專利名稱：一種淫羊藿中有效成分的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥有效成分的提取方法，具體涉及從淫羊藿中提取淫羊藿中有效成分的提取方法，更具體的是從淫羊藿中提取淫羊藿總黃酮和淫羊藿多糖的方法。
背景技術(shù)：
小檗科植物淫羊藿(印imedium)，具有很高的藥用價值，辛、甘，溫。具有補腎陽、強筋骨、祛風(fēng)濕等作用，臨床上常用于陽痿遺精，筋骨酸軟，風(fēng)濕痹痛，麻木拘攣及更年期高血壓?，F(xiàn)代化學(xué)成分研究顯示，淫羊藿的主要有效成分是淫羊藿總黃酮(淫羊藿苷、淫羊藿次苷)和淫羊藿多糖。其淫羊藿總黃酮具有增加心腦血管血流量、促進造血功能、免疫功能及骨代謝，具有補腎壯陽、抗衰老、抗腫瘤等功效。在以往的研究中，主要將淫羊藿苷作為淫羊藿的主要成分和關(guān)鍵指標(biāo)，而很少關(guān)注淫羊藿多糖。最新研究表明，淫羊藿中多糖具有抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、愈潰瘍、提高人體免疫力等作用。并且在淫羊藿中多糖含量很豐富?，F(xiàn)有技術(shù)在提取淫羊藿多糖和淫羊藿苷時，往往采取分步提取的方法，這樣工藝非常復(fù)雜繁瑣，在提取過程中有效成分損失嚴(yán)重，產(chǎn)品收率差

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是為解決上述現(xiàn)有技術(shù)一般只單純提取淫羊藿苷或者提取淫羊藿多糖和淫羊藿苷時，往往采取分步提取的方法，這樣工藝非常復(fù)雜繁瑣，在提取過程中有效成分損失嚴(yán)重，產(chǎn)品收率差等問題，提供一種操作便捷、產(chǎn)品收率高，可達到工業(yè)化生產(chǎn)要求的淫羊藿中有效成分的提取方法。(1)以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入3倍以上水，常溫浸泡1小時以上后，進行水法提??；(2)向步驟1中得到的產(chǎn)物中加入乙醇溶液，2-10°C放置5-M小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物；(3)將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；(4)濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH8-9，加熱至80_90°C，攪拌，冷卻后， 離心，分離上清液，減壓濃縮，用少量石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。在水浴下加熱到80_100°C保溫2-5小時，水提取兩次或兩次以上，過濾，取上層濾液，減壓濃縮成稠浸膏。更進一步的，本發(fā)明的方法為(1).以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入4-8倍水， 常溫浸泡2小時后，在水浴下加熱到90°C保溫3-4小時，水提取兩次，過濾，取上層濾液，減壓濃縮成稠浸膏。O).浸膏用浸膏體積3-5倍的55-65%乙醇溶解，2-10°C放置5- 小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3).將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮。濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH8-9，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的1/2-3倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶
后得淫羊藿多糖。所述水法提取還可以為常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取5-lOmin，連續(xù)2次或 2次以上，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下5-30min，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成
稠浸膏。更進一步的，本發(fā)明的方法為(1.)以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入4-8倍水，常溫浸泡2小時后，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取5-lOmin，連續(xù)2次或2次以上，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下 5-30min,合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏。(2.)浸膏用浸膏體積3-5倍的55-65%乙醇溶解，2_10°C放置小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3.)將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；(4.)濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH8-9，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的1/2-3倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶
后得淫羊藿多糖。所說的稠浸膏的體積為原添加液體體積的1/30-1/10。在步驟(1)原料常溫浸泡1小時以上后，進行水法提取前，還可以包括酶解過程， 所述酶解過程為在原料中加入原料質(zhì)量的0. 1-0. 5%的復(fù)合酶溶液酶解1-3小時。所述復(fù)合酶溶液質(zhì)量百分含量為0. 1-0. 5%。所述復(fù)合酶為纖維素酶與蛋白酶的混合物；纖維素酶與脂肪酶、溶菌酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為1 0.5-1 0.01-0.5 0.01-1 ；酶解時間為0.5-M小時，酶解溫度為 15-70 0C ο所述復(fù)合酶中，纖維素酶與脂肪酶、溶菌酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為 1 0. 6-0. 8 0. 05-0. 2 0. 05-0. 5。所述酶解時間1-3小時，酶解溫度40_50°C，酶解時Wi值為4_6。所述蛋白酶為酸性蛋白酶。本發(fā)明的有益效果在于本發(fā)明在總結(jié)前人的工作和自己探索的基礎(chǔ)上，經(jīng)反復(fù)的研究改進，采用一次程序，分別提取淫羊藿總黃酮和淫羊藿多糖，最大限度的利用原材料簡化工序，提高原料的利用率。通過本發(fā)明的方法極大地地提高了生產(chǎn)效率和轉(zhuǎn)化率，使得產(chǎn)品質(zhì)量更進一步提高， 且產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。


圖1是對比例2的工藝流程圖。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例來進一步說明本發(fā)明，但并不作為對本發(fā)明的限定。
實施例1(1).以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入4倍水，常溫浸泡4小時后，在水浴下加熱至IJ 100°C保溫4小時，水提取3次，過濾，取上層濾液，減壓濃縮成稠浸膏。O).浸膏用浸膏體積5倍的55%乙醇溶解，2°C放置M小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3).將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后， 用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮。濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH8，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的3倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。所述減壓濃縮、過濾、減壓蒸餾、活性炭脫色、用甲醇重結(jié)晶等分別為現(xiàn)有技術(shù)中的常規(guī)技術(shù)手段，詳細(xì)操作不再進行贅述。實施例2(1).以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入8倍水，常溫浸泡2小時后，在水浴下加熱到80°C保溫3小時，水提取兩次，過濾，取上層濾液，減壓濃縮成稠浸膏。O).浸膏用浸膏體積5倍的65%乙醇溶解，10°C放置M小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3).將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮。濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH9，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的1/2 倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。實施例3(1).以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入6倍水，常溫浸泡2小時后，在水浴下加熱到90°C保溫3. 5小時，水提取兩次，過濾，取上層濾液，減壓濃縮成稠浸膏。O).浸膏用浸膏體積4倍的60%乙醇溶解，8°C放置10小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3).將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮。濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化 I丐，調(diào)整PH8. 5，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的2 倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。實施例4(1.)以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入5倍水，常溫浸泡2小時后，常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取8min，連續(xù)3次，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下15min，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏。(2.)浸膏用浸膏體積4倍的60%乙醇溶解，8°C放置8小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3.)將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；(4.)濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整pH8. 5，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的2倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。實施例5(1.)以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入6倍水，常溫浸泡2小時后，原料中加入0. 2%的復(fù)合酶溶液酶解2小時。常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取8min，連續(xù)3次，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下8min，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏。(2.)浸膏用浸膏體積3倍的55%醇溶解，8°C放置5小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物。(3.)將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；(4.)濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH8-9，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的1倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。實施例6-13酶解所用復(fù)合酶和酶解條件如下，其余同實施例5.
權(quán)利要求
1.一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于，所述工藝如下(1)以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入3倍以上水，常溫浸泡1小時以上后，進行水法提?。?2)向步驟1中得到的產(chǎn)物中加入乙醇溶液，2-10°C放置5-M小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物；(3)將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；(4)濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整pH8-9，加熱至80-90°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用少量石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。
2.如權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于，所述水法提取為在水浴下加熱到80-100°C保溫2-5小時，水提取兩次或兩次以上，過濾，取上層濾液， 減壓濃縮成稠浸膏。
3.如權(quán)利要求2所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于，所述工藝如下以質(zhì)量倍數(shù)計，取淫羊藿藥材，加入4-8倍水，常溫浸泡2小時后，在水浴下加熱到90°C 保溫3-4小時，水提取兩次，過濾，取上層濾液，減壓濃縮成稠浸膏；浸膏用浸膏體積3-5倍的55-65%乙醇溶解，2-10°C放置5- 小時，過濾，分別收集濾液和沉淀物；將濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，用乙酸乙酯乙醇1 2洗柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，調(diào)整PH8-9，加熱至85°C，攪拌，冷卻后，離心，分離上清液，減壓濃縮，用沉淀物體積的1/2-3倍的石油醚沖洗，干燥后，用乙醇重結(jié)晶后得淫羊藿多糖。
4.如權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于，所述水法提取為常溫下在勻漿提取裝置中勻漿提取5-lOmin，連續(xù)2次或2次以上，勻漿液轉(zhuǎn)移后在超聲波作用下5-30min，合并勻漿液，濾渣取液，濾液減壓濃縮成稠浸膏。
5.如權(quán)利要求1-4任一所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于所說的稠浸膏的體積為原添加液體體積的1/30-1/10。
6.如權(quán)利要求1所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于在步驟(1) 原料常溫浸泡1小時以上后，進行水法提取前，還包括酶解過程，所述酶解過程為在原料中加入0. 1-0. 5%的復(fù)合酶溶液酶解1-3小時。
7.如權(quán)利要求6所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于所述復(fù)合酶為纖維素酶與蛋白酶的混合物；纖維素酶與脂肪酶、溶菌酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為 1 0.5-1 0.01-0.5 0. 01-1 ；酶解時間為 0. 5- 小時，酶解溫度為 15-70°C。
8.如權(quán)利要求7所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于所述復(fù)合酶中，纖維素酶與脂肪酶、溶菌酶、蛋白酶按照質(zhì)量計算，比例為 1 0. 6-0. 8 0. 05-0. 2 0. 05-0. 5。
9.如權(quán)利要求8所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于所述酶解時間1-3小時，酶解溫度40-50°C，酶解時Wi值為4-6。
10.如權(quán)利要求9所述的一種淫羊藿中有效成分的提取方法，其特征在于所述蛋白酶為酸性蛋白酶。
全文摘要
本發(fā)明涉及藥物制備領(lǐng)域，是一種淫羊藿中有效成分的制備方法，解決了現(xiàn)有技術(shù)淫羊藿中有效成分的制備轉(zhuǎn)化率低，產(chǎn)量低，產(chǎn)品品質(zhì)不好的問題，工藝如下取淫羊藿藥材加入水，浸泡1小時以上后進行水法提取；得到的產(chǎn)物中加入乙醇溶液過濾，分別收集濾液和沉淀物；濾液減壓濃縮成浸膏，經(jīng)拌樣，過硅膠柱，收集流動相，減壓過濾后，用活性炭脫色，用甲醇重結(jié)晶，得淫羊藿總黃酮；濾洗沉淀物，溶于水，加入氯化鈣，加熱攪拌，冷卻后離心分離上清液，減壓濃縮得淫羊藿多糖。通過本發(fā)明的方法極大地地提高了生產(chǎn)效率和轉(zhuǎn)化率，促使原料中的有效物質(zhì)更多的轉(zhuǎn)化為淫羊藿中有效成分，使得產(chǎn)品質(zhì)量更進一步提高，且產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61K36/296GK102451210SQ20101052943
公開日2012年5月16日 申請日期2010年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月3日
發(fā)明者張守力 申請人:張守力