專利名稱：電位滴定法測定五味子提取物中總有機酸的含量的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥成分的含量測定方法，特別涉及一種中藥組五味子提取物中總有機酸的含量
背景技術(shù)：
五味子為木蘭科植物五味子Schisandrachinen-sis (Turcz. )Baill.的干燥成熟果實，習稱北五味子。其味酸、甘，性溫，入肺、心、腎經(jīng)，收斂固澀、益氣生津、補腎寧心。用于久嗽虛喘、夢遺滑精、遺尿尿頻、久瀉不止、自汗、盜汗、津傷口渴、短氣脈虛、內(nèi)熱口渴。五味子含多種有效成分如木脂素、有機酸、揮發(fā)油、多糖，木脂素類成分可滋補肝腎、治療肝炎，琥珀酸、蘋果酸等多種有機酸具有祛痰和鎮(zhèn)咳作用，木脂素類成分檢測方法較多，但有機酸測定的文獻報道較少。本實驗采用直接電位滴定的方法測定五味子提取物中總有機酸的量，避免酸堿滴定法中有機酸提取液較深顏色對滴定終點的干擾。 本發(fā)明使用的五味子提取物為注射用益氣復脈(凍干)生產(chǎn)過程的中間產(chǎn)品，工藝為五味子藥材經(jīng)水提醇沉-氫氧化鈉調(diào)pH-凍干所得。在“調(diào)pH”時五味子中有機酸與堿反應生成鹽，所以測定提取物中有機酸時首先需要將鹽還原成酸。本發(fā)明從該五味子提取物中分離得到琥珀酸、肉桂酸、對羥基苯甲酸等有機酸，其中琥珀酸比例最大，達1%以上，所以本實驗以琥珀酸為對照品測定五味子提取物中總有機酸的含量。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明提供一種新的測定五味子提取物中總有機酸的含量的方法，該方法包括以下步驟步驟1，對照品溶液的制備稱取琥珀酸，用水溶解備用。步驟2、供試品溶液的制備取五味子提取物加水溶解，過陽離子交換樹脂用水洗脫，得到流出液和洗脫液。步驟3、取對照品溶液和供試品溶液，按照《中國藥典》(2010年版)附錄VIIIA電位滴定法進行滴定；步驟4、以所用滴定液的量計算供試品溶液中有機酸的含量。優(yōu)選的本發(fā)明的測定法包括以下步驟步驟1，對照品溶液的制備準確稱取琥珀酸76. 12mg，置IOOmL量瓶中，用水定容，
搖勻，備用。步驟2、供試品溶液的制備取五味子提取物約O. 3g，精密稱定，置離心管中，加20mL水溶解，離心(3000rpm) 5min,上清液過001*1陽離子交換樹脂(經(jīng)過酸-水-堿-水-酸-水預處理，水洗至中性)；再按上述方法提取兩次，依次上樣，流出液及水洗脫液定容至IOOmL容量瓶中，搖勻，即得。步驟3、分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液20mL，按照《中國藥典》(2010年版)附錄VIIIA電位滴定法進行滴定；步驟4、以所用滴定液的量計算供試品溶液中有機酸的含量。本發(fā)明的方法是經(jīng)過篩選獲得的，研究過程如下I.儀器和試藥I. I主要儀器HI9025便攜式PH計，EMS-10型磁力攪拌器，堿式滴定 管；AL 204型萬分之一電子分析天平，XS 105型十萬分之一電子分析天平(瑞士 METTLER公司);L550低速自動平衡離心機(湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司)。1.2試藥及試劑琥珀酸(分析純)；五味子提取物(批號20081001)； 氫氧化鈉、鹽酸、鄰苯二甲酸氫鉀、酚酞、超純水等。2.方法和結(jié)果2. I溶液的制備2. 2. I對照品溶液的制備準確稱取琥珀酸76. 12mg,置IOOmL量瓶中，用水定容，
搖勻，備用。2.1.2供試品溶液的制備取五味子提取物約O. 3g，精密稱定，置離心管中，加20mL水溶解，離心(3000rpm) 5min,上清液過001*1陽離子交換樹脂(經(jīng)過酸-水-堿-水-酸-水預處理，水洗至中性)；再按上述方法提取兩次，依次上樣，流出液及水洗脫液定容至IOOmL容量瓶中，搖勻，即得。2.2電位滴定的可行性研究2. 2. I琥珀酸對照品突躍范圍試驗準確稱取琥珀酸O. 6526g，置IOOmL量瓶中，用水定容，搖勻，精密吸取20mL，按照《中國藥典》(2010年版)附錄VIIIA電位滴定法進行滴定，并用空白校正。采用ORIGIN軟件繪制一階導數(shù)曲線(△E/AVhV。一階導數(shù)曲線最高點對應的體積即為滴定終點體積。結(jié)果見圖I。由圖可見，滴定終點突越明顯，實際消耗O. 1024mol/L NaOH滴定液為24. 9mL。由公式(Vw= 2CmYm/Cm)計算，理論消耗NaOH滴定液為21.5mL，相對誤差為I. 84%，二者相吻合。反應公式H00CH2C-CH2C00H+2Na0H— Na00CH2C_CH2C00Na+2H202. 2. 2五味子提取物突躍范圍試驗精密稱取五味子提取物約O. 3g，制備供試品溶液，準確吸取供試品溶液25mL按前述測定方法測定，五味子提取物的一階導數(shù)曲線見圖2。由圖可見，五味子提取物供試品滴定至NaOH消耗22. ImL (E = 150. 5mV)時存在一個非常明顯的滴定突躍，一階導數(shù)曲線兩邊分布較為對稱。2. 2. 3精密度試驗精密吸取琥珀酸對照品溶液IOmL 6份，加水20mL，用O. 0097mol/L的氫氧化鈉滴定液進行電位滴定，RSD為O. 81% (η = 6)，表明該方法精密度良好。2. 2. 4穩(wěn)定性試驗精密稱取五味子提取物(批號20081001)0. 8171g，按“2. I. 2”項下制備供試品溶液，定容至250mL，分別于0h、2h、4h、8h、12h、24h精密吸取25mL按前述測定方法測定，計算RSD為O. 86% (η = 6)，表明供試品溶液在24h內(nèi)基本穩(wěn)定。2. 2. 5重復性試驗精密稱取五味子提取物(批號20081001)約O. 3g，按“2. I. 2”項下制備供試品溶液，平行6份。分別精密吸取供試品溶液25mL，用O. 0097mol/L的氫氧化鈉滴定液進行電位滴定，計算RSD為I. 67% (η = 6)，表明該方法重復性良好。2.2.6加樣回收試驗精密稱取已知總有機酸含量的五味子提取物(批號20081001)約O. 15g，共6份，分別加入251. 3mg/100mL的琥珀酸對照品溶液10mL，按“2. I. 2”項下制備供試品溶液，分別精密吸取供試品溶液25mL，用O. 0097mol/L的氫氧化鈉滴定液進行電位滴定，計算回收率，結(jié)果回收率分別為 99. 79%, 103. 67%, 102. 81%, 104. 89%,98. 68%, 100. 76%，平均加樣 回收率為101. 77%，RSD 2.36%。結(jié)果表明該方法回收試驗良好。2. 3樣品含量測定精密稱取6個批次的五味子提取物各約O. 3g，按“2. I. 2”項下制備供試品溶液。分別精密吸取供試品溶液25mL，測定，結(jié)果見表I。表I.樣品總有機酸含量測定結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種五味子提取物中總有機酸的含量測定方法，其特征在于，該方法包括以下步驟 步驟I，對照品溶液的制備稱取琥珀酸，用水溶解備用。
步驟2、供試品溶液的制備取五味子提取物加水溶解，過陽離子交換樹脂用水洗脫，得到流出液和洗脫液。
步驟3、取對照品溶液和供試品溶液，按照《中國藥典》(2010年版)附錄VIIIA電位滴定法進行滴定； 步驟4、以所用滴定液的量計算供試品溶液中有機酸的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求I的含量測定方法，其特征在于，包括以下步驟 步驟1，對照品溶液的制備準確稱取琥珀酸76. 12mg，置IOOmL量瓶中，用水定容，搖勻，備用。
步驟2、供試品溶液的制備取五味子提取物約O. 3g，精密稱定，置離心管中，加20mL水溶解，離心(3000rpm)5min,上清液過001*1陽離子交換樹脂(經(jīng)過酸-水_堿-水_酸-水預處理，水洗至中性)；再按上述方法提取兩次，依次上樣，流出液及水洗脫液定容至IOOmL容量瓶中，搖勻，即得。
步驟3、分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液20mL，按照《中國藥典》(2010年版)附錄VIIIA電位滴定法進行滴定； 步驟4、以所用滴定液的量計算供試品溶液中有機酸的含量。
3.根據(jù)權(quán)利要求I的含量測定方法，其特征在于，該方法精密度良好。
4.根據(jù)權(quán)利要求I的含量測定方法，其特征在于，供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。
5.根據(jù)權(quán)利要求I的含量測定方法，其特征在于，該方法重復性良好。
6.根據(jù)權(quán)利要求I的含量測定方法，其特征在于，該方法回收試驗良好。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種電位滴定法測定五味子提取物中總有機酸的含量，該方法包括以下步驟步驟1，對照品溶液的制備稱取琥珀酸，用水溶解備用，步驟2、供試品溶液的制備取五味子提取物加水溶解，過陽離子交換樹脂用水洗脫，得到流出液和洗脫液，步驟3、取對照品溶液和供試品溶液，按照《中國藥典》(2010年版)附錄VIIIA電位滴定法進行滴定；步驟4、以所用滴定液的量計算供試品溶液中有機酸的含量。
文檔編號A61K36/57GK102759558SQ20111010904
公開日2012年10月31日 申請日期2011年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月28日
發(fā)明者葉正良, 周大錚, 張奇, 李德坤 申請人:天津天士力之驕藥業(yè)有限公司