專利名稱：：白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種藥物劑型和制劑技術(shù)，具體涉及一種白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
：白藜蘆醇(Resveratrol，Res)是一種天然二苯乙烯類活性物質(zhì)，普遍存在于何首烏、虎杖及金絲雀等常用中藥中，具有抑制血小板聚集、抗菌、抗癌及保肝護(hù)肝等多種生物學(xué)作用。但其水中溶解度小，經(jīng)小腸吸收率低，嚴(yán)重影響了其在醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用，目前尚沒有研制出理想的白藜聲醇的藥物制劑。因此，尋找和研究毒副作用小的藥物劑型來改善白藜,醇的水溶性，并提高其在小腸的吸收具有非常重要的意義。小麥醇溶蛋白是從作為人類食物的小麥麥粉尤其是中國的優(yōu)質(zhì)純系小麥品種中，經(jīng)提取、純化后獲得的天然植物兩性蛋白質(zhì)成分，來源豐富，容易分離提純，并且有很好的生物相容性。研究表明，由于其內(nèi)部的H鍵及S-S鍵而呈折疊狀二級結(jié)構(gòu)，醇溶蛋白所形成的肽泡狀藥物載體與腸上皮細(xì)胞，紅細(xì)胞，肝細(xì)胞以及皮膚角質(zhì)細(xì)胞具有一定親和性，可以作為轉(zhuǎn)染試劑(載體)，能夠?qū)⑺幬镞\輸?shù)郊?xì)胞內(nèi)，可成為一種無毒無害的天然蛋白質(zhì)分子微膠嚢，作為藥物的良好載體有著巨大的潛力。納米技術(shù)(nanotechnology)是當(dāng)今利用納米尺度物質(zhì)進(jìn)行交叉研究和工業(yè)化的一門綜合性的技術(shù)體系。納米技術(shù)成為藥物新型傳輸載體始于70年代，由于納米粒子的微小體積和特殊結(jié)構(gòu)，在胃腸道能成批地被轉(zhuǎn)運，因此成為改善難溶性藥物吸收的一種有效途徑。納米技術(shù)提高藥物胃腸吸收的機(jī)理可能包括以下幾個方面1)納米粒可通過小腸的peyer's結(jié)而進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，粒徑小的納米載體還可穿過腸系膜的細(xì)胞間通路進(jìn)入循環(huán)；2)由于納米粒高度的^t性'和巨大的表面積，能增加難溶性藥物的溶解度和溶出速度，也能增加與胃腸道壁的接觸，從而增加吸收的機(jī)會，提高難溶性藥物的生物利用度；3)納米粒較之溶液劑，更能被十二指腸的微毛所捕獲，并滯留較長時間，進(jìn)一步延長藥物與細(xì)胞壁接觸時間，提高藥物的吸收速率和吸收率；4)納米栽體可保護(hù)某些不穩(wěn)定藥物，使之不被酶或酸堿催化降解。利用小麥醇溶蛋白作為載體材料，應(yīng)用納米技術(shù)將白藜,醇制備成新型口服給藥系統(tǒng)，解決其吸收差的問題，目前沒有文獻(xiàn)報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種應(yīng)用納米技術(shù)制備的白藜聲醇口服納米給藥系統(tǒng)。本發(fā)明通過利用納米技術(shù)高度分散的特性及載體材料小麥醇溶蛋白生物粘附特性，增加白藜蘆醇與腸道吸收部位的接觸，改善白藜,醇的口服吸收，更好地發(fā)揮藥效。同時，將白藜聲醇納米粒的膠體溶液經(jīng)冷凍干燥后分散在適宜的輔^Hf架中，口服給藥時在腸道中釋放出白藜蘆醇，提高白藜,醇的溶出速度和程度，促進(jìn)其在小腸的吸收。本發(fā)明所迷的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)，是以活性成分白藜聲醇與栽體材料小麥醇溶蛋白制成。小麥醇溶蛋白來源于小麥面筋粉，所述納米組合物中載體材料小麥醇溶蛋白的制備方法是一種快速簡便的蛋白質(zhì)提取純化方法(I.Ezpeletaetal.Gliadinnanopariclesforthecontrolledreleaseofall-trans-retinoicacid,/"f/力ar/z131(1996)191-200.)，用稀乙醇(40%~80%)對谷類作物進(jìn)行提取，經(jīng)過兩次離心得到小麥醇溶蛋白粗提物，并采用水-酸水-水透析法純化得到小麥醇溶蛋白。其分子量范圍通過電泳測定，結(jié)果小麥醇溶蛋白是在200KD-30KD之間的一組蛋白質(zhì)的組合物。本發(fā)明所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)中，白藜蘆醇與小麥醇溶蛋白的質(zhì)量比為1:5-100。本發(fā)明所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)，是通過去溶劑法制備的，具體步驟如下A.將表面活性劑或穩(wěn)定劑溶于水中，構(gòu)成水相；B.將小麥醇溶蛋白和白藜蘆醇，溶于70%~80%乙醇中，構(gòu)成有機(jī)相；C.將有機(jī)相通過針頭，注入水相中，攪拌；然后除去乙醇，濃縮，即得白藜蘆醇納米粒的月交體溶液。上述制備方法中，所述的穩(wěn)定劑或表面活性劑包括PluronicF68、聚乙烯醇、磷脂類、吐溫類(土溫-80)、司盤類任意一種或幾種。在制備本發(fā)明所述的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)時，白藜,醇、有機(jī)溶劑和水三者的比例為1:0.5-10:0.5-50(mg/ml/mi)。本發(fā)明所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)的制備方法中，還包括，在白藜,醇納米粒的膠體溶液中加入增稠劑、凝膠劑或穩(wěn)定劑，或加入藥用輔料后冷凍干燥或噴霧干燥。本發(fā)明所述的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)能夠分散在水溶液、或凝膠溶液中；或分散在藥用輔料的固體粉末中。本發(fā)明的優(yōu)點在于所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)的制備過程中僅使用乙醇，制備方法簡單，適于工業(yè)化生產(chǎn)，同時有效解決了有機(jī)溶劑殘留的相關(guān)問題。并且結(jié)合了載體材料生物粘附性特點與納米技術(shù)的特點，使難溶性的白藜蘆醇在腸道的吸收明顯增加。并且通過體外抗腫瘤試4全，表明白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)具有較好的抗腫瘤活性。具體實施例方式以下通過具體實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于下列實施例包含的內(nèi)容。實施例1取PluronicF6815mg，加30ml水溶解作為水相；另取白藜蘆醇10mg和小麥醇溶蛋白100mg，加入10ml80%乙醇溶液中，攪拌使溶解，作為有機(jī)相。取有機(jī)相，用5號針迅速注入7jC相中，繼續(xù)攪拌5min。移至60。C真空干燥箱，除去乙醇，濃縮至每lml中含O.3mg的白藜蘆醇，即得白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)。上述白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)的粒徑為50~200nm，白藜蘆醇的包封率為74.6%。實施例2取吐溫-8030mg,加50ml水溶解作為水相；另取白蓉，醇10mg和小麥醇溶蛋白50mg，加入5ml70%乙醇溶液中，攪拌使溶解，作為有機(jī)相。取有機(jī)相用5號針迅速注入水相中，繼續(xù)攪拌5min。移至60。C真空干燥箱(真空度為0.08mpa)，除去乙醇，濃縮至每lmL中含0.3mg的白藜蘆醇。加入蔗糖及甘露醇為支架劑，冷凍干燥即得白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)。上述白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)的粒徑為50~200nm，白藜,醇的包封率為71.5%。實施例3取PluronicF6815mg、吐溫-8015mg，加100ml水溶解作為7JC相；白藜,醇10mg和小麥醇溶蛋白120mg，加入50ml70%乙醇溶液中，攪拌使溶解，作為有機(jī)相。取有才M目用5號針迅速注入水相中，繼續(xù)攪拌5min。移至6(TC真空干燥箱(真空度為0.08mpa)，除去乙醇，濃縮至每lml中含0.30mg的白藜,醇。冷凍干燥即得白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)。上述白藜聲醇口服納米給藥系統(tǒng)的粒徑為50200nm,白藜,醇的包封率為83.5%。實施例4取PluronicF6815mg加10ml水溶解作為水相；白藜,醇10mg和小麥醇溶蛋白lOOOmg,加入10ml70%乙醇溶液中，攪拌使溶解，作為有機(jī)相。取有機(jī)相用5號針迅速注入250rpm攪拌的水相中，繼續(xù)攪拌5min。移至60。C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中(真空度為0.05mpa),除去乙醇，濃縮至每lml中含0.3Omg的白藜,醇。冷凍干燥即得白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)。上述白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)的粒徑為50200nm，白藜,醇的包封率為81.5%。實施例5白藜,醇水溶液和白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)的大鼠在體腸吸收試-驗參比樣品白藜聲醇水溶液(含適量吐溫)；供試樣品白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)(按照實施例1方法制備的樣口口J。試驗動物Wister大鼠，雄性，體重(250土30g)，每組5只。參比樣品及供試樣品的濃度均為20jLig/mL、40jug/mL、60jug/mL、80jug/mL,采用大鼠在體小腸回流實驗方法，進(jìn)行整腸段回流實驗，考察不同濃度藥物的吸收行為。分別按下式計算各腸段藥物的吸收率p(y。)和吸收速率常數(shù)kaU'1):吸收率POO-(X廣X2)/X^l00。/fl，X"回流前腸循環(huán)液中含藥量，X2:回流結(jié)束時腸循環(huán)液中含藥量。大鼠在體腸吸收2小時后供試樣品和參比樣品的吸收百分率結(jié)果見表1,試驗結(jié)果表明白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)在小腸的吸收比白藜蘆醇水溶液有明顯的增加。表1不同濃度的白藜蘆醇水溶液及白藜聲醇口服納米給藥系統(tǒng)的在體腸_吸收(n=5)_<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>實施例6白藜,醇小麥醇溶蛋白納米粒的體外抗腫瘤試驗供試樣品按照實施例2方法制備的白藜聲醇口服納米給藥系統(tǒng)方法選擇肝癌HepG2作為受試細(xì)胞抹，應(yīng)用不同濃度的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)作用于細(xì)胞72小時后，用MTT法觀察不同濃度的該藥物對細(xì)胞的生長抑制情況，實驗重復(fù)三批。試驗結(jié)果見表2。表2白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)體外對肝癌HepG2細(xì)胞的生長抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>結(jié)論白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)體外對肝癌細(xì)胞HepG2有較好的抑制作用。權(quán)利要求1.一種白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)，其特征在于以活性成分白藜蘆醇與載體材料小麥醇溶蛋白組成。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)，其特征在于所述的載體材料小麥醇溶蛋白為分子量范圍在200KD-30KD的一組蛋白質(zhì)，來源于小麥面筋粉。3.根據(jù)權(quán)利要求l所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，白藜,醇和小麥醇溶蛋白的質(zhì)量比為1:5-100。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，這種給藥系統(tǒng)是通過去溶劑法制備的。5.根據(jù)權(quán)利要求1~4任一所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，包括如下步驟A、將表面活性劑或穩(wěn)定劑溶于水中，構(gòu)成水相；B、將小麥醇溶蛋白和白藜蘆醇，溶于70%~80°/。乙醇中，構(gòu)成有機(jī)相；C、將有機(jī)相通過針頭，注入水相中，攪拌；然后除去乙醇，濃縮，即得白藜,醇納米粒的膠體溶液。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的白藜，醇口服納米給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于所述的穩(wěn)定劑或表面活性劑包括PluronicF68、聚乙烯醇、磷脂類、吐溫類、司盤類中的任意一種或幾種。7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，制備這種給藥系統(tǒng)時，白藜？醇有機(jī)溶劑水的比例為1:0.5-10:l-50(mg/ml/ral)。8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，還包括，在白藜蘆醇納米粒的膠體溶液中加入增稠劑、凝膠劑或穩(wěn)定劑，或加入藥用輔料后冷凍干燥或噴霧干燥。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的白藜,醇口服納米給藥系統(tǒng)能夠^t在水溶液、或凝膠溶液中；或分散在藥用輔料的固體粉末中。10.權(quán)利要求1~9任一權(quán)利要求所述的白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)在制備治療肝癌藥物中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明通過納米技術(shù)制備得到一種白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)。該給藥系統(tǒng)是由白藜蘆醇和載體材料小麥醇溶蛋白制成，利用納米粒高度分散的特性及載體材料的生物粘附特性，增加白藜蘆醇與腸道吸收部位的接觸面積與接觸時間，促進(jìn)其在小腸更好地吸收。同時，將白藜蘆醇口服納米給藥系統(tǒng)分散在適宜的輔料骨架材料中，提高白藜蘆醇的溶出速度和程度。文檔編號A61P1/00GK101317832SQ20071011050公開日2008年12月10日申請日期2007年6月6日優(yōu)先權(quán)日2007年6月6日發(fā)明者周亞偉申請人:周亞偉