本發(fā)明屬于天然高分子聚合物應(yīng)用領(lǐng)域，具體涉及一種注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

聚谷氨酸是由D-/L-谷氨酸通過(guò)γ-酰胺鍵聚合的鏈狀陰離子多肽型聚合物。聚谷氨酸最初從日本傳統(tǒng)的發(fā)酵食品納豆的粘液中被發(fā)現(xiàn)。聚谷氨酸無(wú)免疫原性，在自然界或人體內(nèi)均能被完全降解，食用、醫(yī)藥或化妝品用均安全無(wú)毒。目前聚谷氨酸可通過(guò)微生物發(fā)酵規(guī)模化制備。聚谷氨酸主鏈含有大量親水基團(tuán)，具有比透明質(zhì)酸更強(qiáng)的吸水性。

美國(guó)專利US 8 486 467 B1公開(kāi)了一種以分子量達(dá)100萬(wàn)以上的聚谷氨酸為原料的皮膚注射填充劑。該專利指出，與透明質(zhì)酸填充劑相比，聚谷氨酸不是人體自身所含物質(zhì)，它被機(jī)體降解消除的速度更慢，達(dá)到在體內(nèi)留存更久的組織填充效果。另外，聚谷氨酸的發(fā)酵菌株為安全無(wú)毒的高產(chǎn)枯草芽孢桿菌，而透明質(zhì)酸的發(fā)酵菌株為致病菌株獸疫鏈球菌，因此聚谷氨酸的使用安全性更高、發(fā)酵成本更低。該聚谷氨酸填充制劑專利的組成為1％～3％聚谷氨酸和0.1％～1％含鈣鹽溶液，用其對(duì)家兔皮膚進(jìn)行48h填充實(shí)驗(yàn)，48h后填充物殘留76％～77％。大于48h的填充情況沒(méi)有進(jìn)一步報(bào)道，若據(jù)48h填充物損失23.5％計(jì)算，到第32天(約1月)時(shí)填充物殘留1％，推算出的填充維持時(shí)間約1個(gè)月。與目前應(yīng)用的交聯(lián)透明質(zhì)酸填充劑維持時(shí)間6～12個(gè)月相比，該填充用聚谷氨酸制劑的維持時(shí)間短，需要改進(jìn)制備方法延長(zhǎng)填充維持時(shí)間，提高應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒的制備方法，得到可用于皮膚組織注射填充的安全有效聚谷氨酸注射制劑。

此外本發(fā)明還提供了一種上述注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒在用于增加組織容量的美容注射填充制劑中的應(yīng)用。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案。

一種注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒的制備方法，包括以下步驟：

(1)將1,4-丁二醇二縮水甘油醚加入去離子水中，攪拌均勻后，再加入聚谷氨酸鹽，攪拌均勻，保溫，得預(yù)混物；

(2)在步驟(1)所述的預(yù)混物中加入水性溶液進(jìn)行勻漿，得勻漿物；

(3)在步驟(2)所述的勻漿物中加入pH調(diào)節(jié)劑和滲透壓調(diào)節(jié)劑，得調(diào)節(jié)物；

(4)步驟(3)所述的調(diào)節(jié)物經(jīng)分離收集凝膠顆粒物，滅菌處理即得。

上述制備方法，優(yōu)選的操作方法為：

(1)將1.0～3.6份1,4-丁二醇二縮水甘油醚加入90～110份去離子水中，攪拌均勻后，再加入20～35份聚谷氨酸鹽，攪拌均勻，保溫，得預(yù)混物，其中所述的份為質(zhì)量份數(shù)；其中聚谷氨酸鹽的重均分子量為150萬(wàn)～250萬(wàn)道爾頓；其中聚谷氨酸鹽為聚谷氨酸鈉、聚谷氨酸鉀、聚谷氨酸鎂、聚谷氨酸鈣、聚谷氨酸鋅中的一種或多種；其中保溫溫度為20～100℃；優(yōu)選地，所述聚谷氨酸鹽為聚谷氨酸鈉，保溫溫度為40～80℃；

(2)在步驟(1)所述的預(yù)混物中加入水性溶液進(jìn)行勻漿，勻漿至95％的凝膠顆粒粒徑小于1.1mm，得勻漿物；其中水性溶液為含0～0.9％鹽類水溶液；其中鹽類為氯化鈉(NaCl)、磷酸二氫鈉(NaH₂PO₄)、磷酸氫二鈉(Na₂HPO₄)、磷酸二氫鉀(KH₂PO₄)、磷酸氫二鉀(K₂HPO₄)中的一種或多種，包括含有結(jié)晶水的水合形式；優(yōu)選地，80％的凝膠粒徑在0.1～0.9mm之間；

(3)在步驟(2)所述的勻漿物中加入pH調(diào)節(jié)劑使pH為6.0～8.0，加入滲透壓調(diào)節(jié)劑使?jié)B透壓為250～340mOsm/kg·H₂O，得調(diào)節(jié)物；其中pH調(diào)節(jié)劑為NaH₂PO₄、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、K₂HPO₄中的一種或多種，包括含有結(jié)晶水的水合形式；其中滲透壓調(diào)節(jié)劑為NaCl、葡萄糖、甘露醇、氯化鉀(KCl)、氯化鈣(CaCl₂)、山梨醇，包括含有結(jié)晶水的水合形式；優(yōu)選地，所述的pH調(diào)節(jié)劑為NaH₂PO₄或Na₂HPO₄，pH為7.35～7.45，滲透壓調(diào)節(jié)劑為NaCl，滲透壓為280～310mOsm/kg·H₂O；

(4)步驟(3)所述的調(diào)節(jié)物經(jīng)過(guò)濾或離心法分離收集凝膠顆粒物，滅菌處理即得；其中滅菌條件為高壓蒸汽110～160℃滅菌，時(shí)間為2s～40min；優(yōu)選地，所述滅菌條件為120～155℃，時(shí)間為4s～30min。

一種如上所述的制備方法制備得到的交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒。

一種如上所述的制備方法制備得到的交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒，用于制備增加組織容量的美容填充注射劑中的應(yīng)用。

一種如上所述的制備方法制備得到的交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒，制備美容填充注射劑。所得注射劑以交聯(lián)聚谷氨酸顆粒為主要成分，具有與人體相適應(yīng)的pH和滲透壓，通過(guò)高壓蒸汽滅菌，可經(jīng)針頭注射于皮膚待填充部位。填充注射采用隧道注射法，針頭斜面朝上，斜向進(jìn)針，一邊退一邊推注，使交聯(lián)聚谷氨酸顆粒進(jìn)入皮膚待填充部位而發(fā)揮增加組織容量的作用；也可據(jù)需采用平鋪、網(wǎng)狀、點(diǎn)面結(jié)合等隧道組合方法注射，以更好達(dá)到立體注射效果。

聚谷氨酸在進(jìn)行交聯(lián)處理時(shí)，調(diào)節(jié)底物聚谷氨酸和交聯(lián)劑1,4-丁二醇二縮水甘油醚的比例，可獲得不同交聯(lián)程度的產(chǎn)物。一般情況下，交聯(lián)底物和交聯(lián)劑濃度越高，交聯(lián)程度越大。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，交聯(lián)聚谷氨酸的交聯(lián)程度不宜過(guò)低，否則會(huì)出現(xiàn)交聯(lián)聚谷氨酸因不耐受滅菌高溫而迅速液化的情況，液化產(chǎn)物易分散將削弱其作為組織填充劑的填充維持效果；交聯(lián)聚谷氨酸的交聯(lián)程度也不宜過(guò)高，否則在制備階段會(huì)出現(xiàn)大量聚谷氨酸很難在少量水性溶液里攪拌混勻，甚至不能完全溶解的現(xiàn)象，最終不能獲得均勻一致的交聯(lián)聚谷氨酸。

本發(fā)明的制備方法首先通過(guò)制備特定交聯(lián)程度的交聯(lián)聚谷氨酸，再制成具有適宜pH、滲透壓及粒徑的凝膠顆粒，該凝膠顆粒能耐受高壓蒸汽滅菌而不液化，最終使得注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒一方面能被安全地注射進(jìn)入皮膚組織，另一方面也因其能以凝膠顆粒的形式駐留于皮膚組織而達(dá)到延長(zhǎng)其填充維持時(shí)間的效果。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：(1)交聯(lián)修飾后的聚谷氨酸，克服了聚谷氨酸易分散易降解的不足，具有延長(zhǎng)組織填充維持時(shí)間的效果。將本發(fā)明制備的注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒用于增加組織容量的美容注射填充術(shù)中，臨床療效顯著，安全性高。(2)聚谷氨酸是微生物來(lái)源、安全無(wú)毒的天然可降解聚合物，且具有超強(qiáng)的吸水保濕性能。本發(fā)明制備的注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒，是一類可用于注射美容的新型填充物，豐富了現(xiàn)有為數(shù)不多的可注射美容填充物品類，為廣大對(duì)注射填充美容有需的患者提供更多選擇，尤其是對(duì)現(xiàn)有注射美容填充物品類過(guò)敏的有需患者。

具體實(shí)施方式

結(jié)合實(shí)施例和對(duì)比例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，應(yīng)該說(shuō)明的是，下述說(shuō)明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對(duì)其內(nèi)容進(jìn)行限定。

實(shí)施例1

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚1.4g加入去離子水110g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量170萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鈉25g，攪拌均勻，100℃保溫0.5h；加入0.9％NaCl水溶液1.0L進(jìn)行勻漿，35000r/min勻漿約10s，至95％的凝膠顆粒粒徑小于0.2mm，中位數(shù)為0.08mm；向勻漿物中加入約0.074g NaH₂PO₄和0.040g Na₂HPO₄，調(diào)節(jié)pH 6.5；再加入NaCl約0.65g，調(diào)節(jié)滲透壓288mOsm/kg·H₂O；5000r/min離心10min，收集沉淀層凝膠顆粒物；分裝，157℃高壓蒸汽滅菌3s即得。

實(shí)施例2

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚3.2g加入去離子水105g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量210萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鎂33g，攪拌均勻，90℃保溫2h；加入0.9％NaCl水溶液0.9L進(jìn)行勻漿，19000r/min勻漿約60s，至95％的凝膠顆粒粒徑小于0.5mm；向勻漿物中加入約0.043g NaH₂PO₄和0.217g Na₂HPO₄，調(diào)節(jié)pH 7.40；再加入NaCl約0.815g，調(diào)節(jié)滲透壓300mOsm/kg·H₂O；過(guò)濾收集凝膠顆粒物；分裝，115℃高壓蒸汽滅菌38min即得。

實(shí)施例3

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚1.6g加入去離子水95g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量180萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鋅27g，攪拌均勻，80℃保溫4h；加入去離子水1.5L進(jìn)行勻漿，25000r/min勻漿約20s，至80％的凝膠顆粒粒徑在0.01～0.6mm之間；向勻漿物中加入約0.091g的KH₂PO₄和0.145g的K₂HPO₄，調(diào)節(jié)pH 6.9；再加入甘露醇71.77g，調(diào)節(jié)滲透壓260mOsm/kg·H₂O；15000r/min離心5min，收集沉淀層凝膠顆粒物；分裝，120℃高壓蒸汽滅菌20min即得。

實(shí)施例4

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚2.0g加入去離子水100g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量220萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鈉28g，攪拌均勻，60℃保溫5h；加入0.021％K₂HPO₄·3H₂O水溶液1.6L進(jìn)行勻漿，10000r/min勻漿約3min，至80％的凝膠顆粒粒徑在0.05～0.8mm之間，中位數(shù)為0.1mm；向勻漿物中加入NaH₂PO₄·2H₂O約0.065g，調(diào)節(jié)pH 7.35；再加入CaCl₂26.88g，調(diào)節(jié)滲透壓280mOsm/kg·H₂O；3000r/min離心3min，收集沉淀層凝膠顆粒物；分裝，121℃高壓蒸汽滅菌15min即得。

實(shí)施例5

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚2.5g加入去離子水100g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量240萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鈉30g，攪拌均勻，50℃保溫6h；加入0.053％Na₂HPO₄·12H₂O水溶液0.5L進(jìn)行勻漿，30000r/min勻漿約15s，至80％的凝膠顆粒粒徑在0.05～1mm之間，中位數(shù)為0.2mm；向勻漿物中加入KH₂PO₄約0.022g，調(diào)節(jié)pH 7.45；再加入山梨醇28.35g，調(diào)節(jié)滲透壓310mOsm/kg·H₂O；過(guò)濾收集凝膠顆粒物；分裝，140℃高壓蒸汽滅菌10s即得。

實(shí)施例6

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚2.8g加入去離子水100g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量200萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鈉31g，攪拌均勻，40℃保溫8h；加入0.025％K₂HPO₄·3H₂O水溶液2.0L進(jìn)行勻漿，15000r/min勻漿約2min，至80％的凝膠顆粒粒徑在0.1～0.9mm之間，中位數(shù)為0.4mm；向勻漿物中加入約0.242g的KH₂PO₄，調(diào)節(jié)pH7.7；再加入KCl 23.66g，調(diào)節(jié)滲透壓320mOsm/kg·H₂O；過(guò)濾收集凝膠顆粒物；分裝，155℃高壓蒸汽滅菌4s即得。

實(shí)施例7

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚3.6g加入去離子水100g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量250萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鈣35g，攪拌均勻，30℃保溫9h；加入0.037％Na₂HPO₄·2H₂O水溶液1.3L進(jìn)行勻漿，18000r/min勻漿約60s，至80％的凝膠顆粒粒徑在0.1～1mm之間；向勻漿物中加入約0.021g NaH₂PO₄·H₂O，調(diào)節(jié)pH 8.0；再加入葡萄糖約64.07g，調(diào)節(jié)滲透壓250mOsm/kg·H₂O；過(guò)濾收集凝膠顆粒物；分裝，160℃高壓蒸汽滅菌2s即得。

實(shí)施例8

將1,4-丁二醇二縮水甘油醚1.0g加入去離子水90g中，攪拌均勻后，再加入重均分子量150萬(wàn)道爾頓的聚谷氨酸鉀和聚谷氨酸鈣各10g，攪拌均勻，20℃保溫10h；加入0.9％NaCl水溶液1.2L進(jìn)行勻漿，21000r/min勻漿約30s，至95％的凝膠顆粒粒徑小于1.1mm；向勻漿物中加入約0.101g NaH₂PO₄和0.017g Na₂HPO₄，調(diào)節(jié)pH 6.0；再加入NaCl約2.76g，調(diào)節(jié)滲透壓340mOsm/kg·H₂O；9000r/min離心1min，收集沉淀層凝膠顆粒物；分裝，110℃高壓蒸汽滅菌40min即得。

對(duì)比例1

將1g重均分子量150萬(wàn)聚谷氨酸鈉溶于80mL水溶液，再加入1g氯化鈣，用水定容至100mL，121℃高壓蒸汽滅菌30min即得。

對(duì)比例2

將2g重均分子量210萬(wàn)聚谷氨酸鈉溶于80mL水溶液，再加入0.9g氯化鈣，用水定容至100mL，121℃高壓蒸汽滅菌30min即得。

對(duì)比例3

將3g重均分子量280萬(wàn)聚谷氨酸鈉溶于80mL水溶液，再加入0.8g氯化鈣，用水定容至100mL，121℃高壓蒸汽滅菌30min即得。

功效測(cè)試：兔耳皮膚填充試驗(yàn)

為突出和便于探查注射填充物的填充維持效果，選擇在家兔耳部背側(cè)皮膚進(jìn)行皮內(nèi)注射填充，局部集中的填充物使局部皮下組織量增加而使皮膚外表面呈明顯隆起的外觀，觀察皮膚隆起狀態(tài)的維持時(shí)間。選擇健康新西蘭家兔2只，1只作空白對(duì)照不注射，另1只進(jìn)行注射填充試驗(yàn)。在接受注射的家兔左側(cè)耳部選擇4個(gè)注射部位，每個(gè)部位注射0.1mL生理鹽水以及實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5、實(shí)施例6制備的注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒。在接受注射的家兔右側(cè)耳部相應(yīng)4個(gè)部位，分別注射0.1mL生理鹽水以及對(duì)比例1、對(duì)比例2和對(duì)比例3制備的注射填充用聚谷氨酸制劑。兔耳皮膚在填充物注射后觀察48周，記錄填充部位皮膚維持隆起狀態(tài)的時(shí)間，其結(jié)果參見(jiàn)表1。填充部位皮膚維持隆起狀態(tài)的檢查，是通過(guò)目視和手指觸覺(jué)檢查填充物存在狀態(tài)，拇指和食指同時(shí)觸碰填充部位的上下兩面，通過(guò)與注射部位周圍平整表面、對(duì)照家兔同部位表面狀況的對(duì)比來(lái)確認(rèn)填充物的存在。

表1兔耳皮內(nèi)注射填充不同聚谷氨酸制劑的維持時(shí)間

兔耳皮內(nèi)注射填充聚谷氨酸制劑后，交聯(lián)的聚谷氨酸制劑組和生理鹽水組在注射部位會(huì)出現(xiàn)局部輕微發(fā)紅現(xiàn)象，能在1～7天內(nèi)自愈恢復(fù)正常；未交聯(lián)的聚谷氨酸制劑組則出現(xiàn)局部紅腫、皮膚發(fā)亮的現(xiàn)象，能在3～7日內(nèi)自愈恢復(fù)正常。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，與空白對(duì)照的家兔相比，接受注射的家兔血常規(guī)正常，心、肝、脾、肺、腎等主要臟器經(jīng)解剖未見(jiàn)明顯異常。

由表1可見(jiàn)，未交聯(lián)的聚谷氨酸制劑的對(duì)比例填充維持時(shí)間為1周，比生理鹽水組略長(zhǎng)，而交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒的實(shí)施例的填充維持時(shí)間長(zhǎng)達(dá)22～48周以上，填充維持時(shí)間明顯長(zhǎng)于未交聯(lián)的聚谷氨酸制劑。未交聯(lián)聚谷氨酸制劑呈溶液流體的狀態(tài)，在注射部位受組織擠壓易于分散和吸收，因此填充物維持效果不明顯。

由表1進(jìn)一步可見(jiàn)，在交聯(lián)聚谷氨酸顆粒制備的步驟(1)得到預(yù)混物中，隨聚谷氨酸鈉和1,4-丁二醇二縮水甘油醚用量的逐漸增加(實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5、實(shí)施例6)，以及步驟(2)得到勻漿物時(shí)交聯(lián)聚谷氨酸顆粒粒徑在一定范圍內(nèi)逐步增大(實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5、實(shí)施例6)，最終獲得的交聯(lián)聚谷氨酸顆粒注射劑在兔耳皮內(nèi)注射填充試驗(yàn)中顯現(xiàn)更長(zhǎng)的填充維持時(shí)間。這是由于一方面交聯(lián)聚谷氨酸顆粒自身的交聯(lián)度隨交聯(lián)處理時(shí)聚谷氨酸原料和交聯(lián)劑的濃度增大而增加，交聯(lián)度高則凝膠體的致密程度越高；另一方面，交聯(lián)聚谷氨酸顆粒粒徑的增大，實(shí)質(zhì)上減小了與體液接觸的表面積，兩方面原因共同作用使得該顆粒抵抗高壓滅菌高溫降解和機(jī)體體液環(huán)境消化降解的能力越高，因此在填充試驗(yàn)中顯現(xiàn)出更長(zhǎng)的填充維持時(shí)間。

交聯(lián)聚谷氨酸顆粒的注射推注試驗(yàn)

在美容注射填充術(shù)中，需要操作者精確控制注射速度和力量，為減小因注射中堵塞而使推注失控的風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)行交聯(lián)聚谷氨酸顆粒的注射推注試驗(yàn)。選取30G號(hào)注射針，安裝在預(yù)灌裝了不同交聯(lián)聚谷氨酸顆粒的1.0mL注射針筒上，通過(guò)注射器推力試驗(yàn)儀設(shè)定推力10N，模擬皮膚內(nèi)注射，觀察注射活塞推進(jìn)速率變化曲線。當(dāng)注射活塞推進(jìn)速率變化曲線為平穩(wěn)平滑曲線，可認(rèn)為注射推注連續(xù)均勻；如出現(xiàn)速率為0或出現(xiàn)波谷波峰起伏，則認(rèn)為注射推注不連續(xù)均勻。交聯(lián)聚谷氨酸顆粒實(shí)施例的注射推注速率變化情況參見(jiàn)表2。

表2灌裝不同交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒的注射推注測(cè)試

由表2可見(jiàn)，實(shí)施例制備的交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒在注射推注測(cè)試中顯現(xiàn)的推注連續(xù)均勻率≥98％，注射安全性較高。同時(shí)也可看到，隨著交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒粒徑區(qū)間逐漸擴(kuò)大，隨大粒徑顆粒特別是1.1mm左右的顆粒出現(xiàn)的幾率逐漸增大，注射推注進(jìn)程的連續(xù)均勻率稍微降低，即推注堵塞的風(fēng)險(xiǎn)有所上升，因此宜控制顆粒粒徑95％的凝膠顆粒粒徑在1.1mm以內(nèi)。再結(jié)合兔耳皮膚填充試驗(yàn)表1結(jié)果可見(jiàn)，隨交聯(lián)聚谷氨酸顆粒粒徑中位數(shù)減小，其在兔耳皮內(nèi)填充維持時(shí)間逐漸縮短。綜合考慮提高交聯(lián)聚谷氨酸顆粒的推注安全性和延長(zhǎng)填充維持時(shí)間，顆粒粒徑不宜過(guò)大或過(guò)小。

聚谷氨酸的交聯(lián)加熱條件選擇

交聯(lián)聚谷氨酸顆粒制備步驟(1)得到預(yù)混物的過(guò)程中，升溫有利于加速交聯(lián)反應(yīng)。為達(dá)到聚谷氨酸和交聯(lián)劑的有效交聯(lián)，觀察到明顯膠凍凝結(jié)的加熱溫度和耗費(fèi)時(shí)間的關(guān)系見(jiàn)表3。

表3聚谷氨酸交聯(lián)時(shí)所需的加熱溫度和凝結(jié)時(shí)間

由表3可見(jiàn)，在聚谷氨酸由流體交聯(lián)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z凍凝結(jié)的過(guò)程中，加熱溫度越高達(dá)到膠凍凝結(jié)的時(shí)間相應(yīng)縮短。考慮到溫度過(guò)高如實(shí)施例1可能帶來(lái)操作燙傷的安全隱患，以及溫度過(guò)低如實(shí)施例8耗用時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，綜合優(yōu)選適中的40～80℃，凝結(jié)時(shí)間自然隨溫度而確定。

另外，交聯(lián)聚谷氨酸顆粒制備步驟(3)得到調(diào)節(jié)物中，選取pH調(diào)節(jié)至6.0～8.0，滲透壓調(diào)節(jié)至250～340mOsm/kg·H₂O，均是人體體液能接收的數(shù)據(jù)范圍。為最大限度減小對(duì)人體注射部位生理環(huán)境的影響，優(yōu)選人體組織液最適pH7.35～7.45，以及滲透壓280～310mOsm/kg·H₂O。

綜上所述，本發(fā)明所公開(kāi)的注射填充用交聯(lián)聚谷氨酸凝膠顆粒在以增加皮膚組織容量為目的的注射填充制劑應(yīng)用中，注射安全，不良反應(yīng)情況發(fā)生率低，無(wú)嚴(yán)重并發(fā)癥情況發(fā)生；其組織增容效果突出，且組織容量填充效果維持時(shí)間上顯著長(zhǎng)于未交聯(lián)聚谷氨酸制劑的注射填充效果。