專利名稱：用作蛋白質(zhì)藥物釋放的含膠原海綿的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于改進(jìn)藥物持續(xù)釋放轉(zhuǎn)運(yùn)的含膠原海綿。
膠原以前已被用作藥物海綿中的一種組分。Artandi[美國專利3，157，524，公布于1964年11月17日]公開了一種由酸處理的膨脹膠原組成的海綿。Oluwasanmi等[J.Trauma16348-353(1976)]公開了一種戊二醛交聯(lián)的1.7毫米厚的膠原海綿。Collins等[Surg.Forum27551-553(1976)]公開了一種戊二醛交聯(lián)的酸膨脹膠原海綿。Berg等[美國專利4，320，201，公布于1982年3月16日]公開了一種高膠原純度的膨脹海綿，這種高純度膠原是經(jīng)酶解動物皮，在堿或酸中消化這些團(tuán)塊，機(jī)械粉碎該團(tuán)塊得到特定長度的膠原纖維并交聯(lián)這些纖維而生產(chǎn)的。Berg等[美國專利4，837，285，公布于1989年6月6日]公開了具有珠體積1～30%的膠原骨架的多孔珠。這些珠用作細(xì)胞生長的基質(zhì)。Doillon等[ScanningElectronMicroscopyⅢ1313-1320(1984)]，Doillon等[Biomaterials8195-200(1987)]公開了在孔直徑大約60到250μm膠原海綿中的細(xì)胞生長。這些海綿中的有些也含有透明質(zhì)酸和/或纖維溶解素(fibronectin)。
此外，膠原已被用作油膏的一種組分[PCT專利申請WO86/03122，公布于1986年6月5日]。膠原還與電流聯(lián)合用于傷口的愈合[Silver和Dunn，美國專利4，937，323，公布于1990年6月26日]。
另外，現(xiàn)有技術(shù)中已使用了含膠原的膜劑。Abbenhaus等，Surg.Forum16477-478(1965)公開了從牛皮中提取的膠原經(jīng)加熱和脫水制備的2到3毫米厚的膠原薄膜。Chu公開了經(jīng)壓縮生產(chǎn)的非化學(xué)法交聯(lián)的膠原移植片，它用來持續(xù)藥物的釋放[歐洲專利申請187014，公布于1986年7月9日;美國專利4，600，533公布于1986年7月15日;美國專利4，655，980，公布于1987年4月7日;美國專利4，689，399，公布于1987年8月25日;和PCT專利申請WO90/00060，公布于1989年6月28日]。Cioca[美國專利4，412，947，公布于1983年11月1日]，公開了經(jīng)冷凍干燥有機(jī)酸中的膠原懸浮液制備的基本上純的膠原層。Kuroyanagai等[歐洲專利申請167828，公布于1984年1月15日;美國專利4，642，118，公布于1987年2月10日]公開了一種由膠原和一種聚α-氨基酸兩層組成的人造皮膚。Berg等[美國專利申請4，841，962，公布于1989年6月27日]，公開了一種由一種膠粘劑，一種交聯(lián)膠原基質(zhì)和一種多層聚合物薄膜三層組成的傷口敷料。Holman美國專利4，950，699，公布于1990年8月21日公開了一種由至少10%膠原與一種丙烯酸膠粘劑混合組成的傷口敷料。Cioca等英國專利1，347，582，公開了一種由冷凍干燥的多分散膠原混合物組成的膠原傷口敷料。
Steffan等，歐洲專利069260，公布于1983年1月12日，公開了一種由高純度天然膠原組成的膠原插入物。Zimmerman等[美國專利4，453，939，公布于1984年6月12日]，公開了一種含有用纖維蛋白質(zhì)，纖維蛋白質(zhì)XⅢ因子和/或凝血酶包裹的膠原的傷口愈合組合物。Leibovich等[美國專利4，808，402，公布于1989年2月]，公開了一種含有膠原，生物可侵蝕(bioerodible)聚合物，和腫瘤壞因子的治療傷口組合物。Yannas和Burkd[J.Biomed.Mat.Res.1468-81(1980)]綜述了人造皮膚的設(shè)計(jì)，一些例子含有膠原。Chvapil等Int.Rev.Connect.TissueRes.61-61(1973)，特別在51到52頁;和Pachence等，Med.Deviceand.Diag.Ind.，949-55(1987)，公開了膠原的各種用途，包括作為藥物輸送載體。
以前所用的含膠原海綿多數(shù)被用作傷口部位細(xì)胞生長的基質(zhì)或骨架，而沒有被用于運(yùn)送藥物。本發(fā)明提供了對藥物海綿的一種非常理想的改進(jìn)，由它可以在一個持久的時期的時間提供治療劑的一種穩(wěn)定，連續(xù)的持久釋放。
本發(fā)明涉及包括一種吸收性明膠海綿，膠原，和一種活性成分的一種含膠原海綿。最好的是，這種吸收性明膠海綿是一種交聯(lián)明膠。
本發(fā)明的另一個方面涉及一種還可以包含有一種或多種增塑劑，穩(wěn)定劑，干燥增強(qiáng)劑或緩沖劑的含膠原海綿。較好的是，增塑劑是選自聚乙二醇和甘油;穩(wěn)定劑是一種選自于由甘露醇、乳糖和葡萄糖組成的一組中的糖;干燥增強(qiáng)劑是選自于由乙醇、甲醇和異丙醇組成的一組中的一種醇;緩沖劑是一種合適的生物緩沖劑。優(yōu)選的活性成分是選自于由PDGF，EGF，F(xiàn)GF，PDEGF，PD-ECGF，KGF，IGF-1，IGF-2，TNF，BDNF，CNTF和NT-3組成的一組成份。
本發(fā)明的另一方面涉及一種促進(jìn)表皮傷口愈合的方法，包括借助本發(fā)明另一方面的膠原海綿使用一種傷口愈合有效劑量的活性成分。
本發(fā)明的其它方面還涉及一種促進(jìn)內(nèi)部傷口愈合的方法，包括借助本發(fā)明另一方面的膠原海綿使用一種傷口愈合有效劑量的活性成分。


圖1顯示了體外PDGF從干明膠海綿中釋放的分布圖。
圖2顯示了用第一級動力學(xué)表示的體外PDGF從干明膠海綿-膠原海綿中釋放的分布圖。
圖3顯示了用放射性同位素法，ELISA和PDGF生物測定法測得的PDGF的相互聯(lián)系。
圖4顯示了體外PDGF從濕明膠海綿一膠原海綿中釋放的分布圖。
圖5顯示了用第一級動力學(xué)表示的體外PDGF從濕明膠海綿-膠原海綿中釋放的分布圖。
圖6顯示了用放射性同位素法，ELISA和PDGF生物測定法測得的PDGF的相互聯(lián)系。
圖7顯示了體外PDGF從不含膠原的明膠海綿中釋放分布圖。
圖8顯示了體外PDGF從用1%膠原溶液制備的明膠海綿-膠原體系中釋放的分布圖。
圖9顯示了體外PDGF從用8%膠原溶液制備的明膠-膠原系中釋放的分布圖。
圖10顯示了用鼠血管叢(boundle)模型所得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
本發(fā)明涉及一種含有吸收性明膠海綿，膠原和一種活性成分的含膠原海綿。
一種合適的吸收性明膠海綿是交聯(lián)明膠，如明膠海綿(Upjohn，Inc.，Kalamzoo，Michigan)。把這種吸收性明膠海綿浸泡在含有膠原和活性成分的溶液中就能把它們結(jié)合起來。或者，預(yù)先決定了用量的膠原溶液能被轉(zhuǎn)移到明膠海綿上并且該溶液能被吸書。
可溶性膠原是平均分子量低于400，000，最好分子量為300，000左右的膠原。一種特別適用的可溶性膠原是SemexS(SemexMedicalCO.，Malvern，Pennsylvania)。因?yàn)檫@種特殊的可溶性膠原是膠原的非全肽(atelopeptide)形式，所以它也是有益的。非全肽膠原是不含末端肽膠原，它是一種位于常與免疫原性有關(guān)的純化膠原一端的肽。末端肽形式的膠原溶液能夠經(jīng)有機(jī)酸水解轉(zhuǎn)化為非全肽形式的膠原。這種可溶性膠原的另一個較好的特征是它有最小量的交聯(lián)，即，0.5%或更少。
把這種可溶性膠原溶液溶于一種合適溶劑如水可產(chǎn)生一種含有0.5左右到10左右%的膠原，較好為1左右到5左右%，最佳為2%左右的膠原(按重量計(jì))溶液。
可溶性膠原溶液或膠原纖維的膠體懸液被用來浸泡吸收性明膠海綿。一般地，將適量膠原溶液轉(zhuǎn)移到吸收性明膠海綿上面。另一種情況，把膠原溶液倒入裝有明膠海綿的容器中。適宜的條件包括讓被浸泡海綿在適宜溫度適宜時間干燥。通常，升高干燥溫度可縮短必要的干燥時間。更詳細(xì)地說，適宜溫度是大約15℃到35℃，最好為室溫左右，而適當(dāng)?shù)母稍飼r間是足以使溶劑量的臨界損耗基本上為零的時間(例如，大約一個小時到10天左右，最好是一天到五天左右的干燥時間)。
為了使優(yōu)選膠原海綿達(dá)到最佳理想特征，在這種膠原溶液中可以包括各種選擇性附加劑。這種合乎要求的特征包括柔韌性，穩(wěn)定性，加速了的干燥時間和與所用的活性成分相容的一個PH值。
為提高柔韌性，可使用一種適當(dāng)?shù)脑鏊軇?。適當(dāng)?shù)脑鏊軇┌ň垡叶己透视汀?yōu)選甘油，這種增塑劑存在的用量是所含膠原重量的0到100%左右，優(yōu)選10到30%左右，最佳為20%左右。
為了增加活性成份的穩(wěn)定性，可在薄膜中使用合適的穩(wěn)定劑。合適的穩(wěn)定劑包括大多數(shù)的糖類，優(yōu)選甘露醇，乳糖，和葡萄糖，最優(yōu)選的是甘露醇。這些穩(wěn)定劑的含量可以是所含膠原重量的0到5%，優(yōu)選所含膠原重量的1%。
為加快薄膜的干燥時間，可使用一種干燥增強(qiáng)劑。合適的干燥增強(qiáng)劑包括醇類，優(yōu)選乙醇、甲醇和異丙醇，最佳為乙醇。這種干燥增強(qiáng)劑存在的用量是總?cè)芤夯驊腋∫褐亓康?到50%左右，優(yōu)選10到30%左右，最佳為20%左右。
為產(chǎn)生一個與所用特定活性成分相容的PH值，在該薄膜中能使用一種合適的緩沖劑。合適的緩沖劑包括多數(shù)通常已知和所用的生物緩沖劑，優(yōu)選乙酸鹽，磷酸鹽和枸櫞酸鹽，最佳為乙酸鹽和磷酸鹽。這種緩沖劑存在的用量是該膠原溶液或懸浮液重量的0.01%到2%左右。相容的PH值是能夠保持活性成分的穩(wěn)定性，優(yōu)化其治療作用或防止其降解的PH值。適當(dāng)?shù)腜H值通常是3到8左右，優(yōu)選5到8左右，最佳為7.0到7.5左右的中性PH值。
優(yōu)選的活性成分是能夠促進(jìn)傷口愈合或神經(jīng)組織再生的生物劑，特別是重組蛋白質(zhì)。這種優(yōu)選活性成分包括來源于血小板的生長因子(PDGF)，表皮生長因子(EGF)，纖維細(xì)胞生長因子(FGF)，來源于血小板的一表皮生長因子(PDEGF)，來源于血小板的內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(PD-ECGF)，角化細(xì)胞生長因子(KGF)，類胰島素生長因子1和2(IGF-1和IGF-2)，腫瘤壞死因子(TNF)，來源于腦組織的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)和神經(jīng)營養(yǎng)素-3(NT-3)。較好的一種活性成分是PDGF或PD-ECGF，最佳的為PDGF。這種活性成分以足以促進(jìn)傷口愈合的用量存在，即，傷口愈合的一種有效用量。該活性成分的實(shí)際用量將由護(hù)理的臨床醫(yī)師決定并取決于各種因素如傷口嚴(yán)重程度，患者的狀況，患者的年齡和任何并發(fā)性損傷或內(nèi)科疾病。一般來說，活性成分的用量將在1μg/cm2到5mg/cm2左右的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的膠原海綿是用作給接觸的細(xì)胞或組織釋放這種活性成分的一種工具。例如，在治療皮膚燒傷或其他創(chuàng)傷中，把一種膠原海綿放在傷口上來給損傷區(qū)域釋放一種適宜的活性成分。PDGF是這類用途中特別適宜的活性成分。膠原海綿也能被用來加速外科傷口的愈合。用于這類方法中時，把這種膠原海綿放入外科切口和縫合進(jìn)傷口作為兩外科傷口表面間的一個接觸面。膠原海綿也能用來釋放神經(jīng)營養(yǎng)因子。用于這類方法時，把這種膠原海綿放在直接接觸或鄰近的神經(jīng)組織來用這種神經(jīng)營養(yǎng)因子治療。
實(shí)施例實(shí)施例1一種膠原海綿的制備用一種金屬桿(直徑32mm，長130mm)卷起一片明膠海綿(Gelfoam80×250×10mm)，很似生面團(tuán)制成一種薄片。所得到的這種薄片厚度為1mm。用一種黃銅制的沖壓機(jī)從這種薄片中切出干膠片。切制一種較大直徑的干膠片(直徑18mm，重1.5mg)用于體外研究。
在一種試驗(yàn)中，用移液管移液0.24ml或0.40ml的含PDGF的這種膠原溶液到每片干膠片上面。在另一種試驗(yàn)中，把這種干膠片浸泡在一種膠原溶液中。如下制備含PDGF的這種膠原溶液。首先，在30-50℃溶解2g的一種可溶性膠原(Semex S Semex，F(xiàn)razer，Pennsylvamia)于50ml的蒸餾水中制備一種4%的膠原溶液。把0.13ml的甘油，2ml的乙醇，和2ml的一種PDGF溶液(2mg/ml乙酸鹽緩沖劑)加入16ml的所得到的溶液。另外，又把微量的125I-PDGF加入這種溶液。在每片干膠片吸收了該溶液后，過夜干燥這種干膠片就制得了一種含PDGF的海綿膠原體系。
實(shí)施例2膠原海綿的釋放動力學(xué)使用Coster Transwell細(xì)胞(“細(xì)胞”)(Costar CO.，Cambridge，Massachusetts)按下述研究膠原海綿中活性成分的釋放率。如實(shí)施例1中所描述的制備125I-PDGF的膠原海綿，并從該薄膜中切得干膠片(1.6cm直徑)每個干膠片被轉(zhuǎn)移到一個Coster Transwell細(xì)胞并放在聚碳酸酯膜上面。把2.5ml的接收溶液(水和1%牛血清白蛋白，或者水和0.25%人血清白蛋白)加到該細(xì)胞容器。該細(xì)胞放置在這種接收液上并開始該釋放試驗(yàn)。在特定時間，移出20μl該接收液并將相同量的新鮮溶液替換進(jìn)該接收液中。重復(fù)這種取樣步驟得到另外20μl試樣。用一臺γ計(jì)數(shù)器(Beckman Instruments，CO.，Irvine，California)測出試樣的放射性。以該放射性為根據(jù)計(jì)算在任一給定時間的接受液中的蛋白質(zhì)濃度并用其它方法如ELISA和3H-胸腺嘧啶脫氧核苷攝取生物測定法證實(shí)。圖1和2和4和5顯示了從該干膠片中釋放PDGF的典型分布圖。從干明膠體系(圖1和2)中的釋放分布圖與該明膠海綿吸收該膠原溶液后馬上進(jìn)行的釋放試驗(yàn)的濕明膠系(圖4和5)是極其相似的。在100小時釋放了大約80%的生長因子。圖3和6顯示的數(shù)據(jù)表明干燥過程沒有改變該生長因子的活性。
圖7顯示了從一種無膠原的明膠海綿中PDGF的釋放。在這個研究中進(jìn)行了PDGF從明膠海綿的釋放。當(dāng)把這種膜(厚1cm)浸泡于PDGF溶液中時為除去捕獲在該膜內(nèi)的氣泡，把這種膜浸泡在減壓的水中。浸過水的膜在PDGF溶液中平衡。用125I-PDGF和Costar Transwell細(xì)胞測出PDGF的釋放率。該釋放率很快。大部分PDGF在12小時內(nèi)被釋放完。從該試驗(yàn)得出的結(jié)果表明膠原-明膠海綿體系在一段延長的時間內(nèi)提供了治療劑的穩(wěn)定、連續(xù)并持久的釋放。
實(shí)施例3從膠原-海綿體系中蛋白質(zhì)體內(nèi)釋放率的測定。
A手術(shù)前準(zhǔn)備給每只稱量約3.0到3.5kg的年輕成熟的新西蘭白兔(M和K Rabbitry，Bertonville，Arkansas)用一種鎮(zhèn)靜藥Rompum
(Farbenfabriken，Bayer，西德)麻醉，接著(10分鐘后)把氯胺酮(60mg/kg)和甲苯噻嗪(xylaine)(5mg/kg)二者均肌肉內(nèi)給藥。測出每只兔重并記錄。把一種小棉或紗布塞插入每只兔的兩只耳朵中，之后用一把動物剪刀(＃40刀口)削去兩只耳朵的內(nèi)表面和外邊薄薄一層。然后給每只耳朵內(nèi)表面涂商業(yè)上可得到的Neet
脫毛霜10分鐘，此后用干紗布除去。耳朵內(nèi)表面用生理鹽水浸泡過的紗布擦凈然后涂70%酒精溶液。每只兔的一個耳朵內(nèi)表面真皮通過用一只30號針將含1∶1000腎上腺素的2%賽魯卡因溶液(這要求1.5到3.0mls總量)浸潤這只耳朵而使其變白。然后把浸潤區(qū)用3次聚乙烯吡咯酮碘，接著用70%酒精溶液擦凈。必要時在該處用干燥塞子替換耳塞。
然后把這些兔子移入無菌手術(shù)室。把已變白的耳朵固定在一個耐熱有機(jī)玻璃“耳板”上(WashingtonUnivevsityMedicalCenter，DivisionofTechnicalServices，St.Louis，Missouri)，它使用了一個雙臂鉗，一個臂在動物耳朵頂部，另一個在底部，在沒有損害耳朵供血條件下穩(wěn)定兔耳。蓋好動物，用聚乙烯吡咯酮碘噴灑手術(shù)區(qū)(即，變白了的耳朵內(nèi)表面)并讓它干燥3到5分鐘。
B、損傷整個損傷步驟使用無菌技術(shù)。使用顯微手術(shù)儀器，一個6mm環(huán)鋸，和一臺雙目顯微鏡(10X，Zeiss)，用一個6mm活檢鉆給每只兔的內(nèi)耳表面輕微刻痕，并用顯微手術(shù)鉗，腱切斷術(shù)剪，一把鈍邊2mm的Lempert骨膜起子和無菌棉球涂藥器在活檢部位清除所有的組織和纖維(包括骨膜)到暴露出軟骨程度。用解剖法去軟骨膜和覆在上面的組織。為實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟⒉恍枰勉@完全鑿穿該軟骨，不過，該軟骨的部分厚度刻痕被認(rèn)為是可接受的。仔細(xì)注意和記錄該軟骨上任一切口或自然孔的位置(在收集的那天作為參考)。用無菌棉球涂藥器除去活檢部位的血，注意照著避免傷口有過多的血。用一小片生理鹽水浸過的紗布蓋在每個結(jié)束了的活檢部位。在每只損傷的耳朵每面的中線(當(dāng)耳朵固定在該板上用對折法確定)上形成四個活動性6mm活檢潰瘍，不管怎樣，每只耳朵上總數(shù)不超過5個活檢位置。這些活檢位置最小間隔1cm。
一只耳朵手術(shù)一結(jié)束就馬上用生理鹽水弄濕的紗布覆蓋，然后在該紗布周圍用帶子捆扎封閉以保持濕度一直到使用PDGF。然后用如第一只耳朵的方法把第二只耳朵褪色，擦凈，固定并損傷。除去第二只耳朵的每個活檢部位的血并用一小片生理鹽水浸泡過的紗布覆蓋每個完成手術(shù)的活檢位。第二只耳朵手術(shù)一結(jié)束馬上用生理鹽水弄濕的紗布覆蓋直到使用PDGF為止。任何兔子在這之前的任一時間顯出從麻醉中蘇醒的跡象時，用25mg/kg氯胺酮肌肉內(nèi)給藥重新麻醉。
C、給傷口使用活性成分按實(shí)施例I的方法制備的干膠片用于體內(nèi)藥物釋放研究。小干膠片(直徑5mm)用于這個試驗(yàn)。把每片干膠片插入一個傷口部位(直徑6mm)并用一片Tagaderm
確保該干膠片保留在傷口部位。
在操作手術(shù)的研究者的觀察下使兔子從麻醉中蘇醒。一蘇醒，就把一種大15到25cm的塑料頸圈(CanineCenter，St.Louis，Missouri)套在每只兔頸上防止兔使傷口或敷料破裂。把這些兔子放回一種隔離的籠中，飼養(yǎng)它們直到收集為止。
D、從膠原-明膠海綿體系中釋放蛋白質(zhì)的測定在選擇的時間，把好幾片干膠片從傷口部位取出。把新的幾片Tagaderm
用于覆蓋已除去干膠片的傷口部位。將這種干膠片收集在在試驗(yàn)管中。當(dāng)收集了所有干膠片時，計(jì)算每個干膠片的放射性。從剩余干膠片的放射性中計(jì)算出在給定時間所釋放出的PDGF量。圖8表示了從用1%膠原溶液制備的該膠原-明膠海綿體系中PDGF的釋放分布圖。在49小時后，約62%的PDGF已被釋放。圖9表示了從用8%膠原溶液制備的該膠原-明膠海綿體系中PDGF的釋放分布圖。這種溶液是在60℃把可溶性膠原溶于蒸餾水中制得的。在49小時后約73%的PDGF已被釋放。
實(shí)施例4用鼠血管叢模型測定含膠原海綿對新組織生長的作用在30只Lewis鼠(125-150g)上，從踝到腹股溝韌帶解剖左脛骨后部和其母體股骨的動脈-靜脈叢。把該叢夾于直徑為1.6cm的兩膠原片間并放入一個匙狀硅化橡膠模型中。A組的片是以膠原-明膠海綿系為基礎(chǔ)。在這組中每個片含大約125μg的PDGF。B組中的片是以可溶性膠原為基礎(chǔ)的，這組中的每片含約125μg的PDGF。C組中的片是由不含任何PDGF的可溶性膠原組成的，并因此用作對照。在第30天殺死所有的動物。大體上測定這種模型的含量，并用一臺數(shù)字化計(jì)算機(jī)和3-D重顯影。按組織形狀測量學(xué)的方法測定所生長的組織體積。
圖10表示了三個不同組的新組織體積的生長。在用含125μg的PDGF的膠原-明膠海綿系治療的動物中觀察到新組織體積的實(shí)質(zhì)性增加。在給相同動物模型使用一種可溶性膠原系的前述試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)在植入后10天和15天之間以含PDGF的可溶性膠原為基礎(chǔ)的干膠片顯著增加新組織的體積。用高劑量PDGF(120μg/膠片)時尤其明顯。該試驗(yàn)也表明，植入后30天這種新組織退化。這些實(shí)驗(yàn)證明這種膠原-明膠海綿系很好地使新組織體積再生長和/或維持幾周。
權(quán)利要求
1.一種含有膠原的海綿，包括一種吸收性明膠海綿，膠原和一種活性成分。
2.按照權(quán)利要求1的含有膠原的海綿，其中所說的吸收性明膠海綿是一種交聯(lián)明膠。
3.按照權(quán)利要求2的含有膠原的海綿，其中所說的交聯(lián)明膠是明膠海綿。
4.按照權(quán)利要求3的含有膠原的海綿，還可以含有一種增塑劑。
5.按照權(quán)利要求4的含有膠原的海綿，其中所說的增塑劑是選自于聚乙二醇和甘油。
6.按照權(quán)利要求4的含有膠原的海綿，還可以含有一種穩(wěn)定劑。
7.按照權(quán)利要求6的含有膠原的海綿，其中所說的穩(wěn)定劑是一種選自于甘露醇、乳糖和葡萄糖一組的糖。
8.按照權(quán)利要求6的含有膠原的海綿，還可以包含一種干燥增強(qiáng)劑。
9.按照權(quán)利要求8的含有膠原的海綿，其中所說的干燥增強(qiáng)劑是一種選自于乙醇、甲醇和異丙醇一組的醇。
10.按照權(quán)利要求8的含有膠原的海綿，還可以包含一種緩沖劑。
11.按照權(quán)利要求1的含有膠原的海綿，其中所說的活性成分是選自于由PDGF，EGF，F(xiàn)GF，PDEGF，PD-ECGF，KGF，IGF-1，IGF-2，TNF，BDNF，CNTF和NT-3組成的一組成份。
12.按照權(quán)利要求10的含有膠原的海綿，其中所說的活性成分是選自于由PDGF，EGF，F(xiàn)GF，PDEGF，PD-ECGF，KGF，IGF-1，IGF-2，TNF，BDNF，CNTF和NT-3組成的一組成份。
13.按照權(quán)利要求11的含有膠原的海綿，其中所說的活性成分是PDGF。
14.按照權(quán)利要求12的含有膠原的海綿，其中所說的活性成分是PDGF。
15.一種促進(jìn)表皮傷口愈合的方法，包括借助權(quán)利要求1的膠原海綿使用一種傷口愈合有效劑量的活性成分。
16.一種促進(jìn)表皮傷口愈合的方法，包括借助權(quán)利要求10的膠原海綿使用一種傷口愈合有效劑量的活性成分。
17.一種促進(jìn)內(nèi)部傷口愈合的方法，包括借助權(quán)利要求1的膠原海綿使用一種傷口愈合有效劑量的活性成分。
18.一種促進(jìn)內(nèi)部傷口愈合的方法，包括借助權(quán)利要求10的膠原海綿使用一種傷口愈合有效劑量的活性成分。
全文摘要
本發(fā)明公開了包含一種吸收性明膠海綿、膠原和一種活性成分的一種含膠原海綿，也公開了如果內(nèi)部和外部傷口使用這種海綿，促進(jìn)傷口愈合的方法。
文檔編號A61L15/22GK1083392SQ9310634
公開日1994年3月9日 申請日期1993年5月1日 優(yōu)先權(quán)日1992年5月1日
發(fā)明者S·Z·宋, A·莫拉韋基 申請人:安姆根有限公司