聯(lián)苯雙酯在制備防曬護(hù)膚品的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及聯(lián)苯雙酯在制備防曬護(hù)膚品的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 近年來，大氣臭氧層遭到嚴(yán)重破壞，隨著臭氧的耗損，太陽紫外線輻照強(qiáng)度不斷增 強(qiáng)，且紫外線輻射具有累積效應(yīng)，對(duì)人們的影響將越來越大。武警部隊(duì)?wèi)?zhàn)士在高原，夏日?qǐng)?zhí) 勤、處突時(shí)長期暴露在強(qiáng)烈日光照射，過多接觸紫外線可以造成皮膚的氧化損傷，導(dǎo)致皮膚 光老化、皮膚癌變、免疫抑制等一系列疾病。近年來對(duì)紫外線導(dǎo)致皮膚損害的分子機(jī)制和信 號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)行了深入研宄，其中研宄較多的包括曬斑細(xì)胞的凋亡、皮膚免疫功能的抑制、皮膚 DNA的損傷、皮膚氧自由基的增多、以及皮膚中基酯金屬蛋白酶，尿苷酸的增高。但是對(duì)紫外 線皮膚損傷的標(biāo)志物還未統(tǒng)一。針對(duì)這些分子機(jī)制和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，開發(fā)安全、有效的防紫 外線輻照產(chǎn)品成為本世紀(jì)化妝品行業(yè)研宄的重要課題。
[0003] 隨著人類對(duì)紫外線照射危害的認(rèn)識(shí)，以及對(duì)其分子機(jī)制和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的深入研宄， 應(yīng)用防曬護(hù)膚品防御日光中的紫外線越來越受到人們的關(guān)注。在高原和戶外執(zhí)勤的武警官 兵，長期受到日光紫外線的危害，嚴(yán)重影響了他們的生活質(zhì)量和戰(zhàn)斗力。目前市場上琳瑯滿 目的防曬品有的價(jià)格昂貴，有的具有局部刺激，易引起紫外線過敏。開發(fā)安全、有效的防紫 外線輻照產(chǎn)品成為本世紀(jì)化妝品行業(yè)研宄的重要課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供聯(lián)苯雙酯在制備防曬護(hù)膚品的應(yīng) 用。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：
[0006] 聯(lián)苯雙酯在制備防曬護(hù)膚品中的應(yīng)用。
[0007] 防曬護(hù)膚品的劑型優(yōu)選為溶液劑、膜劑、凝膠劑、軟膏劑或乳劑。優(yōu)選的是乳劑或 軟膏劑。
[0008] 實(shí)驗(yàn)證明聯(lián)苯雙酯是一類具有良好的紫外線防護(hù)功能的化合物，其對(duì)紫外線不僅 有吸收的功效，還對(duì)紫外線的損害有保護(hù)功能，可做為紫外防護(hù)劑添加劑在制備防曬護(hù)膚 品中進(jìn)行應(yīng)用。聯(lián)苯雙酯具有紫外線吸收的功效和紫外線的損害有保護(hù)功能。本品所用的 原料無毒，價(jià)格便宜，成本低廉，安全高效。
【附圖說明】
[0009] 圖1為聯(lián)苯雙酯體外對(duì)紫外線輻射后人成纖維細(xì)胞的保護(hù)作用。*與紫外照射模 型組比較P〈〇. 05 ▲與正常對(duì)照組比較P〈0. 05
[0010] 圖2為聯(lián)苯雙酯體外對(duì)紫外線輻射后人表皮細(xì)胞的保護(hù)作用。*與紫外照射模型 組比較P〈〇. 05 ▲與正常對(duì)照組比較p〈0. 05
[0011] 圖3為聯(lián)苯雙酯體外對(duì)人黑色素細(xì)胞的黑色素產(chǎn)生的影響，*與對(duì)照組組比較 ρ〈0· 05
[0012] 圖4為聯(lián)苯雙酯對(duì)HaCaT細(xì)胞的UVB防護(hù)作用（Hoechst染色）。
[0013] 圖5. HE染色法觀察聯(lián)苯雙酯對(duì)大鼠的UVB防護(hù)作用（AEC 400 X)。
[0014] 圖6聯(lián)苯雙酯對(duì)大鼠皮膚對(duì)大鼠皮膚Bcl-2表達(dá)的影響（AEC 200X)。
[0015] 圖7聯(lián)苯雙酯對(duì)大鼠皮膚對(duì)大鼠皮膚Bax表達(dá)的影響（AEC 200X)。
[0016] 圖8聯(lián)苯雙酯對(duì)大鼠皮膚對(duì)大鼠皮膚Collagen I表達(dá)的影響（AEC 200X)。
【具體實(shí)施方式】
[0017] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。
[0018] 下列實(shí)施例可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本 發(fā)明。
[0019] 人永生化表皮細(xì)胞（HaCaT細(xì)胞）購自凱基生物技術(shù)有限公司。
[0020] 人真皮成纖維細(xì)胞（Fb細(xì)胞）購自凱基生物技術(shù)有限公司。
[0021] 人黑色素瘤細(xì)胞A375等購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院細(xì)胞庫。
[0022] 實(shí)施例1
[0023] 聯(lián)苯雙酯在制備防曬軟膏劑中的應(yīng)用：
[0024] 聯(lián)苯雙酯10. 0克、冰片0. 5克，單硬酯酸甘油酯20克、十八醇5克、硬酯酸10克、 凡士林10克、甘油10克、三乙醇胺2克、十二烷基硫酸鈉2克、尼泊金酯、香精適量、余量為 去尚子，共計(jì)100克。
[0025] 將單硬酯酸甘油酯、硬酯酸、凡士林、十八醇混合加熱至75°C為油相；
[0026] 將甘油、三乙醇胺及去離子水加熱至75°C，再加入十二烷基硫酸鈉溶解為水相； 然后將水相緩緩倒入油相中，邊加邊攪，直至冷卻，即得基質(zhì)；
[0027] 將聯(lián)苯雙酯和冰片加入基質(zhì)中，攪拌均勻，加入尼泊金酯、香料即得。
[0028] 將聯(lián)苯雙酯加上藥學(xué)可接受的輔料制成溶液劑、膜劑、凝膠劑或乳劑。
[0029] 藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0030] 一、聯(lián)苯雙酯對(duì)紫外線輻射損傷保護(hù)體外研宄
[0031] 1.聯(lián)苯雙酯對(duì)HaCaT、Fb細(xì)胞UVB防護(hù)作用
[0032] 取對(duì)數(shù)生長期HaCaT，F(xiàn)B細(xì)胞，用2. 5 %胰蛋白酶消化，計(jì)數(shù)，細(xì)胞濃度為IXlO4 個(gè)，以100 μ L接種于96孔板，接種24h后，用UVB紫外治療儀輻射板中細(xì)胞，輻射劑量為 30Mj/cm2,之后加入不同劑量的聯(lián)苯雙酯（1\1〇- 7~1\1〇-4!11〇1/1)，正常對(duì)照組加入等量 溶媒，置于37°C，5% CO2溫箱中培養(yǎng)。24h后，移除培養(yǎng)液，加入50 μ IMTT溶液（lmg/mL， PBS配置），37°C孵育4h，移除上清，每孔加入150 μ IDMSO溶解甲簪顆粒，震蕩溶解后，用酶 標(biāo)儀檢測550nm條件處測其光密度值（OD)，以溶劑對(duì)照組的細(xì)胞為對(duì)照組，用以下公式計(jì) 算藥物對(duì)細(xì)胞的抑制率，并計(jì)算細(xì)胞存活率：細(xì)胞存活率=100-(對(duì)照組OD值-加藥組OD 值）八對(duì)照組OD值-空白組OD值）X 100% (3)每一實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
[0033] 如圖1所示，UVB輻射組與正常對(duì)照組相比，UVB輻射顯著性抑制了人真皮成纖維 細(xì)胞（Fb)的活性，給藥組與UVB輻射組相比，聯(lián)苯雙酯（I X 10_7~I X 10 _4mol/L)給藥后， 細(xì)胞存活率顯著提高。
[0034] 如圖2所示，UVB輻射組與正常對(duì)照組相比，UVB輻射顯著性抑制了人永生化表皮 細(xì)胞（HaCaT)的活性；給藥組與UVB輻射組相比，聯(lián)苯雙酯（I X 10_7~I X 10 _4mol/L)給藥 后，細(xì)胞存活率顯著提高。
[0035] 2.聯(lián)苯雙酯對(duì)人黑色素細(xì)胞黑色素生產(chǎn)的影響
[0036] 采用酶標(biāo)儀在405nm測定其吸光度值，間接反應(yīng)出人黑色素細(xì)胞中黑色素生成 量。
[0037] 從圖3可以觀察到聯(lián)苯雙酯（IX KT6~IX l(T4m〇l/L)給藥組與正常人黑色素細(xì) 胞組比，黑色素生成量明顯降低。
[0038] 3.形態(tài)學(xué)觀察聯(lián)苯雙酯對(duì)Ha