專利名稱：：一種α-亞麻酸復(fù)合劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及a-亞麻酸，具體涉及一種or亞麻酸與維生素的復(fù)合劑。本發(fā)明的(X-亞麻酸復(fù)合劑具有抗衰老、延長壽命的作用。
背景技術(shù)：
：a-亞麻酸，學(xué)名9,12,15-十八碳三烯酸，.為全順式非共扼立體構(gòu)型。動(dòng)物體內(nèi)的a-亞麻酸必須來源于食物。綠色植物的葉、根、莖和果實(shí)及苔癬類、蕨類等低等植物、浮游生物中均含有一定量的a-亞麻酸，植物種子所含的植物油中a-亞麻酸含量豐富，其中以亞麻籽和蘇子油中含量最高，可達(dá)50%以上。or亞麻酸可以在人體內(nèi)通過去飽和酶和碳鏈延長酶的催化作用，合成多烯不飽和脂肪酸二十碳五價(jià)不飽和脂肪酸(Ecosapeatanolicacid,EPA)和二十二碳六價(jià)不飽和脂肪酸(ducosahexenoicacid,DHA)，因此，cr亞麻酸是人體的必需脂肪酸。or亞麻酸的健康保健作用主要有1.降低血脂a-亞麻酸可以通過增加類固醇排泄，減少內(nèi)源性膽固醇。3-羥基-3甲基戊二酰輔酶A(HMG-C0A)還原酶和脂肪酰輔酶A膽固醇脂肪酰酶轉(zhuǎn)移酶(ACAT)是膽固醇合成的主要限速酶，a-亞麻酸能使HMG-COA還原酶活性降低，ACAT活性升高，通過減少極低密度脂蛋白中的甘油三脂及載脂蛋白B的生物合成，達(dá)到降低血清甘油三脂的作用，抑制低密度脂蛋白合成。2.降低血壓or亞麻酸能使血漿中的中性脂肪和膽固醇下降，而降低血壓。人群實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)EPA和DHA有顯著的降壓作用。l抑制血栓性疾病，預(yù)防心肌梗塞和腦梗塞a-亞麻酸能改變血小板對(duì)刺激的反應(yīng)性及血小板表面受體數(shù)目，從而導(dǎo)致血小板聚集率降低和出血時(shí)間延長。4.預(yù)防過敏反應(yīng)or亞麻酸能抑制產(chǎn)生過敏性疾病因子，從而調(diào)節(jié)過敏反應(yīng)。5.抑制癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移a-亞麻酸及其衍生物EPA和DHA具有預(yù)防腫瘤發(fā)生和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。6.抑制人體衰老，預(yù)防老年癡呆a-亞麻酸可以增加血小板和紅細(xì)胞中的EPA和DHA，減少花生四稀酸，也能清除肌體在代謝過程中產(chǎn)生過量的自由基，防止蛋白質(zhì)變性，核酸代謝紊亂以及生物膜損傷和交聯(lián)鍵的形成，預(yù)防各種臟器損傷，從而抑制人體衰老。7.保護(hù)視力，提髙學(xué)習(xí)記憶功能w-3系列不飽和脂肪酸是維系人類腦進(jìn)化的核心生命物質(zhì)，尤其是w-3系列多不飽和脂肪酸的母體a-亞麻酸，它的代謝物DHA和EPA是組成神經(jīng)細(xì)胞膜的重要成分，能促進(jìn)腦內(nèi)核酸(DNA和RNA)及蛋白的合成。8.保護(hù)肝臟or亞麻酸能合成前列腺素，能明顯降低血清透明質(zhì)酸，層粘連蛋白和腫瘤壞死因子的含量，因而能防止肝炎肝硬變，對(duì)肝功能有損的患者有抗纖維化的作用。9.抗心律失常or亞麻酸抗心律失常的機(jī)制可能是由于心肌細(xì)胞膜磷脂脂肪酸成分的變化引起了TXA2等生理活性物質(zhì)水平的變化及心肌轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)如鈣通道、受體蛋白和酶活性及其功能的改變，使心律失常不易發(fā)生。由于以ot-亞麻酸為母體的0)-3脂肪酸所具有的特異生理活性，引起了世界各國科學(xué)家的高度重視。德國和日本等國家將a-亞麻酸及其衍生物作為藥物或食品添加劑，用來預(yù)防和治療心血管疾病，美國已開發(fā)出了富含a-亞麻酸的保健品如亞麻酸保健油、亞麻酸膠等，用于預(yù)防和治療心血管疾病。在我國，富含or亞麻酸及其衍生物的一些植物也開始在藥物或食品添加劑、保健品、飼料等方面應(yīng)用。雖然研究證明a-亞麻酸具有明顯的抗自由基作用，對(duì)維持細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu)與功能起重要作用，維生素A、C、E也具有抗自由基抗衰老作用，但目前還缺少證明聯(lián)合應(yīng)用亞麻酸與維生素是否能增強(qiáng)抗衰老、延長壽命的作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種具有延緩衰老與延長壽命功效的a-亞麻酸復(fù)合劑。本發(fā)明的a-亞麻酸復(fù)合劑是以a-亞麻酸、維生素A、維生素C和維生素E為活性成分制成的藥劑，每Kg藥劑中含有活性成分a-亞麻酸60~80g維生素A10~15mg維生素C200~500mg維生素El~4g，優(yōu)選地，每Kg藥劑中含有活性成分a-亞麻酸60~70g維生素A12~15mg維生素C200~400mg維生素El~3g。本發(fā)明將上述a-亞麻酸復(fù)合劑制成滴丸使用，其具體制備方法是將含有600~800mga-亞麻酸有效成分、120~150ug維生素A有效成分、2~4mg維生素C有效成分、10~30mg維生素E有效成分的各種原料藥混合，并加入10g吐溫-80，補(bǔ)充蒸餾水至lKg，充分撹拌使乳化均勻，制成a-亞麻酸復(fù)合劑藥劑。按照明膠甘油水=1:0.3:G.8的比例配制成可藥用載體明膠液，作為制備滴丸的基質(zhì)材料。按照藥劑基質(zhì)材料=1:1的重量比將上述兩種原料注入滴丸機(jī)中，釆用常規(guī)滴丸制備工藝生產(chǎn)a-亞麻酸復(fù)合劑滴丸。通過or亞麻酸復(fù)合劑對(duì)老年小鼠血清中血脂含量、抗自由基、延長果蠅壽命作用及對(duì)小鼠肝臟中端粒酶mRNA表達(dá)變化的作用進(jìn)行研究，證明本發(fā)明的a-亞麻酸復(fù)合劑具有降低血脂、抗自由基及具有延緩衰老和延長壽命的功效。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取明膠10Kg、甘油3Kg、蒸餾水8Kg混合攪拌均勻，制成作為基質(zhì)的可藥用載體明膠液。于2Kg蒸餾水中加入100g吐溫-80并溶解均句，連續(xù)攪拌下依次加入80%a-亞麻酸800g,1.2%維生素A油11.5g，3%維生素C水劑750mL和65%維生素E油30g配成乳劑，以蒸餾水補(bǔ)足至10Kg，制成a-亞麻酸復(fù)合劑藥劑。釆用滴制法，將10Kga-亞麻酸復(fù)合劑藥劑與10Kg明膠液基質(zhì)分別裝入滴制機(jī)中，滴制機(jī)的滴制噴頭口徑1.2mm/1.3mm(內(nèi)/外)，距液面滴距70ram,滴速10滴/min。將藥劑與基質(zhì)加熱至7(TC,通過同心管從滴制噴頭噴出，基質(zhì)液從同心管的外層流下，藥劑從中心管流出，在滴制噴頭的下端出口處，基質(zhì)液將藥劑包裹起來，并滴入到不相溶的液體石蠟冷卻液(溫度15°C)中，凝固成滴丸。在滴制過程中配合以鼓風(fēng)干燥(干燥溫度25X:)。實(shí)施例2取明膠10Kg、甘油4Kg、蒸餾水9Kg混合攪拌均勻，制成作為基質(zhì)的可藥用載體明膠液。于2Kg蒸餾水中加入100g吐溫-80并溶解均勻，連續(xù)攪拌下依次加入8Wa-亞麻酸750g,1.2%維生素A油12g,3%維生素C水劑550mL和65%維生素E油35g配成乳劑，以蒸餾水補(bǔ)足至10Kg，制成a-亞麻酸復(fù)合劑藥劑。釆用滴制法，將10Kga-亞麻酸復(fù)合劑藥劑與10Kg明膠液基質(zhì)分別裝入滴制機(jī)中，滴制機(jī)的滴制噴頭口徑1.2mm/1.3ram(內(nèi)/外)，距液面滴距"mra,滴速10滴/min。將藥劑與基質(zhì)加熱至6(TC,通過同心管從滴制噴頭噴出，基質(zhì)液從同心管的外層流下，藥劑從中心管流出，在滴制噴頭的下端出口處，基質(zhì)液將藥劑包裹起來，并滴入到不相溶的液體石蠟冷卻液(溫度irc)中，凝固成滴丸。在滴制過程中配合以鼓風(fēng)干燥(干燥溫度22T)。實(shí)施例3于2Kg蒸餾水中加入100g吐溫-80并溶解均勻，連續(xù)攪拌下依次加入80%a-亞麻酸900g,1.2%維生素A油10g,3%維生素C水劑400mL和6M維生素E油30g配成乳劑，.以蒸餾水補(bǔ)足至10Kg,制成a-亞麻酸復(fù)合劑藥劑。采用滴制法，將a-亞麻酸復(fù)合劑藥劑與實(shí)施例1明膠液基質(zhì)按照1:1的比例裝入滴制機(jī)中，以實(shí)施例1工藝滴制滴丸。應(yīng)用例1or亞麻酸復(fù)合劑對(duì)老齡小鼠血脂的影響本實(shí)驗(yàn)通過不同濃度的or亞麻酸與維生素A、C、E聯(lián)合應(yīng)用，考察其對(duì)老年小鼠血脂的改變，以達(dá)到a-亞麻酸與維生素A、C、E復(fù)合劑的最佳比例，并為a-亞麻酸與維生素A、C、E混合制劑的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及取材.，將kunMing老年實(shí)驗(yàn)鼠隨機(jī)分為IO個(gè)實(shí)驗(yàn)組老年對(duì)照組及根據(jù)不同復(fù)合劑和不同劑量分成的9個(gè)實(shí)驗(yàn)組(a-亞麻酸設(shè)500、1500、2500mg/kg三個(gè)劑量組"、a2、a3);維生素E(Ve)設(shè)22、40、50mg/kg三個(gè)濃度，維生素C(Vc)設(shè)4、8、10mg/kg三個(gè)濃度，維生素A(Va)設(shè)18、90、200u/100g三個(gè)濃度，Va、Vc、Ve三者低濃度與低濃度混合，中濃度與中濃度混合，高濃度與高濃度混合，作為復(fù)合劑Vace低、中、髙劑量組(VC,、VC2、VC3)),另設(shè)1組青年對(duì)照。每組10只，所有受試小鼠先喂基礎(chǔ)飼料3天，作適應(yīng)性飼養(yǎng)，然后除對(duì)照組外，將不同劑量的or亞麻酸與Vace復(fù)合劑按照受試小鼠的體重進(jìn)行灌胃，試驗(yàn)期為30天。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，先對(duì)各組動(dòng)物進(jìn)行稱重，并記錄進(jìn)食量以及動(dòng)物的活動(dòng)、體毛、采食情況。每天定時(shí)在下午2:00開始灌胃，飼養(yǎng)結(jié)東后，對(duì)各組小鼠進(jìn)行最后稱重?？崭?h后，采用摘除眼球法眼眶取血，并及時(shí)離心分離血清，測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)和高密度脂蛋白(HDL)濃度。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果以^士s表示，數(shù)據(jù)用SPSS10.5軟件進(jìn)行單因素方差分析、析因分析統(tǒng)計(jì)。結(jié)果l.各組小鼠灌胃飼養(yǎng)后體重均有不同程度增加，九個(gè)實(shí)驗(yàn)組與老年對(duì)照組比較，增重明顯(P<0.01);與青年動(dòng)物比較，a+VC:、a2+Vd、a2+VC2、a3+VC2、a:'+VC3組體重增加明顯(P<0.01),且較其它實(shí)驗(yàn)組體重增加明顯(P<0.05),說明or亞麻酸與Vace聯(lián)用有強(qiáng)身健體的作用(表l)。表1a.亞麻酸+Vace對(duì)小鼠體重的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與老年對(duì)照組相比*P<0.05**P<0.01;與青年對(duì)照組相比#p<0.05;2.九個(gè)實(shí)驗(yàn)組的TC、TG、HDL與老年對(duì)照組比較，TC、TG含量低于老年對(duì)照組(P〈0.01),而HDL含量高于老年對(duì)照組(P〈0.01);與青年對(duì)照比較，除HDL有差異(P<0.05)夕卜，TC、TG沒有差異(P>0.05)。各實(shí)驗(yàn)組之間比較，ci2+Vd、a2+VC2組的TC較其他七個(gè)實(shí)驗(yàn)組明顯降低(P〈0.05),a2+Vd、a2+VC2、ci3+VC3組的TG較其他六個(gè)實(shí)驗(yàn)組明顯降低(P〈0.05),HDL之間沒有差別(P〉0.05);說明a-亞麻酸+Vace聯(lián)用有降低血脂，預(yù)防心血管疾病發(fā)生的作用(表2)。表2a-亞麻酸+Vace對(duì)小鼠血脂的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注與老年對(duì)照組相比*P<0.05**P<0.01;與青年對(duì)照組相比*P<0.01討論通過不同濃度的a-亞麻酸+Vace復(fù)合劑飼喂動(dòng)物發(fā)現(xiàn)，九個(gè)實(shí)驗(yàn)組與老年對(duì)照組比較，體重明顯增加，但血清中TC、TG含量低于老年對(duì)照組，HDL含量高于老年對(duì)照組，說明實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物并不因?yàn)轶w重增加而血脂增加，而是降低了心血管疾病危險(xiǎn)因子TC、TG的含量，升高了與心血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化呈負(fù)相關(guān)的因子HDL。九個(gè)實(shí)驗(yàn)組與青年對(duì)照組比較，基本沒有差別。九個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間比較，(X2+Vd、a2+VC2組較其它實(shí)驗(yàn)組體重增加明顯，TC、TG含量較其他實(shí)驗(yàn)組低(P〈0,05)。仏+Vd與ci2+VC2組比較，TC、TG含量低，HDL含量高，說明a2+VC2組比ct2+VCj且更具有降低血脂的作用，(X2+VC2復(fù)合劑預(yù)防冠心病與動(dòng)脈粥樣硬化等作用更強(qiáng)。應(yīng)用例2a-亞麻酸復(fù)合劑的抗氧化作用根據(jù)應(yīng)用例1實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出a2+VC2復(fù)合劑組有預(yù)防冠心病與動(dòng)脈粥樣硬化等作用，本實(shí)驗(yàn)選用a-亞麻酸及Va、Vc、Ve、Vace復(fù)合劑添加到實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物飼料中，通過不同組別的小鼠灌胃飼養(yǎng)，測(cè)定超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)含量，探討a-亞麻酸與維生素A、C、E聯(lián)合應(yīng)用的抗自由基能力。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及取材kunMing老年試驗(yàn)鼠，無特定病原體級(jí)動(dòng)物，60只，18~22月齡，雌雄各半。隨機(jī)分為老年對(duì)照組(基礎(chǔ)飼料灌胃)、a-亞麻酸組(1500mg/kg)、a-亞麻酸+Ve(40mg/kg)組，or亞麻酸+Vc(8tng/kg)組,or亞麻酸+Va(90U/100g)組，a-亞麻酸+Vace組，另設(shè)青年對(duì)照組(l.5~2月齡，基礎(chǔ)飼料灌胃)。每組10只，雌雄各半，所有受試鼠先喂基礎(chǔ)飼料3天，適應(yīng)環(huán)境后灌胃給藥，保持適宜的溫度和濕度，自由攝取自來水，持續(xù)30天。第30天空腹5h后，眼眶取血，測(cè)定自由基相關(guān)指標(biāo)。立即分離出肝臟，冷生理血水沖洗干凈，濾紙吸干表面，-70°C冰箱中冷凍，用于逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測(cè)定端粒酶活性。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理全部統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS10.5軟件包進(jìn)行。結(jié)果以^iS表示，組間比較用單因素方差分析，P<0.05表示差異具有顯著性，P〈0.01有高度顯著性。結(jié)果正常青年動(dòng)物SOD、GSH-PX高于老年動(dòng)物(P〈0.01),MDA低于老年動(dòng)物(P<0.01)，表明隨著年齡的增加，動(dòng)物抗氧化能力減低。與老年對(duì)照組比較，a-亞麻酸能顯著提高動(dòng)物血清SOD、GSH-PX水平(P〈0.05)，顯示a-亞麻酸能提高動(dòng)物抗自由基能力。a-亞麻酸+Vace組SOD、GSH-PX差別有高度顯著性(P<0.01)，而且MDA比老年動(dòng)物有所降低(P<0.05)，顯示a-亞麻酸+Vace能明顯提高動(dòng)物的抗自由基能力。a-亞麻酸、a-亞麻酸+Ve、a-亞麻酸+Vc、cr亞麻酸+Va四個(gè)實(shí)驗(yàn)組比較，SOD、GSH-PX、MDA均沒有差別。以上試驗(yàn)說明雖然在抗氧化中起主要作用的成分是a-亞麻酸，但a-亞麻酸+Vace聯(lián)合應(yīng)用提高SOD的作用相當(dāng)顯著，甚至好于青年對(duì)照組，而其提高GSH-PX的能力也高于a-亞麻酸、a-亞麻酸+Ve、a-亞麻酸+Vc、a-亞麻酸+Va四個(gè)實(shí)驗(yàn)組，可達(dá)到青年組水平(P<0.05),進(jìn)一步顯示a-亞麻酸+Vace復(fù)合劑抗氧化作用最強(qiáng)。(表3)表3a-亞麻酸及其復(fù)合劑對(duì)小鼠自由基清除酶的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與老年對(duì)照組相比*P<0.05**P<0.01,與靑年對(duì)照組相比#P>0.05##<0.05討論從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析可以看出，老年對(duì)照組與青年對(duì)照組的MDA值有顯著差別(P<0.01)，而a-亞麻酸、a-亞麻酸+Ve、a-亞麻酸+Vc、a-亞麻酸+Va、a-亞麻酸+Vace五個(gè)實(shí)驗(yàn)組的MDA值與青年對(duì)照組沒有差別(P〉0.05)，但與老年對(duì)照組差別顯著(P〈0.01);同時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)得老年對(duì)照組SOD、GSH-PX的活性明顯低于青年對(duì)照組(P".01)，五個(gè)實(shí)驗(yàn)組的SOD、GSH-PX的活性比老年對(duì)照組明顯增高，尤其a-亞麻酸+Vace組的SOD甚至好于青年對(duì)照組(P〈0.01)。五個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間比較，MDA濃度沒有差異，但是a-亞麻酸+Vace組的SOD活性明顯高于a-亞麻酸、a-亞麻酸+Ve、or亞麻酸+Vc、a-亞麻酸+Va四個(gè)實(shí)驗(yàn)組(P<0.01);GSH-PX活性也較其它四個(gè)實(shí)驗(yàn)組有所增高，考慮隨著樣本例數(shù)增加，實(shí)驗(yàn)組間可能出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。以上結(jié)果反映出，隨著年齡增長，機(jī)體內(nèi)的抗氧化酶活性降低，抗氧化劑含量減少，而脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA增加，自由基清除能力減弱。通過給老年小鼠飼喂a-亞麻酸與Ve、Va、Vc的不同組合，均可以使老年動(dòng)物的抗氧化能力增強(qiáng)，尤其是or亞麻酸+Vace聯(lián)合應(yīng)用的抗氧化作用最強(qiáng)，能夠顯著提高SOD、GSH-PX的活性，而減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的產(chǎn)生。應(yīng)用例3or亞麻酸復(fù)合劑對(duì)果蠅壽命的影響通過不同組別的美國野生型黑腹果蠅飼養(yǎng)，觀察果蠅的平均壽命和最髙壽命，以進(jìn)一步證實(shí)cr亞麻酸+Vace復(fù)合劑對(duì)動(dòng)物延緩壽命.的作用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及方法收集10h內(nèi)孵化的果蠅成蟲，恩氟烷麻醉后，依雌雄和大小進(jìn)行分組，分為or亞麻酸(60mg/g)+Ve(0.9mg/g)、or亞麻酸+Vc(0.4tng/g)、a_亞麻酸+Vace(Va3.6U/g)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組，每管50只，雌雄分養(yǎng)，每組雌雄果繩各100只。對(duì)照組用基礎(chǔ)飼料，實(shí)驗(yàn)組將抗氧化劑混入基礎(chǔ)飼料中。每五天更換一次培養(yǎng)伺料，每天定時(shí)統(tǒng)計(jì)果蠅存活數(shù)、死亡數(shù)，直到全部死亡。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理規(guī)定每組中所有果蠅存活天數(shù)的代數(shù)和除以果蠅數(shù)目為果蠅平均壽命(ALS)，每組最后死亡的IO只果繩壽命的平均數(shù)為最高壽命(MLS)。結(jié)果以^士S表示，數(shù)據(jù)用SPSS10.5軟件進(jìn)行單因素分析。結(jié)果果蠅壽命實(shí)驗(yàn)顯示，a-亞麻酸與Vc、Ve聯(lián)用延長了雌雄性果蠅的ALS，其中or亞麻酸+Vace復(fù)合劑雌雄性果錄的延長率分別為38.8/、47.5%，與對(duì)照組比較有顯著性(P〈0.01)。a-亞麻酸與Vc、Ve聯(lián)用延長了雌雄性果蠅的MLS,其中or亞麻酸+Vace復(fù)合劑雌雄性果蠅的延長率分別為43.7%、49.6%;與對(duì)照組比較有顯著性(P〈0.01)。另外，a-亞麻酸+Vace復(fù)合劑雌雄性果蠅的平均壽命與最高壽命明顯高于a-亞麻酸+Vc、a-亞麻酸+Ve組(P〈0.05)，更證實(shí)a-亞麻酸+乂&(;6復(fù)合劑對(duì)延長動(dòng)物壽命作用最顯著(表4、5)。表4a-亞麻酸及其復(fù)合劑對(duì)果蠅平均壽命的影響雌雄組別例數(shù)平均壽命(天)延長率(%)例數(shù)平均壽命(天)延長率(W對(duì)照組4844.9±6,75241.2±6.8a-亞麻酸+Vc5051.2±10.3*145352.4±9.2*26.4a-亞麻酸+Ve5158.2±11.2*29.74853.7±10.4*30.3a-亞麻酸+Vace4962.3±10.7**38.85160.8±11.5**47.5注與對(duì)照組相比》P<0.05**P<0.01<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>a-亞麻酸復(fù)合劑增強(qiáng)小鼠端粒酶活性的研究增強(qiáng)端粒酶活性是潛在的基因治療，以防止與年齡有關(guān)的疾病所產(chǎn)生的端粒縮短，從而預(yù)防過早老化。本實(shí)驗(yàn)通過a-亞麻酸+Vace聯(lián)合應(yīng)用飼養(yǎng)不同組別的小鼠，探討or亞麻酸+Vace復(fù)合劑對(duì)肝臟中端粒酶mRNA表達(dá)的影響，以及增強(qiáng)端粒酶活性在延緩衰老的作用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及取材同應(yīng)用例2。結(jié)果判定以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測(cè)定端粒酶活性，采用photoshop軟件進(jìn)行亮度測(cè)定，將擴(kuò)增產(chǎn)物與內(nèi)參照亮度相比，得出相對(duì)定量。統(tǒng)計(jì)分析全部統(tǒng)計(jì)分析采用SPSSIO.5軟件包進(jìn)行。結(jié)果以^士S表示，組間比較用單因素分析，P<0.05表示差異具有顯著性，P〈0.01有高度顯著性。結(jié)果RT-PCR結(jié)果顯示，青年與老年小鼠的肝臟均表達(dá)端粒酶mRM,青年組表達(dá)水平高于老年組(P〈0.05),說明隨著年齡的增加，端粒酶的活性有所降低。與老年組比較，五個(gè)實(shí)驗(yàn)組的端?；辪RNA表達(dá)明顯增高(P〈0.01);a-亞麻酸與維生素復(fù)合劑四個(gè)實(shí)驗(yàn)組的端粒酶mRNA表達(dá)均高于青年組(P<0.01),尤其a-亞麻酸+Vace組最明顯。5個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間比較，a-亞麻酸+Vace組端粒酶mRNA表達(dá)明顯高于其他四組(P〈0.01)，進(jìn)一步證實(shí)or亞麻酸+Vace復(fù)合劑具有協(xié)同提髙端粒酶活性，延長端粒長度，延緩衰老的功效(表6)。表6肝臟中端粒酶mRNA表達(dá)分組平均吸光度(Mean0D)青年對(duì)照0.694±0.016老年對(duì)照0.560±0.012a-亞麻酸0.688±0.021*a-亞麻酸+Ve0.843±0.018*#a-亞麻酸+Vc0.763土0.026*#a-亞麻酸+Va'0.914±0.019*#a-亞麻酸+Vace1.737±0.012**##注與老年組相比*P<0.05,**P<0.01;與青年組相比*P<0.05，##P<0.0權(quán)利要求1、一種α-亞麻酸復(fù)合劑，是以α-亞麻酸、維生素A、維生素C和維生素E為活性成分制成的藥劑，每kg藥劑中含有活性成分α-亞麻酸60～80g維生素A10～15mg維生素C200～500mg維生素E1～4g。2、根據(jù)權(quán)利要求l所述的a-亞麻酸復(fù)合劑，其中每kg藥劑中含有活性成分a-亞麻酸60~70g維生素A12~15mg維生素C200~400mg維生素El~3g。3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的or亞麻酸復(fù)合劑，其特征是所述的藥劑是滴丸。'全文摘要一種α-亞麻酸復(fù)合劑，每kg藥劑中含有活性成分α-亞麻酸60～80g，以及10～15mg維生素A、200～500mg維生素C、1～4g維生素E，本發(fā)明將上述α-亞麻酸復(fù)合劑按照常規(guī)制備工藝制成滴丸。通過α-亞麻酸復(fù)合劑對(duì)老年小鼠血清中血脂含量、抗自由基、延長果蠅壽命作用及對(duì)小鼠肝臟中端粒酶mRNA表達(dá)變化的作用進(jìn)行研究，證明本發(fā)明的α-亞麻酸復(fù)合劑具有降低血脂、抗自由基及具有延緩衰老和延長壽命的功效。文檔編號(hào)A61P3/02GK101361734SQ20081007945公開日2009年2月11日申請(qǐng)日期2008年9月22日優(yōu)先權(quán)日2008年9月22日發(fā)明者朱保忠,琳李申請(qǐng)人:琳李