一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其由重組人生長(zhǎng)激素、荷葉、熟地黃、菟絲子、黃柏及其他保護(hù)劑輔料組成，各中藥原料經(jīng)預(yù)提取，與重組人生長(zhǎng)激素凍干粉混勻制成膠囊得成品。本發(fā)明具有作用時(shí)間長(zhǎng)，生物利用度高，工藝科學(xué)，易推廣等優(yōu)點(diǎn)，且產(chǎn)品可有效促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)。
【專利說明】一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]人在幼年時(shí)，如果生長(zhǎng)激素分泌不足，會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，身體長(zhǎng)得特別矮小，稱“侏儒癥”，對(duì)侏儒癥應(yīng)盡早給予生長(zhǎng)激素治療。人生長(zhǎng)激素是由腦垂體前葉含有嗜酸性粒細(xì)胞所分泌的，由191個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的單一肽鏈的激素，其基本功能是刺激機(jī)體組織的發(fā)育，促進(jìn)人體的骨骼，軟骨和組織的生長(zhǎng)，生長(zhǎng)激素對(duì)中間代謝及能量代謝也有影響，具體可促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，增強(qiáng)對(duì)鈉、鉀、鈣、磷、硫等重要元素的攝取與利用，同時(shí)通過抑制糖的消耗，加速脂肪分解，使能量來源由糖代謝轉(zhuǎn)向脂肪代謝。早在二十世紀(jì)八十年代，由于生長(zhǎng)激素來源稀少，導(dǎo)致其未能得到廣泛應(yīng)用。
[0003]近年來科學(xué)家已用基因工程方法將人類生長(zhǎng)激素基因從染色體DNA鏈上分離出來，重組到質(zhì)粒上，并用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá)，依靠大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)。rhGH的氨基酸含量、空間構(gòu)象及序列與人生長(zhǎng)激素完全相同，具有與人體內(nèi)源性生長(zhǎng)激素等同的生物學(xué)作用:刺激骨骺端軟骨細(xì)胞分化、增殖，刺激軟骨基質(zhì)細(xì)胞增長(zhǎng)，刺激成骨細(xì)胞分化、增殖，引起線性生長(zhǎng)加速及骨骼變寬；促進(jìn)全身蛋白質(zhì)合成，糾正手術(shù)等創(chuàng)傷后的負(fù)氮平衡狀態(tài)，糾正重度感染及肝硬化等所致低蛋白血癥；刺激免疫球蛋白合成，刺激淋巴樣組織、巨噬細(xì)胞 和淋巴細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)抗感染能力；刺激燒傷創(chuàng)面及手術(shù)切口膠原體細(xì)胞合成纖維細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞分裂增殖，加速傷口愈合；促進(jìn)心肌蛋白質(zhì)合成，增加心肌收縮力，降低心肌耗氧量，調(diào)節(jié)脂肪代謝，降低血清膽固醇、低密度脂蛋白的水平；補(bǔ)充生長(zhǎng)激素分泌不足或缺乏，調(diào)節(jié)成人的脂肪代謝、骨代謝、心腎功能。生長(zhǎng)激素的臨床應(yīng)用已有近半個(gè)世紀(jì)，大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究表明生長(zhǎng)激素療效確切，副作用極少。但其在水溶液中不穩(wěn)定，易氧化、脫酰胺、聚合等，從而導(dǎo)致生物活性下降甚至喪失。重組人生長(zhǎng)激素(rhGH)受物理或化學(xué)因素的影響很大，在外界條件發(fā)生變化時(shí)，重組人生長(zhǎng)激素的性質(zhì)常有所改變，因此會(huì)表現(xiàn)出不穩(wěn)定的性質(zhì)。人們把多肽和蛋白質(zhì)的不穩(wěn)定性分為兩種:即物理不穩(wěn)定性和化學(xué)不穩(wěn)定性。提高重組人生長(zhǎng)激素穩(wěn)定性的途徑:1)聚乙二醇(PEG)修飾；2)使用輔料和添加劑；3)真空冷凍干燥技術(shù)；因而防止氧化、防止脫酰胺、防止聚合是重組人生長(zhǎng)激素制劑研究的重要課題，在加工、儲(chǔ)運(yùn)過程中保證重組人生長(zhǎng)激素的質(zhì)量和穩(wěn)定性是非常必要的。
[0004]冷凍干燥(簡(jiǎn)稱凍干)是將需要干燥的藥物溶液預(yù)先凍結(jié)成固體，然后在低溫低壓條件下，從凍結(jié)狀態(tài)不經(jīng)過液態(tài)而直接升華除去水分的一種干燥方法。由于整個(gè)操作過程都處于低溫狀態(tài)，故這種方法尤其適合不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)藥物制劑的制備，凍干后的蛋白質(zhì)藥物呈疏松狀餅塊樣，不僅有利于保存，而且有利于蛋白質(zhì)藥物重溶后的復(fù)性。然而凍干過程是一個(gè)復(fù)雜的相變過程，在凍結(jié)、冷融、干燥和儲(chǔ)存過程中，存在著多種誘導(dǎo)藥品中蛋白質(zhì)變性的因素，故常需使用一些保護(hù)劑來穩(wěn)定處方中的蛋白質(zhì)。優(yōu)良的保護(hù)劑不僅能夠在整個(gè)凍干過程中對(duì)其起到良好的保護(hù)作用，而且能夠?qū)Τ善穬?chǔ)藏期內(nèi)蛋白質(zhì)藥物的變性起到抑制作用，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)藥物在儲(chǔ)存期的變性率往往比整個(gè)凍干過程中的變性率要大，然而多數(shù)在溶液中很有效的蛋白質(zhì)保護(hù)劑對(duì)干燥態(tài)的蛋白質(zhì)并無保護(hù)作用，甚至還會(huì)加速蛋白質(zhì)藥物的不穩(wěn)定化。另外凍干保護(hù)劑的種類繁多，機(jī)制復(fù)雜，而每類蛋白質(zhì)藥物特性也千差萬別，因而只有依據(jù)藥物本身特性合理的選用這些輔料，并配合科學(xué)的加工工藝，方可制備出高質(zhì)量的凍干產(chǎn)品。由于rhGH的理化性質(zhì)，它在水溶液中很不穩(wěn)定，雜質(zhì)的產(chǎn)生使藥物的生物活性有了很大的損失。凍干制劑在患者使用之前需要先溶解為液態(tài)，這就需要在凍干配方中有一種能夠保證藥物在溶解后的穩(wěn)定的緩沖體系，為了保證凍干前蛋白生物活性的穩(wěn)定，以及蛋白類藥物凍干復(fù)水后，得以保持蛋白的生物活性，因此需要研制出穩(wěn)定的液體制劑。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，目的是提供一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其將經(jīng)保護(hù)液處理后的重組人生長(zhǎng)激素凍干粉與中藥荷葉、熟地黃、菟絲子、黃柏復(fù)配，增強(qiáng)其保健促生長(zhǎng)的功效的同時(shí)，延長(zhǎng)產(chǎn)品作用時(shí)間，并確定了保護(hù)劑的配方和用量。
[0006]本發(fā)明的另一目的是提供該凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊的制備方法，該方法先分別對(duì)原料進(jìn)行預(yù)提取，將重組人生長(zhǎng)激素進(jìn)行保護(hù)劑處理，并凍干處理，再將各組分混勻制得膠囊，工藝嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)，易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化推廣。
[0007]實(shí)現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案是:
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素10-14份、荷葉12-17份、熟地黃9-13份、菟絲子8_15份、黃柏7_12份、海藻糖0.5-0.8份、甘露醇0.7-1.1份、甘氨酸0.3-0.5份、酪氨酸0.2-0.4份、甘油0.3-0.6份、維生素E0.6-0.9份、十二烷基硫酸鈉0.1-0.3份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量16-23倍量的體積分?jǐn)?shù)為65-75%的甲醇，于50-60°C水浴中提取0.5-1.5h，再于35-45W微波中提取5_9min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；
混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量13-16倍的體積分?jǐn)?shù)80-90%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露`醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.24-0.28μπι濾膜除菌后調(diào)PH至
5.5-6.5，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至
6.0-6.8，用0.23-0.25 μ m濾膜過濾除菌，再于_36至_42°C條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥14-18h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0008]本發(fā)明使用方法:每日服用1-2粒。
[0009]本發(fā)明中中藥組分的功效如下:
荷葉:味苦，性平，歸肝、脾、胃經(jīng)，有清熱解暑、生發(fā)清陽(yáng)、涼血止血的功用。鮮品、干品均可入藥，常用于治療暑熱煩渴、暑濕泄瀉、脾虛泄瀉以及血熱引起的各種出血癥；
熟地黃:熟地黃，中藥名，又名熟地。為玄參科植物地黃的塊根經(jīng)加工炮制而成。其功效主治:補(bǔ)血滋潤(rùn)；益精填髓。用于血虛萎黃；眩暈心悸；月經(jīng)不調(diào)；崩不止；肝腎陰虧；潮熱盜汗；遺精陽(yáng)痿；不育不孕；月經(jīng)不調(diào)；崩漏下血；腰膝酸軟；耳鳴耳聾；頭目昏花；須發(fā)早白；消渴；便秘；腎虛喘促。
[0010]菟絲子:為雙子葉植物藥旋花科植物菟絲子、南方菟絲子、金燈藤等的種子，具有補(bǔ)腎益精、養(yǎng)肝明目、固胎止泄之功效。
[0011]黃柏:其性寒、味苦，具清熱燥濕、瀉火解毒等功效，常用于濕熱瀉痢、黃疸、白帶以及熱痹、熱淋等癥?，F(xiàn)代研究表明，黃柏含小蘗堿、黃柏酮等主要成分，有抗菌、收斂、消炎的等作用。
[0012]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):將經(jīng)保護(hù)液處理后的重組人生長(zhǎng)激素凍干粉與中藥荷葉、熟地黃、菟絲子、黃柏復(fù)配，增強(qiáng)其保健促生長(zhǎng)的功效的同時(shí)，延長(zhǎng)產(chǎn)品作用時(shí)間，確定了重組人生長(zhǎng)激素保護(hù)劑 的配方和用量，可有效保證重組人生長(zhǎng)激素生物活性的穩(wěn)定；并將重組人生長(zhǎng)激素凍干粉與中藥復(fù)配，確保產(chǎn)品療效的同時(shí)，延長(zhǎng)產(chǎn)品促生長(zhǎng)保健作用時(shí)間；同時(shí)本發(fā)明確定了科學(xué)合理的工藝步驟及工藝參數(shù)，為工業(yè)化推廣奠定了基礎(chǔ)。
具體實(shí)施例
[0013]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，以助于理解本發(fā)明的內(nèi)容。
[0014]實(shí)施例1:
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素13份、荷葉15份、熟地黃11份、菟絲子12份、黃柏9份、海藻糖0.6份、甘露醇0.9份、甘氨酸0.4份、酪氨酸0.3份、甘油0.5份、維生素E 0.7份、十二烷基硫酸鈉0.2份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量21倍量的體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇，于55°C水浴中提取1.0h，再于40W微波中提取7min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；
混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量15倍的體積分?jǐn)?shù)85%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.26 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至6.0，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.4，用0.24 μ m濾膜過濾除菌，再于-39°c條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥16h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0015]實(shí)施例2
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素10份、荷葉12份、熟地黃9份、菟絲子8份、黃柏7份、海藻糖0.5份、甘露醇0.7份、甘氨酸0.3份、酪氨酸0.2份、甘油0.3份、維生素E 0.6份、十二烷基硫酸鈉0.1份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量16倍量的體積分?jǐn)?shù)為65%的甲醇，于50°C水浴中提取0.5h，再于35W微波中提取5min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；
混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量13倍的體積分?jǐn)?shù)80%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.24 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至5.5，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.0，用0.23 μ m濾膜過濾除菌， 再于-36°c條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥14h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0016]實(shí)施例3
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素14份、荷葉17份、熟地黃13份、菟絲子15份、黃柏12份、海藻糖0.8份、甘露醇1.1份、甘氨酸0.5份、酪氨酸0.4份、甘油0.6份、維生素E 0.9份、十二烷基硫酸鈉0.3份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量23倍量的體積分?jǐn)?shù)為75%的甲醇，于60°C水浴中提取1.5h，再于45W微波中提取9min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；
混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量16倍的體積分?jǐn)?shù)90%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.28 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至6.5，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.8，用0.25 μ m濾膜過濾除菌，再于-42°c條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥18h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0017]實(shí)施例4
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素7份、荷葉10份、熟地黃15份、菟絲子6份、黃柏5份、海藻糖0.9份、甘露醇0.4份、甘氨酸0.2份、酪氨酸0.2份、甘油0.8份、維生素El.2份、十二烷基硫酸鈉0.1份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量14倍量的體積分?jǐn)?shù)為55%的甲醇，于40°C水浴中提取0.5h，再于30W`微波中提取5min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；
混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量11倍的體積分?jǐn)?shù)70%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.22 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至5.5，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.0，用
0.21 μ m濾膜過濾除菌，再于_45°C條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥12h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0018]實(shí)施例5
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素16份、荷葉18份、熟地黃6份、菟絲子5份、黃柏13份、海藻糖0.9份、甘露醇0.4份、甘氨酸
0.6份、酪氨酸0.5份、甘油0.7份、維生素E 1.3份、十二烷基硫酸鈉0.4份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量25倍量的體積分?jǐn)?shù)為85%的甲醇，于65°C水浴中提取2.0h，再于50W微波中提取lOmin，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；
混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量18倍的體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.30 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至6.5，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.8，用0.27 μ m濾膜過濾除菌，再于-30°c條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥19h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0019]對(duì)比例1
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素13份、知母8份、桑寄生6份、荷葉15份、熟地黃11份、菟絲子12份、黃柏9份、海藻糖0.6份、甘露醇0.9份、甘氨酸0.4份、酪氨酸0.3份、甘油0.5份、維生素E 0.7份、十二烷基硫酸鈉0.2份；
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量21倍量的體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇，于55°C水浴中提取1.0h，再于40W微波中提取7min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用；混合原料初提取:將知母、桑寄生、熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到五者總質(zhì)量15倍的體積分?jǐn)?shù)85%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；
保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.26 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至6.0，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.4，用
0.24 μ m濾膜過濾除菌，再于_39°C條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥16h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0020]對(duì)比例2
一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素13份、甘露醇1.5份、甘氨酸0.4份、甘油0.5份、維生素E 0.7份、十二烷基硫酸鈉0.2份；一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，具體制備方法如下:
保護(hù)液的制備:將甘露醇、甘氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.26 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至6.0，得保護(hù)液；
重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.4，用
0.24 μ m濾膜過濾除菌，再于-39°c條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥16h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；
混勻制膠囊:將重組人生長(zhǎng)激素凍干粉置于混合機(jī)，混勻得粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
[0021]試驗(yàn)例:凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊促生長(zhǎng)功效研究
試驗(yàn)對(duì)象:平均年齡10.0±2.2歲兒童70個(gè)；身材矮小，身高低于同年齡、同性別正常兒童平均數(shù)2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差；生長(zhǎng)緩慢，生長(zhǎng)速率< 5cm/年；智力正常，與年齡相稱；排除先天遺傳代謝性疾病、染色體異常等其他慢性疾?。?br> 治療方法:每天睡前服用實(shí)施例1-5，對(duì)比例1-2制備的產(chǎn)品2粒；
指標(biāo)的變化采用重復(fù)測(cè)量的方差分析；
計(jì)算以下指標(biāo):
體質(zhì)指數(shù)(BMI)=體重(Wt) /身高(Ht) 2 (單位kg/m2)。
[0022]生長(zhǎng)速率(growth velosity, GV)計(jì)算公式為:GV=(治療后的身高-起始治療時(shí)的身高)/時(shí)間間隔(月)X 12，單位為cm/y。
[0023]按照CA計(jì)算的身高標(biāo)準(zhǔn)差積分(HtSDS):依據(jù)2005年九省/市兒童體格發(fā)育調(diào)查數(shù)據(jù)，計(jì)算公式為:HtSDS=(患兒身高-同性別、同年齡正常兒童身高的均值)/同性別、同年齡正常兒童身高的標(biāo)準(zhǔn)差(SD)。結(jié)果見表1:
血清標(biāo)本收集:收集70例經(jīng)過凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊治療的患兒治療前，治療6月后全血2ml (均為禁食8小時(shí)以上空腹血)，經(jīng)離心機(jī)3000轉(zhuǎn)/分鐘離心得到血清。-20°C冰箱保存?zhèn)溆?，進(jìn)行IGF-1，IGFBP-3的檢測(cè)，結(jié)果見表2:
表1試驗(yàn)前后生長(zhǎng)指標(biāo)的變化
【權(quán)利要求】
1.一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其特征在于:由下述原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素、荷葉、熟地黃、菟絲子、黃柏、海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其特征在于:由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素10-14份、荷葉12-17份、熟地黃9-13份、菟絲子8-15份、黃柏7-12份、海藻糖0.5-0.8份、甘露醇0.7-1.1份、甘氨酸0.3-0.5份、酪氨酸0.2-0.4份、甘油0.3-0.6份、維生素E 0.6-0.9份、十二烷基硫酸鈉0.1-0.3份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其特征在于:制備方法為:荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量16-23倍量的體積分?jǐn)?shù)為65-75%的甲醇，于50-60°C水浴中提取0.5-1.5h，再于35-45W微波中提取5_9min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用； 混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量13-16倍的體積分?jǐn)?shù)80-90%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用；保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.24-0.28μπι濾膜除菌后調(diào)PH至5.5-6.5，得保護(hù)液； 重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.0-6.8，用0.23-0.25 μ m濾膜過濾除菌，再于_36至_42°C條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥14-18h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉；` 混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成品。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其特征在于:由下述重量配比的原輔料制成:重組人生長(zhǎng)激素13份、荷葉15份、熟地黃11份、菟絲子12份、黃柏9份、海藻糖0.6份、甘露醇0.9份、甘氨酸0.4份、酪氨酸0.3份、甘油0.5份、維生素E 0.7份、十二烷基硫酸納0.2份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種凍干重組人生長(zhǎng)激素膠囊，其特征在于:制備方法為:荷葉預(yù)提取:取荷葉粉碎至100目，于荷葉粉末中添加荷葉粉末質(zhì)量21倍量的體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇，于55°C水浴中提取1.0h，再于40W微波中提取7min，提取后取提取液，將提取液離心過濾得濾液，將濾液濃縮至濾液原體積1/3后真空干燥，得荷葉提取物備用； 混合原料初提取:將熟地黃、菟絲子、黃柏按上述重量配比，加入到三者總質(zhì)量15倍的體積分?jǐn)?shù)85%的乙醇中回流提取3次，合并濾液，過濾得濾液，將濾液濃縮至原體積的1/3，真空濃縮得混合提取物備用； 保護(hù)液的制備:將海藻糖、甘露醇、甘氨酸、酪氨酸、甘油、維生素E、十二烷基硫酸鈉按上述重量配比，加入到磷酸鹽緩沖液中攪拌溶解，用孔徑0.26 μ m濾膜除菌后調(diào)PH至6.0，得保護(hù)液； 重組人生長(zhǎng)激素凍干粉的制備:將重組人生長(zhǎng)激素溶解于保護(hù)液中，調(diào)節(jié)PH至6.4，用·0.24 μ m濾膜過濾除菌，再于-39°c條件下預(yù)凍10h，升至10°C真空干燥16h，得重組人生長(zhǎng)激素凍干粉； 混勻制膠囊:將荷葉提取物、混合提取物、重組人生長(zhǎng)激素凍干粉一起置于混合機(jī)，混勻得混合粉末粉碎過篩，抽檢后將混合粉末置于膠囊充填機(jī)中進(jìn)行填充，填充量為0.35g/粒，得成 品。
【文檔編號(hào)】A61K47/22GK103751769SQ201310722494
【公開日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2013年12月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月25日
【發(fā)明者】樓秀余 申請(qǐng)人:樓秀余