專利名稱：2-羥基-4-氧-2-丁烯酸類化合物及其制藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種2-羥基-4-氧-2- 丁烯酸類化合物以及藥學(xué)上可接受的鹽，作為針對PA_N靶點，抑制核酸內(nèi)切酶活性的化合物與抗流感制劑的用途，以及單獨使用或與其它活性化合物合用抗流感的制藥用途。本發(fā)明進一步涉及這些化合物的制備方法，關(guān)于通式(VIII)化合物，其充作制備式(I)化合物的中間物或前藥。
背景技術(shù)：
流感病毒屬正黏病毒科，是一種有包膜的單鏈RNA病毒，自外而內(nèi)可分為包膜、基質(zhì)蛋白(M protein)以及核心三部分。流感病毒基因組含有8個RNA片段，已知可以編碼11種病毒蛋白質(zhì)。其中，由PA、PBl和PB2這3個亞基組成的聚合酶復(fù)合體是負(fù)責(zé)病毒基因組RNA復(fù)制以及病毒mRNA轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵組分，同時由于它的高度保守性、低突變率，成為抗流感病毒藥物設(shè)計的重要靶點。PA_N蛋白是流感病毒聚合酶其中一個亞基PA的N端，是有256個氨基酸殘基構(gòu)成的，流感病毒聚合酶是高度保守的，在病毒的生活周期中聚合酶在復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程中起到重要的作用。聚合酶復(fù)合體是負(fù)責(zé)病毒基因組RNA復(fù)制以及病毒mRNA轉(zhuǎn)錄，同時由于它的高度保守性、低突變率，成為抗流感病毒藥物的重要靶點。而且很少化合物報道針對流感病毒聚合酶，而PA亞基不僅參與病毒復(fù)制過程，而且還參與病毒RNA轉(zhuǎn)錄、內(nèi)切核酸酶活性、具有蛋白酶活性以及參與病毒粒子組裝等多種病毒活動過程。文獻報道顯示，PA_N的功能最為重要。它能維持蛋白的穩(wěn)定，是RNA依賴的RNA聚合酶功能的正常發(fā)揮的提前，具有核酸內(nèi)切酶活性及蛋白酶活性等多種功能，其中核酸內(nèi)切酶的活性位點是Aspl08，Lysl34。正因為具備這些特性，核酸內(nèi)切酶可作為一個理想的靶點，用于設(shè)計、合成抑制劑作為廣譜抗流感(包括人流感和禽流感)藥物。目前針對流感類的藥物設(shè)計主要針對蛋白血凝素(Hemagglutinin, HA)和神經(jīng)氨酸酶(Neuramin1-das es, NA),以及M2離子通道為祀點。但是由于這幾個祀點都在流感病毒的外圍，并不真正制約流感病毒的轉(zhuǎn)錄復(fù)制，變異性較大，因此幾十年來，只有4個抗流感病毒藥物通過美國FDA批準(zhǔn)。PA_N作為一個全新的靶點，目前針對PA_N靶點的流感類藥物還是一塊空白，有報道的只有一些具有抑制核酸內(nèi)切酶活性的化學(xué)合成化合物以及一些中藥分離產(chǎn)物。對于化學(xué)合成的化合物，大多存在重現(xiàn)性差，合成困難等問題，另一方面中藥成分復(fù)雜多變，從單一中藥中提取的化合物可達到幾百種，抗禽流感的活性成分往往是幾十種，作用機制不明確。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種2-羥基-4-氧-2- 丁烯酸衍生物，能夠針對PA_N靶點，具有抑制核酸內(nèi)切酶，抗流感的生物活性。本發(fā)明的另一個目的是提供一種合成2-羥基-4-氧-2- 丁烯酸衍生物的方法。
本發(fā)明提供一種以PA_N靶點，通過抑制核酸內(nèi)切酶起效的藥物或藥物組合物。本發(fā)明提供一種抗流感病毒的活性成分，針對人流感和禽流感病毒的藥物或藥物組合物。本發(fā)明提供一種藥物組合物，其中包括2-羥基-4-氧-2- 丁烯酸衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及其它的活性藥物。本發(fā)明申請人通過創(chuàng)造性勞動，對現(xiàn)有的核酸內(nèi)切酶抑制劑進行深入分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計改造，優(yōu)化得到一類2-羥基-4-氧-2-丁烯酸衍生物。其結(jié)構(gòu)為通式(I)所示的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽:
權(quán)利要求
1.一種具有通式(I)結(jié)構(gòu)的化合物:
2.權(quán)利要求1所述通式(I)化合物，其特點在于:R1為叔丁氧羰基、芐基X1-C4烷基脂肪鏈、苯?；?、C1-C4烷?；涣u基或氨基取代的C1-C4烷基適素取代的C1-C4烷基，被C1-C4烷基或C1-C4烷氧基取代的芳基。
3.權(quán)利要求1所述通式(I)化合物，其特點在于:R1為叔丁氧羰基、芐基、苯酰基、C1-C4烷基脂肪鏈、C1-C4烷?；?，被羥基或氨基取代的C1-C4烷基或鹵素取代的C1-C4烷基。
4.權(quán)利要求1所 述通式(I)化合物，其特點在于:R1為叔丁氧羰基、芐基、苯酰基或C1-C4烷基脂肪鏈。
5.權(quán)利要求1所述通式(I)化合物，其特點在于:R1為叔丁氧羰基、芐基或苯?；?。
6.權(quán)利要求1-5任一項所述通式(I)化合物，其特點在于:R2為取代或未取代的苯環(huán)、聯(lián)苯基或萘基，取代的基團為C1-C4烷基，鹵代C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，羥基。
7.權(quán)利要求1-5任一項所述通式(I)化合物，其特點在于:R2為取代或未取代的苯環(huán)，取代的基團為C1-C4烷基，鹵代C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，羥基。
8.權(quán)利要求1-5任一項所述通式(I)化合物，其特點在于:R2為取代苯環(huán)，取代的基團為C1-C4烷基，鹵代C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，羥基。
9.權(quán)利要求1-5任一項所述通式(I)化合物，其特點在于:R2為未取代苯環(huán)。
10.權(quán)利要求1-9任一項所述通式(I)化合物的制備方法，其特征在于:該制備工藝包括以下步驟: A.分別將含有Rl基團的原料和式(II)化合物哌啶酸乙酯溶于親脂性有機溶劑、水和鹽的混合溶液中、加熱回流，有機溶劑萃取，干燥濃縮得式(III)化合物。
B.將新鮮配制的二異丙基氨基鋰(LDA)以及式(III)化合物溶于有機溶劑中，低溫攪拌反應(yīng)，然后加入R2-磺酰鹵，室溫下攪拌反應(yīng)，氯化銨終止反應(yīng)，有機溶劑萃取，柱層析分離，得式(IV)化合物。
C.式(IV)化合物在堿性條件下水解，有機溶劑萃取，洗滌干燥，得到式(V)化合物。
D.將式(V)化合物溶于有機溶劑中，加入N，N羰基二咪唑(⑶I)加熱攪拌，然后加入二甲羥胺鹽酸鹽攪拌，再降至室溫攪拌反應(yīng)，有機溶劑萃取，洗滌干燥，得到式(VI)化合物。
E.將格式試劑與式(VI)化合物溶于有機溶劑中，加熱回流，有機溶劑萃取，干燥，得到中間產(chǎn)物(VII)。
F.將中間產(chǎn)物(VII)與草酸二甲酯溶于有機溶劑中，加入強堿，加熱回流，倒入鹽溶液，然后有機溶劑萃取，干燥，濃縮，柱層析純化得到式(VIII)化合物。
G.將化合物(VIII)溶于有機溶劑中，加入無機酸，加熱回流，有機溶劑洗滌過濾，重結(jié)晶得最終產(chǎn)物式(I)化合物。
上述反應(yīng)中，基團R1，R2分別與通式(I)結(jié)構(gòu)中的定義相同。
11.權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于:R1選自叔丁氧羰基、芐基、苯?；?、C1-C4烷基脂肪鏈、C1-C4烷?；涣u基或氨基取代的C1-C4烷基或鹵素取代的C1-C4烷基。
12.權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于:R1選自Rl為叔丁氧羰基、芐基、苯酰基或C1-C4烷基脂肪鏈。
13.權(quán)利要求10至12任一項所述的制備方法，其特征在于:R2為取代或未取代的苯環(huán)、聯(lián)苯基或萘基，取代的基團為C1-C4烷基，鹵代C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，羥基。
14.權(quán)利要求10至12任一項所述的制備方法，其特征在于:R2為取代苯環(huán)，取代的基團為C1-C4烷基，鹵代C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，鹵素，羥基。
15.權(quán)利要求10至12任一項所述的制備方法，其特征在于:R2為未取代苯環(huán)。
16.權(quán)利要求1-9任一項所述化合物在制備治療由PA_N介導(dǎo)的疾病的藥物中的用途。
17.權(quán)利要求1-9任一項所述化合物在制備抗感冒藥物中的應(yīng)用。
18.—種藥物組合物 ，其特征在于:包含權(quán)利要求1-9任一項所述的化合物以及藥學(xué)上的輔料，制成可用于給藥的劑型。
19.權(quán)利要求18所述的藥物組合物，其特點在于:所述劑型選自片劑、泡騰劑、膠囊、注射劑、凍干粉針劑、丸劑、顆粒劑、脂質(zhì)體、貼劑、噴霧劑、吸入劑、緩釋劑、控釋劑或靶向制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種具有抗流感作用的通式(I)化合物或其藥學(xué)可接受鹽的藥物活性成分及其制備方法通式(I)上述通式(I)化合物針對PA_N靶點，直接抑制其核酸內(nèi)切酶的活性，能從根本上殺死流感病毒，用于抗流感藥物的制備用途。
文檔編號A61P31/16GK103159668SQ20111041331
公開日2013年6月19日 申請日期2011年12月12日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月12日
發(fā)明者饒子和, 楊誠, 婁智勇, 路支超, 楊猛, 王麗君, 姚偉利, 劉偉 申請人:天津市國際生物醫(yī)藥聯(lián)合研究院