3,5-二羥基戊酸的類似物用于成骨作用
【專利摘要】本發(fā)明揭示一種3,5-二羥基戊酸的類似物，其組成具有改善成骨作用，可不經(jīng)由甲羥戊酸途徑。
【專利說明】
3,5-二羥基戊酸的類似物用于成骨作用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明揭示一種具備成骨作用藥物及其活性的應(yīng)用，特別涉及3,5_二羥基戊酸的 類似物，可不經(jīng)由甲羥戊酸途徑。
【背景技術(shù)】
[0002] 利用非經(jīng)由脂質(zhì)代謝相關(guān)途徑的效果，或多發(fā)性效用(pleiotropic effects)的 影響，可讓他汀類(Statins)藥物表現(xiàn)出骨質(zhì)代謝活性。雖然他汀類藥物包含著3,5_二羥基 戊酸（3,5-dihydroxypentanoic acid)的母體基團(tuán)或衍生基團(tuán)，一直被認(rèn)為經(jīng)由甲輕戊酸 (mevalonate，MVA)途徑模仿3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原酶（3-117(11'〇17-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase，HMG_CoA reductase)受質(zhì)而中斷脂質(zhì)合成，可成 為降低膽固醇的藥物。此甲羥戊酸途徑對(duì)于骨骼的影響已被證實(shí)可調(diào)控蝕骨細(xì)胞活性而抑 制骨豁再吸收(bone resorption)，而且發(fā)現(xiàn)臨床所用的3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原 酶抑制劑的他汀類藥物還具有誘導(dǎo)成骨作用(bone formation)，其可能通過許多的替代途 徑。而且他汀類具成骨作用的必要結(jié)構(gòu)需求，目前尚不清楚，亦缺乏策略促使他汀類藥物減 少在肝組織的分布而增加骨組織親和。此等事實(shí)阻礙著他汀類藥物，作為骨骼同化制劑的 發(fā)展。
[0003] 3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原酶(HMG-CoA reductase)主要分布在肝臟，進(jìn)行 著脂質(zhì)的合成。高效的降血脂化合物需與肝臟中的3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原酶呈 現(xiàn)高親和力，且具有肝細(xì)胞選擇性。因此，如要提高骨組織分布比率，采用降低3-羥基-3-甲 基戊二酰-輔酶A還原酶的抑制活性策略，可能防止此類化合物集中在肝臟作用。
[0004] 他汀類衍生物的相關(guān)制劑，最近成為針對(duì)骨質(zhì)疾患治療的藥物。雖然他汀類已經(jīng) 報(bào)導(dǎo)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和局部投予使用模式下可促進(jìn)骨質(zhì)增生。但多年來，不論是運(yùn)用隨機(jī)對(duì)照 試驗(yàn)或系統(tǒng)性的評(píng)價(jià)，顯示絕經(jīng)后婦女投予他汀類藥物衍生物，無法防止骨折或增加骨密 度，因而認(rèn)為在人體的全身投予模式下，其效果仍有爭(zhēng)議。因此，藥物結(jié)構(gòu)仍有改善空間，必 須研發(fā)能全身使用和具骨選擇性的他汀類藥物衍生物。
[0005] 本案
【申請(qǐng)人】鑒于現(xiàn)有技術(shù)中的不足，經(jīng)過悉心試驗(yàn)與研究，并一本鍥而不舍的精 神，終構(gòu)思出本案發(fā)明「3,5_二羥基戊酸的類似物用于成骨作用」，且能夠克服先前技術(shù)的 不足，以下為本案的簡(jiǎn)要說明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了克服先前技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明經(jīng)由實(shí)驗(yàn)，探討二羥基戊酸的類似物的醫(yī)藥品 及或/食品用途。
[0007] 本發(fā)明的目的即在于提供一種如結(jié)構(gòu)式I所示二羥基戊酸的類似物，
[0009] 其中，X為氮原子或碳原子；
[0010] R為氫基或d-C4烷基；
[0011 ] Ra選自下列其中之一 ：（al瓜-⑶烷基，（a2)取代的&-CK)烷基，（a3)c3-c8環(huán)烷基， (a4)取代的C3_C8環(huán)烷基，（a5)苯胺基(phenylamino)，（a6)取代的苯胺基，（a7)苯基&-&〇烷 胺基（phenyl Cl-10 alkylamino)，（a8)取代的苯基Ci-Cio燒胺基，（a9)雙磷酸鹽類 (bisphosphonate)，（alO)四環(huán)素（tetracycline)，（all)胺基酸(amino acid)，（al2)酸性 寡勝肽（acidic oligopeptides)，（al3)骨標(biāo)祀勝肽（bone targeting peptide)，（al4)
[0012] Rb選自下列其中之一：無取代基、乙酰基（acetyl group)、顯像基團(tuán)（imaging moiety)；
[0013] "in二b表示單鍵或雙鍵；
[0014] Rh選自下列結(jié)構(gòu)式以），（8)，（〇，（0)，化)和卬)其中之一：

[0017] Rk 為&-C5 烷基；
[0018] Rm為&-C5烷基或羥基；
[0019] Rn為d_C5烷基或羥基。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明的一些實(shí)施例，3，5_二羥基戊酸的衍生物還具有成像基團(tuán)，可用于包 括在人類或動(dòng)物的影像檢查的診斷方法。其是包括經(jīng)由投予包含3,5_二羥基戊酸的衍生物 的顯像劑注射、輸液或任何其他已知的方法而成像。
[0021] 本發(fā)明尚有一目的是在于提供一種制造包括結(jié)構(gòu)式I的3，5_二羥基戊酸的類似 物，通過添加劑、賦形劑達(dá)到增加骨質(zhì)作用(bone mass)活性，以治療哺乳動(dòng)物病癥。
[0022] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種組合療法用途，其是用于投予包括結(jié)構(gòu)式I所示 的3，5-二羥基戊酸的類似物的醫(yī)藥組合物與/或食品組合物，以治療哺乳動(dòng)物病癥。
[0023] 本發(fā)明再有另一目的在于提供一種制造結(jié)構(gòu)式I所示的3,5-二羥基戊酸的類似物 的方法，是在于提供荷甲氧羰基(Fmoc)反應(yīng)物，進(jìn)行固相多肽合成（sol id-phase peptide synthesis，SPPS)方法。其包括提供(a)甘氨酸與王樹脂(Wang resin)預(yù)載的中間產(chǎn)物，令 賴氨酸加以連接。（b)經(jīng)由水解內(nèi)酯環(huán)，讓辛伐他汀酸（s imvas tat in ac i d)與賴氨酸的a-氨 基酸基團(tuán)，形成共輒的酰胺鍵。（c)固相多肽合成過程，必須高于100°C溫度下，采取150W以 上的微波照射1〇〇分鐘左右。
【附圖說明】
[0024]圖1為化合物1-F的制備方法流程；
[0025]圖2為化合物2-F的制備方法流程；
[0026] 圖3為3，5_二羥基戊酸的類似物的制備方法流程；
[0027] 圖4為化合物1與鈣離子以等溫滴定量熱卡計(jì)測(cè)試結(jié)合能力的結(jié)果；
[0028] 圖5為化合物1影響氫氧基磷灰石的沉降的結(jié)果，其中，（A)為化合物1+氫氧基磷灰 石，（B)為氫氧基磷灰石；
[0029]圖6為化合物1-F結(jié)合至氫氧基磷灰石的熒光顯微鏡監(jiān)測(cè)結(jié)果，其中，（a)為白光照 亮區(qū)，（b)為暗視野區(qū)；
[0030]圖7為辛伐他汀與化合物1-F對(duì)人類脂肪干細(xì)胞的誘導(dǎo)礦化結(jié)果；
[0031]圖8為辛伐他汀與化合物4~11對(duì)D1細(xì)胞的誘導(dǎo)礦化結(jié)果；
[0032] 圖9為斑馬魚骨靶向與促骨生成試驗(yàn)結(jié)果，其中，（a)為喂食calcein給斑馬魚后， 以熒光顯微鏡觀察暗視野，（b)為喂食化合物2-F給斑馬魚后，以熒光顯微鏡觀察暗視野， (c)為喂食化合物1-F、2_F與辛伐他汀給不同斑馬魚后，觀察斑馬魚骨頭生長情形；
[0033] 圖10為化合物7促進(jìn)斑馬魚骨頭生成的結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0034] 本案將可由以下的實(shí)施例說明而得到充分了解，使得本領(lǐng)域技術(shù)人員可以據(jù)以完 成，然而本案的實(shí)施并非可由下列實(shí)施例而被限制其實(shí)施型態(tài)，本領(lǐng)域技術(shù)人員仍可依據(jù) 除既揭露的實(shí)施例的精神推演出其他實(shí)施例，該等實(shí)施例皆當(dāng)屬于本發(fā)明的范圍。
[0035] 為達(dá)成前述發(fā)明目的，上述結(jié)構(gòu)式I所示二羥基戊酸的類似物，Ra取代基其中（a2) 取代的&-&()烷基可以被下列取代基其中之一所取代:氫基、&-CK)烷基、&_&()烷氧基、&-C5 燒氧羰基(alkoxycarbonyl)、Ci_C5酰氧基(acyloxyl)、C3_C8環(huán)烷基(cycloalkyl )、苯基。 [0036] 上述Ra取代基其中（a4)取代的C3_C8環(huán)烷基、（a6)取代的苯胺基、（a8)取代的苯基 Ci-CK)烷胺基可以各自獨(dú)立的被下列取代基其中之一所取代烷基、氟原子、氯原子、溴 原子、碘原子、含氧原子之的5元芳香環(huán)、含氧原子的6元芳香環(huán)、含氮原子的5元芳香環(huán)、含 氮原子的6元芳香環(huán)。
[0037]上述Ra取代基其中（al2)酸性寡勝肽為選自下列其*2-:-LyS-(A Sp)m-LyS-PEG、D/L-Aspm、D/L-Gl un，其中，m和n各自獨(dú)立地為1至10的正整數(shù)。
[0038] 上述Ra取代基其中（al3)骨標(biāo)靶勝肽為選自下列其中之一：Thr-Met-Arg-Asn-Pr〇-Ile-Thr-Ser-Leu-Ile-Ser-Val，Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His_Arg-Pr〇-Trp-Thr-Gly-Gly-Gly-Ser，Lys-Glu-Ile_Pr〇-Pr〇-Ile-Pr〇-Leu-Leu-Ala-Pr〇-Ser_Gly-Gly-Gly-Ser，Asn-Asn-Val-Ser-Gln-Lys-Trp-Gln-Gln-Arg-Leu-Ile_Gly-Gly-Gly-Ser，Asn_ Ser-Met-Ile-Ala-His-Asn-Lys-Thr-Arg-Met-His-Gly-Gly-Gly-Ser?Gly-Ile-His-Val-Pr〇-Trp-Met-Pr〇-Pr〇-Val-Ala-Phe-Gly-Gly-Gly-Ser ?Gln-Arg-Ser-Trp-Thr-Leu-Asp-Ser-Ala-Leu-Ser-Met-Gly-Gly-Glu-Ser，Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pr〇-Asn_Gly-Gly-Gly-Ser，Ser-Ser-Thr-Leu-Lys-Thr-Phe-Phe-Gly-Phe-Pr〇-Asp-Gly-Gly-Gly-Ser，Asp-Ser-Ser-Asn-Pr〇-Ile-Phe-Trp-Arg-Pr〇-Ser-Ser_Gly-Gly-Gly-Ser， Asn-Thr-Ser-His-Leu-Arg-Val-Lys-Leu-Pr〇-Thr-Pr〇-Gly-Gly-Gly-Ser ?Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pr〇-Asn_Gly-Gly-Gly-Ser，Ala-Thr-Trp-Ser-His_His-Leu-Ser-Ser-Ala-Gly-Leu-Gly-Gly-Gly-Ser ? Ser-Tyr-Ser-Gln-Met-Asp-Pr〇-Pr〇-Arg-Ser_Leu-Pr〇-Gly-Gly-Gly-Ser，Thr-Met-Arg-Asn-Pr〇-Ile-Thr-Ser-Leu-Ile-Ser-Val， Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His_Arg-Pr〇-Trp-Thr，Lys-Glu-Ile-Pr〇-Pr〇-Ile_Pr〇-Leu-Leu_Ala-Pr〇-Ser，Asn-Asn-Val-Ser-Gln-Lys-Trp-Gln-Gln-Arg-Leu_Ile，Asn_Ser_ Met-Ile-Ala-His-Asn-Lys-Thr-Arg-Met-His，Gly-Ile-His-Val-Pr〇-Trp-Met_Pr〇-Pr〇-Val-Ala-Phe，Gln-Arg-Ser-Trp-Thr-Leu-Asp-Ser-Ala-Leu-Ser_Met，Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys_Met-Pr〇-Asn，Ser-Ser-Thr-Leu-Lys-Thr-Phe-Phe-Gly-Phe-Pr〇-Asp，Asp-Ser-Ser-Asn-Pr〇-Ile-Phe-Trp-Arg-Pr〇-Ser_Ser，Asn-Tyr-Ser-His-Leu_Arg-Val-Lys_Leu-Pr〇-Thr-Pro，Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pro-Asn，Ala_ Thr-Trp-Ser-His-His-Leu-Ser-Ser-Ala-Gly-Leu，Ser-Tyr-Ser-Gln-Met-Asp-Pro-Pro-Arg-Ser-Leu_Pr〇-Gly-Gly-Gly-Ser 〇
[0039] 上述Ra取代基其中（al4)
中的U是選自下列其中之一：_1^8、- 1^8-以8?，擬(^、，擬(3、-1^8-以8?-)1{-順厶(3、（厶8?-順厶(^，而了為1或2，1(為正整數(shù)且20>1( M〇
[0040] 于適當(dāng)實(shí)施例本發(fā)明的術(shù)語"烷基"，是指飽和直鏈或含有支鏈的烴基，而(^-(：10烷 基是指該飽和直鏈或含有支鏈烴基鏈上擁有1個(gè)至1 〇個(gè)碳原子。因此，&-&〇烷基是指甲基、 乙基、丙基、丁基、異丁基、仲丁基、戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、己基、庚基、辛基、壬基、 癸基。而"不飽和烷基"是指含有雙鍵直鏈、三鍵直鏈或含有雙鍵、三鍵支鏈的烴基。"苯胺基 (phenylamino)"以-NHPh表示于苯基結(jié)構(gòu)上含有胺基的取代基。
[0041]而于適當(dāng)實(shí)施例，結(jié)構(gòu)式I的3,5_二羥基戊酸的類似物的制備，是運(yùn)用如圖1所示 的合成路徑所示標(biāo)準(zhǔn)態(tài)芴甲氧羰基(Fmoc)的保護(hù)戰(zhàn)略以及固相勝肽合成（solid-phase peptide synthesis, SPPS)方法。以預(yù)先置入甘氨酸的王樹脂（Gly-preloaded Wang resin)為起始原料，分別合成上Fmoc-Lys(lvDde)-〇H)和辛伐他汀，可獲得化合物12。再利用 聯(lián)胺(hydraz ine)移除1vDde保護(hù)基，合成上連續(xù)6個(gè)Fmoc-Asp- (tBu) -OH，可獲得化合物13。 同樣地，合成上Fmoc-Ly s (lvDde) -OH可獲得化合物14。之后，合成上聚乙二醇(化合物15)和 氟硫氰酸熒光素(FITC)，再經(jīng)CLE步驟可得化合物1-F。另外，如化合物14合成上聚乙二醇 (化合物15)和乙烯基，可得化合物1。
[0042] 運(yùn)用如圖2所示的合成路徑，以Rink amide樹脂為起始原料，合成上連續(xù)6個(gè)Fmoc- Asp- (tBu) -OH，可獲得化合物16。同樣地，合成上Fmoc-Ly s (lvDde) -OH、聚乙二醇(化合物15) 和氟硫氰酸熒光素(FITC)，再經(jīng)CLE步驟可得化合物2-F。
[0043] 3,5_二羥基戊酸的類似物，運(yùn)用圖3所示的合成路徑，于室溫下在干燥四氫呋喃 (tetrahydrofuran，THF)中，令異丙基格林那試劑（isopropyl Grignard reagent)與辛伐 他汀反應(yīng)可加以制備。
[0044] 于適當(dāng)實(shí)施例，辛伐他汀酸衍生化合物為于結(jié)構(gòu)式I，Rh選自下列結(jié)構(gòu)式(A)，（B)， (C)，（D)，（E)，（F)其中之一。而部分辛伐他汀酸衍生化合物如結(jié)構(gòu)式II所示，其中Rt選自下 列其中之 一 ：Ci-Cio 烷基、羥基、Ci-Cio 燒胺基、-NH-(Ci-Cio)烷基-Rz、 -NH-(Ci-C5 )烷基 _0_ (Q-C5)烷基-Rz、-NH-胺基;Rz選自下列其中之一:Q-Ckj不飽和烷基、羥基、胺基、含氧原子 的5元芳香環(huán)、含氧原子的6元芳香環(huán)、含氮原子的5元芳香環(huán)、含氮原子的6元芳香環(huán)。
[0046] 圖3所示的合成路徑是以結(jié)構(gòu)式II所示制備部分辛伐他汀酸衍生化合物，而辛伐 結(jié)構(gòu)式IL
[0045] 他汀酸(化合物4)及衍生化合物5-9,亦可比照此合成路徑加以制備，其是在室溫下與二氯 甲烷、甲醇或干燥四氫呋喃中與各類胺類化合物反應(yīng)。
[0047] 根據(jù)上述本發(fā)明的制備路徑流程，其中勝肽鏈的合成可運(yùn)用圖1或圖2所示的合成 路徑，而3，5_二羥基戊酸的類似物的制備則是經(jīng)由圖3所示的合成路徑。于3，5-二羥基戊酸 的類似物的合成路徑，亦可經(jīng)由辛伐他汀衍生物作為起始原料，則其中辛伐他汀衍生物是 選自市售或已知的他汀類藥物。例如阿托伐他汀(Atorvastatin)的化學(xué)名稱為(3R，5R)-7-[2-(4-氟苯基)-3-苯基-4-(苯基氨基甲酰基）-5-異丙基-吡咯-1-基]-3,5-二羥基庚酸 ((3R,5R)-7-[2-(4-Fluoro-pheny1)-3-phenyl-4-(phenyl-carbamoyl)-5-propan-2-ylpyrrol-1-yl]-3,5-dihydroxy-heptanoic acid);西立伐他?。–erivastatin)的化學(xué)名 稱為(31?，53,6￡)-7-[4-(4-氟苯基)-2,6-二異丙基-5-甲氧甲基-吡啶-3-基]-3,5-二羥基- 6-庚稀酸（（3R，5S，6E)-7-[4-(4-fluor0-phenyl )-5_(methox ymethyl )_2，6-bis(propan-2_yl)pyridin-3-yl]-3,5-dihydroxyhept-6-enoic acid);氣伐他?。‵luvas tatin)的化 學(xué)名稱為(31?，53,6￡)-7-[3-(4-氟苯基)-1-(1-甲基乙基)-111-吲哚-2-基]-3,5-二羥基-6-庚稀酸（（3R，5S，6E)-7-[3-(4-Fluorophenyl )-l_( 1-methyl ethyl )-lH-indol_2-yl ]_3， 5- dihydroxy-6-heptenoic acid);羅瓦斯達(dá)?。↙ovastatin)的化學(xué)名稱為（1S，3R，7S，8S, 8AR)-1，2,3,7,8,8A -六氫-3，7-二甲基-8-[ 2 ? [ (2R，4R)-四氫-4-羥基-6-氧代-2H-吡喃-2-基]乙基]-1-萘基（S)-2-甲基丁酸酯（（13,31?，73,83,8 &1〇-8-{2-[(21?，410-4-1^扣(《7- 6- 0xooxan-2-y1]ethyl}-3,7-dimethy1~1,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen-1-yl(2S)-2-methylbutanoate);美伐他汀(Mevastatin)的化學(xué)名稱為2_甲基丁酸[1S_[1_A (R*) ,7-B，8- B (2S*，4S*)，8A- B ] ]-1，2，3，7，8，8A-六氫-7-甲基-8-[2-(四氫-4-羥基-6-氧-2H-P比喃_2_基）乙基]-1-萘酯（（IS，7R，8S，8aR)_8_{ 2_[ (2R，4R)-4-hydroxy-6-0xotetrah ydr0-2H-pyran_2-yl]ethyl}-7-methyl-l，2，3，7，8，8a-hexahydronaphthalen_l-yl(2S)_ 2-methylbutano ate);匹伐他汀(Pitavastatin)的化學(xué)名稱為(3R，5S，6E)-7_[2-環(huán)丙基- 4-(4-氟代苯基）喹啉-3-基]-3,5-二羥基-6-庚烯酸（（31?，53,6￡)-7-[2-07(31(^仰口71-4-(4-fluorophenyl )-3_quinolyl ]_3，5-di-hydroxy-6_heptenoic acid);普伐他汀 (Pravastatin)的化學(xué)名稱為( + )-(3R，5R)-3,5-二羥基-7-[( IS, 2S，6S, 85,8&10-6-羥基-2-甲基-8-[(5)-2-甲基丁酰氧基]-1，2,6,7,8,8&-六氫-1-萘]-庚酸（（31?，55,6￡)-7-[2-cyclopropyl_4-(4-fluor0-phenyl)quinolin_3_yl]_3，5_dihydroxyhept-6-enoic acid);瑞舒伐它汀(Rosuvastatin)的化學(xué)名稱為(31?，55,6￡)-7-[4-(4-氟苯基)-6-異丙 基-2-0-甲基4-甲磺酰胺基）-5-嘧啶]-3,5-二羥基-6-庚烯酸（（31?，53)-7-[4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-(N-methy1-N-methanesuIfonyl-amino)pyrimidin-5-yl] -3，5-di-hydroxy-6(E)-heptenoic acid);辛伐他?。⊿imvastatin)的化學(xué)名稱為（3R， 51〇-7-[(13,23,61?，83,8&10-8-(2,2-二甲基丁酰氧基)-1，2,6,7,8,8&-六氫-2,6-二甲基-1-萘基]_3,5-二羥基庚酸銨（（13,31?，73,83,8 &1〇-8-{2-[(21?，410-4-1^(^(^7-6-oxotetrahydr0-2H-pyran-2-yl]ethyl}-3,7-dimethyl-l,2,3,7,8,8a-hexahydronaphthalen_l-yl2,2-dimethylbutanoate)〇
[0048] 術(shù)語"治療"、"治療中"及其類似術(shù)語是指緩減、改善、消減或消除目前患者所處病 癥或該病癥相關(guān)的任何癥狀的方法，以及預(yù)防該病癥或其他涉及該癥狀的方法。而術(shù)語"有 效劑量(therapeutically effective amount)"是代表足以改善或防止醫(yī)學(xué)癥狀或生物體 狀態(tài)惡化的劑量。有效地劑量亦說明投予化合物的劑量足夠用于診斷的劑量。除非說明書 另有敘述，否則"活性化合物"以及"醫(yī)藥活性化合物"于此均可替換使用，是指稱一具有制 藥學(xué)、藥理學(xué)或治療效果的物質(zhì)。
[0049] 術(shù)語"賦形劑(excipients)"或稱為"藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑"、"生物可利 用的載體或賦形劑"，是包括溶媒、分散劑、包衣、抗菌或抗真菌劑，保存或推遲吸收劑等任 何用于制備成劑型的已知適當(dāng)化合物。通常此類載體或賦形劑，本身不具備治療疾病的活 性，且將本技術(shù)所揭示的衍生物，搭配選用各種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，制備成各劑 型，投予動(dòng)物或人類亦不致于造成不良反應(yīng)、過敏或其它不適當(dāng)反應(yīng)。因而本技術(shù)所揭示的 衍生物，搭配藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，適用于臨床及人類。
[0050] 術(shù)語"藥學(xué)上可接受之賦形劑"，包括但不限于，聚合物、樹脂、增塑劑、填料、潤滑 劑、稀釋劑、黏合劑、崩解劑、溶劑、共一溶劑、界面活性劑、防腐劑、甜味劑、調(diào)味劑、藥學(xué)級(jí) 的染料或顏料、及黏度劑至少一者。
[0051 ] 術(shù)語"醫(yī)藥組成物(pharmaceutical compos it ion)"為一種固體或液體組成物，其 形式、濃度和純度程度適合投予給病患（如人類或動(dòng)物病患），在投予之后，其可誘發(fā)所欲生 理變化。醫(yī)藥組成物典型地為無菌及/或非發(fā)熱性者(non-pyrogenic)。
[0052] 該載體隨各劑型而調(diào)整，無菌注射的組成物可溶解或懸浮于無毒的靜脈注射稀釋 液或溶劑中，此類溶劑如1，3 - 丁二醇。其間可接受的載體可為甘露醇(mannitol)或水。此 外以固定油脂、合成的甘油酯或雙甘油酯，是一般常用的溶劑。脂肪酸，如油酸（oleic acid)、橄欖油或蓖麻油等甘油酯衍生物之類，尤其經(jīng)含氧乙基化的型態(tài)(oxy-acetylated types)皆可作為制備注射劑并為天然的醫(yī)藥可接受油類。此等油類溶液或懸浮液可包含長 鏈的醇稀釋液或分散劑、羧甲基纖維素或類似的分散劑。其他常用的接口活性劑如吐溫、 Spans，或其他類似的乳化劑，或一般醫(yī)藥制造業(yè)所使用于醫(yī)藥可接受的固態(tài)、液態(tài)或其他 生物可利用促進(jìn)劑(enhancing agent)，可用于醫(yī)藥劑型的開發(fā)。
[0053] 用于口服投藥的組成物是采用任何一種口服可接受的劑型，其劑型包括膠囊、錠 劑、片劑、乳劑（emulsion)、含水懸浮液(aqueous suspension)、分散劑、溶劑?？诜┬屯?常所使用的載體，以錠劑為例的基本添加物可為乳糖、玉米淀粉、潤滑劑，以及硬脂酸鎂。而 膠囊使用的稀釋劑(diluent)包括乳糖與干燥的玉米淀粉。制成水懸浮液或乳化劑劑型，是 將活性物質(zhì)懸浮或溶解于已經(jīng)混和著乳化劑或懸浮劑的油性接口活性劑，視需要添加適度 的甜味劑，風(fēng)味劑或是色素。
[OOM] 鼻用噴霧劑(aerosol)或吸入劑（inhalation)組成物，可根據(jù)已知的制劑技術(shù)進(jìn) 行制備。例如，將組成物溶于生理食鹽水中，添加苯甲醇或其他適合的防腐劑，或促進(jìn)吸收 劑以增強(qiáng)其生物可利用性。本發(fā)明所揭示的化合物亦可制成栓劑，采取直腸或陰道的投藥 方式。
[0055]本發(fā)明所揭示化合物亦可運(yùn)用注射投藥，其包括經(jīng)由皮下、腹腔、靜脈、肌肉，或關(guān) 節(jié)腔內(nèi)、顱內(nèi)、關(guān)節(jié)液內(nèi)、脊髓內(nèi)注射，主動(dòng)脈注射，胸腔注射，疾病部位內(nèi)注射，或其他適合 的投藥技術(shù)。
[0056] 于適當(dāng)實(shí)施例，對(duì)患者運(yùn)用組合療法(combination therapies)投予含有結(jié)構(gòu)式I 成分，所制備的單一劑量口服組成物，如片劑、膠囊，或口服結(jié)構(gòu)式I成分的食品。投予結(jié)構(gòu) 式I成分化合物的不同劑型的組合療法，其先后依序投予或是間隔短暫時(shí)間方式，可隨病患 的情況和年齡變化，而選用各種劑型，例如舌下或□腔含片的□服劑型，直腸給藥，鼻腔用 藥、干燥粉末或噴霧的吸入劑，甚至于陰道給藥，皮下、肌肉、靜脈和皮內(nèi)的注射劑，局部給 藥（topical)等等，例如護(hù)手霜(mist)、噴霧、溶液劑（solution)、乳液（lotion)、膠凍 (gel)、乳霜（cream)、軟膏、糊劑(paste)、油膏(unguent)、乳液霜（emulsion)和懸浮劑，更 可包括口服或注射投藥。間隔短暫時(shí)間方式投予，通常以前后3小時(shí)內(nèi)完成投予。
[0057]本說明書所敘述的所有技術(shù)性及科學(xué)術(shù)語，除非另外有所定義，皆隸屬于本領(lǐng)域 技術(shù)人員可共同了解的意義。
[0058]為化合物1-F與1的結(jié)構(gòu)將辛伐他汀酸的3，5_二羥基戊酸以天門冬胺酸寡肽和聚 乙二醇修飾，化合物1-F更有熒光基團(tuán)的鍵結(jié)，相對(duì)地，對(duì)照化合物2-F，其結(jié)構(gòu)不含辛伐他 酸，只有天門冬胺酸寡肽、聚乙二醇和熒光基團(tuán)。化合物1-F與1的結(jié)構(gòu)中，辛伐他汀的內(nèi)酯 基被天門冬胺酸寡肽的胺基開環(huán)，以酰胺鍵方式結(jié)合在3,5_二羥基戊酸的羧基。
[0059] 如化合物1-F與1，辛伐他汀的內(nèi)酯基也可被含有胺基之非寡肽分子以酰胺鍵鍵結(jié) 方式所開環(huán)修飾，甚至是以不含胺基的化合物，以成為酮基的結(jié)合形式開環(huán)，制備了辛伐他 汀衍生化合物3~11。
[0060] 辛伐他汀酸(化合物4)和衍生物1-F、5~11經(jīng)測(cè)試對(duì)3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A 還原酶的抑制能力。結(jié)果如表一顯示，所有辛伐他汀衍生物的有效抑制濃度均高于辛伐他 汀本身，至少是辛伐他汀的5倍以上，甚至化合物1-F與9的有效抑制濃度高于辛伐他汀的 500倍以上；因而得知辛伐他汀的內(nèi)酯基被開環(huán)并改為酰胺鍵結(jié)，可有效下降對(duì)3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原酶的抑制能力。
[0061 ]表一
[0063] 化合物1對(duì)|丐離子(Ca2+)的結(jié)合親和力(binding affinity)，運(yùn)用等溫滴定量熱卡 計(jì)（isothermal titration calorimetry，ITC)測(cè)量。結(jié)果如圖4顯示，化合物1可以與約兩 個(gè)鈣離子結(jié)合，并且有強(qiáng)的結(jié)合能力，結(jié)合常數(shù)為278. lkif1。
[0064]因氫氧基磷灰石(hydroxyapatite，HAP)為骨頭的無機(jī)物組成，研究中以氫氧基磷 灰石為仿生性骨骼材料。化合物1對(duì)氫氧基磷灰石的結(jié)合測(cè)試，其結(jié)果如圖5顯示。以光線穿 透值的百分比（％T)表現(xiàn)氫氧基磷灰石在有或無化合物參與的沉降延遲情形。與無添加化 合物1組別相比，添加化合物1組別可見氫氧基磷灰石的沉降被延遲達(dá)120秒。
[0065] 如以化合物1-F結(jié)合至氫氧基磷灰石，可以熒光顯微鏡進(jìn)行監(jiān)測(cè)。結(jié)果如圖6顯示， 化合物1-F因結(jié)合至氫氧基磷灰石表面，致使氫氧基磷灰石粒子呈現(xiàn)熒光。
[0066] 以人類脂肪干細(xì)胞為細(xì)胞毒性測(cè)試的材料，發(fā)現(xiàn)投予化合物1-F后的細(xì)胞存活率 遠(yuǎn)高于投予辛伐他汀組別，換算成IC5Q表示，可見化合物1-F的IC 5Q為辛伐他汀的300倍，明 顯地得知化合物1-F在細(xì)胞安全性上高于辛伐他汀，IC5Q結(jié)果見表二）
[0067] 表二測(cè)試化合物于人類脂肪干細(xì)胞的細(xì)胞毒性
[0069] 如以老鼠骨母前趨細(xì)胞(rat bone marrow stem cells)Dl為測(cè)試材料，評(píng)估辛伐 他汀衍生物的細(xì)胞毒性。結(jié)果如表三顯示，所有辛伐他汀衍生物的使用濃度均可被提高，表 示辛伐他汀衍生物對(duì)D1細(xì)胞的安全性都比辛伐他汀高。尤其化合物7的IC 5Q更比辛伐他汀高 83倍。
[0070] 表三
[0072] 接著測(cè)試化合物對(duì)D1細(xì)胞的誘導(dǎo)礦化能力。結(jié)果如圖7顯示，濃度15yM以下的辛伐 他汀和化合物1-F，兩者均可誘導(dǎo)D1細(xì)胞礦化。然而辛伐他汀因具有細(xì)胞毒性導(dǎo)致細(xì)胞死亡 情形隨濃度增加而越發(fā)嚴(yán)重，因此呈現(xiàn)礦質(zhì)程度下降，可由圖7辛伐他汀組的紅色染色淡化 得知。相較之下，化合物卜F則可以穩(wěn)定地誘導(dǎo)細(xì)胞礦化；當(dāng)濃度提升至大于20yM，只有化合 物1-F組可以成功地誘導(dǎo)D1細(xì)胞礦化，而辛伐他汀組別的細(xì)胞皆死亡。綜合細(xì)胞毒性與礦化 的分析，化合物1-F相對(duì)于辛伐他汀能呈現(xiàn)安全且有效地誘導(dǎo)細(xì)胞礦化效果。
[0073] 辛伐他汀酸(化合物4)及化合物5~11誘導(dǎo)D1細(xì)胞礦化能力的測(cè)試，則固定濃度為 1與4yM，分別比較礦化達(dá)9、11、13天的結(jié)果。如圖8a顯示，在第9天，化合物5與7 (lyM)都能明 顯地誘導(dǎo)細(xì)胞礦化。在第11天，化合物5、6、7(lyM)均有優(yōu)異誘導(dǎo)細(xì)胞礦化的能力，化合物7 尤其顯著（圖8b)。在第13天，如圖8c顯示，各化合物均有誘導(dǎo)細(xì)胞礦化的能力。而辛伐他汀 會(huì)造成細(xì)胞死亡，無法誘導(dǎo)細(xì)胞礦化，1處的辛伐他汀則具有優(yōu)異的誘導(dǎo)能力，相較之下，辛 伐他汀酸(化合物4)則需在濃度4yM條件下才能有效誘導(dǎo)礦化。我們推測(cè)該差異是因?yàn)閮苫?合物進(jìn)入細(xì)胞能力不同所導(dǎo)致。其中，水溶性優(yōu)于辛伐他汀的化合物7也在濃度4iiM條件下 呈現(xiàn)明顯誘導(dǎo)細(xì)胞礦化能力，且相當(dāng)于辛伐他汀（lyM)和辛伐他汀酸(4iiM)。
[0074] Fleming團(tuán)隊(duì)指出斑馬魚的骨骼的基因類型、生理特征與生長模式均相似于人類， 且相似度都高于老鼠，適合做為造骨藥物的篩選平臺(tái)。本發(fā)明也以斑馬魚為測(cè)試骨生成的 動(dòng)物模型，評(píng)估了衍生化合物1-F、2-F、7與辛伐他汀的促進(jìn)造骨能力，更分析化合物2-F于 斑馬魚活體的骨靶向能力，結(jié)果見圖9和圖10。
[0075]以calcein為正向控制組(其為生物體活體標(biāo)本的礦物質(zhì)的染色選擇）。斑馬魚在 喂食calcein后，可經(jīng)由熒光顯微鏡的觀察在骨骼上的熒光呈色（圖9a的斑馬魚側(cè)面與正面 觀察）；如圖9b顯示，斑馬魚喂食化合物2-F后，骨骼上也有熒光呈色，證明化合物2-F可以標(biāo) 靶至骨骼。
[0076] 投予化合物1-F、2_F與辛伐他汀，測(cè)試化合物對(duì)于成長中斑馬魚的骨頭生成影響。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化合物1-F可促進(jìn)骨頭生長，并相較于未投藥組別(control)增生了 50%，辛伐他 汀組和不含辛伐他汀的化合物2-F組都無法促進(jìn)骨頭生長;如圖9c所示，比較化合物1-F和 2-F，其結(jié)構(gòu)差異為有或無3，5-二羥基戊酯衍生物基團(tuán)，因此推論化合物1-F促進(jìn)骨頭生長 的來源應(yīng)為3,5_二羥基戊酯衍生物基團(tuán)。再者，F(xiàn)leming也曾報(bào)導(dǎo)辛伐他汀對(duì)于斑馬魚骨頭 無法呈現(xiàn)任何生長效益，或許呼應(yīng)了辛伐他汀對(duì)人體骨骼影響不一之說。本發(fā)明也再度觀 察到相同現(xiàn)象，同時(shí)，證明修飾有骨革G向勝肽的化合物1-F不僅能成功地革E1向至骨頭，對(duì)于 人類骨頭生長的促進(jìn)應(yīng)極具潛力。
[0077] 由前述實(shí)驗(yàn)中選出整體表現(xiàn)最優(yōu)異的非寡肽衍生物7,在斑馬魚骨質(zhì)提升研究中， 被證實(shí)不論以0.1與lyM濃度處理，均可促進(jìn)斑馬魚的骨頭生長，較未投藥組別增加范圍在 30~50%之間；如圖10所示，顯然地，雖未具有靶向載體仍可促進(jìn)骨質(zhì)增生，顯然3,5_二羥 基戊酸的酰胺類似物確實(shí)可以達(dá)到造骨的功效。
[0078] 結(jié)果表明，以聚天冬氨酸肽修飾的3,5_二羥基戊酸酰胺類似物，可增強(qiáng)骨質(zhì)的選 擇性和骨質(zhì)生成能力，并具有減輕毒性的效果。此類衍生物改善他汀類藥物的骨質(zhì)增生能 力，此外化合物1-F和7對(duì)于斑馬魚的骨骼具有具體的骨質(zhì)增加作用，表明了3,5_二羥基戊 酸酰胺類似物對(duì)于人類骨質(zhì)增加的潛力。3,5_二羥基戊酸的類似物可成為新穎的骨質(zhì)同化 制劑，用于治療人類骨質(zhì)低下疾病。相較于辛伐他汀抑制HMG-CoA還原酶作用，化合物1-F則 以強(qiáng)化3,5_二羥基戊酸的類似物影響骨質(zhì)途徑并非經(jīng)由甲羥戊酸(MVA)途徑。本研究是首 次以化學(xué)結(jié)構(gòu)需求論及，HMG-CoA還原酶抑制作用不是骨形成的必要條件。
[0079] 實(shí)驗(yàn)方法(Materials and methods)
[0080] 細(xì)胞存活率性測(cè)定（Cytotoxicity assay)
[0081] 化合物丨-F以含有3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3_羧基甲氧基苯基)-2-(4_磺苯 基）_2H_四挫鐵（3_(4，5-dimethyl-thiazol_2-yl )-5-(3-carboxymethoxyphenyl )-2-(4_ 811]^(^1161171)-211-丨61^32〇1；[11111，]\^3)方式分析細(xì)胞毒性。96孔板中，人類脂肪干細(xì)胞 (hADSC)以每孔6xl0 3個(gè)為初始培養(yǎng)密度，培養(yǎng)在k培養(yǎng)液（1(6以丨111〇〇7丨6-3?]\1，618(：0-Invitrogen Corporation);細(xì)胞滿盤后，含有化合物1-F的k培養(yǎng)液當(dāng)作實(shí)驗(yàn)組，未含有化 合物1-F的為空白試驗(yàn)組，以此在37°C下培養(yǎng)3天;加入MTS試劑培養(yǎng)3小時(shí)，再移除k培養(yǎng)液 且以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS)清洗，并加入100yL二甲基亞砜 (dimethyl sulfoxide，DMS0)至孔板中，幫助甲臘(formazan)溶解，吸取出含有甲臘的二甲 基亞砜溶液，以波長490nm檢測(cè)吸收值，數(shù)值大小得以判斷細(xì)胞的存活。
[0082] 化合物4~11以MTT方式分析細(xì)胞毒性。D1細(xì)胞以每孔5x 103個(gè)為初始培養(yǎng)密度， 培養(yǎng)在骨培養(yǎng)液。該骨培養(yǎng)液為含有10%胎牛血清(Fetal bovine Serum，F(xiàn)BS)、100U/mL盤 尼西林（penicillin)、lOOug/mL鏈霉素（streptomycin)、100mg/mL抗壞血酸（ascorbic acid)、1 %非必需氨基酸（non-essential amino acids，NEAA)、1 ? 5g碳酸氫鈉（sodium bicarbonate)的DMEM培養(yǎng)液基。細(xì)胞滿盤后，含有化合物4~11的骨培養(yǎng)液當(dāng)作實(shí)驗(yàn)組，未 含有化合物4~11的為空白試驗(yàn)組，以此在37°C下培養(yǎng)3天;加入MTT試劑培養(yǎng)3小時(shí)，再移除 骨培養(yǎng)液且以PBS緩沖液清洗，并加入100此DMS0至孔板中，幫助甲臘溶解，吸取出含有甲 臘的二甲基亞砜溶液，以波長595nm檢測(cè)吸收值，數(shù)值大小得以判斷細(xì)胞的存活。
[0083] 3-羥基-3 -甲基戊二酰-輔酶A還原酶抑制作用（HMG-Co A r e du c t a s e inhibition):配制含有100處3-羥基-3-甲基戊二酰-輔酶A還原酶、330處原型煙酰胺腺嘌 呤二核苷酸磷酸(NADPH)、2%二甲基亞砜(DMS0)、BSA(lmg/mL)的0.1M磷酸緩沖液，在放入 不同濃度的化合物1與4~11后，混合5分鐘，再加入HMG-CoA還原酶(最終濃度為17.4nM);之 后，以340nm檢測(cè)其吸收值，再用軟件Sigma 10以nonlinear least-squares分析IC5Q，以此 判斷化合物是否抑制HMG-CoA還原酶的作用。
[0084] D1 細(xì)胞的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)（Procedures for culture and osteoinduction of D1 cells):經(jīng)由美國（American Type Culture Collection,ATCC)購買的D1 細(xì)胞，將D1 細(xì)胞以 400yL骨培養(yǎng)液（BM prepared with DMEM, 10%FBS，100U/mL penicillin, lOOyg/mL streptomycin, lOOmg/mL ascorbic acid, 1 %NEAA, 1.5g sodium bicarbonate)培養(yǎng)在48 孔板，初始培養(yǎng)的細(xì)胞密度于每孔為3xl04個(gè);待細(xì)胞滿盤后，置換含有化合物1的骨培養(yǎng) 液，對(duì)空白試驗(yàn)組為沒有添加化合物1的培養(yǎng)液，培養(yǎng)3天后，再置換誘導(dǎo)成骨細(xì)胞礦化培養(yǎng) 液。該成骨細(xì)胞礦化培養(yǎng)液包括HT 2MP-甘油磷酸（0-glycerophosphate )、1(T7M dexamethasone，每2天更換一次誘導(dǎo)成骨細(xì)胞礦化培養(yǎng)液;在設(shè)定培養(yǎng)天數(shù)下，將孔板中的 培養(yǎng)液移除且以PBS緩沖液清洗，再以10 %福爾馬林(formal in)固定細(xì)胞，時(shí)間為30分鐘； 之后，移除福爾馬林且以水清洗細(xì)胞，直至無福爾馬林味道，并靜置和干燥12小時(shí)，再以200 此的10 %醋酸水溶液混合30分鐘，取其上清液且測(cè)定415nm的吸收值，此讀值的空白與試驗(yàn) 組的比較為誘導(dǎo)細(xì)胞礦化的能力差異。
[0085] 化合物4~11的誘導(dǎo)細(xì)胞礦化的能力則如前所述方法進(jìn)行評(píng)估，但是誘導(dǎo)成骨細(xì) 胞礦化培養(yǎng)液內(nèi)不添加地塞米松(dexamethasone)。
[0086] 化合物的骨標(biāo)革巴作用（Bone Targeting of test compounds):以AB strain的斑 馬魚仔魚為測(cè)試對(duì)象，在28°C下以Hank緩沖液（13.7mM NaCl，540yM KCl，25yM Na2HP〇4,44y M KH2P〇4,300yM CaCl2，100yM MgS〇4,420yM NaHC03，pH 7.4)培養(yǎng);2dpf的仔魚被培養(yǎng)在含 3.2!1^測(cè)試化合物的24孔板中，5天后，以3-胺基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽（^1(^11^-11161：11&1168111；1^0仙七6)進(jìn)行犧牲仔魚，再將仔魚以3%輕丙甲纖維素(11161：1171-〇611111〇86)水溶 液固定于載玻片上，利用Leica DM-6000CS焚光顯微鏡（Leica Instruments Inc.， Wetzlar，Germany)進(jìn)行影像拍攝，快門設(shè)定為60秒。
[0087] 化合物誘發(fā)的成骨作用（Bone formation induced by test compounds):孵化2 天的斑馬魚仔魚被培養(yǎng)在24孔板，并投予欲測(cè)試的化合物，經(jīng)過5天后，孵化7天的斑馬魚仔 魚被移除24孔板至6公分的圓盤中，以緩沖液清洗仔魚表面;將仔魚放入含有0.2% Calcein 水溶液中，10分鐘后，取出仔魚并清洗仔魚表面，再將仔魚放入水中10分鐘，讓未染于骨頭 的081〇6；[11擴(kuò)散出仔魚體內(nèi)；隨后，以3-胺基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽（1：1'；[03；[116-11161：1^116-8111；1^0仙七6)進(jìn)行犧牲仔魚，再將仔魚以3%輕丙甲纖維素(11161：1171-0611111086)水溶液固定 于載玻片上，利用Leica Z16AP0顯微鏡進(jìn)行影像拍攝，快門設(shè)定為200ms，圖像以NIH Image J的方式計(jì)算焚光量(NIH open software with Macbiophotonics plugins)，計(jì)算新生成 的骨頭量以相對(duì)于空白試驗(yàn)組的百分比呈現(xiàn)。
[0088] 統(tǒng)計(jì)分析(Statistical analysis):實(shí)驗(yàn)結(jié)果，皆以平均值加減標(biāo)準(zhǔn)誤差(Mean土 SEM)表示。統(tǒng)計(jì)間的差異，在非配對(duì)及配對(duì)樣本中分別采用非相依性的Student ' s t-test。 當(dāng)多個(gè)治療組與對(duì)照組相比較，采用單因子變異數(shù)分析(one way AN0VA)，或雙因子重復(fù)測(cè) 量變異數(shù)分析（two way repeated measures AN0VA)。當(dāng)變異數(shù)分析（Analysis of variance，AN0VA)呈現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異時(shí)，米用Dunneti/ s或Student-Newman-Keuls test。卩值 小于0.05,表示實(shí)驗(yàn)值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著性差異。數(shù)據(jù)和圖面的分析，在IBM計(jì)算機(jī)運(yùn)用 SigmaPlot軟件（版本8 ? 0，Chicago，IL，U? S ? A?)和SigmaStat (版本2 ? 03，Chicago，IL， U.S.A.)〇
[0089] 本發(fā)明以下面的實(shí)施例予以示范闡明，但本發(fā)明不受下述實(shí)施例所限制。本發(fā)明 所用的藥物、生物材料皆市售易于取得，下列僅為示例可取得的管道。
[0090] 實(shí)施例1:
[0091] 化合物1-F的制備:使用芴甲氧羰基(Fmoc)的保護(hù)策略進(jìn)行固相勝肽合成方法，合 成勝肽。一般來說，先秤取芴甲氧羰基-甘氨酸預(yù)載于王樹脂(〇.79mmol/g)于反應(yīng)容器中， 再添加5毫升二甲基甲酰胺(0;[1]161:117]^〇1'1]^1]11(16,0|/〇 ：7)，浸泡1小時(shí)后再進(jìn)行后續(xù)步驟。配置 20%的呱啶于二甲基甲酰胺中，其為去芴甲氧羰基的保護(hù)基的試劑，以下均以DEP為簡(jiǎn)稱； 待移除原先5毫升二甲基甲酰胺，即加入DEP進(jìn)行芴甲氧羰基保護(hù)基的去保護(hù)，經(jīng)過10分鐘 反應(yīng)后，芴甲氧羰基保護(hù)基順利被移除；配制兩倍過量的氨基酸和六氟磷酸苯并三唑-1-基 -氧基三 P 比 口各烷基磷（Benzotriazol-1-yl-oxytri-pyrrolidinophosphonium-hexafluor〇-phosphate，PyBOP)于反應(yīng)瓶中，再配制 0.4M N-甲基嗎啉（N_me thy 1 morpholine)于二甲基甲酰胺中，其為固相勝肽合成的活化試劑，以下均以ACT為簡(jiǎn)稱，ACT 也同被置入反應(yīng)瓶中，反應(yīng)的時(shí)間為所設(shè)定的時(shí)間；待結(jié)束后，將已配制好的終止試劑，其 為100此乙酸酐(Ac 20)于2mL二甲基甲酰胺中，反應(yīng)30分鐘即可完成。進(jìn)而，配制移除試劑， 其組成為95%的三氟乙酸(Trifluoroacetic acid，TFA)水溶液，以下簡(jiǎn)稱CLE，在完成所有 的反應(yīng)條件后，取出所有樹脂且與CLE反應(yīng)90分鐘，再移除CLE后可獲得勝肽出產(chǎn)物。反應(yīng)過 程中，以含有茚三酮(Ninhydrin)的凱薩試劑進(jìn)行監(jiān)測(cè)。配制凱薩試劑以便監(jiān)測(cè)反應(yīng)的進(jìn) 行，其組成為0.28M茚三酮于乙醇溶液、42.37M苯酚于乙醇溶液和吡啶。反應(yīng)過程中，取些許 樹脂以凱薩試劑檢測(cè)，樹脂上的勝肽如有胺基會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，稱之為正向結(jié)果（positive result)，反之，樹脂上的勝肽沒有胺基會(huì)呈現(xiàn)微淡黃色。取移除芴甲氧羰基后的0.251g (0.2mmol)樹脂與N-芴甲氧羰基1-[1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代環(huán)己基亞甲基)-3_甲基 丁基]-L-賴氨酉愛（N-a-Fmoc_N-e-1-(4，4-dimethyl_2，6-diox〇-cyclohex_l-ylidene)-3-methylbutyl-L-lysine，F(xiàn)moc-Lys( lvDde)-〇H)反應(yīng)，4小時(shí)后反應(yīng)順利結(jié)束，再以ACT終止反 應(yīng)；經(jīng)DEP移除芴甲氧羰基后，0.162g(0.4mmol)的辛伐他汀搭配10%二異丙基乙基胺 (di isopropyl-ethylamine)的二甲基甲酰胺溶液進(jìn)行反應(yīng)，在200W的微波照射下，溫度控 制在105°C，經(jīng)過100分鐘后可完成反應(yīng)，再以ACT終止反應(yīng)，獲得化合物12。隨后使用4%聯(lián) 胺(hydrazine)的二甲基甲酰胺溶液移除1vDde保護(hù)基，經(jīng)過20分鐘后，1vDde保護(hù)基可順利 被移除，再依序合成六個(gè)天門冬胺酸，其方法如之前所介紹的固相勝肽合成方法，反應(yīng)時(shí)間 分別為30、45、60、80、80和90分鐘，獲得化合物13。同樣地，賴氨酸也被合成上序列，反應(yīng)時(shí) 間為4小時(shí)，獲得化合物14;然后，移除芴甲氧羰基保護(hù)基，合成上聚乙二醇，反應(yīng)時(shí)間為2小 時(shí);再者，移除 lvDde保護(hù)基，合成上氟硫氰酸焚光素(Fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC)， 反應(yīng)時(shí)間為1小時(shí)，再經(jīng)CLE步驟可得化合物1-F。
[0092] 實(shí)施例2:
[0093]化合物1的制備：比照化合物1-F的實(shí)施例步驟，制備到化合物14;再以2小時(shí)合成 上聚乙二醇，之后，以30分鐘修飾上乙烯基，經(jīng)CLE步驟后可得化合物1。
[0094] 實(shí)施例3:
[0095]化合物2-F的制備:取移除芴甲氧羰基后的0.251g(0.2mmol)樹脂依序合成六個(gè)天 門冬胺酸，反應(yīng)時(shí)間分別為30、45、60、80、80和90分鐘，獲得化合物16。賴氨酸也被合成上序 列，反應(yīng)時(shí)間為4小時(shí)；隨后，再分別修飾上聚乙二醇與氟硫氰酸熒光素，反應(yīng)時(shí)間依序?yàn)? 與1小時(shí)，再經(jīng)CLE步驟可得化合物2-F。
[0096] 實(shí)施例4:
[0097] 化合物1的純化:配制沖提液為甲醇的水溶液(CH30H: H20 = 7:3)，且含有0.1 %三氟 乙酸，將初產(chǎn)物溶于lmL沖提液中，再注射進(jìn)入中壓液相層析系統(tǒng)，其中管柱內(nèi)容物為C18， 經(jīng)不同時(shí)間點(diǎn)下收集，經(jīng)薄層層析鑒定，收集Rf為0.4 (CH30H: H20 = 7:3)的單一產(chǎn)物，可獲得 化合物1，產(chǎn)率為25 %。高效能液相層析分析中，管柱內(nèi)容物也為C18，沖提液為0.1 %三氟乙 酸的甲醇溶液，流速為每分鐘〇.2mL，紫外光偵測(cè)波長為220nm，得化合物1的滯留時(shí)間為7分 鐘，純度為95 %。
[0098] 1H-NMR(400MHz,D2〇)：85.32(m,5H),4.15(m,8H),4.02(br,2H),3.61(m,44H),3.32 (s,3H),3.10(m,4H),2.83(m,12H),1.91(s,3H),1.68(m,10H),1.46(br,12H),1.35(br, 12H),1.19(m,10H).
[0099] Mass(MALDI-TOF) :found for 2024Da(M+H+) ;calcd.for C89H145N11O41: 2023.96Da.
[0100] 實(shí)施例5:
[0101 ]化合物1-F的純化:沖提液為甲醇，將初產(chǎn)物溶于lmL沖提液中，再注射進(jìn)入LH20管 柱，經(jīng)不同時(shí)間點(diǎn)下收集，經(jīng)薄層層析鑒定，收集Rf為0.1 (CH30H: H20 = 1:1)的單一產(chǎn)物，可 獲得化合物1-F，產(chǎn)率為24%。高效能液相層析分析中，管柱內(nèi)容物為C18，沖提液為0.1 %三 氟乙酸的甲醇溶液，流速為每分鐘0.4mL，紫外光偵測(cè)波長為220和496nm，得化合物1-F的滯 留時(shí)間為8.2分鐘，純度為95%。
[0102] 4-匪1?(40冊(cè)抱，&。6七〇116-(16):88.50(1^，111)，7.92(111，11〇,7.16(111，311)，6.71(111， llH)，4.74(m，6H)，4.30(s，2H)，4.13(m，6H)，3.58(m，44H)，3.30(m，3H)，2.89(m，12H)，1.84 (m,16H),1.53(br,8H),1.27(m,18H),0.88(m,2H).
[0103] Mass(MALDI-TOF) :found for 2469Da (M+H20+NaCl+Na+) ； ca 1 cd . f or C108H154N12O45S: 2369.00.
[0104] 實(shí)施例6:
[0105]化合物2-F的純化:沖提液為水，將初產(chǎn)物溶于lmL沖提液中，再注射進(jìn)入LH20管 柱，經(jīng)不同時(shí)間點(diǎn)下收集，經(jīng)薄層層析鑒定，收集Rf為0.6 (CH3CN: H20 = 1:1)的單一產(chǎn)物，可 獲得化合物2-F，產(chǎn)率為26 %。高效能液相層析分析中，管柱內(nèi)容物為C18，沖提液為0.1 %三 氟乙酸的甲醇溶液，流速為每分鐘0.4mL，紫外光偵測(cè)波長為220和496nm，得化合物2-F的滯 留時(shí)間為6.4分鐘，純度為95 %。
[0106] iH-NMRGOOMHz.D〗。）：S7.63(br，lH)，7.53(m，lH)，7.23(m，2H)，7.04(m，2H)，6.47 (m，5H)，4.46(m，5H)，4.05(m，2H)，3.88(m，2H)，3.53(m，44H)，3.25(s，3H)，2.56(m，12H)， 1.61(m,2H),1.05(m,4H).
[0107] Mass(MALDI-TOF) :found for 1765Da(M+H+) ； calcd . for C76H104N10O36S : 1764.63Da.
[0108] 實(shí)施例7:
[0109]化合物3的制備：辛伐他?。?.050g，0 . lmmole)溶解在lOmL的無水四氫呋喃溶液 中，再加入〇? lmL異丙基格林那試劑（isopropyl Grignard reagent)，濃度也為0? lmmole， 反應(yīng)64小時(shí)后，經(jīng)減壓濃縮移除溶劑后，得無色油狀物的初產(chǎn)物；初產(chǎn)物以二氯甲烷 (CH2C1 2)和飽和食鹽水進(jìn)行萃取，重復(fù)操作3次，經(jīng)移除溶劑后，可得0.055g的白色固體，即 為化合物3,產(chǎn)率為36 %。
[0110] 實(shí)施例8:
[0111] 化合物4的制備:辛伐他汀(0.052g，0. lmmole)溶解在10mL的乙醇中，再加入lmL氫 氧化鈉(NaOH)O.lN水溶液，在室溫下反應(yīng)10分鐘可結(jié)束反應(yīng);將乙醇移除后加入0.1N鹽酸 水溶液，直至pH值為6,再進(jìn)行冷凍干燥而獲得白色固體;取丙酮加入白色固體中，使得氯化 鈉以固體方式析出，取出上清液且移除溶劑，最后，可以獲得〇.〇42g的白色固體，產(chǎn)率為 80% 〇
[0112] 4 MMR(400MHz，CDC13) :5.95(d，J=10Hz，lH)，5.75(m，lH)，5.47(br，lH)，5.33 (br,lH),4.17(br,lH),3.67(br,lH),2.40(m,3H),2.22(m,2H),1.92(br,2H),1.543(m, 5H),1.30(m,2H),1.08(m,llH),0.86(d ,J = 6Hz,3H),0.80(t ,J = 8Hz,3H).
[0113] Mass(ESI,m/z):437(M+H)+.
[0114] 實(shí)施例9:
[0115] 化合物5的制備：辛伐他汀（0 ? 102g，0 ? 2mmo 1 e)與乙醇胺(0 ? 025g，0 ? 2mmole)溶解 在5mL的二氯甲烷中，并加入N-甲基嗎啉(0.2mL，1.9mmo 1 e)，室溫下反應(yīng)4小時(shí)，反應(yīng)可順利 結(jié)束;經(jīng)減壓濃縮移除溶劑后，可得黃色油狀物的初產(chǎn)物。初產(chǎn)物以些許二氯甲烷溶解，放 入分液漏斗中，且補(bǔ)充二氯甲烷，二氯甲烷的總體積為30mL，再加入30mL的飽和食鹽水，進(jìn) 行萃取而留下二氯甲烷溶液，此后，再操作2次萃取，總次數(shù)為3次;最后，利用無水硫酸鈉干 燥溶液中的水，再移除硫酸鈉固體和溶劑，可得〇 . 09lg的白色固體，即為化合物5，產(chǎn)率為 80% 〇
[0116] 4 NMR(400MHz，CDC13) ? :7.16(t，J = 6Hz，lH)，5.94(d，J = 9Hz，lH)，5.74(q，J = 4and 6Hz,1H),5.46(br,1H),5.33(br,1H),4.24(m,2H),3.67(m,4H),3.37(m,2H),2.30(m, 5H),1.91(m,2H),1.52(m,5H),1.12(m,13H),0.84(d ,J = 7Hz,3H),0.79(t ,J = 7Hz,3H).
[0117] 13C-NMR(CDC13，100MHz): 5178.4,172.7,133.0,131.5,129.4,128.2,71.8,69.1， 68.2,61.2,43.5,42.9,42.7,42.1,37.5,36.3,34.8,32.9,30.4,27.2,24.7,24.6,24.2, 23.0,13.8,9.2.
[0118] Mass (ESI ,m/z): 502 (M+Na) +. HRMS cald. for C27H45N06Na: 502.3144 ； found: 502.3142.
[om] 實(shí)施例10:
[0120] 化合物6的制備：比照化合物5的制備過程，將乙醇胺改為丙醇胺（0.018g， 0.2mmo 1 e)，反應(yīng)時(shí)間同為4小時(shí)，可得0.101 g的白色固體，產(chǎn)率為86 %。
[0121] 4-匪1?(4001抱，〇0(：13):86.95(1^，11〇,5.96((1，了=10泡，11〇，5.76(br，lH)，5.48 (br,lH),5.38(m,lH),4.19(br,lH),3.75(br,lH),3.63(m,3H),3.38(br,2H),2.31(m,5H), 1.92(m,2H),1.69(m,2H),1.53(m,5H),1.13(m,13H),0.85(d ,J = 7Hz,3H),0.80(t ,J = 8Hz, 7H).
[0122] 13C-NMR(CDC13，100MHz): 5178.4,172.8,133.0,131.5,129.5,128.2,72.0,69.3, 68.2.59.4.43.4.43.0. 42.5.37.7.36.3.36.1.34.7.33.0.32.9.31.9.30.4.27.2.24.8, 24.1.23.1.13.9.9.3.
[0123] Mass (ESI ,m/z): 516 (M+Na) +. HRMS cald. for C28H47N〇6Na: 516.3300 ； found: 516.3297.
[0124] 實(shí)施例11:
[0125] 化合物7的制備：比照化合物5的制備過程，將乙醇胺改為聚乙二醇胺（0.025g， 0.2mmo 1 e)，反應(yīng)時(shí)間為2小時(shí)，可得0.113g的白色固體，產(chǎn)率為90%。
[0126] iH-NMRGOOMHz.CDCh) :S7.14(br，lH)，5.95(d，J = 10Hz，lH)，5.75(dd，J = 6and 6Hz,lH),5.47(br,lH),5.36(m,lH),4.20(br,,lH),3.72(m,4H),3.55(m,5H),3.44(m,2H), 2.30(m,5H),1.92(m,2H),1.52(m,5H),1.12(m,llH),0.84(d ,J = 7Hz,3H),0.79(t ,J = 8Hz, 3H).
[0127] 13C-NMR(CDC13，100MHz): 5178.3,172.2,133.0,131.5,129.4,128.2,72.2,72.0, 69.5.69.4.68.2.61.4.43.3.42.9.42.5.39.1.37.6.36.2.34.7.33.0. 30.4.27.2.24.7, 24.6.24.2.23.0. 13.8.9.3,
[0128] Mass (ESI ,m/z): 546 (M+Na) +. HRMS cald. for C29H49N〇7Na: 546.3407 ； found: 546.3404.
[0129] 實(shí)施例12:
[0130]化合物8的制備：辛伐他汀(0.051g,0. lmmole)溶解在4mL的乙醇中，再加入聯(lián)胺 (60yL，5. Ommole)，在室溫下反應(yīng)2天，則可將溶液移除溶劑而獲得黃色油狀物的初產(chǎn)物;將 初產(chǎn)物以二氯甲烷和飽和食鹽水進(jìn)行萃取，在移除溶劑后可得〇.〇38g的白色固體，產(chǎn)率為 70% 〇
[0131] 咕 NMR(400MHz，CDCl3):5.98(d，J=10Hz，lH)，5.77(m，lH)，5.49(m lH)，5.48(br， 1H),4.20(br,lH),3.78(m,lH),2.45(br,lH),2.34(m,3H),2.23(d,J=10Hz,lH),1.87(m, 2H),1.58(m,5H),1.21(m,2H),1.12(m,llH),0.86(d ,J = 7Hz,3H),0.82(t ,J = 8Hz,3H).
[0132] 13C NMR(100MHz，CDC13): .178.6,132.9,131.4,129.6,128.3,125.9,72.1,69.3, 68.1.43.0. 42.3.37.9.35.7.34.7.33.3.32.9.30.3.27.2.24.8.24.7.23.8.23.1.13.9, 9.3.
[0133] Mass (ESI ,m/z): 473(M+Na)+. HRMS cald. for C25H42N2〇5Na: 473.2986 ； found: 473.2987.
[0134] 實(shí)施例13:
[0135] 化合物9的制備:辛伐他汀(0.051g，0. lmmole)和2-胺甲基R比啶（llyL，0. llmmole) 溶解在12mL的1，4_環(huán)氧己烷中，室溫下反應(yīng)7天，則可收起反應(yīng)且移除溶劑，可得黃色油狀 物的初產(chǎn)物;將初產(chǎn)物以正向硅膠管柱分離，在不同時(shí)間點(diǎn)下收集，經(jīng)薄層層析鑒定，收集 R f為0.25(CH2C12:CH30H= 10:0.2)的單一產(chǎn)物，可獲得化合物9，產(chǎn)率為35%。
[0136] 匪R(400MHz，CDC13) :8.51(d，J = 4Hz，lH)，7.68(td，J = 8and 2Hz，lH)，7.27 (br,lH) ,7.21(m,2H) ,6.97( t, J = 6Hz , 1H), 5.98(d, J = 9Hz , 1H), 5.78(dd ,J = 6Hz , 1H), 5.49(t ,J = 3Hz,lH),5.39(qui ,J = 2and 3Hz, 1H) ,4.69(dd ,J = 6Hz, 1H) ,4.50(dd ,J = 5Hz, lH),4.25(m,lH),3.80(m,lH),2.43(m,4H),2.23(m,lH),1.94(m,2H),1.56(m,7H),1.14(m, llH),0.87(d ,J = 7Hz,3H),0.82(t ,J = 7Hz,3H).
[0137] 13C 匪R(100MHz，CDC13):?178.1，172.3，156.2，148.9，137.0，133.2，131.7, 129.5.128.3.122.5.122.0. 72.3.69.9.68.1.44.2.43.8.43.0.42.5.37.7.36.2.34.7, 33.0. 30.5.27.3.24.8.24.2.23.1.13.9.9.3,
[0138] 實(shí)施例14:
[0139] 化合物10的制備:辛伐他汀(0.051g，0.1mmole)和丙基胺（18yL，0.3mmole)溶解在 12mL的四氫咲喃(Tetrahydrofuran，THF)中，室溫下反應(yīng)7天，貝lj可收起反應(yīng)且移除溶劑，可 得黃色油狀物的初產(chǎn)物;將初產(chǎn)物以正向硅膠管柱分離，在不同時(shí)間點(diǎn)下收集，經(jīng)薄層層析 鑒定，收集Rf為〇. 25(CH2C12:CH30H=8:0.2)的單一產(chǎn)物，可獲得化合物10，產(chǎn)率為48%。
[0140] 匪R(400MHz，CDC13) :6.28(br，lH)，5.98(d，J=10Hz，lH)，5.83(m，2H)，5.49 (br,lH) ,5.43(q,J = 3Hz,lH) ,5.17(m,lH) ,4.72(br,lH) ,4.21 (qua ,J = 5and 7Hz,lH), 3.89(t,J=4Hz,2H),3.79(m,lH),3.62(br,lH),2.39(m,4H),2.23(m,lH),1.79(m,2H), 1.56(m,7H),1.08(m,llH),0.86(d ,J = 7Hz,3H),0.82(t ,J = 7Hz,3H).
[0141] 13C 匪R(100MHz，CDC13):?178.4,171.7,134.0,133.0,131.4,129.6,128.2， 116.4.72.3.69.6.68.1.43.0. 42.9.42.3.41.7.37.9.35.8.34.6.33.2.32.9.30.3.27.2, 24.8.24.7.23.9.23.1.13.9.9.3.
[0142] Mass (ESI ,m/z): 498 (M+Na) +. HRMS cald. for C28H45N〇5Na: 498.3190 ； found: 498.3189.
[0143] 實(shí)施例15:
[0144] 化合物11的制備:辛伐他汀(0.051g，0.1mmole)和丙基胺（18yL，0.3mmole)溶解在 12mL的四氫呋喃中，室溫下反應(yīng)7天，則可收起反應(yīng)且移除溶劑，可得黃色油狀物的初產(chǎn)物； 將初產(chǎn)物以正向硅膠管柱分離，在不同時(shí)間點(diǎn)下收集，經(jīng)薄層層析鑒定，收集Rf為0.3 (CH 2C12: CH30H= 10:0.2)的單一產(chǎn)物，可獲得化合物11，產(chǎn)率為60%。
[0145] 咕 NMR(400MHz，CDCl3):6.23(t，J = 3Hz，lH)，5.97(d，J=10Hz，lH)，5.76(dd，J = 4and 6Hz, 1H), 5.48(br, 1H), 5.40(qui ,J = 2and 3Hz, 1H) ,4.80(br 1H) ,4.19(m, 1H) ,3.74 (m,2H),3.21(m,2H),2.27(m,5H),1.93(m,2H),1.54(m,7H),1.15(m,llH),0.94(t,J=7Hz, 3H),0.83(m,6H).
[0146] 13C 匪R(100MHz，CDC13): .178.3，171.9，133.0，131.5，129.5，128.2,72.3,69.6， 68.1.43.0. 42.3.41.0.37.8.35.9.34.6.33.1.32.9.30.4.27.2.24.8.24.6.24.023.1, 22.7.13.9.11.3.9.3.
[0147] Mass (ESI ,m/z): 500 (M+Na) +. HRMS cald. for C28H47N〇5Na: 500.3346 ； found: 500.3348.
[0148] 本發(fā)明實(shí)屬難能的創(chuàng)新發(fā)明，深具產(chǎn)業(yè)價(jià)值，援依法提出申請(qǐng)。此外，本發(fā)明可以 由本領(lǐng)域技術(shù)人員做任何修改，但不脫離如所附申請(qǐng)專利范圍所要保護(hù)的范圍。
[0149] 其他實(shí)施例
[0150] 實(shí)施例1. 一種改善生物個(gè)體內(nèi)骨質(zhì)低下所介導(dǎo)病癥或疾病的組成物，其包括結(jié)構(gòu) 式I所示的3，5_二羥基戊酸(3，5_dihydroxypentanoic acid)衍生物。
[0152] 實(shí)施例2. -種改善生物個(gè)體內(nèi)骨質(zhì)低下所介導(dǎo)病癥或疾病的組成物，其包括結(jié)構(gòu) 式II所示化合物，其中Rt選自下列其中之一 ：Q-Cn)烷基、羥基、取代的心-心。烷胺基、-N-(CrCn))烷基烷基-胺基、-NH-胺基；-N-^-Ckj)不飽和烷基、含氧原子的5 元芳香環(huán)、含氧原子的6元芳香環(huán)、含氮原子的5元芳香環(huán)、含氮原子的6元芳香環(huán)。
結(jié)構(gòu)式II:
[0153]
【主權(quán)項(xiàng)】
1.組合物在制備藥物或食品中的用途，所述藥物或食品用于治療哺乳動(dòng)物骨質(zhì)低下， 其中，所述組合物包括結(jié)構(gòu)式I所示的3，5-二羥基戊酸衍生物，其中，X為氮原子或碳原子； R為氫基或(&-C4)烷基； Ra選自下列其中之一:Ci-Cio烷基、取代的Ci-Cio烷基、C3_C8環(huán)烷基、取代的C 3_C8環(huán)烷基、 苯胺基、取代的苯胺基、苯基Ci-CK)烷胺基、取代的苯基Ci-Cn)烷胺基、雙磷酸鹽類、四環(huán)素、 胺基酸、酸性寡勝肽、骨標(biāo)靶勝肽芣Rb選自下列其中之一:無取代基、乙?；@像基團(tuán)； "二二"表示單鍵或雙鍵； Rh選自下列結(jié)構(gòu)式(A)，（B)，（C)，（D)，（E)和(F)其中之一：RkSCi-Cs 烷基； RmSCi-Cs烷基或羥基； Rr^Ci-Cs烷基或羥基。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，Ra為取代的心-心。烷基，其中，取代基選自 下列其中之一:氫基、Ci-Cu)烷基、Ci-Cu)烷氧基Xi-Cs烷氧羰基、Ci-Cs酰氧基、C 3-C8環(huán)烷基、 苯基和取代的苯基。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，Ra為取代的C3-C8環(huán)烷基、取代的苯胺基、取 代的苯SCpCh)烷胺基之一，其中，取代基各自獨(dú)立地選自下列其中之一 烷基、氟原 子、氯原子、溴原子、碘原子、含氧原子的5元芳香環(huán)、含氧原子的6元芳香環(huán)、含氮原子的5元 芳香環(huán)、含氮原子的6元芳香環(huán)。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，Ra為酸性寡勝肽，所述酸性寡勝肽為選自 下列其中之一 :-Lys-(Asp)m-Lys-PEG、D/L-Aspm、D/L-Glu n，其中，m和η各自獨(dú)立地為1 至 10 的正整數(shù)。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，Ra為骨標(biāo)靶勝肽，所述骨標(biāo)靶勝肽選自下 列其中之一： Thr-Met-Arg-Asn-Pro-Ile-Thr-Ser-Leu-Ile-Ser-Val， Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His-Arg-Pr〇-Trp-Thr-Gly-Gly-Gly-Ser ? Lys-Glu-IlePr〇-Pr〇-Ile-Pr〇-Leu-Leu-Ala-Pr〇-Ser-Gly-Gly-Gly-Ser? Asn-Asn-Val-Ser-Gln-Lys-Trp-Gln-Gln-Arg-Leu-Ile-Gly-Gly-Gly-Ser ? Asn-Ser-Met-Ile-Ala-His-Asn-Lys-Thr-Arg-Met-His-Gly-Gly-Gly-Ser ? Gly-Ile-His-Val-Pr〇-Trp-Met-Pr〇-Pr〇-Val-Ala-Phe-Gly-Gly-Gly-Ser ? Gln-Arg-Ser-Trp-Thr-Leu-Asp-Ser-Ala-Leu-Ser-Met-Gly-Gly-Glu-Ser， Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pr〇-Asn-Gly-Gly-Gly-Ser ? Ser-Ser-Thr-Leu-Lys-Thr-Phe-Phe-Gly-Phe-Pr〇-Asp-Gly-Gly-Gly-Ser ? Asp-Ser-Ser-Asn-Pr〇-Ile-Phe-Trp-Arg-Pr〇-Ser-Ser-Gly-Gly-Gly-Ser ? Asn-Thr-Ser-His-Leu-Arg-Val-Lys-Leu-Pr〇-Thr-Pr〇-Gly-Gly-Gly-Ser ? Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pr〇-Asn-Gly-Gly-Gly-Ser ? Ala-Thr-Trp-Ser-His-His-Leu-Ser-Ser-Ala-Gly-Leu-Gly-Gly-Gly-Ser ? Ser-Tyr-Ser-Gln-Met-Asp-Pr〇-Pr〇-Arg-Ser-Leu-Pr〇-Gly-Gly-Gly-Ser ? Thr-Met-Arg-Asn-Pro-Ile-Thr-Ser-Leu-Ile-Ser-Val， Leu-Leu-Ala-Asp-Thr-Thr-His-His-Arg-Pro-Trp-Thr， Lys-Glu-Ile-Pr〇-Pr〇-Ile-Pr〇-Leu-Leu-Ala_Pr〇-Ser， Asn-Asn-Val-Ser-Gln-Lys-Trp-Gln-Gln-Arg-Leu-Ile， Asn-Ser-Met-Ile-Ala-His-Asn-Lys-Thr-Arg-Met-His， Gly-Ile-His-Val-Pr〇-Trp-Met-Pr〇-Pr〇-Val-Ala-Phe ? Gln-Arg-Ser-Trp-Thr-Leu-Asp-Ser-Ala-Leu-Ser-Met， Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pr〇-Asn ? Ser-Ser-Thr-Leu-Lys-Thr-Phe-Phe-Gly-Phe-Pr〇-Asp? Asp-Ser-Ser-Asn-Pr〇-Ile-Phe-Trp-Arg-Pr〇-Ser-Ser， Asn-Tyr-Ser-His-Leu-Arg-Val-Lys-Leu-Pro-Thr-Pro ? Ser-Gly-His-Gln-Leu-Leu-Leu-Asn-Lys-Met-Pr〇-Asn? Ala-Thr-Trp-Ser-His-His-Leu-Ser-Ser-Ala-Gly-Leu， Ser-Tyr-Ser-Gln-Met-Asp-Pr〇-Pr〇-Arg-Ser_Leu-Pr〇-Gly-Gly-Gly-Ser〇6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，Ra為其中，U選自下列其 中之一 ：-Lys、-Lys-(Asp-NHAc)J、-NHAc、-Lys-(Asp-)k-NHAc、（Asp-NHAc)】，J為 1 或2，K為正 整數(shù)且20 2 Κ 2 1。7. 組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于改善生物個(gè)體內(nèi)骨質(zhì)低下所介導(dǎo)病癥或 疾病的組成物，其中，所述組合物包括結(jié)構(gòu)式II所示化合物， 結(jié)構(gòu)式II:其中，Rt選自下列其中之一 ：Ci-Cn)烷基、羥基、Ci-Cn)烷胺基、-ΝΗ-(Ci-Cn))烷基-Rz、-NH-(Ci-C5)烷基 _0_(Ci-C5)烷基-Rz、-NH -胺基； Rz選自下列其中之一 不飽和烷基、羥基、胺基、含氧原子的5元芳香環(huán)、含氧原子 的6元芳香環(huán)、含氮原子的5元芳香環(huán)、含氮原子的6元芳香環(huán)。8. -種化合物，其特征在于，所述化合物為結(jié)構(gòu)式I所示的3，5-二羥基戊酸衍生物， 其中，X為氮原子或碳原子；R為氫基或(&-C4)烷基； Ra選自下列其中之一:Ci-Cio烷基、取代的&-&0烷基、c3-c8環(huán)烷基、取代的c 3-c8 環(huán)烷基、苯胺基、取代的苯胺基、苯基烷胺基、取代的苯基烷胺基、雙磷 酸鹽類、四環(huán)素、胺基酸、酸性寡勝肽、骨標(biāo)靶勝肽牙Rb選自下列其中之一:無取代基、乙酰基、顯像基團(tuán)； "二1="表示單鍵或雙鍵； Rh選自下列結(jié)構(gòu)式(A)，（B)，（C)，（D)，（E)和(F)其中之一：， Rk為&-C5烷基； 伽為&-(：5烷基或羥基； Rr^Ci-Cs烷基或羥基。9. 一種化合物，其特征在于，所述化合物為結(jié)構(gòu)式II所示化合物，其中，Rt選自下列其中之一 ：Ci-Cn)烷基、羥基、Ci-Cn)烷胺基、-NH-(Ci-Cn))烷基-Rz、-NH-(Ci-C5)烷基 _0_(Ci-C5)烷基-Rz、-NH -胺基； Rz選自下列其中之一 不飽和烷基、羥基、胺基、含氧原子的5元芳香環(huán)、含氧原子 的6元芳香環(huán)、含氮原子的5元芳香環(huán)、含氮原子的6元芳香環(huán)。
【文檔編號(hào)】A61K31/215GK105853993SQ201610051593
【公開日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年1月26日
【發(fā)明人】陳惠亭, 謝光展, 高佳麟
【申請(qǐng)人】高雄醫(yī)學(xué)大學(xué)