一種葛棗獼猴桃泡騰劑及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種葛棗獼猴桃泡騰劑及其制備方法與應(yīng)用。將提取到的活性多糖混合物、碳酸氫鈉、檸檬酸、粘合劑、木糖醇、葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉和海藻酸鈉按(3-5份):(24-30份):(15-20份):(1-3份):(10-14份):(4-6份):(2-5份)混合、制軟材、制粒,烘干,整粒后,再加入30-50份果汁包合物、即可得到泡騰顆粒劑。該方法工藝簡(jiǎn)單,產(chǎn)品活性成分明確,天然VC保持率在70%以上,采用木糖醇配方體系、口感良好,適于糖尿病病人服用;實(shí)驗(yàn)證明葛棗獼猴桃活性多糖及泡騰顆粒劑對(duì)于Ⅱ型糖尿病均有一定治療功效;能廣泛應(yīng)用到制備抗氧化、抗疲勞和降血糖的食品和/或保健品中。
【專利說(shuō)明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及食品加工領(lǐng)域,具體涉及一種葛棗獼猴桃泡騰劑及其制備方法與應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 野生獼猴桃由于具有獨(dú)特的風(fēng)味和好的保健功效受到了國(guó)內(nèi)外越來(lái)越多學(xué)者的 研宄和關(guān)注。常見(jiàn)的有葛棗和狗棗,本研宄以研宄相對(duì)較少的葛棗為材料。葛棗獼猴桃是 獼猴桃科獼猴桃屬的植物,果實(shí)扁圓、有棱、主要分布于東三省、俄羅斯等地。黑龍江地區(qū) 所產(chǎn)成熟后具有淡黃色果皮,與狗棗外觀有一定差異。同時(shí)所含多糖、總黃酮、萜、維生素 C(Vc)等在含量或成分種類上均有一定差異。現(xiàn)階段研宄成果表明:其標(biāo)志成分有獼猴桃 喊(actinidine),草灰蓉酸(boschniakine),并富含Ca,K,Mg,P,Na,F(xiàn)e,Sr,Mn,Zn,Cu等 人體必需的無(wú)機(jī)元素,而含Pb,Cd,Be,Hg甚微,值得一提的是果實(shí)含維生素C0.53%? 1.43%,基本上均高于中華獼猴桃含量(100?30011^/10(^),開(kāi)發(fā)潛力很大,糖類4.2%? 9. 8%,其中活性多糖更具有好的生理活性,有機(jī)酸0. 78%?2. 48%,果膠質(zhì),鞣質(zhì)和蛋白 質(zhì),此外還含有大量黃酮苷、山奈酚、e-谷留醇等。所以具有潛在的抗腫瘤作用、抗病毒、 抗炎作用;抗氧化作用;增強(qiáng)免疫作用,抗畸變、抗突變作用;降血脂、降血糖作用。具有很 好保健功能,但是其儲(chǔ)藏時(shí)間短,口感酸澀,不能很好地作為水果供應(yīng)市場(chǎng)。此外,要發(fā)揮葛 棗獼猴桃保健作用,需要一定的食用量,活性成分達(dá)到一定劑量才有保健價(jià)值。由于現(xiàn)代 人生活緊張、快速,有很多人處于亞健康狀態(tài),為此這就需要開(kāi)發(fā)一種既能保持其特有的風(fēng) 味,又能發(fā)揮保健功能,且攜帶方便,老少皆宜,又符合現(xiàn)代人快節(jié)奏生活習(xí)慣的產(chǎn)品。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明的目的之一在于提供葛棗獼猴桃中的三種活性多糖及其提取方法。
[0004] 本發(fā)明所提供的葛棗獼猴桃中的活性多糖是按照如下方法提取得到的:
[0005] 1)粗多糖提?。簩⒏饤棲J猴桃榨汁后所得果渣與乙醇水溶液混合,并加入纖維素 酶進(jìn)行酶解;酶解結(jié)束后,使酶滅活,并對(duì)滅活后的酶解液進(jìn)行超聲提取,得到提取液;然 后將所述提取液進(jìn)行濃縮,并向濃縮液中加入乙醇進(jìn)行靜置沉淀,離心得到沉淀物,即為固 體粗多糖;
[0006] 2)粗多糖中活性多糖的提?。?br>
[0007] a)將步驟1)中所得粗多糖配制成5-10mg/mL的粗多糖水溶液,對(duì)所述粗多糖水溶 液除蛋白,并向除蛋白后的粗多糖水溶液中加入體積濃度為80-95%的乙醇水溶液,使粗多 糖沉淀,離心得到沉淀物,并將所述沉淀物配制成濃度為l_2g/L多糖水溶液;
[0008]b)以乙醇和水的體積比為(20:1)-(100:1)的乙醇水溶液為洗脫齊I」,將步驟a)中 的所述l_2g/L多糖水溶液,采用液體上樣法,經(jīng)DlOl大孔樹(shù)脂和MCI反相樹(shù)脂組成的混 合柱進(jìn)行梯度洗脫(梯度洗脫的過(guò)程中,也起到對(duì)所述粗多糖脫色的作用),收集乙醇和水 的體積比為(20:1)-(50:1)的餾分、濃縮、并向濃縮液中加入體積濃度為80-95%的乙醇水 溶液進(jìn)行靜置沉淀,離心得到沉淀物,并對(duì)沉淀物干燥,將所得到的干燥物配制成0. 5-lg/L多糖水溶液;
[0009] c)將步驟b)中所述的0. 5-lg/L多糖水溶液上S印haroseCL-4B陰離子交換柱進(jìn) 行梯度洗脫,以質(zhì)量濃度為〇. 05% -5%的NaCl的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液(Tris緩沖 液)為洗脫劑,分別收集NaCl質(zhì)量濃度為0. 1 %、0. 2%和0. 5%處的餾分,對(duì)所收集到的三 種餾分分別進(jìn)行透析除鹽離子(鈉離子和氯離子)、冷凍干燥,得到干燥物,經(jīng)過(guò)冷融離心 法確定多糖均一性,分別得到葛棗獼猴桃中三種活性多糖RzJPRz2和Rz3,通過(guò)紅外光譜及 TLC鑒別為三種新的雜多糖。
[0010] 上述葛棗獼猴桃中多糖提取方法中,步驟1)中,所述果渣和乙醇水溶液的固液比 為Ig: (5-10)ml,具體為Ig:5ml,所述乙醇水溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為40% -60%,具體為 50%〇
[0011] 所述果渣具體可按照下述方法制備得到:取已清洗的葛棗獼猴桃,用適量液氮攪 拌處理后,檸檬酸浸泡,用LE-2螺旋榨汁機(jī)榨汁后收集果渣,即得。其中,所述液氮的使用 量為所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的1% -3%,具體為2% ;所述檸檬酸的加入量為所述葛棗獼猴桃 質(zhì)量的0. 2% -0. 3%,所述檸檬酸浸泡的時(shí)間為5min-10min,檸檬酸在此起軟化葛棗獼猴 桃的作用。
[0012] 所述纖維素酶加入量為每克所述果渣中加入(20U-45U)的纖維素酶,具體為30U。
[0013] 纖維素酶的酶活定義為Ig固體酶(Iml液體酶)在50°C、pH= 4. 8條件下,Ih水 解底物CMC-Na產(chǎn)生Img葡萄糖的還原糖量為1個(gè)酶活單位,以u(píng)/g(u/ml)表示。
[0014] 所述酶解的pH為4-5. 5,具體為5. 5 ;所述酶解的溫度為37°C-45 °C,具體為37 °C; 所述酶解的時(shí)間為lh_2h,具體為2h。
[0015] 所述酶滅活的方式是采用微波使酶滅活,所述微波的功率為300W-400W,所述微波 將酶滅活的時(shí)間為lmin-5min。
[0016] 所述超聲提取可按如下步驟進(jìn)行:常溫下,在30-40kw的超聲波提取器中超聲處 理30min-60min,如此重復(fù)提取2-3次,合并提取液。
[0017] 所述濃縮為將所述提取液減壓濃縮至原體積1/12-1/8,具體為1/10。
[0018] 所述提取液在濃縮之前,還包括向提取液加入1-2%活性炭脫色的步驟。
[0019] 上述葛棗獼猴桃中多糖提取方法中,步驟2)中,
[0020] 所述除蛋白是采用sevage法對(duì)所述粗多糖水溶液除蛋白,所述sevage法為將步 驟1)中所得固體粗多糖用熱水溶解成粗多糖溶液,并將粗多糖溶液與Sevage試劑[氯仿: 正丁醇=5 :1(V/V)]按體積比5 :1混合,振蕩,離心,變性后的蛋白質(zhì)介于粗多糖溶液與 Sevage試劑交界處。此法的優(yōu)點(diǎn)是條件溫和,不會(huì)引起多糖的變性。
[0021] 所述DlOl大孔樹(shù)脂和MCI反相樹(shù)脂組成的混合柱中DlOl大孔樹(shù)脂和MCI反相 樹(shù)脂的質(zhì)量比為(10-30) : (0. 5-1),具體為20 :1,其中,所述MCI反相樹(shù)脂的商品型號(hào)為 CHP20P〇
[0022] 所述以乙醇和水的體積比為(20:1)-(100:1)的乙醇的水溶液為洗脫劑進(jìn)行梯度 洗脫具體可按如下步驟進(jìn)行:依次用乙醇和水的體積比為20:1、30:1、50:1和100:1的乙醇 的水溶液進(jìn)行梯度洗脫,并實(shí)時(shí)用硫酸-苯酚法檢測(cè),分別收集乙醇和水的體積比為20:1、 30:1和50:1處的餾分,并將所述餾分合并。
[0023] 所述質(zhì)量濃度為0. 05% -5 %的NaCl的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液的pH值為 8. 3-9. 5,此處NaCl起增加離子強(qiáng)度,實(shí)現(xiàn)多糖交換的作用。
[0024] 本發(fā)明的目的在于提供一種葛棗獼猴桃泡騰劑,該葛棗獼猴桃泡騰劑活性成分明 確,綠色健康。
[0025] 本發(fā)明所提供的葛棗獼猴桃泡騰劑包括如下質(zhì)量份數(shù)的組份:
[0026] 葛棗獼猴桃果汁包合物 30份-50份; 葛棗獼猴桃中活性多糖混合物 3份-5份; 葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉 4份-6份; 碳酸氫鈉 24份-30份; 檸檬酸 15份-20份; 粘合劑 1份-3份; 木糖醇 10份-14份 海藻酸鈉 2份-5份。
[0027] 上述葛棗獼猴桃泡騰劑中,所述葛棗獼猴桃果汁包合物可通過(guò)如下方法制備得 到:取已清洗的葛棗獼猴桃,用適量液氮攪拌處理后,檸檬酸浸泡,榨汁,得到果汁;向果汁 中加入吐溫80和亞硫酸鈉,并通入氮?dú)猓ū苊釼c被氧氣氧化),再向其中加入果膠酶進(jìn)行 酶解;加入澄清劑,快速離心,取上清液與環(huán)糊精與麥芽糊精混合(此混合物作為吸附 劑,對(duì)濃縮果汁快速包合吸附),超聲波處理,冷凍干燥或噴霧干燥(最大程度保留保健食 品中濃縮果汁原風(fēng)味及易氧化成分)得到凍干粉,即為果汁包合物。
[0028] 其中,所述液氮的使用量為所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的1% -3%,具體為2%。
[0029]所述檸檬酸的加入量為所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的0. 2% -0. 3%,所述檸檬酸浸泡的 時(shí)間為5min-10min,朽1檬酸在此起軟化葛賽獼猴桃的作用。
[0030] 所述吐溫80和亞硫酸鈉在所述果汁中的濃度均為0. 02-0. 04mg/ml。
[0031] 所述氮?dú)獾耐ㄈ胨俾蕿?0-20ml/min,具體為15ml/min。
[0032] 所述果膠酶加入量為每克所述果汁中加入(20U-30U)的果膠酶,所述酶解的溫度 為30°C-40°C,所述酶解的時(shí)間為lh-2h。
[0033] 所述澄清劑為殼聚糖,所述殼聚糖的加入量為所述果汁總質(zhì)量的1-2%。
[0034] 所述0-環(huán)糊精與麥芽糊精混合物中0-環(huán)糊精和麥芽糊精的質(zhì)量比為I:5_1 : 10。
[0035] 所述上清液和所述0 _環(huán)糊精與麥芽糊精混合物的質(zhì)量比為10 : (2-3)。
[0036] 所述超聲波處理的功率為30W-40W,時(shí)間為2-10min。
[0037] 所述活性多糖混合物為所述葛棗獼猴桃中多糖提取方法提取得到的多糖RZl、Rz2 和Rz^混合物,其中,所述多糖Rz廊Rz2和Rz3的質(zhì)量比為(1-2) : (1-4) : (1-4)。
[0038] 所述葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉為:將制備活性多糖中步驟2)中b)所 述離心后所得的上清液合并,并將其濃縮至原體積1/10-1/20,向其中加入活性炭脫色,使 活性炭的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1-2 %,再向已脫色后的殘液中加入麥芽糊精,使麥芽糊精的質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為20-40%,并冷凍干燥得到凍干粉(此處的凍干粉中主要含有黃酮和皂苷類成分)。
[0039] 所述粘合劑為聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和聚乙二醇4000 (PEG4000)按質(zhì)量比1:1的 混合物。此外,還可采用常用的MC、EC、HPC等粘合劑。
[0040] 所述葛棗獼猴桃泡騰劑中還可以加入適量的食用香精,可以改變葛棗獼猴桃泡騰 劑的口味。
[0041] 所述葛棗獼猴桃泡騰劑中還可以加入適量的高濃度乙醇(多80% )和水作為潤(rùn)濕 劑。
[0042] 所述葛棗獼猴桃泡騰劑中總黃酮彡2%,總多糖彡1.5%,多糖Rz1SO. 1%,多糖 Rz2S0? 2%,多糖Rz3彡 0? 2%。
[0043] 所述葛棗獼猴桃泡騰劑的劑型可為顆粒劑、片劑、膠囊劑或口含片等。
[0044] 所述葛棗獼猴桃泡騰劑的劑型為片劑和口含片時(shí),還需加入1-3%的聚乙二醇 6000 (PEG6000)作為潤(rùn)滑劑,混合均勻、壓片真空包裝即可得泡騰片和口含片。
[0045] 本發(fā)明所述葛棗獼猴桃泡騰劑的服用方法:每日2次,早晚各一片(每片Vc含量 50mg,總黃酮含量 20mg,Rz1Smg,Rz210mg,Rz3IOmg),置于 200-300ml水中,50s左右就可直 接服用。
[0046] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種葛棗獼猴桃泡騰劑的制備方法,所述制備方法 可以達(dá)到一步制粒的效果。
[0047] 本發(fā)明所提供的葛棗獼猴桃泡騰劑的制備方法包括如下步驟:將所述葛棗獼猴桃 中活性多糖混合物、碳酸氫鈉、檸檬酸、粘合劑、木糖醇、所述葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液 凍干粉和海藻酸鈉按所述質(zhì)量份數(shù)混合、制軟材、制粒,烘干,整粒后,再加入所述質(zhì)量份數(shù) 的葛棗獼猴桃果汁包合物,即可得到泡騰顆粒劑。
[0048] 上述制備方法中,所述制軟材之前還包括加入高濃度乙醇(80% -100% )為潤(rùn)濕 劑,可以防止酸堿相發(fā)生反應(yīng)。
[0049] 所述制粒為制粒機(jī)濕法一步制粒。
[0050] 所述烘干的溫度為40°C-45°c;
[0051] 所述整粒的目數(shù)為16目-18目。
[0052] 本發(fā)明由所述葛棗獼猴桃中多糖提取方法所提取得到的三種活性多糖也屬于本 發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0053] 其中,三種活性多糖Rzl、Rz2和Rz3均含有半乳糖醛酸,半乳糖,葡萄糖和甘露糖。 Rz3含有葡萄糖醛酸結(jié)構(gòu),Rz2含有阿拉伯糖結(jié)構(gòu),Rzl不含有鼠李糖結(jié)構(gòu),Rz3可能含有核 糖。以上結(jié)果結(jié)合Smith降解和過(guò)(高)碘酸氧化對(duì)比研宄發(fā)現(xiàn),Rzl,Rz2為1 - 2位鍵 型,Rz3為1 - 4位鍵型。
[0054] 本發(fā)明所提取得到的三種活性多糖和所制備得到的葛棗獼猴桃泡騰劑在制備抗 氧化、抗疲勞和/或降血糖食品和/或保健品方面的應(yīng)用。
[0055]本發(fā)明采用超聲波和微波結(jié)合工藝快速提取功效成分,即活性多糖(純化多糖), 保證了有效成分盡可能的萃出,同時(shí)用液氮、e-環(huán)糊精、麥芽糊精等綜合抗氧化技術(shù)盡可 能避免Vc及活性成分易氧化而造成的損失問(wèn)題,純化工藝相對(duì)簡(jiǎn)單,不采用常見(jiàn)DEAE-52 系列樹(shù)脂處理,采用S印haroseCL-4B樹(shù)脂,具備高流速、高分辨率和純化產(chǎn)品均一性好等 優(yōu)點(diǎn),此外本工藝先對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行D101+MCI混合法脫色素處理,脫色快、樹(shù)脂柱易恢復(fù)。有 利于降低純化材料的負(fù)擔(dān),加快流速,可以縮短加工時(shí)間,提高了產(chǎn)品收率。
[0056] 本發(fā)明所開(kāi)發(fā)的泡騰劑,既有固體制劑方便攜帶的優(yōu)點(diǎn),同時(shí)沖泡方便,所得產(chǎn)品 在感官、口味上保持了葛棗獼猴桃特有風(fēng)味,同時(shí),葛棗獼猴桃中的果汁包合物既可以吸附 保存Vc,可以對(duì)易氧化成分起到保護(hù)作用(環(huán)糊精包合),又可加快冷凍速率,用質(zhì)量濃度 為0. 05% -5%的NaCl的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液(Tris緩沖液)為洗脫劑進(jìn)行梯度洗 脫可使多糖均一度好,無(wú)需再上通用SephadexG系列凝膠色譜柱進(jìn)行進(jìn)一步純化。此外, 對(duì)于提取所得活性多糖(本研宄多糖與劉延吉研宄葛棗獼猴桃以木糖和葡萄糖為組分組 成的葛棗多糖存在明顯差異,本研宄多糖為雜多糖)進(jìn)行保健功能研宄,與已經(jīng)發(fā)表文獻(xiàn) 及相關(guān)專利相比,本發(fā)明所制備的葛棗獼猴桃泡騰劑的保健功能成分明確,本發(fā)明所制備 的葛棗獼猴桃泡騰劑屬于葛棗獼猴桃產(chǎn)品深加工,不屬于初級(jí)加工,同時(shí)綜合利用葛棗獼 猴桃多種活性成分。
[0057] 通過(guò)研宄本發(fā)明所純化得到的活性多糖和所制備得到的葛棗獼猴桃泡騰劑在抗 氧化、抗疲勞和降血糖方面的功效實(shí)驗(yàn),可以發(fā)現(xiàn)其在抗氧化、抗疲勞和降血糖方面具有明 顯的功效,能廣泛應(yīng)用到用于制備抗氧化、抗疲勞和降血糖的食品和/或保健品中。
【專利附圖】
【附圖說(shuō)明】
[0058] 圖1為實(shí)施例1中葛棗獼猴桃中多糖純化的工藝流程圖。
[0059] 圖2為實(shí)施例1中活性多糖紅外光譜圖。
[0060] 圖3為實(shí)施例1中活性多糖Rz2的紅外光譜圖。
[0061] 圖4為實(shí)施例1中活性多糖Rz^紅外光譜圖。
[0062] 圖5為實(shí)施例1中活性多糖薄層層析測(cè)定結(jié)果。
[0063] 圖6為實(shí)施例1中葛棗獼猴桃泡騰劑的制備工藝圖。
[0064] 圖7為實(shí)施例3中活性多糖濃度對(duì)小鼠體重變化的影響。
[0065] 圖8為實(shí)施例3中活性多糖濃度對(duì)小鼠血糖水平的影響。
[0066] 圖9為實(shí)施例3中活性多糖濃度對(duì)小鼠甘油三酯值變化的影響。
[0067] 圖10為實(shí)施例3中活性多糖濃度對(duì)小鼠膽固醇值變化的影響。
[0068] 圖11為實(shí)施例3中活性多糖濃度對(duì)小鼠血漿中胰島素分泌量的影響。
[0069] 圖12為實(shí)施例4中葛棗獼猴桃泡騰劑活性成分對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用。
[0070] 圖13為實(shí)施例4中葛棗獼猴桃泡騰劑活性成分對(duì)羥基離子自由基的清除作用。
【具體實(shí)施方式】
[0071] 下面結(jié)合附圖通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的方法進(jìn)行說(shuō)明,但本發(fā)明并不局限于 此,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本發(fā)明 的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0072] 下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法,如無(wú)特殊說(shuō)明,均為常規(guī)方法;所述試劑和材料,如 無(wú)特殊說(shuō)明,均可從商業(yè)途徑獲得。
[0073] 下述實(shí)施例中所述葛棗獼猴桃產(chǎn)自黑龍江?。凰鰴幟仕?,NaHCO3, 0 -環(huán)糊精、麥 芽糊精,PVP,PEG4000 (6000),乙醇,木糖醇等輔料均為食用級(jí)。
[0074] 下述實(shí)施例中的纖維素酶購(gòu)于山東省泰安市信德利生物工程有限公司。下述實(shí)施 例中的纖維素酶酶活力單位(U)定義為Ig固體酶(lml液體酶)在50°C、pH= 4. 8條件 下,Ih水解底物CMC-Na產(chǎn)生Img葡萄糖的還原糖量為1個(gè)酶活單位,以u(píng)/g(u/ml)表示。
[0075] 纖維素酶酶活力的具體測(cè)定方法為:將0. 625gCMC-Na溶解在IOOml純水中作為 底物,取底物溶液9ml,加纖維素酶酶液lml,50°C下,測(cè)定底物粘度減至一半時(shí)所需時(shí)間, 以?shī)W氏粘度計(jì)測(cè)定。以IOmin能使底物粘度降低一半的酶活作為一個(gè)單位。
[0076] 下述實(shí)施例中的果膠酶購(gòu)于山東省泰安市信德利生物工程有限公司。下述實(shí)施例 中的果膠酶酶活力單位(U)定義為IU果膠活力單位指在50°C,PH= 3.5條件下,一分鐘分 解果膠產(chǎn)生1微摩爾葡萄糖等量物,所需要的酶量為1個(gè)國(guó)際單位。
[0077] 果膠酶酶活力的具體測(cè)定方法為:果膠酶水解果膠,生成半乳糖醛酸。半乳糖醛 酸具有還原性糖醛基,可用次亞碘酸法定量測(cè)定,以此來(lái)表示果膠酶的活性。取3只比色 管中,分別加入l〇g/L果膠溶液5ml,在50±0. 1°C水浴中預(yù)熱IOmin;空白管中加pH= 3. 5緩沖液(檸檬酸-檸檬酸鈉)5mL;樣品管加稀釋酶液lmL、pH= 3. 5緩沖液4mL,立刻 搖勻,計(jì)時(shí)。保溫、反應(yīng)〇.5h,立即取出,微波處理lmin,冷卻;取上述3支管反應(yīng)液各 5ml放入碘量瓶中,準(zhǔn)確加入lmol/L碳酸鈉溶液lml、0.lmol/L碘液5ml,搖勾,于暗處放 置20min;取出,加入2mol/L硫酸溶液2ml,用0? 05mol/L硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至淺 黃色,加淀粉指示液3滴,繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好消失為其終點(diǎn),記錄空白、樣品反應(yīng)液消 耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積,計(jì)算。
[0078] 下述實(shí)施例中檢測(cè)方法:2,4_二硝基苯肼比色法測(cè)定Vc含量;采用硝酸鋁-亞硝 酸鈉比色法測(cè)定總黃酮;采用硫酸-苯酚法測(cè)定可溶性多糖含量;抗氧化方面:對(duì)超氧陰離 子自由基的清除作用,采用鄰苯三酚自氧化速率測(cè)定法,鄰二氮菲分光光度法測(cè)定抗氧化 劑的抗羥基自由基性能;采用小鼠(昆明種)負(fù)重模型以游泳時(shí)間、全血乳酸的含量為指標(biāo) 研宄抗疲勞活性;采用四氧嘧啶誘導(dǎo)構(gòu)建II型糖尿病小鼠模型,研宄降血糖活性。
[0079] 下述實(shí)施例所用的主要儀器:JP600超聲波提取器,武漢嘉鵬電子有限公司; NJL07 - 3型實(shí)驗(yàn)專用微波爐,南京杰全微波設(shè)備有限公司;FD-I冷凍真空干燥機(jī),北京博 醫(yī)康技術(shù)公司;恒溫水浴鍋;真空干燥箱;ZP120單沖壓片機(jī),丹東制藥機(jī)械有限公司;LE-2 螺旋榨汁機(jī),諸城市眾發(fā)機(jī)械;紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),日立2010 ;PHS-3C型酸度計(jì),上海雷 磁;電子天平,德國(guó)賽多利斯等。
[0080] 實(shí)施例1果汁包合物的制備、果渣中活性成分的提取以及泡騰劑、膠囊劑和泡騰 片制備
[0081] 1)果汁包合物制備:將葛棗獼猴桃清洗挑選,并向所述葛棗獼猴桃中加入檸檬酸 進(jìn)行浸泡處理,浸泡時(shí)間為8min,檸檬酸的加入量為所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的0. 25%,加入 所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的2%液氮、利用LE-2螺旋榨汁機(jī)快速榨汁,收集果汁,依次向果汁中 加入吐溫80和亞硫酸鈉(目的是防止維生素C降解),使其濃度均為0. 02mg/ml,通入氮?dú)猓?氮?dú)馑俾蕿?5ml/min,每克所述果汁中加入25U的果膠酶,在36°C下酶解I. 5h,檢測(cè)控制 Vc降解。并向所述果汁中加入殼聚糖作為澄清劑,使殼聚糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%,快速離心, 取上清液,并將上清液和e-環(huán)糊精與麥芽糊精混合物(其中,e-環(huán)糊精和麥芽糊精的質(zhì) 量比為1:6)混合,使上清液和e-環(huán)糊精與麥芽糊精混合物的比例為10 :3,在30W下,超 聲波處理2min,冷凍干燥或噴霧干燥得到凍干粉,即為果汁包合物。
[0082] 2)提取果渣中活性成分:將步驟1)中用LE-2螺旋榨汁機(jī)快速榨汁后所剩的果 渣,依據(jù)固液比Ig:5ml,加入50%乙醇水溶液,并且每克所述果渣中加入30U的纖維素酶進(jìn) 行酶解,酶解時(shí)的pH為5. 5,溫度37°C,酶解時(shí)間為此;酶解結(jié)束后,在300W功率下,用微波 處理酶解液5min,將纖維素酶滅活;將滅活后的酶解液置于超聲波提取器中,在30kw功率 下,常溫超聲40min,如此重復(fù)提取2?3次,合并提取液(此時(shí),可向提取液中加入2%活 性炭脫色),并將提取液減壓濃縮至原體積1/10時(shí),加入乙醇促使提取液中的粗多糖沉淀, 靜置過(guò)夜,離心獲得粗多糖;
[0083] 將離心獲得粗多糖用熱水溶解成粗多糖溶液,并將粗多糖溶液與Sevage試劑[氯 仿:正丁醇=5 :1(V/V)]按體積比5 :1混合,振蕩,離心,變性后的蛋白質(zhì)介于粗多糖溶液 與Sevage試劑交界處,并向分離出的已除蛋白后的粗多糖溶液中加入濃度為90%的乙醇, 促使粗多糖沉淀,離心得到沉淀物,并將所述沉淀物用熱水溶解形成濃度為l_2g/L多糖溶 液,然后以乙醇和水的體積比為(20:1)-(100:1)的乙醇的水溶液為洗脫劑,采用液體上樣 法,經(jīng)DlOl大孔樹(shù)脂和MCI反相樹(shù)脂組成的混合柱進(jìn)行梯度洗脫,用硫酸-苯酚法檢測(cè),收 集合并乙醇和水的體積比為(20:1)、(30:1)和(50:1)處的餾分,濃縮、加入90%乙醇、多 糖出現(xiàn)沉淀,靜置IOh后,4000r/min下離心15min,得到沉淀物,并對(duì)沉淀物低溫干燥,得到 干燥物,備用。
[0084] 制備葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉:將上述離心后所得的上清液合并,并 將其至原體積1/15,向其中加入活性炭脫色,使活性炭的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%,再向已脫色后的 殘液中加入麥芽糊精,使麥芽糊精的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%,并冷凍干燥得到凍干粉(此處的凍 干粉中主要含有黃酮和皂苷類成分),即制備得到了葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉。
[0085] 將上述得到的干燥物用熱水溶解配制成lg/L多糖溶液,以質(zhì)量濃度為 0. 05% -5%的NaCl的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液(Tris緩沖液)為洗脫劑,采用液體上樣 法,上S印haroseCL-4B陰離子交換柱進(jìn)行梯度洗脫,用硫酸-苯酚法檢測(cè)收集NaCl的質(zhì)量 濃度為0.05%、0. 1%、0.2%、0.5%處的餾分,并對(duì)所收集到的餾分進(jìn)行透析除鹽離子、冷 凍干燥得到干燥物,即為三種葛棗獼猴桃中活性多糖RzJPRz2和Rz3。經(jīng)過(guò)冷融離心法(將 冷凍干燥后的干燥物溶解成多糖溶液,-20°C下冷凍30min,室溫融化,15°C下,在IOOOOr/ min下離心15min,無(wú)沉淀說(shuō)明純度好)確定多糖均一,性,通過(guò)紅外光譜及TLC鑒別多糖,其 相應(yīng)的流程圖如圖1所示。
[0086] 活性多糖Rz1的紅外光譜圖如圖2所示,從圖1可得知:3360-3431cm_1為羥基 (-0H)的締合峰,1634cm_1為羰基(CO)吸收,表明存在乙?;?。1106、988cm_1的三個(gè)峰 表示分子中存在0-型糖苷鍵。872cm_1為0-型-D-吡喃甘露糖,而880cm_1則示為 0 -型-D-吡喃葡萄糖型,可能為雜多糖。
[0087] 活性多糖Rz2的紅外光譜圖如圖3所示,從圖2可得知:在3320-3500cm_1處示為 羥基(O-H)的締合峰,環(huán)上碳一氧(C-O)吸收峰在K^O-llSOcnT1為一較強(qiáng)吸收峰,且有裂 分。在880-900cnT1間有特征吸收,這表示為0 -型糖苷鍵。
[0088] 活性多糖Rz3的紅外光譜圖如圖4所示,從圖3可得知:3460-3480011-1出現(xiàn)寬峰, 并分裂2重峰,可能是O-H的伸縮振動(dòng)峰,表明多糖存在分子內(nèi)和分子間的氫鍵;1600CHT1 左右的吸收峰是-CHO的C-O的伸縮振動(dòng)峰,1000-1200CHT1間比較大的吸收峰是由兩種C-O 伸縮振動(dòng)所引起的,其中一種是屬于C-O-H的,另種是糖環(huán)的C-O-C;860cm1處有一吸收峰, 可能為呋喃糖型C-H變角振動(dòng)的特征吸收峰。
[0089]通過(guò)薄層色譜法(TLC),對(duì)活性多糖此1-此3進(jìn)行了成分分析,薄層色譜法是一種 微量而快速的分析方法。它兼?zhèn)淞酥鶎游龊图垖游鰞烧叩膬?yōu)點(diǎn)并且操作方便,設(shè)備簡(jiǎn)單,容 易掌握、便宜、靈活的特點(diǎn),具體的過(guò)程如下:
[0090] 對(duì)照品溶液的制備:葡萄糖0. 5mg,甘露糖0. 5mg,阿拉伯糖I. 0mg,L-木糖I. 5mg, L-半乳糖0. 5mg,L-鼠李糖0. 5mg,D-半乳糖醛酸I.Omg,D-葡萄糖醛酸I.Omg,D-核糖 0. 5mg等,精確稱定,超聲溶解于2ml60%乙醇水溶液制成混合對(duì)照品溶液。
[0091] 供試品溶液的制備:分別取Rz1-RzJOmg溶于IOmL硫酸中,置于氮?dú)獗Wo(hù)密封試管 內(nèi)100°C下水解3h。水解液低壓旋干,殘?jiān)苡贗mL60%乙醇水溶液中得供試品溶液。
[0092] 展開(kāi)劑和顯色劑:以正丁醇:吡啶:乙酸:水=12. 5:4. 5:2:2(V/v)為展開(kāi)劑進(jìn)行 展開(kāi),苯胺-二苯胺溶液(二苯胺4g、苯胺4mL、85%磷酸20mL混合溶解于200mL丙酮溶液 中)為顯色劑。
[0093] 薄層層析(TLC):硅膠G(5cmXIOcm),點(diǎn)樣量2yL,混合對(duì)照品點(diǎn)樣IyL,置于展 開(kāi)槽中,取出吹干,噴顯色劑苯胺-二苯胺顯色后,置于烘箱中130°C加熱顯色至斑點(diǎn)清晰, 其相應(yīng)的測(cè)試結(jié)果圖如圖5所示,其中,Rz1水解;Rz2水解;Rz3水解;B-混合對(duì)照品溶液; (1,半乳糖醛酸;2,葡萄糖醛酸;3,半乳糖;4,葡萄糖;5,甘露糖;6,阿拉伯糖;7,木糖;8, 鼠李糖;9,核糖),從附圖5可知:RZl、RzjPRz3均含有半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和甘露 糖。Rz3^有葡萄糖醛酸結(jié)構(gòu),Rz2含有阿拉伯糖結(jié)構(gòu),Rzi不含有鼠李糖結(jié)構(gòu),Rz3可能含有 核糖。以上結(jié)果結(jié)合Smith降解和過(guò)(高)碘酸氧化對(duì)比研宄發(fā)現(xiàn),Rzl,Rz2為1 - 2位 鍵型,Rz3為1 - 4位鍵型。
[0094] 上述過(guò)(高)碘酸氧化原理:可選擇性斷裂糖分子中連二羥基或連三羥基,生成相 應(yīng)的多糖醛、甲醛或甲酸。
[0095] 上述Smith降解是將氧化產(chǎn)物還原后進(jìn)行酸水解。
[0096] 3)泡騰劑、膠囊劑和泡騰片制備:向12g果渣中提取的活性多糖RZl、RZJPRz3的 混合物(其中,1^、1^2和1^3的質(zhì)量比為1 :2:3)中加入木糖醇(568)、碳酸氫鈉(968)、檸 檬酸(80g)、海藻酸鈉(20g)、葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉(18g)和粘合劑(12g, 其由質(zhì)量比為1:1的PVP與PEG4000組成),此外還可加入適量香精適量、適量無(wú)水乙醇和 水(在制備的過(guò)程中可以加入適當(dāng)高濃度乙醇(90% )為潤(rùn)濕劑,便于制備泡騰顆粒劑,制 備結(jié)束后,高濃度乙醇(90% )也揮發(fā)完全),在制粒機(jī)上濕法一步制粒,45°C下烘干,以18 目篩子整粒后,加入120g果汁包合物,則可制備得到泡騰顆粒劑;裝入膠囊則可制備得到 膠囊劑;加入1 %潤(rùn)滑劑(PEG6000),混合均勻、壓片可得100片,真空包裝可得泡騰片,其相 應(yīng)的制備工藝圖如圖6所示。
[0097] 測(cè)量上述泡騰劑中總黃酮含量和總多糖含量的方法如下:
[0098]總黃酮測(cè)定采用如下方法:精密稱取在120°C干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品50mg,置 50ml容量瓶中定容,取IOml定容IOOml容量瓶中,配制每Iml中含無(wú)水蘆丁 0.lmg,作為母 液。精密量取對(duì)照品溶液〇ml、lml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml分別置25ml比色管中,各加水至 5ml,加5 %亞硝酸鈉溶液Iml,搖勻,放置6分鐘,加10 %硝酸鋁溶液Iml,搖勻,放置6分鐘, 加4%氫氧化鈉試液4ml,加50%乙醇至刻度,搖勻,放置10-15分鐘,以相應(yīng)試劑為空白, 在510nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得方程回 歸Y= 0? 573X+0. 0168。
[0099] 樣品處理:精密稱量研碎泡騰劑0. 2-0. 5g,加入20-30ml甲醇超聲提取5min,抽慮 定容50ml,移取2-3ml樣品,測(cè)其吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方法檢測(cè)計(jì)算,得到葛棗獼猴桃泡 騰劑中總黃酮彡2%。
[0100] 總多糖采測(cè)定采用如下方法:精密稱定葡萄糖〇.l〇〇g,置于IOOOmL容量瓶中,用 水定容。取0. 5、1、1. 5、2、2. 5和3mL于25mL比色管中,分別加入5%的苯酚lmL,快速加 51111濃硫酸混勾,靜止1〇111;[11,40<€水浴30111;[11,在490111]1波長(zhǎng)下測(cè)吸光度,得回歸方程7 = 0.0175x+0. 0176〇
[0101] 樣品處理:精密稱量研碎泡騰劑0. 1-0. 2g,加入20-40%乙醇20-30ml,超聲提取 5-10min,抽慮,上清液加入90%乙醇使乙醇濃度達(dá)到70%以上,出現(xiàn)沉淀后,靜止10-18h, 4000r/min離心lOmin,純水溶解,定容50ml容量瓶作為檢測(cè)樣品,測(cè)其吸光度,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲 線方法檢測(cè)計(jì)算,得到葛棗獼猴桃泡騰劑中總多糖多1. 5%。
[0102] 實(shí)施例2 :葛棗獼猴桃制劑及活性多糖成分RZl_3降血糖和抗疲勞研宄
[0103] 采用小鼠(昆明種)負(fù)重模型進(jìn)行研宄,以游泳時(shí)間和全血乳酸的含量為指標(biāo)研 宄抗疲勞活性;采用STZ誘導(dǎo)二型糖尿病小鼠為模型,研宄其降血糖效果。其結(jié)果如表1和 表2所示:
[0104] 表1活性多糖及其制劑對(duì)昆明小鼠游泳時(shí)間的影響
[0105]
【權(quán)利要求】
1. 一種提取葛棗獼猴桃中三種活性多糖的方法,包括如下步驟: 1) 粗多糖提?。簩⒏饤棲J猴桃榨汁后所得果渣與乙醇水溶液混合,并加入纖維素酶進(jìn) 行酶解;酶解結(jié)束后,使酶滅活,并對(duì)滅活后的酶解液進(jìn)行超聲提取,得到提取液;然后將 所述提取液進(jìn)行濃縮,并向濃縮液中加入乙醇進(jìn)行靜置沉淀,離心得到沉淀物,即為固體粗 多糖; 2) 粗多糖中活性多糖的提取: a) 將步驟1)中所得粗多糖配制成5-10mg/mL粗多糖水溶液,對(duì)所述粗多糖水溶液除 蛋白,并向除蛋白后的粗多糖水溶液中加入體積濃度為80-95 %的乙醇水溶液,使粗多糖沉 淀,離心得到沉淀物,并將所述沉淀物配制成濃度為l_2g/L多糖水溶液; b) 以乙醇和水的體積比為(20:1) - (100:1)的乙醇水溶液為洗脫齊I」,將步驟a)中的所 述l-2g/L多糖水溶液,采用液體上樣法,經(jīng)D101大孔樹(shù)脂和MCI反相樹(shù)脂組成的混合柱進(jìn) 行梯度洗脫,收集乙醇和水的體積比為(20:1)-(50:1)的餾分、濃縮、并向濃縮液中加入體 積濃度為80-95%的乙醇水溶液進(jìn)行靜置沉淀,離心得到沉淀物,并對(duì)沉淀物低溫干燥,將 所得到的干燥物配制成〇. 5-lg/L多糖水溶液; c) 將步驟b)中所述的0. 5-lg/L多糖水溶液上SepharoseCL-4B陰離子交換柱進(jìn)行梯 度洗脫,以質(zhì)量濃度為〇. 05% -5 %的NaCl的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液為洗脫劑,分別收 集NaCl質(zhì)量濃度為0. 1%、0. 2%和0. 5%處的餾分,對(duì)所收集到的三種餾分分別進(jìn)行透析 除去鹽離子、冷凍干燥,得到干燥物,即為葛棗獼猴桃中三種活性多糖RZl、此2和Rz3。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:步驟1)中,所述果渣和乙醇水溶液的固 液比為lg: (5-10)ml,所述乙醇水溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為40% -60% ; 所述纖維素酶加入量為每克所述果渣中加入20U-45U的纖維素酶; 所述酶解的pH為4-5. 5,所述酶解的溫度為37°C-45°C,所述酶解的時(shí)間為lh-2h; 所述酶滅活的方式是采用微波使酶滅活,所述微波的功率為300W-400W,所述微波將酶 滅活的時(shí)間為lmin-5min; 所述超聲提取可按如下步驟進(jìn)行:常溫下,在30-40kw的超聲波提取器中超聲處理 30min-60min,如此重復(fù)提取2-3次,合并提取液; 所述提取液在濃縮之前,還包括向提取液加入1-2%活性炭脫色的步驟; 所述濃縮為將所述提取液減壓濃縮至原體積1/12-1/8。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:步驟2)中,所述D101大孔樹(shù)脂和MCI 反相樹(shù)脂組成的混合柱中D101大孔樹(shù)脂和MCI反相樹(shù)脂的質(zhì)量比為(10-30) : (0. 5-1); 所述以乙醇和水的體積比為(20:1)-(100:1)的乙醇的水溶液為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫 可按如下步驟進(jìn)行:依次用乙醇和水的體積比為20:1、30:1、50:1和100:1的乙醇的水溶液 進(jìn)行梯度洗脫,并實(shí)時(shí)用硫酸-苯酚法檢測(cè),收集乙醇和水的體積比為20:1、30:1和50:1 處的餾分,并將所述餾分合并; 所述質(zhì)量濃度為〇. 05 % -5 %的NaCl的三羥甲基氨基甲烷緩沖溶液的pH值為 8. 3-9. 5 〇
4. 權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述方法所提取得到的三種活性多糖,其中,所述三種活性 多糖為多糖RzpRzjPRzp
5. -種葛棗獼猴桃泡騰劑,包括如下質(zhì)量份數(shù)的組份: 葛棗獼猴桃果汁包合物 30份-50份; 葛棗獼猴桃中活性多糖混合物 3份-5份; 葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉 4份-6份; 碳酸氫鈉 24份-30份; 檸檬酸 15份-20份; 粘合劑 1份-3份; 木糖醇 10份-14份; 海藻酸鈉 2份-5份; 其中,所述葛棗獼猴桃果汁包合物通過(guò)如下方法制備得到:取已清洗的葛棗獼猴桃,檸 檬酸浸泡,用液氮攪拌處理后,榨汁,得到果汁;向果汁中加入吐溫80和亞硫酸鈉,并通入 氮?dú)猓傧蚱渲屑尤牍z酶進(jìn)行酶解;加入澄清劑,離心,取上清液與0 _環(huán)糊精與麥芽糊 精混合,超聲波處理,冷凍干燥或噴霧干燥得到凍干粉,即為果汁包合物; 所述液氮的使用量為所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的1% -3% ; 所述檸檬酸的加入量為所述葛棗獼猴桃質(zhì)量的〇. 2% -0. 3%,所述檸檬酸浸泡的時(shí)間 為 5min_10min; 所述吐溫80和亞硫酸鈉在所述果汁中的濃度均為0. 02-0. 04mg/ml; 所述氮?dú)獾耐ㄈ胨俾蕿?0_20ml/min; 所述果膠酶加入量為每克所述果汁中加入(20U-30U)的果膠酶,所述酶解的溫度為 30°C-40°C,所述酶解的時(shí)間為lh-2h; 所述澄清劑為殼聚糖,所述殼聚糖的加入量為所述果汁總質(zhì)量的1-2% ; 所述環(huán)糊精與麥芽糊精混合物中環(huán)糊精和麥芽糊精的質(zhì)量比為1 :5-1 :10 ; 所述上清液和所述環(huán)糊精與麥芽糊精混合物的質(zhì)量比為10 : (2-3); 所述超聲波處理的功率為30W-40W,時(shí)間為2-10min; 所述活性多糖混合物為權(quán)利要求4中所述多糖RZl、此2和Rz3的混合物,其中,所述多 糖RzJPRz2和Rz3的質(zhì)量比為(1_2) : (1_4) : (1_4); 所述葛棗獼猴桃多糖提取后的濾液凍干粉為將權(quán)利要求1所述步驟2)中b)所述離心 后所得的上清液合并濃縮至原體積1/10-1/20,向其中加入活性炭脫色,使活性炭的質(zhì)量分 數(shù)為1-2%,再向已脫色后的殘液中加入麥芽糊精,使麥芽糊精的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20-40%,并 冷凍干燥得到凍干粉。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的葛棗獼猴桃泡騰劑,其特征在于:所述粘合劑為聚乙烯吡咯 烷酮和聚乙二醇4000按質(zhì)量比1:1的混合物; 所述葛棗獼猴桃泡騰劑的劑型為顆粒劑、片劑、膠囊劑或口含片; 所述葛棗獼猴桃泡騰劑的劑型為泡騰片或口含片,還需向中加入1-3%的聚乙二醇 6000作為潤(rùn)滑劑,混合均勻、壓片真空包裝即可得泡騰片或口含片。
7. 權(quán)利要求5或6所述的葛棗獼猴桃泡騰劑的制備方法,包括如下步驟:將所述葛棗 獼猴桃中活性多糖混合物、碳酸氫鈉、檸檬酸、粘合劑、木糖醇、所述葛棗獼猴桃多糖提取后 的濾液凍干粉和海藻酸鈉按所述質(zhì)量份數(shù)混合、制軟材、制粒,烘干,整粒后,再加入所述質(zhì) 量份數(shù)的葛棗獼猴桃果汁包合物,即可得到葛棗獼猴桃泡騰劑。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法,其特征在于:所述制軟材之前還包括加入高濃度 乙醇為潤(rùn)濕劑的步驟,其中,所述高濃度乙醇的濃度為80-100% ; 所述制粒為制粒機(jī)濕法一步制粒; 所述烘干的溫度為40°C-45°C; 所述整粒的目數(shù)為16目-18目。
9. 權(quán)利要求4所述的三種活性多糖在制備抗氧化、抗疲勞和/或降血糖食品和/或保 健品方面的應(yīng)用。
10. 權(quán)利要求5或6所述的葛棗獼猴桃泡騰劑在制備抗氧化、抗疲勞和/或降血糖食品 和/或保健品方面的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K36/185GK104473159SQ201410696693
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月26日
【發(fā)明者】柴軍紅, 何婷婷, 張蕾, 金志民, 李然紅 申請(qǐng)人:牡丹江師范學(xué)院