冬蟲夏草提取液及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種冬蟲夏草提取液及其制備方法和應(yīng)用。更具體而言，本發(fā)明涉及 一種具有美白效果的冬蟲夏草提取液及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 冬蟲夏草（Cordyceps)是麥角菌科真菌冬蟲夏草菌（Cordyceps sinensis (Berk) Sacc.)寄生在蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座和幼蟲尸體的干燥復(fù)合體。冬蟲夏草的生長環(huán)境 獨(dú)特，分布區(qū)域有限，僅產(chǎn)于我國西藏、青海、四川西部及甘肅南部地區(qū)海拔3000米以上的 高原地帶，生長周期2至3年，目前尚沒有實(shí)現(xiàn)人工栽培。由于有限的野生資源與巨大的市 場需求，冬蟲夏草成為我國目前價(jià)格最為昂貴的名貴滋補(bǔ)中藥。
[0003] 冬蟲夏草的藥用功效始載于《本草從新》，其具有補(bǔ)肺益腎、止血化痰的功效，用于 治療肺虛咳嗽、咯血盜汗等癥，是我國防病治病的名貴中藥之一。由于在《黃帝內(nèi)經(jīng)》內(nèi)有 記載"肺主皮毛、司呼吸"，冬蟲夏草或可通過改善肺的功能從而改善皮膚質(zhì)素。然而從現(xiàn)代 科學(xué)的角度來看，我們并未找到任何能證明冬蟲夏草有美白功效的證據(jù)。根據(jù)《中國藥典》， 核苷中的腺苷是一個(gè)用來鑒定冬蟲夏草質(zhì)量的指標(biāo)。但天然冬蟲夏草的腺苷及其衍生物蟲 草素的含量極低，反之北蟲草（Cordyceps militaris(L.)Link.)則含有較多的腺苷及大量 的蟲草素。雖然蟲草素已被證實(shí)有美白作用，但是冬蟲夏草的蟲草素含量極微。
[0004] 酪氨酸酶活性抑制作用的測試是用來篩選美白藥品的傳統(tǒng)測試方法，其中 酪氨酸會(huì)因?yàn)槔野彼崦傅淖饔枚D(zhuǎn)化成左旋多巴（L-DOPA)，進(jìn)而轉(zhuǎn)化成為多巴色素 (Dopachrome)。多巴色素在492nm波長下有吸光度，故可以量化及計(jì)算酪氨酸酶的活性。 多巴色素只是暫存物，它會(huì)轉(zhuǎn)化成黑色素（Melanin)。人類皮膚上的黑色素是由黑色素細(xì) 胞（Melanocyte)所產(chǎn)生的多巴色素轉(zhuǎn)化而成的。黑色素會(huì)漸漸地在黑色素細(xì)胞內(nèi)的黑色 素體（Melanosome)內(nèi)成熟，成熟后黑色素體便會(huì)沿著黑色素細(xì)胞的樹突（Dentrite)轉(zhuǎn)移 到角質(zhì)細(xì)胞（Keratinocyte)，使膚色變深。抑制酪氨酸酶活性能有效減少多巴色素及黑色 素的產(chǎn)生，從而使膚色變得更淡更白。
[0005] 目前，大部分的美白產(chǎn)品如對(duì)苯二酸（Hydroquinone)及熊果苷（Arbutin)等均為 針對(duì)酪氨酸酶活性而達(dá)到美白功效。雖然對(duì)苯二酚的美白功效明顯，卻于2006年因?yàn)橹掳?的風(fēng)險(xiǎn)而被禁用。隨后，熊果苷亦因?yàn)榛瘜W(xué)結(jié)構(gòu)與對(duì)苯二酚相似而被禁用?？茖W(xué)界正找尋 安全性較高的美白用品來替換對(duì)苯二酚等藥品。
[0006] 目前，市場上還沒有冬蟲夏草或冬蟲夏草提取物所制成的美容產(chǎn)品。其次，冬蟲夏 草具有特殊的香菇味。因此，若以其提取液作為美白產(chǎn)品原料，則需要考慮從中去除這股特 殊的香菇味，否則會(huì)引起部分美白產(chǎn)品使用者的反感。但是，一般的冬蟲夏草提取方法均未 能除掉這股特殊的香菇味。簡而言之，冬蟲夏草具有特殊香菇味是制備冬蟲夏草提取液以 用作美白產(chǎn)品原材料的一個(gè)局限性。
[0007] 此外，由于冬蟲夏草提取液含有大量多糖和核苷、營養(yǎng)豐富，被微生物污染的風(fēng)險(xiǎn) 較高，因此，為了長期儲(chǔ)存，冬蟲夏草提取液在被提取出來后進(jìn)行消毒是期望的。但是，尚不 清楚在消毒的過程中是否會(huì)破壞冬蟲夏草中的活性成分例如美白活性成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明旨在解決上述問題中的一個(gè)或多個(gè)。
[0009] 在第一方面中，本發(fā)明提供了一種制備包含肌苷的冬蟲夏草提取液的方法，包括 以下步驟：
[0010] 1)提供冬蟲夏草原料；
[0011] 2)以所述冬蟲夏草原料的重量16-24倍的水浸泡所述冬蟲夏草原料，在38-42°C 溫浸8 - 12小時(shí),得到浸泡液；和
[0012] 3)過濾所述浸泡液，得到冬蟲夏草提取液。
[0013] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的方法還可包括步驟4):對(duì)所述冬蟲夏草提取液進(jìn)行 消毒。例如，所述消毒可以是于118-122°C的溫度進(jìn)行10 - 20分鐘的高溫消毒。
[0014] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法步驟2)中，可以以冬蟲夏草原料的重量20倍 的水浸泡所述冬蟲夏草原料。
[0015] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法步驟2)中，可以在40°C浸泡所述冬蟲夏草原 料。
[0016] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法步驟2)中，可以浸泡所述冬蟲夏草原料10小 時(shí)。
[0017] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法步驟3)中，可以以濾膜過濾所述浸泡液，以 除去殘?jiān)?br>[0018] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在本發(fā)明的方法步驟4)中，可以將所述冬蟲夏草提取液于 120°C高溫消毒15分鐘。
[0019] 在一個(gè)實(shí)施方案中，可用于本發(fā)明的方法中的冬蟲夏草原料是天然的冬蟲夏草。
[0020] 在一個(gè)實(shí)施方案中，可用于本發(fā)明的方法中的冬蟲夏草原料是完整的冬蟲夏草、 斷裂的或只有子實(shí)體或蟲體部分的冬蟲夏草、或者呈粉末狀的冬蟲夏草。
[0021] 在第二方面，本發(fā)明提供了一種根據(jù)本發(fā)明的第一方面獲得的包含肌苷的冬蟲夏 草提取液。
[0022] 在第三方面，本發(fā)明提供了一種美白產(chǎn)品，其包含美白有效量的本發(fā)明的包含肌 苷的冬蟲夏草提取液或包含美白有效量的肌苷。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的美白產(chǎn)品是 藥品、保健品、食品、飲料、食品添加劑、營養(yǎng)強(qiáng)化劑或美容用品的形式。
[0023] 在第四方面，本發(fā)明提供了本發(fā)明的包含肌苷的冬蟲夏草提取液或肌苷在制備美 白產(chǎn)品中的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的美白產(chǎn)品是藥品、保健品、食品、飲料、食品 添加劑、營養(yǎng)強(qiáng)化劑或美容用品的形式。
[0024] 在第五方面，本發(fā)明提供了一種鑒定冬蟲夏草質(zhì)量的方法，包括以下步驟：
[0025] 1)提供冬蟲夏草原料；
[0026] 2)以所述冬蟲夏草原料的重量16-24倍的水浸泡所述冬蟲夏草原料，在38_42°C 溫浸8-12小時(shí)，得到浸泡液；
[0027] 3)任選地，過濾所述浸泡液，得到冬蟲夏草提取液；和
[0028] 4)測定所述浸泡液或所述提取液中肌苷的含量。
[0029] 在一個(gè)實(shí)施方案中，冬蟲夏草質(zhì)量包括冬蟲夏草的美白功效。
【附圖說明】
[0030] 以下將結(jié)合附圖，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的詳細(xì)說明。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，附圖 以及下文詳細(xì)描述旨在僅為示例性的，不應(yīng)以任何方式解釋為對(duì)本發(fā)明范圍的限制。
[0031] 圖1為實(shí)施例1中五種核酸（尿苷、肌苷、鳥苷、腺苷、蟲草素）對(duì)照的液相指紋圖 譜。
[0032] 圖2為實(shí)施例1中提取自完整的冬蟲夏草的液相指紋圖譜。
[0033] 圖3為實(shí)施例1中提取自冬蟲夏草子實(shí)體的液相指紋圖譜。
[0034] 圖4為實(shí)施例1中提取自冬蟲夏草蟲體部分的液相指紋圖譜。
[0035] 圖5為實(shí)施例1中提取自冬蟲夏草粉未的液相指紋圖譜。
[0036] 圖6為實(shí)施例2中多巴色素在492nm下的吸光度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0037] 圖7為實(shí)施例2中提取自不同種類冬蟲夏草的提取液對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用 的結(jié)果。
[0038] 圖8為實(shí)施例2中不同種類核苷對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用的結(jié)果。
[0039] 圖9為實(shí)施例2中不同肌苷濃度對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用的結(jié)果。
[0040] 圖10為實(shí)施例3中高溫消毒前后的冬蟲夏草提取液對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用 的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0041] 除非本文中另外定義，本文所使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人 員通常所理解的含義。盡管與本文所描述的方法和材料相似或等價(jià)的那些方法和材料也可 用于本發(fā)明的實(shí)踐中，但是優(yōu)選的方法和材料還是在本文中加以描述。此外，如本文所使 用，數(shù)值范圍包括定義該范圍的數(shù)字。本發(fā)明的小標(biāo)題僅僅為了闡述的目的，而不旨在限制 本發(fā)明的范圍。
[0042] 如本文所使用，除非上下文明確指出，所有百分比都按重量計(jì)算。
[0043] 本申請(qǐng)的發(fā)明人首次發(fā)現(xiàn)，通過在一定條件下提取冬蟲夏草，所得的冬蟲夏草提 取液含有美白活性成分肌苷，從而可用于美白用途。另外，通過本發(fā)明方法提取冬蟲夏草， 可以去除冬蟲夏草的特殊香菇味。此外，可以對(duì)通過本發(fā)明的方法得到的冬蟲夏草提取液 進(jìn)行消毒，例如高溫消毒，從而可長期儲(chǔ)存。
[0044] 因此，本發(fā)明的第一方