專利名稱：活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的藥物及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物的配方與制備工藝，更具體的涉及一種活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部 位群的藥物及其制備工藝。
背景技術(shù)：
目前，隨著人們生活水平的提高，高脂肪、高熱量食物的攝入量也日益增大。 脂肪肝、高血脂癥、肥胖癥、動脈硬化癥、腦血栓、冠心病等疾病的發(fā)病率逐年 增加，且呈年輕化趨勢。在臨床上一般采用西藥進(jìn)行降脂治療，以降膽固醇或甘 油三脂為主，長期服用會對人體產(chǎn)生很多毒副作用，如對肝臟、腎臟造成損害等。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的發(fā)明目的是針對上述問題，提供一種活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群 的藥物及其制備工藝，旨在達(dá)到降脂又保肝的目的。
本發(fā)明制備活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的藥物配方，其中有效部位群為總皂
苷和總有機(jī)酸；制備總皂苷的藥物配方組分的重量百分比為黃芪或黨參或五加皮30 45%，丹參或姜黃或山楂30 45%，蒺藜或葛根10 25%;制備總有機(jī)酸的藥物配方組分 的重量百分比為女貞80 90%，大黃或決明子10 20%。
本發(fā)明的制備工藝步驟為
1) 制備總皂苷的工藝步驟為將黃芪或黨參或五加皮、丹參或姜黃或山楂、蒺藜或
葛根按上述配方混合，用與原料重量比為8 12倍量的水提取.1 3次，每次 0.5 1.5小時，合并提取液，濾過，濾液用濃度為50 90%的乙醇醇沉，靜置 過夜，過濾，回收醇沉濾液，將醇沉濾液在ioo'c沸騰水浴濃縮并定容至含總 皂苷濃度為0.5 2g/ml的濃縮液，將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次 用體積為樹脂體積6 10倍的蒸餾水和30 70%的乙醇洗脫，洗脫流速l 3ml/min，收集30 70%的乙醇洗脫液，將洗脫液在IO(TC沸騰水浴蒸干制得總 皂苷；
2) 制備總有機(jī)酸的工藝步驟為將女貞、大黃或決明子按上述配方混合，用與原 料重量比為6 10倍量的50 95%乙醇回流提取1 3次，每次1 2h，合并提取液，濾過，回收濾液，將濾液在IO(TC沸騰水浴濃縮并定容至含總有機(jī)酸濃度 為0.5 2g/ml的濃縮液；將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為 樹脂體積6 10倍的蒸餾水、10 30%乙醇和70 95%乙醇梯度洗脫，洗脫流速 為l~3ml/min，收集70 95%乙醇洗脫液，將洗脫液在IO(TC沸騰水浴蒸干制得 總有機(jī)酸；
3)將重量比為1 : 1 10 : 1的總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。 本發(fā)明的顯著優(yōu)點為該藥物配方全部為純天然中藥材，既降脂又保肝，對人體
無毒副作用，并且制備工藝簡單、容易操作、提取效率高。
具體實施例方式
將黃疾或黨參或五加皮、丹參或姜黃或山楂、蒺藜或葛根按上述配方混合，用與原料 重量比為8 12倍量的水提取1 3次，每次O. 5 1.5小時，合并提取液，濾過，濾 液用濃度為50 90%的乙醇醇沉，靜置過夜，過濾，回收醇沉濾液，將醇沉濾液在100 'C沸騰水浴濃縮并定容至含總皂苷濃度為0.5 2g/ml的濃縮液，將濃縮液上AB-S型大 孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積6 10倍的蒸餾水和30 70%的乙醇洗脫，洗 脫流速1 3ml/min，收集30 70%的乙醇洗脫液，將洗脫液在IO(TC沸騰水浴蒸干制得 總皂苷。
將女貞、大黃或決明子按上述配方混合，用與原料重量比為6 10倍量的50 95% 乙醇回流提取1 3次，每次1 2h,合并提取液，濾過，回收濾液，將濾液在IOO'C 沸騰水浴濃縮并定容至含總有機(jī)酸濃度為0.5 2g/ml的濃縮液；將濃縮液上AB-S型大 孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積6 10倍的蒸餾水、10 30%乙醇和70 95%乙 醇梯度洗脫，洗脫流速為1 3ml/min，收集70 95%乙醇洗脫液，將洗脫液在IO(TC沸 騰水浴蒸干制得總有機(jī)酸。
將重量比為1 : 1 10 : 1的總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。 其中，所用藥材女貞為女貞Ligustrum lucidum. Ait.的成熟果實或干燥葉片；黃 芪是采用豆禾斗植物蒙古黃疾Astragalus membranaceus (Fisch- ) Bge、 Var mongholicus (Bge、) Hsio或膜莢黃芪Astragalus membranaceus (Fisch、 ) Bge、的干燥私黨參是采 用桔梗科植物黨參Codorwpsis pilosula (Franch.)Nannf.、素花黨參C. Pilosula Nannf. Var. modesta(Nannf. )L. T. Shen或川黨參C. tangshen Oliv.的根;五加皮是采用五加科植物 細(xì)柱五加Acanthopanax gracilistylusW. W, Smith的干燥根皮；丹參是采用唇形科植物丹參 Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥的根與根莖；姜黃是采用姜科植物姜黃Curcuma longa. L. 的根莖；山楂是采用薔薇科植物山里紅Crataegus pinnatifida Bge. var. major N. E. Br.或
5山楂C. pinnatifida Bge.的成熟果實；蒺藜是采用蒺藜科植物蒺藜Trib,ulus terrestris L. 的果實；葛根是采用豆科植物野葛Pueraria lobata (Willd.)0hwi或甘葛藤Pueraria thomsonii Benth.的干燥根；大黃是采用蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L.、唐古特大 黃R, tanguticum Maxim, ex Balf.或藥用大黃R. officinale Baill.的干燥根及根蓬；決明子 是采用豆科植物決明Cassia obtusifolia L.或小決明C. tora L.的干燥成熟種子。
制備總皂苷的工藝步驟中樹脂的用量與制備總皂苷原料用量的重量比為3 : 10， 制備總有機(jī)酸的工藝步驟中樹脂的用量與制備總有機(jī)酸原料用量的重量比為3 : 5。
實施例1
將黃芪、丹參、蒺藜按上述配方混合，用與原料重量比為8倍量的水提取2次， 每次1小時，合并提取液，濾過，濾液用濃度為70%的乙醇醇沉，靜置過夜，過濾，回 收醇沉濾液，將醇沉濾液在10(TC沸騰水浴濃縮并定容至含總皂苷濃度為lg/ml的濃縮 液，將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積8倍的蒸餾水和60% 的乙醇洗脫，洗脫流速1.5ml/min，收集60%的乙醇洗脫液，將洗脫液在10(TC沸騰水 浴蒸干制得總皂苷。
將女貞、大黃按上述配方混合，用與原料重量比為8倍量的80%乙醇回流提取2 次，每次lh，合并提取液，濾過，回收濾液，將濾液在10(TC沸騰水浴濃縮并定容至 含總有機(jī)酸濃度為lg/ml的濃縮液；將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積 為樹脂體積10倍的蒸餾水、10%乙醇和70%乙醇梯度洗脫，洗脫流速為L5ml/min，收 集70%乙醇洗脫液，洗脫液在10(TC沸騰水浴蒸干制得總有機(jī)酸。
將重量比為1 : 1的總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。 實施例2
將黨參、丹參、蒺藜按上述配方混合，用與原料重量比為10倍量的水提取2次， 每次1小時，合并提取液，濾過，濾液用濃度為80%的乙醇醇沉，靜置過夜，過濾，回 收醇沉濾液，將醇沉濾液在10(TC沸騰水浴濃縮并定容至含總皂苷濃度為lg/ml的濃縮 液，將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積8倍的蒸餾水和60% 的乙醇洗脫，洗脫流速1.5ml/min，收集60°/。的乙醇洗脫液，將洗脫液在IOO'C沸騰水 浴蒸午制得總皂苷。
將女貞、大黃按上述配方混合，用與原料重量比為8倍量的80%乙醇回流提取2
次，每次lh，合并提取液，濾過，回收濾液，將濾液在100'C沸騰水浴濃縮并定容至
含總有機(jī)酸濃度為lg/ml的濃縮液；將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積IO倍的蒸餾水、10%乙醇和70%乙醇梯度洗脫，洗脫流速為1.5ml/min，收 集70%乙醇洗脫液，將洗脫液在IOO'C沸騰水浴蒸干制得總有機(jī)酸。 將重量比為1 : 1的總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。
實施例3
將黃芪、山楂、蒺藜按上述配方混合，用與原料重量比為8倍量的水提取3次， 每次1小時，合并提取液，濾過，濾液用濃度為75%的乙醇醇沉，靜置過夜，過濾，回 收醇沉濾液，將醇沉濾液在IO(TC沸騰水浴濃縮并定容至含總皂苷濃度為lg/ml的濃縮 液，將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積8倍的蒸餾水和60% 的乙醇洗脫，洗脫流速1.5ml/min，收集60%的乙醇洗脫液，將洗脫液在IO(TC沸騰水 浴蒸干制得總皂苷。
將女貞、大黃按上述配方混合，用與原料重量比為8倍量的80%乙醇回流提取2 次，每次lh，合并提取液，濾過，回收濾液，將濾液在IO(TC沸騰水浴濃縮并定容至 含總有機(jī)酸濃度為lg/ml的濃縮液；將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積 為樹脂體積IO倍的蒸餾水、10%乙醇和70%乙醇梯度洗脫，洗脫流速為1.5ml/min，收 集70%乙醇洗脫液，將洗脫液在IO(TC沸騰水浴蒸干制得總有機(jī)酸。
將重量比為1 : 1的總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。
有效部位群的藥理研究試驗 (一)有效部位群對大鼠血脂的影響
大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)l周，隨機(jī)分為正?？瞻讓φ战M和造模組。正常組大鼠灌胃生理 鹽水；造模組大鼠采用灌胃脂肪乳劑法造模，脂肪乳劑組成10g膽固醇、20g豬油、 2g膽酸鈉、lg甲基硫氧嘧啶、20ml吐溫-80、 20ml丙二醇，加水適量混勻成100ml。 喂養(yǎng)7天后，眼眶取血，測血清TC、 TG。
根據(jù)造模組大鼠的體重及TC、 TG水平，隨機(jī)將其分成6組?？瞻讓φ战M、模型組、 氟伐他汀組(3.6mg'kg—。、原方組U400rag'kg—')、有效部位群高劑量組(375mg kg—1)、 有效部位群中劑量組U88mg'kg—。、有效部位群低劑量組(62.5mg*kg—0，每組10只。
大鼠按不同組別給不同樣品藥液，正常對照組每天每只灌胃蒸餾水(lml/100g) 兩次；模型組每天每只灌胃脂肪乳劑和蒸餾水各一次；給藥組每天每只灌胃脂肪乳劑 和不同藥物各一次。連續(xù)喂養(yǎng)和給藥30d。并分別于Od、 7d、 14d、 21d、 28d稱其體 重。末次給藥后禁食12小時(不禁水)，稱重后斷頭取血，分離血清，分別測定血脂各項指標(biāo)?？偰懝檀?TC)用氧化酶法測定、甘油三酯(TG)用氧化酶法測定、高密 度脂蛋白膽固醇(HDL-C)用直接法測定、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)用直接法 測定，結(jié)果見表1。
表1有效部位群治療實驗性大鼠高脂血癥的效果
組別n劑量TCTG肌LDLHDL/ LDL
(Wu/mg kg—')(CB/mmol I/1)(Cn/mmol * L—"(CEi/咖o1 I/1)(Cis/mmol * I/1)
空白對照組8_1. 2±0, 05AA0. 65±0. 070. 66 ±0. 04AA0. 25 ±0. 06AA3. 59 ±0. 39厶厶
模型組10—19. 5±1. 7"0, 87±0.012. 89±1.44**16. 21土1.44"0. 19±0. 01"
氟伐他汀組103,610. 1±2. 8AA0.31±0. 011.39±0. 079. 93 ±0. 89A0.81±0. 01
原方組9140016.5±5.80. 66 ±0. 072. 22±0. 3414. 02±1. 590. 17 ±0. 07
高劑量組9375U.5土2. 9厶0. 34 ±0. 031.64±0. 038. 52±0. 82。0. 18±0. 01
中劑量組918812. 6±4.90. 38 ±0.06L79士0, 2111. 56±1. 890. 19 ±0. 02
低劑量組962.513. 6±6,40.41 ±0.081.87±0. 2320. 66±4. 250. 18±0. 01
注t檢驗，各給藥組與模型組比較△ / <0.05, △△戶<0.01;與原方組比較A尸〈0.05;與 空白組比較*尸<0.05, **尸<0.01。
表l結(jié)果顯示模型組大鼠血清TC、 LDL含量明顯高于空白對照組(P<0.01)。有 效部位群各劑量組及氟伐他汀組可使大鼠血清TC、TG、LDL-C含量明顯降低(P〈0.05 0.01)，高劑量組大鼠血清TC、 LDL含量同模型組比較有顯著性差異(尸<0.05)，作用 強(qiáng)度與氟伐他汀相當(dāng)，且與原方組比較亦無顯著性差異(尸〉0.05)。提示提取部位為 全方藥效作用的活性部位，與全方藥效無明顯差別。
(二)有效部位群對大鼠急性肝損傷的影響.-
取30只大鼠雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組10只?？瞻讓φ战M、模型組灌胃生 理鹽水10ml/kg/d，有效部位群組灌胃有效部位群375mg/kg/d。各組連續(xù)灌胃給 藥7天，于最末一次給藥后lh除空白對照組灌胃花生油(5ml/kg)夕卜，其余各組均 灌胃25XCCl4花生油溶液5ml/kg，禁食過夜，16h后斷頭取血處死動物，收集血液， 分離血清，測定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、甘油三脂(TG)。結(jié)果見表2。
大鼠處死后立即剖腹，取出肝臟浸于10%的中性福爾馬林溶液中，固定3 4天， 常規(guī)石蠟切片，HE染色，光鏡觀察肝組織病理改變。肝臟損傷程度分級定為肝細(xì)胞 水腫數(shù)量百分比10 20%、 20 30%、 30 40%及》50%;肝細(xì)胞彌漫性脂變程度肝細(xì)胞無彌漫性脂變、肝細(xì)胞內(nèi)僅見細(xì)小脂滴；肝細(xì)胞小灶性壞死程度肝細(xì)胞無小灶 性壞死；肝小葉內(nèi)偶見幾個細(xì)胞壞死灶。結(jié)果見表3。
表2有效部位群對大鼠血清ALT、 TG的影響 組別 ^ ^ji 25%CC14 XTf
(Wmg kg—1) (ml/kg) (U/L) (腸l/g)
空白對照組~~§ 3 5 28.92±7.53"
模型組 6 — 5 376.82±37.68*
部位群組 8 375 5 307. 6±38.23A
注t檢驗，與空白組比較*尸<0.01;與模型組比較△尸<0.05， △△尸<0.01。
表2結(jié)果顯示模型組大鼠血清ALT水平較空白對照組顯著升高(P<0.01)，說明 CCU致急性肝損傷模型建立成功。有效部位群組大鼠血清ALT水平較模型組顯著降低 (尸<0.05)，血清TG水平較模型組明顯升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義(尸>0.05)。 表3有效部位群對實驗性大鼠肝臟病理組織學(xué)的影響
組別 n 正常水腫數(shù)量 水腫數(shù)量 水腫數(shù)量 水腫數(shù)量彌漫性小灶性
(10 20%) (20 30%) (30 40%)(》50%) 脂變 壞死
空白對照組8§ 5 5 5 55 5
模型組 6 0 1 1 2 2 6 6
部位群組 8 0 4 3 1 0 8 8
病理組織學(xué)結(jié)果顯示(一)肉眼觀察空白對照組所見肝臟呈暗紅褐色，其表面 光滑，質(zhì)中等；模型組肝臟增大呈暗灰紅色，甚者呈灰黃紅色，或見黃褐色小斑點， 包膜較緊張、光滑，質(zhì)較軟；有效部位群組肝臟輕度增大，表面呈暗紅褐色或微黃， 或偶見黃褐色小斑點，包膜較緊張，質(zhì)稍軟。(二)光鏡檢査空白對照組大鼠肝組織 結(jié)構(gòu)鏡下見肝索排列規(guī)則，肝細(xì)胞形態(tài)正常，細(xì)胞核圓或橢圓形，居中，肝竇及匯管 區(qū)無異常；模型組鏡下可見程度不等的肝細(xì)胞帶狀水腫、細(xì)胞索排列紊亂，以及廣泛 性輕度脂變和偶見小灶性壞死，大部分帶狀水腫為中央并向匯管區(qū)擴(kuò)延；而有效部位 群組肝細(xì)胞水腫數(shù)量、脂變與小灶性壞死均較模型組明顯減輕，尤以肝細(xì)胞水腫數(shù)量 減輕明顯，多數(shù)肝細(xì)胞接近空白對照組，證實了有效部位群對CCL4致肝損傷具有保護(hù) 作用。
0. 71 ±0.17' 0. 34±0. 15* 0. 37 ±0. 08權(quán)利要求
1.一種活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的藥物，其特征在于所述的有效部位群為總皂苷和總有機(jī)酸；所述制備總皂苷的藥物配方組分的重量百分比為黃芪30～45％，山楂30～45％，蒺藜10～25％；所述制備總有機(jī)酸的藥物配方組分的重量百分比為女貞80～90％，大黃10～20％。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的藥物，其特征在于所述女貞為女貞的成熟果實或干燥葉片。
3. —種如權(quán)利要求1或2所述活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的制備工藝，其特征在 于制備工藝步驟為1) 制備總皂苷的工藝步驟為將黃芪、山楂、蒺藜按上述配方混合，用與原料重 量比為8 12倍量的水提取1 3次，每次0. 5 1. 5小時，合并提取液，濾過， 濾液用濃度為50 90%的乙醇醇沉，靜置過夜，過濾，回收醇沉濾液，將醇沉 濾液在IO(TC沸騰水浴濃縮并定容至含總皂苷濃度為0.5 2g/ml的濃縮液，將 濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積6 10倍的蒸餾水 和30 70%的乙醇洗脫，洗脫流速1 3ml/min，收集30 70%的乙醇洗脫液， 將洗脫液在100。C沸騰水浴蒸干制得總皂苷；2) 制備總有機(jī)酸的工藝步驟為將女貞、大黃按上述配方混合，用與原料重量比 為6 10倍量的50 95%乙醇回流提取1 3次，每次1 2h，合并提取液，濾 過，回收濾液，將濾液在10(TC沸騰水浴濃縮并定容至含總有機(jī)酸濃度為0.5 2g/ml的濃縮液；將濃縮液上AB-S型大孔吸附樹脂柱，依次用體積為樹脂體積 6 10倍的蒸餾水、10 30%乙醇和70 95%乙醇梯度洗脫，洗脫流速為l 3ml/min，收集70 95%乙醇洗脫液，將洗脫液在IOO'C沸騰水浴蒸干制得總有 機(jī)酸；3) 將重量比為1 : 1 10 : 1的總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的制備工藝，其特征在于所述制備總皂苷的工藝步驟中樹脂的用量與制備總皂苷原料用量的重量比為3 : 10，所述制備總有機(jī)酸的工藝步驟中樹脂的用量與制備總有機(jī)酸原料用量的重量比為 3 5 o
全文摘要
本發(fā)明提供一種活脈調(diào)脂膠囊復(fù)方有效部位群的藥物及其制備工藝，該有效部位群為總皂苷和總有機(jī)酸，制總皂苷的藥物為黃芪，山楂，蒺藜；制總有機(jī)酸的藥物為女貞，大黃；將制總皂苷的藥物混合，用水提取后濾過，醇沉，醇沉濾液的水浴濃縮液上大孔吸附樹脂柱，依次蒸餾水、乙醇洗脫，洗脫液蒸干制得總皂苷；將制總有機(jī)酸的藥物混合用乙醇提取，濾過，濾液水浴濃縮后上大孔吸附樹脂柱，依次用蒸餾水，乙醇梯度洗脫，洗脫液蒸干制得總有機(jī)酸；總皂苷和總有機(jī)酸混合制成有效部位群。本發(fā)明的藥物配方全部為純天然中藥材，既降脂又保肝，對人體無毒副作用，制備工藝簡單、容易操作、提取效率高。
文檔編號A61K36/734GK101491608SQ20091000478
公開日2009年7月29日 申請日期2007年1月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年1月12日
發(fā)明者張小如, 徐榕青, 李孝棟, 王英豪 申請人:福建中醫(yī)學(xué)院