一種絞股藍(lán)提取物及其真菌轉(zhuǎn)化制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種絞股藍(lán)提取物及其真菌轉(zhuǎn)化制備方法，該提取物的制備方法是：取絞股藍(lán)乙醇提取物，在綠色木霉、分枝犁頭霉和黑曲霉真菌培養(yǎng)基27-30℃條件進(jìn)行發(fā)酵1-6天，將發(fā)酵后的絞股藍(lán)總提物冷凍干燥，用8-10倍量(v／w，mL／g)的80％乙醇超聲提取2-4次，每次20-40min。將發(fā)酵絞股藍(lán)乙醇提取液減壓濃縮，干燥得到本發(fā)明所述的絞股藍(lán)提取物。通過采用微生物轉(zhuǎn)化的方法制備的絞股藍(lán)提取物中活性成分的含量明顯提高。
【專利說(shuō)明】一種絞股藍(lán)提取物及其真菌轉(zhuǎn)化制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種富含達(dá)木林A、達(dá)木林B、gypenoside L和gypenoside LI的絞股藍(lán)(Gynostemmapentaphyllum)提取物，以及該提取物的真菌轉(zhuǎn)化制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]皂苷類化合物是以C30骨架作為母核的糖苷，廣泛存在于植物界中。根據(jù)碳骨架不同可分為三萜皂苷和留體皂苷[I]。其中，三萜皂苷主要存在于五加科、豆科、遠(yuǎn)志科和葫蘆科，留體皂苷主要存在于薯蕷科、百合科和玄參科。此外，海星、海參等海洋生物中也存在皂苷類化合物。皂苷類成分具有復(fù)雜的物理化學(xué)性質(zhì)(如具有發(fā)泡和乳化作用)，因而也具有廣泛的藥理活性，如抗腫瘤、抗炎、抗微生物、抗糖尿病、抗氧化、免疫促進(jìn)以及心血管和神經(jīng)保護(hù)等作用[2-7]。
[0003]皂苷具有許多不同的生物活性，如人參皂苷Rbl在C3和C20位均連有糖基，具有保護(hù)神經(jīng)[8]、改善記憶作用[9]。而人參皂苷Rg3和Rh2，它們只在C3位連有糖基，具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性[10，11]。前期研究表明，熱處理絞股藍(lán)產(chǎn)物中分離得到的絞股藍(lán)皂苷gypenoside L、gypenoside L1、damulin A和damulin B具有較強(qiáng)的抑制非小細(xì)胞肺癌增殖作用[12]。但這四個(gè)化合物在絞股藍(lán)原植物中含量甚微。因此，對(duì)于這些含量低的皂苷類活性成分的合理轉(zhuǎn)化和結(jié)構(gòu)修飾已成為當(dāng)今藥物研究的一個(gè)熱點(diǎn)。
[0004]絞股藍(lán)為葫蘆科(Cucurbitaceae)絞股藍(lán)屬(Gynostemma)絞股藍(lán)GynostemmapentaphyIIum(Thunb.)Makino的全草[13],具有清熱解毒，止咳祛痰等功能。由于絞股藍(lán)中含有與人參相似的達(dá)瑪烷類皂苷，又被冠予“南方人參”、“第二人參”的美譽(yù)
[14]。`
[0005]利用微生物對(duì)有機(jī)化合物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化是獲得化學(xué)合成方法難以得到的新類型結(jié)構(gòu)的有效方法之一，微生物對(duì)三萜類化合物的區(qū)域選擇性和立體選擇性轉(zhuǎn)化已被廣泛研究[15，16]。參考文獻(xiàn):
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【發(fā)明內(nèi)容】

[0022]本發(fā)明的目的在于提出一種富含達(dá)木林A(damulin A)、達(dá)木林B (damulin B)、gypenoside L和gypenoside LI的絞股藍(lán)提取物，該提取物的制備方法，以及該提取物在制備治療腫瘤藥物中的用途。通過釆用真菌轉(zhuǎn)化的方法制備的絞股藍(lán)提取物中抗腫瘤活性成分的含量明顯提高，進(jìn)而`增強(qiáng)了本發(fā)明的絞股藍(lán)提取物治療腫瘤的效果。
[0023]本發(fā)明的絞股藍(lán)提取物中含有以下化合物:
[0024]
【權(quán)利要求】
1.一種絞股藍(lán)提取物，其特征在于，采用微生物發(fā)酵的方法制備得到，所述的微生物為真菌。
2.—種絞股藍(lán)提取物，其特征在于，所述的絞股藍(lán)提取物的制備方法包括以下步驟:取絞股藍(lán)乙醇提取物，在真菌培養(yǎng)基27-31°C條件進(jìn)行發(fā)酵1-10天，將發(fā)酵后的絞股藍(lán)總提物用等體積正丁醇萃取1-6次，減壓濃縮，干燥得到絞股藍(lán)提取物，所述的真菌選自綠色木霉、分枝犁頭霉和黑曲霉；所述的絞股藍(lán)提取物中含有以下化合物:
3.如權(quán)利要求2所述的絞股藍(lán)提取物，其特征在于，所述的絞股藍(lán)提取物的制備方法包括以下步驟:取絞股藍(lán)乙醇提取物，在真菌培養(yǎng)基28-30°C條件進(jìn)行發(fā)酵2-8天，將發(fā)酵后的絞股藍(lán)總提物用等體積正丁醇萃取2-4次，減壓濃縮，干燥。
4.如權(quán)利要求2所述的絞股藍(lán)提取物，其特征在于，所述的絞股藍(lán)提取物的制備方法包括以下步驟:取絞股藍(lán)乙醇提取物，在真菌培養(yǎng)基28°C條件進(jìn)行發(fā)酵7天，將發(fā)酵后的絞股藍(lán)總提物用等體積正丁醇萃取3次，減壓濃縮，干燥。
5.如權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的絞股藍(lán)提取物，其特征在于，所述的絞股藍(lán)乙醇提取物的制備方法為:取絞股藍(lán)用5-10倍量(V / w,mL / g)的60-95%乙醇回流提取1_8次，每次l-5h，濃縮即得。
6.如權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的絞股藍(lán)提取物，其特征在于，所述的絞股藍(lán)乙醇提取物的制備方法為:取絞股藍(lán)用8倍量(V / w, mL / g)的80%乙醇回流提取3次，每次2h，濃縮即得。
7.如權(quán)利要求2-4任一項(xiàng)所述的絞股藍(lán)提取物，其特征在于，所述化合物占絞股藍(lán)提取物的重量比為:damulin A18_30mg / g、damulin Β5.5_30mg/g、gypenoside L5_20mg /g、gypenosideLI2.5-lOmg / g。
8.權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)所述的絞股藍(lán)提取物在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求8 所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的癌癥選自:肺癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌或白血病。
【文檔編號(hào)】A61P35/02GK103720740SQ201410019158
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2014年1月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月16日
【發(fā)明者】樸香蘭, 金玉蘭, 曲田麗, 劉慧敏 申請(qǐng)人:中央民族大學(xué)