具有保護(hù)胃黏膜作用的藥物組合物及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域和保健食品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有保護(hù)胃黏 膜、防治慢性胃炎、胃潰瘍的藥物組合物、制備方法及其在藥物、保健食品中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 慢性胃炎（chronicgastritis)是一種常見(jiàn)病、多發(fā)病，它的發(fā)病區(qū)域遍及世界各 地，涉及各類人群。并且隨著現(xiàn)代社會(huì)進(jìn)步，生活節(jié)奏加快，各種壓力更是無(wú)處不在，各種內(nèi) 在外在因素都不斷地刺激、破壞人的胃粘膜，引起了諸多的胃疼痛、炎癥等疾病，使得慢性 胃炎成為影響人類健康的一大疾病。慢性胃炎分為原發(fā)性與繼發(fā)性兩類，原發(fā)性胃炎又分 為淺表性、萎縮性及肥厚性3種。
[0003] 研究顯示，慢性胃炎等疾病的病因包括不健康的生活方式如熬夜、勞累、飲酒、飲 濃茶等原因，也包括幽門螺桿菌感染，藥物因素（如阿司匹林等），還有精神因素和遺傳因 素等。慢性胃炎的病理變化，基本局限于黏膜層，主要體現(xiàn)胃粘膜受損，因此嚴(yán)格地講應(yīng)稱 之為"慢性胃黏膜炎"或"胃黏膜病"。因此，如何保護(hù)好胃粘膜成為預(yù)防及治療慢性胃炎癥 的研究熱點(diǎn)及管件。
[0004] 目前，對(duì)于慢性胃炎的治療尚無(wú)特效療法，一般主張無(wú)癥狀者無(wú)需進(jìn)行治療，若有 癥狀可參考下列方法進(jìn)行治療：
[0005] 1、日常保健避免引起急性胃炎的因素，如戒除煙酒避免服用對(duì)胃有刺激性的食物 及藥物如NSAID等；
[0006] 2、飲食治療原則與潰瘍病相似，多次少餐，軟食為主，避免生冷及刺激性食物，更 重要的是根據(jù)病人的飲食習(xí)慣和多年經(jīng)驗(yàn)，總結(jié)出一套適合自己的食譜；
[0007] 3、藥物治療Hp相關(guān)性胃炎需進(jìn)行根除Hp的治療，而其他慢性胃炎尚無(wú)特效療法， 大多不能使胃炎逆轉(zhuǎn)，因此主要是對(duì)癥治療。慢性胃炎多數(shù)胃酸偏低或無(wú)酸，但其本身無(wú)特 殊治療，可適量給予稀鹽酸和胃蛋白酶。如1 %鹽酸l〇ml，口服，3次/d，胃蛋白酶合劑10ml， 口服，3次/d。但胃液分泌量每天達(dá)1.5-2. 5L，30ml1 %鹽酸根本不能改變胃液的pH。還 有些患者服鹽酸后反覺(jué)胃部不適，可能是黏膜糜爛，鹽酸刺激所致。有報(bào)道用西咪替?。?氰咪胍）治療慢性胃炎，療效亦較顯著，Swynnerton也給無(wú)酸的消化不良病人服用堿性藥 物治療，也取得較好的效果。這些從理論上尚無(wú)法解釋，但事實(shí)經(jīng)驗(yàn)如此。
[0008] 可見(jiàn)，目前對(duì)于慢性胃炎的治療依然以刺激性較強(qiáng)的西藥為主，這對(duì)于本身已受 損的胃黏膜也可能造成二次的創(chuàng)傷。一直以來(lái)，中醫(yī)中藥均以其溫和的治療方式廣受歡迎， 因此，以中藥治療慢性胃炎也成為了日前研究的熱點(diǎn)及方向。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 為此，本發(fā)明的目的在于提供一種具有保護(hù)胃黏膜作用，可有效治療慢性胃炎、胃 潰瘍的藥物組合物和保健食品，并進(jìn)一步公開(kāi)其制備方法。
[0010] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種具有保護(hù)胃黏膜作用的藥物組合物，其 特征在于，所述藥物組合物的原料藥組成為：灰樹(shù)花提取物1-10重量份；白術(shù)1-10重量 份；白芍1-6重量份；佛手1-6重量份。
[0011] 進(jìn)一步的，所述藥物組合物的原料藥組成為：灰樹(shù)花提取物5重量份；白術(shù)5重量 份；白芍3重量份；佛手3重量份。
[0012] 所述藥物組合物添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)方法制備成臨床可接受的劑型，所述劑 型包括但不限于膠囊劑、片劑、沖劑、口服液、顆粒劑、散劑、丸劑、固體飲料。
[0013] 本發(fā)明還公開(kāi)了由所述藥物組合物添加常規(guī)輔料，按照常規(guī)方法制備成的制劑。
[0014] 本發(fā)明還公開(kāi)了制備所述藥物組合物的方法，包括按照選定的處方量取灰樹(shù)花提 取物、白術(shù)、白芍和佛手，并混合均勻的步驟，加入常規(guī)輔料、按照常規(guī)工藝制成臨床上可接 受的劑型。
[0015] 進(jìn)一步的，所述方法為：取處方量的白術(shù)、白芍、佛手混勻，加入6-10倍重量倍水 提取1-3次，每次0. 5-2小時(shí)，提合并取液，真空濃縮至90°C時(shí)相對(duì)密度1. 10-1. 20g/mL，得 濃縮膏；取處方量的灰樹(shù)花提取物與所述濃縮膏混勻，并加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)方法制備 成臨床可接受的膠囊劑、片劑、沖劑、口服液、顆粒劑、散劑、丸劑、固體飲料。
[0016] 進(jìn)一步的，在采用常規(guī)工藝制備膠囊劑、片劑、及顆粒劑等需要進(jìn)行干燥的劑型 時(shí)，采用進(jìn)行帶式真空干燥方式進(jìn)行干燥，優(yōu)選控制其進(jìn)料速度3000-5000mL/h，每段溫度 分別為 90-100°C、90-100°C、85-95°C、70-8(rC、20-3(rC，帶速 50-200mm/min，帶干物料經(jīng) 整粒后，加入30-70%乙醇濕法制粒，50-80°C烘干后，再進(jìn)行后續(xù)的整粒和/或壓片程序。
[0017] 所述的方法還包括將灰樹(shù)花按照常規(guī)方法提取制備所述灰樹(shù)花提取物的步驟。
[0018] 進(jìn)一步的，所述灰樹(shù)花提取物按照如下步驟提?。喝』覙?shù)花10-20重量份，切片， 加入10-20重量倍水提取1-3次，每次0. 5-2小時(shí)，合并提取液，真空濃縮至60°C時(shí)相對(duì)密 度為1. 10-1. 30g/mL，得到所述的灰樹(shù)花提取物。
[0019] 本發(fā)明還公開(kāi)了所述的組合物或所述方法制備得到的組合物在制備具有保護(hù)胃 黏膜作用的藥物和保健食品中的用途。
[0020] 本發(fā)明還公開(kāi)了所述的組合物或所述方法制備得到的組合物在制備治療慢性胃 炎、胃潰瘍的藥物和保健食品中的用途。
[0021 ] 本發(fā)明所述中藥組合物由灰樹(shù)花提取物、白術(shù)、白芍、佛手入藥，灰樹(shù)花提取物中 的有效成分灰樹(shù)花多糖證明具有促進(jìn)人胃黏膜上皮細(xì)胞增殖的作用，從而促進(jìn)胃黏膜損傷 的修復(fù)；白術(shù)健脾益氣，燥濕利水，固表止汗；白芍補(bǔ)血柔肝、平肝止痛。斂陰收汗；佛手疏 肝理氣，和胃止痛，化痰止咳。本方以灰樹(shù)花提取物為主，配合健脾益氣養(yǎng)胃的中草藥，對(duì)胃 黏膜損傷具有良好的修復(fù)及保護(hù)作用。
[0022] 實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明所述中藥組合物具有促進(jìn)人胃黏膜上皮細(xì)胞增殖的作用，對(duì)于 創(chuàng)傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)，保護(hù)胃黏膜顆粒能夠促進(jìn)GES-1向創(chuàng)傷面遷移，
[0023] 加速損傷區(qū)域上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而促進(jìn)胃黏膜損傷的修復(fù)，可對(duì)胃黏膜起到有 效的保護(hù)作用，對(duì)胃潰瘍疾病的治療具有積極的作用及效果。因此本發(fā)明對(duì)制備治療胃潰 瘍等慢性疾病的藥物開(kāi)辟了一種新的中藥治療方法，不僅有效率高且副作用低，制作工藝 簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)效益高，具有很好的應(yīng)用前景。
[0024] 實(shí)驗(yàn)例
[0025] 1.試驗(yàn)方案
[0026] 1· 1試驗(yàn)材料及設(shè)備
[0027] 人胃粘膜上皮細(xì)胞（GES-1)購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所；
[0028] 01^1高糖培養(yǎng)基、胎牛血清、0.2%胰蛋白酶均購(gòu)自6四0);
[0029] MTS(Promega);保護(hù)胃黏膜的藥物組合物（由實(shí)施例1所制顆粒劑）；
[0030] 生物安全柜（HealForce力康）；數(shù)碼相差倒置顯微鏡（1X51Olympus);二氧化碳 培養(yǎng)箱（esco);高速冷凍離心機(jī)（5810REppendorf);酶標(biāo)儀（sunrisetecan)。
[0031] 1.2試驗(yàn)方法
[0032] 1. 2. 1多糖溶液制備
[0033] 細(xì)胞培養(yǎng)液：DEME高糖培養(yǎng)基，10%胎牛血清，100U·mL1青霉素、鏈霉素；保護(hù)胃 黏膜顆粒溶于細(xì)胞培養(yǎng)液中，配制成〇~50mg·mL1的不同濃度，0. 22μm微孔濾膜過(guò)濾除 菌，4°C冰箱避光保存?zhèn)溆谩?br>[0034] 1. 2. 2細(xì)胞培養(yǎng)
[0035] 人胃粘膜上皮細(xì)胞GES-1，置37°C、飽和濕度、5% 0)2無(wú)菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每2~3d 換一次液，每3~4d傳代，使細(xì)胞濃度維持在70%~80%融合度。1. 2. 3保護(hù)胃黏膜顆粒 對(duì)人胃粘膜上皮細(xì)胞GES-1增殖的影響
[0036] 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，將其濃度調(diào)整為2. 0X104個(gè)·mL\接種于96孔板，每孔 100μL，培養(yǎng)24h后更換培養(yǎng)液，實(shí)驗(yàn)組分別加入50、10、2、0. 4、0. 08mg.mL1的保護(hù)胃黏膜 顆粒溶液各200μL，空白組為細(xì)胞培養(yǎng)液，溶劑空白組為相對(duì)應(yīng)的保護(hù)胃黏膜顆粒溶液，每 組設(shè)6個(gè)重復(fù)，培養(yǎng)l、2、3、4d后，加MTS溶液20μL，繼續(xù)培養(yǎng)4h，使用酶標(biāo)儀測(cè)492nm波 長(zhǎng)的吸光度值，計(jì)算細(xì)胞增殖率，實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，并記錄其生長(zhǎng)狀態(tài)。
[0037]
[0038] 1. 2. 4保護(hù)胃黏膜顆粒對(duì)人胃粘膜上皮細(xì)胞GES-1遷移的影響
[0039] 胃粘膜創(chuàng)傷模型的建立：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人胃黏膜上皮細(xì)胞，以每孔6X105個(gè)細(xì) 胞接種于24孔板，每孔400μL，置37°C，5 %C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，待細(xì)胞間形成較緊密 的連接成單層后，用直徑為1. 5_的毛細(xì)管在培養(yǎng)皿的中央垂直劃一道痕跡，且在顯微鏡 下可同時(shí)看到創(chuàng)面兩側(cè)。劃傷后吸出原培養(yǎng)液，每孔用200yLPBS洗兩次以除凈未貼壁細(xì) 胞，然后各孔加入不同保護(hù)胃黏膜顆粒終濃度的培養(yǎng)液400μL，對(duì)照組僅加入DMEM培養(yǎng)液 400μL，應(yīng)用專業(yè)圖像分析軟件Imageproplus6. 0分別測(cè)量0,6,12, 24h的劃痕創(chuàng)面愈合 情況。
[0040]
[0041] 1.3數(shù)據(jù)處理
[0042] 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差（無(wú)±S)表示，用SPSS13. 0軟件處理，采用方差分 析法，差異具有顯著性水平為P〈〇. 05,極顯著性水平為P〈0. 01。
[0043] 2結(jié)果與分析
[0044] 2. 1保護(hù)胃黏膜顆粒對(duì)GES-1細(xì)胞增殖的影響
[0045] 保護(hù)胃黏膜顆粒促進(jìn)人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1增殖效果與保護(hù)胃黏膜顆粒的 濃度、作用時(shí)間具有重要的關(guān)系。在96h的作用培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，保護(hù)胃黏膜顆粒設(shè)計(jì)濃度 為0. 08mg·mL^0. 4mg·mL1劑量組對(duì)人胃粘膜上皮細(xì)胞GES-1具有促增殖效果，其 中0. 08mg·mL\〇. 4mg·mL1組在48h促增殖率達(dá)398. 77%、382. 88%，差異達(dá)到極顯著 (Ρ〈0· 01)〇
[0046] 根據(jù)增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇0. 4mg·mL1保護(hù)胃黏膜顆粒濃度組再進(jìn)行作用培養(yǎng)，使 用倒置顯微鏡觀察GES-1細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及其形態(tài)。保護(hù)胃黏膜顆粒組培養(yǎng)的GES-1細(xì)胞 明顯比CK生長(zhǎng)狀態(tài)更加良好，24hCK組細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)相比明顯較差，細(xì)胞形態(tài)小，圓形，未 見(jiàn)貼壁，48h保護(hù)胃黏膜顆粒組貼壁生長(zhǎng)明顯，數(shù)量劇增，細(xì)胞呈正常的扁平多角形或近于 梭形，有偽足，72h后保護(hù)胃黏膜顆粒組雖然數(shù)量有所增