專利名稱：一種半仿生技術(shù)提取蜂膠活性成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是關(guān)于蜂膠中活性成分的新提取方法，屬于天然藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蜂膠作為一種天然藥物，其顯著的療效和神奇的多種功能已經(jīng)引起醫(yī)藥界的高度 重視。蜂膠是蜜蜂從膠原植物生枝腋芽處采集的樹脂類物質(zhì)與蜜蜂內(nèi)分泌物的復(fù)雜化合 物。蜂膠的化學(xué)成分非常的復(fù)雜，對蜂膠化學(xué)成分的研究始于德國。1910年Kustenmacher 從蜂膠中鑒定出肉桂醇和肉桂酸。現(xiàn)代科學(xué)分析從蜂膠中鑒定出305種化合物，其中黃酮 類71個，芳香酸與芳香酸酯類59個，氨基酸25個，醛與酮類19個，甾體類6個，糖類9個， 烴類25個，醇、酚類和其他化合物24個。新采集的蜂膠約含有55%樹脂和香膏，30%蜂蠟， 10%芳香揮發(fā)油，5%的花粉等雜物。蜂膠中豐富的黃酮類和萜烯類物質(zhì)具有獨(dú)特的生物學(xué) 作用。 黃酮類化合物泛指兩個苯環(huán)通過中央三碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列有機(jī)化合物。
它們的種類很多，大多在各環(huán)都有酚羥基取代，黃酮類化合物是人體所必需的營養(yǎng)素之一，
人體自身不能合成，只能從食物中攝取，目前國人黃酮攝取水平遠(yuǎn)未達(dá)到有益攝取量。黃酮
類化合物能使冠狀動脈、腦血管血流量增加，具有降低心肌耗氧量、抗D、律失常、軟化血管、
降血糖、降血脂、降低血液黏稠度、抗氧化、清除體內(nèi)自由基、抗衰老等作用。 蜂膠中所含黃酮類化合物的種類和數(shù)量之多是其他天然植物所不及的，現(xiàn)已分離
出來并已鑒定結(jié)構(gòu)的有70多種，如槲皮素、白楊素、金合歡素、蘆丁等，從蜂膠中提取和分
離黃酮類化合物并對其新的藥理學(xué)作用進(jìn)行研究一直受到人們重視。 天然蜂膠中活性功能性成分種類多，已報道多種方法對蜂膠中活性成分進(jìn)行提取 和分離，但每種提取方法提取的有效成分、含量及藥理作用存在差異同。從蜂膠中提取有效 成分的方法主要是根據(jù)相似相溶原理進(jìn)行溶液或溶劑提取，常用有熱水提取法、堿液提取 法、丙酮提取法、醇提取法、酶解法等方法。隨著提取技術(shù)和工藝的不斷發(fā)展，對于蜂膠中有 效成分的提取也取得了巨大的進(jìn)展。如超臨界多重萃取方法、超臨界-C02萃取方法、高 壓提取法、超聲波技術(shù)提取法、微波提取法等。近年來又發(fā)展出一種新的提取有效成分的方 法，即半仿生提取法，已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展。 半仿生提取法(semi-bionic extraction method,簡稱SBE法)是孫秀梅、張兆旺 等首先提出的關(guān)于中藥提取的新工藝。陳曉娟等通過正交試驗(yàn)優(yōu)選半仿生法提取杜仲葉中 綠原酸和黃酮的工藝條件為杜仲葉為原料，以磷酸氫二鈉-檸檬酸的緩沖溶液作為提取 液，m(杜仲葉)m(提取液)l : 20，提取液pH值分別為2.0、7.5、8.3在7(TC，每次提 取lh，提取3次；在此條件下，綠原酸的得率達(dá)1.44%，黃酮得率達(dá)0. 044%。
半仿生提取法(Semi-Bionic Extraction Method)簡稱SBE，是從生物藥劑學(xué)的角 度將整體藥物研究法與分子藥物研究法相結(jié)合，模擬口服藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)吸收的環(huán)境， 采用活性指導(dǎo)下的導(dǎo)向分離方法，是為經(jīng)消化道口服給藥的制劑設(shè)計的一種新的提取工 藝。半仿生提取法符合藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)過程、適合工業(yè)化生產(chǎn)、體現(xiàn)了中醫(yī)治病綜合成分作用的特點(diǎn)，又有利于用單體成分控制制劑質(zhì)量，在具體工藝選擇上既考慮了活性混合成 分又以單體成分作指標(biāo)，這樣不僅能充分發(fā)揮混合物的綜合作用又能利用單體成分控制中
藥制劑的質(zhì)量。而且有效成分損失少，成本低，生產(chǎn)周期短。半仿生提取法不但在一定程度 上促進(jìn)有效成分的溶出，而且還有利于制劑和使用。 半仿生法用于提取植物中的有效成分已經(jīng)取得了一定的成效，它對于復(fù)方制劑的 提取相當(dāng)有效。蜂膠是一種很復(fù)雜的化合物，里面的活性有效成分的物質(zhì)也很多，各自的化 學(xué)性質(zhì)及酸堿度也不一樣，所以半仿生法用于蜂膠有效成分的提取有很大的優(yōu)勢，是一種 很有潛力的方法。在本發(fā)明完成之前，關(guān)于用半仿生法提取蜂膠中的功能性成分未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一是提供了一種提取蜂膠活性成分的方法。 本發(fā)明的目的之二是提供了以蜂膠活性成分為藥物原料的研制口服液、滴丸、膠
囊劑等。 本發(fā)明的目的之三提供以蜂膠的活性成分作為主要的藥物用于預(yù)防和治療高血 脂、冠心病等疾病。 本發(fā)明的技術(shù)解決方案如下 取蜂膠原料，按照l : 4(m/v)的比例加入蒸餾水，在常溫下浸漬lh，并不斷攪拌。
將浸漬后的原料冷卻至5t:以下，過濾以除去蜂蠟。然后將原料冷凍(-『C至-3t:)i-5小
時，待原料變硬變脆后粉碎為14目的粗粉。然后按照l : 20[m(原料)v(有機(jī)溶劑)]
的量加入有機(jī)溶劑(氯仿乙酸乙酯80%乙醇，1 : i : 2)，用磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖
溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)溶液的ra分別為2. 0、7. 5、8. 3，用超聲波提取三次，超聲波功率為300W，溫度 為8(TC，超聲時間/間歇時間為4s/4s，超聲時間為10分鐘。提取完畢后合并三次提取所 得到的濾液，減壓蒸餾回收溶劑，將提取液濃縮為浸膏。然后將浸膏用20倍體積的乙醇溶
解，再以等體積的乙酸乙酯液提取三次，調(diào)節(jié)提取液的ra為3-8，靜置、產(chǎn)生沉淀，抽濾，將
提取物水洗至中性。然后40°C -50°C，0. 05MPa條件下減壓干燥，即得到本發(fā)明的蜂膠功能 性成分。 本發(fā)明所采用半仿生提取法，是利用〃 灰思維方式〃 ，將整體藥物研究法與分子 藥物研究法相結(jié)合，從生物藥劑學(xué)的角度為經(jīng)消化道給藥的中藥及其復(fù)方創(chuàng)立的一種提取 新技術(shù)。它模擬口服給藥及藥物經(jīng)胃腸道轉(zhuǎn)運(yùn)的過程，適合工業(yè)化生產(chǎn)，藥效物質(zhì)的提取完 全、提取率高，且不改變藥物原有的功能，生產(chǎn)周期短，成本低。本發(fā)明中采用的是半仿生法 有機(jī)溶劑提取工藝，三個不同的ra值是模擬的人體內(nèi)胃、小腸、大腸的體液環(huán)境，用復(fù)合有 機(jī)溶劑能更好的溶出蜂膠中的有效成分，另外，結(jié)合超聲波技術(shù)，它的空化作用對細(xì)胞膜的 破壞有助于蜂膠有效成分的釋放與溶出，超聲波使提取液不斷震蕩，有助于溶質(zhì)擴(kuò)散，同時 超聲波法大大縮短了提取時間，提高了有效成分的提取率和原料的利用率。
權(quán)利要求
一種半仿生技術(shù)提取蜂膠活性成分的方法，其特征在于包括以下步驟取蜂膠原料，按照1∶4(m/v)的比例加入蒸餾水，在常溫下浸漬1h，并不斷攪拌。將浸漬后的原料冷卻至5℃以下，過濾以除去蜂蠟。然后將原料冷凍。待原料變硬變脆后粉碎為14目的粗粉。然后按照1∶20[m(原料)∶v(有機(jī)溶劑)]的量加入有機(jī)溶劑，用磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)溶液的PH，用超聲波提取三次。提取完畢后合并三次提取所得到的濾液，減壓蒸餾回收溶劑，將提取液濃縮為浸膏。然后將浸膏用20倍體積的乙醇溶解，再以等體積的乙酸乙酯液提取三次，調(diào)節(jié)提取液的PH為3-8，靜置、產(chǎn)生沉淀，抽濾，將提取物水洗至中性。然后40℃-50℃，0.05MPa條件下減壓干燥，即得到本發(fā)明的蜂膠功能性成分。
2. 根據(jù)權(quán)利要求i所說的將原料冷凍，其特征在于溫度為-8t:至-3t:，冷凍時間為1-5小時。
3. 根據(jù)權(quán)利要求i所說的有機(jī)溶劑，其特征在于有機(jī)溶劑為氯仿乙酸乙酯80%乙 醇，i : i : 2。
4. 根據(jù)權(quán)利要求i所說的調(diào)節(jié)反應(yīng)溶液的PH，其特征在于該ra值分別為ra分別為2. 0、7. 5、8. 3。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所說的超聲波提取，其特征在于超聲波功率為300W，溫度為80°C ，超 聲時間/間歇時間為4s/4s，超聲時間為10分鐘。
全文摘要
取蜂膠原料，浸漬后冷卻至5℃以下，過濾以除去蜂蠟后將原料冷凍變硬變脆后粉碎。然后加入有機(jī)溶劑，用磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖溶液調(diào)節(jié)反應(yīng)溶液的pH分別為2.0、7.5、8.3，用超聲波提取三次。提取完畢后合并三次提取所得到的濾液，減壓蒸餾回收溶劑，將提取液濃縮為浸膏。然后將浸膏乙醇溶解，再以等體積的乙酸乙酯液提取三次，調(diào)節(jié)pH為3-8，靜置、產(chǎn)生沉淀，抽濾，將提取物水洗至中性。然后減壓干燥，即得到蜂膠功能性成分。該方法提取得到的蜂膠有效成分完全，提取時間短，產(chǎn)品得率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號A61K35/64GK101757037SQ200810121710
公開日2010年6月30日 申請日期2008年10月23日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月23日
發(fā)明者吳菁, 陳群 申請人:湖州來色生物基因工程有限公司;吳菁