一種基于聚酰胺聚電解質(zhì)納米膠束的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種生物可降解的基于聚酰胺聚電解質(zhì)納米膠束的制備方法，屬于載 體與緩釋材料技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 聚電解質(zhì)復(fù)合膠束是由兩種帶相反電荷的組分通過靜電作用形成的，此類膠束的 一個(gè)突出優(yōu)點(diǎn)是可以負(fù)載帶電荷的藥物、基因或酶，且制備條件溫和簡單。研究人員利用 聚電解質(zhì)復(fù)合物能夠直接或間接地參與生命體內(nèi)一些復(fù)雜的生命活動(dòng)過程的特點(diǎn)而在刺 激響應(yīng)藥物控釋、細(xì)胞免疫隔離移植、多肽蛋白質(zhì)藥物的控釋、基因治療及人造疫苗等領(lǐng)域 進(jìn)行了深入的研究并取得了重大進(jìn)展，這對于聚電解質(zhì)復(fù)合物的實(shí)用價(jià)值而言具有重要意 義。
[0003] 阿霉素是一種普通的抗癌化療藥物，對多種癌癥具有明顯療效。但是阿霉素的毒 副作用也非常大。因此降低其毒副作用，增強(qiáng)療效是研究中的一個(gè)難題。在目前大多數(shù)納 米膠束藥物載體的研究中，藥物是通過與載體的物理相互作用或者共價(jià)連接方式進(jìn)行負(fù)載 的，避免不了載藥率和包封率低、藥物泄露和控釋困難的缺點(diǎn)。
[0004] 谷氨酸（Glu)具有反應(yīng)性官能團(tuán)多、來源比較豐富、價(jià)格相對低廉等優(yōu)點(diǎn)，聚谷氨 酸鏈段含有懸掛羧基，具有與陽離子復(fù)合的功能。乳酸（LA)來源廣泛，價(jià)格低廉，其聚合物 具有良好的生物相容性和降解性，降解產(chǎn)物能參與體內(nèi)三羧酸循環(huán)而被生物體吸收。聚乙 二醇單甲醚具有良好的水溶性、潤濕性、潤滑性、生理惰性、對人體無刺激、溫和。
[0005] 本發(fā)明首先設(shè)計(jì)和制備了一種基于聚酰胺聚電解質(zhì)納米膠束的制備方法，通過配 方的設(shè)計(jì)將聚谷氨酸分子引入共聚物，使共聚物側(cè)鏈含有陰離子基團(tuán)，從而能夠有效地與 阿霉素分子中的氨基通過陰、陽離子的復(fù)合作用形成膠束，共聚物的疏水性鏈段與阿霉素 分子位于膠束的內(nèi)核，外層由親水性的mPEG保護(hù)膠束的穩(wěn)定性，防止藥物泄露。將該膠束 進(jìn)行藥物體外釋放，具有載藥量高、防止藥物泄露和控制釋放的特點(diǎn)。本發(fā)明制備方法簡 單、不使用有機(jī)溶劑、膠束結(jié)構(gòu)獨(dú)特、控釋性能好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明目的是提供一種基于聚酰胺聚電解質(zhì)納米膠束作為藥物載體的制備方法， 選用來源廣泛、無毒無刺激、生物相容性好的谷氨酸、乳酸和聚乙二醇單甲醚。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0008] (1)含酰胺鍵聚電解質(zhì)三元共聚物的合成：控制谷氨酸（Glu)、乳酸（LA)、mPEG 摩爾比為 1 5、1 :0. 5 :0. 5、1 :1 :0. 5、1 :2 :0. 5、1 :3 :0. 5,二水合氯化亞錫為催化劑， IKTC預(yù)聚3h，升溫130°C，真空度維持0. 085Mpa，反應(yīng)8h后停止加熱，產(chǎn)物用乙醇溶解，過 濾除去未反應(yīng)的谷氨酸，濾液在50°C減壓蒸餾，產(chǎn)物用三氯甲烷溶解，無水乙醚沉淀，得淡 黃色粘稠液體，分別簡稱為 61^-1005、61^-10505、61^-1105、61^-1205、61^-1305，充分干燥 備用。
[0009] (2)載藥膠束的制備：采用聚離子復(fù)合法制備載藥膠束。將一定質(zhì)量的 PGlu-c〇-PLA-c〇-mPEG(GLP-10505)溶于水，磁力攪拌至共聚物完全溶解，逐漸滴加阿霉素 水溶液，至溶液呈現(xiàn)紅色且有明顯的丁達(dá)爾現(xiàn)象時(shí)停止，隨后繼續(xù)攪拌24h使載藥膠束穩(wěn) 定。將載藥膠束溶液轉(zhuǎn)入截留分子量為3500的透析袋中，避光狀態(tài)下在超純水中透析8h。
[0010] 本發(fā)明的有益效果：
[0011] ①由于聚電解質(zhì)三元共聚物中主鏈同時(shí)含有聚酰胺鏈段結(jié)構(gòu)和聚酯鏈段結(jié)構(gòu)，t匕 起單純聚酯鏈段結(jié)構(gòu)的聚合物，在水中降解性能減緩，大大提高了聚合物到穩(wěn)定性，將其與 抗癌藥物阿霉素進(jìn)行復(fù)合后，所得納米膠束穩(wěn)定性增強(qiáng)，有利于納米膠束在體內(nèi)循環(huán)而不 至于出現(xiàn)藥物泄露，提高藥物的生物利用度。
[0012] ②本發(fā)明的含酰胺鍵聚電解質(zhì)三元共聚物可用于藥劑學(xué)領(lǐng)域中，方法為"一步 法"，簡單方便，整個(gè)反應(yīng)僅一步，較開環(huán)聚合法制備聚氨酯而言，避免了繁瑣的合成步驟、 昂貴的單體和有機(jī)溶劑的使用，具有"綠色"反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)。
[0013] ③采用聚離子復(fù)合法制備載藥膠束，步驟簡單，以超純水做為溶劑，無毒環(huán)保，特 別是藥物參與膠束的形成，載藥量包括形成膠束內(nèi)核的藥物和物理包裹的藥物，不僅提高 了載藥量，也保證了藥物的穩(wěn)定性，膠束具有PH值和鹽濃度敏感性，從而使其具有優(yōu)異的 載藥和控釋效果。
【附圖說明】
[0014] 圖1基于聚酰胺聚電解質(zhì)與阿霉素復(fù)合納米膠束的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0015] 圖2含酰胺鍵聚電解質(zhì)三元共聚物PGlu-co-PLA-co-mPEG的的紅外譜圖。
[0016] 圖3載藥納米膠束（GLP105-D0X)的SEM照片。
[0017] 圖4載藥納米膠束（GLP105-D0X)在PBS緩沖液中藥物釋放曲線。a :pH=8. OPBS ; b :pH=7. 4PBS ;c :pH=7. OPBS ;d :pH=6. OPBS ;e :pH=5. OPBS。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 以下結(jié)合實(shí)例對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明并不局限于此。
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 含酰胺鍵聚電解質(zhì)三元共聚物的合成：將I. 5gL_谷氨酸、4gmPEG混合均勻，加入 0. 02g二水合氯化亞錫為催化劑，IKTC預(yù)聚3h，升溫130°C，真空度維持0. 085Mpa，反應(yīng)8h 后停止加熱，產(chǎn)物用乙醇溶解，過濾除去未反應(yīng)的谷氨酸，濾液在50°C減壓蒸餾，產(chǎn)物用三 氯甲烷溶解，無水乙醚沉淀，得淡黃色粘稠液體，充分干燥備用。
[0021] 載藥膠束的制備：采用聚離子復(fù)合法制備載藥膠束。將0. 2g的 PGlu-C〇-PLA-C〇-mPEGG(LP105-D0X)溶于20g水，磁力攪拌至共聚物完全溶解，逐漸滴加阿 霉素水溶液，至溶液呈現(xiàn)紅色且有明顯的丁達(dá)爾現(xiàn)象時(shí)停止，隨后繼續(xù)攪拌24h使載藥膠 束穩(wěn)定。將載藥膠束溶液轉(zhuǎn)入截留分子量為3500的透析袋中，避光狀態(tài)下在超純水中透析 8h〇
[0022] 載藥膠束在不同介質(zhì)中的釋放研究：將透析好的載藥膠束取5mL于透析袋內(nèi)，分 別置于250mL介質(zhì)為0.0 lM pH為5. 0、6. 0、7. 0、7. 4、8. 0的磷酸鹽緩沖溶液（PBS)中，與 37±0