一種含有毛蕊異黃酮的藥物組合物及其制藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領域，具體涉及一種含有毛蕊異黃酮的藥物組合物及其制藥應 用。
【背景技術】
[0002] 黃芪是傳統常用中藥之一，具有補中益氣，利尿，排膿，斂瘡生肌等功效，近年來， 已有報道黃芪被應用于治療腎臟疾病，但是對其起治療作用的有效成分并不清楚。因此，有 必要對它的主要成分進行研究分析，以闡明作用機理。
[0003] 毛蕊異黃酮是黃芪中黃酮類成分含量較高的一種，研究表明它可以提高免疫功 能，保護心腦血管、肝臟、腎臟和肺臟作用，還可降血脂、降血糖、減少糖尿病并發(fā)癥等。
[0004] 現代研究發(fā)現，黃芪甲苷是黃芪的主要活性成分之一，具有抗炎、抗氧化、免疫調 節(jié)、抗凋亡、抗病毒、缺血損傷保護等多種藥理作用。
[0005] 黃芪多糖為水溶性雜多糖，可作為免疫促進劑或調節(jié)劑，同時具有抗病毒、抗腫 瘤、抗衰老、抗輻射、抗應激、抗氧化等作用。
[0006] 目前，國內外對以上三種成分的治療作用研究報道較多，且治療領域較廣，但未見 以兩種或兩種成分以固定投藥量組合用于治療腎臟及其他疾病的報道。本發(fā)明通過大量試 驗證明以固定投藥量組成的組合物比單獨使用某一成分有更好的治療效果，從而為臨床治 療腎臟疾病提供了新的藥物和方法。

【發(fā)明內容】

[0007] 經過大量試驗研究證實，本發(fā)明公開的組合物能有效治療腎臟疾病、慢性腎衰、腎 病綜合征、腫瘤和心腦血管等疾病。
[0008] 本發(fā)明組合物的活性成分由毛蕊異黃酮10-100份、黃芪甲苷0. 1-10份和/或黃 芪多糖5-50份組成。
[0009] 本發(fā)明毛蕊異黃酮、黃芪甲苷和黃芪多糖可以從黃芪中提取得到，也可以通過化 學合成得到。
[0010] 本發(fā)明藥物組成優(yōu)選：
[0011] 1.毛蕊異黃酮l〇mg、黃苗甲苷0. lmg。
[0012] 2.毛蕊異黃酮100mg、黃苗甲苷10mg。
[0013] 3.毛蕊異黃酮50mg、黃苗甲苷5mg。
[0014] 4.毛蕊異黃酮10mg、黃苗多糖50mg。
[0015] 5.毛蕊異黃酮100mg、黃苗多糖5mg。
[0016] 6.毛蕊異黃酮50mg、黃苗多糖25mg。
[0017] 7.毛蕊異黃酮50mg、黃芪多糖25mg、黃芪甲苷5mg。
[0018] 本發(fā)明組合物可以加入一種或多種藥學上可接受的載體，制成藥劑學上任何一種 劑型，可以制成固體形式、液體形式、氣體形式或半固體形式的制劑，優(yōu)選注射劑、片劑、顆 粒劑、膠囊劑、丸劑或沖劑。
[0019] 本發(fā)明對7組藥物組合物開展了試驗研究，具體藥物組合物是：
[0020] 組合物一：毛蕊異黃酮10mg、黃芪甲苷0. lmg。
[0021] 組合物二：毛蕊異黃酮100mg、黃芪甲苷10mg。
[0022] 組合物三：毛蕊異黃酮50mg、黃芪甲苷5mg。
[0023] 組合物四：毛蕊異黃酮l〇mg、黃苗多糖50mg。
[0024] 組合物五：毛蕊異黃酮IOOmg、黃苗多糖5mg。
[0025] 組合物六：毛蕊異黃酮50mg、黃苗多糖25mg。
[0026] 組合物七：毛蕊異黃酮50mg、黃苗多糖25mg、黃苗甲苷5mg。
[0027] 實驗一、本發(fā)明對慢性腎衰大鼠的治療作用
[0028] 1.實驗動物SD大鼠120只，雌雄各半，體重200g±20g，購自中國科學院上海實驗 動物中心。
[0029] 2.實驗藥物本發(fā)明7組組合物成分由大連美侖生物技術有限公司提供。實驗前按 相應量用〇. 5%羧甲基纖維鈉配成100ml，備用，毛蕊異黃酮、黃芪甲苷和黃芪多糖配制濃 度基本與組合物七濃度相同。
[0030] 3.實驗方法取120只SD大鼠，隨即取出10只作為空白對照組，其余大鼠適應性 喂養(yǎng)3天。除空白對照組外，其余大鼠用2. 5 %腺嘌呤混懸液按250mg/kg/天灌胃，連續(xù)灌 胃給予3周，待出現血清尿素氮、肌酐升高等腎功能衰竭現象時，將符合要求的大鼠隨即分 為模型組、組合物一、組合物二、組合物三、組合物四、組合物五、組合物六、組合物七組、毛 蕊異黃酮組、黃芪甲苷組和黃芪多糖組，每組10只。用純水配制所需藥物100ml，組合物一 至七組、毛蕊異黃酮組、黃芪甲苷組和黃芪多糖組分別灌胃給予相應藥物體積均為IOml/ kg，空白對照組和模型組灌胃給予等體積的0.5%羧甲基纖維鈉，每日給藥一次，連續(xù)給藥 4周。末次給藥24h后，腹主動脈取血，測定血清尿素氮、肌酐、血清白蛋白的含量和血液流 變學各指標，解剖腎臟進行病理切片，顯微鏡下觀察病理變化。
[0031] 4.檢測指標
[0032] (1)測定血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的含量
[0033] (2)血液流變學檢查
[0034] (3)病理學檢查
[0035] 5.實驗結果
[0036] (1)本發(fā)明對慢性腎衰模型大鼠血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的影響。見表1。
[0037] 表1本發(fā)明對慢性腎衰大鼠血清尿素氮、肌酐和血清白蛋白的影響）
[0038]
[0039] 注：各組與模型組比較*P〈0. 05，**P〈0. 01
[0040] 結果表明：空白對照組與模型組比較尿素氮和肌酐明顯較低，血清白蛋白明顯較 高，且有顯著性差異，表明造模后，已對大鼠造成嚴重損傷，經過4周的治療各給藥組大鼠 尿素氮和肌酐明顯降低，血清白蛋白明顯升高，且有顯著性差異（P〈〇. 05或p〈0. 01)，且指 標改善情況優(yōu)于單有等劑量的毛蕊異黃酮、黃芪甲苷或黃芪多糖。
[0041] (2)本發(fā)明對慢性腎衰大鼠血液流變學的影響。見表2。
[0042] 表2本發(fā)明對慢性腎衰大鼠血液流變學的影響

[0045] 注：各組與模型組比較*Ρ〈0· 05, **Ρ〈0· 01
[0046] 結果表明：空白對照組與模型組比較全血粘度，血漿粘度和紅細胞壓積均明顯較 低，且有顯著性差異，表明造模后，已對大鼠造成嚴重損傷，經過4周的治療各給藥組大鼠 全血粘度，血漿粘度和紅細胞壓積均明顯降低，且有顯著性差異（Ρ〈〇. 05或ρ〈0. 01)，且指 標改善情況優(yōu)于或等于單有等劑量的毛蕊異黃酮、黃芪甲苷或黃芪多糖。
[0047] (3) HE染色顯微鏡下觀察結果
[0048] 空白對照組：腎小球和腎小管清晰，結構正常，未見病理改變；
[0049] 模型組：腎小球萎縮，腎小管明顯擴張，近曲小管和遠曲小管上皮細胞均有明顯濁 腫和變性發(fā)生，腎間質纖維組織增生，并有慢性炎細胞浸潤；
[0050] 各給藥組：腎小球輕微充血，結構未見異常，腎小管有輕微擴張，無明顯炎細胞浸 潤。
[0051] 6.結論實驗結果證實，各給藥組對慢性腎衰均有較好地治療作用，具體表現在改 善血肌酐、尿素氮、血清白蛋白、血液流變學各指標和病理學特征方面。
[0052] 實驗二、本發(fā)明組合物對腎小球腎炎的治療作用
[0053] 1.實驗動物SD大鼠130只，雌雄各半，體重180_220g，購自中國科學院上海實驗 動物中心。新西蘭白兔8只，購自西安市迪樂普生物資源開發(fā)有限公司。
[0054] 2.實驗藥物本發(fā)明7組組合物藥物成分由大連美侖生物技術有限公司提供。實驗 前按相應量用0.5%羧甲基纖維鈉配成100ml，備用，毛蕊異黃酮、黃芪甲苷和黃芪多糖配 制濃度基本與組合物七濃度相同。
[0055] 3.實驗方法
[0056] (1)制備兔抗大鼠胸腺細胞血清取無菌的SD大鼠6只，處死，小心摘取大鼠胸腺 和肝臟。將肝臟用PBS緩沖液沖洗干凈后制成肝粉待用；另將胸腺置于PBS緩沖液中，沖洗 2-3次，小心分離、去除其表面的淋巴結和血管，置200目不銹鋼網篩上，用解剖針輕輕劃破 胸腺游離出胸腺細胞，用PBS緩沖液沖洗，收集胸腺細胞懸液，離心10min，用PBS緩沖液重 制2 X IOVml的胸腺細胞懸液，按體積比1 :2混合胸腺細胞懸液和弗氏完全佐劑，充分混 勻，以混合后的懸液作為大鼠胸腺細胞免疫抗原液。將大鼠胸腺細胞免疫抗原液多點注射 于8只新西蘭白兔背部皮下，每只兔子注射3ml。常規(guī)飼養(yǎng)2周后，兔耳緣靜脈注射2 X IO7/ ml的胸腺細胞懸液，每只注射I. 5ml。7d后心臟抽取兔子血液，收集兔血清。用免疫擴