一種檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化學(xué)品的分析檢驗(yàn)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種檢材中多目標(biāo)藥物毒物同 時(shí)快速提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 檢材中的藥物、毒物的分析檢驗(yàn)分為提取和檢測兩個(gè)環(huán)節(jié)，由于科學(xué)技術(shù)的日新 月異，使得儀器分析檢測技術(shù)取得了長足發(fā)展，但提取環(huán)節(jié)依舊耗時(shí)、繁瑣、提取率低、且無 法對未知物進(jìn)行篩查，是目前制約藥物毒物分析技術(shù)發(fā)展的瓶頸，因此，建立簡便快捷、提 取率高、雜質(zhì)去除徹底、可適于多種藥物、毒物同時(shí)提取的方法顯得尤為重要。
[0003] 通常情況下，應(yīng)用最為廣泛的提取方法當(dāng)屬經(jīng)典的液-液提取法，但該方法存在 操作繁瑣、溶劑耗費(fèi)量大、藥物提取率低、雜質(zhì)去除不徹底、重現(xiàn)性差、易乳化等諸多缺點(diǎn)。 直至20世紀(jì)90年代初期，我國才開始研究基于固相萃取技術(shù)的提取方法，目前常用的固相 提取材料是親脂性材料和離子交換樹脂材料，上述固相萃取技術(shù)雖然能夠明顯減少溶劑用 量、提高藥物提取率、避免乳化，但將其應(yīng)用到公安破案過程中時(shí)，一次萃取一般只能分離 得到單個(gè)或單類藥物，而對于常見藥物、毒物的分離提取往往需要準(zhǔn)備多個(gè)樣品、多種固相 材料，分多次進(jìn)行，無法實(shí)現(xiàn)較多藥物毒物的一次性提取，依然存在操作繁瑣、費(fèi)時(shí)（血檢 材提取一般需120分鐘）、漏檢等問題。
[0004] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，中國專利文獻(xiàn)CN102517793A公開了一采用血液 快速檢測所中毒物的方法：取兩份待檢血液，一份加PH9緩沖液稀釋，另一份加水稀釋，分 別倒入裝有硅藻土的層析柱中，加PH9緩沖液稀釋的血液過層析柱后用乙醚洗脫，洗脫液 于45°C的水浴濃縮盡干得提取物A;加水稀釋的血液過層析柱后用二氯甲烷洗脫，洗脫液 于50°C的水浴濃縮盡干得提取物B，將提取物A和提取物B分別利用常規(guī)化合物的檢測儀 器進(jìn)行檢測，能檢測出為何種毒物中毒。上述技術(shù)只需兩份檢材，5分鐘內(nèi)便可完成提取，大 幅簡化了實(shí)驗(yàn)操作、縮短了提取時(shí)間，但該技術(shù)只能適用于巴比妥類、苯并二氮卓類、安眠 酮、生物堿類藥物、吩噻嗪類藥物及其代謝物、茚滿二酮類、羥基香豆素類殺鼠劑、毒鼠強(qiáng)、 有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類殺蟲劑、及冰毒等常見毒品的系統(tǒng)性同時(shí)提取，而對于另外一些常 見藥物、毒物如策劃藥、呼吸興奮藥、擬除蟲菊酯類殺蟲劑等，卻不能隨上述藥物一起從檢 材中分離提取出來，也就是說，上述技術(shù)仍然無法覆蓋針對所有常見致死性藥物、毒物的一 次性提取，依舊需要另取檢材、額外開發(fā)新的提取方法，并不能有效解決操作繁瑣、工作量 大、耗時(shí)長、漏檢的問題。
[0005] 因此，研究與開發(fā)一種簡便快捷、提取率高、雜質(zhì)去除徹底、能同時(shí)適于所有常見 藥物、毒物的一次性提取方法，是本領(lǐng)域尚未解決的一個(gè)技術(shù)難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)對于檢材中的常見藥物、毒物的提取 方法所存在的操作繁瑣、工作量大、耗時(shí)長、無法實(shí)現(xiàn)所有藥物毒物一次性提取的缺陷，從 而提供一種簡便快捷、提取率高、除雜徹底、且能同時(shí)適于所有常見藥物、毒物一次性提取 的方法。
[0007] 為此，本發(fā)明實(shí)現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案為：
[0008] -種檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法，包括：
[0009] 采用pH= 2-14的緩沖液對檢材進(jìn)行等體積稀釋，混勻，形成混合液，將所述混合 液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱中，待其完全滲入至所述固相萃取柱的填料中之后，依次采用乙醚、二 氯甲烷洗脫，合并洗脫液，濃縮供檢；
[0010] 其中，所述固相萃取柱的填料的組成包括，以所述填料的總質(zhì)量計(jì)，二氧化硅的含 量為80-94wt%，氧化錯(cuò)的含量不大于3wt%，氧化鐵的含量不大于2wt%;所述填料的堆密 度不大于〇. 4g/cm3。
[0011] 優(yōu)選地，用于形成所述混合液的緩沖液的pH= 5-10。
[0012] 優(yōu)選地，所述混合液的體積與所述填料的質(zhì)量之比為1 : (1.15-1. 6)，其中體積/ 質(zhì)量的關(guān)系為mL/g。
[0013]優(yōu)選地，以所述填料的總質(zhì)量計(jì)，二氧化硅的含量為85_91wt%，氧化鋁的含量為 0. 4-2. 8wt%，氧化鐵的含量為0. 6-2wt%;所述填料的堆密度為0. 2-0. 4g/cm3。
[0014] 優(yōu)選地，所述填料的灼燒殘?jiān)淮笥?.5%，干燥失重不大于2. 5%。
[0015] 優(yōu)選地，所述填料的灼燒殘?jiān)淮笥?%，干燥失重不大于2%。
[0016] 優(yōu)選地，所述乙醚與混合液的體積比為（3-8) :1。
[0017] 優(yōu)選地，所述二氯甲烷與混合液的體積比為（3-8) : 1。
[0018] 優(yōu)選地，所述檢材為血、尿、動物臟器和組織、食品或洗護(hù)用品中的一種或幾種。
[0019] 本發(fā)明所述的檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法，其固相萃取柱的填料中 二氧化硅的含量為80-94wt%、氧化鋁的含量不大于3wt%、氧化鐵的含量不大于2wt%、且 填料的堆密度不大于〇. 4g/cm3時(shí)，能夠使檢材中的蛋白質(zhì)、氨基酸等大極性雜質(zhì)分子通過 其結(jié)構(gòu)中的極性基團(tuán)更牢固地吸附在填料分子的表層，同時(shí)雜質(zhì)分子的非極性基團(tuán)一致朝 外以結(jié)合藥物、毒物分子，這樣在有機(jī)溶劑洗脫的過程中，一方面有利于破壞雜質(zhì)與藥物、 毒物分子間的結(jié)合作用，增強(qiáng)藥物、毒物分子的解吸效果，進(jìn)而確保很高的提取率，另一方 面還不易于雜質(zhì)分子從填料上的解吸，提高了對雜質(zhì)的去除效果，使得本發(fā)明的一次性提 取方法能夠降低檢材中雜質(zhì)的干擾。優(yōu)選地，二氧化硅含量為85-91wt%，氧化鋁含量為 0. 4-2. 8wt%，氧化鐵含量為0. 6-2wt%，填料堆密度為0. 2-0. 4g/cm3時(shí)，更有助于徹底除去 檢材中的雜質(zhì)干擾，提高本發(fā)明的提取率。
[0020] 本發(fā)明濃縮后的洗脫液可以單獨(dú)采用紫外光譜、氣相色譜、高效液相色譜等儀器、 或上述儀器與質(zhì)譜的聯(lián)用儀等儀器進(jìn)行分析和檢測。
[0021] 本發(fā)明的技術(shù)方案具有如下優(yōu)點(diǎn)：
[0022] 1、本發(fā)明提供的檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法，選用具有特定組成和 特定性能的混合物作為固相萃取柱的填料，并以乙醚、二氯甲烷為洗脫劑分別對檢材進(jìn)行 洗脫，5分鐘之內(nèi)便可將檢材中所含的全部藥物、毒物一次性完全分離提取出來以供檢測， 從而使得本發(fā)明的提取方法具備普適性強(qiáng)、操作簡便、工作量小、除雜能力強(qiáng)、提取效率高 的優(yōu)點(diǎn)，對所有常見的致死性藥物、毒物的提取率基本都在90 %以上。
[0023] 2、本發(fā)明提供的檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法，限定上樣混合液的體 積（mL)與填料的質(zhì)量（g)之比為1 : (1. 15-1. 6)，其原因在于，填料的用量過小，不僅使得 在上樣過程中混合液不能完全吸附于填料表面，未加洗脫劑就有部分上樣混合液流出，增 加了雜質(zhì)，降低了提取率，而且在洗脫過程中也不利于藥物、毒物分子的解吸，同樣降低了 提取率；但填料的用量也不能過大，會導(dǎo)致洗脫劑的用量多、耗時(shí)費(fèi)力、且提取率未見提升。
[0024]3、本發(fā)明提供的檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法，發(fā)明人通過長期的科 學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，固相萃取柱的填料的灼燒殘?jiān)淮笥?. 5%，干燥失重不大于2. 5%，優(yōu)選灼 燒殘?jiān)淮笥? %，干燥失重不大于2 %時(shí)，能夠避免在上樣及洗脫過程中由于填料自身的 放熱、膨脹等變化對洗脫效果所產(chǎn)生的不良影響，使得本發(fā)明的提取方法準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性 好。
[0025] 4、本發(fā)明提供的檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方法，還限定了洗脫劑乙 醚、二氯甲烷的用量，更好地確保將填料上吸附的藥物、毒物分子完全洗脫下來，并在這一 前提下可有效防止雜質(zhì)解吸、減少溶劑用量、縮短提取時(shí)間。本發(fā)明中洗脫劑的用量并不是 越多越好，過多會造成溶劑浪費(fèi)、更重要的是還增大了洗脫液中的雜質(zhì)含量，提取率也未見 改善。
[0026]此外，本發(fā)明的提取方法能夠適用于所有生物檢材如血、尿、動物臟器和組織，及 非生物檢材如食品或洗護(hù)用品等中所含藥物、毒物的一次性提取，從而更突顯了本發(fā)明方 法普適性強(qiáng)、操作簡便、工作量小、除雜能力強(qiáng)、提取效率高等諸多優(yōu)點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0027]下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明所提供的檢材中多目標(biāo)藥物毒物同時(shí)快速提取方 法進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0028] 實(shí)施例1
[0029]采用1ml、pH=6. 6的磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液對1ml的血檢材進(jìn)行稀釋， 混勻得混合液，將混合液轉(zhuǎn)移至裝填有2. 3g填料的固相萃取柱中，待混合液完全滲入至填 料中后，取7ml的乙醚進(jìn)行洗脫，再取7ml的二氯甲烷洗脫，合并兩次的洗脫液，濃縮供檢。
[0030]本實(shí)施例中的填料組成為：以填料總質(zhì)量計(jì)，二氧化硅1. 9g、氧化鋁69mg、氧化鐵 32mg、余量為氧化鈣、氧化鎂和有機(jī)質(zhì)；且該填料的堆密度為0. 4g/cm3、灼燒殘?jiān)鼮?%、干 燥失重為0. 7%。
[0031] 實(shí)施例2
[0032] 采用0.5ml、pH= 5的緩沖液對0.5ml的尿檢材進(jìn)行稀釋，混勻得混合液，將混合 液轉(zhuǎn)移至裝填有1. 5g填料的固相萃取柱中，待混合液完全滲入至填料中后，取5ml的乙醚 進(jìn)行洗脫，再取5ml的二氯甲烷洗脫，合并兩次的洗脫液，濃縮供檢。
[0033]本實(shí)施例中的填料組成為：以填料總質(zhì)量計(jì)，二氧化硅1. 36g、