專利名稱：藥物組合物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及適于治療癌癥的藥物組合物，具體而言，本發(fā)明涉及含有維生素D或其體、類似物或代謝產(chǎn)物的藥物組合物，以及這些組合物在治療患者體內(nèi)腫瘤的應(yīng)用。
維生素D是一種由活化5-碳單元構(gòu)成的類異戊烯化合物。維生素D最為廣泛的形式是維生素D3或膽鈣化醇。維生素D3來源于一種膽固醇生物合成中間體--7-去氫膽固醇的生物合成。維生素D3在肝臟中被代謝成25-羥基膽鈣化醇[25(OH)D3]，其是維生素D循環(huán)于血液室中的主要形式。25(OH)D3被腎臟轉(zhuǎn)化成兩個(gè)主要的雙羥化代謝產(chǎn)物，即1，25-二羥基膽鈣化醇[1，25(OH)2D3]和24，25-二羥基膽鈣化醇[24R，25(OH)2D3]。
1，25(OH)2D3是維生素D3天然發(fā)生的生物活性最高的形式，其在血流中被轉(zhuǎn)運(yùn)至其在腸粘膜細(xì)胞中的主要作用位點(diǎn)，在此處刺激鈣吸收。因此維生素D3可被看作是一種激素原，因?yàn)樗晦D(zhuǎn)化成一種與甾體激素作用類似的代謝產(chǎn)物。它特別是在骨的無機(jī)骨架合成中調(diào)控鈣和磷的代謝。
全身性給藥大劑量維生素D3或其代謝產(chǎn)物因?qū)е赂哜}血癥而受到限制。這種情況已經(jīng)引導(dǎo)了與鈣代謝相比對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)具有更大效應(yīng)的活化維生素D(D3)類似物的開發(fā)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些化合物對(duì)于抑制乳房、直腸、結(jié)腸直腸和前列腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)有效。
發(fā)明公開我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)某些器官中的腫瘤，如肝臟原發(fā)性和繼發(fā)性腫瘤，可通過對(duì)患病器官局部給藥高濃度1，25(OH)2D3進(jìn)行治療而不導(dǎo)致高鈣血癥。在本專利申請(qǐng)人共同未決的國際專利申請(qǐng)PCT/AU98/00440中公開了一種對(duì)肝臟局部給藥維生素D或其代謝產(chǎn)物或類似物治療肝癌的方法，此處引用這一專利作為參考。
這種對(duì)腫瘤的效應(yīng)是極端劑量依賴的，因此轉(zhuǎn)運(yùn)更高濃度維生素D類化合物如1，25(OH)2D3是有利的。但維生素D及其前體、類似物和代謝產(chǎn)物在常規(guī)載體如水中的溶解度有限，使轉(zhuǎn)運(yùn)至器官中的化合物濃度具有一個(gè)上限。在常規(guī)載體中維生素D3經(jīng)動(dòng)脈轉(zhuǎn)運(yùn)將維生素D3于流向肝臟的血中的最大濃度限制在10-7mol/l的水平。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)將維生素D類化合物如1，25(OH)2D3溶于脂質(zhì)如碘化或未碘化油中時(shí)，可以使1，25(OH)2D3濃度達(dá)到很高。對(duì)于維生素D類化合物采用油作為載體的另一個(gè)好處在于有些油富集在某些腫瘤中，使得腫瘤內(nèi)維生素D3濃度非常高。而且我們認(rèn)為對(duì)維生素D類化合物使用脂質(zhì)作為載體可以導(dǎo)致維生素D類化合物在腫瘤中的持久性抗增殖活性，而且化合物的保留時(shí)間要明顯更長(zhǎng)。
因此，在本發(fā)明的第一個(gè)方面中，本發(fā)明提供一種適于通過向某一器官局部給藥藥物組合物而治療該器官中癌細(xì)胞的藥物組合物，該組合物包含維生素D類化合物以及藥學(xué)可接受的脂質(zhì)，其中維生素D類化合物在組合物中的濃度大于約1×10-7mol/l。
通過術(shù)語“維生素D類化合物”我們囊括了維生素D的生物活性和非活性形式。維生素D類化合物可以是維生素D的前體、代射產(chǎn)物或類似物。維生素D類化合物可以是任何具有抗腫瘤活性的類似物。維生素D類化合物可以是膽鈣化醇、25(OH)D3或1，25(OH)2D3。維生素D類似物的實(shí)例包括但不限于EB1089、OCT(22-氧-1，25(OH)2D3)、1α，25(OH)2、22，24-二烯，24，26，27 trihomo D3、MC903(calcipotriol)和KH1060--1，25(OH)2-16-烯-23-炔維生素D3及其六氘代形式。維生素D類化合物可以是維生素D5或其類似物。
在本發(fā)明組合物中維生素D類化合物的濃度優(yōu)選至少約1×10-6mol/l。維生素D類化合物的濃度可以為至少約1×10-5mol/l。濃度可以為至少約1×10-4mol/l。濃度可以為至少約1×10-3mol/l。維生素D類化合物的優(yōu)選濃度為約1×10-6mol/l至50×10-5mol/l。
所使用的脂質(zhì)優(yōu)選為腫瘤所嗜好的脂質(zhì)，使得高濃度維生素D類化合物轉(zhuǎn)運(yùn)至腫瘤中。為確定所治療腫瘤是否是嗜脂質(zhì)的，可通過經(jīng)皮或手術(shù)放置的導(dǎo)管將小劑量脂質(zhì)送入肝臟動(dòng)脈內(nèi)。對(duì)于不嗜脂質(zhì)的腫瘤所取得的療效不可能達(dá)到嗜脂質(zhì)腫瘤相同的水平。
藥學(xué)可接受的脂質(zhì)可以是油，優(yōu)選為非碘化的油。非碘化油可以是任何可溶解維生素D類化合物的藥學(xué)可接受的油。油可以為例如罌粟籽油、大豆油、芝麻油、紅花油、花生油、cremophore、Liposyn或Intralipid。油可以來源于包括角鯊?fù)楹徒酋徬┰趦?nèi)的鯊油肝油。脂質(zhì)可以是中等鏈長(zhǎng)的三甘油酯(MCT)。
可以使用碘化油，如碘化罌粟籽油(lipiodol)，但碘具有使維生素D類化合物光敏感性增加的效應(yīng)。
脂質(zhì)可以是這些油的乳液形式，其中采用藥學(xué)可接受的乳化劑制備乳液，其包括但不限于天然和合成磷脂、Span、Tween或Pluronic。
我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在lipiodol中可以獲得很高濃度的活化維生素D3。例如，2mg的1，25(OH)2D3易于溶解在1ml的碘化罌粟籽油中。
除了提供一種更為有效治療腫瘤的組合物外，在本發(fā)明組合物中可以獲得的更高濃度的維生素D類化合物也提供了一種長(zhǎng)時(shí)間釋放維生素D類化合物的貯庫，因此可以對(duì)組合物進(jìn)行的“單發(fā)(one shot)”給藥。
而且由于本發(fā)明的組合物可以提供更高濃度的維生素D，維生素D的非活性形式甚至也可用于治療腫瘤。雖然在低濃度下這種非活性形式可能對(duì)腫瘤治療無效，在很高濃度下它們可能轉(zhuǎn)變?yōu)橛行У摹?br> 本發(fā)明的組合物也可包括一種或多種其它成份。本發(fā)明組合物可包含能夠增加維生素D受體表達(dá)的成份。該組合物可包含雌激素、雌激素樣化合物或雌激素拮抗劑。該成份可以是他莫昔芬(tamoxifen)。
該組合物可用于治療某些器官中的原發(fā)性或繼發(fā)性腫瘤，對(duì)于這些器官可通過局部給藥轉(zhuǎn)運(yùn)組合物。
因此，本發(fā)明進(jìn)一步擴(kuò)展至一種治療病人體內(nèi)某種器官中腫瘤的方法，該方法包括向器官內(nèi)局部給藥本發(fā)明的組合物。
可以通過動(dòng)脈轉(zhuǎn)運(yùn)如動(dòng)脈灌注進(jìn)行局部給藥?；蛘?，本發(fā)明的組合物可以被轉(zhuǎn)運(yùn)至門靜脈中。腫瘤可以是原發(fā)性或繼發(fā)性腫瘤。所治療的器官可以是肝臟、乳房、前列腺、骨腫瘤或腎臟。本發(fā)明的組合物也可用于治療結(jié)腸直腸癌或肉瘤。本發(fā)明的方法和組合物特別適用于治療肝瘤。
維生素D類化合物可溶在上述脂質(zhì)如碘化或非碘化罌粟籽油中而達(dá)到所需的維生素D類化合物濃度。
本發(fā)明的方法可按月、或其它間隔反復(fù)使用。本發(fā)明的組合物和方法具有通過本發(fā)明組合物轉(zhuǎn)運(yùn)局部濃度非常高的維生素D類化合物的能力，顯而易見這可以控制腫瘤同時(shí)避免了高鈣血癥。
為更全面描述本發(fā)明，我們提供了以下不起界定作用的實(shí)施例。
圖2顯示在正常介質(zhì)(-●-)或在1％lipiodol(-○-)中經(jīng)不同劑量維生素D3處理5天后[3H]胸腺嘧啶脫氧核苷進(jìn)入HepG2細(xì)胞中。數(shù)值表示為平均值±s.e.m.(***＝P＜0.01，采用單尾t-檢驗(yàn))。
圖3是一個(gè)棒圖，其顯示HepG2細(xì)胞暴露于溶解在正常介質(zhì)(a)或1％lipiodol(b)中的不同劑量維生素D35天后各孔中的細(xì)胞計(jì)數(shù)(％對(duì)照)。數(shù)值表示為平均值±s.e.m.(***＝P＜0.01，采用單尾t-檢驗(yàn))。
圖4顯示在正常介質(zhì)(-■-)或在1％lipiodol(-□-)中暴露于不同劑量維生素D31天，然后暴露于不含藥物的介質(zhì)4天后[3H]胸腺嘧啶脫氧核苷進(jìn)入HepG2細(xì)胞中。數(shù)值表示為平均值±s.e.m.(***＝P＜0.01，采用單尾t—檢驗(yàn))。
圖5是一個(gè)棒圖，其顯示HepG2細(xì)胞暴露于溶解在正常介質(zhì)(a)或1％lipiodol(b)中的不同劑量維生素D31天，然后暴露于不含藥物的介質(zhì)4天后各孔中的細(xì)胞計(jì)數(shù)(％對(duì)照)。數(shù)值表示為平均值±s.e.m.(***＝P＜0.01，采用單尾t—檢驗(yàn))。
圖6是一個(gè)棒圖，其顯示按以下段落2中所述分別給藥維生素D3/Tween、維生素D3/MCT以及維生素D3/lipiodol(患腫瘤大鼠的體內(nèi)實(shí)驗(yàn))后，注射1小時(shí)后放射性維生素D3在Sprague—Dawley大鼠肝臟、腫瘤和血漿中的濃度。
圖7是一個(gè)棒圖，其概括了圖6所示的1小時(shí)結(jié)果。
圖8是一個(gè)棒圖，其顯示按以下段落2中所述分別給藥維生素D3/Tween、維生素D3/MCT以及維生素D3/lipiodol后，注射1天后放射性維生素D3在Sprague—Dawley大鼠肝臟、腫瘤和血漿中的濃度。
圖9是一個(gè)棒圖，其概括了圖8所示的1天結(jié)果。


圖10是一個(gè)棒圖，其顯示按以下段落2中所述分別給藥維生素D3/Tween、維生素D3/MCT以及維生素D3/lipiodol后，注射3天后放射性維生素D3在Sprague—Dawley大鼠肝臟、腫瘤和血漿中的濃度。
圖11是一個(gè)棒圖，其概括了圖10所示的3天結(jié)果。
圖12顯示對(duì)于患有HCC病人經(jīng)肝動(dòng)脈給藥維生素D3(50μg)對(duì)AFP和鈣濃度的影響。
實(shí)施本發(fā)明的方式1.細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1.1材料與方法1.1.1吸收實(shí)驗(yàn)對(duì)吸收實(shí)驗(yàn)，在置于6孔組織培養(yǎng)板中的無菌顯微鏡蓋玻璃上生長(zhǎng)單層HepG2細(xì)胞。細(xì)胞暴露(24小時(shí))于含1％lipiodol的培養(yǎng)介質(zhì)(MEM—5％FBS)中，并采用油紅O浸漬技術(shù)染色。這簡(jiǎn)單地包括用10％福爾馬林固定細(xì)胞，然后染色，分化和反染色。細(xì)胞用磷酸鹽緩沖液(pH7.4)充分洗滌，并且在固定全過程中使用水。固定后在顯微鏡下觀察細(xì)胞并照像。1.1.2細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)當(dāng)細(xì)胞暴露于溶解在正?；蚝琹ipiodol(1％v/v)介質(zhì)中的維生素D3之后，采用[3H]胸腺嘧啶脫氧核苷吸收試驗(yàn)以及臺(tái)盼藍(lán)排斥細(xì)胞計(jì)數(shù)方法確定細(xì)胞繁殖。為進(jìn)行此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，將細(xì)胞置于24孔的細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔104個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)箱中于37℃、濕的5％CO2氛中溫孵24小時(shí)。然后將介質(zhì)替換成含維生素D3(10-11至10-7M)的介質(zhì)，其中維生素D3溶于正常介質(zhì)，或者首先溶于lipiodol中，然后與介質(zhì)充分混合使得最終lipiodol濃度為1％(v/v)。對(duì)于急性劑量研究，細(xì)胞暴露于兩個(gè)含有藥物的介質(zhì)之一中24小時(shí)，然后在隨后的4天中替換成不含藥物的介質(zhì)。而在長(zhǎng)期處理中，細(xì)胞暴露于溶解在上述介質(zhì)之一中的不同濃度藥物中5天。隔天替換一次介質(zhì)。在處理期的末期，向各孔中加入0.4μCi[3H]胸腺嘧啶脫氧核苷并培養(yǎng)4小時(shí)，由此對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行胸腺嘧啶吸收實(shí)驗(yàn)。使用β—閃爍計(jì)數(shù)器測(cè)量進(jìn)入三氯乙酸可沉淀物中的放射性。相對(duì)于對(duì)照組以百分抑制量作圖。維生素D3/lipiodol組的對(duì)照細(xì)胞用含lipiodol的介質(zhì)(1％)處理。
對(duì)于細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)，按每孔5×104個(gè)細(xì)胞的濃度將細(xì)胞加入到六孔板中。細(xì)胞處理步驟與胸腺嘧啶脫氧核苷實(shí)驗(yàn)中所述相同。在處理期(5天)結(jié)束時(shí)，用胰蛋白酶處理細(xì)胞并用血球計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。所有計(jì)數(shù)重復(fù)四次并且每個(gè)實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)兩次。采用單尾的學(xué)生氏t—檢驗(yàn)對(duì)比處理組和對(duì)照組數(shù)值，p＜0.05被定為存在顯著性差異。1.2結(jié)果油紅O浸漬后暴露于lipiodol中的HepG2細(xì)胞均顯示出多個(gè)細(xì)胞內(nèi)lipiodol紅色小泡，而在對(duì)照細(xì)胞中無lipiodol的跡象。
當(dāng)長(zhǎng)期處理時(shí)，在所有維生素D3濃度以及兩種轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)中HepG2細(xì)胞均顯示出明顯的胸腺嘧啶脫氧核苷吸收的減少。但在暴露于維生素D3/lipiodol轉(zhuǎn)運(yùn)體系中的細(xì)胞中，對(duì)胸腺嘧啶脫氧核苷吸收的抑制程度要明顯更高。
類似地，當(dāng)采用任一種測(cè)試介質(zhì)長(zhǎng)期處理細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞增殖受抑制而導(dǎo)致劑量依賴性的細(xì)胞數(shù)量下降(圖3)。在急性實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞僅暴露于含藥物介質(zhì)中1天并暴露于不含藥物的介質(zhì)中4天，與對(duì)照相比，經(jīng)僅由介質(zhì)配成的維生素D3處理的細(xì)胞不顯示胸腺嘧啶脫氧核苷吸收的降低，但對(duì)于暴露于處于lipiodol中的維生素D3中的細(xì)胞來說，胸腺嘧啶脫氧核苷吸收明顯下降(圖4)。在細(xì)胞計(jì)數(shù)方法中，暴露于維生素D3濃度為10-7M的孔中觀察到細(xì)胞數(shù)目明顯下降，但在維生素D3和lipiodol處理的板中，在10-9，10-6和10-7M孔中暴露均表現(xiàn)出細(xì)胞數(shù)目的明顯下降(圖5)。注意1.按照非常相似的方式由1％MCT替代1％lipiodol重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)。MCT所得結(jié)果與lipiodol結(jié)果非常相似，與暴露于維生素D3/介質(zhì)的細(xì)胞相比，暴露于維生素D3/MCT中的細(xì)胞增殖明顯下降。
2.為尋找可生長(zhǎng)于細(xì)胞腫瘤中并對(duì)維生素D3響應(yīng)的適當(dāng)細(xì)胞系，大鼠細(xì)胞系，Novikoff和HTC被篩選用于對(duì)維生素D3(10-11至10-6M)的響應(yīng)。所得結(jié)果表明Novikoff是一類對(duì)維生素D3不響應(yīng)的細(xì)胞系，而對(duì)于HTC，10-6M濃度的藥物可使增殖抑制率約為50％。2.患腫瘤大鼠中的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)2.1材料與方法對(duì)于300至350g的雄性Sprague—Dawley大鼠進(jìn)行常規(guī)麻醉(氟烷)并進(jìn)行l(wèi)apratomy。然后使用26G3/8—結(jié)核菌苗針將懸浮于100μl介質(zhì)中的5×106個(gè)Novikoff細(xì)胞滴注到肝包膜以下。然后用腸道縫合術(shù)閉合腹部開口。
在常規(guī)麻醉下進(jìn)行所有操作，在麻醉結(jié)束前對(duì)動(dòng)物皮下注射lipiodol和鎮(zhèn)痛藥丁丙諾啡(0.025mg/kg)。
動(dòng)物飼養(yǎng)10天，食物和水不加限制，每天評(píng)價(jià)其健康情況。此后將動(dòng)物隨機(jī)分組(每組6只)并重新進(jìn)行l(wèi)apratomy。將導(dǎo)管插入動(dòng)物的肝動(dòng)脈中，通過導(dǎo)管注入放射性標(biāo)記的維生素D3或載體。按以下方式處理各實(shí)驗(yàn)組
●組1—3接受100μl的lipiodol●組4—6接受存在于100μl的lipiodol中的維生素D3(放射性＋非放射性)●組7—9接受100μl的MCT●組10—12接受存在于100μl的MCT中的維生素D3(放射性＋非放射性)●組13—15接受100μl的Tween●組16—18接受存在于100μl的Tween中的維生素D3(放射性＋非放射性)給藥后將導(dǎo)管取出并將切口縫合。在給藥1小時(shí)、1天和3天后對(duì)動(dòng)物實(shí)施安樂死。在安樂死之前利用心臟穿刺從各動(dòng)物體內(nèi)抽取3ml血液。
尸體解剖檢查各動(dòng)物的肝臟和腫瘤，稱重并置于冷動(dòng)機(jī)中冷凍待分析。組織勻漿后，用二氯甲烷萃取肝臟、腫瘤或血漿。利用β—閃爍計(jì)數(shù)計(jì)測(cè)定各樣品中放射性維生素D3的含量。2.2結(jié)果所得結(jié)果列于圖6—11中。從這些結(jié)果可以看出1小時(shí)時(shí)肝臟、腫瘤和血漿三個(gè)樣品中放射性均高。而在1和3天時(shí)腫瘤樣品和肝臟及血清樣品之間的差別非常明顯，腫瘤中l(wèi)ipiodol和MCT均較高。各時(shí)間點(diǎn)結(jié)果的概括(圖7、9和11)清楚地表明在各情況下lipiodol處理的動(dòng)物放射性水平(維生素D或代謝產(chǎn)物)較高。事實(shí)上這確認(rèn)了體外研究所得的結(jié)果，表明溶在lipiodol或MCT中的維生素D3在腫瘤中被吸收、保持并最終被釋放。但溶于正常載體如Tween中的維生素D3被快速地從腫瘤和身體中清除。3.人體實(shí)驗(yàn)一期臨床實(shí)驗(yàn)3.1患者的治療依據(jù)含有/不含有的指標(biāo)選取患有原發(fā)性HCC的病人。在進(jìn)有所有醫(yī)護(hù)和輔助醫(yī)護(hù)實(shí)驗(yàn)后，由一位有經(jīng)驗(yàn)的放射科醫(yī)生通過肝動(dòng)脈對(duì)病人給藥單劑量的溶于5ml的lipiodol中的50μg維生素D3。藥物制劑在醫(yī)院的腫瘤制劑室中于完全無菌的條件下制備。給藥后每24小時(shí)抽取血樣以確定血清AFP、鈣和維生素D3水平，一共進(jìn)行3天，此后病人出院并每周走訪一次共計(jì)4周(給藥后總計(jì)的時(shí)間)。3.2結(jié)果圖12顯示至今已完成治療的一個(gè)病人中AFP和鈣水平的結(jié)果。
可以看出AFP水平明顯下降，在7天時(shí)達(dá)到最低并保持低水平直至第15天，此后開始回升，第28天左右達(dá)到治療前水平。對(duì)于鈣水平來說，在第2至4天內(nèi)急劇上升但在第7天時(shí)恢復(fù)到正常。討論對(duì)比不同轉(zhuǎn)運(yùn)體系所得結(jié)果清楚表明，在lipiodol轉(zhuǎn)運(yùn)體系中維生素D3的抑制作用增加并且持久。這可能是由于多種因素所致，包括從lipiodol中吸收、保持并持續(xù)釋放維生素D3。以前采用不同技術(shù)的報(bào)道(1，2)已經(jīng)表明HCC吸收lipiodol。我們?cè)诖朔矫娌捎肏epG2細(xì)胞系和油紅O浸漬技術(shù)所得結(jié)果清楚表明了這些細(xì)胞可能通過胞飲作用大量吸收lipiodol。
在細(xì)胞生命周期內(nèi)油保持于細(xì)胞內(nèi)的現(xiàn)象已被揭示(1)。Lipiodol的長(zhǎng)期細(xì)胞內(nèi)保持表明了肝瘤細(xì)胞的特殊功能，與HCC保持lipiodol很長(zhǎng)時(shí)間的情況相比，正常肝臟細(xì)胞表現(xiàn)為對(duì)lipiodol吸收并在幾天內(nèi)快速將其排出。因此，可以假設(shè)采用維生素D3/lipiodol長(zhǎng)期處理所觀察到的抑制作用增加可能部分是由于lipiodol的累積以及因此造成的維生素D3的細(xì)胞內(nèi)累積。但從這些結(jié)果可以看出，僅從這一角度并不能解釋兩種轉(zhuǎn)運(yùn)體系之間的差別。其它的貢獻(xiàn)因素可能是維生素D3在lipiodol中穩(wěn)定性更高，因?yàn)樗赡苁顾幬锩馐艽x酶(3)的廣泛性降解以及快速暴露于代謝酶中。這一情況對(duì)于本發(fā)明特別有意義，因?yàn)榫S生素D3是一種化學(xué)結(jié)構(gòu)對(duì)廣泛性代謝脆弱的藥物，而且HepG2是一種具有廣泛性代謝功能的細(xì)胞系(4)。
對(duì)于24小時(shí)細(xì)胞暴露于單劑量維生素/lipiodol中細(xì)胞增殖明顯受抑制的急性處理實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可能表明了維生素D3從細(xì)胞內(nèi)lipiodol貯庫中持續(xù)釋放。這可能正好是與僅存在于介質(zhì)中的維生素D3相比處于lipiodol或MCT中的維生素D3抑制作用更大并且持久的原因所在。對(duì)于帶有Novikoff腫瘤的大鼠所得結(jié)果表現(xiàn)出相同觀點(diǎn)，并證實(shí)了細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的正確性，在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中處于lipiodol和MCT中的維生素D3被腫瘤HCC細(xì)胞吸收、保持并逐漸釋放。但由于Novikoff是一種維生素D3耐藥細(xì)胞系，在此模型中不能進(jìn)行效能性實(shí)驗(yàn)。
雖然進(jìn)行評(píng)論為時(shí)尚早，但現(xiàn)今一個(gè)接受50μg維生素D3/5ml lipiodol治療病人所得結(jié)果正比于細(xì)胞培養(yǎng)和大鼠實(shí)驗(yàn)所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。對(duì)血漿樣品檢測(cè)維生素D3水平(現(xiàn)正在進(jìn)行)應(yīng)該清楚表現(xiàn)出維生素D3/lipiodol在HCC中的特性。
總之，上述結(jié)果表明溶于lipiodol中的維生素D3在人類HCC細(xì)胞系HepG2中產(chǎn)生增加并且持久的抗細(xì)胞增殖作用，并且如大鼠肝臟腫瘤實(shí)驗(yàn)所示在腫瘤中保持明顯更長(zhǎng)的時(shí)間。
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不背離本發(fā)明廣義描述的精神或范圍的前提下，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說對(duì)于如具體實(shí)施方案所示的本發(fā)明存在多種變化和/或改變。因此該實(shí)施方案被認(rèn)為是描述性而非定界性的。
權(quán)利要求
1.一種適于通過向某一器官局部給藥藥物組合物而治療該器官中癌細(xì)胞的藥物組合物，該組合物包含維生素D類化合物以及藥學(xué)可接受的脂質(zhì)，其中維生素D類化合物在組合物中濃度大于約1×10-7mol/l。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其中，維生素D類化合物是維生素D、或其前體、代射產(chǎn)物或類似物。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其中，組合物中維生素D類化合物的濃度至少約1×10-6mol/l。
4.如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其中，組合物中維生素D類化合物的濃度至少約1×10-5mol/l。
5.如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其中，組合物中維生素D類化合物的濃度至少約1×10-4mol/l。
6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其中，組合物中維生素D類化合物的濃度至少約1×10-3mol/l。
7.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中，維生素D類化合物選自于維生素D3、25(OH)D3、1，25(OH)2D3和24R，25(OH)2D3，或它們的前體、代射產(chǎn)物或類似物。
8.如權(quán)利要求1至6之一所述的藥物組合物，其中，維生素D類化合物選自于EB1089、OCT(22-氧-1，25(OH)2D3)、1α，25(OH)2、22，24-二烯，24，26，27 trihomo D3、MC903(calcipotriol)和KH1060——1，25(OH)2-16-烯-23-炔維生素D3及其六氘代形式。
9.如權(quán)利要求1至6之一所述的藥物組合物，其中，維生素D類化合物是維生素D5或其類似物。
10.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中，脂質(zhì)是腫瘤嗜好的脂質(zhì)。
11.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中，脂質(zhì)是藥學(xué)可接受的油。
12.如權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其中，所述油是非碘化油。
13.如權(quán)利要求12所述的藥物組合物，其中，所述油是罌粟籽油。
14.如權(quán)利要求11所述的藥物組合物，其中，所述油是碘化油。
15.如權(quán)利要求14所述的藥物組合物，其中，所述油是碘化罌粟籽油(lipiodol)。
16.如上述任一權(quán)利要求所述的藥物組合物，其中，組合物還包含增加維生素D受體表達(dá)的其他成份。
17.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其中，所述其它成份是雌激素、雌激素樣化合物或雌激素拮抗劑。
18.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其中，所述其它成份是他莫昔芬。
19.一種治療病人體內(nèi)某種器官中腫瘤的方法，該方法包括向器官內(nèi)局部給藥上述任一權(quán)利要求中的組合物。
20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中，受治療的器官選自于肝臟、乳房、前列腺、骨腫瘤和腎臟。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述器官是肝臟。
22.如上述權(quán)利要求19至21之一所述的方法，其中，通過動(dòng)脈轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)行局部給藥。
23.如權(quán)利要求20或21所述的方法，其中，組合物通過門靜脈轉(zhuǎn)運(yùn)。
24.如上述權(quán)利要求19至23之一所述的方法，其中，腫瘤為原發(fā)性和繼發(fā)性腫瘤。
25.如上述權(quán)利要求19至24之一所述的方法，其中，所述腫瘤是肝瘤。
26.如上述權(quán)利要求19至24之一所述的方法，其中，所述腫瘤是結(jié)腸直腸癌或肉瘤。
27.如權(quán)利要求25所述的方法，其中，通過肝動(dòng)脈灌注進(jìn)行局部給藥。
28.如上述權(quán)利要求18至26之一所述的方法，其中，組合物按照單發(fā)給藥的形式進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種適于治療癌癥的藥物組合物,具體而言是涉及含有維生素D或前體、類似物或代謝產(chǎn)物的藥物組合物,以及這些組合物在治療患者體內(nèi)腫瘤的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K38/22GK1332629SQ99808157
公開日2002年1月23日 申請(qǐng)日期1999年5月4日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月4日
發(fā)明者戴維·莫里斯 申請(qǐng)人:Mrc控股有限公司