一種高生物利用度的姜黃素納米脂質(zhì)載體的制作方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物制劑領域和生物醫(yī)藥技術(shù)領域，具體涉及一種高生物利用度的姜 黃素納米脂質(zhì)載體。
【背景技術(shù)】
[0002]姜黃素(Curcumin, Cur)為中藥姜黃的主要成分，現(xiàn)代藥理實驗表明姜黃素除了具 有抗炎、抗癌、抗氧化作用外，還具有保護腎臟、抑制肺纖維化、抑制肝纖維化等作用，美國 國立腫瘤研究所已將其列為第三代癌化學預防藥，并于2000年列入美國藥典。姜黃素雖然 具有廣泛的藥理活性，但它在水中溶解度差，藥動學實驗表明，其口服給藥生物利用度低。 提高姜黃素的口服生物利用度是提高姜黃素臨床療效的關鍵。因此，尋求一種能夠有效提 高姜黃素溶解度、促進姜黃素口服吸收的新劑型是人們長期以來一直渴望解決的問題。
[0003] 目前，為提高姜黃素的口服生物利用度，國內(nèi)外已有姜黃素固體分散體、姜黃素脂 質(zhì)體、姜黃素乳劑、姜黃素自乳化給藥系統(tǒng)和納米粒等的研究報道。這些新技術(shù)的應用，均 在一定程度上較混懸液提高了生物利用度。公告號為CN 102008439B，名稱為《一種姜黃素 包覆脂質(zhì)體制劑及其制備方法》的中國專利文獻授權(quán)了一種姜黃素包覆脂質(zhì)體制劑及其制 備方法。其利用帶正電荷的三甲基殼聚糖作為吸收促進劑促進姜黃素的口服吸收，但帶正 電荷的材料均具有一定的細胞毒性，服用時易帶來潛在的胃腸道安全性問題。按照50mg/kg 劑量進行大鼠灌胃給藥后，姜黃素包覆脂質(zhì)體的Cmax為57.66yg/l，是未包覆脂質(zhì)體的1.8 倍，是姜黃素混懸液的5.31倍。姜黃素包覆脂質(zhì)體的AUC是未包覆脂質(zhì)體的2.28倍，是姜黃 素混懸液的23.12倍。公告號為CN 104042569A，名稱為《聚乙二醇維生素 E琥珀酸酯修飾的 姜黃素氯化殼聚糖脂質(zhì)體及其制備方法》的中國專利文獻公開了聚乙二醇維生素 E琥珀酸 酯修飾的姜黃素氯化殼聚糖脂質(zhì)體及其制備方法。其利用聚乙二醇維生素 E琥珀酸酯和氯 化殼聚糖作為吸收促進劑，按照50mg/kg劑量進行大鼠灌胃給藥后，聚乙二醇維生素 E琥珀 酸酯修飾的姜黃素氯化殼聚糖脂質(zhì)體的AUC為游離藥物的1.87倍，Cmax為游離藥物的1.78 倍。氯化殼聚糖也是帶正電荷的生物材料，使用時也會帶來潛在的胃腸道安全性問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了解決姜黃素水溶性差，口服生物利用度低的問題，針對上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明 提供了一種高生物利用度的姜黃素納米脂質(zhì)載體，及其制備方法。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的： 一種高生物利用度的姜黃素納米脂質(zhì)載體，原料藥為姜黃素，輔料包括:表面活性劑、 固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)材料和吸收促進劑，其中，各組分的重量份數(shù)如下所示:姜黃素1-5 份;表面活性劑10-40份;固態(tài)脂質(zhì)材料1-10份;液態(tài)脂質(zhì)材料2-20份;吸收促進劑1-10份。
[0006] 所述的固態(tài)脂質(zhì)材料包括:膽固醇油酸酯、三月桂酸甘油酯、單硬脂酸甘油酯、硬 脂酸、甘油棕櫚酸硬脂酸酯和山崳酸甘油酯，優(yōu)選三月桂酸甘油酯和膽固醇油酸酯中的一 種或幾種。
[0007] 所述的液態(tài)脂質(zhì)材料包括:三油酸甘油酯、中鏈脂肪酸酯、中鏈甘油三酯、油酸聚 乙二醇甘油酯和辛癸酸甘油酯，優(yōu)選三油酸甘油酯和中鏈甘油三酯中的一種或幾種。
[0008] 所述的表面活性劑包括磷脂、吐溫80、泊洛沙姆188、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氫 化蓖麻油、乳化劑OP，優(yōu)選磷脂和吐溫80中的一種或幾種。
[0009] 所述吸收促進劑為牛磺膽酸-聚乙二醇-單硬脂酸酯，優(yōu)選聚乙二醇長鏈個數(shù)為 100或聚乙二醇長鏈個數(shù)為40，優(yōu)選?；悄懰崤c聚乙二醇-單硬脂酸酯的摩爾比為1:1。
[0010] 本發(fā)明所述的吸收促進劑不限于應用在脂質(zhì)納米載體中，也可應用于固體脂質(zhì)納 米粒、脂質(zhì)體，納米乳及膠束中。
[0011] 本發(fā)明還提供了一種用于提高脂質(zhì)載體生物利用度的吸收促進劑，所述吸收促進 劑為牛磺膽酸-聚乙二醇-單硬脂酸酯，優(yōu)選聚乙二醇長鏈個數(shù)為100或聚乙二醇長鏈個數(shù) 為40，優(yōu)選?；悄懰崤c聚乙二醇-單硬脂酸酯的摩爾比為1:1。
[0012] 本發(fā)明還提供了上述吸收促進劑的制備方法，將?；悄懰崛苡诜琴|(zhì)子極性溶劑 中，加入縮合劑，后加入聚乙二醇-單硬脂酸酯反應，蒸出溶劑后水合，再進一步透析，干燥 即得?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯。
[0013] 所述非質(zhì)子極性溶劑選自N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(DMSO)、乙腈、二 氯甲烷中的一種或幾種。
[0014] 所述縮合劑選1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDCI)、二環(huán)己基 碳二亞胺(DCC)、1_羥基苯并三唑(HOBT)中的一種或幾種。
[0015] 上述方法中，?；悄懰峥赏ㄟ^?；悄懰徕c進行制備。一個優(yōu)選的方案，稱取?；悄?酸鈉溶于適量水中形成?；悄懰徕c水溶液。另取鹽酸溶液于燒杯中，加入適量冰水后，將牛 磺膽酸鈉水溶液緩慢滴加至鹽酸溶液中，并不斷攪拌至溶液中析出黃色固體。將反應液進 行抽濾、烘干，得?；悄懰帷?br>[0016] 上述吸收促進劑的一個優(yōu)選的制備方法，稱取?；悄懰崛苡跓o水DMF中，加入 EDCI，冰水浴反應。將聚乙二醇-單硬脂酸酯溶于CH2Cl2中，緩慢滴加至上述反應液中，冰水 浴反應后，常溫反應。旋蒸除去CH 2Cl2,透析除去未反應完的?；悄懰岷蜌堄嗳軇〥MF等小分 子雜質(zhì)(MfflOOO)，冷凍干燥得白色粉末，即?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯。
[0017] 本發(fā)明所述的高生物利用度的姜黃素納米脂質(zhì)載體可以由以下方法制備： 方法一:將姜黃素、表面活性劑、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)材料和上述吸收促進劑，用乙 醇-氯仿（1:1)超聲溶解后，將溶液轉(zhuǎn)移至茄形瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑，向茄形瓶中加 入10%甘油水溶液，37°C水合，探頭超聲后過0.45μπι的微孔濾膜，即得高生物利用度的姜黃 素納米脂質(zhì)載體； 方法二:將姜黃素、表面活性劑、固態(tài)脂質(zhì)材料和液態(tài)脂質(zhì)材料，用乙醇-氯仿（1:1)超 聲溶解后，將溶液轉(zhuǎn)移至茄形瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑，向茄形瓶中加入溶有上述吸收 促進劑的10%甘油水溶液，37°C水合，探頭超聲后過0.45μπι的微孔濾膜，即得高生物利用度 的姜黃素納米脂質(zhì)載體； 方法三:將姜黃素、表面活性劑、固態(tài)脂質(zhì)材料、液態(tài)脂質(zhì)材料和上述吸收促進劑置于 表面皿中，50~60°C加熱熔融，在機械攪拌下加入同溫度的10 %甘油水溶液，形成乳劑后快 速至于冰浴中，探頭超聲后過〇.45μπι的微孔濾膜，即得高生物利用度的姜黃素納米脂質(zhì)載 體； 方法四：將姜黃素、表面活性劑、固態(tài)脂質(zhì)材料和液態(tài)脂質(zhì)材料置于表面皿中，50~60 °〇加熱熔融，在機械攪拌下加入同溫度的溶解有上述吸收促進劑的10%甘油水溶液，形成 乳劑后快速至于冰浴中，探頭超聲后過〇.45μπι的微孔濾膜，即得高生物利用度的姜黃素納 米脂質(zhì)載體。
[0018] 本發(fā)明中，考慮到姜黃素在水中的溶解度很低(約0.4μg/ml)，但是研究發(fā)現(xiàn)，姜黃 素在油中的溶解度較水中高（如在Ll349中溶解度高達約5mg/ml)。納米脂質(zhì)載體是在固體 脂質(zhì)納米粒的基礎上，在固態(tài)脂質(zhì)中混入形態(tài)相異的液態(tài)脂質(zhì)作為混合類脂基質(zhì)得到的新 一代納米制劑，其具有較高的物理穩(wěn)定性、易于控制藥物釋放及易于表面修飾等特點，故本 發(fā)明將姜黃素制成納米脂質(zhì)載體。
[0019] 研究表明，膽汁酸是膽汁的重要成分，能增加消化道中脂質(zhì)和膽固醇的溶解性，解 除膽汁阻塞，抑制膽固醇結(jié)石的形成，增加膽汁流量等。膽汁酸在腸中通過兩種機理被人體 重新吸收，一種是在回腸的遠端，由位于回腸遠端柱狀上皮細胞頂端腔面的刷狀緣膜上的 轉(zhuǎn)運體（即回腸頂端Na/膽汁酸聯(lián)合轉(zhuǎn)運體)介導的跨細胞轉(zhuǎn)運方式實現(xiàn)主動運輸，這是膽 汁酸吸收的主要途徑；另一種吸收機理主要發(fā)生在小腸和結(jié)腸，是利用簡單擴散的被動運 輸方式進行吸收，這種方式可在小腸的任何部位及結(jié)腸發(fā)生。?；悄懰崾悄懰岬聂然c牛 磺酸的氨基以酰胺鍵相連的一種結(jié)合型膽汁酸，其分子量515.6,它是膽汁酸的主要成分之 一。本發(fā)明合成了一種吸收促進劑，即?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯。聚乙二醇-單硬脂 酸酯具有親水的聚乙二醇長鏈及親脂的硬脂酸端基，脂溶性硬脂酸鏈段可插入納米脂質(zhì)載 體的脂質(zhì)內(nèi)核中，而親水性的聚乙二醇鏈段伸展于納米粒表面，本發(fā)明將聚乙二醇-單硬脂 酸酯的聚乙二醇鏈段功能化，引入牛磺膽酸。本發(fā)明所述的高生物利用度的姜黃素納米脂 質(zhì)載體，即利用功能化的?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯將?；悄懰嵝揎椩谳d姜黃素的納 米脂質(zhì)載體的外表，利用?；悄懰嵩谛∧c內(nèi)可以通過被動擴散和主動轉(zhuǎn)運的方式被機體吸 收的特點，可以有效提高藥物在整個小腸上皮細胞的吸收，提高姜黃素口服吸收利用度。本 實驗中所采取的載體材料、表面活性劑、吸收促進劑以及凍干保護劑等均為藥劑學上廣泛 應用的藥劑輔料，具有無毒、無刺激性、生物相容性好的特點。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有 益效果在于:本發(fā)明的?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯為小分子兩親性材料，合成工藝簡 單，由于其兩親性的性質(zhì)，可以通過簡單的方法賦予更多納米載體(如脂質(zhì)體、固體脂質(zhì)納 米粒粒，納米乳及膠束)具有口服給藥促吸收的特點，能顯著提高難吸收藥物的口服生物利 用度。在本發(fā)明中，?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯作為吸收促進劑，大大提高了姜黃素的 吸收和口服生物利用度，同時也為難吸收藥物的促吸收研究提供了一種新的思路。
【附圖說明】
[0020] 圖1為大鼠灌胃不同納米制劑后姜黃素的血濃經(jīng)時曲線（其中?為本發(fā)明所述牛 磺膽酸修飾的載姜黃素的納米脂質(zhì)載體，□為未修飾?；悄懰岬妮d姜黃素的納米脂質(zhì)，▲ 為姜黃素溶液)。 具體實施方案 下面通過實施例對本發(fā)明加以進一步的說明，但下述實施例并不限制本專利的權(quán)利范 圍。
[0021] 實施例1?；悄懰?聚乙二醇-單硬脂酸酯的合成。
[0022] (1)稱取約0.5g?；悄懰徕c(0.93mmol)溶于適量水中形成?；悄懰徕c水溶液。另 取1.4ml鹽酸溶液（lmol/L)于50ml燒杯中，加入適量冰水后，將?；悄懰徕c水溶液緩慢滴加 至鹽酸溶液中，并不斷攪拌至溶液中析出黃色固體。將反應液進行抽濾、烘干，得?；悄懰?。 [0023] (2)稱取約0 · 2g牛磺膽酸（0 · 39mmol)溶于5ml無水DMF中，加入0 · 12gEDCI，冰水浴 反應lh。將1.8g聚乙二醇-單硬脂酸酯溶于25mlCH2Cl2中，緩慢滴加至上述反應液中，冰水浴 反應Ih后，常溫反應24h。旋蒸除去CH2Cl2,透析除去未反應完的?；悄懰岷蜌堄嗳軇〥MF等 小分子雜質(zhì)(MfflOOO