擇。
[0013] 顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離 本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
[0014] 以下通過實(shí)施例形式的【具體實(shí)施方式】，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說 明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容 所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例1本發(fā)明水提物的制備方法
[0016]取腎葉山螞蝗，加5倍量的水浸泡1~2h，煮沸30，過濾，藥渣加3倍量水繼續(xù)煎煮， 煮沸25min，過濾，再重復(fù)2次，合并濾液，濃縮，得水提物。
[0017]實(shí)施例2本發(fā)明水提物的制備方法
[0018] 取腎葉山螞蝗，加9倍量的水浸泡1~2h，煮沸60min，過濾，藥渣加7倍量水繼續(xù)煎 煮，煮沸50min，過濾，再重復(fù)1次，合并濾液，濃縮，得水提物。
[0019] 實(shí)施例3本發(fā)明水提物的制備方法
[0020] 腎葉山螞蝗，加6倍量的95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)2次，每次30min，合并提 取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物。
[0021 ]實(shí)施例4本發(fā)明水提物的制備方法
[0022]腎葉山螞蝗，加10倍量的95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)4次，每次60min，合并 提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物。
[0023]實(shí)施例5本發(fā)明水提物的制備方法
[0024]腎葉山螞蝗，加8倍量90 %乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)3次，每次45min，合并提取 液趁熱抽濾，濾液置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮揮去大部分的乙醇，至聞不到乙醇味，得乙醇提取 物。
[0025] 以下通過實(shí)驗例的方式來說明本發(fā)明的有益效果：
[0026] 實(shí)驗例1傣藥腎葉山螞蝗對急勃起功能障礙的治療作用
[0027] 1.材料
[0028] 1.1動物
[0029] SPF級SD大鼠，體重200g± 20g，120只，雌雄各半，購自成都達(dá)碩實(shí)驗動物有限公 司，合格證號：SCXK (川）2013-24。
[0030] 1.2藥物和試劑
[0031] 傣藥腎葉山螞蝗（由云南省高校民族醫(yī)藥現(xiàn)代研究重點(diǎn)實(shí)驗室提供)分為a.醇提： 加8倍量95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)3次，每次45min，合并提取液趁熱抽濾，濾液置旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮揮去大部分的乙醇，至聞不到乙醇味，即得乙醇提取液，備用;b.水提:加相 當(dāng)于藥材量7倍的冷水浸泡l_2h，煮沸45min，過濾。藥渣加5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸35min，過 濾，再重復(fù)1次。合并3次濾液濃縮，備用；
[0032]龜鹿補(bǔ)腎片（國藥準(zhǔn)字Z20080217廣東新寶制藥有限公司）；萬艾可(枸櫞酸西地那 非片，簡稱西地那非）；
[0033] 睪酮(T)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，伊萊瑞特生物科技有限公司，產(chǎn)品貨號:E-EL-0072c;雌二醇(E2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，伊萊瑞特生物科技有限公司，產(chǎn)品貨號:E-EL-0065c〇
[0034] 1.3儀器
[0035]旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(BUCHI瑞士公司）；
[0036]臺式高速冷凍離心機(jī)(美國賽默飛世爾Primo R);
[0037] 雙門立式超低溫冰箱(美國賽默飛世爾REVCO Ux300);
[0038]全波長掃描式多功能酶標(biāo)儀(VaricsKar)
[0039] 2.方法
[0040] 2.1雌性大鼠的準(zhǔn)備
[0041]為消除雌性大鼠在進(jìn)行交配實(shí)驗時動情期的不同，進(jìn)行雙側(cè)卵巢切除術(shù)，并同時 注射雌激素。方法為:雌性大鼠在10%水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉下，背部朝上固定于鼠板 上，在大鼠最末肋骨下，腋中線和距脊柱外側(cè)約2cm交叉處剪除長毛，切開皮膚和背肌，有乳 白色發(fā)亮的脂肪團(tuán)，其中便包埋著卵巢。用小鑷子輕夾脂肪團(tuán)，拉出切口外，分離脂肪，即見 粉紅色卵巢。取一絲線將卵巢下輸卵管及脂肪一并結(jié)扎，剪下卵巢，將子宮角送回腹腔，然 后摘取對側(cè)卵巢，術(shù)后肌注青霉素20萬U/kg抗感染治療3天，常規(guī)飼養(yǎng)，1個月后進(jìn)行交配試 驗，實(shí)驗前48小時皮下注射苯甲酸雌二醇0.2mg/只，4小時前再次經(jīng)皮下注射黃體酮0.4mg/ 只。
[0042] 2.2大鼠給藥及交配實(shí)驗
[0043]選擇雄性性成熟大鼠正常飼養(yǎng)，隨機(jī)分為空白組、龜鹿補(bǔ)腎片組(0.93g生藥/kg)、 水提取物組高劑量組（13g生藥/kg)、水提取物低劑量組（4.05g生藥/kg)、乙醇提取物組 (13g生藥/kg)、萬艾可組(0.13g/kg)，共六組。龜鹿補(bǔ)腎片組、水提高劑量及醇提組給藥量 按大鼠體表面積折算等效量的3倍;水提低劑量組按大鼠體表面積折算的等效量計算，每組 大鼠除萬艾可組于試驗前Ih灌胃給藥外，其余每天灌胃兩次，早晚各一次，灌胃容積均為 lml/lOOg，各組均灌胃培養(yǎng)28天，每日飼料與水正常供給，每周按時稱量大鼠體重保證其發(fā) 育正常。灌胃結(jié)束后，使雌性大鼠動情期相同，實(shí)驗于晚上7-11時進(jìn)行，將雄性大鼠單獨(dú)放 入籠中5min，使其適應(yīng)環(huán)境，然后每籠加入1只雌鼠，觀察記錄捕捉潛伏期（自雌鼠投入至雄 鼠第一次捕捉雌鼠的時間）、20mi η內(nèi)雄鼠捕捉雌鼠的次數(shù)、交配潛伏期（自雌鼠投入至雄鼠 第1次與雌鼠交配的時間）、20min內(nèi)交配次數(shù)，
[0044] 2.3性激素檢測
[0045] 待測定行為學(xué)指標(biāo)結(jié)束后，雄性大鼠用10 %水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主動脈取 血，3000r/min，離心15分鐘，取上清液，-20 °C分裝冷藏，待測定血清睪丸酮，雌二醇含量，睪 酮(T)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒測定睪酮含量，雌二醇(E2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒測定 雌二醇。
[0046] 3.結(jié)果
[0047]實(shí)驗結(jié)果用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計，計量資料用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，樣本比較 用t檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義，則說明傣藥腎葉山螞蝗對大鼠性行為及性激素影響具 有統(tǒng)計學(xué)意義。
[0048] 3.1傣藥腎葉山螞蝗對大鼠性行為的影響
[0049] 結(jié)果見表1:
[0050 ]表1傣藥腎葉山螞幢對大鼠性行為的影響(n = I Ox 土 s)
[0052] 注：與空白組比較*Ρ〈0.05, ΔΡ〈〇.〇1.
[0053] 由表1可以看出：與空白組比較，陽性對照藥萬艾可明顯縮短雄性大鼠捕捉潛伏 期、明顯增加捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù);龜鹿補(bǔ)腎片也能 縮短雄性大鼠捕捉潛伏期，增加捕捉次數(shù)，縮短交配潛伏期，明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù);本 發(fā)明傣藥腎葉山螞蝗水提高劑量組和醇提組能縮短雄性大鼠捕捉潛伏期，增加捕捉次數(shù)， 能明顯縮短交配潛伏期，增加20min內(nèi)交配次數(shù)。
[0054] 實(shí)驗結(jié)果說明，本發(fā)明藥物腎葉山螞蝗及其醇提物、水提物均可以有效延長交配 時間，增加交配次數(shù)，延長潛伏期，可以治療勃起功能障礙。
[0055] 3.2傣藥腎葉山螞蝗對大鼠血清睪酮、雌二醇含量的影響 [0056] 結(jié)果見表2:
[0057]表2傣藥腎葉山螞蝗對雄性大鼠血清睪酮、雌二醇含量的影響(n = 10，X 土 s)
[0059] 注：與空白組比較*Ρ〈0.05, ΔΡ〈〇.〇1·
[0060] 由表2可以看出，龜鹿補(bǔ)腎片組，可升高雄性大鼠血清睪丸酮含量。傣藥腎葉山螞 蝗水提高劑量組和低劑量組對雄性大鼠血清睪丸酮升高影響不顯著，而醇提劑量組有明顯 升高;對雌二醇含量，龜鹿補(bǔ)腎片組和傣藥腎葉山螞蝗水提低劑量組雌二醇含量影響不明 顯，而醇提組則雌二醇含量降低效果較為明顯。
[0061] 實(shí)驗結(jié)果說明，本發(fā)明藥物腎葉山螞蝗及其醇提物可以有效提高血清睪丸酮含 量，降低血清雌二醇的含量。
[0062] 綜上，本發(fā)明腎葉山螞蝗及提取物可以有效延長交配時間，增加交配次數(shù)，延長潛 伏期，可以治療勃起功能障礙，其中，其醇提物還可以有效提高血清睪丸酮含量，降低血清 雌二醇的含量，應(yīng)用前景良好。
【主權(quán)項】
1. 腎葉山螞蝗及其提取物在制備治療勃起功能障礙的藥物或保健食品中的用途。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于:所述的腎葉山螞蝗是豆科植物腎葉山螞蝗 Desmodiumrenifolium(Linn.)Schindler的干燥根。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的用途，其特征在于:所述的腎葉山螞蝗的提取物為水提取 物或者醇提取物。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于:所述的腎葉山螞蝗的水提取物按照如下方 法制備:取腎葉山螞蝗，加5~9倍量的水浸泡1~2h，煮沸30~60min，過濾，藥渣加3~7倍量 水繼續(xù)煎煮，煮沸25~50min，過濾，再重復(fù)1~2次，合并濾液，濃縮，得水提物;優(yōu)選地，按照 如下方法制備:取腎葉山螞蝗，加7倍量的水浸泡1~2h，煮沸45min，過濾，藥渣加5倍量水繼 續(xù)煎煮，煮沸35min，過濾，再重復(fù)1次，合并3次濾液，濃縮，得水提物。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于:所述腎葉山螞蝗的醇提取物按照如下方法 制備:取腎葉山螞蝗，用90-95%乙醇回流提取，得乙醇提取物。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于:所述腎葉山螞蝗的醇提取物按照如下方法 制備：取腎葉山螞蝗，加6~10倍量的95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)2~4次，每次30~ 60mi η，合并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:加8倍量的 95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)3次，每次45min，合并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提 取物。7. 根據(jù)權(quán)利要求1~6任意一項所述的用途，其特征在于:所述藥物或保健食品是提高 血清睪丸酮含量和/或降低血清雌二醇含量的藥物或保健食品。8. -種腎葉山螞蝗水提物，其特征在于:它是按照如下方法制備的：取腎葉山螞蝗，加7 倍量的水浸泡l_2h，煮沸45min，過濾，藥渣加5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸35min，過濾，再重復(fù)1 次，合并3次濾液，濃縮，得水提物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:取腎葉山螞蝗，加5~9倍量 的水浸泡l_2h，煮沸30~60min，過濾，藥渣加3~7倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸25~50min，過濾， 再重復(fù)1~2次，合并濾液，濃縮，得水提物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:取腎葉山螞蝗，加5-9倍量的水浸泡l_2h，煮沸45min，過濾，藥渣加5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸35min，過濾，再重復(fù)1 次，合并3次濾液，濃縮，得水提物。9. 一種腎葉山螞蝗醇提物，其特征在于：它是按照如下方法制備的：取腎葉山螞蝗，用 90-95 %乙醇回流提取，得乙醇提取物。10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的腎葉山螞蝗醇提物，其特征在于:它是按照如下方法制備的： 取腎葉山螞蝗，加6~10倍量的95%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)2~4次，每次30~60min， 合并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物;優(yōu)選地，按照如下方法制備:加8倍量的95%乙 醇進(jìn)行連續(xù)回流提取，重復(fù)3次，每次45min，合并提取液，抽濾，揮去乙醇，得乙醇提取物。
【文檔編號】A23L33/105GK106074673SQ201610643308
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年8月8日 公開號201610643308.7, CN 106074673 A, CN 106074673A, CN 201610643308, CN-A-106074673, CN106074673 A, CN106074673A, CN201610643308, CN201610643308.7
【發(fā)明人】馮德強(qiáng), 段小花, 王艷妮
【申請人】云南中醫(yī)學(xué)院