當(dāng)歸藤在制備治療肝纖維化藥物方面的新用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及當(dāng)歸藤的新用途，特別是當(dāng)歸藤提取物及當(dāng)歸藤總黃酮的新用途，即 在制備治療肝纖維化藥物方面的新用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 肝纖維化是肝損傷持續(xù)存在，組織發(fā)生修復(fù)反應(yīng)時(shí)因細(xì)胞外基質(zhì)合成、降解與沉 積不平衡而引起的病理過(guò)程，肝臟內(nèi)細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-基質(zhì)、基質(zhì)-遞質(zhì)間相互作用，構(gòu)成 的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，參與肝纖維化的發(fā)生及發(fā)展。肝纖維化是慢性肝病重要的病理特征，也是 進(jìn)一步向肝硬化發(fā)展的主要中間環(huán)節(jié)。如若病因持續(xù)存在，肝纖維化逐漸加重，肝小葉正常 結(jié)構(gòu)遭到破壞，中心靜脈區(qū)和匯管區(qū)出現(xiàn)間隔、假小葉形成，即發(fā)展為肝硬化。肝硬化不僅 可導(dǎo)致慢性肝細(xì)胞功能衰竭和門(mén)脈高壓等并發(fā)癥，還可發(fā)展為肝細(xì)胞癌。
[0003] 肝纖維化過(guò)程中出現(xiàn)的肝竇毛細(xì)血管化及病理性血管新生從微觀辨證上來(lái)看屬 中醫(yī)"血瘀"的病機(jī)。
[0004] 當(dāng)歸藤（Embelia parviflora Wall)系紫金?？苹ㄋ崽僮訉僦参铮址Q小花酸藤 子、大力王、篩其強(qiáng)，為常綠木質(zhì)藤本，以其干燥的藤或根入藥，主要分布廣西（龍州、大新、 天等、百色、河池）、廣東、貴州、云南等地。其性味苦、澀、平。壯醫(yī)認(rèn)為當(dāng)歸藤具有通龍路火 路、補(bǔ)血調(diào)經(jīng)、益精壯陽(yáng)、強(qiáng)腰膝的功能，是常用壯藥品種，用于勒內(nèi)（貧血）、京瑟（閉經(jīng)）、 月經(jīng)不調(diào)、隆白呆（帶下）、發(fā)旺（風(fēng)濕骨痛）、腰腿痛、胸肋痛、胃痛、慢性腸炎、產(chǎn)后腹痛、 卟艮襠（不孕癥）等，屬抗風(fēng)濕要藥。廣西特產(chǎn)中成藥"桂龍藥膏"以該藥材為原料。
[0005] "當(dāng)歸藤化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)研宄"《廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)》發(fā)現(xiàn)，當(dāng)歸藤中可能含有糖 類、苷類、酚類、鞣質(zhì)、皂苷、有機(jī)酸類、黃酮類、三萜類、留體類、揮發(fā)油及油脂等成分。
[0006] 據(jù)盧森華等人研宄報(bào)道（"當(dāng)歸藤不同部位揮發(fā)油成分GC-MS分析"《安徽農(nóng)業(yè)科 學(xué)》），當(dāng)歸藤根、莖、葉揮發(fā)油中均含有2-正戊基呋喃、肉豆蔻酸、棕櫚酸和亞油酸，根中含 量最高為亞油酸，莖中含量最高為棕櫚酸。
[0007] "當(dāng)歸藤中總皂苷的提取工藝研宄"《時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥》劉靜等人在對(duì)當(dāng)歸藤化學(xué) 成分的研宄中，分離得到大量皂苷類化合物，其主要成分為百兩金皂苷B。皂苷類化合物 常具有較好的抗腫瘤活性，而百兩金皂苷B作為中藥百兩金的重要成分之一，對(duì)腫瘤細(xì)胞 MCF-7, NCI-H460和SF-268具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。
[0008] "紫外分光光度法測(cè)定當(dāng)歸藤中兒茶素含量"《安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)》管海波等在對(duì)當(dāng)歸 藤化學(xué)成分的研宄過(guò)程中，分離得到大量的兒茶素。兒茶素具有抑菌、消炎、抑制腫瘤、抗氧 化、抗衰老、抗畸變、降血壓、降血脂、降血糖、防輻射等多種保健功能。
[0009] "當(dāng)歸藤中總黃酮提取工藝研宄"《食品工業(yè)科技》報(bào)道針對(duì)當(dāng)歸藤中總黃酮提取 工藝研宄，但僅僅按總黃酮得率為指標(biāo)。
[0010] 目前未檢索到當(dāng)歸藤、當(dāng)歸藤提取物或當(dāng)歸藤總黃酮可用于治療肝纖維化的文獻(xiàn) 報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】
toon] 本發(fā)明的目的是提供當(dāng)歸藤在制備治療肝纖維化藥物方面的新用途；
[0012] 本發(fā)明的另一目的是提供當(dāng)歸藤提取物在制備治療肝纖維化藥物方面的新用 途；
[0013] 本發(fā)明的另一目的是提供當(dāng)歸藤總黃酮在制備治療肝纖維化藥物方面的新用 途；
[0014] 本發(fā)明的另一目的是提供當(dāng)歸藤提取物的制備方法；
[0015] 本發(fā)明的另一目的是提供當(dāng)歸藤總黃酮的制備方法。
[0016] 本發(fā)明的目的是通過(guò)下列的技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0017] 本發(fā)明原料來(lái)源：
[0018] 當(dāng)歸藤：系紫金?？苹ㄋ崽僮訉僦参顴mbelia parviflora Wall，又稱小花酸藤 子、大力王、篩其強(qiáng)，為常綠木質(zhì)藤本，以其干燥的藤或根入藥，主要分布廣西（龍州、大新、 天等、百色、河池）、廣東、貴州、云南等地。性味苦、澀、平。
[0019] 發(fā)明人在研宄肝纖維化的治療過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，紫金?？浦参锂?dāng)歸藤特別是當(dāng)歸藤所 含總黃酮表現(xiàn)出能顯著改善大鼠肝纖維化程度，減輕肝組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和脂肪變性程 度，表明當(dāng)歸總黃酮具有抗大鼠肝纖維化，保護(hù)肝細(xì)胞作用，對(duì)肝功能有改善效果。
[0020] 肝纖維化病變時(shí)，肝細(xì)胞受到破壞死亡，其合成分泌的ALT、AST等就經(jīng)肝細(xì)胞膜 轉(zhuǎn)移至血液，使血液中的含量明顯升高；此外，肝細(xì)胞破壞死亡，導(dǎo)致其合成的白蛋白減少。 因此，ALT、AST、白蛋白血清水平可反映肝細(xì)胞損傷程度。而LN水平能反映肝臟的早期損害 和肝組織病變的活動(dòng)進(jìn)程，對(duì)預(yù)示肝纖維化的發(fā)生和肝硬化的早期診斷具有重要價(jià)值。肝 臟損傷時(shí)，肝內(nèi)間質(zhì)細(xì)胞合成HA增加，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞受損，數(shù)量減少，使HA分解減少，從而 使血清HA含量增加。在研宄中發(fā)現(xiàn)，CC14誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠給予當(dāng)歸藤總黃酮后血清 ALT、AST含量顯著降低，白蛋白含量顯著升高，LN、HA顯著降低，表明當(dāng)歸總黃酮具有抗大 鼠肝纖維化，保護(hù)肝細(xì)胞作用，對(duì)肝功能有改善效果。
[0021] 當(dāng)然，當(dāng)歸藤總黃酮對(duì)肝纖維化大鼠的肝保護(hù)作用可能是一個(gè)復(fù)雜的機(jī)制，具體 機(jī)制還需做進(jìn)一步研宄。雖然目前對(duì)其具體作用機(jī)制還不完全明了，但當(dāng)歸藤總黃酮對(duì)肝 纖維化大鼠具有較好的治療及肝保護(hù)作用，提示其肝纖維化作用，從而保護(hù)受損肝臟。
[0022] 本發(fā)明專利臨床應(yīng)用的安全性較高，在治療肝纖維化的藥物治療中不失為一種好 藥，其拓寬了治療肝纖維化的新方法，同時(shí)為患者解決了現(xiàn)有技術(shù)治療肝纖維化時(shí)出現(xiàn)的 不良反應(yīng)。
[0023] 因此，申請(qǐng)人提供當(dāng)歸藤、當(dāng)歸藤提取物、當(dāng)歸藤總黃酮能夠用于治療肝纖維化藥 物方面的新用途。
[0024] 本發(fā)明還公開(kāi)了當(dāng)歸藤提取物在制備治療肝纖維化藥物的應(yīng)用，所述當(dāng)歸藤提取 物的制備包括以下步驟：
[0025] 當(dāng)歸藤粉碎，加入濃度為60-80 %乙醇50-70°C水浴提取2-3次，每次乙醇用量為 藥材總重量8-12倍，每次提取時(shí)間為40-60min，合并提取液，濃縮，過(guò)濾，濃縮，干燥，得當(dāng) 歸藤提取物。
[0026] 本發(fā)明公開(kāi)的當(dāng)歸藤總黃酮在制備治療肝纖維化藥物的應(yīng)用，所述當(dāng)歸藤總黃酮 通過(guò)以下步驟制備：
[0027] 當(dāng)歸藤粉碎，加入濃度為50-80%乙醇微波提取2-3次，每次乙醇用量為藥材總重 量8-15倍，每次提取時(shí)間為10-20min，合并提取液，濃縮，過(guò)濾，濾液過(guò)弱酸性陽(yáng)離子交換 樹(shù)脂吸附后，用濃度為60-80%乙醇洗脫，洗脫液濃縮、真空干燥，得當(dāng)歸藤總黃酮。
[0028] 本發(fā)明公開(kāi)的當(dāng)歸藤總黃酮在制備治療肝纖維化藥物的應(yīng)用，所述當(dāng)歸藤總黃酮 還可以通過(guò)以下步驟制備：
[0029] 當(dāng)歸藤粉碎，加入濃度為60%乙醇，用780W微波提取2-3次，每次乙醇用量為藥材 總重量12倍，每次提取時(shí)間為15min，合并提取液，減壓濃縮，加硅藻土過(guò)濾，濾液過(guò)ADS17 樹(shù)脂吸附，用70%乙醇洗脫，洗脫液濃縮、真空干燥，得當(dāng)歸藤總黃酮。
[0030] 本發(fā)明提供的當(dāng)歸藤、當(dāng)歸藤提取物、當(dāng)歸藤總黃酮用于治療肝纖維化藥物方面 的新用途具有以下優(yōu)點(diǎn)：
[0031] 1、當(dāng)歸藤、當(dāng)歸藤提取物、當(dāng)歸藤總黃酮從紫金?？苹ㄋ崽僮訉佼?dāng)歸藤中而得，安 全無(wú)毒，可長(zhǎng)期服用。
[0032] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，當(dāng)歸藤提取物及當(dāng)歸藤總黃酮可顯著降低肝纖維化大鼠的ALT、 AST(P〈0.01或P〈0.05)，顯著升高肝纖維化大鼠的白蛋白（P〈0.01或P〈0.05)，顯著降低肝 纖維化大鼠的LN、HA(P〈0. 01或P〈0. 05)，可明顯改善大鼠肝纖維化程度，減輕肝組織炎癥 細(xì)胞浸潤(rùn)和脂肪變性程度，表明當(dāng)歸藤提取物及當(dāng)歸藤總黃酮具有抗大鼠肝纖維化，保護(hù) 肝細(xì)胞作用，對(duì)肝功能有改善效果?？傮w實(shí)驗(yàn)效果顯示，當(dāng)歸藤提取物及當(dāng)歸藤總黃酮可有 效治療肝纖維化，治療效果最優(yōu)為當(dāng)歸藤總黃酮，當(dāng)歸藤提取物次之，但兩者均顯示出顯著 的治療效果。
【具體實(shí)施方式】
[0033] 下面通過(guò)