血小板生成素在促進造血干細胞歸巢中的用圖
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及生物制藥領域，具體地，涉及血小板生成素在促進造血干細胞歸巢中的用途。
【背景技術】
[0002]造血干細胞(Hematopoietic stem cells，HSC)移植已經(jīng)成為臨床上治療多種惡性血液病、免疫缺陷性疾病等的重要手段之一。造血干細胞移植后，經(jīng)血液循環(huán)歸巢于受體造血微環(huán)境，進行增殖、分化，重建受者的造血和免疫系統(tǒng)，從而達到治療的目的。造血干細胞在受者體內(nèi)長期植入，受到多種因素的影響，其中造血干細胞歸巢于骨髓的效率是一個重要的影響因素。在移植細胞后的24小時內(nèi)，通過有效的促歸巢藥物的作用來達到增加歸巢的造血干細胞數(shù)量的目的，對于改善造血干細胞的植入效率具有重要意義。
[0003]然而，目前臨床上尚沒有應用于造血干細胞移植術后促進造血干細胞歸巢的藥物，用于該領域的藥物有待進一步研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術中存在的技術問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出血小板生成素用于制備造血干細胞移植術中促進造血干細胞歸巢藥物中的用途。
[0005]需要說明的是，本發(fā)明是基于發(fā)明人的下列工作而完成的:
[0006]重組人促血小板生成素(rhTPO)在臨床上用于化療后所致的血小板減少癥、特發(fā)性血小板減少性紫癜和造血干細胞移植后血小板重建。血小板生成素作用靶點是細胞表面的c-MPL受體。造血干細胞及巨核細胞表面表達c-MPL。血小板生成素與受體結合，激活了下游信號通路，調(diào)節(jié)了造血干細胞及巨核細胞的擴增及分化等生物學行為。
[0007]基于人重組血小板生成素可以安全、有效地應用于異基因造血干細胞移植術后血小板減少癥的臨床治療，發(fā)明人進一步研究發(fā)現(xiàn)血小板生成素對造血干細胞的歸巢有重要作用，能明顯增加造血干細胞歸巢至骨髓的數(shù)量，進而促進造血干細胞的植入，提高造血干細胞的移植成功率。發(fā)明人的研究結果表明:血小板生成素促進造血干細胞歸巢的機理與其擾亂趨化軸SDF-1 a -CXCR4有關。
[0008]因而，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了血小板生成素或血小板生成素受體激動劑在制備藥物中的用途，所述藥物促進造血干細胞歸巢。
[0009]發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)，應用血小板生成素制備的藥物，可以在造血干細胞移植術中促進造血干細胞的歸巢，增加歸巢的造血干細胞的數(shù)量，提高造血干細胞歸巢效率，進而改善骨髓造血干細胞的移植成功率。
[0010]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供了一種用于促進造血干細胞歸巢的藥物。根據(jù)本發(fā)明實施例，該藥物包含血小板生成素。
[0011]發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)，該藥物可以在造血干細胞移植術中促進造血干細胞的歸巢，增加歸巢的造血干細胞的數(shù)量，提高造血干細胞歸巢效率，進而提高骨髓造血干細胞的移植成功率。
[0012]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物為選自注射劑、顆粒劑、片劑和膠囊劑的至少一種，優(yōu)選注射劑。
[0013]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物采用生理鹽水或者PBS進行稀釋。
[0014]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物在骨髓移植后24小時內(nèi)，優(yōu)選4小時內(nèi)進行給藥。由此，藥物促進造血干細胞歸巢的效果好，進而促進造血干細胞的早期植入。
[0015]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物的給藥途徑為選自皮下注射、肌肉注射和靜脈注射的至少一種。根據(jù)本發(fā)明的一些具體示例，優(yōu)選皮下注射。由此，藥物的吸收效果好。
[0016]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物的給藥劑量為10-100 μ g/kg。由此，藥物的療效好。
[0017]本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。
【附圖說明】
[0018]本發(fā)明的上述和/或附加的方面和優(yōu)點從結合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中:
[0019]圖1顯示了根據(jù)本發(fā)明一個實施例，利用流式細胞術檢測供者細胞在受者體內(nèi)歸巢的比例示意圖；
[0020]圖2顯示了根據(jù)本發(fā)明一個實施例，利用流式細胞術檢測供者小鼠造血干細胞(CD45.1/LSK)在受者體內(nèi)歸巢比例的示意圖；
[0021]圖3顯示了根據(jù)本發(fā)明一個實施例，利用集落培養(yǎng)的方法檢測供者小鼠造血細胞在受者體內(nèi)的歸巢數(shù)量的示意圖；
[0022]圖4顯示了根據(jù)本發(fā)明一個實施例，血小板生成素對骨髓細胞移植后小鼠存活率影響的實驗結果。
【具體實施方式】
[0023]下面詳細描述本發(fā)明的實施例，所述實施例的示例在附圖中示出。下面通過參考附圖描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0024]根據(jù)本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了血小板生成素在制備藥物中的用途，所述藥物促進造血干細胞歸巢。
[0025]發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)，應用血小板生成素制備的藥物，可以在造血干細胞移植術中促進造血干細胞的歸巢，增加歸巢的造血干細胞的數(shù)量，提高歸巢效率，進而改善骨髓造血干細胞的移植成功率。
[0026]需要說明的是，本發(fā)明所述的血小板生成素(TPO)，泛指一切具備血小板生成素功能的化合物，即包括ΤΡ0，以及TPO類似物，例如TPO模擬肽(ΤΡ0 mimetic peptide, TMP)、TPO 非模擬肽(ΤΡ0 nonpeptide mimics)等。
[0027]根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供了一種促進造血干細胞歸巢的藥物。根據(jù)本發(fā)明實施例，該藥物包含血小板生成素。
[0028]發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)，該藥物可以在造血干細胞移植術中促進造血干細胞的歸巢，增加歸巢的造血干細胞的數(shù)量，提高歸巢效率，進而促進造血干細胞的早期植入。
[0029]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物的劑型不受特別的限制，可以制成選自注射劑、顆粒劑、片劑和膠囊劑的至少一種。根據(jù)本發(fā)明具體示例，所述藥物為注射劑。
[0030]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物采用生理鹽水或者PBS(即磷酸鹽緩沖液，pH = 7.4)進行稀釋。
[0031 ] 根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物在骨髓移植后24小時內(nèi)，優(yōu)選4小時內(nèi)進行給藥。由此，藥物促進造血干細胞歸巢的效果好，提高藥物療效。
[0032]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物的給藥途徑不受特別限制，例如可以通過靜脈注射給藥、肌肉注射給藥或皮下注射給藥。根據(jù)本發(fā)明具體示例，所述藥物的給藥途徑優(yōu)選為皮下注射。由此，藥物的吸收效果好。
[0033]根據(jù)本發(fā)明實施例，所述藥物的給藥劑量不受特別限制，可以根據(jù)用藥需求及治療個體差異，依據(jù)臨床經(jīng)驗進行適當調(diào)整。根據(jù)本發(fā)明具體示例，對于6-8周齡，20g體重，雄性C57BL/45.1品系小鼠，在進行Co6°射線照射，劑量9.5Gy，照射20-22小時，所述藥物的給藥劑量為10-100 μ g/kg。由此，藥物的療效好。
[0034]下面參考具體實施例，對本發(fā)明進行說明，需要說明的是，這些實施例僅僅是說明性的，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0035]實施例1
[0036]按照以下步驟，檢測血小板生成素對骨髓細胞移植后造血干細胞歸巢的影響:
[0037]1、分離小鼠骨髓細胞
[0038]C57BL/45.2品系小鼠(該品系小鼠造血干細胞表達⑶45.2標志，可通過流式檢測鑒別)購自北京維通利華公司，6-8周齡，18-22g體重，雄性，該批小鼠作為骨髓細胞移植供者。小鼠穩(wěn)定狀態(tài)一周以上，脊椎脫白處死，取出股骨和脛骨，并用PBS反復沖洗骨髓腔，獲得的細胞懸液以2000rpm離心5分鐘，然后加入紅細胞裂解液(購自美國BD公司，貨號555899，使用時去離子水將原液1: 10稀釋后使用)，2分鐘后加入5_10倍體積的PBS，2000rpm離心5分鐘并洗2次，獲得小鼠骨髓細胞懸液，備用。
[0039]2、血小板生成素(thrombopoietin，ΤΡ0)促進小鼠造血細胞歸巢的實驗
[0040]C57BL/45.1品系小鼠(該品系小鼠造血干細胞表達⑶45.1標志，可通過流式檢測鑒別，其造血干細胞可異體移植于上述C57BL/CD45.2小鼠，并通過流式細胞術對供者和受者的細胞進行區(qū)分；上述兩種小鼠造血干細胞的