專利名稱：兒茶提取物在制備升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
未發(fā)明涉及兒茶Uc腦'ac她c/m (L.) willd.)的提取物，兒茶提 取物的制備方法，含有這類提取物的藥物組合物，以及這種提取物在 制備升高白細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
兒茶為豆科植物兒茶cs&c力w (L. ) willd.的去皮枝、干 的干燥煎膏。冬季采收枝、干，除去外皮，砍成大塊，加水煎煮，濃 縮，干燥而成，習(xí)稱"兒茶膏"或"黑兒茶"。兒茶苦、澀，微寒，歸 肺經(jīng)。功能為收濕生肌斂瘡，主治潰瘍不斂，濕疹，口瘡，跌撲傷痛， 外傷出血。文獻(xiàn)報(bào)道，兒茶的藥理作用主要集中在抗菌、抑制腸蠕動(dòng)、 降壓、降低毛細(xì)血管通透性、保肝、抗癌等方面。
白細(xì)胞是人體衛(wèi)士，白細(xì)胞減少后，人體的防病能力降低，出現(xiàn) 疲乏無(wú)力、四肢酸軟、頭暈惡心、發(fā)熱等癥狀，引起反復(fù)發(fā)作的上呼 吸道感染、肺炎、泌尿道感染等。白細(xì)胞的生成很容易受到藥物的影 響，造成白細(xì)胞減少。解熱鎮(zhèn)痛類藥物比如氨基比林、安乃近、復(fù)方 阿司匹林等都可以引起白細(xì)胞減少癥；許多種抗生素也對(duì)骨髓造血功 能有抑制作用，比如氯霉素、磺胺類藥物、青霉素等均可損害造血系 統(tǒng)，有發(fā)生白細(xì)胞減少的可能，尤以氯霉素對(duì)血液系統(tǒng)的損害更為嚴(yán) 重。抗精神病藥氯丙嗪、奮乃靜、三氟拉嗪都可引起白細(xì)胞減少，以 氯丙嗪的發(fā)生率較高?？辜谞钕偎幬锉蜓踵奏?、他巴唑等都可以 引起白細(xì)胞減少癥。
白細(xì)胞降低是一種常見病，多發(fā)病，嚴(yán)重威脅人類的健康。白細(xì) 胞減少nl有遺傳性、家族性、獲得性等，其屮獲得性占多數(shù)。促白細(xì)胞生成藥物臨床應(yīng)用種類較多，如維生素B6、利血生可用 于各種粒細(xì)胞減少癥。維生素B4、鯊肝醇、肌苷、脫氧核苷酸、康力 龍等可用于抗癌藥、放療或氯霉素等因素所致的白細(xì)胞減少，有的價(jià) 格昂貴，有的療效均難以確定。因此尋找新的、有效的、價(jià)格低廉的 促白細(xì)胞生成藥物十分必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種兒茶(Jca"'a catec/w (L.) willd.)的
提取物。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種制備兒茶catec/m (L.) willd.)的提取物的方法。
本發(fā)明的再一目的在于提供一種含有兒茶(Jc^/" o to7/m (L.) willd.)的提取物的藥物組合物。
本發(fā)明的又一目的在于提供兒茶(A^c&catec/m (L.) willd.)的 提取物在制備升高白細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用。
為了完成本發(fā)明之目的，可采用如下技術(shù)方案
兒茶為豆科植物兒茶Jc3"s c^ec力"(L. ) willd.的去皮枝、干 的干燥煎膏。冬季采收兒茶"cacis ca&c力"(L. ) willd.)的枝、 干，除去外皮，砍成大塊，加水煎煮，濃縮，干燥而成兒茶原藥材。 本發(fā)明的兒茶原藥材是市售的，也可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)制備。
兒茶提取物的制備工藝
方法一
(a)兒茶原藥材用水溶解，溶解可以在靜態(tài)或動(dòng)態(tài)下，溶解 的溫度可以是室溫到水回流的溫度(30-IO(TC)，也可以使用超聲 或微波助溶，溶劑量為原藥重量的2-15倍；然后去除殘?jiān)コ?殘?jiān)梢允褂眠^濾或離心的方式，過濾可以使用濾紙過濾或垂熔漏斗。
(b) 濾液(ER3)置于分液漏斗中，依次用極性由弱到強(qiáng)的溶
劑萃取，例如用石油醚(或己烷)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、正丁
醇萃取。
(c) 乙醚或乙酸乙酯部分為為目標(biāo)兒茶"csdsc^ec力i/(L.) willd.)提取物(ER1)。
在方法一的優(yōu)選的實(shí)施方案中
(a) 以兒茶原藥材200g計(jì)，加水500 — 900ml后超聲溶解， 然后采用濾紙過濾除去殘?jiān)?br> (b) 依次用石油醚(1.2L—1.6L)、氯仿(1.2L—1.6L)、乙酸 乙酯(3. 0L — 4. OL)、正丁醇(3. 0L — 4. OL)萃取，
(c) 乙酸乙酯部位干燥為目標(biāo)兒茶(Jcscj'a cMec力w (L.) wilia.)提取物。
方法二
(a)原藥材用醇類溶解；優(yōu)選的醇選自甲醇、乙醇、異丙醇、 丁醇等，溶解可以在靜態(tài)或動(dòng)態(tài)下，溶解的溫度可以是室溫到醇 回流的溫度，也可以使用超聲或微波助溶，溶劑量為原藥重量的 2-15倍。然后加入硅膠(60-300目)攪拌，硅膠用量以重量計(jì)為 原藥材的1-2倍。
'(b)將硅膠拌好的樣品放入索氏提取器或垂熔漏斗中，依次 用石油醚(或己垸)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、丙酮、甲醇沖洗，
(c)乙醚或乙酸乙酯部分為目標(biāo)兒茶"ca"s cstec力"(L.) willd.)提取物(ER2)。在方法二優(yōu)選的實(shí)施方案中
(a) 以兒茶原藥材200g計(jì)，力D 60 — 80%乙醇500 —700ml后 超聲溶解，再加入硅膠(160-200目)500 — 700克攪拌。
(b) 將其在水浴上加熱揮干溶劑后置于垂熔漏斗中，依次用 石油醚(O. 3L — 0. 7L)、氯仿(0. 3L —0. 7L)、乙酸乙酯(2.0L — 3.0L)、丙酮(2.0L — 3.0L)、甲醇(1. 0L — 2. OL)洗脫，
'(c)乙酸乙酯部位為目標(biāo)兒茶"caciacWec力w (L. ) willd.) 提取物。
兒茶提取物浸膏可經(jīng)冷凍干燥或真空干燥成干粉，也可把濃縮 液體直接噴霧干燥成干粉。
本發(fā)明還涉及含有本發(fā)明兒茶藥物提取物和常規(guī)藥物賦形劑或輔 劑的制備。
i發(fā)明還提供一種藥物組合物，它包括藥物有效劑量的，如本發(fā)
明方法提取的兒茶提取物和/或兒茶及藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明提取物的藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。用于 此目的時(shí)，如果需要，可將本發(fā)明提取物與一種或多種固體或液體藥 物賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成可作為人藥或獸藥使用的適當(dāng)?shù)氖┯眯?式或劑量形式。
本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給 藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、 皮膚腹膜或直腸等，優(yōu)選克服給藥。
本發(fā)明提取物或含有它的藥物組合物的給藥途徑可為注射給藥。 注射包括靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、皮內(nèi)注射等。
給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型。如液體劑型可以是真溶液類、膠體類、微粒劑型、乳劑劑型、混懸劑型。其他劑型例如片劑、 膠囊、滴丸、氣霧劑、丸劑、粉劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、顆粒劑、 栓劑、凍干粉針劑等。
本發(fā)明提取物可以制成普通制劑、也可以是緩釋制劑、控釋制劑、 靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。
為了將單位給藥劑型制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種 載體b關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如淀粉、糊精、硫 酸鈣、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、碳酸鈣、白陶 土、微晶纖維素、硅酸鋁等；濕潤(rùn)劑與粘合劑，如水、甘油、聚乙二 醇、乙醇、丙醇、淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯 膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、紫膠、甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙 烯吡咯烷酮等；崩解劑，例如干燥淀粉、海藻酸鹽、瓊脂粉、褐藻淀 粉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、碳酸鈣、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二 垸基磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等；崩解抑制劑，例如蔗糖、 三硬脂酸甘油酯、可可脂、氫化油等；吸收促進(jìn)劑，例如季銨鹽、十 二烷基硫酸鈉等；潤(rùn)滑劑，例如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂 酸鹽、硼酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣 片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。
例如為了將給藥單元制成丸劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種 載體。關(guān)于載體的例子是，例如稀釋劑與吸收劑，如葡萄糖、乳糖、 淀粉、可可脂、氫化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、Gelucire、高嶺土、 滑石粉等；粘合劑，如阿拉伯膠、黃蓍膠、明膠、乙醇、蜂蜜、液糖、 米糊或面糊等；崩解劑，如瓊脂粉、干燥淀粉、海藻酸鹽、十二烷基 磺酸鈉、甲基纖維素、乙基纖維素等。
例如為了將給藥單元制成膠囊，將有效成分本發(fā)明提取物與上述的 各種載體混合，并將由此得到的混合物置于硬的明膠膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明提取物制成微囊劑，混懸于水性介質(zhì)中形成混 懸劑，亦可裝入硬膠囊中或制成注射劑應(yīng)用。
綜上所述，兒茶提取物具有很強(qiáng)的升高白細(xì)胞的活性，能使環(huán)磷酰 胺引起的動(dòng)物白細(xì)胞下降有較強(qiáng)的升高白細(xì)胞作用，兒茶為常用中藥， 因而有益于人群中各種原因一起的白細(xì)胞下降的血象的改善，可用于 白細(xì)胞異常的治療。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l:兒茶原藥材200g，加水700ml后超聲溶解，然后釆 用濾紙過濾除去殘?jiān)Ｒ来斡檬兔?1.4L)、氯仿(1.4L)、乙酸 乙酯(3.5L)、正丁醇(3.5L)萃取，最后將乙酸乙酯部位(54g)進(jìn) 行制劑成型。
實(shí)施例2:兒茶原藥材200g，加70%乙醇600ml后超聲溶解， 再加入硅膠(160-200目)600克攪拌。將其在水浴上加熱揮干溶 劑后置于垂熔漏斗中，依次用石油醚(0.5L)、氯仿(O. 5L)、乙酸 乙酯(2.5L)、丙酮(2.5L)、甲醇(1.5L)洗脫，最后將乙酸乙酯部 位U03g)進(jìn)行制劑成型。
藥理實(shí)驗(yàn)
材料和儀器昆明種小鼠84只，雌、雄各半，體重18 22g。由中 國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，合格證號(hào)SCXK(京)2004-0001。 鹽酸小檗胺片(升白胺片，四川金山禪心制藥有限公司)；兒茶藥物組合物ER1、 ER2、 ER3，環(huán)磷酰胺(上海華聯(lián)制藥有限公司)。 實(shí)驗(yàn)方法
將以上小鼠隨機(jī)分成6組(每組14只)正常組、模型組、升白
胺片組、ER、組、ER2組、ER3組；給藥組劑量均為100mg/kg，給藥體 積為10ml/kg，正常組與模型組灌胃同體積水；連續(xù)灌胃給藥7天，分 別在第4、 5、 6天于給藥后1小時(shí)，除正常組腹腔注射生理鹽水10ml/kg 外，其余6組腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg，于第7天給藥后1小時(shí)， 自小鼠眼后靜脈叢采血于抗凝管內(nèi)，血液細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)細(xì)胞。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
一般情況觀察除模型組小鼠毛色少澤，體重稍有下降外，正常 組與其它給藥組小鼠飲食、飲水正常，毛色光滑，行動(dòng)靈活，排泄正 常。對(duì)小鼠外周白細(xì)胞數(shù)目的影響結(jié)果見表l
表l，兒茶提取物對(duì)模型小鼠外周白細(xì)胞數(shù)目的影響(n=14， x±s)
組別劑量 (mg/kg)動(dòng)物 (11)白細(xì)胞數(shù)目(X109/L)
正常組146.8±2.5廣*
模型組142.4 ±1.02
升白胺片組100143.4 ±1.24*
ERi組100145.5±2.49
ER2組100143.3±1.08*
ER3組100143.6±1.34*
注與模型組比較，*P<0.05，"*P<0,001.
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺后，白細(xì)胞顯著下降，給
藥組各組均有不同程度的升高白細(xì)胞作用，ERi組作用最強(qiáng)，有顯著的 升白作用；升白胺片組、ER2組、ER3組升白作用相當(dāng)。
權(quán)利要求
1、一種兒茶(Acacia catechu(L.)willd.)提取物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(a)兒茶原藥材用水為溶劑溶解，然后去除殘?jiān)?b)濾液(ER3)置于分液漏斗中，依次用石油醚(或己烷)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、正丁醇萃??；(c)乙醚或乙酸乙酯部分為目標(biāo)兒茶(Acacia catechu(L.)willd.)提取物(ER1)。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，步驟(a)的溶解 可以使用超聲或微波助溶。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(a) 以兒茶原藥材200g計(jì)，加水500 — 900ml后超聲溶解， 然后采用濾紙過濾除去殘?jiān)?b) 依次用石油醚(1.2L—1.6L)、氯仿(1.2L—1.6L)、乙酸 乙酯(3. 0L — 4. OL)、正丁醇(3. 0L — 4. OL)萃??；'(c)乙酸乙酯部位為目標(biāo)兒茶"c3ciscs"c力〃 (L. ) willd.) 提取物。
4、 一種兒茶(Jcs"s cs"c力"(L. ) willd.)提取物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟(a)原藥材用醇類溶解，溶劑量為原藥重量的2-15倍；然后 加入硅膠(60-300目)攪拌，硅膠用量以重量計(jì)為原藥材的l-2 倍；(b) 將硅膠拌好的樣品放入索氏提取器或垂熔漏斗中，依次 用石油醚(或己烷)、氯仿、乙醚或乙酸乙酯、丙酮、甲醇沖洗；(c) 乙醚或乙酸乙酯部分為目標(biāo)兒茶cs&c力"(L.) willd.)提取物(ER2)。
5、 根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟(a)中所述的醇 選自甲醇、乙醇、異丙醇、丁醇。
6、 根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，步驟(a)中的溶 解可以使用超聲或微波助溶。
7、 根據(jù)權(quán)利要求4的制備方法，其特征在于，包括如下步驟制備(a) 以兒茶原藥材200g計(jì)，加60 — 80%乙醇500 — 700ml后 超聲溶解，再加入硅膠(160-200目)500 — 700克攪拌；(b) 將其在水浴上加熱揮干溶劑后置于垂熔漏斗中，依次用 石油醚(0. 3L —0. 7L)、氯仿(0. 3L — 0. 7L)、乙酸乙酯(2.0L — 3.0L)、丙酮(2. 0L—3. OL)、甲醇(1. OL—2. OL)洗脫；(c) 乙酸乙酯部位為目標(biāo)兒茶"csciacs&c力w (L. ) willd.) 提取物。
8、 權(quán)利要求l一7中制備的兒茶(Acacia catechu (L. ) willd.) 提取物。
9、 一種藥物組合物，其特征在于，含有權(quán)利要求8的兒茶(Acacia catechu (L. ) willd.)提取物和制藥學(xué)上可接受的載體。
10、權(quán)利要求8的兒茶(Acacia catechu (L. ) willd.)提取物 在制備升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了兒茶提取物在制備升高白細(xì)胞藥物中的應(yīng)用，還公開了兒茶(Acacia catechu(L.)willd.)的提取物，兒茶提取物的制備方法，含有這類提取物的藥物組合物，以及這種提取物在制備升高白細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K135/00GK101549005SQ200810103060
公開日2009年10月7日 申請(qǐng)日期2008年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月31日
發(fā)明者超 劉, 嶺 張, 朱海波, 李保明, 凱 渠, 王洪慶, 陳若蕓 申請(qǐng)人:中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所