專利名稱：一種金銀花提取物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥活性成分的提取純化方法，具體地說，涉及一種金銀花提取 物的制備方法。屬中藥制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
金銀花首載于梁·陶弘景《名醫(yī)別錄》，名忍冬。《中國藥典》(1963版)將忍冬作 為金銀花的唯一來源，1977年后各版《中國藥典》綜合考慮根據(jù)臨床療效、地區(qū)習慣用等因 素，選定忍冬科的植物忍冬Lonicera japonica Thunb.、紅腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq.、山銀花 Lonicera confusa DC.、或毛花柱忍冬 Lonicera dasystyla Rehd.的干花蕾 或帶初開的花為金銀花，其中正品為忍冬的干燥花蕾，我國大部分地區(qū)均產(chǎn)，以山東產(chǎn)量最 大，河南產(chǎn)的質(zhì)量較佳。金銀花為常用中藥，性寒，味甘，具有顯著清熱解毒、抗菌消炎和抗 病毒作用，用于癰腫療瘡、喉痹、丹毒、熱血毒痢、風熱感冒、濕病發(fā)熱。金銀花所含的有機酸類成分是其主要活性成分，目前從金銀花中提取有機酸類成 分的方法通常采用濕浸法、水煮法、稀醇提取和酸醇提取等。但是上述這些傳統(tǒng)方法，其溶 劑的加入量至少是金銀花的10倍量以上，且至少需要提取2 5小時，消耗的溶劑多且提 取時間長；并且由于金銀花藥材的成分復雜，含有很多有機酸以外的成分，所以傳統(tǒng)方法得 到的提取物，其活性成分(如有機酸類成分)純度較低。例如，中國專利公開號CN101269107 公開了一種金銀花葉藥用提取物的提取方法，該方法取金銀花葉切段或粉碎，按質(zhì)量份加 蒸餾水煮提，過濾合并濾液，濾液濃縮，用鹽酸調(diào)PH，離心，上清液上大孔吸附樹脂柱吸附， 乙醇洗脫，回收乙醇，干燥，得金銀花葉藥用提取物，該方法制得的提取物中總有機酸含量 僅為50% 60%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種金銀花提取物的制備方法，該方法溶劑的用量少、提 取時間短，并且能夠提高活性成分(主要為有機酸)的含量。為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的金銀花提取物的制備方法，包括如下步驟1)超高壓提取在金銀花中加入5 8倍金銀花重量的60 90% (體積)烷醇 類溶劑，加壓到100 400MPa，保持該壓力15 30min后泄壓，過濾；將濾液濃縮后冷藏； 然后離心分離，收集上清液；2)純化將步驟1)得到的上清液回收溶劑至流浸膏狀；然后加水溶解，上大孔吸 附樹脂柱，用5 10倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用6 10倍樹脂柱體積的20 30% (體積)烷醇類溶劑洗脫，將醇洗脫液回收溶劑至無醇味，冷凍干燥，得到金銀花提取物。其中，所述烷醇類溶劑為甲醇、乙醇、異丙醇或正丁醇中的一種或幾種，優(yōu)選的是 甲醇或乙醇，更優(yōu)選的是乙醇。步驟1)中所述濃縮是將濾液濃縮至原體積的20 30%;所述冷藏的時間為12 20h，冷藏溫度為0 5°C。所述離心分離的轉(zhuǎn)速為5000r/min，時間為15 20min，通過離心分離能夠徹底去除蛋白質(zhì)、多糖和其他雜質(zhì)。步驟2)中所述大孔吸附樹脂的型號為HP-20、D-101、D-201、D-301、SP-70、 SP-700、SP-825 或AB-8。具體地說，本發(fā)明的制備方法包括如下步驟1)超高壓提取取一定量的金銀花，破碎成長約3 IOmm的小段，放入超高壓提 取罐，加入5 8倍金銀花重量的60 90% (體積)烷醇類溶劑；加壓到100 400MPa， 保持該壓力15 30min后，立即泄壓；過濾，將濾液濃縮至原體積的20 30%后，冷藏過 夜；然后將冷藏液用離心機以轉(zhuǎn)速5000r/min離心分離15 20min ；2)純化將離心后的上清液減壓回收烷醇類溶劑至流浸膏狀，然后加水溶解，上 大孔吸附樹脂柱，依次用5 10倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用6 10倍樹脂柱體積的 20 30% (體積)烷醇類溶劑洗脫，減壓回收醇洗脫液的溶劑至無醇味，冷凍干燥，得到金 銀花提取物。本發(fā)明方法得到的金銀花提取物，可以與藥學上可接受的載體一起制成各種藥物 制劑。所述藥物制劑可以是藥學領(lǐng)域常用的劑型，例如注射劑或口服制劑等，所述的口服制 劑是指片劑、膠囊、口服液或滴丸等。利用本發(fā)明的金銀花提取物制備所需各種劑型時，可 以按照藥學領(lǐng)域的常規(guī)生產(chǎn)方法制備。本發(fā)明的金銀花提取物的制備方法，將中藥現(xiàn)代化技術(shù)中的超高壓提取技術(shù)和大 孔吸附樹脂技術(shù)相結(jié)合，從而提取并純化金銀花中的活性成分，制備得到以有機酸為主要 活性成分的金銀花提取物。本發(fā)明方法不但提高了提取物中的活性成分的含量，而且去除 了大量雜質(zhì)，從而解決了中成藥常有的吸潮性大的問題，且減少了雜質(zhì)帶來的副作用，提高 了療效。本發(fā)明的金銀花提取物的制備方法，其是針對現(xiàn)有的水提法、醇提法、水提醇沉等 方法的不足，在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上加以改進，將超高壓提取和大孔吸附樹脂分離技術(shù)相結(jié) 合，用來提取并純化金銀花中的活性成分，取得了良好的效果。本發(fā)明方法不但操作簡便、 溶劑用量少、提取時間短、成本低；而且提取的活性成分得率高，總有機酸含量在70%左 右，重復性和穩(wěn)定性好；能夠充分利用原料資源，非常適合工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式以下通過具體實施例來進一步說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。(注以 下實施例中烷醇類溶劑的濃度均為體積分數(shù)。)實施例11、超高壓提取取金銀花藥材500g，破碎成長約3mm的小段，放入超高壓提取罐， 加入3. 5L 75%乙醇；加壓到200MPa，保壓15min后，立即泄壓，過濾，將濾液濃縮至原體積 的30%后，冷藏過夜；將冷藏液用離心機以轉(zhuǎn)速5000r/min離心分離20min ；2、純化將離心后得到的上清液減壓回收乙醇至流浸膏狀，然后加入500mL水溶 解，上大孔吸附樹脂柱(型號D-101)，依次用5倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用8倍 樹脂柱體積的20%乙醇洗脫，減壓回收乙醇洗脫液至無醇味，冷凍干燥，得金銀花提取物 11. 41g，其中活性成分總有機酸的含量為70.3%。實施例2
1、取金銀花藥材500g，破碎成長約5mm的小段，放入超高壓提取罐，加入4. 5L 80%甲醇。加壓到lOOMpa，保壓30min后，立即泄壓，過濾，將濾液濃縮至原體積的20%后， 冷藏過夜；然后將冷藏液用離心機以轉(zhuǎn)速5000r/min離心分離15min。2、將離心后得到的上清液減壓回收甲醇至流浸膏狀，然后加入500mL水溶解，上 大孔吸附樹脂柱(型號HP-20)，依次用8倍量樹脂柱體積的水洗脫，然后再用10倍量 樹脂柱體積的25%乙醇洗脫，減壓回收乙醇洗脫液至無醇味，冷凍干燥，得金銀花提取物 11. 33g，其中活性成分總有機酸的含量為72. 1%。實施例31、超高壓提取取金銀花藥材500g，破碎成長約IOmm的小段，放入超高壓提取罐， 加入4. OL 90%異丙醇；加壓到400MPa，保壓25min后，立即泄壓，過濾，將濾液濃縮至原體 積的30%后，冷藏過夜；將冷藏液用離心機以轉(zhuǎn)速5000r/min離心分離15min ；2、純化將離心后得到的上清液減壓回收乙醇至流浸膏狀，然后加入500mL水溶 解，上大孔吸附樹脂柱(型號SP-70)，依次用8倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用8倍樹 脂柱體積的30%正丁醇洗脫，減壓回收乙醇洗脫液至無醇味，冷凍干燥，得金銀花提取物 11. 51g，其中活性成分總有機酸的含量為69. 8%。實施例41、超高壓提取取金銀花藥材500g，破碎成長約8mm的小段，放入超高壓提取罐， 加入4. OL 90%正丁醇；加壓到300MPa，保壓20min后，立即泄壓，過濾，將濾液濃縮至原體 積的25%后，冷藏過夜；將冷藏液用離心機以轉(zhuǎn)速5000r/min離心分離15min ；2、純化將離心后得到的上清液減壓回收乙醇至流浸膏狀，然后加入500mL水溶 解，上大孔吸附樹脂柱(型號D-201)，依次用6倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用6倍 樹脂柱體積的30%甲醇洗脫，減壓回收乙醇洗脫液至無醇味，冷凍干燥，得金銀花提取物 11. 18g，其中活性成分總有機酸的含量為73.6%。實施例51、超高壓提取取金銀花藥材500g，破碎成長約8mm的小段，放入超高壓提取罐， 加入2. OL 60%乙醇和2. OL 60%甲醇加壓到300MPa，保壓30min后，立即泄壓，過濾，將 濾液濃縮至原體積的30%后，冷藏過夜；將冷藏液用離心機以轉(zhuǎn)速5000r/min離心分離 15min ；2、純化將離心后得到的上清液減壓回收乙醇至流浸膏狀，然后加入500mL水溶 解，上大孔吸附樹脂柱(型號D-201)，依次用10倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用10倍 樹脂柱體積的30 %乙醇洗脫，減壓回收乙醇洗脫液至無醇味，冷凍干燥，得金銀花提取物 11. 20g，其中活性成分總有機酸的含量為70. 9%。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案，對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在 本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因 此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。
權(quán)利要求
一種金銀花提取物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟1)超高壓提取在金銀花中加入5～8倍金銀花重量的體積分數(shù)60～90％烷醇類溶劑，加壓到100～400MPa，保持該壓力15～30min后泄壓，過濾；將濾液濃縮后冷藏；然后離心分離，收集上清液；2)純化將步驟1)得到的上清液回收溶劑至流浸膏狀；然后加水溶解，上大孔吸附樹脂柱，用5～10倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用6～10倍樹脂柱體積的體積分數(shù)20～30％烷醇類溶劑洗脫，將醇洗脫液回收溶劑至無醇味，冷凍干燥，得到金銀花提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述烷醇類溶劑為甲醇、乙醇、異丙 醇或正丁醇中的一種或幾種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述烷醇類溶劑為甲醇或乙醇。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的制備方法，其特征在于，所述烷醇類溶劑為乙醇。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任意一項所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述濃縮是將 濾液濃縮至原體積的20 30%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任意一項所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述冷藏的時 間為12 20h，冷藏溫度為0 5°C。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任意一項所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述離心分離 的轉(zhuǎn)速為5000r/min，時間為15 20min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任意一項所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述大孔吸附 樹脂的型號為 HP-20、D-IO1、D-201、D-301、SP-70、SP-700、SP-825 或 AB-8。
全文摘要
本發(fā)明提供一種金銀花提取物的制備方法，包括如下步驟1)超高壓提取在金銀花中加入烷醇類溶劑，加壓到100～400MPa，保持15～30min后泄壓，過濾；將濾液濃縮后冷藏，然后離心分離；2)純化將離心后得到的上清液回收溶劑至流浸膏狀；然后加水溶解，上大孔吸附樹脂柱，先用5～10倍樹脂柱體積的水洗脫，然后再用6～10倍樹脂柱體積的20～30％烷醇類溶劑洗脫，將醇洗脫液回收溶劑至無醇味，冷凍干燥，得到金銀花提取物。本發(fā)明方法運用超高壓提取和大孔吸附樹脂分離技術(shù)提取純化金銀花的活性成分，操作簡便、溶劑用量少、提取時間短、成本低；且提取的活性成分得率高，重復性和穩(wěn)定性好；能夠充分利用原料資源，非常適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61P31/04GK101933967SQ20101027423
公開日2011年1月5日 申請日期2010年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月31日
發(fā)明者汪洪湖, 陳文明 申請人:蚌埠豐原涂山制藥有限公司