本發(fā)明屬于生物提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種蜂膠的制備方法。

背景技術(shù)：

蜂膠是蜜蜂從植物芽孢或樹(shù)干上采集的樹(shù)脂，將其混入其上腭腺、蠟腺的分泌物加工而成的一種具有芳香氣味的膠狀固體物。是蜜蜂科動(dòng)物中華蜜蜂等修補(bǔ)蜂巢所分泌的黃褐色或黑褐色的粘性物質(zhì)，可入藥。蜂膠(propolis)集動(dòng)植物精華于一體，含有100多種能增進(jìn)人類(lèi)健康的類(lèi)黃酮。蜂膠中含有300多種化學(xué)成分，其中包括芳香族和黃酮類(lèi)、有機(jī)酸、萜烯類(lèi)物質(zhì)、維生素、酶類(lèi)等(castrosl，2001)，使它具有許多已被證實(shí)或正在被證實(shí)的生理功能。蜂膠具有：抗菌防腐作用(梁郁強(qiáng)等，1999；馬爾科相，1990)，抗病毒作用(amoros等，1992)，抗癌作用(sakamoto,1994；banskota,1998)，護(hù)肝作用(remirez,1997；ricardo,1994)，抗疲勞作用(吳粹文等，1997)；抗氧化、抗菌、消炎、抗病毒、保肝和抗癌等作用(alencar,s.m等，2007)。隨著對(duì)蜂膠的研究進(jìn)一步深入，不斷發(fā)現(xiàn)其具有新的生理功能，如抑制脂肪氧化酶的活性、抗過(guò)敏作用、抗?jié)冏饔?、抑制血糖上升作用、改善代謝作用等。作為一種能夠增進(jìn)健康、改善體質(zhì)的天然物質(zhì)，蜂膠受到了越來(lái)越多的關(guān)注。

目前市面上各種劑型的蜂膠種類(lèi)繁多，但其配料都離不開(kāi)“提純蜂膠膏”，而“提純蜂膠膏”的品質(zhì)好壞直接決定了各種蜂膠制品的質(zhì)量好壞。所以蜂膠提純工藝對(duì)下游蜂膠制品加工環(huán)節(jié)至關(guān)重要。蜂膠提取的方法很多，目前比較主流的是食用酒精浸提、二氧化碳超臨界萃取。實(shí)際生產(chǎn)實(shí)踐中由于食用酒精浸提安全性高、成本低等特點(diǎn)依然是各個(gè)廠家的首選。

食用酒精的蜂膠提純工藝看似簡(jiǎn)單，實(shí)則不然。由于蜂膠成分復(fù)雜，全面提取十分困難，尤為重要的是毛膠中鉛含量很高，通過(guò)一般的沉降、過(guò)濾手段不僅時(shí)間長(zhǎng)、效率低，而且除鉛效果并不理想。此外，現(xiàn)有蜂膠提純工藝大多注重浸提液的濃度以及浸提液與物料的配比，經(jīng)過(guò)多遍提取后，提取液的有效成分含量急劇降低，低濃度提取液極大地增加了濃縮的時(shí)間、成本，降低了生產(chǎn)效率，通知制備得到的蜂膠純度低。

因此，研究開(kāi)發(fā)一種改善傳統(tǒng)食用酒精浸提工藝獲得高純度的蜂膠變得非常重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種蜂膠的制備方法，該方法制備得到的蜂膠可有效除去蜂膠中的重金屬物質(zhì)，且得到的蜂膠純度高。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用食用酒精溶液浸提后，再加入單寧，攪拌均勻，進(jìn)行微波提取，得到提取液；

3)再將提取液進(jìn)行離心分離，取上清液；

4)將上清液進(jìn)行超濾，得到蜂膠。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟1)中，粉碎至100～150目。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，加入毛膠粉重量8～12倍的食用酒精溶液。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，食用酒精溶液的體積濃度為55～70％。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，加入的單寧量為毛膠粉重量的0.02～0.08％。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟2)中，微波提取的條件為：功率為250～400w，時(shí)間為18～25min。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟3)中，在5000～7000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離12～18min。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述步驟4)中，所述超濾為：先用截留分子量為90kda～120kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為50kda～70kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

1、通過(guò)本發(fā)明方法有效克服了傳統(tǒng)采用乙醇提取獲得的蜂膠提取物中活性蛋白質(zhì)含量低問(wèn)題(活性蛋白質(zhì)含量一般為1.9％左右)，按本發(fā)明蜂膠提取方法得到的蜂膠提取物中蛋白質(zhì)含量達(dá)到3.9％。

2、本發(fā)明方法采用單寧，環(huán)保，不會(huì)影響蜂膠的功效和營(yíng)養(yǎng)，且可有效去除蜂膠的重金屬物質(zhì)，經(jīng)檢測(cè)，本發(fā)明方法制得的蜂膠不含有任何重金屬物質(zhì)。

3、按照本發(fā)明方法制備蜂膠，得到的蜂膠產(chǎn)品純度高，經(jīng)過(guò)hplc檢測(cè)，蜂膠純度可達(dá)到99％以上。

4、通過(guò)本發(fā)明方法制備蜂膠還能夠有效保持天然蜂膠的原有芳香味，還保留了蜂膠中α和β兩種淀粉酶及其它生物活性物質(zhì)。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。

實(shí)施例1

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至100目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量12倍的體積濃度為55％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.06％的單寧，攪拌均勻，在功率為250w條件下微波提取25min，得到提取液；

3)再將提取液在5000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離16min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為90kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為70kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過(guò)hplc檢測(cè)，蜂膠純度可達(dá)到99.2％。

實(shí)施例2

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至150目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量11倍的體積濃度為60％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.08％的單寧，攪拌均勻，在功率為300w條件下微波提取24min，得到提取液；

3)再將提取液在5500r/min轉(zhuǎn)速下離心分離18min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為95kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為65kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過(guò)hplc檢測(cè)，蜂膠純度可達(dá)到99.5％。

實(shí)施例3

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至100目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量10倍的體積濃度為65％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.06％的單寧，攪拌均勻，在功率為350w條件下微波提取22min，得到提取液；

3)再將提取液在6000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離16min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為100kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為60kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過(guò)hplc檢測(cè)，蜂膠純度可達(dá)到99.7％。

實(shí)施例4

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至150目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量9倍的體積濃度為70％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.04％的單寧，攪拌均勻，在功率為400w條件下微波提取20min，得到提取液；

3)再將提取液在6500r/min轉(zhuǎn)速下離心分離14min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為110kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為55kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過(guò)hplc檢測(cè)，蜂膠純度可達(dá)到99.5％。

實(shí)施例5

蜂膠的制備方法，包括以下制備步驟：

1)將毛膠冷凍，粉碎至100目，得到毛膠粉；

2)將毛膠粉用毛膠粉重量8倍的體積濃度為65％的食用酒精溶液浸提后，再加入毛膠粉重量的0.02％的單寧，攪拌均勻，在功率為250w條件下微波提取18min，得到提取液；

3)再將提取液在7000r/min轉(zhuǎn)速下離心分離12min，取上清液；

4)將上清液先用截留分子量為120kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到一次超濾液；一次超濾液繼續(xù)用截留分子量為50kda的超濾膜進(jìn)行超濾分離，得到蜂膠。

經(jīng)過(guò)hplc檢測(cè)，蜂膠純度可達(dá)到99.2％。