專利名稱：硝呋替莫用于治療由毛滴蟲目引起的疾病的制作方法
硝呋替莫用于治療由毛滴蟲目引起的疾病 本發(fā)明涉及硝呋替莫在治療由毛滴蟲目(Trichomonadida)和雙滴蟲目 (Diplomonadida)引起的疾病中的用途，所述疾病比如例如組織滴蟲病，特別是火雞組織滴 蟲病。硝基雜環(huán)化合物抗原生動(dòng)物疾病的功效原則上是已知的(1)。原生動(dòng)物包括其基本結(jié)構(gòu)是真核細(xì)胞的單核生物體。然而，更精確的系統(tǒng)分類學(xué) 顯示各個(gè)門(St^me)、綱、屬和種的習(xí)性、形態(tài)學(xué)和生化代謝方面有大的差異。這就是為何 依賴于其靶點(diǎn)和作用原理的化學(xué)品通常不會(huì)對(duì)所有的原生動(dòng)物都同樣地起作用，而是僅僅 對(duì)特定類群的原生動(dòng)物起作用0，3，4)。迄今為止，僅僅描述了硝呋替莫抗錐蟲屬的原生動(dòng)物種例如布氏錐蟲 {Trypanosoma foT/cei)和克氏錐蟲(斤沙浙^？劃腳 cruzi)的功效(5，DE -AS -1 170 957)。 錐蟲屬具有鞭毛，其最初在基體(“毛基體”，因此屬于動(dòng)基體目(Kinetoplastida))上，并 與基體一起發(fā)育成波動(dòng)膜。錐蟲屬主要生長(zhǎng)在血漿中，并由吸血的節(jié)肢動(dòng)物傳播。這些病原 體引起人類的查加斯病(“錐蟲病”)。硝呋替莫幾乎是目前起抗這些病原體的作用的唯一 化合物。該活性可能是基于抑制錐蟲谷胱甘酰亞精胺還原酶(Trypanothione Reduktase)， 一種錐蟲屬特異性酶。該酶在其它原生動(dòng)物病原體特別是毛滴蟲和組織滴蟲中不存在。迄今為止，還沒有描述硝呋替莫在毛滴蟲目和雙滴蟲目之內(nèi)的功效。毛滴蟲目全 都是寄生原生動(dòng)物，對(duì)其而言，多個(gè)(通常為4至6個(gè))鞭毛是典型的。一個(gè)顯著的形態(tài)特 征是生物體內(nèi)的收縮桿(Kontraktiler Mab，=珊瑚肋)，其參與運(yùn)動(dòng)。與動(dòng)基體目不同， 毛滴蟲目不具有線粒體，其是能量代謝的重要細(xì)胞器。取而代之，能量代謝發(fā)生在人們所說(shuō) 的氫酶體內(nèi)。在這些細(xì)胞器中，丙酮酸氧化脫羧，伴隨著ATP合成和鐵氧化還原蛋白-控 制的電子轉(zhuǎn)移(6)。這些單細(xì)胞寄生蟲通過分裂繁殖。沒有發(fā)現(xiàn)性階段或孢囊。毛滴蟲目 包括許多屬(特別是毛滴蟲屬和組織滴蟲屬)和其它許多種，但是大多數(shù)這些都是無(wú)害和 非病原的。然而，存在觸發(fā)嚴(yán)重的疾病和引起動(dòng)物飼養(yǎng)的重要經(jīng)濟(jì)損害的代表物。這些包 括毛滴蟲屬(特別是加氏毛滴蟲U. gallinae)和禽毛滴蟲(J. galIinarumY)、三魏}k (Tritrichomonas)屬(特別是胚胎三毛滴蟲、T. foetus)和豬三毛滴蟲、T. suis))和組 織滴蟲屬(特別是火雞組織滴蟲、H. meleagridis)) α鴿子和家禽的毛滴蟲病(Trichomonosis)是一種由加氏毛滴蟲ijrichomonas gallinae)和禽毛滴蟲、T. gallinarum)引起的傳染病。加氏毛滴蟲、T. gallinae)主要 寄生在咽、食道和嗉囊中。然而，在疾病期間，其它器官，主要是肝、心臟和肺也受到感染。 幼小鴿子的感染最早發(fā)生在在由潛伏感染的年長(zhǎng)動(dòng)物第一次飼喂鴿乳期間。其它傳染源是 受感染的飲用水或飼料。該疾病被認(rèn)為是幼年鴿子中最常見的疾病，引起嚴(yán)重?fù)p害，特別是 在繁殖群中。除了高死亡率之外，觀察到的癥狀為消化障礙、食欲不振、飲用水和食物的消 耗減少和飛行能力受限。禽毛滴蟲ijrichomorms gallinarum)寄生在雞和火雞的盲腸中。 該病引起生長(zhǎng)遲緩、嚴(yán)重腹瀉和肝臟壞死性炎癥。組織滴蟲病是一種由火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)引起的傳染病。 組織滴蟲是腸道寄生蟲。組織滴蟲病在火雞中特別重要，其也被稱為黑頭病。在火雞中，該疾病特別地是由病原體火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)引起的。除了火雞之外， 可被該病原體感染的其它動(dòng)物包括雞、珍珠雞、孔雀、野雞、鷓鴣和鵪鶉，其同時(shí)也是儲(chǔ)存宿主?；痣u組織滴蟲(Histomonas meleagridis)感染引起盲腸和肝臟的嚴(yán)重炎癥，因?yàn)?該病原體損害腸道組織，并經(jīng)由血液到達(dá)肝臟，在其中其引起壞死形成。一種該疾病的相伴 癥狀通常是循環(huán)衰竭，其可以由賦予該疾病名稱的患病動(dòng)物的黑藍(lán)色的頭部來(lái)鑒定。在受感染的動(dòng)物群例如家禽生產(chǎn)單位中，該疾病非?？斓貍鞑サ秸麄€(gè)群，由于其 非常高的死亡率(在某些情況下高達(dá)100%)而導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。由于其結(jié)構(gòu)性鞭毛，火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)屬于鞭毛蟲亞門 (鞭毛綱)和毛滴蟲目。該鞭毛蟲階段通過分裂在盲腸中繁殖。從受感染的盲腸開始，變形 蟲樣階段經(jīng)由血管滲透肝臟，在其中經(jīng)由大面積壞死而破壞肝臟(7)。因?yàn)樵谒拗魍?，該組織滴蟲病原體僅僅能存活很短時(shí)間，并且因?yàn)楫?dāng)穿過消化道 時(shí)，它們中的大多數(shù)被殺死，所以，組織滴蟲經(jīng)由直接途徑例如經(jīng)口攝取含組織滴蟲的新鮮 糞便而傳播是很少的。美國(guó)研究人員進(jìn)行的試驗(yàn)顯示在動(dòng)物試驗(yàn)中，火雞的感染經(jīng)由泄殖 腔與口服途徑相比更容易發(fā)生。因?yàn)樵诩S便已經(jīng)堆積之后，泄殖腔發(fā)生輕微的吸入，經(jīng)由該 途徑的感染很可能在常規(guī)條件下出現(xiàn)，比如經(jīng)由被污染的褥草。已經(jīng)證實(shí)經(jīng)由中間宿主的 病原傳播在科學(xué)上是毫無(wú)疑問的。其特別地為被稱為攜帶者(特別地作為火雞組織滴蟲 (Histomonas meleagridis)的轉(zhuǎn)運(yùn)載體)的盲腸蠕蟲雞異刺線蟲Ofeieraii1S gallinarum) (蛋或幼蟲)。組織滴蟲可以在具胚的異刺線蟲屬的蛋中保持感染至多4年。其它的中間 宿主可以是被異刺線蟲屬的蛋污染的蚯蚓和節(jié)肢動(dòng)物。另外，雞和其它家禽種類也存在潛 在的危險(xiǎn)。它們比火雞的敏感性低，通常載有病原體，但是在臨床上不易被感染；如此，它們 有助于傳播病原體?；痣u可以在任何齡期被感染；然而，所述疾病最通常出現(xiàn)在3至12周齡。在大多 數(shù)情況下，所述疾病的感染和表現(xiàn)之間的時(shí)期為7 -12天。死亡率可以高達(dá)100%，在感染后 第17天達(dá)到其最大值。從第8天開始，可以在盲腸中發(fā)現(xiàn)炎癥，從第10天開始，可以在肝 臟中發(fā)現(xiàn)炎癥。感染的動(dòng)物是反應(yīng)遲鈍的、疲憊的，它們的頭和翅膀下垂，它們拒絕飲食。排便硫 磺色的糞、腹瀉和之后甚至糞便中出現(xiàn)血液都是典型的。與該疾病相關(guān)的循環(huán)障礙引起頭 部的嚴(yán)重帶黑色的-藍(lán)色顏色，其賦予該疾病的名稱。.
所述疾病的過程主要由火雞的齡期和腸內(nèi)菌叢確定。感染大腸桿菌依c^i)、產(chǎn)氣莢 膜梭菌(C/osirii/i perfringens)或球蟲(Coccidien)的另外的細(xì)菌感染可以使該過程 惡化(8)?？梢允褂脕?lái)自盲腸和肝臟的天然樣品，借助于食鹽溶液進(jìn)行組織滴蟲病的診斷。 似變形蟲的活動(dòng)期是在相差顯微鏡下可辨別的。對(duì)于組織學(xué)研究，使用PAS染色。直到1950年，砷化合物(例如硝苯胂酸、卡巴胂、羅沙胂)是抗組織滴蟲病的僅有 的有效化合物。然而，眾所周知砷化合物通常不能足夠有效地治療一旦已經(jīng)確立的感染。一 個(gè)進(jìn)一步的缺點(diǎn)是其安全指數(shù)非常地低甚至兩倍劑量的羅沙胂就導(dǎo)致火雞的運(yùn)動(dòng)功能受 干擾。自從1960年，已經(jīng)例如在飲食或飲用水中使用了其它的硝基咪唑類或硝基呋喃類，但是自從90年代中期，EU和USA已經(jīng)逐漸禁止它們用于牲畜中和作為飼料添加劑。在 1997年，地美硝唑退出了 USA市場(chǎng)，在2001年，其被禁止在EU用作飼料添加劑。自從2003 年3月31日，即使硝呋索爾，在EU仍然被許可的唯一產(chǎn)品，由于安全問題而不再被使用。 因此，用于治療組織滴蟲病的藥物和用于預(yù)防控制組織滴蟲病的制劑目前和未來(lái)都不能獲得。避免感染所述疾病的唯一目前可獲得的策略包括衛(wèi)生措施、最佳化飼養(yǎng)密度和營(yíng) 養(yǎng)供應(yīng)，和避免病原體攜帶。這些措施不足以且單獨(dú)不能夠預(yù)防感染患病。未能提供抗組織滴蟲病的疫苗。例如，抗火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)的疫苗接種是生物學(xué)上不可能的，因?yàn)榧词乖诟腥局笠膊荒塬@得自然免 疫。一旦感染，動(dòng)物可能再次生病。經(jīng)由減毒活疫苗賦予免疫性的嘗試失敗。因此，存在用于治療由毛滴蟲目引起的疾病比如例如組織滴蟲病的活性物質(zhì)的需 要，其中活性物質(zhì)具有好的活性和好的毒理學(xué)性質(zhì)。令人驚奇地，我們目前發(fā)現(xiàn)硝呋替莫抗毛滴蟲目有效，硝呋替莫也具有好的毒理 學(xué)性質(zhì)。迄今為止，還沒有描述該活性，也沒有預(yù)期其好的毒理學(xué)性質(zhì)。本發(fā)明涉及
硝呋替莫在制備用于治療由毛滴蟲目引起的疾病的藥物中的用途。硝呋替莫為式(I)的化合物
任選地，可以考慮使用其常規(guī)可藥用鹽。此外，任選地，可以考慮使用該活性物質(zhì)的水 合物或其它溶劑合物，或者，任選地，使用水合物或其它溶劑合物的鹽。所述用途都可以是預(yù)防和治療的。毛滴蟲目包括組織滴蟲(Histomonas)屬、毛滴 蟲CTrichomonas)屬、三毛滴蟲(Tritrichomonas)屬。對(duì)于毛滴蟲屬，特別地可以提及加 氏毛滴蟲U. gallinae)和禽毛滴蟲(J. gallinarum)。對(duì)于三毛滴蟲屬，可以特別地提及 胚胎三毛滴蟲(7 Zbeto1S)、豬三毛滴蟲(7 SWi)和馬三毛滴蟲(7叫心·/)。對(duì)于組織 滴蟲屬，可以特別地提及火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)。雙滴蟲目包括六鞭毛蟲屬(Hexamita)。對(duì)于六鞭毛蟲屬，可以特別地提及鴿六鞭 毛蟲0 co^ffl^ae)、火雞六鞭毛蟲(/ ffleha^rii/is)和鮭六鞭毛蟲0 salmonis) 0優(yōu)選地控制組織滴蟲病。其由組織滴蟲屬物種(Histomonas spp.)引起。根據(jù)本 發(fā)明，非常特別地優(yōu)選地控制由火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)引起的組織滴蟲 病。硝呋替莫在控制組織滴蟲病中的活性不僅針對(duì)病原體的腸道階段，而且針對(duì)該病原體 的肝臟階段。根據(jù)本發(fā)明治療動(dòng)物?？商峒暗膶?shí)例為哺乳動(dòng)物，比如例如牛、馬、豬、狗、貓。優(yōu)選 地治療家禽，比如例如雞、珍珠雞、鷓鴣、鵪鶉、鴨、鵝、孔雀、野雞、鴿子，特別是火雞(Puten) (在此和火雞(Trutham)同義使用)?？梢詮?qiáng)調(diào)的疾病的實(shí)例為下述的
鴿子、火雞或家禽的毛滴蟲病是由禽毛滴蟲(I. gallinarum)和/或加氏毛滴蟲(J.
5gallinae)引起的。組織滴蟲病出現(xiàn)在雞、珍珠雞、孔雀、野雞、鷓鴣、鵪鶉中，特別地出現(xiàn)在火雞中?；?雞的組織滴蟲病(黑頭病)特別地是由火雞組織滴蟲(H. meleagridis)引起的。活性物質(zhì)直接施用或者以合適的制劑經(jīng)由腸內(nèi)、腸胃外或皮膚途徑施用?；钚晕镔|(zhì)的腸內(nèi)給藥是例如以粉末劑、栓劑、片劑、膠囊、糊劑、飲劑(Tr&iken)、顆 粒劑、獸用頓服藥、大丸劑、加藥飼料或飲用水的形式口服進(jìn)行的。皮膚給藥是例如以浸漬、 噴霧、沐浴、清洗、澆淋(Aufgiei^en)(澆潑和點(diǎn)注)及灑粉的形式進(jìn)行的。腸胃外給藥是 例如以注射劑(肌內(nèi)、皮下、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi))或植入物的形式進(jìn)行的。合適的制劑是
溶液，比如注射用溶液、口服溶液、稀釋之后口服給藥的濃縮物、用在皮膚上或體腔中 的溶液、澆淋制劑、凝膠劑；
乳劑和混懸劑，用于口服給藥或皮膚給藥和用于注射；半固體制劑；
其中活性物質(zhì)加入到軟膏基底或水包油型油乳劑基質(zhì)或油包水型乳劑基底中的制
劑；
固體制劑，比如粉末劑、預(yù)混物或濃縮物、顆粒劑、丸粒、片劑、大丸劑、膠囊；氣霧劑和 吸入劑，包含有效物質(zhì)的成型制品。注射用溶液是例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和皮下給藥?？诜芤簞┙?jīng)直接給藥。濃縮物是在預(yù)先稀釋至使用濃度之后口服給藥。施用至皮膚的溶液是滴在、涂在、擦在、噴射在或通過浸漬、沐浴或清洗施加到皮 膚上。凝膠劑是施用在皮膚或涂抹皮膚上或引入到體腔中。澆淋制劑是澆潑或點(diǎn)注在有限皮膚區(qū)域上，活性物質(zhì)穿透皮膚起全身作用或分布 在體表上。乳劑是油包水型或水包油型，可以口服、經(jīng)皮或作為注射劑施用?；鞈覄┛梢钥诜⒔?jīng)皮或作為注射劑施用。
半固體制劑可以口服或經(jīng)皮給藥。它們與上述混懸劑和乳劑的區(qū)別僅僅在于它們 更高的粘度。為了制備固體制劑，將活性物質(zhì)與合適的賦形劑混合，任選地加入添加劑，并使得 變成所需的形狀。根據(jù)本發(fā)明特別優(yōu)選的是在家禽中的用途。這優(yōu)選地通過口服給藥進(jìn)行，特別是 經(jīng)由加藥飼料或飲用水給藥。所有上述的藥物形式，使用的添加劑和助劑及這些藥物形式的制備原則上都是技 術(shù)人員已知的?；钚晕镔|(zhì)可以與增效劑或其它活性物質(zhì)組合存在。可提及的其它活性物質(zhì)為 抗球蟲藥，比如羅貝胍或安普羅銨，在一些情況下與葉酸拮抗藥(例如乙氧酰胺苯甲
酯(ethopabate)、乙胺嘧啶、依匹普林)組合；
聚醚抗生素類，比如莫能菌素、鹽霉素、拉沙洛西、甲基鹽霉素、生度米星或馬度米星； 三嗪酮類，比如托曲珠利、泊那珠利或地克珠利； 磺酰胺類(磺胺喹沙啉、磺胺二甲嘧啶、磺胺嘧啶)。
為了長(zhǎng)期的治療效果，推薦在圈養(yǎng)之前或結(jié)束增肥期之后對(duì)動(dòng)物欄消毒。蠕蟲，特別是異刺線蟲屬物種(幼蟲)(9)在組織滴蟲的傳播中充當(dāng)轉(zhuǎn)運(yùn)載體。因 此，在治療組織滴蟲病中，可能有意義的是進(jìn)行與驅(qū)腸蟲藥的組合治療。因此，已知當(dāng)從感 染時(shí)進(jìn)行治療時(shí)，驅(qū)腸蟲藥比如例如苯并咪唑類阿苯達(dá)唑或芬苯達(dá)唑具有體內(nèi)預(yù)防活性。 常用的驅(qū)腸蟲治療是從感染的時(shí)間點(diǎn)計(jì)14天。因此，通過與硝呋替莫和驅(qū)腸蟲藥的組合治 療，獲得了由毛滴蟲引起的疾病的改善治療?？商峒暗尿?qū)腸蟲藥為苯并咪唑類比如阿苯達(dá)唑、芬苯達(dá)唑，或ftObenzimidazole 比如非班太爾。這些物質(zhì)具有例如抗異刺線蟲屬物種活性，特別是抗雞異刺線蟲 (Heterakis gallinarum)，已知其充當(dāng)火雞組織滴蟲(Histomonas meleagridis)的轉(zhuǎn)運(yùn)載 體(10)。可提及的其它藥物為咪唑并噻唑類(左旋咪唑、四咪唑)，四氫嘧啶類(噻嘧啶、莫 侖太爾、奧克太爾)，脒衍生物例如阿米太爾、三苯雙脒(Tribendimidin)和去?；⒚滋?爾衍生物Bay d 9216和氨基乙腈衍生物(參見例如，Kaminsky等人，^Vatore 452，176-180 (2008年3月13日))，比如，例如AAD 1470。在驅(qū)腸蟲藥中可提及的優(yōu)選的物質(zhì)是縮酚酸肽驅(qū)腸蟲藥。縮酚酸肽驅(qū)腸蟲藥比如 PF1022A和Emod印sid具有抗各種動(dòng)物種類中的線蟲類的廣譜驅(qū)腸蟲藥活性，所述動(dòng)物種 類比如雞形目、嚙齒類動(dòng)物、爬行動(dòng)物、狗、貓、綿羊、牛、山羊、馬(11、12、13、14)。在此，已經(jīng) 證實(shí)PF1022A和Emod印sid具有抗Heterakoidea超家族的線蟲類的活性。這些包括例如 來(lái)自異刺線蟲屬家族，以及雞中的雞異刺線蟲LHetereikis ^aBi/^r )、鼠科動(dòng)物線蟲類 海綿異刺線蟲ijieterakis spumosa)。例如口服劑量50mg/kg的PF1022A具有抗后者的活 性，例如劑量范圍為l-10mg/kg的Emod印sid也具有抗后者的活性(13，15)。此外，已經(jīng)證 實(shí)例如PF1022A具有抗Heterakoidea超家族的其它代表、雞的雞蛔蟲(Ascaridia galli) (其屬于蛔蟲總科家庭)的活性。在此，所述化合物起作用的劑量為ang/kg (16)。因此，來(lái) 自環(huán)狀縮酚酸肽化合物類型的這些物質(zhì)特別地適于預(yù)防性控制組織滴蟲病。優(yōu)選使用的縮酚酸肽-驅(qū)腸蟲藥是24元環(huán)狀縮酚酸肽類?？商峒跋率龅?式(IIa)的化合物
權(quán)利要求
1.硝呋替莫用于制備用于治療由毛滴蟲目引起的疾病的藥物的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，用于治療由組織滴蟲引起的疾病。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，用于治療由火雞組織滴蟲引起的疾病。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，用于治療由毛滴蟲引起的疾病。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，用于治療由三毛滴蟲引起的疾病。
6.硝呋替莫，用于治療由毛滴蟲目引起的疾病。
7.試劑，包含硝呋替莫和驅(qū)腸蟲藥。
8.試劑，包含硝呋替莫和驅(qū)腸蟲藥縮酚酸肽。
全文摘要
本發(fā)明涉及硝呋替莫在治療由毛滴蟲引起的疾病中的用途，所述疾病比如例如組織滴蟲病，特別是火雞組織滴蟲病。
文檔編號(hào)A61K31/541GK102083440SQ200980125506
公開日2011年6月1日 申請(qǐng)日期2009年6月20日 優(yōu)先權(quán)日2008年7月2日
發(fā)明者A·哈德, G·格雷夫, R·弗羅伊曼 申請(qǐng)人:拜爾動(dòng)物保健有限責(zé)任公司