一種抗結(jié)腸癌組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于制藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體而言，本發(fā)明涉及一種抗結(jié)腸癌藥物及其應(yīng)用。本發(fā)明所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，由人參，槐角，藤梨根，無(wú)花果組成，其中，所述人參為100-150份，槐角為45-80份，藤梨根為40-90份，無(wú)花果為70-110份。本發(fā)明的有益效果在于：1、通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，藥物有高效的抗癌效果。2、藥物的抗癌機(jī)制很可能是由于藥物中的有效成分抑制了L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，從而達(dá)到良好的抗癌效果。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種抗結(jié)腸癌組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于制藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體而言，本發(fā)明涉及一種抗結(jié)腸癌組合物及其應(yīng)用。【背景技術(shù)】
[0002]結(jié)腸癌是世界范圍內(nèi)第二大流行癌癥、第三大癌癥致死原因。目前其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，主要與環(huán)境因素和遺傳因素有關(guān)。外科切除術(shù)現(xiàn)在仍然是結(jié)腸癌的唯一根治方法。因?yàn)閮H僅70%的結(jié)腸癌腫瘤是可以切除的，許多的病人不得不接受輔助的化學(xué)治療。因此，尋找靶向性更好的同時(shí)毒副作用較低的抗結(jié)腸癌藥物，長(zhǎng)期以來(lái)，一直是制藥領(lǐng)域研發(fā)人員最求的目標(biāo)。
[0003]L 型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體 I (L-type amino acid transporter 1，LAT1)是近年發(fā)現(xiàn)的一種在癌細(xì)胞(包括腎癌，前列腺癌，膀胱癌，大腸癌，肺癌，乳腺癌，胰腺癌，肺癌等)表面特異性高表達(dá)的藥物跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)。LATl功能主要是向癌細(xì)胞內(nèi)運(yùn)送蛋白質(zhì)合成所需要的必需氨基酸，為癌細(xì)胞的過(guò)度分裂增殖提供充足的“營(yíng)養(yǎng)供給”，對(duì)癌細(xì)胞的快速增殖起著重要的作用。因此，某種藥物如果能夠抑制LATl的表達(dá)，就可以在一定程度上治療抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，這種藥物具有成為抗癌藥物的前景。
[0004]在篩選治療宮頸癌的藥物的過(guò)程中，皂苷類(lèi)物質(zhì)由于植物來(lái)源豐富，容易獲取，療效好，且不良反應(yīng)較低，一度成 為人們關(guān)注的目標(biāo)。人參為五加科人參屬草本植物人參的干燥根，人參的主要成分為人參皂苷，人參皂苷單體化合物具有抗腫瘤，抗疲勞，抗衰老等功效。人參皂苷Rbl和Rgl在天然植物中含量較高，而Rg3、Rh2、compand K等含量較少。許多藥理研究表明，稀有人參皂苷(如Rhl、Rh2、Rg3、Rb3等)藥效更為珍貴，在某些難治性疾病如腫瘤治療方面顯示獨(dú)特的療效，因此，對(duì)人參進(jìn)行加工處理，增加人參稀有皂苷的含量，同時(shí)篩選藥物組方配伍，形成一個(gè)有效的抗癌方劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員研究的關(guān)鍵。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種抗結(jié)腸癌組合物及其應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，由人參，槐角，藤梨根，無(wú)花果組成，其中，所述人參為100-150份，槐角為45-80份，藤梨根為40-90份，無(wú)花果為70-110份。
[0007]進(jìn)一步的，人參為120-145份，槐角為55-70份，藤梨根為60_80份，無(wú)花果為80-100 份。
[0008]進(jìn)一步的，所述人參經(jīng)過(guò)如下方法加工:將人參原材料粉碎20-40目，用人參原料50%-70%重量的水濕潤(rùn)，噴入人參原料5-20%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵24-72小時(shí)，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0009]進(jìn)一步的，所述的人參為鮮人參、干人參、紅參中的任一種或幾種。
[0010]進(jìn)一步的，一種抗結(jié)腸癌組合物和藥學(xué)上可接受的載體組成。
[0011]所說(shuō)的藥學(xué)中可以接受的輔助性成分，可包括例如在片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑或適當(dāng)形式的緩釋劑型等固體制劑形式口服藥物制劑中可以接受和使用的填充劑:如淀粉、糊精、糖粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、葡萄糖、碳酸鈣等；黏合劑:如羥丙甲纖維素、聚維酮、淀粉漿、糊精漿、糖漿、膠漿、阿拉伯膠等；賦形劑、潤(rùn)滑劑:如硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、滑石粉、微粉硅膠、液體石蠟、聚乙二醇等；軟膠囊劑中的基質(zhì):如植物油、聚乙二醇等；抗氧化劑:如亞硫酸鈉、抗壞血酸、半胱氨酸、維生素E等；在口服緩控釋制劑中的阻滯劑:如蜂蠟、巴西棕櫚蠟、氫化植物油、硬脂酸、聚維酮、乙基纖維素等；在注射制劑中允許使用的溶劑、助溶劑、穩(wěn)定劑和附加劑等。經(jīng)相應(yīng)的制劑方法和過(guò)程，即可制備得到相應(yīng)的口服或注射制劑形式的藥物。在栓劑中使用的基質(zhì):如可可豆脂、半合成甘油脂肪酸酯類(lèi)、香果脂、氫化油等；水溶性及親水性基質(zhì):如甘油明膠、聚乙二醇、吐溫-61、硬脂酸聚烴氧(40)酯、水溶性殼聚糖、泊洛沙姆等；吸收阻滯劑:如大豆卵磷脂、海藻酸、羥丙基甲級(jí)纖維素、硬脂酸、蜂蠟等；在軟膏中使用可藥用輔料或賦形劑，如黏合劑:如預(yù)膠化淀粉、羥丙基纖維素等、填料:如乳糖、蔗糖、甘露醇等；潤(rùn)滑劑:如硬脂酸、聚乙二醇、硬脂酸鎂、滑石粉、二氧化硅等、崩解劑:如淀粉、竣甲基纖維素納；潤(rùn)滑劑:如十二烷基硫酸納等。
[0012]其中，口服制劑優(yōu)選為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質(zhì)體；注射制劑優(yōu)選凍干粉針、靜脈乳劑、脂質(zhì)體、納米乳；外用制劑優(yōu)選栓劑、軟膏。
[0013]本發(fā)明還提供了上述組合物在制備抗結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用。
[0014]其中，抗結(jié)腸癌藥物優(yōu)選為用于結(jié)腸癌的含有人參的組合物。
[0015]本發(fā)明所述的藥物制備方法為:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的30-50°C的溫水浸泡l_3h，然后，加入原料重量3-5倍的水，在75-90°C提取3-5次，冷卻過(guò)濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，搖勻密封，至于陰涼通風(fēng)處保存。上述浸膏可直接作藥用，也可用于如動(dòng)物抗癌模型試驗(yàn)。
[0016]本發(fā)明的有益效果在于:1、通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，藥物有高效的抗癌效果。2、藥物的抗癌機(jī)制很可能是由于藥物中的有效成分抑制了 L型氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體I的轉(zhuǎn)運(yùn)功能，從而達(dá)到良好的抗癌效果。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0017]圖1為不同濃度抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116體外生長(zhǎng)的抑制率?！揪唧w實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，給出的實(shí)施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0019]下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法；下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為自常規(guī)生化試劑商店購(gòu)買(mǎi)得到的；下述實(shí)施例中的米根霉(根霉菌Rhizopus oryzae)購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，菌株保藏編號(hào):cgmcc3.6919,原始編號(hào):3.851。
[0020]實(shí)施例1:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為150克，槐角為45克，藤梨根為90克，無(wú)花果為110克。
[0021]人參原材料粉碎20-40目，其中，所述的人參為鮮人參,用人參原料50%重量的水濕潤(rùn)，噴入人參原料5%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵24小時(shí)，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0022]制備方法為:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的50°C的溫水浸泡lh，然后，加入原料重量5倍的水，在75°C提取3次，冷卻過(guò)濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，得到抗結(jié)腸癌組合物I號(hào)。
[0023]實(shí)施例2:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為100克，槐角為80克，藤梨根為40克，無(wú)花果為70克。
[0024]人參原材料粉碎20-40目，人參為干人參與紅參混合物,重量比為1:1,用人參原料70%重量的水濕潤(rùn)，噴入人參原料20%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵72小時(shí)，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0025]制備方法為:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的30°C的溫水浸泡3h，然后，加入原料重量3倍的水，在80°C提取5次，冷卻過(guò)濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，得到抗結(jié)腸癌組合物2號(hào)。
[0026]實(shí)施例3:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為145克，槐角為65克，藤梨根為78克，無(wú)花果為95克。
[0027]人參原材料粉碎20-40目，所述人參為紅參，用人參原料67%重量的水濕潤(rùn)，噴入人參原料17%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵38小時(shí)，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0028] 制備方法為:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的44°C的溫水浸泡2.5h，然后，加入原料重量4倍的水，在90°C提取4次，冷卻過(guò)濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，搖勻密封，得到抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)。
[0029]實(shí)施例4:
在本實(shí)施例中，通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明了組合物在抗結(jié)腸癌方面具有良好的效果。
[0030]1.材料與方法
1.1受試藥品
抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)。
[0031]1.2細(xì)胞株 結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116。
[0032]1.3主要試劑
DMEM、RPMI1640、F12K、McCoy’ s 5A培養(yǎng)基購(gòu)自Hycelone公司和中科邁晨(北京)科技有限公司，胎牛血清(FBS)、胰酶購(gòu)自Gibco公司，PBS粉末購(gòu)自Sigma公司，100X青鏈霉素溶液購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司，MTS —步法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒(Promega)。
[0033]1.4 儀器
Zenyth 1100多功能掃描儀:奧地利Anthos公司出品；IC 1000 Countstar全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀:上海睿鈺生物科技有限公司；HFsafe生物安全柜:力康生物醫(yī)療科技控股有限公司；HERAcell 150i CO2培養(yǎng)箱:Thermo Scientific公司；LD5_2A低速離心機(jī):北京醫(yī)用離心機(jī)廠。
[0034]1.5實(shí)驗(yàn)方法
1.5.1人癌細(xì)胞的體外培養(yǎng)與鋪板
上述人源癌細(xì)胞用含10%FBS和青鏈霉素的DMEM/RPMI1640/F12K/McCoy’ S 5A培養(yǎng)基于37°C、5%C02、95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)、傳代，待細(xì)胞生長(zhǎng)至融合、于超凈臺(tái)內(nèi)用胰酶將貼壁細(xì)胞進(jìn)行消化，以培養(yǎng)基混懸成104~105cells/ml的細(xì)胞懸液，鋪于96孔板，每孔鋪細(xì)胞懸液100μΙ，繼續(xù)培養(yǎng)24 h。
[0035]1.5.2藥物配制與96孔板投藥
1.5.2.1抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)
精密稱(chēng)取抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)600mg，以IOml的DPBS溶解后離心12000rpm 40min,取上清液經(jīng)0.22Mffl的微孔濾膜除菌過(guò)濾后再以培養(yǎng)基逐級(jí)稀釋成逐級(jí)稀釋成30、15、7.5、
3.75、1.875,0.94,0.47mg/ml的溶液，投于96孔板，每孔50μ1，使孔內(nèi)的終濃度分別為10、
5、2.5、1.25,0.63,0.31和0.15mg/kg,對(duì)照孔投與同體積的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h。
[0036]1.5.3 MTT 測(cè)定
投藥48 h后將MTS —步法細(xì)胞活力檢測(cè)試劑盒中的試劑，每孔加入20 μ I，放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)1~3h，應(yīng)用熒光掃描儀在492nm處測(cè)定每孔的OD值，對(duì)每孔的存活細(xì)胞產(chǎn)生的可溶性甲瓚的顏色進(jìn)行測(cè)定。
[0037]1.5.4結(jié)果計(jì)算
根據(jù)每孔的OD值，按下列公式計(jì)算對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率:
抑制率(％)=(對(duì)照組平均OD值-給藥組平均OD值)/對(duì)照組平均OD值X 100%
2.結(jié)果
2.1抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)對(duì)癌細(xì)胞的體外生長(zhǎng)抑制作用
試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116在體外生長(zhǎng)過(guò)程中受到不同程度的抑制，抑制率約70.28%以上。提取物粉末的抑制濃度為0.15~10mg/ml，HCTl 16可見(jiàn)3個(gè)濃度以上的劑量依賴關(guān)系(見(jiàn)表1)。
[0038]3.結(jié)論
抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)對(duì)人源結(jié)腸癌細(xì)胞系的體外生長(zhǎng)具有一定抑制作用。
[0039]表1抗結(jié)腸癌組合物3號(hào)對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞的體外生長(zhǎng)抑制作用
【權(quán)利要求】
1.一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于，由人參，槐角，藤梨根，無(wú)花果組成，其中，所述人參為100-150份，槐角為45-80份，藤梨根為40-90份，無(wú)花果為70-110份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于，人參為120-145份，槐角為55-70份，藤梨根為60-80份，無(wú)花果為80-100份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于，所述人參經(jīng)過(guò)如下方法加工:將人參原材料粉碎20-40目，用人參原料50%-70%重量的水濕潤(rùn)，噴入人參原料5-20%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵24-72小時(shí)，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng) 所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于，所述的人參為鮮人參、干人參、紅參中的任一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于和藥學(xué)上可接受的載體組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于，口服制劑可以為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質(zhì)體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)所述的一種抗結(jié)腸癌組合物，其特征在于注射用制劑可以為凍干粉針、注射用靜脈乳劑、注射劑、脂質(zhì)體、納米乳、輸液；外用制劑可以為栓劑、軟膏。
8.—種如權(quán)利要求1所述的抗結(jié)腸癌組合物作為有效成分在治療抗結(jié)腸癌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104000880SQ201410239670
【公開(kāi)日】2014年8月27日 申請(qǐng)日期:2014年5月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月30日
【發(fā)明者】金鑫 申請(qǐng)人:金鑫