優(yōu)選約 7%w/wligtrosidealdehydeaglycon，
[0035] 約5_7%w/w，更優(yōu)選約6%w/w毛蕊花戒（verbascoside)，
[0036] 約4_6%w/w，更優(yōu)選約5%w/w松脂酸(口：[110代8；[1101)和去乙酰氧基松脂酸，
[0037] 約2_4%w/w，更優(yōu)選約3%w/w酪醇，
[0038] 約9-11 %w/w，更優(yōu)選約10%w/w羥基酪醇，
[0039] 約7_9%w/w，更優(yōu)選約8%w/w未經(jīng)確認(rèn)的多酸，和/或 [0040] 約32-34%￥/\￥，更優(yōu)選約33%￥/\￥多糖和低于約4%￥/\￥水分。
[0041]根據(jù)另外的優(yōu)選實(shí)施方案，該組合物的特征在于第一組分（即，番茄粉)和第二組 分（即，多酚提取物）的重量比為約100-95:0-5，更優(yōu)選99-96:1-4，甚至更優(yōu)選99-98:1-2， 優(yōu)選約98:2(w/w)。對(duì)于特別優(yōu)選的實(shí)施方案，即本發(fā)明的RED007( "Lycoprozen"）膳食，可 以表明98: 2的根據(jù)組分A的如本文中所述的番茄提取物和根據(jù)組分B的多酚提取物的重量 比是特別有利的。
[0042]發(fā)明人能夠證明，如本文中呈現(xiàn)和要求的組合物顯著地降低了促血管生成/促炎 性介質(zhì)VEGF和IL6的血清水平。令人驚訝地，如果與現(xiàn)有技術(shù)已知的番茄食品（36)相比，本 文中所述的番茄粉與本文中所述的多酚提取物的組合甚至導(dǎo)致血清中降低的VEGF和/或 IL6水平。因此，本發(fā)明還涉及本發(fā)明的組合物在用于降低促血管生成/促炎性介質(zhì)(如VEGF 和IL6)的方法中的用途。VEGF和IL6涉及癌發(fā)生和腫瘤進(jìn)展，特別是前列腺癌發(fā)生和腫瘤進(jìn) 展。
[0043] 因此，根據(jù)本發(fā)明的再一個(gè)方面，本發(fā)明的組合物適用于癌癥或炎癥的預(yù)防和/或 治療的方法。本發(fā)明的組合物能夠?qū)骨傲邢俚难装Y并且預(yù)防前列腺癌發(fā)作和/或進(jìn)展。所 述癌癥可以選自前列腺癌、結(jié)腸癌、乳癌、肺癌、腎癌、肝癌和/或其轉(zhuǎn)移。在特別優(yōu)選的實(shí)施 方案中，所述癌癥是前列腺癌。
[0044] 根據(jù)另外的優(yōu)選實(shí)施方案，本發(fā)明涉及用于預(yù)防癌癥，特別是前列腺癌的方法中 的組合物。
[0045] 本發(fā)明的再一個(gè)方面涉及本文中所述的組合物用作食品補(bǔ)充劑。因此，本發(fā)明還 涉及本文中所述的組合物作為食品補(bǔ)充劑的用途。
[0046] 用于根據(jù)本發(fā)明的方法中的組合物可以以藥物組合物和/或制劑的形式存在。這 樣的根據(jù)本發(fā)明的組合物和/或制劑可以以足夠用于預(yù)防和/或治療特定病癥的劑量通過(guò) 合適的方式給藥于需要的患者，特別是人患者。例如，根據(jù)本發(fā)明的組合物和/或制劑可以 與可接受的載體、防腐劑、穩(wěn)定劑、稀釋劑和/或佐劑一起配制成組合物。這樣的試劑是本領(lǐng) 域技術(shù)人員已知的。可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案來(lái)確定治療功效。
[0047] 可以以本領(lǐng)域技術(shù)人員看來(lái)合適的方式來(lái)給藥組合物或制劑。然而，優(yōu)選口服給 藥本文中所述的組合物。例如，可以以水溶性粉末或片劑、膠囊、囊片的形式來(lái)給藥組合物。
[0048] 給藥的組合物和/或制劑的劑量當(dāng)然將取決于待治療的患者和患者的狀況，如患 者的體重、患者的年齡以及待治療的疾病或損傷的類型和嚴(yán)重程度，給藥的方式和開(kāi)處方 醫(yī)生的判斷。例如，0.001至l〇〇mg/kg的日劑量是合適的。
[0049] 本發(fā)明的再一個(gè)方面涉及用于生產(chǎn)優(yōu)選用于本發(fā)明的組合物中的番茄粉的方法， 其包括步驟：
[0050] (a)提供優(yōu)選具有提尚含量的番前軒和皮的番前泥；
[0051 ] (b)在約50-70°C，優(yōu)選約60°C，在約300至400mbar范圍內(nèi)的壓力下，濃縮來(lái)自（a) 的番茄泥，獲得番茄濃縮物；
[0052] (c)將來(lái)自（b)的番茄濃縮物噴霧干燥，優(yōu)選使用約170-200°C，優(yōu)選約175-190°C 范圍內(nèi)的進(jìn)口溫度，獲得番茄粉。
[0053] 可以通過(guò)清洗、分選和清洗番茄果來(lái)獲得步驟(a)中提供的番茄泥，避免精制步 驟，由此提高富含類黃酮的籽和皮的存在。
[0054] 獲得的番茄粉非常多地富含生物活性化合物，如類胡蘿卜素、類黃酮和/或酮胺。當(dāng) 然，本發(fā)明的再一個(gè)方面是通過(guò)上述方法制得的番茄粉。
[0055] 此外，本文中描述了用于生產(chǎn)多酚提取物(優(yōu)選用于本發(fā)明的組合物中）的方法， 其包括步驟：
[0056] (a)將來(lái)自橄欖油生產(chǎn)的廢水通過(guò)至少一個(gè)濾器過(guò)濾；
[0057] (b)將獲自步驟(a)的截留物在直到20°C的溫度下減壓濃縮，優(yōu)選直到10-15%w/w 干物質(zhì)的濃度；
[0058] (c)使用約150-170°C，優(yōu)選約170°C的進(jìn)口溫度和低于80°C的出口溫度將來(lái)自（b) 的濃縮截留物在水膠體的存在下噴霧干燥。
[0059] 步驟(a)中使用的來(lái)自橄欖油生產(chǎn)的廢水可以首先通過(guò)機(jī)械過(guò)濾，以除去大的顆 粒和/或用果膠分解酶處理。此后，進(jìn)行微濾步驟，其可以包括使用幾個(gè)不同的膜，如聚合膜 和/或陶瓷膜。例如，可以在具有25000Da孔隙度的聚合膜上進(jìn)行微濾，并且可以使獲得的透 過(guò)液通過(guò)具有8000Da截留的膜?？梢酝ㄟ^(guò)在相同的膜上通過(guò)幾次來(lái)濃縮獲得的截留物。
[0060] 可以在水膠體，如兩種水膠體(例如，阿拉伯膠和麥芽糖糊精）的存在下，例如，各 自50%，進(jìn)行步驟(C)噴霧干燥。作為涂層劑和核心的水膠體之間的比例可以為60:40至50: 50 〇
[0061] 因此，本發(fā)明的另一個(gè)目的是通過(guò)上述方法制得的多酚提取物。
[0062] 本發(fā)明的再一個(gè)方面涉及用于生產(chǎn)本發(fā)明的組合物的方法并結(jié)合上述用于制備 番茄粉和多酚提取物的步驟：
[0063 ] (a)提供優(yōu)選具有提尚的含量的番前軒和皮的番前泥；
[0064] (b)在約50-70°C，優(yōu)選約60°C，在約300至400mbar范圍內(nèi)的壓力下，濃縮來(lái)自（a) 的番茄泥，獲得番茄濃縮物；
[0065] (c)將來(lái)自（b)的番茄濃縮物噴霧干燥，優(yōu)選使用約170-200°C范圍內(nèi)的進(jìn)口溫度， 獲得番前粉;和
[0066] (d)將來(lái)自步驟(c)的番茄粉與如本文中所述獲得的來(lái)自橄欖油廢水的多酚提取 物混合。
[0067] 附圖
[0068] 圖1:作為加工過(guò)程中的時(shí)間/溫度條件函數(shù)的類胡蘿卜素收集。
[0069] 圖2:作為加工過(guò)程中的時(shí)間/溫度條件函數(shù)的類黃酮收集。
[0070] 圖3:作為加工過(guò)程中的時(shí)間/溫度條件函數(shù)的果糖基-氨基酸收集。
[0071] 干燥蔬菜、水果和其他食品中的游離氨基酸與葡萄糖的初始聚合導(dǎo)致了果糖基-氨基酸的形成，也稱為Amador i重排產(chǎn)物，按照干重，其可以構(gòu)成直到12 %的水溶物。如所示 的，A組分的加工條件最大化了果糖基-氨基酸，特別是Fru-HI S的存在。
[0072]攝取的D-果糖-氨基酸抵抗消化并且可以部分吸收至循環(huán)中，沒(méi)有被代謝。已知 Fru-His以相當(dāng)大的量存在于RED007中，呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)表明FruHis在負(fù)責(zé)RED007生理效應(yīng)的 活性化合物的集合中起著關(guān)鍵作用。
[0073] 圖4:不同膳食過(guò)程中的VEGF血清水平。值表示平均土SD(n為8只小鼠 hREDOO?膳 食（用10%終產(chǎn)物RED007強(qiáng)化的⑶膳食），當(dāng)與對(duì)照膳食比較時(shí)，顯著降低了VEGF的血清水 平:P〈0.0001 (two-ways AN0VA)。更重要地，RED007膳食在降低血清VEGF濃度中明顯比番茄 膳食(富含1〇%"番茄粉"的對(duì)照膳食，其組成記載于表1中）更有效(P〈〇. 001)。番茄紅素膳 食沒(méi)有顯著改變飼喂對(duì)照膳食的小鼠中發(fā)現(xiàn)的VEGF濃度0 = 〇.2〇4)。1^〇〇〇7也可以稱為 "Lycoprozen"。這兩個(gè)術(shù)語(yǔ)在本文中可互換。
[0074]圖5:不同膳食過(guò)程中的IL6血清水平。值表示平均土SD(n為8只小鼠 KRED007膳食 (用10%終產(chǎn)物RED007強(qiáng)化的CD膳食），顯著降低了 IL6的血清水平:P〈0.0001 (雙向AN0VA)。 更重要地，RED007膳食在降低血清VEGF濃度中明顯比番茄膳食（富含10 % "番茄粉"的對(duì)照 膳食，其組成記載于表1中）更有效(P〈〇. 001)。番茄紅素膳食沒(méi)有顯著改變IL6濃度(P = 0·314)〇
[0075]圖6:不同膳食過(guò)程中的VEGF血清水平。值表示平均土SD(n為8只小鼠）。對(duì)照膳食 用10%的A和B組分混合物強(qiáng)化。分別根據(jù)不同的A組分/B組分比例(w/w)，即，99.5:0.5、 98.0:2.0 (RED007膳食)和96.0:4.0，來(lái)混合兩種組分。當(dāng)與用99.5:0.5比例的A組分/B組分 強(qiáng)化的膳食相比時(shí)，RED007膳食在降低VEGF水平中明顯更有效(p〈0.0001，雙向AN0VA)。含 有96.0:4.0比例的A組分/B組分的膳食的作用沒(méi)有明顯不同于RED007強(qiáng)化膳食呈現(xiàn)的那些 (ρ = 0·0632,雙向 AN0VA)。
[0076]圖7:不同膳食過(guò)程中的IL6血清水平。值表示平均土SD(n為8只小鼠）。對(duì)照膳食用 10%的A和B組分混合物強(qiáng)化。分別根據(jù)不同的A組分/B組分比例(w/w)，即，99.5:0.5、98.0: 2.0 (RED007膳食)和96.0:4.0，來(lái)混合兩種組分。當(dāng)與用99.5:0.5比例的A組分/B組分強(qiáng)化 的膳食相比時(shí)，RED007膳食在降低IL6水平中明顯更有效（p〈0.0001，雙向AN0VA)。含有 96.0:4.0比例的A組分/B組分的膳食的作用沒(méi)有明顯不同于RED007強(qiáng)化膳食呈現(xiàn)的那些(p =0.1855，雙向八從^八）。 實(shí)施例
[0077]番茄粉(組分A)的制備
[0078]為了制備番茄粉，首先清洗和分選番茄果，隨后碎粉，避免精制步驟，以提高富含 類黃酮的籽和皮的存在。將獲得的番茄泥在80-90°C的溫度下預(yù)熱，并且隨后使用低溫(60 °C )和真空(300-400mbar)濃縮。當(dāng)汁的折射率在大約29-30白利糖度級(jí)別時(shí)，用熱水再次稀 釋至12白利糖度級(jí)別的濃度，并使用190 °C的進(jìn)口溫度噴霧干燥，并將出口溫度保持在低于 85°C。渦輪速度為2600rpm?；卺槍?duì)優(yōu)化類胡蘿卜素、類黃酮和果糖基-氨基酸(并且特別是 Fru-His)的預(yù)備實(shí)驗(yàn)選擇了這些條件。圖1-3。
[0079]結(jié)果，當(dāng)與為了小鼠中的化學(xué)預(yù)防實(shí)驗(yàn)已經(jīng)制得的番茄粉組合物(36,38)相比時(shí)， A組分，即本文中描述的番茄粉，大量地富含活性化合物(表1)。應(yīng)當(dāng)注意到常規(guī)番茄醬在 TRAMP前列腺模型中是完全無(wú)效的(38)。
[0080] 表1.lOOg 的組成：
[0081]
[C
[0083] *參考文獻(xiàn)36以及圖4和5中記載的實(shí)驗(yàn)中使用的番茄制備物。ND =未測(cè)定。
[0084] 按照之前所述的，通過(guò)HPLC，使用C30和C18色譜柱，并結(jié)合UV-Vis檢測(cè)測(cè)定了類胡 蘿卜素和類黃酮的濃度。通過(guò)高分辨率質(zhì)譜（HRMS)，使用ExactiveOrbitrap設(shè)備 (ThermoFisher，USA)測(cè)定了 FRU-HIS的濃度。
[0085]來(lái)自橄欖油廢水的多酚提取物(組分B)的制備
[0086] 橄欖多酚獲自Coratina品種的橄欖油壓榨廢水。使廢水接受機(jī)械過(guò)濾處理（100μπι 的截留），以避免大的顆粒進(jìn)入和堵塞下面的截留過(guò)濾裝置。此后，用果膠分解酶進(jìn)行酶處 理，接著在幾個(gè)過(guò)濾步驟中進(jìn)行過(guò)濾。在具有25000D孔隙度的聚合膜上進(jìn)行微濾，并且使透 過(guò)液通過(guò)具有8000Da截留的膜。在相同膜上通過(guò)幾次，并且在未超過(guò)20°C的減壓下輕微蒸 發(fā)后，將此膜的截留物濃縮至直到10-15%干物質(zhì)的濃度。在各自50%的兩種水