專(zhuān)利名稱(chēng)：一種用于治療白血病的中藥組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于治療白血病的中藥組合物及其制備方法，屬于中藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
白血病是造血組織的惡性疾病。其特點(diǎn)是骨髓及其他造血組織中有大量白血病細(xì)胞無(wú)限制地增生，并進(jìn)入外周血液，而正常血細(xì)胞的制造被明顯抑制，該病居年輕人惡性疾病中的首位，病因至今仍不完全清楚，病毒可能是主要的致病因子，但還有許多因素如放射、化學(xué)毒物(苯等)或藥物、遺傳素質(zhì)等可能是致病的輔因子。根據(jù)白血病細(xì)胞不成熟的程度和白血病的自然病程，分為急性和慢性?xún)纱箢?lèi)。根據(jù)增生細(xì)胞類(lèi)型，可分為粒細(xì)胞性、淋巴細(xì)胞性和單核細(xì)胞性三類(lèi)。主要表現(xiàn)為感染、發(fā)熱、貧血和出血。
主要治療有下列兒類(lèi)化學(xué)治療、放射治療、標(biāo)靶治療。部分高危險(xiǎn)性病人，
需要進(jìn)行骨髓移植。近i o年來(lái)，隨著分子生物學(xué)、生物遺傳學(xué)的進(jìn)展，對(duì)白
血病的病因病理認(rèn)識(shí)更加深入，同時(shí)新療法、新藥物的發(fā)現(xiàn)以及中藥的使用，使白血病預(yù)后得到極大的改觀。
中醫(yī)學(xué)無(wú)"白血病"這一病名，根據(jù)其臨床表現(xiàn)如發(fā)熱、貧血、出血、肝脾及淋巴結(jié)腫大等,可歸于中醫(yī)"虛勞"、"急勞"、"熱勞"、"血證"、"痰核"等范疇。雖然無(wú)統(tǒng)一辨證依據(jù),但中醫(yī)白血病辨證分型的總趨勢(shì)還是以氣陰兩虛型、氣血兩虛型、熱毒蘊(yùn)結(jié)型和血瘀阻滯型為主。
本發(fā)明人認(rèn)為白血病的病因主要是由"毒邪入血"所引起，這種邪毒進(jìn)入機(jī)體后多能化熱傷陰,因而又將這種毒邪稱(chēng)為火熱之邪，也稱(chēng)之為火毒、熱毒。除此之外,邪毒還應(yīng)包括內(nèi)傷所致的內(nèi)毒。邪毒在一定內(nèi)因條件下入侵人體的臟腑經(jīng)絡(luò),由表及里,或毒自?xún)?nèi)而生,內(nèi)外合毒。邪毒蘊(yùn)積于內(nèi)，日久化熱。所以治則當(dāng)以清熱解毒為主。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種新的中藥組合物，該組合物具有清熱、解毒、活血的作用，用于治療各種急慢性白血病。
本發(fā)明的另 一個(gè)目的是提供上述中藥組合物的制備方法。
本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的
本發(fā)明是由下述重量配比的原料制成的雄黃0. 05-0. 1份、青黛1. 5-3份、牛黃0. 15-0. 35份、天竺黃3-9份、當(dāng)歸6-12份、川芎3-9份、冰片0. 15-0. 3份。
優(yōu)選的重量份配比為雄黃0.08份、青黛2份、牛黃0.2份、天竺黃6份、當(dāng)歸9份、川芎6份、冰片0.2份。
本發(fā)明中藥組合物的制備方法如下
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎水提取或不同濃度乙醇提取或水提醇沉，或水蒸汽蒸餾提取揮發(fā)油藥渣水提取或不同濃度乙醇提取或水提醇沉，還可進(jìn)一步用大
孔樹(shù)脂柱純化，得到天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取
物、雄黃、青黛、牛黃、冰片混合，加入適量輔料，制備成藥學(xué)上可接受的固體口服制劑，例如膠囊劑、片劑、丸劑、滴丸劑等。
其中，天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物的優(yōu)選制備方法為
天竺黃、當(dāng)歸、川芎加5倍量水，煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾渣加入4倍量水，煎1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，濾液減壓濃縮至藥液體積(L)與藥材重量(Kg)比為1: 0.9-1.1，加入乙醇使藥液含醇濃度在70%，靜置，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35 (50。C)的稠膏，減壓干燥(60°C， -0.08Mpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物。
天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物的另1尤選制備方法為
天竺黃、當(dāng)歸、川芎加8倍量70%乙醇提取，2次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35 (50°C)的稠膏，減壓干燥(60°C， -0.08Mpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物。
本發(fā)明中藥組合物優(yōu)選的滴丸劑的制備方法如下
將聚乙二醇4000:聚乙二醇6000按3: l的比例加熱熔融，加入天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片的細(xì)粉，混勻，60-8(TC保溫，滴入冷卻的二甲硅油中，待滴丸冷卻后取出，瀝凈并擦除二甲硅油，即得滴丸。
本發(fā)明中藥組合物優(yōu)選的丸劑的制備方法如下
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，加入適量蜂蜜，混和均勻，制丸劑。
本發(fā)明屮藥組合物優(yōu)選的膠囊劑的制備方法如下
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，加
入乳糖，混勻，用95%乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，即得膠囊劑。
本發(fā)明中藥組合物另一優(yōu)選的膠囊劑的制備方法如下
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，干燥，裝入膠囊，即得膠囊劑。
本發(fā)明中藥組合物優(yōu)選的片劑的制備方法如下將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，加入乳糖，混勻，制粒，干燥，加入硬脂酸鎂適量，混勻，壓片，包衣，即得片劑。
本發(fā)明藥物組合物的配伍機(jī)理如下
本發(fā)明人認(rèn)為白血病的病因主要是由"毒邪入血"所引起，這種邪毒進(jìn)入機(jī)體后多能化熱傷陰，因而又將這種毒邪稱(chēng)為火熱之邪,也稱(chēng)之為火毒、熱毒。邪毒在一定內(nèi)因條件下入侵人體的臟腑經(jīng)絡(luò),由表及里,或毒自?xún)?nèi)而生,內(nèi)外合毒。如果邪毒量少力弱則起病緩，即有一個(gè)潛伏期,或病程較長(zhǎng)。邪毒蘊(yùn)積于內(nèi),日久化熱,耗氣傷陰，因而患者早期常表現(xiàn)為氣陰耗傷的證候,臨床表現(xiàn)為氣陰兩虛型,為早期或輕型患者;邪毒入里,傷及氣血,出現(xiàn)氣血雙虧證候,屬氣血兩虛型;毒邪進(jìn)一步深入,侵入營(yíng)血,攻注骨髓、肝脾及三焦,使陰陽(yáng)失調(diào)，致造血器官功能障礙，引起白血病細(xì)胞顯著增生的現(xiàn)象,出現(xiàn)壯熱、煩渴、衄血、發(fā)斑等熱毒熾盛表現(xiàn)。若邪毒內(nèi)陷心包則出現(xiàn)神昏譫語(yǔ)等證候,如不及時(shí)救治,出現(xiàn)氣陰衰竭，病入膏肓,難以救治。此多在前兩型基礎(chǔ)上病情惡化而形成,也可因邪毒力很強(qiáng),或者正氣極虛，邪毒直接侵入營(yíng)血,攻注骨髓，一發(fā)病即見(jiàn)熱毒熾盛現(xiàn)象。邪毒內(nèi)蘊(yùn),加之內(nèi)傷七情,造成熱灼沒(méi)液，血液黏稠,氣機(jī)郁滯，終致氣血瘀滯,熱灼痰凝,氣滯痰氣凝結(jié),則漸成癥積、瘰疬、惡核而見(jiàn)肝脾淋巴結(jié)腫大。
依據(jù)以上白血病的病因病程的分析，治療白血病當(dāng)以清熱解毒為主，活血化瘀為輔。在本發(fā)明中藥組合物中，各藥物的作用機(jī)理如下
雄黃硫化物類(lèi)礦物雄黃族雄黃，主含二硫化—砷(As2S2)。辛，溫；有毒。歸肝、大腸經(jīng)。解毒殺蟲(chóng)，燥濕祛痰，截瘧。用于癰腫疔瘡，蛇蟲(chóng)咬傷，蟲(chóng)積腹痛，驚癇，瘧疾。
青黛爵床科植物馬藍(lán)Baphicacanthus cusia (Nees) Bremek.、蓼科植物蓼藍(lán)Polygonum tinctorium Ait. 或十字花禾斗植物蔣藍(lán)Isatis indigoticaFort.的葉或莖葉經(jīng)加工制得的干燥粉末或團(tuán)塊。咸，寒。歸肝經(jīng)。清熱解毒，涼血，定驚。用于溫毒發(fā)斑，血熱吐衄，胸痛咳血，口瘡，癢腮，喉痹，小兒驚癇。
牛黃甘，涼。歸心、肝經(jīng)。清心，豁痰，開(kāi)竅，涼肝，息風(fēng)，解毒。用
于熱病神昏，中風(fēng)痰迷，驚癇抽搐，癲癇發(fā)狂，咽喉腫痛，口舌生瘡，癰腫疔瘡。
天竺黃本品為禾本科植物青皮竹Bambusa textilis McClure或華思勞竹SchizostachyumchinenseRendle等桿內(nèi)的分泌液干燥后的塊狀物。甘，寒。歸心、
肝經(jīng)。清熱豁痰，涼心定驚。用于熱病神昏，中風(fēng)痰迷，小兒痰熱驚癇、抽搐、夜啼。
當(dāng)歸甘、辛，溫。歸肝、心、脾經(jīng)。補(bǔ)血活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)腸通便。用于血虛萎黃，眩暈心悸，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，虛寒腹痛，腸燥便秘，風(fēng)濕痹痛，跌撲損傷，癰疽瘡瘍。
川芎辛，溫。歸肝、膽、心包經(jīng)。活血行氣，祛風(fēng)止痛。用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕腹痛，胸脅刺痛，跌撲腫痛，頭痛，風(fēng)濕痹痛。
冰片辛、苦，微寒。歸心、脾、肺經(jīng)。開(kāi)竅醒神，清熱止痛。用于熱病神昏、痙厥，中風(fēng)痰厥，氣郁暴厥，中惡昏迷，目赤，口瘡，咽喉腫痛，耳道流膿。
砷作為抗腫瘤藥物在我國(guó)己有百年歷史，如過(guò)去應(yīng)用牛黃解毒片(含雄黃)
及雄黃治療慢性粒細(xì)胞白血病(CML)。 70年代初期，我國(guó)率先用砷劑治療急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)，獲得較高的臨床緩解率。
雄黃的主要成分為硫化砷，研究發(fā)現(xiàn)其中治療白血病的主要化合物為二硫化二砷(As2S2 )。北京醫(yī)科大學(xué)血液病研究所報(bào)告單用雄黃治療急性早幼粒細(xì)胞白血病38例，其中6例為對(duì)多種藥物耐藥的復(fù)發(fā)病人，2例為ATRA及化療藥物部分耐藥的復(fù)發(fā)病人，另30例為經(jīng)ATRA治療后達(dá)完全緩解病例，治療方案為1000 1500mg d-1，2 3周為'療程，療程間隔2 3周，總療程2年半。結(jié)果經(jīng)1 3療程雄黃治療后，8例部分或完全耐藥的病人完全緩解，30例于完全緩解期接受雄黃治療的病例，除3例因其它嚴(yán)重合并癥或雄黃的副作用退出治療外，其余27例均持續(xù)完全緩解，所有35例病人至1997年一直存活，3年實(shí)際生存率為100% 。早在1981年周藹祥等人已證明雄黃治療白血病有效，完全緩解率72% ，部分緩解28% ，總有效率100%。 1998年唐由君應(yīng)用含雄黃的中成藥六神丸、西黃丸、紫金錠治療急慢性白血病獲得一定療效。1999年楊新中報(bào)告運(yùn)用由雄黃等屮藥組方的純中藥制劑治療急慢性白血病，療效較好。此結(jié)果證實(shí)了雄黃對(duì)APL治療的高效性及特異清除APL克隆至基因水平的作用。(雄黃等砷劑治療白血病的機(jī)理及臨床應(yīng)用，解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)第19巻第2期)
目前研究證明誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是雄黃抗腫瘤作用的一種比較明確而重要的機(jī)制，不同學(xué)者采用不同的惡性血液病細(xì)胞對(duì)其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的機(jī)制進(jìn)行了深入研究。在細(xì)胞凋亡的分子生物學(xué)研究過(guò)程中，人們發(fā)現(xiàn)多種基因參與細(xì)胞凋亡的調(diào)控，其中bcl-2基因的作用備受關(guān)注。bcl-2的過(guò)度表達(dá)不僅可有效阻止包括代謝產(chǎn)物積累、自由基等誘發(fā)的細(xì)胞凋亡，而且能夠抑制許多因素(如射線和癌基因)介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。 一些研究發(fā)現(xiàn)bcl - 2基因家族蛋白表達(dá)水平的變化能顯著改變腫瘤細(xì)胞株對(duì)化療藥物誘導(dǎo)凋亡的阻抗。(雄黃誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡的研究，現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)2006年1月第14巻第1期)
在本發(fā)明中藥組合物中以雄黃作為君藥，利用其"以毒攻毒"的特性，作為產(chǎn)生治療效果的主要藥物，青黛、牛黃、天竺黃共為臣藥取其清熱、解毒、涼血的功效以配合和貫徹清熱解毒的中醫(yī)治療原則，另外，當(dāng)歸、川芎活血，冰片開(kāi)竅醒神共為佐使，七藥合用共奏清熱解毒、活血化瘀、止痛、涼血之功效。
本發(fā)明中藥組合物具有清熱、解毒、活血的作用，用于治療各種急慢性白血病，如急性白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、真性紅細(xì)胞增多癥、急性早幼粒細(xì)
胞白血病等。
以下通過(guò)具體實(shí)施方式
，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明具體的實(shí)施方式實(shí)施例1:
雄黃O. 08kg、青黛2kg、牛黃O. 2kg、天竺黃6kg、當(dāng)歸9kg、川芎6kg、冰片0. 2 kg
大竺黃、當(dāng)歸、川芍加5倍量水，煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾渣加入4倍量水，煎1小吋，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，濾液減壓濃縮至21L，加入乙醇使藥液含醇濃度在70%，靜置，濾過(guò)，濃縮.節(jié)相對(duì)密度為1.30-1.35 (50°C)的稠膏，減壓干燥(60°C， -O.OSMpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；
將30kg聚乙二醇4000和15kg聚乙二醇6000加熱熔融，加入天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片的細(xì)粉，混勻，60-8(TC保溫，滴入冷卻的二甲硅油中，待滴丸冷卻后取出，瀝凈并擦除二甲硅油，即得滴丸。
實(shí)施例2:
雄黃O. 08kg、青黛2kg、牛黃O. 2kg、天竺黃6 kg、當(dāng)歸9kg、川藎6kg、冰片0. 2 kg
天竺黃、當(dāng)歸、川芎加5倍量水，煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾渣加入4倍量水，煎1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，濾液減壓濃縮至12L，加入乙醇使藥液含醇濃度在70%，靜置，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35 (50°C)的稠膏，減壓干燥(6(TC， -O.OSMpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，加入適量蜂蜜，混和均勻，制丸劑。
實(shí)施例3:
雄黃O. 08kg、青黛2kg、牛黃O. 2kg、天竺黃6 kg、當(dāng)歸9 kg、川芎6 kg、冰片0. 2 kg天竺黃、當(dāng)歸、川芎加8倍量70%乙醇提取，2次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1. 30-1. 35 (50°C)的稠膏，減壓干燥(60°C， -0.08Mpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、牛黃、青黛、冰片粉碎成細(xì)粉，加入20kg乳糖，混勻，用95%乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，即得膠囊劑。
實(shí)施例4:
雄黃O. 08kg、青黛2 kg、牛黃0.2 kg、天竺黃9 kg、當(dāng)歸12 kg、川芎9kg、冰片0. 2 kg
天竺黃、當(dāng)歸、川芎加5倍量水，煎煮2小時(shí)，濾過(guò)，濾渣加入4倍量水，煎1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，濾液減壓濃縮至15L，加入乙醇使藥液含醇濃度在70%，靜置，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35 (5(TC)的稠膏，減壓干燥(60°C， -O.OSMpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，干燥，裝入膠囊，即得膠囊劑。
實(shí)施例5:
雄黃O. 08kg、青黛2kg、牛黃O. 2kg、大竺黃3kg、當(dāng)歸6kg、川芎3 kg、冰片0. 2 kg
天竺黃、當(dāng)歸、川芎加8倍量70%乙醇提取，2次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1. 30-1. 35 (50°C)的稠膏，減壓干燥(6CTC， -0.08Mpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；
將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，加入15kg乳糖，混勻，制粒，干燥，加入硬脂酸鎂適量，混勻，壓片，包衣，即得片劑。
通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明所述藥物組合物的有益效果本發(fā)明藥物組合物對(duì)可移植性小鼠淋巴細(xì)胞白血病(L7212)治療作用的實(shí)驗(yàn)研究
1材料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)材料本發(fā)明藥液、碘化丙啶、大鼠抗小鼠單克隆抗體(anti-CD3-PE、 anti-CD4-FITC、 anti-CD8-FITC)。
近交系小鼠，鼠齡5-8周，體重18-24g，雌雄各半。流式細(xì)胞儀。L7212白血病細(xì)胞株。
1.2實(shí)驗(yàn)方法按文獻(xiàn)(褚建新，齊淑玲，雷健玲，等.可移植性小鼠白血病模型(L7212)的建立及其生物學(xué)特性[J].中華腫瘤雜志，1981,3(4): 287)方法復(fù)制L7212白血病模型。將小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、正常給藥組(中藥高劑量)、L7212模型組、L7212中藥1組(中藥高劑量)和L7212中藥2組(中藥中劑量)。正常給藥組、L7212中藥1組和L7212中藥2組予本發(fā)明藥液(高劑量中藥為含生藥8g/ml的藥液，中劑量中藥為含生藥4g/ml的藥液)0. 3ml/只灌胃，正常對(duì)照組和L7212模型組予等體積生理鹽水。各組均于接種次日灌胃給藥，每日l(shuí)次，共給藥7d。
1.3觀測(cè)指標(biāo) (1)生存時(shí)間用公式(T-C) /CX100X計(jì)算，生命延長(zhǎng)率T為治療組平均生存天數(shù)，C為對(duì)照組平均生存天數(shù)。(2)外周血白細(xì)胞總數(shù)及分類(lèi)計(jì)數(shù)，骨髓有核細(xì)胞涂片分類(lèi)計(jì)數(shù)，肝、脾、胸腺指數(shù)。(3)殘留白血病細(xì)胞的測(cè)定按文獻(xiàn)(鄭德先，吳克復(fù)，褚建新.現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)血液學(xué)研究方法與技術(shù)[M].北京北京醫(yī)科大學(xué) 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1999,510)方法，采用生物移植試驗(yàn)檢測(cè)。(4)細(xì)胞增殖周期按文獻(xiàn)(姜泊，張亞歷，周殿元.分子生物學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法[M].北京人民軍醫(yī)出版社1996， 118)方法，以流式細(xì)胞儀檢測(cè)。T淋巴細(xì)胞亞群以流式細(xì)胞儀一檢測(cè)。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料以(；±S)表示，采用t檢驗(yàn)。
2結(jié)果
2.1各組生存時(shí)間比較見(jiàn)表l。結(jié)果小:第l、 2批實(shí)驗(yàn)中，L7212屮藥組較L7212模型組生存吋間均有所延長(zhǎng)(p<0. 05或0. 01)， L7212屮藥1、 2組組間生存時(shí)間差異無(wú)顯著性(p〉0.05)一。
表l各組生存時(shí)間比較(d， ；±S)
組別 實(shí)驗(yàn)批數(shù)n 生存時(shí)間 生命延長(zhǎng)率(％)
L7212模荊組167. 8±0. 7
L7212中藥1組1612. 3±1. 0 **27. 3**
L7212中藥2組1611. 3±1. 3*22. 3*
L7212模型組267. 0±0. 8
L7212中藥1組268. 6±0. 7*10. 8
—W L7212投刑組比較，*p<0. 05， **p<0. 01。下同。
2.2各組外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi)比較見(jiàn)表2。結(jié)果不L7212模型組和L7212中藥1組小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)在接種后第5日已明顯升高，但差異無(wú)顯著性(p>0.05)。接種后第8日，兩組小鼠外周血涂片中已可見(jiàn)大量白血病細(xì)胞，而L7212中藥1組白血病細(xì)胞百分比低于L7212模型組(p<0.01)。
表2各組外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)及白血病細(xì)胞百分比比較(；±S)_
組別_時(shí)間 n f^細(xì)胞計(jì)數(shù)(X109/L) A血病細(xì)胞百分比(％)
L7212模荊組 接種后第l日 3 16.8±1.5 0L7212屮藥1組接種后第1日 317. 5±2. 50
L7212模型組 接種后第5日 323. 5±3. 02. 6±0.9
L7212中藥l組接種jH第5日 320. 1±3. 12. 0±0. 7
L7212模型組 接種后第8日 3112. 1±21. 526. 2±3. 5
L7212中藥l組接種后第8日 353. 4±21. 1**16. 3±3. l林
2.3各組骨髓白血病細(xì)胞百分比比較見(jiàn)表3。接種后第5日，小鼠骨髓中 已出現(xiàn)少量白血病細(xì)胞，但兩組結(jié)果相近(p>0.05)。接種后第8日，L7212中 藥1組小鼠骨髓中白血病細(xì)胞百分比明顯低于L7212模型組，但由于觀察例數(shù) 少，未作統(tǒng)計(jì)。表3各組骨髓白血病細(xì)胞百分比比較(％，
組別 時(shí)間n甶血病細(xì)胞百分比
L7212投刑組 接種后第5日34. 0±1. 1
1.7212中藥l組 接種后第5曰33. 6±1. 2
L7212投型組 接種后第8日124. 5
1.7212中藥l組 接種后第8日122. 3
2. 4各組肝臟、脾臟、胸腺指數(shù)比較L7212模型組和L7212中藥1組接種后第5 H，活殺的小鼠(6只)及白血病死亡小鼠(4批，共44只)的肝臟、脾臟指數(shù)相近(p〉0.05)。正常給藥組小鼠的脾臟、胸腺指數(shù)相近(p>0.05)。
2.5各組殘留白血病細(xì)胞測(cè)定結(jié)果比較L7212模型組與L7212中藥1、 2組小鼠生存時(shí)間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.6各組骨髓細(xì)胞增殖周期分布比較見(jiàn)表4。結(jié)果顯示L7212中藥1組小鼠骨髓細(xì)胞G2/G1比值較止常對(duì)照組和L7212模型組降低。
表4各組骨髓細(xì)胞增殖周期分布比較(x±S)
組別 n計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù) G0十G1(%) S (%)G2+M (%) G2/G1
U:常對(duì)照組 510476. 72±7. 5820. 02 ±10. 243. 10±2. 891.91±0.丄4
L7212模觀組 310478. 77±7. 2521. 20±7. 0601.96 ±0.09
L7212中藥1組310477. 21±6. 7822. 33±7. 560. 91±0. 891.76±0. 09A
勾正常對(duì)照組比較，AP〈0.05。卜'同
2.7各組脾臟、T淋巴細(xì)胞亞群比較 見(jiàn)表5。 L7212組小鼠脾臟T淋巴細(xì)胞亞群CD3+、 CD4+、 CD8+百分比多低于正常組，而CD4VCD8+比值多低于未給藥組(正常對(duì)照組、L7212模型組)。
表5各組脾臟、T淋巴細(xì)胞亞群比較(S±S)組別n計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)CD3+ (%)CD4+ (%)CD8+ (%)CD4+/CD8+
正常對(duì)照組410423. 2±3.814.5±1,4 9.4±1.71, 7±0. 3
正常給藥組310417.0±1.810. 5士1.2A 8, 1±2. 41. 3±0. 5
L7212模型組110418, 515. 10. 95.8
L7212中藥1組 110415.613.2 2.55. 1
3結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明藥物組合物對(duì)白血病有很好的療效，因其可延長(zhǎng)L7212白血病小鼠的生存時(shí)間，降低其外周血中白血病細(xì)胞的比例，故該方對(duì)治療白血病是客觀有效的。
權(quán)利要求
1、一種用于治療白血病的中藥組合物，其特征在于，它是由下列重量份的原料藥制成雄萸0.05-0.1份、青黛1.5-3份、牛黃0.15-0.35份、天竺黃3-9份、當(dāng)歸6-12份、川芎3-9份、冰片0.15-0.3份。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1的中藥組合物，其特征在于，它是由下列重量份的原料 藥制成雄黃0.08份、青黛2份、牛黃0.2份、天竺黃6份、當(dāng)歸9份、川芎 6份、冰片0.2份。
3、 權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，該方法為 將天竺黃、當(dāng)歸、川芎水提取或不同濃度乙醇提取或水提醇沉，或水蒸汽蒸餾 提取揮發(fā)油藥渣水提取或不同濃度乙醇提取或水提醇沉，還可進(jìn)一歩用大孔樹(shù) 脂柱純化，得到天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物；將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、 雄黃、青黛、牛黃、冰片混合，加入適量輔料，制備成藥學(xué)上可接受的固體口 服制劑，例如膠囊劑、片劑、丸劑、滴丸劑等。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，天竺黃、 當(dāng)歸、川芎提取物的制備方法為大竺黃、當(dāng)歸、川芎加5倍量水，煎煮2小 時(shí)，濾過(guò)，濾渣加入4倍量水，煎1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液， 濾液減壓濃縮至藥液體積(L)與藥材軍暈(Kg)比為1: 0.9-1.1，加入乙醇使藥液 含醇濃度在70%，靜置，濾過(guò)，濃縮至相對(duì)密度為1.30-1.35 (5(TC)的稠膏， 減壓干燥(6CTC， -0.08Mpa)，即得天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物。
5、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的屮藥組合物的制備方法，其特征在于，天竺黃、 當(dāng)歸、川芎提取物的制備方法為天竺黃、當(dāng)歸、川芎加8倍量70%乙醇提取， 2次，每次1小時(shí)，濾過(guò)，濾渣棄去，合并2次濾液，回收乙醇，濃縮至相對(duì)密 度為1.30-1.35 (50°C)的稠膏，減壓十燥(60。C， -0. 。8Mpa)，即得大竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物。
6、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，滴丸劑的制備方法為將聚乙二醇4000:聚乙二醇6000按3: l的比例加熱熔融，加入天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片的細(xì)粉，混勻，60-80°C 保溫，滴入冷卻的二甲硅油中，待滴丸冷卻后取出，瀝凈并擦除二甲硅油，即 得滴丸。
7、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，丸劑的制 備方法為將大竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì) 粉，加入適量蜂蜜，混和均勻，制丸劑。
8、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的屮藥組合物的制備方法，其特征在于，膠囊劑的制備方法為將大竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成細(xì)粉，加入乳糖，混勻，用95%乙醇制粒，干燥，裝入膠囊，即得膠囊劑。
9、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，膠囊劑的制備方法為將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成 細(xì)粉，干燥，裝入膠囊，即得膠囊劑。
10、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，片劑的制備方法為將天竺黃、當(dāng)歸、川芎提取物、雄黃、青黛、牛黃、冰片粉碎成 細(xì)粉，加入乳糖，混勻，制粒，干燥，加入硬脂酸鎂適量，混勻，壓片，包衣， 即得片劑。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療白血病的中藥組合物及其制備方法。該中藥組合物是由雄黃、青黛、牛黃、天竺黃、當(dāng)歸、川芎、冰片。按一定重量配比制備而成。它可以被制備成任何一種常用藥物劑型。本發(fā)明中藥組合物具有清熱、解毒、活血之功效，用于治療各種急慢性白血病。
文檔編號(hào)A61K9/20GK101590193SQ200810113218
公開(kāi)日2009年12月2日 申請(qǐng)日期2008年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月27日
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