一種癸氧喹酯納米制劑及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種癸氧喹酯納米制劑及其制備方法與應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 瘧疾是經(jīng)按蚊叮咬進(jìn)行傳播的由瘧原蟲引起的疾病。瘧原蟲通過蚊蟲叮咬到達(dá)人 體后，首先在肝臟由子孢子發(fā)育成裂殖子，然后感染紅細(xì)胞。瘧原蟲感染紅細(xì)胞后，引起癥 狀如發(fā)燒，頭痛，疲勞和嘔吐等。這些癥狀通常在蚊子叮咬后10天到15天出現(xiàn)?；颊咄ǔ?需要及時(shí)治療，否則會(huì)損壞病人的重要器官甚至威脅到病人的生命安全。據(jù)世界衛(wèi)生組織 2013年統(tǒng)計(jì)的數(shù)字，世界上還有97個(gè)國(guó)家近34億人口處于罹患瘧疾的危險(xiǎn)，其中12億處 在高風(fēng)險(xiǎn)中。每年大約有62萬人死于瘧疾，其中70%以上是5歲以下的兒童。但是瘧疾是 可以預(yù)防和治愈的，因此這種狀況并非不可避免。
[0003] 目前與瘧疾抗?fàn)幍姆椒ㄓ蟹乐刮孟x叮咬、發(fā)展預(yù)防性疫苗以及尋找和研制有效的 抗瘧疾藥物。迄今為止，還沒有預(yù)防瘧疾的疫苗誕生。全球范圍內(nèi)已出現(xiàn)瘧原蟲廣泛對(duì)氯 喹和磺胺類耐藥。我國(guó)科技工作者發(fā)明的青蒿素是當(dāng)前最主要的抗瘧疾藥。但是東南亞一 帶也出現(xiàn)了青蒿素耐藥蟲株。為避免青蒿素耐藥，世界衛(wèi)生組織已限制青蒿素單獨(dú)使用，而 必須聯(lián)合用藥。另外，全球青蒿素生產(chǎn)能力有限（黃蒿種植量有限）。伯氨喹類是較新的 用于肝期的抗瘧疾藥物。但是這類藥有很強(qiáng)的副作用，它不僅可引起部分瘧疾病人的急性 溶血性貧血，而且對(duì)惡性瘧紅細(xì)胞內(nèi)期則完全無效，不能作為控制癥狀的藥物應(yīng)用。而以阿 托伐醌/氯胍組成的復(fù)方馬拉隆則因?yàn)閮r(jià)格高而使低收入人群經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)過重。因而開發(fā)廉 價(jià)、高效、低毒并可以大量生產(chǎn)的新藥和新的復(fù)方制劑勢(shì)在必行。
[0004] 近年來，本專利發(fā)明人和不少其他作者在研宄中發(fā)現(xiàn)一種球蟲抑制藥物癸氧喹酯 (CAS號(hào)為18507-89-6)在體外實(shí)驗(yàn)中有很強(qiáng)的抑制和殺滅瘧原蟲的作用。其在體外試驗(yàn)的 藥效不僅遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過氯喹，而且絲毫也不遜色于青蒿素。這是經(jīng)過從上百萬個(gè)化合物篩選比 較而得出來的結(jié)論（Science2011 ;334:1372-7)。新近的實(shí)驗(yàn)證明癸氧喹酯通過抑制瘧原 蟲線粒體的細(xì)胞色素bcl復(fù)合物，可以非常有效地在體外和體內(nèi)殺滅瘧原蟲。雖然它與臨 床上現(xiàn)有的阿托伐醌的藥理作用相似，但是與其并不具交叉抗藥性。有文獻(xiàn)報(bào)道，對(duì)有1個(gè) 突變位點(diǎn)的瘧原蟲產(chǎn)生的抗藥性，癸氧喹酯的藥效失去2倍，而阿托伐醌的藥效失去20倍； 對(duì)有3個(gè)基因突變位點(diǎn)的瘧原蟲產(chǎn)生的抗藥性，癸氧喹酯的藥效失去5倍，而阿托伐醌的藥 效失去 1000 倍（ACSChem.Biol. 2011，6, 1214 - 1222)。
[0005] 癸氧喹酯，由化學(xué)合成，其命名為4-羥基喹啉（乙基-6-癸氧基-7-乙氧基-4-羥 基喹啉-3-羧酸酯），CAS號(hào)18507-89-6,分子量418,分子式C25H35NO5。據(jù)EFSA雜志 (2003) 17,1-40的有關(guān)癸氧喹酯專題的綜合報(bào)道，癸氧喹酯的水溶解度非常低（純凈水中 〇? 06毫克/升，在一般pH值為4-9的水中〈0? 01毫克/升），呈高親脂性（logKow值為 5. 2-5. 5)，該化合物在其它溶劑中的溶解度也非常低。
[0006] 癸氧喹酯作為抗球蟲病的獸藥，在全球范圍內(nèi)（包括我國(guó)）使用已有多年的歷史， 沒有發(fā)現(xiàn)有明顯的副作用，其主要的作用部位為家禽和馬，羊等牲口的腸道，用于抗球蟲感 染，因此不需要經(jīng)腸道吸收入體內(nèi)而發(fā)揮藥效。因?yàn)楣镅踵ニ苄詷O差，所以阻礙其從腸 道有效吸收到體內(nèi)，這就限制了該化合物用于人體作為抗瘧疾藥使用。
[0007] 癸氧喹酯在藥效和安全性方面較其它現(xiàn)有的抗瘧藥有明顯的優(yōu)勢(shì)?？诜┬腿匀?是最方便可行的用藥方式。癸氧喹酯能不能成為口服抗瘧疾藥，關(guān)鍵是要解決其在腸道吸 收的問題。藥物顆粒粒徑在微米以上的混懸液是癸氧喹酯常見的用藥方式。而以這種方式 給藥不可能達(dá)到體內(nèi)的有效濃度，也就不可能起到預(yù)防或治療瘧疾的效果。
[0008] 曾經(jīng)有報(bào)道，癸氧喹醋可增強(qiáng)二氯二甲P比啶酷（meticlorpindol，3, 5-Dichloro_2 ,6-dimethyl_4-pyridinol)在哺乳動(dòng)物內(nèi)的抗皰原蟲的效果[見U.SPat.No. 4, 031, 220和 U.S.Pat.No. 4, 195, 089].二篇報(bào)道均是以癸氧喹酯1份和二氯二甲吡啶酚60份的比例混 合，然后再摻入乳糖和淀粉，進(jìn)一步與溶于水相中的聚乙烯吡咯烷酮制粒。然而，這些報(bào)道 完全沒有提供關(guān)于藥物顆粒大小的信息，也沒有提供任何有關(guān)于抗瘧疾藥效的實(shí)驗(yàn)資料。
[0009] 在測(cè)試癸氧喹酯抗瘧疾藥效的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，需要選擇合適的溶劑給藥。有的用 玉米油乳劑[Tae-gyuNametal(2011),ACSChemicalBiolog(Il) :1214 - 1222]，還 有的用大豆油乳劑[Filipa.P.daCruz,etal(2012),JournalofInfectiousDisease 205 (8) : 1278-86]。由于實(shí)驗(yàn)本身會(huì)產(chǎn)生一定的誤差，再加上所選擇的溶劑不同，所得出的 藥效差異竟然超出10倍以上。因此，能不能把癸氧喹酯發(fā)展成為抗瘧疾藥，就在于能不能 研制出有效的溶劑給藥。
[0010] 用于抗球蟲的商品化的獸藥制劑中含癸氧喹酯的量一般都在6 %。其中有 國(guó)外的產(chǎn)品[DeccOX? (Rhone-Poulenc)，U.S.Pat.No. 3, 485, 845, 1969;USPat-No. 35446861970]， 也有國(guó)內(nèi) 的產(chǎn)品[Wuetal.CN101606908 (A) ,2009;Lietal.CN 101590055 (A)，2009)。在這些含癸氧喹酯的獸藥產(chǎn)品中，所用藥物載體有多種多樣，制劑制 作的方式也各不相同。但是所有這些用于獸藥的制劑并無有關(guān)顆粒大小的實(shí)驗(yàn)資料。有的 劑型所含有制劑顆粒達(dá)到毫米[Lietal.CN102228438A，2011].這些制劑可能在某種程 度上增加了癸氧喹酯的溶解度，但是沒有證據(jù)證明它們可以作為抗瘧疾的醫(yī)療藥品。
[0011] 對(duì)于在體外有高度生物活性的難溶化合物，可以通過增強(qiáng)溶解度，提高體內(nèi)藥物 的釋放以及藥效，將其轉(zhuǎn)變?yōu)橛杏玫乃幤?。提高化合物溶解度通常所用的辦法，是將其制成 鹽或者是通過制劑的方法以增強(qiáng)其溶解度。后者涉及到用高分子載體，增溶劑或表面活性 劑。在試圖將癸氧喹酯轉(zhuǎn)化為抗瘧疾藥的嘗試中，還沒有成功運(yùn)用上述方法的報(bào)道。目前 還沒有任何一個(gè)以癸氧喹酯作為活性成份的用于防治瘧疾的產(chǎn)品問世。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 本發(fā)明的目的之一在于提供一種癸氧喹酯納米制劑，其粒徑不大于300nm，提高了 癸氧喹酯的溶出率、生物利用度及抗瘧疾藥效。
[0013] 本發(fā)明的目的之二在于提供一種上述癸氧喹酯納米制劑的制備方法，制得的癸氧 喹醋納米制劑的粒徑不大于300nm。
[0014] 本發(fā)明的目的之三在于提供一種上述癸氧喹酯納米制劑在抗瘧疾方面的應(yīng)用。
[0015] 為達(dá)此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
[0016] -種癸氧喹酯納米制劑，包括癸氧喹酯、兩親性表面活性劑，所述兩親性表面活性 劑為L(zhǎng)-a磷脂酰膽堿。
[0017] 癸氧喹酯為癸氧喹酯納米制劑的活性成分，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式（1)所示：
[0018]
[0019] 市售的癸氧喹酯由于其在腸道的溶出率太低，只能用于抗球蟲病。當(dāng)晶體藥物 從10微米降到100納米時(shí)，比表面積提高100倍，[ElaineM.Merisko-Liversidge(2008) DrugNanoparticles:FormulatingPoorlyWater-SolubleCompounds,Toxicologic Pathology，36:43-48]。含藥顆粒表面積的增大對(duì)于藥物的溶出率和藥物分子在腸道的吸 收具根本性的改變，而溶出率的增加可明顯加強(qiáng)難溶化合物的藥效。本發(fā)明的癸氧喹酯納 米制劑由于其比表面積比常規(guī)的癸氧喹酯微米制劑的比表面積大很多，有利于增加癸氧喹 酯納米制劑中癸氧喹酯的溶出率及癸氧喹酯在腸道的吸收，使其有效用于抗瘧疾。
[0020] 本發(fā)明所述的兩親性表面活性劑的HLB值不小于10,所述的兩親性表面活性劑指 的是既可在pH為中性的溶劑中溶解，又可在酸性條件下溶解；本發(fā)明的兩親性表面活性劑 為L(zhǎng)-a磷脂酰膽堿，在中性條件下，兩親性表面活性劑帶有電荷，呈二親性；而在酸性環(huán)境 中，兩親性表面活性劑則可以接受一個(gè)質(zhì)子，并且形成相對(duì)穩(wěn)定的中性分子，兩親性表面活 性劑有助于提高癸氧喹酯的溶解度，這在腸道吸收時(shí)尤為重要。
[0021] 本發(fā)明所述L-a磷脂酰膽堿選自蛋黃L-a磷脂酰膽堿和/或植物L(fēng)-a磷脂酰 膽堿，植物L(fēng)-a磷脂酰膽堿通常指的是大豆L-a磷脂酰膽堿；其中，所述蛋黃L-a磷脂酰 膽堿從蛋黃中提取，大豆L-a磷脂酰膽堿從大豆中提取。
[0022] 優(yōu)選地，所述兩親性表面活性劑與所述癸氧喹酯的質(zhì)量比為1~5:1，例如1:1、 2:1、3:1、4:1、5:1 〇
[0023] 所述癸氧喹酯納米制劑還包括非離子表面活性劑；所述非離子表面活性劑是指在 水溶液中不產(chǎn)生離子的表面活性劑。非離子表面活性劑在水中的溶度是由于分子中具有強(qiáng) 親水性的官能團(tuán)。非離子表面活性劑溶于水時(shí)不發(fā)生解離，其分子中的親油基團(tuán)與離子型 表面活性劑的親油基團(tuán)大致相同，其親水基團(tuán)主要是由具有一定數(shù)量的含氧基團(tuán)（如羥基 和聚氧乙烯鏈）構(gòu)成。由于非離子表面活性劑在溶液中不是以離子狀態(tài)存在，所以它的穩(wěn) 定性高，不易受強(qiáng)電解質(zhì)存在的影響，也不易受酸、堿的影響，與其他類型表面活性劑能混 合使用，相容性好，在各種溶劑中均有良好的溶解性，在固體表面上不發(fā)生強(qiáng)烈吸附。
[0024] 本發(fā)明中，非離子表面活性劑的引入可使兩親性表面活性劑的作用更佳，還可 使所形成的納米顆粒不會(huì)發(fā)生再聚合。優(yōu)選地，本發(fā)明所述非離子表面活性劑為聚山梨 醇酯和/或KolliphorHS15;本發(fā)明所述的聚山梨醇酯為司盤（Span，山梨醇脂肪酸 酯）和環(huán)氧