本發(fā)明涉及物質(zhì)提取
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法。
背景技術(shù)：
：化妝品使用不當就會引起皮膚過敏，瘙癢、脫屑、紅腫、紅血絲和色素沉著等。因化妝品而導(dǎo)致的接觸性皮炎的患病率大大提升?；瘖y品接觸性皮炎常見的致敏原有防腐劑、香料香精、表明活性劑、防曬劑、抗氧化劑等等，這些成分是化妝品必要添加劑。隨著皮膚敏感越來越受到人們的重視，近年來化妝品行業(yè)正逐漸朝著崇尚綠色、回歸自然的方向發(fā)展。研制獨特的天然抗敏活性物質(zhì)，并將其添加到化妝品中，已成為化妝品行業(yè)最活躍的主題之一。馬齒莧(PortulacaoleraceaL.)，又名馬舌菜、長命菜等，為馬齒莧科馬齒莧屬一年生肉質(zhì)草本植物。多以其干燥地上部分入藥，遍布全國，盛產(chǎn)于四川。馬齒莧的營養(yǎng)價值和藥用價值極高，是我國衛(wèi)生部劃定的78種藥食同源的野生植物之一。具有清熱解毒、涼血止血的功能，現(xiàn)代藥理研究表明，馬齒莧具有抗菌、抗氧化、抗衰老、抗缺氧、鎮(zhèn)痛、抗炎和神經(jīng)保護等作用?，F(xiàn)有技術(shù)中，馬齒莧提取物的制備方法多采用水提或醇提法，水提或醇提法是利用離心作用分離提取液，最后取上清液，棄去廢渣，這種方法所得提取物純度較低。目前，馬齒莧提取物的制備方法中尚未涉及結(jié)晶提取工法。在提高提取物的純度上，結(jié)晶提取工藝與水提或醇提法相比，純度更高。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個目的是提供一種馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中馬齒莧提取物純度較低的問題。本發(fā)明還有一個目的是提供一種馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法，以提供一種利用結(jié)晶法制備馬齒莧提取物的方法。本發(fā)明提供一種馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法，包括以下步驟：步驟一，以馬齒莧全草為原料，除雜洗凈后搗碎，得到搗碎物；步驟二，將乙醇加入所述搗碎物中，過濾、減壓濃縮，得到粗提取濃縮液；步驟三，向所述粗提取濃縮液中加入去離子水，形成懸浮液，將石油醚加入所述懸浮液中，使液體分為上下兩層，取下層的水相部進行減壓濃縮，得到馬齒莧粗提取物；步驟四，用去離子水稀釋所述馬齒莧粗提取物，得到馬齒莧粗提取液，將所述馬齒莧粗提取液通過大孔吸附樹脂，進行吸附，然后再洗脫、減壓濃縮，得到濃縮液；步驟五，稀釋所述濃縮液，然后結(jié)晶提純，得到馬齒莧提取物結(jié)晶；步驟六，向所述馬齒莧提取物結(jié)晶中加入溶劑溶解，過濾，得到馬齒莧抗敏舒緩提取液。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟二中，將乙醇加入所述搗碎物中，過濾、減壓濃縮，得到粗提取浸膏的具體步驟如下：將加入乙醇的所述搗碎物放置在循環(huán)加熱裝置內(nèi)，在55～65℃溫度下，加熱提取3～6h，重復(fù)三次上述提取過程，得到提取液；過濾所述提取液，得到濾液；在48～55℃和-0.09Mpa環(huán)境下減壓濃縮所述濾液，得到粗提取浸膏。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟二中，所述乙醇的濃度為75％，所述搗碎物與所述乙醇的質(zhì)量比為1:5～1:10。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟三中，所述懸浮液與所述石油醚的體積比為1:2～1:4。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟四中，所述馬齒莧粗提取物與所述大孔吸附樹脂質(zhì)量比為1:5～1:10，所述大孔吸附樹脂為D-101大孔吸附樹脂。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟四中，洗脫采用去離子水洗脫液，洗脫流速為40～100ml/min，洗脫體積為3～4倍柱體積。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟五中，稀釋所述濃縮液，然后結(jié)晶提純，得到馬齒莧提取物結(jié)晶的具體步驟如下：向所述濃縮液中加入去離子水，加熱至50～60℃，使所述濃縮液充分溶解，得到濃縮液稀釋液，所述濃縮液與所述去離子水的質(zhì)量比為2:1；在0—4℃條件下，將所述濃縮液稀釋液靜置2～4h，進行結(jié)晶，并重結(jié)晶3～5次，得到馬齒莧提取物結(jié)晶。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述步驟六中，將所得馬齒莧提取物結(jié)晶干燥后，加入濃度為50％的戊二醇或者33％的1,3—丁二醇的溶劑進行溶解，利用0.22um濾膜過濾，得到馬齒莧抗敏舒緩提取液。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式，所述馬齒莧抗敏舒緩提取液可用于制備抗敏舒緩化妝品、護膚品。本發(fā)明提供了一種馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法，采用溶劑提取、萃取以及大孔吸附樹脂分離、結(jié)晶、重結(jié)晶的工藝方法制備馬齒莧提取物。該方法首次利用結(jié)晶法制備馬齒莧提取物，為馬齒莧提取物的制備、提純提供了新方法。經(jīng)HPLC圖譜測定，結(jié)晶法相對于傳統(tǒng)的水提或醇提法，其提取物的純度明顯提高。附圖說明為了更清楚地說明本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。附圖1為本發(fā)明馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法流程圖。附圖2為實施例1所得馬齒莧抗敏提取物HPLC譜圖。HPLC譜圖條件：流動相：A相為去離子水；D相為乙腈；洗脫條件：0.01-30minD＝10％-100％；柱子型號：C-18，250mm*4.6mm，5μm；流速1ml/min；柱溫箱：30℃；進樣量：10μl。具體實施方式為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結(jié)合附圖對本發(fā)明實施方式作進一步地詳細描述。本發(fā)明公開了一種馬齒莧抗敏舒緩液的制備方法，包括以下步驟：步驟一，以馬齒莧全草為原料，除雜洗凈后搗碎，得到搗碎物；步驟二，向步驟一所得的搗碎物中加入乙醇，然后放置在循環(huán)加熱裝置內(nèi)，在55～65℃溫度下，加熱提取3～6h，加熱提取能提高提取效率。過濾所得提取液，得到濾液，重復(fù)三次上述提取過程，然后合并濾液。在48～55℃和-0.09Mpa環(huán)境下減壓濃縮濾液，得到粗提取浸膏。本步驟中，乙醇的濃度為75％，搗碎物與乙醇的質(zhì)量比為1:5～1:10。步驟三，向步驟二中所得的粗提取浸膏中加入去離子水，形成懸浮液。然后向懸浮液中加入石油醚，使液體分為上下兩層，取下層的水相部進行減壓濃縮，得到馬齒莧粗提取物。本步驟中，懸浮液與石油醚的體積比為1:2～1:4。步驟四，用去離子水稀釋步驟三所得的馬齒莧粗提取物，得到馬齒莧粗提取液，將馬齒莧粗提取液通過D-101大孔吸附樹脂，進行吸附，然后再洗脫、減壓濃縮，得到濃縮液。本步驟中，馬齒莧粗提取物與大孔吸附樹脂質(zhì)量比為1:5～1:10；洗脫采用去離子水洗脫液，洗脫流速為40～100ml/min，洗脫體積為3～4倍柱體積。步驟五，向稀釋步驟四所得的濃縮液中加入去離子水，加熱至50～60℃，使?jié)饪s液充分溶解，得到濃縮液稀釋液。然后在0—4℃條件下，將濃縮液稀釋液靜置2～4h，進行結(jié)晶。冷凍干燥上述結(jié)晶，然后再重結(jié)晶3～5次，以提高純度，得到馬齒莧提取物結(jié)晶。本步驟中，濃縮液與去離子水的質(zhì)量比為2:1；步驟六，向步驟五所得的馬齒莧提取物結(jié)晶中加入溶劑溶解，溶解劑優(yōu)選為濃度為50％的戊二醇或者33％的1,3—丁二醇。然后在萬級工作臺上利用0.22um濾膜過濾，最終得到馬齒莧抗敏舒緩提取液。利用本發(fā)明方法所得的馬齒莧抗敏舒緩提取液，可用于制備抗敏舒緩化妝品、護膚品。實施例1：取馬齒莧全草500g，除雜洗凈后搗碎。向搗碎物中加入75％的酒精2500g，然后放置在循環(huán)加熱裝置內(nèi)，在55℃溫度下，加熱提取3h。過濾所得提取液，得到濾液，重復(fù)三次上述提取過程，然后合并濾液。將濾液在48℃和-0.09Mpa環(huán)境下減壓濃縮濾液，得到粗提取浸膏95g。向粗提取浸膏中加入去離子水，形成懸浮液200ml。然后向懸浮液中加入400ml石油醚，使液體分為上下兩層，取下層的水相部進行減壓濃縮，得到馬齒莧粗提取物85g。用去離子水稀釋馬齒莧粗提取物，得到馬齒莧粗提取液，將馬齒莧粗提取液通過850g的D-101大孔吸附樹脂，進行吸附。然后再洗脫，洗脫采用去離子水洗脫液，洗脫流速為40ml/min，洗脫體積為3倍柱體積。之后減壓濃縮，然后在4℃條件下，將濃縮液靜置2h，進行結(jié)晶。冷凍干燥上述結(jié)晶，然后再重結(jié)晶3次，以提高純度，得到馬齒莧提取物結(jié)晶5g。向馬齒莧提取物結(jié)晶中加入250ml溶劑溶解，溶解劑為濃度為50％的戊二醇。然后在萬級工作臺上利用0.22um濾膜過濾，最終得到馬齒莧抗敏舒緩提取液。實施例2：取馬齒莧全草2000g，除雜洗凈后搗碎。向搗碎物中加入75％的酒精20kg，然后放置在循環(huán)加熱裝置內(nèi)，在65℃溫度下，加熱提取6h。過濾所得提取液，得到濾液，重復(fù)三次上述提取過程，然后合并濾液。將濾液在55℃和-0.09Mpa環(huán)境下減壓濃縮濾液，得到粗提取浸膏437.3g。向粗提取浸膏中加入去離子水，形成懸浮液700ml。然后向懸浮液中加入800ml石油醚，使液體分為上下兩層，取下層的水相部進行減壓濃縮，得到馬齒莧粗提取物400g。用去離子水稀釋馬齒莧粗提取物，得到馬齒莧粗提取液，將馬齒莧粗提取液通過3kg的D-101大孔吸附樹脂，進行吸附。然后再洗脫，洗脫采用去離子水洗脫液，洗脫流速為100ml/min，洗脫體積為4倍柱體積。之后減壓濃縮，然后在4℃條件下，將濃縮液靜置2h，進行結(jié)晶。冷凍干燥上述結(jié)晶，然后再重結(jié)晶5次，以提高純度，得到馬齒莧提取物結(jié)晶18g。向馬齒莧提取物結(jié)晶中加入900ml溶劑溶解，溶解劑為濃度為33％的1,3—丁二醇。然后在萬級工作臺上利用0.22um濾膜過濾，最終得到馬齒莧抗敏舒緩提取液。實施例3：取馬齒莧全草1000g，除雜洗凈后搗碎。向搗碎物中加入75％的酒精1kg，然后放置在循環(huán)加熱裝置內(nèi)，在55℃溫度下，加熱提取3h。過濾所得提取液，得到濾液，重復(fù)三次上述提取過程，然后合并濾液。將濾液在48℃和-0.09Mpa環(huán)境下減壓濃縮濾液，得到粗提取浸膏210g。向粗提取浸膏中加入去離子水，形成懸浮液400ml。然后向懸浮液中加入600ml石油醚，使液體分為上下兩層，取下層的水相部進行減壓濃縮，得到馬齒莧粗提取物190g。用去離子水稀釋馬齒莧粗提取物，得到馬齒莧粗提取液，將馬齒莧粗提取液通過1.5kg的D-101大孔吸附樹脂，進行吸附。然后再洗脫，洗脫采用去離子水洗脫液，洗脫流速為70ml/min，洗脫體積為3倍柱體積。之后減壓濃縮，然后在4℃條件下，將濃縮液靜置2h，進行結(jié)晶。冷凍干燥上述結(jié)晶，然后再重結(jié)晶3次，以提高純度，得到馬齒莧提取物結(jié)晶11g。向馬齒莧提取物結(jié)晶中加入550ml溶劑溶解，溶解劑為濃度為50％的戊二醇。然后在萬級工作臺上利用0.22um濾膜過濾，最終得到馬齒莧抗敏舒緩提取液。取馬齒莧抗敏舒緩提取液，經(jīng)0.22um微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液，精密吸取供試品溶液10ul進樣，色譜條件如下：流動相：A相為去離子水；D相為乙腈；梯度洗脫條件：0.01-30minD＝10％-100％；柱子型號：C-18，250mm*4.6mm，5μm；流速1ml/min；柱溫箱：30℃；進樣量：10μl。得到馬齒莧抗敏提取物HPLC譜圖。參照圖2所示，取樣品50mg，定容到10ml容量瓶中，濃度為5mg/ml，0.22um微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液，精密吸取供試品溶液10ul進樣，色譜條件如上，得到馬齒莧抗敏提取物HPLC譜圖。其中有效成分的純度為93.3％。峰表如下：保留時間峰面積2.1561003252.52126927272.98493284總計2886336以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁1 2 3