專利名稱：用于防止粘連的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于防止粘連的組合物，所述組合物包括生物相容的透明質(zhì)酸和聚合物化合物。更具體地，本發(fā)明涉及具有優(yōu)異效能的用于防止粘連的組合物及其制備方法，所述組合物包括沒(méi)有被化學(xué)交聯(lián)劑或化學(xué)改性劑修飾的透明質(zhì)酸。
背景技術(shù)：
粘連是正常彼此分開的周圍器官或組織之間的連接，其是由在包括由炎癥、切口、 擦傷或外科手術(shù)等引起的創(chuàng)傷的傷口愈合過(guò)程中纖維組織或外滲物的過(guò)度生成以及血液的凝固而產(chǎn)生的。在任一種外科手術(shù)后可能會(huì)引起粘連，并且由于在手術(shù)后愈合過(guò)程中在手術(shù)部位周圍的器官或組織之間的粘連，可能會(huì)引起嚴(yán)重的臨床后遺癥。據(jù)報(bào)道通常手術(shù)后器官粘連的發(fā)生率的范圍是55%至93% (Ann. Royal Coll. Surg. Engl.，75，147-153，1993)。有相當(dāng)大比例的腹部手術(shù)會(huì)引起粘連。盡管這些粘連中的一些可能發(fā)生自發(fā)分解，但是在大多數(shù)的情況下甚至是在傷口愈合以后仍然存在有粘連， 這可能導(dǎo)致多種后遺癥。后遺癥的種類是多種多樣的。根據(jù)美國(guó)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，已知在隨后的手術(shù)中所述手術(shù)后粘連(作為主要的癥狀)伴隨有49%至74%的腸閉塞、15%至20%的不育癥、20%至 50% 的慢性骨盆痛、和 19% 的腸穿孔(Eur. J. Surg.，Suppl577，32-39，1997)。腹膜內(nèi)粘連的形成機(jī)制已在Granger發(fā)表的論文中有詳細(xì)的描述(Inf ert. Reprod. Med. Clin. North Am.，5 :3，391-404，1994)。Granger 認(rèn)為在手術(shù)后產(chǎn)生的滲出物中由凝血過(guò)程中產(chǎn)生的纖維蛋白引起粘連。炎性滲出物富含纖維蛋白，所述纖維蛋白在傷口表面形成血塊。當(dāng)纖維蛋白降解時(shí)，間皮再生，這通常導(dǎo)致傷口的愈合。纖維蛋白的分解或纖維蛋白溶解依賴于纖維蛋白溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白溶酶(其為纖維蛋白溶解酶)，并且該反應(yīng)由存在于間皮和基礎(chǔ)基質(zhì)中的組織型纖溶酶原激活物(tPA)所促進(jìn)。然而，如果不發(fā)生纖維蛋白溶解，則炎性細(xì)胞和成纖維細(xì)胞滲透到所述纖維蛋白基質(zhì)中，導(dǎo)致組織粘連。在這種方式中，通過(guò)一系列的纖維蛋白生成機(jī)制和纖維蛋白溶解機(jī)制而發(fā)生粘連，并且這兩個(gè)機(jī)制之間的關(guān)系是復(fù)雜的且與傷口的愈合過(guò)程是密切相關(guān)的。作為預(yù)防所述粘連的多種方法之一，已針對(duì)預(yù)防相鄰組織之間的粘連的形成的抗粘連劑進(jìn)行深入研究，所述抗粘連劑是通過(guò)在組織的傷口愈合的過(guò)程中采用屏障形成物理屏障來(lái)進(jìn)行預(yù)防所述粘連，這與表面活性劑的作用相似。這些屏障所采用的抗粘連屏障可根據(jù)它們的類型大致地分為兩類一類是包括薄膜型、非交織型和海綿型的膜型屏障，另一類是包括凝膠型的溶液型屏障。所述膜型抗粘連材料的實(shí)施例包括氧化-再生纖維素、膨體聚四氟乙烯(在下文中被稱為“ePTFE”)、由改性透明質(zhì)酸、羧甲基纖維素鈉和化學(xué)改性劑等組成的膜劑。所述溶液型抗粘連材料的實(shí)施例包括乳酸鹽林格溶液、右旋糖酐-70溶液、肝素溶液、羧甲基纖維素鈉溶液、透明質(zhì)酸溶液、硫酸軟骨素溶液、聚乙二醇溶液、泊洛沙姆溶液等。在這些溶液型抗粘連材料中，乳酸鹽林格溶液、右旋糖酐-70溶液、肝素溶液等具有主要的機(jī)制，即在腹膜的愈合過(guò)程中誘導(dǎo)纖維蛋白覆蓋的表面相互分離。盡管它們是已被用于通過(guò)使組織相互分離而抑制粘連的制劑，但是由于它們能被腹膜快速吸收，因此不能得到令人滿意的抗粘連效果(Am. Surg.，63，775-777，1983)。同時(shí)，由于聚乙二醇等在體內(nèi)不能降解，僅可采用當(dāng)吸收時(shí)可通過(guò)代謝途徑排出的低分子量材料。然而，使用所述低分子量材料會(huì)導(dǎo)致過(guò)快吸收，使得其不能在較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)作為有效的屏障防止粘連。同時(shí)，在專利號(hào)為4，141,973的美國(guó)專利中公開的透明質(zhì)酸是由交替連接的 β -D-N-乙酰葡糖胺和β-D-葡萄糖醛酸組成的線性大分子多糖，并且已知即使當(dāng)其被植入或注入體內(nèi)時(shí)，其仍具有優(yōu)異的生物相容性。然而，還由于在相對(duì)較短的時(shí)間內(nèi)在體內(nèi)的分解和吸收，其在作為抗粘連劑的性能方面仍存在限制。為了嘗試改善這些缺點(diǎn)，專利號(hào)為6，387，413Β1的美國(guó)專利公開了通過(guò)添加例如為羧甲基纖維素的聚合物化合物而制備透明質(zhì)酸凝膠組合物，以實(shí)現(xiàn)對(duì)透明質(zhì)酸凝膠在物理性質(zhì)方面進(jìn)行補(bǔ)充的目的。如上所述，已對(duì)透明質(zhì)酸凝膠在物理性質(zhì)方面進(jìn)行補(bǔ)充進(jìn)行了多種研究。在這些研究中，為了改善透明質(zhì)酸在體內(nèi)應(yīng)用后容易被水溶解以及體內(nèi)滯留時(shí)間相對(duì)較短的方面的缺點(diǎn)，已提出了對(duì)透明質(zhì)酸的多種修飾，其可通過(guò)多種化學(xué)交聯(lián)劑或化學(xué)改性劑來(lái)進(jìn)行修飾。迄今為止，由此開發(fā)的材料顯示出了預(yù)防粘連的潛力，但是由于主要采用化學(xué)交聯(lián)方法，仍然存在有與不便于除去交聯(lián)劑或添加劑和方法復(fù)雜相關(guān)的問(wèn)題以及毒性和安全性的問(wèn)題。作為為解決上述問(wèn)題(即與抗粘連功能的低效、化學(xué)交聯(lián)劑或添加劑的合成和可能的滯留毒性有關(guān)的問(wèn)題)而進(jìn)行的各種廣泛而深入的研究和實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通過(guò)提供包含有不采用化學(xué)交聯(lián)劑的、具有優(yōu)化的生物相容性的、高分子量的透明質(zhì)酸的組合物可解決上述問(wèn)題。此外，與用作為在抗粘連作用方面的物理屏障的包含有聚合物材料的簡(jiǎn)單混合物的常規(guī)產(chǎn)品不同，本發(fā)明是基于預(yù)防粘連的新功能方法，其中采用本發(fā)明的透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉不僅可以作為物理屏障，還可抑制主要是粘連發(fā)生的原因的血栓形成。因此，本發(fā)明可區(qū)別于傳統(tǒng)的產(chǎn)品并且還被證實(shí)了在抗粘連效果和安全性方面是優(yōu)異的。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問(wèn)題因此，本發(fā)明的目的在于提供用于預(yù)防粘連的組合物，所述組合物包括透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或甲殼低聚糖。所述組合物優(yōu)選為凝膠型組合物。進(jìn)一步地，本發(fā)明的目的在于提供包含有透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或甲殼低聚糖的組合物在制備預(yù)防粘連的藥物制劑的用途。進(jìn)一步地，本發(fā)明的目的在于提供用于預(yù)防手術(shù)后粘連的方法，其包括向包括人類的哺乳動(dòng)物給予包含有透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或甲殼低聚糖的組合物。進(jìn)一步地，本發(fā)明是基于粘連預(yù)防的新功能方法，其中由本發(fā)明提供的包含有透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉的組合物不僅可作為物理屏障，還可抑制主要是粘連發(fā)生的基礎(chǔ)的血栓形成，因此其可區(qū)別于傳統(tǒng)的產(chǎn)品并且還提供在抗粘連效果和安全性方面的優(yōu)異效果。進(jìn)一步地，本發(fā)明通過(guò)提供包含有透明質(zhì)酸和甲殼低聚糖的組合物，來(lái)延長(zhǎng)如在單次使用透明質(zhì)酸后所顯示出來(lái)的在體內(nèi)透明質(zhì)酸的早期分解和吸收，從而減少粘連的發(fā)病率。進(jìn)一步地，本發(fā)明的目的在于提供減少手術(shù)后粘連的發(fā)生的組合物，防止在最初的手術(shù)以后和當(dāng)傷口愈合完成時(shí)形成粘連，所述組合物在體內(nèi)能被分解并吸收然后被排泄。技術(shù)方案通過(guò)將聚合物材料加入到透明質(zhì)酸中而得到本發(fā)明的組合物。雖然所述聚合物材料可優(yōu)選羥乙基淀粉或水溶性的甲殼低聚糖，但是可采用包括PLGA(聚乳酸聚乙醇酸共聚物)、PLL (聚左旋賴氨酸)、PEG (聚乙二醇)、HEC (羥乙基纖維素)、CMC (羧甲基纖維素) 等的任意聚合物材料，只要相對(duì)于單獨(dú)使用透明質(zhì)酸凝膠不容易滿足藥物材料的所需的物理性質(zhì)而言，其可增加透明質(zhì)酸凝膠的固有性質(zhì)即可。因此，本發(fā)明提供用于預(yù)防粘連的包含有透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或水溶性甲殼低聚糖的組合物。所述組合物優(yōu)選為凝膠型組合物。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供包含有透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或甲殼低聚糖的組合物在制備預(yù)防粘連的藥物制劑中的用途。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供用于預(yù)防手術(shù)后周圍器官或組織粘連的方法，其包括向包括人類的哺乳動(dòng)物給予包含有透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或甲殼低聚糖的組合物。將在下文中更為詳細(xì)地描述本發(fā)明的用于預(yù)防粘連的組合物。1、透明質(zhì)酸(在下文中被稱為“HA”)作為本發(fā)明的透明質(zhì)酸，可不考慮其來(lái)源而采用任意的從動(dòng)物組織提取得到的或由發(fā)酵法制備得到的透明質(zhì)酸。透明質(zhì)酸由透明質(zhì)酸酶分解，然后通過(guò)代謝途徑吸收和消除。進(jìn)一步地，本發(fā)明的透明質(zhì)酸是生物衍生材料，其沒(méi)有受到化學(xué)交聯(lián)，且不具有由于在體內(nèi)的長(zhǎng)期滯留而在人體內(nèi)積累的毒性，而這是傳統(tǒng)交聯(lián)透明質(zhì)酸的問(wèn)題所在，且因此在安全性方面本發(fā)明的透明質(zhì)酸優(yōu)于傳統(tǒng)的制劑。本發(fā)明的透明質(zhì)酸的分子量的范圍為約5. OX IO5至約5. OX IOfiDa,且優(yōu)選范圍為約0. 8X IO6至約3X IOf5Datl具有上述具體范圍的分子量的透明質(zhì)酸具有適當(dāng)?shù)捏w內(nèi)半衰期，因此可用作為物理屏障。在另一方面，傳統(tǒng)的低分子量透明質(zhì)酸(低于5. OX IO5)在傷口愈合過(guò)程中可能難于保持為物理屏障。具有超過(guò)SXlOf5Da的高分子量的透明質(zhì)酸酶具有非常高的粘度，這會(huì)產(chǎn)生與諸如轉(zhuǎn)移、過(guò)濾等的生產(chǎn)工藝相關(guān)的問(wèn)題，因此是不合乎需要的。以本發(fā)明的組合物的總重量計(jì)，本發(fā)明的透明質(zhì)酸的含量的范圍是約0.3wt%至 7. Owt%，優(yōu)選為約0. 5wt%至5. Owt%。如果透明質(zhì)酸的含量低于0. 3wt%，抗粘連的作用受到限制。在另一方面，如果透明質(zhì)酸的含量高于7. 0wt%，這可能會(huì)產(chǎn)生由于粘度的生產(chǎn)工藝的問(wèn)題。2、羥乙基淀粉(在下文中稱為“HES”)在本發(fā)明的組合物中，HES被用作為藥物成分，其用于降低基本上是粘連發(fā)生的原因的凝血機(jī)制中血液凝固的發(fā)生。多種羥乙基淀粉目前用作為膠體血容量替代溶液。主要根據(jù)這些羥乙基淀粉的分子量和/或它們的醚化將它們分類為羥乙基和其它參數(shù)。其代表性實(shí)施例包括羥乙基淀粉 (HES 450/0. 7)和噴他淀粉(PES 200/0. 5)。HES基于平均重量、醚化或羥乙基的摩爾取代度MS(例如，在HES 200/0.5中的 0. 5 ；MS =羥乙基與無(wú)水葡萄糖單元的平均摩爾比例)或者取代度(例如，DS =單-或聚羥乙基葡萄糖與總無(wú)水葡萄糖單元的比例)，由通常簡(jiǎn)寫為KDa的分子量表示。根據(jù)分子量， 可將臨床應(yīng)用中的HES分類為高分子量G50kDa)、中分子量QOOkDa至250kDa)和低分子量(70kDa 至 130kDa)制劑。HES具有非特異性的抗凝血作用。HES注入到循環(huán)系統(tǒng)期間血液的稀釋會(huì)引起這些作用。所述血液稀釋的影響會(huì)導(dǎo)致因凝血因子的稀釋而降低血液凝固。根據(jù)早期的研究， 其中提到HES的分子量對(duì)血液凝固具有影響。然而Franz等曾提到血液凝固紊亂顯示出在高分子量的HES和低分子量的HES之間不具有顯著差異(Anesth. Analg.，92，1402-1407， 2001)，并且歐洲專利2005-050877描述了 HES溶液的止血抑制受到摩爾取代度而非平均分子量的顯著影響。根據(jù)這些公開的內(nèi)容，認(rèn)為血小板的功能將受到其它因素而非HES的平均分子量的顯著影響。已從FDA獲得批準(zhǔn)作為血液容量替代溶液且目前在國(guó)外已上市的HES溶液的示例包括人造血漿溶液(Hextend) (HES670/0. 75，Biotime)、羥乙基淀粉(Hespan) (HES 130/0. 4，BBraun)和萬(wàn)汶(Voluven) (HES 130/0. 4，F(xiàn)resenius kabi)。本發(fā)明的羥乙基淀粉的分子量的范圍是約2. OX IO5至約1. OX IOfiDa,且優(yōu)選范圍是約2. 5 X IO5至約6. 7 X IO5Da0如果羥乙基淀粉的分子量低于2. 0 X IO5Da,其可能不能有效預(yù)防粘連。在另一方面，如果羥乙基淀粉的分子量高于LOXlO6Da,這可能會(huì)產(chǎn)生體內(nèi)半衰期延長(zhǎng)的問(wèn)題。所采用的羥乙基淀粉的摩爾取代度的范圍是約0. 2至約0. 8，且優(yōu)選為約0.75至約0.4.如果羥乙基淀粉的摩爾取代度低于0.2，其可能不能有效預(yù)防粘連。在另一方面，如果羥乙基淀粉的摩爾取代度高于0. 8，其可能產(chǎn)生與材料本身的安全性有關(guān)的問(wèn)題。進(jìn)一步地，以本發(fā)明的組合物的總重量計(jì)，本發(fā)明的羥乙基淀粉的含量的范圍是約0. 05wt%至約3. Owt %，且優(yōu)選范圍是約0. Iwt %至約2. Owt %。如果羥乙基淀粉的含量低于0.05wt%，這可能不能有效預(yù)防粘連。在另一方面，如果羥乙基淀粉的含量高于 3. 0wt%，這可能導(dǎo)致降低其添加劑作用以及其在體內(nèi)長(zhǎng)期滯留。3、甲殼低聚糖(在下文中被稱為“COS”)甲殼質(zhì)和殼聚糖是天然的多糖且最近引起了特別的關(guān)注。殼聚糖是大自然(螃蟹、蝦、甲殼類)中存在的甲殼質(zhì)的脫乙?；a(chǎn)物，并且是由β-1，4-連接的葡糖胺的聚合物構(gòu)成的天然的大分子多糖。由于具有過(guò)高的分子量，從而導(dǎo)致體內(nèi)吸收率或溶解度降低， 因此盡管殼聚糖具有優(yōu)異的生理活性，但是其應(yīng)用受到限制。在另一方面，甲殼低聚糖是甲殼質(zhì)和殼聚糖的部分分解產(chǎn)物，且具有高溶解度、允許多種化學(xué)修飾的高活性的伯胺基團(tuán)、高的體內(nèi)吸收率和抗菌活性同時(shí)具有殼聚糖的生理性質(zhì)。因此，已證實(shí)甲殼低聚糖可作為醫(yī)藥材料促進(jìn)抗粘連作用的表達(dá)。本發(fā)明的甲殼低聚糖的分子量的范圍是約0.5X IO3至約1.0X IO4Da,且優(yōu)選范圍為約1 X IO3至約5X 103Da。如果甲殼低聚糖的分子量低于0. 5 X IO3Da,這可能產(chǎn)生抗粘連作用的問(wèn)題。在另一方面，如果甲殼低聚糖的分子量高于1. OX 104，這可能導(dǎo)致體內(nèi)應(yīng)用的限制。以本發(fā)明的組合物的總重量計(jì)，甲殼低聚糖的含量的范圍是約0.05wt%至 15wt%,優(yōu)選為約0. Iwt %至IOwt %。如果甲殼低聚糖的含量低于0. 05wt %，這可能產(chǎn)生抗粘連作用的問(wèn)題。在另一方面，如果甲殼低聚糖的含量高于15wt%，這可能產(chǎn)生由于溶解度的生產(chǎn)工藝的問(wèn)題。本發(fā)明的組合物可配制成多種劑型，優(yōu)選為溶液劑或凝膠劑等?？赏ㄟ^(guò)添加藥學(xué)可接受的賦形劑或添加劑等來(lái)制備所述溶液劑或凝膠劑。例如可采用生理鹽水或蒸餾水。為了預(yù)防手術(shù)后在組織或器官之間的粘連，可根據(jù)以下通用方法采用包含有本發(fā)明的組合物的產(chǎn)品。1)確認(rèn)使損傷或者外科手術(shù)部位完全止血。2)確保在無(wú)菌的地方打開本產(chǎn)品的包裝，去掉注射器的瓶蓋且然后導(dǎo)管轉(zhuǎn)向固定到其上。3)將組合物充分施加到靶點(diǎn)。必要時(shí)，可采用例如噴霧器的輔助手段來(lái)實(shí)現(xiàn)所述溶液的有效應(yīng)用。4)給藥后棄去殘留的溶液。本發(fā)明的組合物的有效量的范圍優(yōu)選為約0. 01至約IOml/單位面積(Icm2)，且更優(yōu)選為約0. 1至5ml。所述組合物的有效量可根據(jù)多種因素而發(fā)生變化，所述多種因素為例如損傷或手術(shù)區(qū)域的深度、大小和位置，損傷區(qū)域的組織和器官特異性、本發(fā)明的組合物的劑量以及外科手術(shù)操作者的個(gè)人觀點(diǎn)。有益效果如上所述，本發(fā)明的用于預(yù)防粘連的組合物可通過(guò)采用不需要化學(xué)交聯(lián)的生物衍生的材料來(lái)減少異物反應(yīng)，在體內(nèi)停留一定時(shí)間，然后分解和吸收，不會(huì)干擾外科手術(shù)后的傷口的愈合，可在其應(yīng)用時(shí)方便使用，并且可預(yù)防粘連。


圖1為顯示將本發(fā)明的組合物向動(dòng)物給藥的照片。圖2為顯示根據(jù)本發(fā)明的對(duì)照組的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的代表性照片。圖3為顯示根據(jù)本發(fā)明的比較實(shí)施例的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的代表性照片。圖4和圖10為顯示在本發(fā)明的組合物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中粘連面積減少率(％ )的比較結(jié)果的圖。圖5和圖6為顯示本發(fā)明的實(shí)施例的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的代表性照片。圖7為顯示在本發(fā)明的組合物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中粘連程度的比較結(jié)果的圖。圖8為顯示在本發(fā)明的組合物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中粘連強(qiáng)度的比較結(jié)果的圖。圖9為顯示本發(fā)明的組合物的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中粘連面積的比較結(jié)果的圖。
具體實(shí)施例方式通過(guò)下文中給出的結(jié)合以下附圖而做出的詳細(xì)實(shí)施方式，本發(fā)明的這些和其它目的、優(yōu)點(diǎn)和特征以及實(shí)現(xiàn)其的方法將變得顯而易見。然而，本發(fā)明可以體現(xiàn)為不同的形式， 并且不應(yīng)解釋為限制本文中所提出的實(shí)施方式。相反，提供這些實(shí)施方式，使得該公開內(nèi)容將徹底和完整，并且將向本領(lǐng)域技術(shù)人員充分表達(dá)本發(fā)明的范圍。因此，本發(fā)明將僅由所附的權(quán)利要求書所限定。
cooes] WMmm ι ^ 4 吿丨丨減照細(xì)ffl刊麗占連_鋪綱勿比較實(shí)施例 1 :Guardix-sol作為由透明質(zhì)酸(HA)和羧甲基纖維素組成的抗粘連劑，采用市售的產(chǎn)品 (Guardix-sol,由韓國(guó)的 BIORANE CO.，LTD.制造)。比較實(shí)施例2將分子量為2. 5 X IO6至3 X IO6Da且粘度為30dl/g至!35dl/g的HA溶解于生理鹽水直到濃度為0. 5wt%。得到的水溶液在冷室中在4°C溶解約2天，從而得到包含有HA的凝膠組合物。比較實(shí)施例3以與實(shí)施例1相同的方法得到包含有HA的凝膠組合物，不同的是HA溶解于生理鹽水直到濃度為Iwt %。比較實(shí)施例4將羥乙基淀粉(HES，670/0. 75)溶解于生理鹽水直到濃度為8. Owt %,從而得到僅含有HES的組合物。^MM 1至5 制各用干予頁(yè)防粘連的句,含有誘明質(zhì)酸和羥乙某淀粉450/0. 7的會(huì)目合物實(shí)施例1將6% HES (450/0. 7)溶液溶解于生理鹽水中直到濃度為0. 03wt%,并將分子量為 2. 5X IO6至3X IO6Da且粘度為30dl/g至35dl/g的HA溶解于所獲得的生理鹽水溶液中直到濃度為Iwt %。得到的水溶液在冷室中在4°C溶解約2天，從而得到包含有HA和HES的凝膠組合物。實(shí)施例2以與實(shí)施例3相同的方法得到包含有HA和HES的凝膠組合物，不同的是HES溶解于生理鹽水直到濃度為0. 06wt%。實(shí)施例3以與實(shí)施例3相同的方法得到包含有HA和HES的凝膠組合物，不同的是HES溶解于生理鹽水直到濃度為0. 12wt%。實(shí)施例4以與實(shí)施例3相同的方法得到包含有HA和HES的凝膠組合物，不同的是HES溶解于生理鹽水直到濃度為0. 2#t%。實(shí)施例5以與實(shí)施例3相同的方法得到包含有HA和HES的凝膠組合物，不同的是HES溶解于生理鹽水直到濃度為0. 5wt%。^mme Mm^fmmm^^m^mmmf^mm670/0.75 mn^以與實(shí)施例1相同的方法得到包含有HA和HES的凝膠組合物，不同的是具有不同分子量和摩爾取代度的6% HES (670/0. 75)溶解于生理鹽水直到濃度為0. 5wt%。^MM 7 泡丨備用于予頁(yè)防粘連的包含有誘日月禾ΠΜ乙基淀| 264/0. 45的組合奪勿
以與實(shí)施例1相同的方法得到包含有HA和HES的凝膠組合物，不同的是具有不同分子量和摩爾取代度的10% HES (264/0. 45)溶解于生理鹽水直到濃度為0. 5wt%。實(shí)施例8 制備用于預(yù)防粘連的包含有誘明質(zhì)酸和甲殼低聚糖的組合物將分子量為IXlO3至5X103Da的甲殼低聚糖(在下文中被稱為“COS”，由韓國(guó) KITTOLIFE CO.，LTD.制造)溶解于生理鹽水直到濃度為0. 5wt %且HA溶解于所述溶液中直到濃度為lwt%。得到的水溶液在冷室中在4°C溶解約2天，從而得到包含有HA和COS 的凝膠組合物■棚列1射鼠,碰-目·輔牛員卿Φ傭■連i式駘采用大鼠盲腸-腹腔壁磨損模型評(píng)價(jià)比較實(shí)施例1至4和實(shí)施例1至8中制備的樣品的抗組織粘連性能。作為試驗(yàn)動(dòng)物，采用7周Sprague-Dawley雄性大鼠(SLC，日本) 并對(duì)其進(jìn)行分組(n = 5/組)。為了誘導(dǎo)粘連，通過(guò)腹腔注射鹽酸氯胺酮(0. lml/100g)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行麻醉，然后腹部剃毛并用70%乙醇消毒，然后在腹部的中線做4至5cm切口。 從切開的部位取出盲腸，用滅菌的紗布摩擦所述盲腸的漿膜(1.2cmX 1.2cm)直到發(fā)生出血，采用試劑勺使相對(duì)的腹膜(1.2cmX 1.2cm)損傷。用5-0縫線固定與所述摩擦損傷區(qū)域 Icm遠(yuǎn)的兩個(gè)點(diǎn)，使得兩個(gè)損傷的表面接觸，從而促使粘連的形成。將生理鹽水注入空白對(duì)照組。對(duì)于實(shí)驗(yàn)組，5ml的抗粘連溶液被注入每個(gè)損傷的區(qū)域(參照?qǐng)D1)。然后，縫合腹膜和皮膚。在手術(shù)完成后，在一周內(nèi)隨意給動(dòng)物喂食飼料和水，然后處死，并評(píng)價(jià)粘連。采用粘連評(píng)價(jià)系統(tǒng)，得到的分?jǐn)?shù)計(jì)算總和以及求平均值(Am. J. Obstet. Gynecol.，146，88-92，1983)。結(jié)果分別在表 1 至表 4 中給出。根據(jù)以下分為0至5等級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)粘連的程度(0 無(wú)粘連，1 一個(gè)薄膜狀粘連， 2 二個(gè)或二個(gè)以上薄膜狀粘連，3 病灶局部厚粘連，4 片狀局部粘連，5 伴隨有血管形成或一個(gè)或一個(gè)以上片狀密集粘連的非常厚的粘連)。根據(jù)以下分為1至4等級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)粘連的強(qiáng)度(1 容易被非常弱的力釋放的薄膜狀的粘連，2 需要適當(dāng)?shù)牧?lái)釋放粘連，3 采用相當(dāng)大的壓力釋放的粘連，4 難于釋放的或者需要非常高的壓力來(lái)釋放的非常強(qiáng)的粘連)。
_4] ^ ι.
權(quán)利要求
1.用于防止粘連的組合物，其包括透明質(zhì)酸和羥乙基淀粉或甲殼低聚糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述透明質(zhì)酸具有的分子量為0.8XIO6至 3Xl(fDa。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，以所述組合物的總重量計(jì)，所述透明質(zhì)酸的含量的范圍是0. 5 1%至5. 0wt%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述羥乙基淀粉具有的分子量為2.OX IO5至 LOXlO6Da,且具有的摩爾取代度為0. 75至0. 4。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述羥乙基淀粉具有的分子量為2.5X105至 6. 7 X IO5Da,且具有的摩爾取代度為0. 75至0. 4。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，以所述組合物的總重量計(jì)，所述羥乙基淀粉的含量范圍是0.2. 0wt%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述水溶性的甲殼低聚糖具有的分子量為 1父103至5\1030&。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中，以所述組合物的總重量計(jì)，所述水溶性的甲殼低聚糖的含量范圍是0. 1襯％至10wt%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述透明質(zhì)酸是從動(dòng)物組織中提取得到的或者是由發(fā)酵法制備得到的。
10.權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)所述的組合物在制備用于防止粘連的藥物制劑中的應(yīng)用。
11.用于防止手術(shù)后周圍器官或組織粘連的方法，包括向包含人類的哺乳動(dòng)物給予權(quán)利要求1至9任一項(xiàng)所述的組合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于防止組織粘連的組合物，其包括生物相容的透明質(zhì)酸和聚合物化合物。更具體地，本發(fā)明涉及包括沒(méi)有被化學(xué)交聯(lián)劑或化學(xué)改性劑修飾的透明質(zhì)酸的組合物及其制備方法，以及用于防止粘連的具有優(yōu)異性能的組合物。本發(fā)明的所述用于防止粘連的組合物顯示出物理屏障功能和新型粘連預(yù)防功能，從而抑制作為粘連基礎(chǔ)的血栓形成。與簡(jiǎn)單混合聚合物物質(zhì)起物理屏障作用的傳統(tǒng)組合物不同，本發(fā)明通過(guò)在人體內(nèi)經(jīng)歷分解、吸收和一段時(shí)間后的排泄而發(fā)揮作為物理屏障的更有效的作用，不會(huì)干擾外科手術(shù)后疤痕的愈合，并且由于在外科手術(shù)的區(qū)域的應(yīng)用是便利的因此顯示出優(yōu)異的效果。
文檔編號(hào)A61P41/00GK102231985SQ200980148062
公開日2011年11月2日 申請(qǐng)日期2009年11月25日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月1日
發(fā)明者廉準(zhǔn)皙, 申章湜, 趙一煥, 韓世光, 黃義鎮(zhèn) 申請(qǐng)人:新豐制藥株式會(huì)社, 浦項(xiàng)工科大學(xué)教