專利名稱：抗體的配制品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗體的穩(wěn)定配制品。優(yōu)選的穩(wěn)定配制品包括25-250mg/ml抗體，10至30mM緩沖物質(zhì)，1%至15%多元醇，0. 001%至0. 05%表面活性劑以及pH從5至7. 5。本發(fā)明另外的方面特征是制備上述配制品的方法。
背景技術(shù)：
單克隆抗體(mAb)允許表征在細(xì)胞表面上表達(dá)的生理學(xué)重要的分子。“白細(xì)胞分化簇”或抗原(⑶)限定于免疫系統(tǒng)的細(xì)胞中(scholossman, S. F. et al. (1994) Immunol. Today15(3) ;98)。在淋巴樣細(xì)胞個(gè)體發(fā)育發(fā)展過程中CD在它們分化和成熟中，在細(xì)胞識(shí)別和附著的機(jī)制中，以及在免疫應(yīng)答期間在活化和增殖機(jī)制中作用的定義已經(jīng)導(dǎo)致將它們對(duì)應(yīng)的mAb用于診斷和免疫治療中，其中有前途的結(jié)果見于(Dantal, J. et al. (1991) Curr. Opin.Tmmun01 3:740)。 生物技術(shù)發(fā)展的最新進(jìn)展以足夠大量數(shù)量提供了廣泛多樣的生物學(xué)活性多肽用作藥物。然而，由于多種物理不穩(wěn)定性(包括變性以及形成可溶性或不可溶性聚集體)，以及多種化學(xué)不穩(wěn)定性(例如水解、氧化、以及脫酰胺作用)，這些多肽可能失去它們潛在的生物活性。在液體藥物配制品中這些多肽的穩(wěn)定性可能例如受多種因素影響，例如pH、離子強(qiáng)度、溫度、冷凍-融化重復(fù)循環(huán)、以及暴露于機(jī)械剪切力(例如在處理過程中發(fā)生的)。由于物理攪拌以及在溶液中以及在儲(chǔ)存小瓶中液-氣界面處多肽分子的相互作用，也可能發(fā)生聚集體形成和生物活性喪失。US20030190316涉及包含處于甘氨酸緩沖劑和/或組氨酸緩沖劑中抗體的穩(wěn)定制劑并且還提供了用于制備包含蛋白的穩(wěn)定制劑的方法，包括用一種堿性氨基酸或一種堿性氨基酸衍生物或其一種鹽來調(diào)節(jié)pH。當(dāng)已經(jīng)配制了多種液體藥物組合物以穩(wěn)定包含在其中的多肽生物活性時(shí)，對(duì)于醫(yī)學(xué)從業(yè)人員而言在液體配制品中多肽的降解不斷地產(chǎn)生問題。因此，對(duì)于包括促進(jìn)多肽組分穩(wěn)定性的生理學(xué)相容性穩(wěn)定劑的另外的藥物組合物存在需要，由此保持了它們的療效。發(fā)明目的本發(fā)明的主要目的是獲得包括抗體、緩沖劑以及一種或多種藥學(xué)上可接受賦形劑的配制品。本發(fā)明另一個(gè)目的是獲得包括一種抗體或其片段、緩沖劑以及溶解保護(hù)劑的配制品。本發(fā)明又另一個(gè)目的是獲得抗體的穩(wěn)定配制品。

發(fā)明內(nèi)容
相應(yīng)地，本發(fā)明涉及包括抗體、緩沖劑以及一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的一種配制品；包括抗體或其片段、緩沖劑或溶解保護(hù)劑的一種配制品；包括a)約25mg/ml至約250mg/ml抗體，b)提供pH5至pH7. 5的緩沖劑的一種抗體的穩(wěn)定配制品；包括a)約lOOmg/ml至約150mg/ml抗體，b)提供pH5至pH7. 5的緩沖劑，c)約0. 001%至約0. 05%非離子型表面活性劑的一種抗體的穩(wěn)定配制品；以及包括a)約100mg/ml至約150mg/ml抗體，b)提供pH5至pH7. 5的緩沖劑，c)約0. 001%至約0. 05%非離子型表面活性劑以及(d)溶解保護(hù)劑和/或冷凍保護(hù)劑的一種抗體的穩(wěn)定配制品。


圖I :在所評(píng)估的不同配制品的研究過程中pH變率。圖2 :在所評(píng)估的不同配制品的研究過程中同滲質(zhì)量摩爾濃度(mosmolality)數(shù)值。圖3 :歸一化的熒光圖顯示在不同條件下孵化的不同配制品中樣品的圖譜和\最大值是不同的。 圖4 :樣品的流體動(dòng)力學(xué)半徑分析。圖5:在40° C下孵化的樣品中電荷變異體分布。圖6:在40° C下孵化的樣品中電荷變異體分布(組氨酸海藻糖突出顯示)。圖7 :用于磷酸鹽和組氨酸基配制品的離子交換層析譜圖的重疊顯示在磷酸鹽基的配制品中具有更高的酸性變異體。圖8 :表示在40 ° C下孵化的樣品中單體％降低的圖形。圖9 :在40 ° C下通過SEC (%HMWP+%LMWP )說明降解劑增加的圖形。圖10 :在測(cè)試的四種配制品中LMWP增加。所以四種配制品遵循相同的趨勢(shì)并且數(shù)值非常相似除了該組氨酸海藻糖配制品具有比其他配制品顯著地更低的斷裂。圖11 :在測(cè)試的四種配制品中HMWP的增加趨勢(shì)。與磷酸鹽樣品相比較包含組氨酸的配制品顯示更低的聚集作用。圖12 :在不同配制品中Tlh樣品的pH變率。圖13 :反復(fù)冷凍-融化樣品的蛋白濃度。圖14 :在反復(fù)冷凍-融化之后在磷酸鹽和組氨酸中Iml樣品的SEC譜圖。圖15 :在磷酸鹽和組氨酸配制品中0. 5ml樣品的SEC譜圖比較。圖16 :在經(jīng)受反復(fù)冷凍和融化的兩種配制品中Iml樣品的SEC數(shù)據(jù)。圖17 :在經(jīng)受反復(fù)冷凍和融化的兩種配制品中0. 5ml樣品的SEC數(shù)據(jù)。圖18 lml樣品的離子交換層析譜圖的重疊顯示在磷酸鹽樣品中在40min處可能的聚集體洗脫。圖19 :0. 5ml樣品的重疊顯示在40min處在磷酸鹽樣品中聚集體洗脫，但是在組氨酸樣品中則沒有。圖20 :在磷酸鹽和組氨酸配制品中經(jīng)歷反復(fù)冷凍和融化的Iml樣品的IEX數(shù)據(jù)。圖11 :在磷酸鹽和組氨酸配制品中經(jīng)歷反復(fù)冷凍和融化的0. 5ml樣品的IEX數(shù)據(jù)。圖22 :在冷凍狀態(tài)樣品中pH變率。圖23 :在冷凍狀態(tài)穩(wěn)定性樣品中的蛋白濃度。圖24 :冷凍狀態(tài)穩(wěn)定性的SEC重疊顯示磷酸鹽聚集作用的顯著增加。圖25 :在冷凍狀態(tài)穩(wěn)定性樣品中尺寸變異體分布的SEC數(shù)據(jù)。
圖26 :冷凍狀態(tài)穩(wěn)定性樣品的IEX層析圖譜的重疊。圖27 :在磷酸鹽和組氨酸中冷凍狀態(tài)穩(wěn)定性的IEX數(shù)據(jù)。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明涉及包括抗體、緩沖劑以及一種或多種藥學(xué)上可接受賦形劑的一種配制品。
本發(fā)明涉及包括一種抗體或其片段、緩沖劑以及溶解保護(hù)劑的一種配制品。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該緩沖劑選自TRIS、磷酸鹽類、琥珀酸鹽類、檸檬酸鹽類、乙酸鹽類、咪唑類、甘氨酸、L-精氨酸、組氨酸以及它們的組合。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，該緩沖劑優(yōu)選地是組氨酸。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，該溶解保護(hù)劑選自一種多元醇或糖類。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，這些溶解保護(hù)劑在性質(zhì)上是非還原性的，例如PEG、甘油、蔗糖、海藻糖以及甘露醇。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，該配制品進(jìn)一步包括冷凍保護(hù)劑類。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，該冷凍保護(hù)劑優(yōu)選地是海藻糖。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，該配制品進(jìn)一步包括表面活性劑。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，其中表面活性劑選自包括聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80的組。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，該配制品進(jìn)一步包括填充劑(bulking agent)。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，其中填充劑選自包括甘氨酸和甘露醇的組。本發(fā)明涉及一種抗體的穩(wěn)定配制品,包括a)約25mg/ml至約250mg/ml抗體，b)提供PH5至pH7. 5的緩沖劑。本發(fā)明涉及一種抗體的穩(wěn)定配制品，包括a)約100mg/ml至約150mg/ml抗體，b)提供PH5至pH7. 5的緩沖劑；c)約0. 001%至約0. 05%非離子型表面活性劑。本發(fā)明涉及一種抗體的穩(wěn)定配制品,包括a)約100mg/ml至約150mg/ml抗體，b)提供PH5至pH7. 5的緩沖劑；c)約0. 001%至約0. 05%的非離子型表面活性劑；以及d)溶解保護(hù)劑和/或冷凍保護(hù)劑。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，該配制品是一種凍干的餅狀物或粉末。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在用于注射的無菌水或用于注射的溶菌水(bacteriolytic water)中進(jìn)一步重新構(gòu)造該配制品。本發(fā)明的主要目的是提供一種穩(wěn)定的液體藥用組合物，包括抗體、緩沖物質(zhì)、多元醇以及表面活性劑。有利地是發(fā)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的組合物的配制品產(chǎn)生在儲(chǔ)存是具有穩(wěn)定性的組合物。在存儲(chǔ)時(shí)進(jìn)行穩(wěn)定是指免疫球蛋白基本上不聚集也不降解并且保持可接受的體外和體內(nèi)活性水平。本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及制備抗體配制品的方法。本發(fā)明是針對(duì)包括作為治療活性組分的抗體的液體藥用組合物并且針對(duì)用于它們制備的方法。為了本發(fā)明的目的，就藥用組合物或配制品而言術(shù)語“液體”旨在包括術(shù)語“水性的”。如在此使用的術(shù)語“抗體”涵蓋了天然發(fā)生的(天然的)、合成的以及重組的抗體和蛋白，以及它們的生物學(xué)活性變異體(如在本文中別處限定的)?！爸委熁钚越M分”一詞是指當(dāng)將該藥用組合物施用到受試者體內(nèi)時(shí)該抗體特異性地結(jié)合到該組合物中從而在治療、預(yù)防、或診斷受試者體內(nèi)疾病或病癥方面帶來希望的治療反應(yīng)。更具體地，本發(fā)明的組合物是穩(wěn)定的液體藥用組合物，其治療活性組分包括在存儲(chǔ)期間在液體藥物配制品中正常地呈現(xiàn)聚集體形成的一種抗體?！熬奂w形成”一詞是指在多肽分子之間的一種物理相互作用，這導(dǎo)致寡聚物形成，這些寡聚體可以保持可溶性，或從溶液中沉淀的較大的可見聚集體?！按鎯?chǔ)期間”一詞是指制備后的一種液體藥用組合物或配制品不立即施用于受試者體內(nèi)。而是，在制備之后，將它包裝用于以液體形式、以冷凍狀態(tài)、或以干燥形式進(jìn)行存儲(chǔ)用于以后重新組成液體形式或適合施用到受試者體內(nèi)的其他形式。在液體藥用組合物的存儲(chǔ)期間由多肽形成聚集體可能不利地影響該多肽的生物活性，導(dǎo)致該藥用組合物療效喪失。此外，聚集體形成可能引起其他問題，例如當(dāng)使用灌注系統(tǒng)施用包含該多肽的藥用組合物時(shí)阻塞了管道、薄膜、或泵。本發(fā)明穩(wěn)定的液體藥用組合物進(jìn)一步包括一定數(shù)量的緩沖種類。這些緩沖種類主要地包括磷酸鹽或組氨酸。該配制品的緩沖種類旨在維持pH。這些磷酸鹽配制品的pH設(shè) 定為7并且組氨酸配制品的pH設(shè)定為6，因?yàn)檫@些pH位于這些緩沖種類的緩沖范圍內(nèi)。添加到本發(fā)明組合物中的表面活性劑的穩(wěn)定數(shù)量是足以抑制包含抗體的組合物中聚集體形成或混濁的數(shù)量。例如當(dāng)長(zhǎng)期存儲(chǔ)、機(jī)械攪拌、冷凍和融化時(shí)，可以發(fā)生這種聚集體形成。觀察到顯著地抑制了聚集或混濁，并且在具有表面活性劑的包含該抗體的組合物中相比于在不包含表面活性劑的可比較的配制品中混濁/聚集體形成少至少10%，優(yōu)選少至少50%、更優(yōu)選少至少70%、并且最優(yōu)選少至少90%。用320nm處吸光度進(jìn)行小瓶和包含抗體的組合物的目測(cè)檢驗(yàn)可以被監(jiān)測(cè)用于確定聚山梨醇酯80將蛋白分子保持在溶液中的能力。在缺少聚山梨醇酯80的樣品中在320nm處的吸光度(主要地由于分子在溶液中散射而產(chǎn)生的)是顯著得多的。如在此使用的“表面活性劑”被限定為涵蓋任何去污劑，該去污劑具有一個(gè)親水性區(qū)域以及一個(gè)疏水性區(qū)域，并且包括非離子型、陽離子型、陰離子型以及兩性離子型去污齊U。適當(dāng)?shù)谋砻婊钚詣┌ɡ缇垩跻蚁┟撍嚼嫣谴紗斡退狨?也稱為聚山梨醇酯80或“吐溫”80)，聚氧乙烯脫水山梨糖醇單月桂酸酯(也稱為聚山梨醇酯20，或“吐溫”20)、或N-月桂基肌氨酸。非離子型表面活性劑優(yōu)選地用于在此所述的配制品。這類非離子型表面活性劑可以選自下面表面活性劑例如聚氧單體或聚氧乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。聚山梨醇酯80優(yōu)選地用于本發(fā)明的組合物。該表面活性劑能夠以按重量計(jì)0. 01%-0. 5%的濃度存在。這些免疫球蛋白亞基多肽各自包括一個(gè)恒定區(qū)和一個(gè)可變區(qū)。在大多數(shù)種類中，重鏈可變區(qū)(或VH結(jié)構(gòu)域)和輕鏈可變區(qū)(或VL結(jié)構(gòu)域)相結(jié)合從而形成包括“互補(bǔ)決定區(qū)”(或CDR)(特異性地促成針對(duì)特定表位的抗原結(jié)合位點(diǎn)的免疫球蛋白分子的部分)的一個(gè)抗原結(jié)合域。通常地，重鏈和輕鏈各自具有三個(gè)CDR，這些CDR促使形成該免疫球蛋白的抗原結(jié)合位點(diǎn)。通常地但不是不變地，免疫球蛋白分子的“抗原結(jié)合域”由一個(gè)重鏈的可變域的至少一部分和一個(gè)輕鏈的可變域的至少一部分組成(通過二硫鍵保持在一起)。Fe區(qū)域?qū)τ诳贵w的效應(yīng)子功能是重要的。這些效應(yīng)子功能包括引發(fā)補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(⑶C)、引發(fā)細(xì)胞吞噬作用以及抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)，并且通過胞吞轉(zhuǎn)運(yùn)作用將抗體轉(zhuǎn)移穿過細(xì)胞屏障。此外，F(xiàn)e區(qū)域?qū)τ诒３址N類IgG抗體的血清半衰期是重要的(Ward andGhetie, Ther. Immunol. 2:77-94 (1995))?！獋€(gè)另外的方面，本發(fā)明提供了一種改變的抗體、或選自Fab、Fe或其一部分的功能性片段。
在一個(gè)另外的方面，本發(fā)明提供了包括本發(fā)明的一種抗體或其功能性片段連同一種藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體一起的一種藥用組合物。該組合物可以包括一種或多種緩沖種類、一種或多種多元醇、以及一種或多種表面活性劑。該組合物包括多種藥學(xué)上可接受的載體。藥學(xué)上接受的載體包括但不限于鹽水、無菌水、磷酸鹽緩沖鹽水等。其他緩沖劑類、分散劑類、以及適合遞送到病人體內(nèi)的惰性無毒性物質(zhì)可以包括在本發(fā)明的組合物中。這些組合物可以是適合給藥的溶液，并且典型地是無菌的以及不含有不希望的顆粒物質(zhì)。本發(fā)明上下文中使用的緩沖劑優(yōu)選地是磷酸鹽或組氨酸。最優(yōu)選地，本發(fā)明的配制品中使用的緩沖劑不限于乙酸鹽、琥珀酸鹽、組氨酸以及磷酸鹽，它們可以如此地或組合地使用。令人希望地，該配制品溶液的pH是在5至7. 5的范圍內(nèi)，并且該溶液的pH優(yōu)選地是在5. 5至6的范圍內(nèi)，如果必要的話，將最終pH調(diào)節(jié)到希望的水平。在本發(fā)明上下文中使用的多元醇是還原糖，它們起數(shù)種作用例如用于抗體的穩(wěn)定齊U、一種張力改性劑并且冷凍保護(hù)劑和溶解保護(hù)劑也包括在該配制品中。最優(yōu)選地，本發(fā)明配制品中使用的多元醇是非還原性糖例如蔗糖或海藻糖。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的其他藥學(xué)上可接受的賦形劑還可以形成受試者組合物的一部分。這包括例如多種填充劑并且其中填充劑是選自甘氨酸或甘露醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，該配制品的糖組分(蔗糖和海藻糖)具有多種目的糖作為抗體的穩(wěn)定劑起作用，保護(hù)它避免降解；它們是冷凍/溶解保護(hù)劑，在凍干過程期間(該凍干過程涉及冷凍和干燥兩者)這些保護(hù)劑保護(hù)該抗體；它們也是張力改性劑，其濃度可以被調(diào)節(jié)以便提供一種等滲產(chǎn)物。在皮下施用的產(chǎn)物(例如這種產(chǎn)物)中張力是顯著的，因?yàn)榈葷B產(chǎn)物能夠顯著地降低在注射位點(diǎn)處的刺痛。選擇蔗糖和海藻糖用于評(píng)估因?yàn)樗鼈儍烧叨际沁€原糖并且已經(jīng)廣泛用于穩(wěn)定蛋白。選擇該糖的濃度從而提供用于皮下給藥的等滲溶液。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，配制品篩選研究的結(jié)果表明在2-8° C下并且當(dāng)經(jīng)歷冷凍/融化時(shí)在這些配制品之間在HMWP或LMWP中未觀察到顯著差異。然而，當(dāng)在40° C下孵化時(shí)，與磷酸鹽基的配制品相比較，在包含組氨酸的緩沖劑中抗體的物理穩(wěn)定性得以改善，尤其是在聚集方面(圖11)。在組氨酸海藻糖配制品中Tlh樣品始終呈現(xiàn)最高百分比率的單體并且因此呈現(xiàn)所有四種測(cè)試配制品的最低降解物百分比。在本發(fā)明的又另一個(gè)實(shí)施方案中，在2-8° C下通過孵化抗體或在冷凍/融化下電荷變異體分布未改變。然而，在40° C下孵化該抗體在由每種配制品提供的穩(wěn)定程度方面產(chǎn)生了差異。與磷酸鹽配制品相比較，基于組氨酸的配制品又是更慢的從而積聚酸性變異體。在組氨酸配制品中，與組氨酸蔗糖相比較，組氨酸海藻糖始終呈現(xiàn)較低酸性的變異體，并且因此呈現(xiàn)更高的主峰％(圖5:在40° C下孵化的樣品中電荷變異體分布。圖6:在40° C下孵化的樣品中電荷變異體分布)。該抗體的效價(jià)/生物活性在任何配制品和/或條件中未被改變并且可與標(biāo)準(zhǔn)品比較。可以得到這個(gè)結(jié)論，因?yàn)榛钚?效價(jià)測(cè)定還沒有發(fā)展到足以在不同配制品之間進(jìn)行區(qū)別。鑒于這些基于組氨酸的配制品能夠比磷酸鹽組合物更好地保護(hù)抗體避免降解的事實(shí)，這可能是一個(gè)重要的考慮方面。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，如通過熒光光譜法以及DSC評(píng)估的抗體的構(gòu)象穩(wěn)定性在所測(cè)試的任何配制品中不經(jīng)歷顯著改變。在熒光實(shí)驗(yàn)中(圖3)在\最大值(該最大值可能指出該抗體3D構(gòu)象的改變)中沒有改變。類似地，在針對(duì)TO樣品和40° C樣品觀察到的解鏈溫度方面沒有顯著差異，這表明該抗體的不同結(jié)構(gòu)域仍然以許多與研究起始相同的方式進(jìn)行去折疊。在下面實(shí)例中對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步限定。應(yīng)當(dāng)理解的是這些實(shí)例，雖然指示本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，是僅通過說明的方式給出的。從上面討論和這些實(shí)例中，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以確定本發(fā)明的本質(zhì)特征，并且不偏離其精神和范圍，可以對(duì)本發(fā)明做出多種改變和變更以使它適應(yīng)多種用途和條件。從下面實(shí)例可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以容易理解的是這些實(shí)例僅是用作本發(fā)明的說明，本發(fā)明限定于此后隨附的權(quán)利要求中。 通過下面實(shí)例和圖形進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明。然而，這是實(shí)例不應(yīng)解釋成限制本發(fā)明的范圍。下面的實(shí)例代表本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案。
具體實(shí)施例方式A.可以用下面方式制備包含mAB的配制品。通過使用正切流動(dòng)過濾(TFF)或UF/DF將純化的抗體濃縮到希望的高濃度并且隨后將緩沖劑更換成配制品緩沖劑。通過使用正切流動(dòng)過濾(TFF)或UF/DF將純化的抗體濃縮到20mg/ml至30mg/ml之間，并且隨后將緩沖劑更換成配制品緩沖劑。然后使這種樣品經(jīng)歷冷凍干燥，并且一旦凍干，在WFI的適當(dāng)體積中重新組成餅狀物從而實(shí)現(xiàn)希望的最終藥品濃度。將原料藥物質(zhì)凍干，并且然后溶于配制品緩沖劑中至需要的濃度。使用柱層析技術(shù)(例如離子交換層析法、親和層析法或疏水性相互作用層析法)將抗體濃縮至需要的高濃度。B.水性配制品的化學(xué)穩(wěn)定性在2-8° C下孵化的樣品和經(jīng)受冷凍-融化應(yīng)激的那些樣品未顯示任何變異性(通過離子交換)。僅在40° C下孵化的樣品中觀察到降解的差異。在40° C下孵化的樣品的離子交換層析清楚地顯示與磷酸鹽基的配制品相比較，在組氨酸配制品中酸性變異體以較小程度增加。在組氨酸配制品中，與組氨酸蔗糖配制品相比較，包含海藻糖的配制品具有較低的酸性變異體群體。因此，組氨酸海藻糖是優(yōu)異的配制品(通過離子交換層析法)。通過SEC，在2-8° C下孵化的樣品以及通過冷凍-融化脅迫的那些樣品顯示在所評(píng)估的四種配制品中在降解模式中具有較小的或沒有差異。然而，在40° C下孵化的樣品在單體降低的速率方面顯示差異，因此這影響了降解物(HMWP和LMWP)的積聚表明組氨酸/海藻糖配制品遵循較慢的單體降解速率，而其他三種配制品看起來降解得更快。在圖中在降解物增加方面觀察到相同情況。
HMWP (高分子量蛋白)和LMWP (低分子量蛋白)增加的更緊密觀察顯示在所有配制品中(圖)LMWP的增加模式遵循類似趨勢(shì)，并且在HMWP的積聚中，組氨酸配制品使它們自身與基于磷酸鹽的配制品分開(圖)。在5. 5周結(jié)束時(shí)，包含組氨酸/海藻糖的配制品具有最高的剩余的單體以及最低％降解物。圖14-17中的SEC結(jié)果表明在反復(fù)冷凍融化(FT) (-80° C)下在四周的期間在磷酸鹽/NaCl樣品中聚集體增加了并且在四周的期間在His/Tre配制品中沒有可觀察到的聚集體增加。在0. 5ml填充體積樣品中聚集的聚集體增加量是約I. 75%，以及在Iml填充樣品中是I. 41%。在圖18-21中弱陽離子交換層析表明當(dāng)在磷酸鹽/NaCl以及組氨酸海藻糖配制品中在四周研究期間內(nèi)將mAb反復(fù)冷凍(-80° C)和融合時(shí)電荷變異體分布未顯著改變。然而，在Phos/Nacl樣品中，增加數(shù)量的蛋白在40分鐘處與緩沖劑峰一起共洗脫。 其他參數(shù)例如pH，濃度未表明一種配制品高于另一種配制品的優(yōu)異性(如在圖12-13中指示的)。在圖24-27中冷凍狀態(tài)穩(wěn)定性研究表明在電荷變異體圖譜中未觀察到差異，但是表明在Phos/Nacl配制品中聚集顯著增加，并且在His/Tre配制品中則沒有。其他參數(shù)例如pH、濃度未表明一種配制品高于另一種配制品的優(yōu)異性(如在圖22-23中指示的)。
權(quán)利要求
1.一種配制品，包括抗體、緩沖劑以及一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
2.一種配制品，包括抗體或其片段、緩沖劑以及溶解保護(hù)劑。
3.如權(quán)利要求I或2所述的配制品，其中該緩沖劑選自TRIS、磷酸鹽類、琥珀酸鹽類、檸檬酸鹽類、乙酸鹽類、咪唑類、甘氨酸、L-精氨酸、組氨酸以及它們的組合。
4.如權(quán)利要求I或2所述的配制品，其中緩沖劑優(yōu)選地是組氨酸。
5.如權(quán)利要求2所述的配制品，其中該溶解保護(hù)劑選自多元醇或糖類。
6.如權(quán)利要求5所述的配制品，其中該溶解保護(hù)劑性質(zhì)上是非還原性的例如PEG、甘油、蔗糖、海藻糖以及甘露醇。
7.如權(quán)利要求I或2所述的配制品，其中該配制品進(jìn)一步包括冷凍保護(hù)劑類。
8.如權(quán)利要求7所述的配制品，其中該冷凍保護(hù)劑優(yōu)選地是海藻糖。
9.如權(quán)利要求I或2所述的配制品，該配制品進(jìn)一步包括表面活性劑類。
10.如權(quán)利要求9所述的配制品，其中該表面活性劑是選自包括聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80的組。
11.如權(quán)利要求I或2所述的配制品，其中該配制品進(jìn)一步包括填充劑類。
12.如權(quán)利要求11所述的配制品，其中該填充劑選自包括甘氨酸和甘露醇的組。
13.—種抗體的穩(wěn)定配制品，包括a)約25mg/ml至約250mg/ml抗體，b)提供pH5至PH7. 5的緩沖劑。
14.一種抗體的穩(wěn)定配制品,包括a)約50mg/ml至約250mg/ml的抗體，b)提供pH 5至pH 7. 5的緩沖劑以及c)約0. 001%至約0. 05%的非離子型表面活性劑。
15.—種抗體的穩(wěn)定配制品,包括a)約100mg/ml至約250mg/ml的抗體，b)提供pH5至PH7. 5的緩沖劑；c)約0. 001%至約0. 05%的非離子型表面活性劑；以及c)溶解保護(hù)劑和/或冷凍保護(hù)劑。
16.如權(quán)利要求15所述的配制品，其中所述配制品是一種凍干的餅狀物或粉末。
17.如權(quán)利要求15所述的配制品，其中在用于注射的無菌水或用于注射的溶菌水中進(jìn)一步重新構(gòu)建所述配制品。
全文摘要
一種包含抗體、緩沖劑、非離子型表面活性劑、以及溶解保護(hù)劑/冷凍保護(hù)劑的穩(wěn)定的藥物配制品。還披露了用于制備、存儲(chǔ)、以及使用這類配制品的相關(guān)方法。
文檔編號(hào)A61K39/395GK102770157SQ201080060508
公開日2012年11月7日 申請(qǐng)日期2010年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月20日
發(fā)明者卡爾蒂克·拉馬尼, 蘇查里塔·亞卡爾 申請(qǐng)人:分子免疫中心, 拜康有限公司